猕猴桃溃疡病防治药剂室内筛选及田间药效试验_龙友华

　[收稿日期]　2010-07-18;2010-09-06修回

　[基金项目]　贵州省科技厅农业攻关项目“修文六广河牌猕猴桃产业化关键技术开发与示范”[黔科合N Y 字(2009)3022];贵阳市科技局

农业科技攻关计划项目“修文县六广河牌猕猴桃产业化关键技术开发与应用”[筑科农合同字第(2009)2-007];修文县科技局农业项目“修文县猕猴桃病虫害无公害防治技术研究”[修科合同字(2007)第1号]

　[作者简介]　龙友华(1970-),男,副教授,从事农产品质量与安全及有害生物化学防治技术研究。E -m a i l :g z l y h 126@126.c o m

植物保护·土壤肥料·微生物

[文章编号]1001-3601(2010)10-0661-0084-03

猕猴桃溃疡病防治药剂室内筛选及田间药效试验

龙友华1

,夏锦书

(1.贵州大学农学院,贵州贵阳550025;2.贵州省黔南民族职业技术学院,贵州都匀558000)

[摘　要]为筛选猕猴桃溃疡病的有效防治药剂,采用室内抑菌试验和田间病斑涂抹试验研究了6种杀菌剂对猕猴桃溃疡病病菌的毒力和田间防效。结果表明:90%链·土霉素抑菌效果较好,E C 50为40.20m g /L ,其次是硫酸链霉素,E C 50为64.75m g /L ;3%中生菌素和36%三氯异氰尿酸E C 50分别为279.20m g /L 和368.65m g /L ;0.1亿c f u /g 多粘类芽孢杆菌细粒剂和25%叶枯唑抑菌效果较差,E C 50分别为846.32m g /L 和947.77m g /L 。田间病斑涂抹试验中,90%链·土霉素可湿性粉剂对猕猴桃溃疡病具有较好的防治效果,病斑愈合率达82.47%,40%硫酸链霉素可溶性粉剂和3%中生菌素可湿性粉剂防效分别为78.73%和75.01%。

[关键词]猕猴桃;溃疡病;杀菌剂;毒力;防效[中图分类号]S 436.634.1[文献标识码]A

I n d o o r S c r e e n i n ga n d F i e l d T r i a l o f B a c t e r i c i d e s a g a i n s t K i w i f r u i t C a n k e r

L O N GY o u -h u a 1

,X I AJ i n -s h u

(1.C o l l e g e o f A g r i c u l t u r e ,G u i z h o uU n i v e r s i t y ,G u i y a n g ,G u i z h o u 550025;2.Q i a n n a nN a t i o n a l i t y V o c a t i o n a l

a n dT e c h n i c a l C o l l e g e ,D u y u n ,G u i z h o u 558000,C h i n a )

A b s t r a c t :T h e t o x i c i t y a n d f i e l dc o n t r o l e f f e c t o f 6b a c t e r i c i d e s a g a i n s t k i w i f r u i t c a n k e r w e r e t e s t e db yt h e

i n d o o r b a c t e r i o s t a s i s t e s t a n d f i e l d s p o t s m e a r i n g t r i a l t o s c r e e n e f f e c t i v e b a c t e r i c i d e s t o c o n t r o l k i w i f r u i t c a n k e r .T h e r e s u l t s s h o w e dt h a t t h ec o n t r o l e f f e c t o f 90%S t r e p t o m y c i n -O x y t e t r a c y c l i n eW Pw a s t h eb e s t ,f o l l o w e db y 40%S t r e p t o m y c i n s u l p h a t e W P ,E C 50o f S t r e p t o m y c i n -O x y t e t r a c y c l i n e W P ,S t r e p t o m y c i n s u l p h a t e W P ,3%Z h o n g s h e n g m y c i n W P ,36%T r i c h l o r o i s o c y a n u r i ca c i dWP ,t e nm i l l i o nc f u /g P a e n i b a c i l l u s p o l y m y x aa n d 25%B i s m e r t h l a z o l w a s 40.20m g /L ,64.75m g /L ,279.20m g /L ,368.65m g /L ,846.32m g /La n d 947.77m g /L r e s p e c t i v e l y .T h e s p o t h e a l i n g r a t e o f 90%S t r e p t o m y c i n -O x y t e t r a c y c l i n e W P ,40%S t r e p t o m y c i n s u l p h a t e W P a n d 3%Z h o n g s h e n g m y c i n W P a g a i n s t k i w i f r u i t c a n k e r w a s 82.47%,78.73%a n d 75.01%s e p a r a t e l y i n t h e f i e l d s p o t s m e a r i n g t r i a l .

K e y w o r d s :k i w i f r u i t ;c a n k e r ;b a c t e r i c i d e ;t o x i c i t y ;c o n t r o l e f f e c t 猕猴桃溃疡病是由细菌(P s e u d o m o n a s s y r i n g a e P Va c t i n i d i a )引起的一种毁灭性病害,国外广泛分布于日本、美国、新西兰和韩国等,我国于1985年在

湖南东山峰农场首次发现[1-2]

。目前,该病在我国湖南、福建、四川、陕西和安徽等地均有发生,被列为全国森林植物检疫对象,国内外学者对猕猴桃溃疡病

作了大量研究。李瑶等[3-4]

研究了猕猴桃溃疡病的流行因子、猕猴桃中两种同工酶与抗病性的关系,李

庚飞等[5]

研究了猕猴桃体内酚的含量与溃疡病的

抗性关系,李淼等[6]

对猕猴桃品种枝条组织与抗溃

疡病关系作了初步研究,宋晓斌等[7]

研究了猕猴桃

溃疡病的生物防治技术,张锋等[8]

研究了猕猴桃溃疡病化学药剂的防治技术。但链·土霉素、中生菌素防治猕猴桃溃疡病鲜有报道。贵州省修文猕猴桃产区个别果园溃疡病发生严重,其发生面积逐年扩大,危害日益严重,现已从修文久长镇蔓延至龙场镇猕猴桃产区,在谷堡乡猕猴桃主产区已有零星发生,

