第二章植物组织培养
第二章植物组织培养
一、名词解释
1.植物组织培养
2.离体培养（试管培养）
3.植株培养
4.器官培养
5.组织培养
6.细胞培养
7.原生质体培养
8.固体培养
9.液体培养
10.初代培养
11.继代培养
12.光培养
13.暗培养
14.植物细胞的全能性
15.胚性细胞（分生性细胞）
16.分化
17.脱分化
18.愈伤组织
19.再分化
20.体细胞胚
21.植物的再生功能
22.组培快繁技术
23.外植体
24.琼脂
25.抗生素
26.活性炭
27.母液（贮备液）
28.接种
29.原球茎
30.脱毒苗（无病毒苗）
31.指示植物检测（枯斑测定法）
32.指示植物（鉴别寄主）
33.抗原、抗体、抗血清
34.单配法
35.混配法
二、填空
1.植物组织培养由于培养物脱离母株在试管内培养，故又称
或，植物组织培养根据分类依据不同可以划分为不同的类型，其中，根据培养对象可以分为、
、、根据培养对象可分为、根据培养过程可分为
、根据培养条件可分为
。
2. 植物细胞的全能性是一种的能力，不管是
在特定的条件下都能表达出来，产生一个完整植株。
3.一个已分化的细胞要表达出其全能性，就要经过
和的过程，这就是植物组织培养所要达到的目的。
4.脱分化后的细胞进行再分化的过程有两种不同的形式，一是
另一种是。
5. 植物再生功能的产生是由于
，在自然情况下，许多植物的营养器官和细胞再生困难，主要是由于
、所致。
6.目前植物种质资源的保存有两个问题，一是
另一个是。
7. 植物组织培养是在进行，因此对环境条件和设备的要求。
8. 厂房必须满足三个基本的需要：即、
。
9. 厂房根据结构和应用范围一般设计为、
、、、
。
10. 药品配制间的主要任务
是，
洗涤间的主要任务是，培养基制作间的主要任务是缓冲间的
主要任务是
无菌操作间的主要任务是
试管苗培养间的主要任务是
试管苗驯化移植间的主要任务是
11. 常用的灭菌设备有、、
四种。
12. 湿热灭菌设备（高压蒸汽灭菌锅）用于
的灭菌，根据规模大小有、、
等不同规格，根据控制方式分为、、
等三种不同类型。
13. 过滤灭菌设备（防细菌滤膜）要求网孔直径为以下，在需要过滤灭菌的液体量大时，常使用，液量小时，可用，主要用于、、
等不耐热物质的灭菌。
14. 干热灭菌设备利用的方法进行灭菌，包括
、。
15.其他灭菌设备是利用紫外光波、超声波、臭氧等杀菌，主要用于对
和进行消毒。常用的设备包
括、、。
16.常用的接种设备有、、
其中，是植物组织培养最常用、最普及的无菌操作装置。根据风幕形成的方式可分为和
两种，根据使用方式分为、、
等，根据操作形式分为和。常用的接种工具有、、
、、、。是用于剥离茎尖和进行培养物的观察、分析、拍照等，包
括、、
、四种。
17. 常用的培养设备有、、
。
18. 培养架大多由制成，一般设层，最低一层离地高约，其他每层间隔
左右。
19. 是用于液体培养时改善培养过程的氧气供应状况。
20. 是对于一些对环境条件要求特别严格的培养物。
21. 根据培养目的和要求不同，可选用不同类型和规格的培养容器可分
为、、
。
22. 主要用于外植体静置培养、振荡培养
或试管苗继代培养。优点有
23. 主要用于茎尖培养、液体培养。
主要用于继代和生根培养。主要用于兰科植物的培养。
24. 用于称量的设备与用具有、、
、、六种。其中，
是用于进行琼脂、蔗糖和各种药品的称量，需要有称量和的分析天平，以及称量大量元素、蔗糖和琼脂的
等不同精度的天平。
25. 环境控制设备与用具有、、
三种。
26. 植物组织培养过程中常用的洗涤剂有、
和，其中适用于玻璃器皿和金属类器具洗涤的是。
27. 常用的消毒灭菌方法有、。其前者可以分为、、
后者可以分为、、、
。
28. 根据所作用的物体和工作程序可将消毒灭菌操作主要分为
、、。
29. 环境灭菌的方法主要有、、
。植物组织培养中如超净工作台的局部无菌环境采用
灭菌，对于缓冲间、接种间、培养间采用灭菌。
30. 组织培养中根据用具种类不同分别采用、
、。
31. 干热灭菌是利用进行烘烤灭菌的方法，适用于各种玻璃器皿和器械的灭菌消毒，将烘箱温度控制在
烘烤分，即可达到灭菌效果。适用于培养基、玻璃器皿、棉塞、布制品及金属用具等得灭菌，一般灭菌掌握在压力下。
32. 培养基灭菌一般采用，特殊情况下采用
33. 过滤灭菌主要针对的物质。如赤霉素、生长素、脱落酸、玉米素、部分维生素、多用抗生素和酶，过滤灭菌的原理是
34. 叫做外植体，外植体一般采用
灭菌的方法。
35. 不同植物种类、外植体类型、取材季节与时间等对灭菌效果有很大
影响，一般在灭菌时应先进行实验，确定
、、。
36. 配置培养基的目的是人为提供离体培养材料的，
在植物组织培养生产中应根据不同的、
选用不同的培养基。
37. 培养基主要有、、
、五大类组成。配置培养基母液时要用
以确保母液及培养及成分的精确性，大规模生产时可用
。
38. 大量元素指的元素，有等。微量元素指的元素，有等。
39. 组织培养中用到的有机化合物有、、
、、五大类。
40. 组织培养基中用到的糖类的作用一是二是
使用浓度一般在，在大规模生产时，可用食用的
代替。
41. 维生素类化合物在植物细胞中主要以各种的形式参与多种代谢活动，对、等有很好的促进作用。常用维生素的种类有、、
、、、等七种。使用浓度是。
42. 肌醇又称，作用是，
，，
。使用浓度一般为。43. 氨基酸的作用是。常用的有
、、、、
、。
44. 天然复合物对有促进作用，对
的作用不明显。其中使用量最多，效果最大的是，其使用浓度为，主要在兰花组织培养中应用，且对原球茎的增值有明显促进作用的天然复合物是，其用量为
45. 植物生长调节物质包括、、
三大类。常用的生长素类物质作用能力的强弱顺序为。常用的细胞分裂素类作用能力的强弱顺序是，其中常用的人工合成的、性能稳定的、价格适中的是。
46. 细胞分裂素类不溶于水，也不溶于酒精，一般可溶于
或。
47. 生长调节物质的使用量甚微，浓度一般用表示，一般使用生长素的浓度是，细胞分裂素的浓度为
48. 培养基的其他成分有、、
。在固体培养时，琼脂是最好的，用量在之间。抗生素的用量在之间。活性炭的通常使用浓度为。
49. 所谓母液是，也称。母液配制的目的一是，二是
。
50. 母液配制的方法有和两种。配制大量元素母液时用感量的托盘天平称取药品，微量元素母液用感量的分析天平称取药品。母液保存时放入的冰箱中低温保存，用时再按比例稀释。
51. 配制培养基时称取琼脂、蔗糖的量分别为和。调培养基的PH为，偏碱滴加调整，偏酸滴加
调整。
52. 培养基的高压灭菌加压至，稳压时接通电源，继续加压至
开始计时，保压在维持分，此时温度在
。开锅后贮存于培养基中培养。
53. 熬制培养基过程中，先放入，最后加入
。多数植物适宜的PH在。
54. 接种是的过程。操作过程必须在进行。
55. 接种前打开紫外线灯进行环境灭菌，接种人员上工作台后，用檫拭双手，及工作台面。
56. 植物组培快繁的流程是、、
、、、、
、。
57. 选择适宜的外植体大小是，茎尖分生组织为
茎段上常带个茎节，叶片。
58. 组培所需的条件包括、、
、、。组培温度一般为
，光照主要表现在和方面。组织培养中多采用光照，光周期最常用的周期是
的光照，的黑暗。培养室内的湿度要保持，大多数植物适宜的PH在，一般培养基结要求。
59. 培养基中由于有无机盐类、蔗糖等化合物，会影响渗透压的变化，通常个大气压对植物生长有促进作用，
个大气压对植物生长有阻碍作用，个大气压会使植物生长完全停止，个大气压植物细胞就不能生存。
60. 液体培养时应考虑用、、
三种方法。
61. 初代培养指。初代培养建立的无性繁殖系包括、、、。
62. 根据初代培养时发育的方向可分为几种，分别为、
、、。
63. 炼苗基质有、、。草本植物用，木本植物有。
64. 炼苗过程中适宜的生根温度为。
65. 无病毒苗是指。
66. 脱毒方法有、、。
67. 热处理的方法有、。其中适用于休
