丙二醛含量测定
实验六、植物组织丙二醛含量测定
植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下
降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累。活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基（0-2）、轻自由基（OH-）、过氧自由基（ROO
-）、烷氧自由基（RO-）、过氧化氢（H2O2、单线态氧（021等。植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统，超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶（ASA— POD等是酶促防御系统的重要保
护酶，抗坏血酸（ASA）和还原型谷胱甘肽（GSH）等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂。
丙二醛（MDA）是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损
伤。因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。所以在植物衰老生理和抗性生理研究中，丙二醛含量是一个常用指标。
［原理］
植物组织中的丙二醛（MDA）在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸（TBA）产生显色
反应，反应产物为粉红色的3, 5, 5 一三甲基恶瞠2, 4 一二酮（Trimet — nine）。该物质在539rim波长下有吸收峰。由于硫代巴比妥酸也可与其
它物质反应，并在该波长处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反
应的影响，在丙二醛含量测定时，同时测定600nm下的吸光度，利用539rim
与600nm下的吸光度的差值计算丙二醛的含量。
［材料、仪器、药品］
1.材料=植物抗逆性鉴定实验中的四种菠菜样品，即绿色和黄色叶片的咼温处理和室温对照。
2.仪器：⑴分光光度计；⑵离心机；（3）水浴锅：（4）天平；（5）研钵；（6）剪刀；（7）5ml刻度离心管；（9）刻度试管（10ml） : （10）镉子；（11）移液管（5ml、2mK
1ml）；（12）冰箱。
3.药品: ⑴O.OSmol/L pH7.8 磷酸钠缓冲液;
⑵石英砂;
（3） 5 %三氯乙酸溶液：称取5g三氯乙酸，先用少量蒸憎水溶解，然后定容到
100ml;
（4）0.5%硫代巴比妥酸溶液：称取0?5g硫代巴比妥酸，用5%三氯乙酸溶解,
定容至100ml,即为0?5 %硫代巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液。
［方法］
1.丙二醛的提取：取0?5g样品，加入2inl预冷的0,05mol/L pH7?8的磷酸
缓冲液，加入少量石英砂，在经过冰浴的研钵内研磨成匀浆，转移到5ml刻度离心试管，将研钵用缓冲液洗净，清洗也移入离心管中，最后用缓冲液定容至5ml。
在4500转/min离心lOmino上清液即为丙二醛提取液。
2.丙二醛含量测定=吸取2 ml的提取液于刻度试管中，加入0.5%硫代巴比
妥酸的5任氯乙酸溶液3ml,于沸水浴上加热10min,迅速冷却。于4500转/min离心lOmino取上清液于532、600nm波长下，以蒸f留水为空白调透光
率100%测定吸光度。
3.结果计算:
(A532—A600) XV1XV
丙二醛含量(nmol/g ) = 1.55 X W X WX V2
式中=A为吸光度；V1为反应液总量(5m1)： V为提取液总量(5ml) : V2为反应
液中的提取液数量(2ml) ； W为植物样品重量(0?5g) ； 1.55X10-1为丙二醛的微摩尔吸光系数(在1升溶液中含有1卩mol丙二醛时的吸光度)0
4 ?注意事项: ⑴0?1?0?
5 %的三氯乙酸对MD— TBA反应较合适，若高于此浓度，其反
应
液的非专一性吸收偏高;
(2)MD— TBA显色反应的加热时间，最好控制沸水浴10?15miri之间。时间太
短或太长均会引起532nm下的光吸收值下降;
(3)如用MDA乍为植物衰老指标，首先应检验被测试材料提取液是否能与TBA
反应形成532rim处的吸收峰。否则只测定532、600nm两处A值，计算结果与实际情况不符，测得的高A值是一个假象;
(4)在有糖类物质干扰条件下(如深度衰老时人吸光度的增大，不再是由于脂质
过氧化产物MDA含量的升高，而是水溶性碳水化合物的增加，由此改变了提取液成分，不能再用532nm 600nm两处A值计算MDA含量，可测定510、532、560nm处的A值，用A532 -(A510—A560)/2的值来代表丙二醛与TBA反应液
的吸光值。
［实验结果记录］
［实验前思考题］
(1)通过丙二醛含量测定能够解决什么理论和实际问题?
(2)什么时候植物会发生严重的膜脂过氧化作用？简述其过氧化作用过程。
(3)说明膜脂过氧化作用的对植物的效应。
TBA为什么要溶解在三氯乙酸中?
提取液与TBA的混合液为什么要加热？为什么加热时间又不能过长?
为什么要测定反应液在600nm下的吸光度?
(7)
在计算公式中，为什么吸光系数的单位是微摩尔，而最后的含量单位却是毫微摩尔?
(8)写出实验时间按排和操作流程图。
(9)写出抗逆性鉴定和丙二醛含量测定实验统一的时间按排和操作流程图。［实
验后思考题］
(1)如果可溶性糖含量影响丙二醛含量的测定，你有什么办法消除其影响?
(2)丙二醛反应液为什么加热时间过长会影响测定结果?