对修文猕猴桃的生产造成了严重的威胁。为做好修文猕猴桃溃疡病的防治工作,笔者于2007-2010年对贵州修文猕猴桃溃疡病进行了调查,并进行了防治药剂的室内筛选和田间防治试验研究,以期为修文猕猴桃溃疡病的防治提供技术依据。

1材料与方法

1.1供试材料1.1.1病原菌猕猴桃溃疡病病原菌(P s e u d o -m o n a s s y r i n g a e P Va c t i n i d i a e )从修文县唐人农庄猕猴桃溃疡病重发区采样分离获得,经分离纯化后保存于密闭的无菌蒸馏水中,室温保存。1.1.2供试药剂40%硫酸链霉素可溶性粉剂,华北制药集团爱诺有限公司;3%中生菌素可湿性粉剂,东莞市瑞德丰生物科技有限公司;36%三氯异氰尿酸可湿性粉剂,湖南省海洋生物工程有限公司;25%叶枯唑(噻枯唑)可湿性粉剂,青岛瀚生生物科

　贵州农业科学　2010,38(10):84～86　G u i z h o u A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s

技股份有限公司;0.1亿c f u/g多粘类芽孢杆菌细粒剂(康地蕾得),上海泽元海洋生物技术有限公司; 90%链·土霉素可湿性粉剂,石家庄市三农化工有限公司。

1.1.3培养基配方N A培养基:牛肉膏3.0g,蛋白胨10.0g,N a C l5.0g,琼脂18.0g,p H6.8～7.0,培养基加蒸馏水定容至1000m L,121℃湿热灭菌20m i n。

1.2室内防治药剂筛选

1.2.1猕猴桃溃疡病菌分离纯化将发病猕猴桃枝条表面用清水洗净晾干,再用85%的酒精擦拭,迅速过火烧尽酒精,用消过毒的解剖刀刮去表面皮层,刮其褐色组织置于无菌培养皿中,滴入2滴无菌水,用无菌玻棒捣碎组织,静置5m i n,用玻棒取菌液在N A培养基上划线,28℃培养48h。待培养基上长出菌落后,挑取小圆形,稍隆起,白色稀汤状,有光泽菌落于N A培养基上培养,纯化3次,然后再挑取单一菌落,置于装有10m L无菌水的试管中,于室温中保存。

1.2.2菌悬液的制备用灭菌的接种环蘸取含有猕猴桃溃疡病菌的试液,在N A培养基上划线,于28℃恒温箱中培养。待猕猴桃溃疡病菌在N A培养基上活化后,取病原菌于3m L无菌水中配制成病菌原液,取1m L菌原液再用无菌水按10、100、1000、…等倍稀释涂板,28℃培养48h,根据平板上长出的菌落数推算菌原液浓度。根据菌原液浓度,制备菌悬液,使1m L菌悬液涂板后长出的菌落数为100个左右。

1.2.3药剂室内毒力测定将各供试药剂用灭菌水配制相应浓度的含药培养基,用500μL可调微量移液器取1m L配好的药液于9c m的培养皿中,并与9m L约45℃的N A培养基混匀。待其凝固后,用500μL可调微量移液器取500μL的病原菌悬液于配好的含药培养基中,28℃恒温培养箱中培养48h,肉眼观察统计每个处理的菌落数。3次重复,以无菌水代替药剂处理为对照,所得结果用农药室内生物测定数据处理系统软件计算,求出各药剂的毒力回归式和E C50。

抑菌率/%=[(对照皿中菌落数-处理皿中菌落数)/对照皿中菌落数]×100

1.3田间病斑涂抹防治试验

1.3.1试验概况试验于2009年3月17日在修文县唐人农庄猕猴桃种植基地进行。试验地海拔1300m,历年平均气温13.21℃,积温≥3838.6℃,降雨量1180m m,无霜期258d,属斜坡山地,土壤为黄壤粘土。供试品种为米良1号,树龄10年,管理水平中等,猕猴桃溃疡病发生严重。

1.3.2田间试验设计试验设A,3%中生菌素可湿性粉剂25倍液;B,40%硫酸链霉素可溶性粉剂50倍液;C,36%三氯异氰尿酸可湿性粉剂25倍液; D,25%叶枯唑可湿性粉剂20倍液;E,0.1亿c f u/g 多粘类芽孢杆菌细粒剂20倍液;F,90%链·土霉素可湿性粉剂50倍液;C K,清水对照。共7个处理,4次重复,每小区8株猕猴桃树,随机区组排列,试验时刮除病斑后用刷子蘸药液涂抹病斑。

1.3.3调查统计方法试验前调查每小区8株树上所有病斑,并挂牌进行标记,涂药后3个月调查病斑愈合率,以病斑表皮下产生青色愈伤组织且病斑以上枝条不枯死作为愈合病斑,以病斑愈合率计算防治效果。计算公式为:

病斑愈合率/%=(防治后病斑愈合数/防治前病斑总数)×100

防治效果/%=[(处理区病斑愈合率-对照区病斑愈合率)/(1-对照区病斑愈合率)]×100

2结果与分析

2.16种杀菌剂对猕猴桃溃疡病病菌的毒力效果

从表1看出,90%链·土霉素可湿性粉剂对猕猴桃溃疡病菌的抑制效果较好,E C50为40.20m g/L;其次是40%硫酸链霉素可溶性粉剂,E C50为64.75m g/L;3%中生菌素可湿性粉剂和36%三氯异氰尿酸可湿性粉剂的E C50分别为279.20m g/L和368.65m g/L;0.1亿c f u/g多粘类芽孢杆菌细粒剂和25%叶枯唑可湿性粉剂对猕猴桃溃疡病菌的抑制效果较差,E C50分别为846.32m g/L和947.77m g/L。