眠器官、剪下的接穗或种植材料的脱毒方法是，
适用于生长期植物材料的脱毒处理。
68. 热处理脱毒只对和病毒有效，而对
不起作用。
69. 茎尖培养的方法包括、、
、。其中培养茎尖常采用。70. 影响茎尖培养的因素有、、
其中茎尖大小与脱除效果呈，即剥取茎尖越小，脱出效果。但茎尖大小与茎尖的成活率呈，即茎尖越小培养难度，成活率。一般茎尖切取的大小为且带1---2个叶缘基的茎尖为培养材料。
71. 在茎尖培养中，比效果好。
从茎尖的活跃生长的程度上说，一般地，比
效果好。是目前生产无病毒苗最安全、最重要的一条途径。
72. 目前的生产实践中还有、、
、等方法。
73. 无病毒植物的检测方法有、、
四种，指示植物一般有两种类型，一种是
，另一种是。
74. 无病毒原原种的保存置于的温度条件下离体保存。75．用于组织培养的菊花主要是，如果为了脱除病毒，则应在解剖镜下剥取mm的茎尖进行培养。
76．菊花诱导培养基中加人细胞分裂素mg／l，生长素mg／l，诱导丛包生芽效果最好。
77．菊花采用和两种方法继代增殖可以获得大量试管苗。
78．菊花热处理脱毒是将病毒植株置于℃条件下，生长2个月，再经脱毒。
79．香石竹组培时，应选取优良的品种，在期，切取健壮植株的
作外植体。
80．香石竹的初代培养以诱导或的方法繁殖快。
81．将香石竹植株放到高温环境处理周，能脱除香石竹花叶病毒、环斑病毒、条斑病毒等。
82．蝴蝶兰是茎性热带兰。
83．通过技术繁育蝴蝶兰种苗，是目前繁殖率最高，种苗质量最优秀的方法。
84．蝴蝶兰用花梗或花梗作外植体，是最
合适的外植体取样部位。
85．蝴蝶兰炼苗时，将出瓶的小苗要用将附在根部的培养基洗干净，用洁净、消毒的将根包裹，松紧适宜，放在适宜的条件下培养，l个月后，小苗生长稳定，开始喷
施。
86．马铃薯在有根小苗继续扩繁的情况下，培养温度给予昼
温℃，夜温的培养条件下，便在试管瓶内形成试管微型薯。
87．马铃薯脱毒苗快速繁殖的方法有、、。
二、选择题
1. 对除去细胞壁原生质体的培养称为
A细胞培养B原生质体培养C器官培养D液体培养2. 对外植体进行的第一次培养称为
A初代培养B继代培养C光培养D固体培养3. 利用植物组织培养法快速繁殖种苗的技术称为
A工厂化生产技术B组培快繁技术C组织培养技术
4. 植物组织培养厂房必须满足个基本要求
A1 B2 C3 D5
5. 主要用于化学药品的贮藏，称量和溶液配制的是
A药品配制间B洗剂间 C 缓冲间D无菌操作间
6. 缓冲间设计面积一般为m2,应安装用以照射灭菌。
A2---3 紫外线灯B1----3 电灯
C2---3 电灯D1--- 3 紫外线灯
7. 主要用于培养基，玻璃器皿及其他可高温灭菌用品的灭菌设备为
A防细菌膜B高压蒸汽灭菌锅（湿热灭菌设备）
C烘箱D酒精灯
8. 防细菌膜的网孔直径为um以下
A0.45 B0.55 C0.35 D0.4
9. 主要用于赤霉素、玉米素、脱落酸等不耐热物质过滤灭菌的设备为A高压蒸汽灭菌锅B防细菌滤膜
C烘箱D酒精灯
10. 超净工作台根据风幕形式可分为
A水平风、垂直风B单人单面、双人单面
C开放式操作、密封式操作
11. 用于分离植物组织时用到的工具是
A尖头镊子B枪型镊子C解剖剪D接种针
12. 用于茎尖剥离和愈伤组织转接的工具是
A弯头剪B解剖刀C接种针D切割盘
13. 用于剥离茎尖和进行培养物的观察、分析、拍照等时用
A显微镜B放大镜C照相机D录像机14. 培养架大多由制成
A木头B金属
15. 用于液体培养时能改善培养过程中氧气供应状况的是
A恒温振荡器B光照培养箱C培养架D空调机16. 主要用于外植体静置培养、振荡培养或试管苗继代培养的容器是
A试管B塑料瓶C三角瓶D果酱瓶17. 主要用于兰科植物培养的培养容器是
A试管B塑料瓶C三角瓶D果酱瓶18. 用于称量大量元素、蔗糖和琼脂的天平为
A分析天平B托盘天平C电子天平
19. 用于配置培养基母液时溶解各种化合物的用具是
A烧杯B量筒C容量瓶D移液管
20. 用于自动控制培养间培养时间的环境设备是
A空调机 B 冰箱C光照时控器
21. 用于存放各种化学药品的设备是
A药品柜B木箱C纸箱
22. 适宜的外植体大小是
A0.2----0.5mm B0.5c m×0.5cm C0.5---1cm D1---2cm 23. 植物组织培养中温度一般采用
A23----27 B 25---35 C20----25 D23----30 24. 组织培养中光照的影响主要表现在
A光质、光强B光强、光照时间（光周期）
C光照时间、光和塑率
25. 组织培养中多采用lx的光照
A2000---3000 B2000---5000 C2000---2500 D2500---3000 26. 组织培养时最常用的周期是h 的光照，h的黑暗。
A16、8 B16、3 C8、16 D16、16
27．组培中一般要求培养室湿度保持在
A60---80％B70—90％C70—80％ D 80—90％
28. 组培中大多数植物适宜的PH在之间，一般皆要求为A5.6---6.5,5.8 B5.6---6.6,5.8 C6.5---7.5,5.8 D6.6---8.6,6.8
29. 组培中培养基的渗透压通常在个大气压时对植物生长有促进作用
A1---2 B2个以上C5---6个D6个以上
30. 转入生根培养基的生根过程，草本植物大约天，木本植物大约天生根
A7,10---15 B7,10 C8,15 D15,7---8
31. 适宜的出瓶炼苗阶段为小植株生出条水平根，每条根长
Cm
A3---5,1—2 B1---2,3---5 C1---3,2---5 D2----5,1---3 32. 在植物的试管苗的整个生长过程中，采用恒温培养且温度控制在
A27---30 B23---27 C20----23 D25---27
33. 试管苗培养瓶内的空气相对湿度接近
A100％B95％C90％ D 80---90％
34. 炼苗要求将试管苗从培养间转移至驯化温室，不开口自然光下放置
天，然后打开封口材料继续放置天
A7----10,1---2 B 1---2,7---10 C5---10,1---2 D7---10,6----8 35. 试管苗移栽后要保持适宜的温度、光照条件，适宜的生根温度为
℃
A18---20 B20---22 C18---25 D25---28 36.温汤浸渍处理过程中要求将材料放入℃的温水中浸渍数分钟至数小时
A45---55 B40---50 C50—55 D 55---65 37. 热处理过程中选择季节时以最好
A春季B夏季C秋季D冬季
38. 茎尖培养时一般切取mm带1—2个叶原基的茎尖为培养材料
A0.1---1.0 B0.2—0.5 C0.1—0.5 D0.5---0.8
39. 茎尖培养的条件为温度℃光照h光照强度为lx
A25,16,2000 B 27,6,3000
40. 主要用于草本植物和通过汁液传播病毒的鉴定的检测方法为
A汁液涂抹法B嫁接法C热处理法D纸桥法41. 对于木本多年生果树及草莓、甘薯等无性繁殖的草本植物，采取
检测病毒
A汁液涂抹法B嫁接法C热处理法D纸桥法
42. 采用方法可直接观察有无病毒颗粒的存在，并观察到有关病毒颗粒的大小，形状及结构。
A电子显微镜检测法B嫁接法C抗血清检测法D直观检测法
43. 保存无病毒原种苗时，网纱以目为好
A400 B300 C200 D500
44. 试管保存无病毒原种时，应置于℃下离体保存
A1---9 B11---19 C2---8 D3---6
三、判断
（）1. 植物的组织培养又称试管培养或离体培养，是由于培养物脱离母株。
（）2. 对除去细胞壁的原生质体的培养称为细胞培养。
（）3. 初代培养是对外植体进行的前两次培养。
（）4. 光培养和暗培养过程中都必须有光照的刺激。
（）5. 植物细胞的全能性是一种潜在的能力。
（）6. 受精卵或合子都具有全能性。