丙二醛含量测定讲解学习
丙二醛含量测定
实验六、植物组织丙二醛含量测定 植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累。活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羟自由基(OH·)、过氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、过氧化氢（H2O2）、单线态氧（O21）等。植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防御系统的重要保护酶，抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂。 丙二醛(MDA)是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。所以在植物衰老生理和抗性生理研究中，丙二醛含量是一个常用指标。 [原理] 植物组织中的丙二醛(MDA) 在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸(TBA) 产生显色反应，反应产物为粉红色的3，5，5一三甲基恶唑2，4一二酮(Trimet—nine)。该物质在539nm波长下有吸收峰。由
于硫代巴比妥酸也可与其它物质反应，并在该波长处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反应的影响，在丙二醛含量测定时，同时测定600nm下的吸光度，利用539nm与600nm下的吸光度的差值计算丙二醛的含量。 [材料、仪器、药品] 1．材料：植物抗逆性鉴定实验中的四种菠菜样品，即绿色和黄色叶片的高温处理和室温对照。 2．仪器：(1) 分光光度计；(2) 离心机；（3）水浴锅：(4) 天平；(5) 研钵；(6) 剪刀；(7) 5ml刻度离心管；(9) 刻度试管(10ml)；(10) 镊子；(11) 移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱。 3．药品： (1) 0.05mol/L pH7.8磷酸钠缓冲液； (2) 石英砂； (3) 5％三氯乙酸溶液：称取5g三氯乙酸，先用少量蒸馏水溶解，然后定容到100ml； (4) 0.5％硫代巴比妥酸溶液：称取0.5g硫代巴比妥酸，用5％三氯乙酸溶解，定容至100ml，即为0.5％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液。 [方法] 1．丙二醛的提取：取0.5g样品，加入2ml预冷的0.05mol/L pH7.8的磷酸缓冲液，加入少量石英砂，在经过冰浴的研钵内研磨成匀浆，转移到5ml刻度离心试管，将研钵用缓冲液洗净，清洗也移
白酒中总醛的测定
白酒中总醛的测定 一、实验目的 采用分光光度法测定白酒中总醛的测定。 二、实验原理 在碱性条件下, 醛与2, 4 二硝基苯肼反应生成2, 4 二硝基苯腙橙红色化合物,在445nm波长处进行吸光度测定, 根据外标法求出醛的含量。 三、仪器与试剂 U1800紫外可见分光光度计、恒温水浴器。 无醛乙醇( 制备): 取1500mL 乙醇置于2000mL 蒸馏烧瓶中, 加入15g 2, 4 二硝基苯肼、0. 75mL 浓盐酸及几粒沸石, 回流4h 并放置4h,再将冷凝器改换为精馏柱, 缓缓精馏. 弃去初始流出液100mL 左右及剩余液约200mL黄色溶液,收集中间馏分,蒸馏液应清澈透明。 浓盐酸: 12mol/L。 2, 4 二硝基苯肼无醛乙醇饱和溶液,现用现配。 氢氧化钾-乙醇溶液: ( 100g/ L) 10. 0g 氢氧化钾溶于20. 0mL 水中, 转移至100mL容量瓶中,用无醛乙醇稀释至刻度,混匀。 甲醛标准溶液: 2.8ml含量36%-38%的甲醛。用水稀释成1L的工作溶液。此溶液1ml相当于1mg甲醛。具体须用碘量法滴定。用时稀释成10mg/ L 的工作溶液。 试剂均为分析纯, 水为蒸馏水。 四、实验操作
1、具体步骤 准确吸取10mg/L甲醛标准溶液2.0mL,移入25mL刻度试管中, 依 次加入5. 0mL 无醛乙醇、1.0mL2,4 二硝基苯肼溶液和0.05mL盐酸, 盖上瓶塞。在50度水浴中加热30min后取出,冷却至室温,加入5.0mL 氢氧化钾-乙醇溶液,放置5min,用水稀释至刻度,混匀。然后用比色皿在445nm波长处测定显色液的吸光度, 以试剂空白为参比。 2、工作曲线的绘制 移取一系列甲醛标准溶液0. 0mL, 2.0mL,4.0mL, 6.0mL, 8.0mL, 10.0mL(相当于甲醛含量0.0mg, 0.02mg, 0.04mg, 0.06mg , 0.08mg,0.10mg) , 按实验方法测定各溶液的吸光度, 以总醛( 以甲醛计) 含量( mg) 为横坐标, 吸光度为纵坐标。绘制标准曲线。 3、样品测定 选择白酒3种编号为1号、2号、3号, 准确移取试样各2.0mL按实验方法测定试样显色液的吸光度, 从标准曲线查出醛的含量。 五、数据处理分析 六、思考题 1.在本实验中影响白酒中甲醛测定准确的因素有哪些？
丙二醛含量测定
植物组织或器官中丙二醛含量的测定 一、实验目的 二、实验原理： 三、实验仪器：紫外可见分光光度计离心机 四、实验步骤： ●1 MDA的提取称2g叶片，加入10％三氯乙酸(TCA)2ml及少量石英砂，研磨；进一步加入8mlTCA充分研磨，接着把匀浆液以4000r／min离心10min，其上清液即为MDA提取液。 ●2 MDA显色反应及测定取2ml MDA提取液（对照组取2ml 蒸馏水），在加2ml 0.6％TBA混匀，在试管上加棉塞，置沸水中加热15min，迅速拿出水浴锅冷却，以4000r／min离心15min ，于波长532nm和450nm下测定OD值。 五、结果计算 ●以测得的OD532减去OD600的非特异吸收值，分别计算衰老和对照组的值。 MDA浓度(μmol/L)=6.45OD532-0.56OD450 D450、D532分别代表450nm、532nm波长下的光密度值。 六、注意事项： ●0.1-0.5％的三氯乙酸对MDA—TBA反应较合适，若高于此浓度，其反应液的非专一性吸收偏高； ●MDA-TBA显色反应的加热时间，最好控制沸水浴10-15min之间。时间太短或太长均会引起532nm下的光吸收值下降； ●如待测液浑浊，可适当增加离心力及时间。 ●低浓度的铁离子能增强MDA与TBA的显色反应，当植物组织中铁离子浓度过低时应补充Fe3+（最终浓度为0.5 nmol·L-1） ●可溶性糖与TBA显色反应的产物在532 nm也有吸收（最大吸收在450 nm），当植物处于干旱、高温、低温等逆境时可溶性糖含量会增高，必要时要排除可溶性糖的干扰。 