2.26种杀菌剂对猕猴桃溃疡病的田间防治效果

田间试验结果(表2)表明,90%链·土霉素可湿性粉剂50倍液涂抹对猕猴桃防治较好,涂药后3个月防效达81.84%,与农用链霉素差异不显著,与其他药剂差异达极显著水平,40%硫酸链霉素可溶性粉剂50倍液及3%中生菌素可湿性粉剂25倍液防效均达75%以上,其余药剂防效较差,均低于60%。

表16种杀菌剂对猕猴桃溃疡病病菌的毒力

T a b l e1　T h e t o x i c i t y o f6b a c t e r i c i d e s a g a i n s t k i w i f r u i t c a n k e r

供试药剂B a c t e r i c i d e

毒力回归式

T o x i c i t y r e g r e s s i o ne q u a t i o n

E C

(m g/L)

田间药效试验设计方案

田间药效试验设计方案进行农药田间药效试验之前，必须制定试验计划和方案，明确试验的目的、要求、方法以及各项技术措施的规格要求，以便试验的各项工作按计划进行，也便于在进行过程中检查执行情况，保证试验任务的完成。田间试验设计的主要目的是减少试验误差，提高试验的精确度，使试验人员能从试验结果中获得无偏差的处理平均值及试验误差的估计值，从而能进行正确而有效的比较。在药效试验中要减少试验误差，就必须对试验误差来源，通过试验设计加以克服。在试验过程中如何减少试验误差应注意以下几个方而： 1?试验地的选择选择有代表性的试验地是使土壤差异减少至最少限度的一个重要措施，对提高试验准确度有很大作用。选择试验地要考虑到： 1.1、试验地的地势应平坦，肥力水平均匀一致。 2.2、试验地的作物生长整齐、树势一致，而且防治对象常年发生较重且为害程度比较均匀，且每小区的害虫虫口密度和病害的发病情况大致相同。特别是杀菌剂试验，要选择高度感染供试对象病害的品种进行试验。 2.3、试验地的田间管理水平相对一致，并符合当地的实际情况。 1.4、试验地应选择离房屋、道路、水塘稍远的开阔农田，以保证人、畜安全和免受外来因素的偶然影响。 2.5、试验地周围最好种植相同的作物，以免试验地孤立而易遭受其它因素为害。 2 ?试验药剂处理供试农药和对照农药的剂型和含量要合乎规格，无变质、失效现象，并有详细的标签和说明书，标明生产厂家、出厂日期等。评价一种农药产品不同剂量的药效试验，至少要有供试产品的3个浓度梯度、1个常规标准农药的常用浓度和2个空白对照等5个处理。如供试的农药产

品是混配制剂，而且各个单剂己登记过，除设混剂本身3个浓度梯度和1个空白对照外，还应设混剂中各个单剂的常规处理浓度，共6个处理。 3?设置重复次数试验设置重复次数越多，试验误差越少。但在实际应用中，并不是重复次数越多就越好。因为多于一定的重复次数，误差的减少很慢，而人力、物力的花费也大大增加，是不值得的。重复次数的多少，一般应根据试验所要求的精确度、试验地土壤差异的大小、供试作物的数量、试验地而积、小区的大小等具体决定。对试验精确度要求高、试验地土壤差异大、小区面积小的试验，重复次数可多些，否则可少些。通常情况下，要求把试验误差的自由度控制在10以上，即（处理数-2）* （重复数-2）>10o 一般每个处理的重复次数以3-5次为宜。大区试验和大面积示范可不设重复。 4?釆用随机区组排列为使各种偶然因素作用于每小区机会均等，那么在每重复内设置的各种处理只有用“随机排列”才能符合这种要求，反映实际误差。例如某种药剂药效好坏究竟是由于其所在小区病、虫密度不均匀，还是药剂木身的原因，就不容易判别了。为了解决这一问题，可将试验地按重复次数划分为数量相同的区组（即重复），再将每一区组按处理数目划分小区（包含药剂处理和对照区），然后将每种药剂在区组中随机排列，即每种药剂在区组中仅出现一次。用随机区组和重复组合，试验就能提供无偏的试验误差估计值。 5 ?小区面积与形状小区面积的大小和形状对于减少土壤差异的影响和提高试验的精确度是相当重要的。小区面积的大小，应根据土壤条件、作物种类、病虫草害的生物学特性和试验目的而定。一般要求： 5.2、差异较大的田块，小区面积宜大一些。 5.2、凡植株高大、株行距较大的作物，单位面积上株数较少的作物，种植密度小的作物小区而积可大些，反之可小些。 5.3、活动性强的害虫，小区面积宜大些；活动性较差的如蜗虫

实验一除草剂田间药效试验

实验一除草剂田间药效试验本实验方法适用于除草剂防治果园及非耕地杂草的登记用田间药效小区试验及药效评价。一、实验目的学习除草剂田间药效试验的基本过程，掌握除草剂田间试验设计和评价药效的方法。二、实验材料与仪器 1．实验材料供试作物：果树品种和砧木在当地应具代表性的常规品种，如柑桔等；试验对象：各种有代表性的阔叶杂草、禾本科杂草和莎草等种群；供试药剂：试验药剂10%草甘膦SL；对照药剂： 2．实验仪器喷雾器，水桶，移液管，量筒，烧杯，天平等。三、实验内容与方法 1．田间试验设计本试验设试验药剂10%草甘膦SL(2250 g a.i./hm2)、中(1500 g a.i./hm2)、低(975 g a.i./hm2)3个剂量，对照药剂20%百草枯SL 750 g a.i./hm2，另设空白对照共5个处理，每处理4次重复，小区面积30 m2，每小区间50 cm隔离带，随机区组排列。 2．施药方法采用背负式工农-16型喷雾器(操作压力0.3～0.4 MP a，喷孔口径0.8 mm)施药，药液用量为675 L/hm2。施药选择天气晴朗时进行，确保用药后24 h不遇降水。记录用药时的日期和时间，以及杂草和果树两者的生长状态(萌芽、生育期)。 3．调查方法用绝对值法或估计值法记录小区的杂草种群量，如杂草种类、杂草株数、覆盖度或杂草重量等，并详细地描述造成杂草伤害的症状(如生长抑制、失绿、畸形等)，以准确说明药剂作用方式。 (1) 绝对值调查法调查每种杂草总株数或重量，对整个小区进行调查或在每个小区随机选择3～4个点，每点0.25～1 m2进行抽样调查。 (2) 估计值调查法每个药剂处理区同邻近的空白对照区或对照带进行比较，估计相对杂草种群量，包括杂草群落总体和单种杂草，可用杂草数量、覆盖度、高度和茁壮长势(例如实际的杂草量)等指标，其结果可用简单的百分比表示(0为无草，100 %为与空白对照区杂草同等)，也可等量换算成杂草防除百分比效果(0为无防治效果，100%为杂草全部防治)，还应记录空白对照区或对照带的杂草株数覆盖度的绝对值。为了克服准确估计百分比和使用齐次方差的困难，可以采用下列分级标准进行调查： 1 级：无草； 2 级：相当于空白对照区的0～2.5%； 3 级：相当于空白对照区的2.6%～5%； 4 级：相当于空白对照区的5.1%～l0%； 5 级：相当于空白对照区的10.1%～15%； 6 级，相当于空白对照区的15.1%～25%； 7 级：相当于空白对照区的25.1%～35%；