（）7. 分化的结果导致胚性细胞的分裂能力丧失，最终形成植物体。（）8. 已分化的细胞恢复分裂转变为分生性状态，并形成愈伤组织的过程称为“再分化”。
（）9. 将一个已经失去分裂能力，处于分化成熟和分散静止状态的胚性细胞置于特定的培养基上，首先发生的变化是恢复到分生性状态。（）10. 一个已经脱分化的细胞如果条件合适，可以保持旺盛的分裂状态。
（）11. 一个已分化的细胞要表达出其全能性，要经过再分化的过程。
（）12. 由愈伤组织不同部位分别独立形成不定芽和不定根的形式称为胚形态建成。
（）13. 在某些情况下，再分化可以直接发生在脱分化的细胞中，其间需要插入一个愈伤组织阶段，才能分化出芽和根。
（）14. 植物再生功能产生的主要原因是由于植物受伤的组织产生了创伤激素。
（）15. 在自然情况下，许多植物的营养器官和细胞的再生困难，主要是由内源激素调整缓慢，不全面或外界条件不适宜所致。
（）16. 植物组织培养技术能使植物的再生功能在更大范围内充分的表现。
（）17. 植物组织培养过程优化，繁殖率高。
（）18. 采用植物组织培养技术繁殖种苗，可以实现育苗的工厂化生产。
（）19. 无病毒植株具有抗病毒的能力。
（）20. 利用植物组织培养技术可以解决种质资源保存过程中资源衰竭和保持耗资大，易受损失的问题。
（）21. 植物组织培养技术对环境条件和设施设备无要求。
（）22. 进行植物组织培养的工厂化生产时，要事先做好计划和设计。
（）23. 植物组织培养厂房设计时应按自然工作程序先后合理布局，避免生产环节倒排。
（）24. 植物组织培养厂房必须满足2个基本需求。
（）25. 植物组织培养厂址最好选在常年主风向的下风方向。
（）26. 植物组织培养厂房一般设计为7个操作间。
（）27. 药品配制间主要用于化学药品的贮藏、称量及容器的洗涤工作。
（）28. 药品配制间设计时要求磁力搅拌器与电子天平同放一个台面。
（）29. 药品配制间中不需要配制普通冰箱。
（）30. 外植体的预处理与清洗，试管苗的出瓶清洗与整理等工作需要在洗涤间进行。
（）31. 洗涤间设计时要求方便多人同时操作，配大型水槽及晾干台。
（）32. 烘箱、周转箱等设备应配置在缓冲间。
（）33. 培养基的制作间主要负责培养基的配置、分装、包扎和高压灭菌等工作。
（）34. 培养基的制作间在设计时要求在灭菌锅的下方墙壁上设置换气窗，利于通风排气。
（）35. 缓冲间设计时要求3---5平方米。
（）36. 缓冲间中设置的紫外线灯主要用于照射灭菌。
（）37. 无菌操作间一般要求7---8平方米，需配置推拉门，紫外线灯及一小型空调。
（）38. 操作间需配置医用小推车。
（）39. 主要用于接种材料培养生长的是试管苗培养间。
（）40. 试管苗驯化移植间通常在日光温室内进行，要求能够控温调湿，空光通风，控菌防虫。
（）41. 高压蒸汽灭菌主要用于培养基，玻璃器皿及其他高温灭菌用品的灭菌。
（）42. 湿热灭菌设备根据规模大小可分为手动控制，半自动控制和全自动控制等不同类型。
（）43. 防细菌滤膜的网孔直径为0.55微米以下。
（）44. 过滤灭菌设备主要用于赤霉素、玉米素、脱落酸等不耐热物质的灭菌。
（）45. 接种器械灭菌器属于热灭菌设备。
（）46. 紫外灯、超声波清洗器、臭氧发生器主要用于对空气和物质表面的消毒灭菌。
（）47. 超净工作台是植物组织培养最常用、最普及的无菌操作装置。
（）48. 超净工作台根据使用方式可分为：水平风和垂直风。（）49. 枪型镊子主要用于分离植物组织。
（）50. 用于植物组织培养基中茎尖剥离和培养物观察、分析拍照的是显微镜。
（）51. 培养架多由金属制成。
（）52. 恒温振荡器主要用于固体培养时改善培养过程中的氧气供应状况。
（）53. 光照培养箱主要用于一些对环境条件要求特别严格的培养物。
（）54. 培养器皿要求酸性透光度好玻璃制成。
（）55. 主要用于茎尖及液体培养的是果酱瓶。
（）56. 植物组织培养过程中微量元素及植物激素称量时用托盘天平。
（）57. 主要用于培养基母液定容的是烧杯。
（）58. 光照时控器主要用于自动控制培养间的光照强度。
（）59. 磁力搅拌器主要用于易溶物质的搅拌。
（）60. 恒温水浴锅属于蒸馏设备。
（）61. 用于培养基PH值测定时多用PH试纸。
（）62. 植物组织培养工作的基本要求是掌握组织培养的工作程序和基本操作技术。
（）63. 植物组织培养过程中的各种灭菌方法的有效作用时间都是以材料或用具的作用时间为前提的。
（）64. 铬酸洗液的颜色以棕红色为好，变青褐色则失效。
（）65. 铬酸洗液的颜色以棕红色为好，变青褐色则失效。
（）66. 配制铬酸洗液时应将重铬酸钾溶液注入浓硫酸中。
（）67. 可以用手直接接触铬酸洗液。
（）68. 对于新购回的玻璃器皿无需洗涤即可使用。
（）69. 对于已被霉菌等杂菌污染的器皿应先进行高压蒸汽灭菌在清洗灭菌。
（）70. 清洗干净的载玻片，盖玻片应放在95℅的乙醇中备用。（）71. 对新购置的金属器皿应先去油脂，再擦净备用。
（）72. 对于已使用过的金属器皿应先用洗衣粉水涮洗，再用酒精擦拭备用。
（）73. 用毛刷刷洗器皿时应沿两个方向（瓶壁上下圆周旋转）刷
洗。
（）74.检查玻璃器皿，是否清洗干净只要瓶壁看透明锃亮即可。（）75.清洗时可以不用清洗器皿口。
（）76.培养器皿上的标记可以忽略不计。
（）77.洗过的玻璃器皿一定要晒干。
（）78.对于移液管理之类的量具和计量仪器可以采取高温烘烤的办法，使其达到干燥状态。
（）79.灭菌和消毒是组织培养关键的技术。
（）80.植物组织培养的过程都在无菌条件下进行。
（）81.灭菌即消毒，消毒即灭菌。
（）82.自然条件下的环境及物品都是有菌的。
（）83.喷雾灭菌属于物理灭菌方法。
（）84.对环境灭菌就是要彻底消灭环境中的微生物。
（）85.超净工作台的局部灭菌常采用空气过滤灭菌。
（）86.紫外线照射灭菌只适宜于空气和物体表面的灭菌。
（）87.紫外线照射灭菌一般要求照射时间为20~30min，且距照射物不超过2m为宜。
（）88.喷雾灭菌常采用0.2％的新洁儿灭对环境进行喷雾。
（）89.常采用的化学重蒸剂为甲醛。
（）90.对培养材料的培养室只能用甲醛灭菌。
（）91.采用干热灭菌时将箱温控制在150—170℃烘烤120min即可达到效果。
（）92.接种工具可采用酒精灯内190°烘烤的方法灭菌。
（）93.温热灭菌只在0.1~0.5Mpa的压力下灭菌20~30 min。
（）94温热灭菌锅内温度可达到121~125℃
（）95.对于镊子、剪刀等可采用浸泡灭菌方法进行灭菌。
（）96.配制培养基过程中简单的煮沸可以杀死所有微生物，因此分装后无需灭菌。
（）97.培养基灭菌一般采用过滤灭菌。
（）98.对于GA3.2AA.ABA.27等采用过滤灭菌。
（）99.过滤灭菌学术网孔直径为0.55以下
（）100.外植体一般采用浸泡灭菌的方法。
（）101.外植体选取的季节、时间对灭菌效果无影响。
（）102.饱和的漂白粉溶液经过5—30分得消毒可以很好的起到灭菌的效果。
（）103.配制培养基的目的是人为提供离体培养材料的氮源。
（）104.配制一种培养基可以满足任何植物组织或器官的培养。（）105.根据营养水平，培养基可以分为固体培养基和液体培养基。
（）106.在植物组织培养中，应根据不同的植物种类和培养部位及不同的培养目的选用不同的培养基。
（）107.MS培养基适于生根培养。
（）108.配制培养基母液时最好用自来水。
（）109.N,P,K,Ca,Mg,S是配置培养基中的大量元素。
（）110.微量元素是浓度小于0.5mmol/L的元素。
（）111.在配置培养基时用到的铁离子多为+2价。
（）112.在配置培养基时糖类的使用浓度一般为3---5℅.
（）113.大规模生产培养基时，用到的糖类由绵白糖代替。
（）114.维生素类在配置培养基的过程中主要起到促进生长和分化的作用。
（）115.环已六醇主要参与细胞壁和细胞膜的构建且使用，浓度为100mg/L.