丙二醛(MDA)含量的测定 ①测定步骤 称取剪碎的试材1g，加入2ml10%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA进一步研磨，匀浆在4000r/min离心10分钟，上清液为样品提取液。吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水)，加入2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的吸光度。 ②计算(3-6)式中：C—MDA的浓度；A450，A532 和A600—分别代表450、532和600nm 波长下的吸光度值。 丙二醛(MDA)含量的测定 丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。 关键词：丙二醛含量测定氧化作用MDA膜脂过氧化硫代巴比妥酸TBATBA显色反应 植物器官衰老或在逆境下遭受伤害，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛(MDA)是膜脂过氧化的最终分解产物，其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。MDA从膜上产生的位置释放出后，可以与蛋白质、核酸反应，从而丧失功能，还可使纤维素分子间的桥键松驰，或抑制蛋白质的合成。因此，MDA的积累可能对膜和细胞造成一定的伤害。 [原理]丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁
丙二醛测量方法
硫代巴比妥酸法（丙二醛含量测定） 一：原理 丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。低浓度的铁离子能够显著增加TBA与蔗糖或MDA显色反应物在532、450nm处的消光度值，所以在蔗糖、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为每克千重100—300ug·g-1，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3+的终浓度为0．5umol·L-1。 二：试剂 1：质量分数为10％三氯乙酸(TCA)； 2：质量分数0.6％硫代巴比妥酸：先加少量的氢氧化钠(1mol·L-1)溶解，再用10％的三氯乙酸定容； 三：方法 1：MDA的提取称取剪碎的试材1g，加入2mll0％TCA和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA研磨，匀浆在4000r·min-1离心10min，上清液为样品提取液。
2：显色反应和测定吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水)，加入2ml 0．6％TBA溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的消光度。 四：结果 C1＝11.71D450 C2＝{6.45(D532 - D600) - 0.56D450}NW-1 C1——可溶性糖的浓度(mmol·L-1) C2——MDA的浓度（·umol·L-1） D450、0532、D600分别代表450、532和600nm波长下的消光度值。 N:提取液总体积（ml） W:植物组织鲜重
丙二醛含量测定
植物组织中丙二醛含量测定 方法一： 一、目的 通过实验，掌握植物体内丙二醛含量测定的原理及方法。 二、原理 丙二醛（MDA）是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害，其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量，通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应，生成红棕色的三甲川（3、5、5－三甲基恶唑2、4－二酮），三甲川最大的吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最大吸收波长在450nm处，在532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中丙二醛与硫代巴比妥酸反应产物含量时一定要排除可溶性糖的干扰。此外在532nm波长处尚有非特异的背景吸收的影响也要加以排除。低浓度的铁离子能显著增加硫代巴比妥酸与蔗糖或丙二醛显色反应物在532、450nm处的吸光度值，所以在蔗糖、丙二醛与硫代巴比妥酸显色反应中需要有一定的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为100－300μg·g－1Dw，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3＋的终浓度为0.5nmol· L－1。在532nm、600nm和450nm波长处测定吸光度值，即可计算出丙二醛含量。 三、材料、仪器设备及试剂 1. 材料：植物叶片。 2. 仪器设备：离心机，分光光度计；电子分析天平；恒温水浴；研钵；试管；移液管（1ml、5ml）、试管架；移液管架；洗耳球；剪刀。 3. 试剂：10％三氯乙酸；0.6％硫代巴比妥酸（TBA）溶液：石英砂。 四、实验步骤 1. 丙二醛的提取 称取受干旱、高温、低温等逆境胁迫的植物叶片1g，加入少量石英砂和10％三氯乙酸2ml，研磨至匀浆，再加8ml10％三氯乙酸进一步研磨，匀浆以4000r/min离心10min，其上清液为丙二醛提取液。 2. 显色反应及测定 取4支干净试管，编号，3支为样品管（三个重复），各加入提取液2ml，对照管加蒸馏水2ml，然后各管再加入2ml 0.6％硫代巴比妥酸溶液。摇匀，混合液在沸水浴中反应15 min，迅速冷却后再离心。取上清液分别在532、600和450nm波长下测定吸光度（A）值。
甲醛含量的测定