加压筛选试剂

MTX加压方法简介诞生于70年代末的基因工程药物因其具有其他药物无法比拟的优点，己迅速成为制药工业中一个引人注目的领域。1995年美国基因工程药物销售额约为48亿美元，1997年超过60亿美元，年增长率达20%以上。各国政府将其视为新的经济增长热点而给予了大力支持。基因工程药物研发的主要环节包括：基因克隆和工程菌构造；重组细胞培养；目的产物分离纯化等。针对以上主要环节，研究人员正致力于高效表达、培养工艺及下游分离纯化等方面的研究。目前已有多种表达系统应用于表达具有医疗价值的蛋白质，如大肠杆菌、酵母、昆虫杆状病毒系统、哺乳动物细胞等表达系统。大多数药用蛋白都是糖蛋白，中国仓鼠卵巢细胞（CHO）是目前重组糖基蛋白生产的首选体系，已有越来越多的药用蛋白在其中获得了高效表达，部分药物已投放市场，例如EPO、G-CSF、组织型纤溶酶原激活剂t-PA、CD受体、单克隆抗体、乙型肝炎表面抗原、白介素、干扰素等。影响重组蛋白在CHO细胞中表达的因素很多，层次也很广泛，涉及CHO细胞表达体系、表达载体系统、外源基因、表达细胞株的加压扩增与筛选、细胞大规模培养等。转录是真核基因表达调节的基本控制点，研究表明：所有提高转录水平的策略主要通过载体构建、基因转染方法和选择不同标记来调控；CHO细胞表达体系和外源基因影响mRNA的翻译；表达细胞株的加压扩增，目的在于扩增外源基因的拷贝数，从而提高表达量；筛选表达细胞株，可获得稳定的、高表达的单克隆细胞株；大规模细胞培养中，血清、溶氧、二氧化碳、氨、乳酸的浓度以及剪切力影响细胞的生长、外源蛋白的表达和纯化。深入了解和灵活运用各种影响因素，有助于重组蛋白在CHO细胞中的高效表达。（一）CHO表达系统 1. CHO细胞表达体系常用的CHO细胞系有两种：CHO和CHO-dhfr-。CHO表达系统是目前应用最广泛的真核表达系统之一，与其它表达系统相比，它具有许多优点：准确的转录后修饰功能，表达的糖基化药物蛋白在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近天然蛋白分子；表达产物胞外分泌，便于分离纯化；具有重组基因的高效扩增和表达能力；贴壁生长，有较高的耐受剪切力和渗透压能力，可进行悬浮培养或在无血清培养基中达到高密度，培养体积能达到1000L以上；CHO细胞属于成纤维细胞，很少分泌内源蛋白，利于外源蛋白的分离纯化。改造CHO细胞，可更好地表达外源蛋白。为减少大规模细胞培养过程中凋亡的发生，将bcl-2基因（细胞凋亡抑制基因）导入细胞，bcl-2基因的过量表达能抑制Gln或氧缺乏引起的细胞凋亡，减少细胞特定营养成分的消耗，提高细胞密度和目的蛋白产量。向CHO细胞中导入p21、p27基因，可使细胞G1期延长（细胞静止），改造后细胞活力正常，营养成分消耗和代谢毒物含量有效降低，从而减少细胞凋亡、死亡，外源蛋白表达量提高，产品成本降低。 2. 载体系统借助真核基因表达调控的理论，可将较强的顺式作用元件集中到一个载体中，使其方便高效地表达外源基因。目前，已经构建了许多真核表达载体，它们包含适当的顺式作用元件和选择标记。顺式作用元件主要有启动子—增强子元件、转录剪切和Poly A信号等；CHO 细胞表达载体中主要有两类选择标记：非扩增基因和共扩增基因。