（）116.氨基酸是很好的有机碳源。
（）117.天然复合物对器官的分化作用明显。
（）118.椰乳是配置培养基过程中使用最多，效果最大的一种天然复合物。
（）119.椰乳培养对茎尖大小要求不明显。
（）120.香蕉是兰科组培中用到的天然复合物。
（）121.马铃薯做为天然复合物去皮。
（）122.常用的生长素类物质作用能力的强弱顺序为：
2,4—D>IBA>IAA>NAA。
（）123.IAA在使用的过程中应避光保存。
（）124.IAA应用最普遍。
（）125.2,4—D可用95℅的酒精助溶。
（）126.当IBA/IAA的比值高时，利于长根，反之利于长芽。
（）127.细胞分裂素类激素是腺嘌呤的衍生物，作用能力的强弱顺序为：ZT>6—BA>KT.
（）128.6—BA是常用的一类生长素类激素。
（）129.细胞分裂素不溶于酸也不溶于碱。
（）130.赤霉素的主要成分是GA3.
（）131.生长素类物质使用量甚微，一般生长素浓度为0.05—5mg/L,细胞分裂素类为0.05—10mg/L.
（）132.琼脂是一种固化剂。
（）133.一般琼脂以颜色深，透明度好者为上品。
（）134.任何两种抗生素都可以混用。
（）135.活性炭是一种有益无害的吸附剂。
（）136.培养基中激素类母液的浓度为0.5—1mg/ml.
（）137.母液配置好后应放在10℃的冰箱内低温保存。
（）138.培养基的配置过程中应先调PH，在定容。
（）139.培养基溶液的PH值为5.5—6.8，偏碱滴加0.1mol/L的Hcl 调整，偏碱滴加0.1mol/L的NaOH调整。
（）140.封装好的培养基应放到高压灭菌锅中灭菌。
（）141.培养基灭菌锅中的水应加满为止。
（）142.高压灭菌锅灭菌时应先稳压后排气。
（）143.培养基熬制过程中应用旺火加热，文火煮开。
（）144.配制培养基时一定按母液顺序依次加入。
（）145.培养基熬制过程中，先加入难容的琼脂及有机附加物，最后加入药剂混合液。
（）146.经高压灭菌后培养基的PH值会降低。
（）147.灭菌过程中，锅内的冷空气对灭菌的效果没有影响。
（）148.培养基成分不随灭菌时间而发生变化。
（）149.灭完菌的培养基应立及取出，摆平冷却。
（）150.接种过程中对环境条件无任何要求。
（）151.接种过程对环境条件无要求。
（）152.接种过程中使用的灭菌材料均为70—75％的酒精。
（）153.植物的任何器官、细胞或组织都能作为外植体。
（）154.一般来说，分化程度越高的细胞和组织脱分化越容易。（）155.选择外植体时应在生长季节选择或成功率高。
（）156.外植体的大小直接影响到组培的成功与否。
（）157.对于选择的外植体材料无需处理即可使用。
（）158.外植体表面灭菌多用70---75％的酒精。
（）159.接种时对于茎尖、茎段应按极性正放在培养基上。
（）160.培养基的配置过程中要求的温度条件为25+2℃.
（）161.光强和光周期对外植体的分化和生长都有影响。
（）162.一般来说，在一定范围内，光照度越强，幼苗越生长，越粗壮。
（）163.光照时间主要影响到组培物的增值与分化。
（）164.固体培养基可加入活性炭来增加通气度，以利于发根。（）165.液体培养时应考虑用滤纸桥培养法。
（）166.初代培养即接种外植体后最初的几代培养。
（）167.菊花、月季、石竹可以采取茎----枝------芽------苗的生产过程来进行繁殖。
（）168.用靠培养不定芽得到的培养物如非洲菊、草莓一般采取芽丛进行繁殖。
（）169.体细胞胚状体就是合子胚。
（）170.体细胞胚状体是由性细胞发生的。
（）171.悬浮培养的细胞可以产生胚状体。
（）172.胚状体的发生不受遗传基因的影响。
（）173.兰科植物主要依靠培养原球茎进行繁殖。
（）174.继代培养过程是快速繁殖的过程。
（）175.继代繁殖代数可以无限制的多。
（）176.继代培养的小苗到一定程度需进行生根培养。
（）177.生根培养茎中应加入蔗糖的量。
（）178.出瓶炼苗阶段对小苗的要求为3---5条水平跟，每条根长1----2厘米。
（）179.胚状体的育成的小苗可以不经过生根阶段。
（）180.试管苗应采取恒温培养，且温度一般为23----27℃.
（）181.试管苗内的相对湿度接近100％.
（）182.试管苗培养过程中的光强较弱。
（）183.试管苗的培养条件为异养，移栽后变为自养。
（）184.试管苗在移栽至大田之前先要进行炼苗。
（）185.草本植物或木本植物移栽时都可直接栽于营养钵中。
（）186.试管苗在出苗过程中尽量不伤根或少伤根。
（）187.移栽前期应保持较高的空气湿度，5---7天后可降低湿度。（）188.小苗移栽后适宜的生根湿度为18---20℃.
（）189.无病毒苗即无特定病毒苗或检定苗。
（）190.对生长期植物材料的脱毒处理是最好使用温汤浸渍法。（）191.热处理以夏季最好。
（）192.热处理对任何植物、器官等处理温度及时间一样。
（）193.热处理法可以脱除所有植物病毒。
（）194.茎尖培养脱毒时培养基中应适当加入K+ 和NH4.
（）195.茎尖大小与脱除病毒的效果成正相关。
（）196.茎尖培养中，光培养比暗培养效果好。
（）197.茎尖培养中，一般地，培养顶芽茎尖比培养腋芽茎尖好。（）198.并不是所有的培养物都能产生无病毒植株。
（）199.对于潜隐性病可采取直观检测法。
（）200.指示植物检测法也称枯斑测定法。
（）201.指示植物检测法常用于草本植物及通过汁液传播的病毒鉴定。
（）202.嫁接法常用于木本多年生的果树及用于无性繁殖的草本植物。
（）203.指示植物对所有病毒都通用。
（）204.指示植物检测法只能测出病毒的相对感染力。
（）205.电子显微镜检查法不仅可以观察到有无病毒颗粒存在，而且可以观察到病毒的大小、形状和结构。
（）206.无病毒原原种苗应种植于防虫网室中。
（）207.在无病毒苗的应用过程中，应重点防止病毒的再度感染。
四、简答
1. 植物组织培养的类型？
2. 植物组织培养的应用原理？
3. 脱分化后的细胞进行再分化的过程有哪两种形式？
4. 植物再生功能产生的原因？许多营养器官和细胞再生困难的原因？
5. 植物组织培养的特点有哪些？
6. 植物组织培养的应用有哪些？
7. 植物组织培养厂房的设计原则和具体要求有哪些？
8. 植物组织培养厂房的结构和应用范围有哪些？各自的任务？
9. 植物组织培养的基本仪器和设备有哪些？各自的功能及适用范围？
10. 植物组织培养设备及用具有哪些？各自的功能及适用范围？
植物组织培养实验基本步骤。。
植物组织培养实验基本步骤 一、母液的配置 1、MS大量元素母液的配制 将大量元素配制成10倍的母液，使用时再稀释10倍。按照配方表中用量依次分别称取扩大10倍的：NH4NO3 、KNO3 、KH2PO4 、 MgSO4·7H2O 、CaCl2·2H2O ，所有药品称取完毕后用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，最后定容至500ml，转入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 2、MS微量元素母液的配制 将微量元素配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别依次称取：MnSO4· 4H2O 、ZnSO4·7H2O 、 H3BO3 、KI 、CuSO4·5H2O 、CoCl2·6H2O ，用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，用容量瓶定容至500ml，转入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 3、MS铁盐母液配制 将铁盐配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的：称
FeSO4·7H2O 和Na2·EDTA ，把FeSO4·7H2O和Na2·EDTA·2H2O分别置于200ml蒸馏水中，加热并不断搅拌使之溶解（磁力搅拌器，边加热，边搅拌）。保持加热，把FeSO4溶液慢慢倒入Na2·EDTA溶液中并不断搅拌，接近沸腾时停止加热，待溶液冷却后加蒸馏水到最终容积500ml，置于棕色细口瓶中，用力振荡1～2min，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名。在室温下避光保存一段时间令其充分反应后，再置于4℃冰箱中保存备用。 4、MS有机化合物母液的配制 将有机化合物配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的：肌醇、维生素B1 、烟酸、甘氨酸、维生素B6 、蔗糖，用蒸馏水依次溶解并定容至500ml后，转入500ml 细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 二、植物激素的配置 常见激素：二氯苯氧乙酸（2，4－D）、萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚－3－丁酸（IBA）、激动素（6-糠氨基嘌呤、 KT）、6－苄氨基嘌呤（6－BA）、赤霉素（GA3）、 1、生长素类： （1）、生长素类在组织培养中的主要作用是：诱导细胞的分裂和根的分化，诱导愈伤组织
植物组织培养 考试复习题.doc
植物组织培养考试复习题 植物组织培养 绪论P1 第一章植物组织培养的基本原理P3 第二章植物组织培养的基本原理P6 第三章植物器官和组织培养P口 第四章胚胎培养及离体授粉P16 第五章花药和花粉培养P20 第六章植物细胞培养P24 第八章原生质体培养P27 第九章植物离体繁殖P30 第十章无病毒苗木培育P33 植物组织培养基本操作P35 1 绪论 植物组织培养的概念植物组织培养是在无菌和人工控制的环境条件 下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、 由于培养的植物材料已脱离母体，乂称为植物离体培养(Plant culture in vitro)o 广义：对植物的器官、组织、细胞及原生质体进行离体培养技术植物组织培养