甲醛含量的测定 一、仪器与设备：分光光度计，精密天平，恒温水浴锅，量瓶（50ml 、100ml ），刻度吸管（、2ml 、5ml ），移液管（5ml 、25ml ），量筒，试管，锥形瓶（250ml5个，100ml ），称量瓶，高温炉，酸式滴定管（50ml ，校正曲线或校正值），干燥器（内装变色硅胶），玻璃漏斗（3个），恒温水浴锅。 二、试剂与溶液：吐温80（AR ），乙醇（AR ），醋酸（AR ），醋酸铵（AR ），乙酰丙酮（AR ），甲醛溶液（40％）（AR ），NaOH 滴定液(1mol/L)，盐酸滴定液(1mol/L)，K 2MnO 4，基准草酸钠，硫酸，H 2O 2试液（AR ），溴麝香草酚篮指示液，甲基红－溴甲酚绿混合指示液，酚酞指示液，基准无水Na 2CO 3。 三、试剂和指示剂配制： ⑴甲基红－溴甲酚绿混合指示液：①取甲基红置于100ml 乙醇溶液中，摇匀，得％甲基红的乙醇溶液；②取溴甲酚绿置于100ml 乙醇溶液中，摇匀，得％溴甲酚绿的乙醇溶液；③取％甲基红的乙醇溶液20ml ，加％溴甲酚绿的乙醇溶液30ml ，摇匀，得甲基红－溴甲酚绿混合指示液。 ⑵酚酞指示液：取酚酞1g 置于100ml 乙醇溶液中，摇匀。 ⑶NaOH 滴定液(1mol/L)：①取NaOH 适量，加水振荡使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。取澄清NaOH 饱和溶液56ml ，加新沸过的冷水使成1000ml ，摇匀；②NaOH 滴定液的标定：取在105℃干燥2～3h 至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾，精密称量6g ，加新沸过的冷水50ml ，振摇，使其尽量溶解，加酚酞指示液2滴，用NaOH 滴定液滴定，在接近终点时，应使邻苯二甲酸氢钾完全溶解，滴定至溶液显粉红色。每1ml NaOH 滴定液相对于的邻苯二甲酸氢钾。据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量，算出本液的浓度即得。 ⑷盐酸滴定液(1mol/L)：①取盐酸90ml ，加水适量使成1000ml ，摇匀，即得；②用NaOH 滴定液滴定，处理使其F 值由～变为～(滴定液要澄清，置玻璃瓶中贮存)；③标定：a 、无水Na 2CO 3干燥前应用乳钵研细，分别置于3个称量瓶中，每个称量瓶中称入样品，厚度；b 、置高温炉内，分开排列，在270～300℃下干燥2h ，闭塞，置装有硅胶的干燥器中，冷却30min(夏天温度高时，可放置40min)，称供试品与称量瓶合重，准确至，记录数值；c 、继续在270～300℃下干燥1h ，取出，在干燥器中放置30min ，称量，记录数值，若两次差值在以上，则重复c 操作，直至差值在以下；d 、将供试品迅速倾入锥形瓶中，再称量空称量瓶重量；e 、加水50ml 使溶解，加甲基红－溴甲酚绿混合指示液10滴，用盐酸滴定液(1mol/L)滴定至溶液由绿色转变为紫红色，置电炉上煮沸2min ，冷却至室温，继续滴定溶液由绿色变成暗紫色。每1mlHcl 滴定液相当于 mg 无水Na 2CO 3。计算公式为：F=W/(V ×T)×100％ 〔W 为Na 2CO 3用量，mg ；V 为Hcl 滴定液用量；T=〕
植物组织MDA含量测定
植物组织MDA 含量测定 一、目的要求 1．掌握植物组织MDA 含量测定的原理及具体测量步骤； 2．深化理解MDA 与逆境和衰老的关系，理解植物组织MDA 含量测定的意义； 3．了解膜脂过氧化、氧自由基和MDA 形成的关系； 4．能够根据待测材料的具体情况设计实验步骤测定MDA 含量； 5．学习分光光度计，低温离心机等仪器的使用方法。 二、实验原理 植物遭受逆境胁迫或衰老时，体内会发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低，活性氧平衡失调及内源激素平衡失调等。活性氧代谢失调直接导致植物体内活性氧的大量积累，从而引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。 膜脂过氧化的产物有二烯轭合物、脂类过氧化物、丙二醛、乙烷等。其中丙二醛（Malondialdehyde ，MDA ）是膜脂过氧化最重要的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此在植物衰老生理和抗性生理研究中，MDA 含量是一个常用指标，可通过测定MDA 了解膜脂过氧化的程度，以间接测定膜系统受损程度以及植物的抗逆性。 MDA 在高温及酸性环境下可与2-硫代巴比妥酸（TBA ）反应，产生红棕色的产物3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮（Trimet —nine ），又名三甲川，该物质在532nm 处有最大光吸收，在600nm 处有最小光吸收。由于TBA 也可与其它物质反应，并在532nm 处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反应的影响，同时测定600nm 下的吸光度，利用532nm 与600nm 下的吸光度的差值计算MDA 的浓度。 即：A 532－A 600＝ε·C ·L 式中，A 532和A 600分别表示532nm 和600nm 处的吸光度值，C 是MDA 浓度，L 为比色杯厚度，ε=155L·mmol -1·cm -1。 + 100 C O H N S N H O O O H H H N H S N H O O H O OH N N H S 2O TB A MDA 3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮 需要指出的是，植物组织中糖类物质可能对MDA-TBA 反应有干扰作用。可用下列公式消除由蔗糖引起的误差。
酒精中醛的测定
白酒中醛含量的测定（以乙醛计） 一、实验目的 掌握用碘量法测定白酒中醛含量的方法和原理。 二、实验原理 食用酒精中的醛与亚硫酸氢钠发生加成反应，生成α-羟基磺酸钠，过量的亚硫酸氢钠用碘氧化。 CH3CHO+NaHSO3＝CH3CH(OH)(SO3Na) 剩余的NaHSO3与已知过量的I2作用，其反应式为: NaHSO3 + I2 +H2O == NaHSO4 + 2HI 用Na2S2O3滴定剩余的碘，便可以测出白酒中的总醛量 2Na2S2O3 +I2 == Na2S4O6+2NaI 三、实验药品 K2Cr2O7、0.1mol\L Na2S2O3溶液、1:1HCL、Na2CO3、固体KI、碘标准溶液（0.05mol·L-1）、淀粉溶液（0.5％）、NaHSO3（0.05mol·L-1）、锥形瓶、碘量瓶 四、实验步骤 1、配置0.10 mol\L Na2S2O3溶液500mL 称取13g Na2S2O3·5H2O ，溶于500mL新煮沸的冷蒸馏水中，加0.1g Na2CO3，保存于棕色瓶中，放置一周后进行标定。 配制0.05mol·L-1碘标准溶液500mL 称取6.49-6.51g碘及17g碘化钾，溶于100mL水中，稀释定容至500mL，摇匀，贮存于棕色瓶中。 2、Na2S2O3溶液的标定