除草剂田间药效试验

除草剂田间小区药效试验施药技术探讨田间药效试验是我国农药登记管理工作重要内容之一，是制定农药产品标签的重要技术依据。除草剂田间小区药效试验对施药技术的要求相对较高，这需要综合考虑多方面因素的影响，如对喷雾设备的要求、施药技术人员的操作水平、施药时的天气状况等。小区药效试验的技术关键是施药方式方法，因为不同的施药方法在作物上的药液沉积量和药剂分布状况有很大差异，必然会对药效产生重大影响，从而会使药效的评估发生明显偏差（屠豫钦，1993）。除草剂田间小区药效试验施药技术的问题 1施药设备不完善田间小区药效试验主要采用背负式手动喷雾器，这也是目前我国占绝对地位的喷雾机械。据统计，1996年，我国共有喷药器械484.7万架，其中80%以上是小型背负式喷雾器（傅泽田，祁力钧，王秀，2002）。受国内对喷雾器生产和开发情况的影响，手动喷雾器几十年来一直变化不大，主要是以工农-16型为主，尤其是雾化部件也只有一种切向涡流芯喷头，这种情况造成了许多问题（袁会珠，齐淑华，杨代斌，1998；屠豫钦，2004）使用者面临最普遍的问题是喷雾器的质量不过关，使用中存在着跑冒滴漏的现象，另外喷嘴型号不全。最近两年，北京、山东、河北都有新型的手动背负式喷雾器问世，在加工质量和选材方面有所改善，但可供选择的喷嘴类型仍然较少。此外，这些改进后的背负式手动喷雾器普遍不具有压力表和稳压器，只能通过手动摇杆来控制喷雾压力，这样不能把压力很好的控制在某一具体的数值，使得输出的流量不稳定。 2喷嘴的选择不当国内手动背负式喷雾器大都配有空心或实心锥雾喷嘴，也有配扇形喷嘴的。但问题是可供选择的喷嘴型号范围较小，而有些使用者对农药应用技术的了解有限，往往是不论针对作物的何种生长时期，用何种除草剂，自始至终就用同一个喷嘴。喷洒苗前除草剂为尽量避免飘移，可选择流量大一点的喷嘴，苗后除草剂的喷洒要考虑药液的均匀度和沉积率，可选择流量小的喷嘴。 3不重视施药时的气象条件药剂能否很好的沉积，与施药时的天气情况密不可分，包括施药时的温度、湿度和风速等。当施药时温度超过27℃时，易引起药害或造成飘移、挥发而降低药效，温度低于15℃时也易产生药害（王险峰，关成宏，2001）。白天有太阳直射时，湿度较低，笔者曾在施药季节于哈尔滨市郊做过测试，在上午9点30分和下午4点时田间实际相对湿度只有20%左右，特别不利于除草剂的喷洒。风速过大容易产生雾滴飘移，既不能保证正在喷洒小区的药效，而且飘移的药液有可能落到邻近的小区内，这对小区试验药效评价尤为不利。 4行走速度和喷液量的控制不严格小区试验是要求将少量甚至微量的农药准确无误地施用到单位面积小区上。人们通常在施药前计算好了单位面积小区所需的药量和喷液量，但对行走速度没有在田间进行实际测量（且每次施药前都必须重新测量，即使是长期的同一施药者），造成了药液的剩余或缺少，这些都影响药效的评估。也有施药者为了能使得药液分布均匀，放慢了行走速度，这样喷液量也就加大了。而过去传统的大容量喷雾往往往往造成了药液滴淌（draining）和滚落（running off），沉积率较差（屠豫钦，1993；袁会珠，1999）。喷液量并非越大越好，每公顷200L即可满足农艺要求（袁会珠，1999；王险峰，2002），加大喷液量也不可能解决干旱的问题。施药技术规范化 “硬件”的选择小区药效试验要尽量选择质量好、精确度高的喷雾器，最好具有稳压装置或带有压力表，压力可调最好，而要避免选择那些在药液少量的情况下压力不足、喷不彻底的手动喷雾

农药田间药效试验报告

田间试验批准证书号：协议备案号：试验样品封样编号：农药田间药效试验报告（［单击此处键入试验年度］）农药类别：杀虫剂试验名称：委托单位：承担单位：试验地点：总负责人：［签名] 技术负责人：［签名] 参加人员：

报告完成日期：地址：电话：传真：邮编： E-mail：

田间药效试验报告摘要试验名称：试验作物：防治对象：供试药剂：施药方法及用水量（拌土量）：试验结果：

适宜施药时期和用量：使用方法：安全性：

［单击此处键入试验名称］田间药效试验报告 1 试验目的［单击此处键入试验目的］ 2 试验条件 2.1 试验对象、作物和品种的选择［单击此处键入试验对象和拉丁名］［单击此处键入试验作物，品种名称］ 2.2 环境或设施栽培条件［单击此处键入小区耕作、环境条件或设施栽培条件］ 3 试验设计和安排 3.1 药剂 3.1.1 试验药剂［单击此处键入试验药剂通用名称、含量、剂型、生产厂家］ 3.1.2 对照药剂［单击此处键入对照药剂商品名、通用名称、含量、剂型、生产厂家］3.1.3 药剂用量与编号表1 供试药剂试验设计

3.2 小区安排 3.2.1 小区排列［单击此处键入小区排列方法（田间小区分布图或表）］ 3.2.2 小区面积和重复小区面积或植株数：［单击此处键入小区面积或小区植株株数］重复次数：［单击此处键入重复次数］ 3.3 施药方法 3.3.1 使用方法［单击此处键入详细使用方法，应与当地农业生产实践相适应］ 3.3.2 施药器械［单击此处键入施药器械类型、操作条件］ 3.3.3 施药时间和次数［单击此处键入施药次数、施药时期或作物生育期及虫害发生阶段］3.3.4 使用容量［单击此处键入实际公顷用药液量或用药倍数］ 3.3.5 防治其他病虫害的药剂资料［单击此处键入防治其它病虫害药剂施用准确数据］ 4 调查、记录和测量方法 4.1 气象及土壤资料 4.1.1 气象资料［单击此处键入施药当日及试验期间气象资料概要（详见气象资料表）］4.1.2 土壤资料［单击此处键入土壤资料］

红心猕猴桃溃疡病的五个防治方法

红心猕猴桃溃疡病的五个防治方法溃疡病是红心猕猴桃生产中重要病害之一，溃疡病发生后来势凶猛，危害巨大，给生产造成重大损失，轻者减产、枝条干枯，重者死树、甚者毁园。一、症状识别该病害一般发生在春季伤流期、开花期和秋季。主要危害植株主杆、枝蔓、叶片及花蕾等部位。一般新生嫩叶抗性差，较易侵入，初染叶片上出现退绿小点，水渍状，后发展到一至三毫米不规则形或多角形的褐色病斑，边沿有明显的黄色晕圈。新梢染病，发黑枯死；花蕾受害，不能张开；主杆和枝条受害，皮层组织呈水渍状，变软，梢隆起。当病斑扩大成一厘米宽，数厘米长的条斑后，病斑开裂，皮层和木质部分离，病斑周围变暗褐色或黑色。大部分树体染病后，春季伤流期，皮层渗溢出铁锈红色的胶状病菌，随分流液扩展，直漫延至木质部变褐腐烂。导致枝条萎蔫、枯死或整株枯死。