狭义：对植物的组织(分生组织、表皮组织、薄壁组织等)及培养产生 的愈伤组织进行离体培养。 1.无菌：使培养器皿、器械、培养基和培养材料等处于无真菌、细菌、病毒等微生物的状态，以保证培养材料在培养器1111中正常生长和发育。 2.人工控制的环境条件：对光照、温度、湿度、气体等条件进行人工 控制，以满足植物培养材料在离体条件下的正常生长和发育。 3.外植体：由活体（in vivo）植物体上提取下來的，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。（植物组织培养中，使用的各种器官、组织和 细胞统称为外植体。） 4.愈伤组织：外植体因受伤或在离体培养时，其未分化的细胞和已分 化的细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。 （在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。）植物组织培养的特点 植物组织培养的主要特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体 的器官、组织和细胞。具体特点表现在： 1）组织培养的整个过程都是在无菌条件下进行的，外植体、培养基、接种环境都须经过无菌处理。 2）组织培养在多数情况下是利用成分完全确定的人工培养基进行的, 除少数特殊情况（进行营养缺陷型突变细胞的筛选）夕卜，素、微量元素、有机物和植物激素，培养基的PH和渗透压也是人为设定的。因此，在组织下也能再生完整植株。14）组织培养物通过连续继代培养可以不断增殖，
植物组织培养实验报告
植物组织培养实验报告 Modified by JACK on the afternoon of December 26, 2020
院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师范）年级13级学号 姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法； 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法； 4.了解组织培养的基本程序； 5.掌握接种的方法和材料的培养过程； 6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术； 7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体； 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。 植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态； 2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）； 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件
把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克／升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基，特点是：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性，因而在培养的过程中可维持较好的稳定性；营养丰富，在一般培养中无须额外加
植物组织培养实验报告
如对你有帮助，请购买下载打赏，谢谢！ 院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师范）年级13级学号姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期2016.3-6 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法； 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法； 4.了解组织培养的基本程序； 5.掌握接种的方法和材料的培养过程； 6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术； 7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体； 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态； 2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）； 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件 把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克／升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基，特点是：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性，因而在培养的过程中可维持较好的稳定性；营养丰富，在一般培养中无须额外加入复杂的有机成分；微量元素种类全，浓度高。这类培养基是目前使用最广泛的培养基。 6.生长调节物质 包括天然植物激素额人工激素类似物。植物激素是一类植物自身合成、同时对其生长发育具有重要调节作用的有机化合物。生长调节物质对于离题培养中的细胞分裂分
国内外植物组织培养技术的差距
国内外植物组织培养技术的差距 姓名：*** 学号：********* 指导教师：*** 专业班级：生物工程2009级1班 完成日期：2012-06-05
摘要 植物组织培养技术是农业生物技术中最早实现产业化并取得显著经济效益和社会效益的领域，在理论研究和生产实践中具有广泛的应用价值。通过对国内外植物组培的发展概况以及技术差距的分析，指出了我国植物组织培养技术的发展现状、目前存在的主要问题和应采取的措施，并对植物组织培养技术的发展作了展望。 关键词：组织培养概况差距展望 Abstract The plant tissue culture technology is agricultural biotechnology as the first realized industrialization and get a remarkable economic and social benefits of the field, in the theoretical research and production practice has wide application value. Through the domestic and international plant tissue and the development situation of the technology gap analysis, and pointed out the plant tissue culture technology's development present situation, the existing problems and the measures should be taken, and the development of plant tissue culture technology are discussed. Key words：Tissue culture situation gap looking
植物组织培养实验室 组培室 规划设计
植物组织培养实验室组培室规划设计 一、实验室要求理想的组织培养实验室应该建立在安静、清洁、远离污染 源的地方，最好在常年主风向的上风方向，尽量减少污染。规模化生产的组织 培养实验室最好建在交通方便的地方，便于培养产品的运送。实验室的建设均 需考虑两个方面的问题：一是所从事的实验的性质，即是生产性的还是研究性的，是基本层次的还是较高层次的；二是实验室的规模，规模主要取决于经费 和实验性质。无论实验室的性质和规模如何，实验室设置的基本原则是：科学、高效、经济和实用。一个组织培养实验室必须满足3个基本的需要：实验准备(培养基制备、器皿洗涤、培养基和培养器皿灭菌)、无菌操作和控制培养。此外，还可根据从事的实验要求来考虑辅助实验室及其各种附加设施，使实验室 更加完善。在进行植物组织培养工作之前，首先应对工作中需要哪些最基本的 设备条件有个全面的了解，以便因地制宜地利用现有房屋，或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的，实验室规 模太小，则会限制生产，影响效率。在设计组织培养实验室时，应按组织培养 程序来没计，避免某些环节倒排，引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格 无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件，需要一定的设备、器材和用具，同 时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。二、实验室组成(一)基本实 验室基本实验室包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间，是 组织培养实验所必须具备的基本条件。如进行工厂化生产，年产4万-20万， 需3-4间实验用房，总面积60平方米。1、准备室(化学实验室)功能：又叫化 学实验室，进行一切与实验有关的准备工作：完成所使用的各种药品的贮备、 称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养 材料的预处理等。要求：最好有20平方米左右。要求宽敞明亮、以便于放置多个实验台和相关设备，方便多人同时工作；同时要求通风条件好，便于气体交换；实验室地面应便于清洁，并应进行防滑处理。分类：分体式-研究性质实验室，分开的若干房间将准备室分解为药品贮藏室、培养基配制与洗涤室和灭菌 室等，功能明确，便于管理，但不适于大规模生产。通间式-规模化实验室，准备室一般设计成大的通间，使试验操作的各个环节在同一房间内按程序完成。 准备试验的过程在同一空间进行，便于程序化操作与管理，试验中减少各环节 间的衔接时间，从而提高工作效率。此外还便于培养基配制、分装和灭菌的自