准确称取约0.12g K2Cr2O7于碘量瓶中，加25ml水溶解，并加2gKI和5mlHCL，稀释至100mL摇匀放置10分钟后用Na2S2O3溶液进行滴定至溶液变为浅黄绿色时加5ml淀粉指示剂，用Na2S2O3溶液继续滴定至溶液由兰色变为浅（亮）绿色时为止。平行标定3次。 标定反应为： Cr2O72- + 6I- + 14H+ = 2Cr3+ +3I2 +7H2O 2S2O32- + I2 = 2I- + S4O62- 3、碘标准溶液的标定 准确移取25.00mL配制好的碘标准滴定溶液，置于碘量瓶中，加100mL 水（15—20℃），用硫代硫酸钠标准滴定溶液[C(Na2S2O3)=0.1mol/L]滴定，近终点（微黄色）时，加5mL淀粉指示剂，继续滴定至溶液蓝色消失。 原理：2S2O32- + I2 = 2I- + S4O62- 平行测定三次。 4、 NaHSO3浓度的标定 准确吸取25.00mL碘标准溶液三份，分别置于250mL碘量瓶中，准确加入10.00mL NaHSO3溶液，盖上塞子5min，使其充分反应，然后加入2mL HCl (1：1)，并立即用0.1mol·L-1Na2S2O3标准溶液滴定至颜色变为浅黄色。再加2mL淀粉溶液，继续用0.1mol·L-1Na2S2O3标准溶液滴定至蓝色刚好褪去即为终点。根据Na2S2O3标准溶液的用量和碘标准溶液的用量，计算NaHSO3溶液的浓度。平行测定三次。 5、白酒中醛含量的测定 用移液管移取25.00mL白酒于250mL碘量瓶中，加15mL去离子水，再用移液管移取10.00mL亚硫酸氢钠溶液，混匀，于暗处放置30分钟其间时常摇动。取出，加入25.00mL0.05 mol\L碘标准溶液溶液，摇匀，即用
水中甲醛的测定(分光光度法)
水中甲醛的测定 分光光度法 1 范围 本标准规定了水中甲醛测定的方法原理、仪器与试剂、操作步骤、计算及注意事项。 本标准适用于脱盐水，生产水、生活水、冷凝液、尿素溶液（含碳铵）中甲醛的测定。 2 原理 甲醛在酸性条件下与变色酸二钠（－萘二磺酸－－羟基）反应生成紫色络合物，在580nm 波长处用分光光度计进行比色测定。 3 试剂与仪器 分光光度计； 比色管50mL ； 实验用电炉； 浓硫酸：AR ； 10g/L 变色酸二钠溶液。变色酸二钠溶液。 称取1.0g 变色酸于少量蒸馏水水中，溶解后稀至100mL 。 亚硫酸钠溶液：126g/L ； 称取126 g 亚硫酸钠溶于水，稀释至1000mL ，加（约10滴）百里酚酞指示剂（1 g/L ），用硫酸溶液（1+19）中和至无色。 甲醛含量测定：量取 mL 甲醛溶液（称准至0.0002g ）置于50 mL 亚硫酸钠溶液的锥形瓶中，用硫酸标准溶液c(1/2H 2SO 4)=1mol/L 滴定至溶液由蓝色变为无色。 甲醛含量（%）=m cV 10003003.0?? 式中：c —硫酸标准溶液的浓度，mol/L ； V —消耗硫酸标准溶液的体积，mL ； m —甲醛溶液之质量，g ； —与 mL 硫酸标准滴定溶液[c(1/2H 2SO 4)=1mol/L]相当的以克表示的甲醛质量。 甲醛标准溶液，1mg/mL ； 根据下式计算，称取甲醛溶液，置于1000mL 容量瓶中加水稀释至刻度，摇匀。 m=X 000.1 式中：m —甲醛溶液之质量，g ； X —甲醛含量，%； —甲醛标准溶液浓度，mg/mL 。 甲醛标准溶液：10mg/L ； 移去上述溶液，置于1000mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。 甲醛标准溶液：1mg/L 。 移去上述溶液，置于1000mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。 4 操作步骤 标准曲线的制作 4.1.1高含量甲醛标准曲线的制作 4.1.1.1分别取、、、、、甲醛标准溶液（10mg/L ）于6个50mL 比色管中，分别加蒸留水、、、、、； 4.1.1.2在各比色管中分别加入变色酸二钠溶液，摇匀；
丙二醛含量测定
实验六、植物组织丙二醛含量测定 植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累。活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羟自由基(OH·)、过氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、过氧化氢（H2O2）、单线态氧（O21）等。植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防御系统的重要保护酶，抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂。 丙二醛(MDA)是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。所以在植物衰老生理和抗性生理研究中，丙二醛含量是一个常用指标。 [原理] 植物组织中的丙二醛(MDA) 在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸(TBA) 产生显色反应，反应产物为粉红色的3，5，5一三甲基恶唑2，4一二酮(Trimet—nine)。该物质在539nm波长下有吸收峰。由于硫代巴比妥酸也可与其它物质反应，并在该波长处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反
应的影响，在丙二醛含量测定时，同时测定600nm下的吸光度，利用539nm 与600nm下的吸光度的差值计算丙二醛的含量。 [材料、仪器、药品] 1．材料：植物抗逆性鉴定实验中的四种菠菜样品，即绿色和黄色叶片的高温处理和室温对照。 2．仪器：(1) 分光光度计；(2) 离心机；（3）水浴锅：(4) 天平；(5) 研钵；(6) 剪刀；(7) 5ml刻度离心管；(9) 刻度试管(10ml)；(10) 镊子； (11) 移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱。 3．药品： (1) L 磷酸钠缓冲液； (2) 石英砂； (3) 5％三氯乙酸溶液：称取5g三氯乙酸，先用少量蒸馏水溶解，然后定容到100ml； (4) ％硫代巴比妥酸溶液：称取硫代巴比妥酸，用5％三氯乙酸溶解，定容至100ml，即为％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液。 [方法] 1．丙二醛的提取：取样品，加入2ml预冷的L 的磷酸缓冲液，加入少量石英砂，在经过冰浴的研钵内研磨成匀浆，转移到5ml刻度离心试管，将研钵用缓冲液洗净，清洗也移入离心管中，最后用缓冲液定容至5ml。在4500转/min离心10min。上清液即为丙二醛提取液。 2．丙二醛含量测定：吸取2 ml的提取液于刻度试管中，加入％硫代巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液3ml，于沸水浴上加热10min，迅速冷却。于4500