二、发病规律溃疡病是一种腐生性强、又耐低温的细菌，主要在树体病枝上越冬，或者随病枝病叶等残体在土壤中越冬，成为第二年的初侵染源。翌年早春三月开始发病。四月下旬出现发病高峰期，发病部位多从衰弱的枝杆皮孔、芽基、落叶痕、枝条分杈处开始，如遇风雨，不断重复侵染。三、致病原因低温高湿，多雨天气，气温突降遇冻后或先年超负荷挂果，树体抵抗力下降后，易染病原菌；农事操作人为碰伤，夏剪冬剪锯口愈合慢时有利病害侵入，则发病重。四、农业防治多施农家肥料，改善土壤结构，提高树体对多种元素的吸收利用，限制挂果量，入冬早浇防冻水。增强树体抗寒适应能力。五、化学防治先年9月中旬叶面喷施400―600倍的猕杀可湿性粉剂或500倍消菌灵可湿性粉剂。冬剪后，及时喷施5波美度的石硫合剂，喷施部位为主枝、枝条及剪锯伤口，防止病害侵入。三月份发病后，对小伤口或病斑，用小刀在病灶部位纵向上下割三个伤口，深达木质部，伤口上下必须超出病灶1至2厘米，用毛刷蘸强力克菌灵50倍液在上刀口挤压，迫使药液穿过病灶向下口流去。如发病盛期，且病灶大，可用原液少量涂入，以利快速杀菌。如剪锯口或树体的病斑过大，可选医用凡士林拌杀毒矾，在刮去病部坏组织后涂抹此膏，既能保护伤口不受染菌侵染，又能使新的皮层快速生长，是一个切实可行的综合治疗方法。红心猕猴桃酸奶的加工技术作者: 红心猕猴桃果果时间: 2011-04-14 13:03 点击: 292次

农药田间药效试验准则

——农药田间药效试验准则（５） ——中华人民共和国国家标准柑桔贮藏病害是柑桔采收后存放期的主要病害，经常需用杀菌剂进行防治。为了确定防治柑桔贮藏期病害药剂的最佳使用浓度，测试药剂对柑桔贮藏病害的效果及对柑桔品质的影响，为杀菌剂登记的药效评价和安全、合理使用技术提供依据。特制定本标准。本标准主要起草人：刘乃炽、吴新平、顾宝根、朱庆华。 1范围本标准规定了杀菌剂防治柑桔贮藏病害：青霉病（Penicillium italicum），绿霉病(Penicillium digitatum)，黑色蒂腐病( Diplodia natalensis)，褐色蒂腐病（Phomopiscitri ）药效试验的方法和基本要求. 本标准适用于柑桔仓库贮藏期杀菌剂防治柑桔贮藏病害登记用药效试验及药效评价，其它药效试验参照本标准执行。 2 试验条件 2.1 试验对象、作物和品种的选择试验对象为柑桔贮藏期病害。试验作物为柑桔采收后的果实。选择贮藏期易感染病害的柑桔品种，记录品种名称。 2.2环境条件试验用果来源必须相同，果的大小及品种的特性必须是相似的，清除带有病疤的果和机械损伤的果，把供试果洗净，待处理。试验期间，试验用果的贮藏条件必须一致；在冷贮藏情况下，要考虑品种的特点，使贮藏条件保持最适宜状态。试验可以在不同地区及不同季节进行（秋天、冬天、夏天），也可在不同年份对多品种进行试验。试验时，不同处理的果要分开存放。 3 试验设计和安排 3.1 药剂 3.1.1 试验药剂注明药剂商品名/代号、中文名、通用名、剂型含量和生产厂家。试验药剂处理不少于三个剂量或依据协议（试验委托方与试验承担方签定的试验协议）规定的用药剂量。 3.1.2 对照药剂对照药剂须是已登记注册的并在实践中证明有较好药效的产品。对照药剂的类型和作用方式应同试验药剂相近并使用常用剂量，特殊情况可视试验目的而定。 3.2 试验安排试验药剂，对照药剂、空白对照处理于仓库随机排列。每一处理，常温贮藏为100―200果，冷藏为400―500果，重复4―5次。 3.3 施药方式 3.3.1 使用方法按协议要求及标签说明进行。一般是浸渍、熏蒸及喷淋处理后单果和大包装隔离贮存。 3.3.2使用器械若喷淋，选用生产中常用的器械，记录所用器械的类型和操作条件（操作压力、喷孔口径）的全部资料。施药应保证药量准确，分布均

农药田间药效试验准则

农药田间药效试验准则杀菌剂防治柑橘炭疽病 Pesticide- Guidelines for the field efficacy trials- Fungicides against anthracnose of citurs 前言田间药效试验是农药登记管理工作重要内容之一，是制定农药产品标签的重要技术依据，而标签是安全、合理使用农药的唯一指南。为了规范农药田间试验方法和内容，使试验更趋科学与统一，并与国际准则接轨，农业农村部农药检定所制定了我国田间药效试验准则国家标准，但是杀菌剂防治柑橘炭疽病却缺乏相关的国家标准，故此根据我省实际情况并经过大量田间药效试验验证而制定本标准。柑橘炭疽病是我省柑橘的主要病害之一，生产上经常需用杀菌剂进行防治。为确定防治柑橘炭疽病药剂的最佳使用剂量，测试药剂对柑橘及非靶标有益生物的影响，为杀菌剂登记的药效评价和安全、合理使用技术提供依据，特制定本标准。本标准由江西省农业厅提出。本标准起草单位：江西省植保植检局（农药管理局）。本标准的主要起草人：钟玲、王希、洪豹元、舒宽义、黄向阳、何益民、王旭明、曾敬富、张晓阳、孔学梅、徐小明。本标准由江西省植保植检局（农药管理局）负责解释。 1 范围本标准规定了杀菌剂防治柑橘炭疽病(Colletotrichum gloeosporioides)田间药效小区试验的方法和基本要求。本标准适用于杀菌剂防治柑橘炭疽病田间药效小区试验及药效评价，其他田间药效试验参照本标准执行。 2 试验条件 2.1 试验对象、作物和品种的选择试验对象为炭疽病。试验作物为柑橘，选用敏感品种，记录品种名称及树龄。 2.2 环境条件