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植物组织培养实验室 (组培室规划设计 2009年 05月 31日星期日 10:18一、实验室要求 理想的组织培养实验室应该建立在安静、清洁、远离污染源的地方, 最好在常年主风向的上风方向, 尽量减少污染。规模化生产的组织培养实验室最好建在交通方便的地方, 便于培养产品的运送。 实验室的建设均需考虑两个方面的问题:一是所从事的实验的性质, 即是生产性的还是研究性的, 是基本层次的还是较高层次的; 二是实验室的规模, 规模主要取决于经费和实验性质。 无论实验室的性质和规模如何,实验室设置的基本原则是:科学、高效、经济和实用。一个组织培养实验室必须满足 3个基本的需要:实验准备 (培养基制备、器皿洗涤、培养基和培养器皿灭菌、无菌操作和控制培养。此外,还可根据从事的实验要求来考虑辅助实验室及其各种附加设施,使实验室更加完善。 在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解, 以便因地制宜地利用现有房屋, 或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的,实验室规模太小,则会限制生产,影响效率。在设计组织培养实验室时, 应按组织培养程序来没计, 避免某些环节倒排, 引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件, 需要一定的设备、器材和用具, 同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。 二、实验室组成 (一基本实验室 基本实验室包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间,是组织培养实验所必须具备的基本条件。如进行工厂化生产,年产 4万 -20万, 需 3-4间实验用房,总面积 60平方米。
植物组织培养实验参考答案9
植物组织培养实验复习题 一、名词解释 1、大量元素:指含量占生物总重量万分之一以上的元素，包括C、H、O、N、P、S、K、C、Mg等。 2、微量元素:含量占生物总重量万分之一以下的元素。 3、植物生长调节剂:人工合成的对植物的生长发育有调节作用的化学物质。 4、外植体：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官 5、细胞全能性：植物体的每个细胞都含有该植物全部的遗传信息。 6、基础培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人工配置的营养基质。 7、愈伤组织:人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团不定形的疏松排列的薄壁细胞。 8、褐变:植物组织中多酚氧化酶被激活，使酚类物被氧化成醌类物，可抑制其他酶活性，毒害外植体。 9、茎尖脱毒:茎尖分生区的病毒传播速度很慢，利用茎尖组培获得无病毒苗，来达到脱毒的目的。 10、不定芽：凡从叶、根或芽节间或是离体培养的愈伤组织上等通常不形成芽的部位生出的芽。 11、污染率：污染数除以接种数，再乘以100%。 12、诱导率：愈伤数除以未污染数，再乘以100%。 13、成活率：成活数除以未污染数，再乘以100%。 14、接种：将表面消毒的外植体转接到无菌的培养基上的过程。 15、消毒：消灭材料上的病菌（不损伤植物材料）。 16、灭菌：利用物理或化学的方法，达到组织培养所学的无菌环境。 17、母液：欲配培养液的浓缩液。 18、无病毒苗：指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要危害病毒在植物内的存在表现为阴性反应的苗木。 19、植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体，培养在无菌培养基上和人工控制的环境中，使其生长、分化、增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。 20快速繁殖：采取培养基配制，材料灭菌，无菌培养，幼苗转移到苗床，成苗转至大田栽种五步走的繁殖培养方式 21、继代培养：继代培养是指愈伤组织在培养基上生长一段时间后，营养物枯竭，水分散失，并已经积累了一些代谢产物，此时需要将这些组织转移到新的培养基上的培养方式。 22、生根培养：将长到一定长度的微枝（>10mm）转移到生根培养基上培养。 23、玻璃化现象：试管苗的茎叶变成透明水渍状，生长畸形，增殖系数明显下降，难以诱导生根，即使诱导生根，其根系质量极差，移栽成活率极低。 24、暗培养： 25、液体培养：将所需培养物的悬浮液在液体培养基中培养的方法。 26、脱分化：一个成熟细胞回复到分生状态或胚性细胞状态的现象。 27、分化：由于细胞的分工而导致的细胞结构和功能的改变或发育方式改变的过程。 28、热处理脱毒：利用高温下使植物组织中的病毒部分钝化或完全失去活性的方法。 1 / 6 29、微尖嫁接技术：把极小（<0.2mm）的茎尖作为接穗嫁接到实生砧木上（无菌种子培养获无菌
《植物组织培养技术》试题六答案
《植物组织培养技术》试题六答案 一、名词解释（每题3分，共15分） 1、植物组织培养：是指在无菌条件下，将植物的离体器官、组织、细胞以及原生质体，应 用人工培养基，创造适宜的培养条件，使其长成完整小植株的过程。 2、驯化：试管苗移植前可将培养瓶移到自然光照下锻炼3～10d，让试管苗接受自然光的照 射，感受自然温度的昼夜温差现象，使其壮实，然后再开瓶移植，经过较低温、湿度的处理，以适应自然温、湿度条件。 3、接种：在无菌条件下，用灼烧过的镊子将外植体放到培养基上的操作过程。 4、细胞悬浮培养：是指将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。 5、脱毒苗：是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。 二、填空题（每空1分，共20分） 1、植物组织培养的发展分为三个阶段：萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应用阶段。 2、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝固剂和支持物，一般用量为6-10g／L 之 间。 3、常用的化学灭菌剂有酒精、氯化汞、次氯酸钠等。 4、愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式、和胚状体方式。 5、茎尖培养根据培养目的和取材大小分为茎尖分生组织培养和普通茎尖培养两种类型。 前者主要是对茎尖长度不超过0.1mm，最小只有几十微米的茎尖进行培养，目的是获得无病毒植株；后者是对几毫米乃至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养，目的是加快繁殖速度。 6、分子生物学鉴定脱毒苗的主要方法：①双链RNA法(dsRNA)和②互补DNA(cDNA)检测法。 7、花药培养前的预处理:低温冷藏是最常用的方法。 8、原生质体的纯化方法有：离心沉淀法、漂浮法和界面法。 三、选择题（每题1分，共10分） 1、植物组织培养实验室不包括（ D ）。 A、准备室 B、无菌操作室 C、培养室 D、显微实验室 2、离体叶培养中，消毒后的叶片应整理切割成（ C ）大小。 A、3×3mm B、4×4mm C、5×5mm D、6×6mm 3、（ D ）是植物离体培养常用的主要糖类。 A、葡萄糖 B、果糖 C、麦芽糖 D、蔗糖 4、在组培过程中，受到细菌侵染后，在培养基的表面出现（ D ）。 A、粉状、毛状菌斑 B、粉状、脓状菌斑 C、油状、毛状菌斑 D、油状、脓状菌斑 5 、超低温种质保存的温度为（ C ）； A、0～15℃； B、-80～0℃； C、-196℃； D、-280℃
植物组织培养实验报告
植物组织培养实验报告 一实验目的 让植物组织经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。 二实验原理 植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。植物激素在此过程中起着重要的作用，吲哚乙酸（IAA ）和 6 –苄基氨基腺嘌呤（6 – BA ）的比例，决定了根和芽的分化。 三实验器材 （一）试剂 乙醇、IAA 或 2 ，4 – D 、HgCl 2 （或次氯酸钠）、6- 苄基氨基腺嘌呤（6-BA ） MS 培养基 （二）仪器设备 培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（100mL ），烧杯，量筒，培养皿，超净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，橡皮筋等 三实验步骤 1. 配制培养基 （1 ）愈伤组织诱导培养基：MS 培养基（蔗糖含量为10 g/L ，2,4 – D 含量为 2 mg/L ，琼脂10 g/L ）。 （2 ）试验培养基：在MS 培养基中按表33 – 1 加入IAA 和6–BA 。 吲哚乙酸先用少量0.1 mol/L NaOH 溶解，6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量0.1 mol/L HCl 溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。 2. 培养基灭菌 将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至pH 5.8 ，趁热分装于100 mL 三角烧瓶中，每瓶约20 mL 。待培养基冷却凝固后，用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后在高压灭菌锅中121 ℃（ 1 kg/cm 2 ）下灭菌20 min 。取出三角烧瓶放在台子上，