化妆品中甲醛含量的测定方法
学号：036 本科学年论文 学院化学化工学院 专业应用化学 年级2010级 姓名刘娇 论文题目化妆品中甲醛含量的测定方法 指导教师裴强职称讲师 成绩
2012年5月8日
目录 摘要 (1) 关键词 (1) Abstract (1) Keywords (1) 前言 (1) 1化妆品的组成以及甲醛(释放剂)的作用 (2) 2甲醛的危害以及主要化妆品生产国所采用的对策 (2) 3 化妆品中甲醛含量的检测方法 (3) 分光光度法 (3) 乙酰丙酮法 (3) 分光光度法 (3) 变色酸法(CTA法) (3) 3.1.4品红亚硫酸比色法 (4) 色谱法 (4) 薄层色谱法 (4) 气相色谱法 (4) 3.2.3高效液相色谱法 (5) 固相微萃取(SPME)和同位素稀释质谱(ID-MS)联用法 (5) 结语 (6) 参考文献 (7)
化妆品中甲醛含量的测定方法 姓名：刘娇学号：036 化学化工学院应用化学班 指导教师：裴强职称：讲师 摘要：甲醛由于其亲水性好、杀菌效率高、价格低廉以及不受体系中的酸碱度的影响等优点,而用作化妆品的防腐剂。但甲醛对人体健康的危害很大,因此需要对化妆品中的甲醛含量进行检测。本文详细介绍了测定化妆品中甲醛含量的方法,并对每种方法进行评价和总结。随着化妆品防腐技术的不断发展,未来的化妆品中将会彻底禁用甲醛。 关键词：甲醛、化妆品、测定方法 Abstract: Formaldehyde is used as one kind of preservatives in cosmetics due to its following advantages: good hydrophility, high efficient sterilization ability, low price and unaffected pH value in the system. However, formaldehyde does harm to human health. Therefore, the content of formaldehyde in cosmetics should be determined. In this paper, determination methods of formaldehyde in cosmetics are introduced in detail. And each method is evaluated and summarized. With the development of the preservatives in cosmetics, the formaldehyde will be forbidden in the cosmetics in future. Keywords：Formaldehyde,Cosmetics,Determination method 前言 随着经济的发展和生活水平的提高,人们对化妆品的需求量不断增大,近年来化妆品种类的多样化、系列化、功能的专业化,使其使用范围也更加广泛,并且成为日常生活中的必需品。与此同时,有关化妆品引起的健康危害及其它不安全中毒事故问题的报道也日益增多,性质日渐严重,已逐渐发展成为现代公害病,直接影响广大消费者的身心健康。因此,关于化妆品的安全问题,就显得越来越突出和重要。广东省卫生防疫站于1996年10月-12月对广东省30个单位的香波样品进行了甲醛含量的检测,结果显示香波中甲醛使用率%,产品超标%[1];深圳市福田区疾病预防控制中心于2004年初对深圳市售和美容院化妆品中洗护发类、洁面乳、护手霜、润肤霜、眼霜等5类化妆品共62份样品进行检测,检测结果表明
植物体内丙二醛含量的测定
植物体内丙二醛含量的测定 一、目的 通过实验，掌握植物体内丙二醛含量测定的原理及方法。 二、原理 丙二醛（MDA）是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害，其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量，通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应，生成红棕色的三甲川（3、5、5－三甲基恶唑2、4－二酮），三甲川最大的吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最大吸收波长在450nm处，在532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中丙二醛与硫代巴比妥酸反应产物含量时一定要排除可溶性糖的干扰。此外在532nm波长处尚有非特异的背景吸收的影响也要加以排除。低浓度的铁离子能显著增加硫代巴比妥酸与蔗糖或丙二醛显色反应物在532、450nm处的吸光度值，所以在蔗糖、丙二醛与硫代巴比妥酸显色反应中需要有一定的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为100－300μg·g－1Dw，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3＋的终浓度为0.5nmol· L－1。在532nm、600nm和450nm波长处测定吸光度值，即可计算出丙二醛含量。 三、材料、仪器设备及试剂 1. 材料：植物叶片。 2. 仪器设备：离心机，分光光度计；电子分析天平；恒温水浴；研钵；试管；移液管（1ml、5ml）、试管架；移液管架；洗耳球；剪刀。 3. 试剂：10％三氯乙酸；0.6％硫代巴比妥酸（TBA）溶液：石英砂。 四、实验步骤 1. 丙二醛的提取 称取受干旱、高温、低温等逆境胁迫的植物叶片1g，加入少量石英砂和10％三氯乙酸2ml，研磨至匀浆，再加8ml10％三氯乙酸进一步研磨，匀浆以4000r/min离心10min，其上清液为丙二醛提取液。 2. 显色反应及测定 取4支干净试管，编号，3支为样品管（三个重复），各加入提取液2ml，对照管加蒸馏水2ml，然后各管再加入2ml 0.6％硫代巴比妥酸溶液。摇匀，混合液在沸水浴中反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液分别在532、600和450nm波长下测定吸光度（A）值。 五、丙二醛含量计算： 由于蔗糖－TBA反应产物的最大吸收波长为450nm，毫摩尔吸收系数为85.4×10－3，MDA －TBA反应产物在532nm的毫摩尔吸收系数分别是7.4×10－3和155×10－3。532nm非特异性吸光值可以600nm波长处的吸光值代表。 按双组分分光光度法原理，建立方程组，解此方程组即可求出MDA及可溶性糖浓度。方程组： A450=（85.4×10－3）·C糖 （A532－A600）=（155×10－3）·C MDA+（7.4×10－3）·C糖 解得： A450 C糖= —————— = 11.71A450（mmol·L－1） 85.4×10－3