猕猴桃溃疡病防治药剂室内筛选及田间药效试验_龙友华

[收稿日期]　2010-07-18;2010-09-06修回　[基金项目]　贵州省科技厅农业攻关项目“修文六广河牌猕猴桃产业化关键技术开发与示范”[黔科合N Y 字(2009)3022];贵阳市科技局农业科技攻关计划项目“修文县六广河牌猕猴桃产业化关键技术开发与应用”[筑科农合同字第(2009)2-007];修文县科技局农业项目“修文县猕猴桃病虫害无公害防治技术研究”[修科合同字(2007)第1号] 　[作者简介]　龙友华(1970-),男,副教授,从事农产品质量与安全及有害生物化学防治技术研究。E -m a i l :g z l y h 126@126.c o m 植物保护·土壤肥料·微生物 [文章编号]1001-3601(2010)10-0661-0084-03 猕猴桃溃疡病防治药剂室内筛选及田间药效试验龙友华1 ,夏锦书 2 (1.贵州大学农学院,贵州贵阳550025;2.贵州省黔南民族职业技术学院,贵州都匀558000) [摘　要]为筛选猕猴桃溃疡病的有效防治药剂,采用室内抑菌试验和田间病斑涂抹试验研究了6种杀菌剂对猕猴桃溃疡病病菌的毒力和田间防效。结果表明:90%链·土霉素抑菌效果较好,E C 50为40.20m g /L ,其次是硫酸链霉素,E C 50为64.75m g /L ;3%中生菌素和36%三氯异氰尿酸E C 50分别为279.20m g /L 和368.65m g /L ;0.1亿c f u /g 多粘类芽孢杆菌细粒剂和25%叶枯唑抑菌效果较差,E C 50分别为846.32m g /L 和947.77m g /L 。田间病斑涂抹试验中,90%链·土霉素可湿性粉剂对猕猴桃溃疡病具有较好的防治效果,病斑愈合率达82.47%,40%硫酸链霉素可溶性粉剂和3%中生菌素可湿性粉剂防效分别为78.73%和75.01%。 [关键词]猕猴桃;溃疡病;杀菌剂;毒力;防效[中图分类号]S 436.634.1[文献标识码]A I n d o o r S c r e e n i n ga n d F i e l d T r i a l o f B a c t e r i c i d e s a g a i n s t K i w i f r u i t C a n k e r L O N GY o u -h u a 1 ,X I AJ i n -s h u 2 (1.C o l l e g e o f A g r i c u l t u r e ,G u i z h o uU n i v e r s i t y ,G u i y a n g ,G u i z h o u 550025;2.Q i a n n a nN a t i o n a l i t y V o c a t i o n a l a n dT e c h n i c a l C o l l e g e ,D u y u n ,G u i z h o u 558000,C h i n a ) A b s t r a c t :T h e t o x i c i t y a n d f i e l dc o n t r o l e f f e c t o f 6b a c t e r i c i d e s a g a i n s t k i w i f r u i t c a n k e r w e r e t e s t e db yt h e i n d o o r b a c t e r i o s t a s i s t e s t a n d f i e l d s p o t s m e a r i n g t r i a l t o s c r e e n e f f e c t i v e b a c t e r i c i d e s t o c o n t r o l k i w i f r u i t c a n k e r .T h e r e s u l t s s h o w e dt h a t t h ec o n t r o l e f f e c t o f 90%S t r e p t o m y c i n -O x y t e t r a c y c l i n eW Pw a s t h eb e s t ,f o l l o w e db y 40%S t r e p t o m y c i n s u l p h a t e W P ,E C 50o f S t r e p t o m y c i n -O x y t e t r a c y c l i n e W P ,S t r e p t o m y c i n s u l p h a t e W P ,3%Z h o n g s h e n g m y c i n W P ,36%T r i c h l o r o i s o c y a n u r i ca c i dWP ,t e nm i l l i o nc f u /g P a e n i b a c i l l u s p o l y m y x aa n d 25%B i s m e r t h l a z o l w a s 40.20m g /L ,64.75m g /L ,279.20m g /L ,368.65m g /L ,846.32m g /La n d 947.77m g /L r e s p e c t i v e l y .T h e s p o t h e a l i n g r a t e o f 90%S t r e p t o m y c i n -O x y t e t r a c y c l i n e W P ,40%S t r e p t o m y c i n s u l p h a t e W P a n d 3%Z h o n g s h e n g m y c i n W P a g a i n s t k i w i f r u i t c a n k e r w a s 82.47%,78.73%a n d 75.01%s e p a r a t e l y i n t h e f i e l d s p o t s m e a r i n g t r i a l . K e y w o r d s :k i w i f r u i t ;c a n k e r ;b a c t e r i c i d e ;t o x i c i t y ;c o n t r o l e f f e c t 猕猴桃溃疡病是由细菌(P s e u d o m o n a s s y r i n g a e P Va c t i n i d i a )引起的一种毁灭性病害,国外广泛分布于日本、美国、新西兰和韩国等,我国于1985年在湖南东山峰农场首次发现[1-2] 。目前,该病在我国湖南、福建、四川、陕西和安徽等地均有发生,被列为全国森林植物检疫对象,国内外学者对猕猴桃溃疡病作了大量研究。李瑶等[3-4] 研究了猕猴桃溃疡病的流行因子、猕猴桃中两种同工酶与抗病性的关系,李庚飞等[5] 研究了猕猴桃体内酚的含量与溃疡病的抗性关系,李淼等[6] 对猕猴桃品种枝条组织与抗溃疡病关系作了初步研究,宋晓斌等[7] 研究了猕猴桃溃疡病的生物防治技术,张锋等[8] 研究了猕猴桃溃疡病化学药剂的防治技术。但链·土霉素、中生菌素防治猕猴桃溃疡病鲜有报道。贵州省修文猕猴桃产区个别果园溃疡病发生严重,其发生面积逐年扩大,危害日益严重,现已从修文久长镇蔓延至龙场镇猕猴桃产区,在谷堡乡猕猴桃主产区已有零星发生, 对修文猕猴桃的生产造成了严重的威胁。为做好修文猕猴桃溃疡病的防治工作,笔者于2007-2010年对贵州修文猕猴桃溃疡病进行了调查,并进行了防治药剂的室内筛选和田间防治试验研究,以期为修文猕猴桃溃疡病的防治提供技术依据。 1材料与方法 1.1供试材料1.1.1病原菌猕猴桃溃疡病病原菌(P s e u d o -m o n a s s y r i n g a e P Va c t i n i d i a e )从修文县唐人农庄猕猴桃溃疡病重发区采样分离获得,经分离纯化后保存于密闭的无菌蒸馏水中,室温保存。1.1.2供试药剂40%硫酸链霉素可溶性粉剂,华北制药集团爱诺有限公司;3%中生菌素可湿性粉剂,东莞市瑞德丰生物科技有限公司;36%三氯异氰尿酸可湿性粉剂,湖南省海洋生物工程有限公司;25%叶枯唑(噻枯唑)可湿性粉剂,青岛瀚生生物科　贵州农业科学　2010,38(10):84～86　G u i z h o u A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s