植物组织培养技术
第2章植物组织培养技术 第二节植物组织培养概述 一、授课章节 第二节植物组织培养概述。 二、学时安排 2学时。 三、教学目标 1．掌握植物组织培养的含义。 2．了解植物组织培养的类型划分。 3．理解植物组织培养的应用原理。 4．掌握植物组织培养的特点和应用。 四、教学重点、难点分析 重点： 植物组织培养的含义、特点和应用。 难点： 植物组织培养的应用原理。 五、教具 电化教学设备，植物组织培养试管苗。 六、教学方法 讲授法，多媒体课件。 七、教学过程 Ⅰ.导入 前面我们学习了有关植物育种的一些知识，今天，请看我给同学们看一样东西(教师拿出试管苗)，问同学们这是什么呢？这就是我们要学的植物组织培养。 II.新课
一、植物组织培养的含义 植物组织培养是指在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体培养在人工培养基上，给予适宜的培养条件，使其长成完整植株的过程。由于培养物脱离母株在试管内培养，故又称离体培养、试管培养。 二、植物组织培养的类型 植物组织培养由于分类依据不同可划分为不同的类型。 三、植物组织培养的应用原理 （一）植物细胞全能性 植物细胞全能性，是指植物体上每个具有完整细胞核的植物细胞，都具有该植物体的全部遗传信息和产生完整植株的能力。植物的体细胞一旦脱离所在器官或组织的束缚成为离体状态时，在一定的营养、激素和外界条件作用下，就可能表现出全能性，而生长发育成为完整的植株。
（二）细胞的分化和形态建成 （三）植物的再生功能 四、植物组织培养的特点 （一）研究材料来源单一，无性系遗传信息相同 （二）试验经济，管理方便，工作效率高 （三）培养条件人为控制，可周年连续进行试验或生产 （四）生长快，周期短，繁殖率高 五、植物组织培养的应用 （一）优良品种的快速繁殖 （二）脱毒及脱毒苗的再繁育 （三）植物新品种的培育 （四）种质资源的保存和交换 （五）有用次生代谢产物的生产 III.作业 1.简述植物组织培养的概念和培养类型。 2.植物组织培养技术有哪些特点？ 3.植物组织培养在生产上有哪些方面的应用？ 4.通过学习，你对植物组织培养技术是怎样理解的？ 第二节植物组织培养厂房的设计与构建一、授课章节 第二节植物组织培养厂房的设计与构建。 二、学时安排 2学时。
植物组织培养复习要点
名词解释 1 植物组织培养：指通过无菌操作分离植物材料接种到培养基上，在人工控制的条件下进行培养，使其生长，分化并再生为完整植株的过程。 2 植物细胞全能性：指植物体的每个具有完整细胞核的细胞，都具有该植物的全部遗传信息和发育成完整植株的潜在能力。 3 接种：将灭菌后的植株体在超净工作台上进行分离，切割成所需的材料大小，并将其转移到培养基上的过程。 4 褐变：指在组织培养过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之变褐死亡的现象。 5 指示植物：指对某种病毒反应敏感，症状明显，用以鉴定病毒种类的植物，又称鉴别寄主。 6 愈伤组织：外植物细胞在外源急速的诱导下，经过脱分化形成愈伤组织的过程。 7 细胞培养：将从植物体或植物的培养物游离的细胞或细胞团，在人工培养基上进行培养的方法。 8 原生质体融合（体细胞杂交）：植物根茎叶等营养器官及其愈伤组织或悬浮细胞的原生质体进行融合。 9 超低温保存：指将植物的离体材料包括茎尖、分生组织、胚胎、花粉、愈伤组织、悬浮细胞、原生质体，经过一定的方法处理后在超低温（-196°液氮）条件下进行保存的方法。 10 玻璃化苗：在植物组织培养过程中，叶片和嫩梢呈透明或半透明水浸状的培养物。填空选择 1植物组织培养类型（培养工程的不同）：初代培养、继代培养、生根培养。 2植物组织培养的发展三个阶段：探索阶段、奠基阶段、迅速发展阶段。 3生物体发生三个基本现象：细胞分裂、生长、分化。 4无菌操作室定期消毒：采用甲醛和高锰酸钾产生的蒸汽熏蒸或安装紫外线灯光灯照射消毒。 5培养室一般光、温、湿条件范围：光照1000-6000lx，每天光照10-16h 温度20-30°之间湿度保持在70%-80%为好 6光照主要表现：光强光质以及光照时间。 7培养基成分：无机营养、有机营养、糖类、植物生长调节物质、琼脂、活性炭等， 8无机营养，微量，大量：无机营养又叫矿质营养，是组成植物生命体的主要元素。大量元素：主要有氮、磷、钾、钙、镁、硫等。微量元素：主要有铁、铜、锌、锰、氯、硼等。 9常用的物理灭菌方法：高温湿热灭菌、高温干热或灼烧灭菌、过滤除菌、射线灭菌。10无病毒苗：未被病毒感染，或经人工处理去除病毒的植物苗株。 11脱毒原理：第一、植物细胞全能性学说。第二、感染病毒植株的体内病毒分布的不均匀性。第三、植物体内可能存在“病毒钝化系统” 12花药和花粉：花药实际上是一种器官，花粉培养属器官培养。 13单细胞分离：机械分离、酶解分离、由组织培养物分离。 14单细胞培养方法：看护培养法、微室培养法、平板培养法 15细胞融合方式：自发融合和诱发融合。 16种质离体保存途径：常温保存、低温保存和超低温保存。 17低温保存不同方法：高渗透压保存法、生长抑制剂保存法、降低氧分压保存法、低气
植物组织培养实验报告
院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师范）年级13级学号17130208 姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期2016.3-6 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法； 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法； 4.了解组织培养的基本程序； 5.掌握接种的方法和材料的培养过程； 6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术； 7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体； 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态； 2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）； 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件 把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克／升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基，特点是：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性，因而在培养的过程中可维持较好的稳定性；营养丰富，在一般培养中无须额外加入复杂的有机成分；微量元素种类全，浓度高。这类培养基是目前使用最广泛的培养基。 6.生长调节物质 包括天然植物激素额人工激素类似物。植物激素是一类植物自身合成、同时对其生长发育具有重要调节作用的有机化合物。生长调节物质对于离题培养中的细胞分裂分化、器官形成和个体再生等均起着重要而明显的调节作用。一般来说，基本培养基只能保证培养物的生存，维持其最低的生理活动，而只有植物激素的配合使用，才能完成离体培养物中按照需要设计的各个调节环节。常用的植物组培激素种类主要有生长素类、细胞分裂素类、赤霉素。
植物组织培养
第六章植物的初级代谢和次级代谢 1.初级代谢产物：糖类、核酸、脂肪和蛋白质等光合作用的直接产物，由糖类等有机物次级代谢衍生出累的物质叫次级代谢产物。 2.次级代谢产物在植物生命中的作用：对植物的生长、繁衍、适应等生理过程具有重要作用；某些事植物生命活动中必需的；有些可影响生长发育；有些可以防御天敌保护自己；有些可以作为重要的药物。对人类的作用则是可以利用其育成新品种，利用基因工程原理改变次级代谢改良作用的品质和提高抗病、抗虫能力。 第七章细胞信号转导 1.细胞信号转导：指细胞偶联各种刺激信号与其引起的特定生理效应之间的一系列分子反应机制。 2.跨膜信号转导：信号与细胞表面的受体结合之后，通过受体将信号传递进入细胞内的过程。 3.受体：指能够特异性识别并结合信号、在细胞内放大和传递信号的物质。特征是特异性、高亲和力和可逆性。 4.钙调蛋白：一种耐热的球蛋白，等电点是4.0相对分子质量是17000，它是具有148个氨基酸的单链蛋白。 5.泛素蛋白酶体途径：其介导的蛋白降解是机体调节细胞内蛋白水平与功能的一个重要机制。负责执行这个调控过程的组成成分包括泛素及其启动酶系统和蛋白酶体系统。 1.什么叫信号转导？细胞信号转导包括哪些过程？ 答：信号转导是指细胞偶联各种刺激信号与其引起的特定生理效应之间的一系列分子反应机制。包括四个步骤：第一，信号分子与细胞表面受体的相结合；第二，跨膜信号转换；第三，在细胞内通过信号转导网络进行信号传递、放大和整合；第四，导致生理生化变化。 2.什么叫钙调蛋白？它有什么作用？ 答：钙调蛋白是一种耐热的球蛋白，具有148个氨基酸的单链多肽。两种方式起作用：第一，可以直接与靶酶结合，诱导构象变化而调节靶酶的活性；第二，与CA结合，形成活化态的CA/cam复合体，然后再与靶酶结合，将靶酶激活。 3.蛋白质可逆磷酸化在细胞信号转导中有什么作用？ 答：是生物体内一种普遍的翻译后修饰方式。细胞内第二信使如CA等往往通过调节细胞内多种蛋白激酶和蛋白磷酸酶，从而调节蛋白质的磷酸化和去磷酸化过程，进一步传递信号。 4.植物细胞内钙离子浓度变化是如何完成的？ 答：细胞壁是胞外钙库。质膜上的CA通道控制CA内流，而质膜上的CA泵负责将CA泵出细
植物组织培养试验