实验三 丙二醛含量测定
实验三丙二醛含量测定 一、实验目的： 熟悉测定丙二醛含量的常用方法。 二、实验原理 植物在盐胁迫下，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛是其产物之一，通常将其作为脂质过氧化指标，用于表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。丙二醛（MDA）是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸（TBA）反应生成红棕色的3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮（三胛川），其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。 三、仪器与试剂 分光光度计；离心机；电子天平；研钵两套；试管。 10%三氯乙酸（TCA）；0.6%硫代巴比妥酸；石英砂。 四、实验步骤 1.丙二醛提取 小麦叶片0.5g，加入10﹪三氯乙酸(TCA)5mL(分两次加)和少量石英砂充分研磨，匀浆液以5000r/min离心10min，上清液即为样品提取液。 2.反应体系 取2mL提取液，分别加入2mL 0.6﹪TBA液，混匀，在试管
上加盖塞，置于沸水浴中沸煮15min，迅速冷却，离心。取上清液测定532nm和450nm下的A值。以2mL水代替提取液调零。 3.MDA含量计算： 根据C＝6.45×A532－0.56×A450，计算出样品提取液中丙二醛的浓度C（μmol/L），然后再计算出每克样品中丙二醛的含量(μmol/gFW)。并对数据进行方差分析。
植物丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)
植物丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法) 简介： 动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时，会发生脂质氧化。丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物，一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA在内的复杂化合物，此时通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平，因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化的指标。生物体内的一些其它生化反应也会产生MDA，例如thromboxane synthase也可以催化产生，但只要在测定时设置适当对照即可观察到脂质氧化水平的变化。 植物丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)(Plant MDA Assay Kit with TBA)又称脂质氧化(MDA)检测试剂盒，是采用一种基于MDA和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反应产生红色产物的显色反应，随后通过比色法用于对植物组织(根、茎、叶、种子等)MDA进行检测，是专门用于植物脂质氧化(lipid peroxidation)水平检测的试剂盒，不适用于动物组织、细胞、血液等。丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA发生反应，形成红色的MDA-TBA加合物，MDA-TBA加合物在有最大吸收，该复合物的吸光系数为155mmol/(L.cm)，并且在长处有最小吸收。植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰，我们总结出经验公式，以消除这一干扰。亦可以通过比标准品进行比较，进行含量检测。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、植物根茎、叶子等 2、剪刀 3、离心管、小试管或96孔板 4、分光光度计或酶标仪 5、水浴锅或恒温箱 6、离心机 操作步骤(仅供参考)：编号 名称TO1023 50T TO1023 100T Storage 试剂(A): 组织匀浆液250ml 500ml RT 避光试剂(A): TBA 0.35g 0.7g RT 避光试剂(C): 抗氧化剂0.5ml 1ml 4℃ 试剂(D): MDA标准品(1mmol/L) 0.5ml 1ml -20℃避光使用说明书
酚试剂分光光度法测定甲醛的含量
酚试剂分光光度法测定甲醛的含量 1 实验原理空气中的甲醛与酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化成蓝绿色化合物。根据颜色深浅，比色定量。 2 试剂本法中所用水均为重蒸馏水或去离子交换水：所用的试剂一般为分析纯。 称量 0.10g 酚试剂，加水溶解，倾于 100ml 具塞量筒中，加水至刻度。放入冰箱中保存，可稳定三天。 吸收夜：量取吸收原液5ml，加95ml水，即为吸收液。采样时，临用现配。1%的硫酸铁铵溶液：称量 1.0g 硫酸铁铵，用 L 盐酸溶解，并稀释至 100ml。碘溶液：称量40g碘化钾，溶于20ml水中，加入12.7g碘。待碘完全溶解后，用水定容至1000ml。移入棕色瓶中，暗处储存。 1mol/L氢氧化钠溶液：称量40g氢氧化钠溶于水中，并稀释至1000mL L 硫酸溶液：量取 28ml 浓硫酸缓慢加入水中，冷却后，用水稀释至 1000mL。硫代硫酸钠标准溶液 (C(Na2S2O3)=L) %淀粉溶液：称量 0.5g 可溶性淀粉，用少量水调成糊状后，加入 100mL 沸水，并煮沸2~3min至溶液透明。冷却后，加入0.1g水杨酸或氯化锌 保存。 甲醛标准贮备溶液：量取含量为 36%~38%甲醛溶液，放入 1L 容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液1ml约相当于1mg甲醛。其准确浓度用下述碘 量法标定。甲醛标准贮备溶液的标定：精确量取待标定的甲醛标准贮 备溶液， 置于250mL碘量瓶中。加入碘溶液(C(1/2I2)=L)和15mL1mol/L氢氧化 钠溶液，摇匀后放置15min。加入20mL L硫酸溶液，再放置 15mi n。用硫代硫酸钠标准溶液滴定，至溶液呈现浅黄色时，加入 % 淀粉溶液继续滴定至恰使蓝色褪去为止，并记录所用硫代硫酸钠标准 溶液体积(V2)， mL同时用水作试剂空白滴定，记录空白滴定所用硫代 硫酸钠标准溶液体积(V? , mL甲醛溶液的浓度用公式计算： 甲醛溶液浓度(mg/mL =(V 1-V2) XC1X 15/20 式中：V1—试剂空白消耗硫代硫酸钠溶液的体积，mL V 2—甲醛标准储备溶液消耗硫代硫酸钠溶液的体积，mL C i —硫代硫酸钠溶液的准确物质的量浓度，
甲醛含量的测定方法2
甲醛各项指标的测定方法 一、甲醛含量的测定 1、硫酸溶液（C=0.5mol/L）的配制及标定 1.1、药剂：工业基准的无水碳酸钠试剂（99.5%—100.05%）； 甲基红—亚甲基蓝混合指示剂；分析纯的浓硫酸试剂。 1.2、硫酸溶液的配制： 用量筒量取15ml浓硫酸，缓缓倒入1000ml蒸馏水中，冷却，摇匀。1.3、硫酸溶液的标定： 将无水碳酸钠用称量瓶称取4g左右放入（270—300℃）烘箱中烘至恒重，取出后放入干燥器里冷却至室温。然后称取,三份1.0000g—1.0025g分别倒入三个250ml锥形瓶中，用50ml量筒量取蒸馏水倒入锥形瓶中溶解。溶解后滴加2滴配制好的甲基红—亚甲基蓝混合指示剂，此时溶液为淡蓝色。再将预先配制好的硫酸溶液倒入50ml酸式滴定管中开始向锥形瓶中滴定，滴至锥形瓶中溶液恰好变为淡紫色立即停止滴定，读出滴定所用的硫酸的数值并记录。将锥形瓶中的溶液放入电热套加热，沸腾后计时2min,取下锥形瓶观察颜色，此时溶液恢复淡蓝色，将其放入冷水中迅速冷却至室温后继续用硫酸溶液滴定，溶液由淡蓝色刚好变为淡紫色停止滴定，读数并记录，将两次滴定所用的硫酸的体积相加求和并做好记录。然后平行测定三次。 1.4 数据记录与处理 实验次数第一次第二次第三次 m(无水碳酸钠质量)，（g） V（H2SO4），（ml） C（H2SO4），（mol/L） C平均(H2SO4)，（mol/L） 公式C(H2SO4) = m(无水碳酸钠) / ｛V（H2SO4）×0.05299｝
2无水亚硫酸钠溶液的配制 2.1、药剂：无水亚硫酸钠试剂（分析纯） 2.2、步骤：用电子天平称取63g 无水亚硫酸钠试剂倒入500ml 容量瓶中，再用蒸 馏水稀释至容量瓶刻度线定容，摇匀后即为1mol/L 的亚硫酸钠溶液。 3、甲醛含量的测定 3.1、药剂：硫酸标准溶液；无水亚硫酸钠溶液；甲醛试样；百里酚酞指示剂。 3.2、步骤：用量筒量取50ml 亚硫酸钠溶液置于锥形瓶中，再加入3滴百里香酚酞指示剂，观察颜色，若此时溶液为淡蓝色，则再滴加1—2滴硫酸溶液，若无色则继续下列操作。将锥形瓶放在电子天平上并使读值归零，然后向锥形瓶中滴加1.2000g —1.4000g 甲醛试样，此时溶液呈蓝色。再用50ml 碱式滴定管盛装NaOH 标准溶液滴定至溶液刚好无色为终点。记录消耗的硫酸溶液的体积，根据下列公式计算甲醛含量。 % 100003 .3C V HCHO SO H SO H 4242???= m 甲醛的含量 二、甲醛密度的测定 将甲醛试样用量筒量取100ml ，在温度为22℃时，将密度计缓慢插入100ml 溶液中，密度计刻线与液面凹液面处于水平位置读值并记录。若温度稍高，则温度每高出2℃，读出密度的数值再加0.001g/mL 。 三、甲醇含量的测定 根据下列公式直接计算数值 %10000253 .000171 .10.003?-+?= 甲醛的密度甲醛的含量甲醇的含量 四、甲醛酸值的测定 1、NaOH 溶液的配制 用电子天平称取0.2gNaOH 试剂（分析纯）倒入250ml 容量瓶中，按照正常稀释方法用蒸馏水稀释至容量瓶刻线处，摇匀后即为0.02mol/L 的NaOH 标准溶液。
纺织品甲醛测定方法
深圳迪宝玩具有限公司 纺织品甲醛测定方法 一、甲醛含量的限定 纺织品中甲醛含量问题日益引起业界及社会的广泛关注，同时也成为“绿色贸易壁垒”的重要内容，各国的法规或标准均对甲醛含量做了严格的限定。 ⒈我国于2003年1月1日起实施强制性标准GB 18401－2001《纺织品甲醛含量的限定》 GB18401－2001《纺织品甲醛含量的限定》对纺织品(包括面料和辅料)中所含的甲醛进行了严格的限制，与目前国际通行的实际控制标准基本一致。我国纺织品甲醛含量的限定值是根据产品最终用途而定的，其规定见表。 我国纺织品甲醛含量限定值 纺织品类型甲醛含量(mg／kg)≤纺织品类型甲醛含量(mg／kg)≤ 婴幼儿类20 非直接接触皮肤类200 直接接触皮肤类75 室内装饰类300 其中：婴幼儿类包括尿布、尿裤、内衣、围嘴儿、睡衣、手套、袜子、中衣、外衣、帽子和床上用品；直接接触皮肤类包括文胸、腹带、针织内衣、衬衫、裤子、裙子、睡衣、袜子、床单和被罩；非直接接触皮肤类包括毛衫、外衣、裙子和裤子；室内装饰类包括桌布、窗帘、沙发罩、床罩和墙布。 ⒉日本相关法规和标准中甲醛含量的限定值 日本的相关法规和标准中对甲醛含量的限定如表所示。 日本纺织品甲醛含量限定值 规则纺织品类型甲醛含量(mg／kg)≤ 日本通产省根据日本第112号法令(1973)颁布的《关于日用品中有害物质含量法规与皮肤直接接触的服装75 与皮肤直接接触较少的服装(如衬衫) 300 外衣1000 2岁以下婴幼儿服装20 日本厚生省34号令(1974)《关于日用品中有害物质含量法规的实施规则》婴儿用品(A－Ao)值0.05 其他产品75 日本纺织品检查协会标准2周岁岁内婴幼儿(A－Ao)值0.05 内衣75 男女衬衣300 男女便裤及裙子1000 注A－Ao(吸光度)是指日本标准甲醛数值，规定大于0.05为不合格；小于或等于0.05为合格。 ⒊其他与生态纺织品有关的国际法规及标准 国际上常见的一些生态纺织品相关法规与标准如表所示。 常见生态纺织品国际通行法规 国家限定甲醛含量的相关规则甲醛含量的限定内容及标 欧盟国家Oeko Tex标准100∶2000 家具布、窗帘布、桌布、不接触皮肤的衣服：300mg／kg 床垫、接触皮肤的衣服：75mg／kg 床单、婴幼儿纺织品：20mg／kg