《植物组织培养技术》实验指导 实验一组培室设备参观及器皿的洗涤和灭菌 一、目的要求： 1．通过参观，了解组织培养室的几个主要组成部分和各部分应有的基本设备以及有关仪器的用途与功能。 2．通过实际操作，学会洗涤剂的配制和各种器皿的清洗和灭菌方法。 二、材料用具： 高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、双筒解剖镜、酸度测定仪、空调机、控温仪、百分之一与万分之一天平、电炉、玻璃器皿（试管、三角瓶、移液管、漏斗、烧杯、容量瓶、试剂瓶、量筒酒精灯），以及镊子、解剖刀、解剖针、手术剪，肥皂、洗衣粉、重铬酸钾、浓硫酸等。三、说明： 在进行各类具体的组培实验前，首先了解组培室的结构及主要设备的用途和性能是十分必要的，总体上的了解有利于以后各实验的进行以及正确的使用各种仪器和设备。 植物组织培养是一项十分细致的工作，为了保证植物外植体不受污染，第一关就是要对各种器皿进行清洗和消毒，使它们保持无菌状态，
做这些工作同样有一套科学的方法和需要熟练的技巧，因此每个学生必须学好这套基本功。 四、方法和步骤： 首先在老师带领下参观组培室，并听取讲解，然后配制洗液，称取工业用重铬酸钾40克，溶解在500ml在水中，然后徐徐加入450ml 粗制浓硫酸（或废硫酸）配好的溶液呈红色，铬酸洗液是一种强氧化剂，去污能力强，但玻璃器皿上沾有油脂、凡士林、石蜡等则用此液无效，铬酸洗液可反复使用，直到溶液呈青褐色为止。此溶液腐蚀性强，洗涤时需注意。 每人清洗部分玻璃器皿，方法：清水洗净→泡入洗衣粉水溶液中进行洗刷→清水反复冲洗→蒸馏水淋一遍→烘干备用。 然后清洗部分较脏的玻璃器皿，方法：采用先碱后酸，即用洗衣粉洗刷后冲洗干净→晾干→侵入酪酸洗液，浸泡时间视器皿的肮脏程度而定→清水反复冲洗干净→蒸馏水淋洗一遍→烘干备用。 带有石蜡或胶布的器皿：先将其除去，再用常规洗涤，石蜡用水煮沸数次即可去掉，胶布粘着物则需用洗衣粉液煮沸数小时，再用水冲洗，凉干后浸入洗液，以后的步骤同前。 对器皿和用具进行高压灭菌，即用手提式高压灭菌锅，在1.1个大气压下保持15~20分钟。解剖刀、手术剪、解剖针、镊子等用具在接
植物组织培养考试重点
第一章 1植物离体培养：通过无菌操作，把植物细胞或其他类型的外植体，接种于人工配置的培养基上，给予人工控制的环境条件，使培养或操作对象表现生长发育等生命活动。 2细胞全能型：细胞具有该有机体的全部遗传信息，并具有形成有机体所有细胞类型的能力。3园艺植物生物技术的应用领域一在细胞工程的应用；1良种繁育，使繁殖系数大，周年生产，繁殖速度快，苗木整齐一致。2离体种质保存，克服常规保存方法占用大量土地或消耗大量人力物力等缺点，并方便种质资源的地区和国际交换，避免病虫的人为传播。3细胞工程育种，培育园艺新品种，克服远缘杂交育种障碍。4有用物质的生产，大规模的细胞发酵罐培养生产药物，食品，调料香精等日用化工品。二基因工程运用：作为园艺作物改良的有效手段之一。三：分子标记运用，加快育种速度，降低选育种的成本，有效提高品种改良的成效。四：在植物学基础研究上的应用：进行遗传多样性的分析，系谱分析，基因表达及调控的研究等。 4细胞脱分化：指外植体中已分化的细胞，在切割损伤和培养物内外因素作用下，逐渐丧失其原有的分化了的结构和功能，合成代谢变得旺盛，细胞壁由厚变薄，细胞内部结构发生变化，细胞高度液泡化，回复到分生组织状态，形成无组织的细胞团或愈伤组织的过程。 5器官分化：指培养条件下的组织或细胞团分化形成不定根，不定芽等器官的过程。 6胚胎发生：指从合子到成熟胚的发生发育过程，所形成的的胚称为合子胚。 7.离体胚胎发生和器官发生有何异同：自然条件下的器官分化是受植物体本身的自主调节控制，而在离体培养条件下，器官分化则是在人工辅助条件下完成的，有3个生长阶段，第一，外植体经过诱导形成愈伤组织。第二，形成生长中心（也成为拟分生组织）。第三，器官原基及器官形成、体细胞胚是离体培养的产物，体细胞胚起源于非合子细胞，体细胞经历了胚胎发育过程，与器官发生形成个体的途径不同。 第二章 外植体：用于接种培养的各种离体的植物材料，包括胚胎材料，各种器官，组织，细胞，原生质体等。 1.外植体的类型茎尖（最常用的材料。生长速度快，繁殖率高，不易产生遗传变异。）节间部（新梢节间容易灭菌，脱分化再分化能力较强）叶和叶柄（取材容易，新出叶片杂菌较少，实验操作方便。）鳞片（水仙、百合、葱、蒜、风信子经常以鳞片为材料。）其他（种子、根、块茎、块根、花球、花粉） 2.外植体的选择原则 1.再生能力强 2.遗传稳定性好 3.外植体来源丰富 4. 外植体灭菌容易 3.外植体的选择依据 1.植物的种类和基因型 2. 外植体来源 3.外植体大小 4.取材季节 5.外植体的生理状态和发育年龄 4.外植体的预处理及消毒 1.减少带菌的处理（在长期晴朗的天气条件下取材、选择信么萌发的幼芽或嫩梢、选择表面比较光滑的材料、对母株定期喷洒杀菌药剂、用纸袋或薄膜袋将枝条封套保护待其萌发新芽后取材、在室内采用水插粗芽后取材，或是在温室植株上取材等，都可以大大减少处事戴菌量。对一些戴菌量较大的植物，如茎尖，从室外取回经剪截处理后，置于烧杯内，杯口用纱布封好，置于水龙头下流水冲洗过夜） 2.消毒剂的杀伤力和材料对消毒剂的耐受力（不同消毒剂种类杀伤力不同，不同的外植体材料对同种消毒剂的耐受力也不同。选择消毒剂时，尽可能选用对微生物消灭作用强烈而对植物材料比较安全的种类。在选择外植体材料时，则应优先考虑体积较大戴菌量较少耐受力较强的类型。对于
植物组织培养技术
植物组织培养技术 植物组织培养是70 年代快速发展并趋成熟的现代生物技术，是在含有营养物质及植物生长调节物质的培养基中离体培养植物组织（器官或细胞）的技术。它的理论依据是植物细胞的全能性，即植物体的每一个细胞都有分化成一个完整植株的潜在能力。该技术在品种选育、名特优品种的快速繁殖、自然资源的保护、品种质量的提高、濒危植物种质保存等诸方面都表现出巨大的应用前景，取得了明显的经济效益。 组织培养前景广阔植物组织培养技术一诞生就表现了强大的生命力和美好的前景。它在细胞学、遗传学、农学、生理学、生物化学等学科的基础理论研究中，成了一种常用的生物学技术; 在实际应用中也发挥了巨大作用，取得了显着的经济效益和社会效益。 育种：通过组织培养技术，结合诱变育种技术，成功地培育出许多优良品种。如抗黄化叶病的大麦品种; 培育出脱病毒的马铃薯、甘蔗品种，使马铃薯产量增加十多倍;选育出早熟（比母本提早15 天）、优质（含糖量9.5%）、高产（单果平均重106 克）的京早三号桃（中科院植物所培育）等等，这些例子不胜枚举。 快速繁殖：应用组织培养技术可使某一个优良品种得到快速繁殖，可在一年内从一个芽或一张叶片，培养与繁殖成几十万或上百万株小苗，使得该优良品种很快得以推广。如浙江省金华婺东葡萄良品场，1990年将日本引进的葡萄品种栽培成功后，我们通过快速繁殖，使每月的增殖系数达到6?9,可使一个芽在一年之内产生100 万个芽。快繁技术在花
卉、果树等经济植物的优良品种繁育中，取得了良好的经济效益。 名、特、优、稀植物品种的保存与繁殖：许多名贵植物（如兰花）由于繁殖慢或困难,数量不多; 而众多的野生植物（如花卉、药材）由于人们过度的采伐,变成濒危植物。这些品种的保存与繁殖越来越显得重要与紧迫。应用组织培养技术, 不仅可以在实验室条件下保存种质,还可以进行工业化生产, 大量繁殖来满足人类生活的需求。 无土栽培：现代正在快速推广的无土栽培技术, 就是建立在组织培养的基础理论之上的, 特别是无土栽培中的营养液成分, 与组织培养的培养基配制基本相似。无土栽培以其高产、低成本、低污染与低有害物质的残留而倍受人们的欢迎。 快速繁殖 植物快速繁殖技术自60 年代开始用于兰花生产以来已得到快速发展。开始时主要应用于花卉生产, 现逐渐应用于蔬菜、果树等其他园艺作物, 近年来又应用于造林树种的繁育上。现已有数百种植物可通过组织培养进行快速繁殖, 并进行了商品化的大规模生产。其中包括用于切花生产的香石竹、唐菖蒲、非洲菊、花烛、百合、菊花等; 还有兰花、非洲紫罗兰、大岸桐、杜鹃和某些蕨类植物和观叶植物; 以及草莓、芦笋、香蕉、葡萄、桉树等经济作物。在很多国家已成为一种新兴的产业。 该技术的主要优点有： ①所需要的植物材料少；②繁殖速度快，不管从总体上还是单位面积上，其繁殖速度都大大快于常规方法; ③如结合茎尖培养等脱病毒技术，可改良作物品种。
植物组织培养知识点归纳
第一章 1、植物组织培养：是指在离体条件下，利用人工培养基对植物的器官、组织、细胞、原 生质体等进行培养，使其长成完整植株 2、外植体：在植物组织培养中，由活体（in vivo）植物上提取下来的、接种在培养基上的 无菌细胞、组织、器官等均称为外植体。 3、愈伤组织：指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。 4、应用 一、农业上的应用 1. 种苗快速繁殖(rapid propagation) 2.无病毒苗(virus free)的培养 3.在育种上的应用(breeding) （1）倍性育种，缩短育种年限，杂种优势明显； （2）克服远缘杂交的不亲合性和不孕性（胚培养）； （3）保存种质 （4）创造变异 二、在遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等方面的应用。用于基因工程技术创造植物新种质。用于植物生长发育理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等。 三、利用组织培养材料作为植物生物反应器 第二章 1、细胞全能性（Totipotency）：指任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成一个完整植 株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。 2、细胞分化（cell differentiation）：指导致细胞形成不同结构，引起功能或潜在的发育方式 改变的过程。 3、脱分化（Dedifferentiation）：指离体条件下生长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构 和功能而恢复分生状态，形成无组织结构细胞团或愈伤组织 的过程。 4、再分化（Redifferentiation）：指脱分化的细胞重新恢复分化能力，形成具有特定结构和功 能的细胞、组织、器官甚至植株的过程。 5、植物组织培养中常遇到的问题以及解决措施 一、污染及防治： 1、真菌污染后，如果已形成孢子，则必须经高压灭菌后扔掉。但若是细菌污染，只 要及时发现，将材料上部未感菌的部分剪下转接，材料仍可使用。 2、用抗生素等杀菌药剂的处理，会影响植物材料正常生长。 二、褐变及防止 （1）选择合适的外植体