农药田间药效试验的要求

农药登记药效资料要求（室内生物活性及田间药效的试验要求）农药是植物保护的重要手段，从整个农业病、虫、草、鼠害等的防治来说，应当发挥各种防治方法的积极作用，提倡预防为主综合防治的植保方针，但今后或更长的时间里化学防治仍是起主导作用，据有关专家的估计，目前在防治有害生物的过程中，农药所起的作用的达70%—80%，而其它方法所起的作用占20%—30%，如不使用农药，就很难达到高产、稳产的要求。所以要不断研制新农药、新剂型，探索科学使用农药的新方法，新途径，克服农药使用中的缺点，以最大限度发挥农药的作用。一种农药是否可以用于生产，防治病、虫、草、鼠害，必须在一定的环境条件下，经过室内生物活性测定及田间小区试验，得到科学的试验数据才能确定。这部分资料必须由经农业部农药检定所认证考核合格的单位和人员来完成。试验方法及内容必须按照已经颁布国家有关标准进行。如：GB/T17980.1—17980.50-2000《农药田间药效试验准则（一）》。暂时没有标准的要按照有关规定或常规方法进行。一、室内生物活性测定资料要求在申请临时登记时必须要提交室内生物活性测定资料，这部分资料包括药剂对靶标生物的作用机理及致死中量LD 50（致死中浓度LC 50 ）或抑制中量ED 50 （抑制中浓度EC 50 ）。这个数值是经过常规的生物测定试验后对数据进行生物统计得到的（生物统计可使用具有统计功能的计算器完成）。 LD 50（LC 50 ）：药剂使靶标生物死亡一半所使用的计量（或浓度）。 ED 50（EC 50 ）：药剂使靶标生物抑制一半所使用的计量（或浓度）。室内生物测定时杀虫剂一般可采用点滴法、浸渍法和喷雾法等；杀菌剂可采用孢子萌发试验法，生长速率测定法和扩散法等；除草剂可采用小杯法和盆栽法等。二、田间药效的试验要求田间小区试验是在自然条件下，通过植物种类、有害生物、有益生物等多种因素综合作用研究农药在应用上的各种效应，鉴别农药防治病、虫、草、鼠害的效果，对作物的安全性，对有益生物的影响及对环境的影响，是综合评价农药的使用与推广价值所必须的步骤，是新农药室内试验过度到大田实际应用的中间纽带。为了正确评价一种农药，使药效资料符合农药登记的要求，试验结果有一定的可比性，并要与国际上的试验方法取得一致，以便交流,田间药效试验应按着统一的试验程序，严格的科学性和准确性，内容力求全面。试验单位和地点应由农业部农药检定所统一安排。 1）每一个新研制的农药、新剂型应在我国不同气候条件，具有代表性的耕作区完成两年以上的田间小区药效试验。 2）试验地选择：试验地是田间小区药效试验的最基本条件，选择当地有代表性的试验地，要求地势平坦，土壤类型、肥力基本一致，作物种植和管理水平一致，排灌方便的田块，并应记录灌溉的方法，时间及水量。不要将试验地选在树林、房屋、河流、池塘及大路边的田块。否则会影响试验的代表性。 3）试验作物和防治对象的选择：一般来说，新农药、新剂型在进入田间小区试验之前，基本掌握了它的试验作物和防治对象，为了获得理想结果，应选择敏感品系作物进行试验，创造和提供有利于防治对象发生的条件。也

室内药剂筛选试验

室内药剂筛选试验 1含药培养基法将牛肉膏蛋白胨培养基加热熔化, 待其冷却至40℃～45℃时, 分别加入各种药剂母液, 制成待测浓度的含药培养基, 充分摇匀后倒皿(培养皿直径为9cm )。然后用移液管在每皿已凝固的培养基中央分别加入各病菌的孢子悬浮液1.0m l, 以不加药剂的培养基为对照。每处理3 次重复, 于28℃恒温箱内培养, 用“十”字形测量法测量菌落直径, 每天测量 1 次, 连续测 6 次,将末次的测量结果用于方差分析。 2抑菌圈法将牛肉膏蛋白胨培养基加热熔化, 冷却到45℃左右时, 将配制好的孢子悬浮液加入, 摇匀后倒皿。用打孔器将滤纸打成直径为0.15 cm 的圆碟, 灭菌后放入已配制好的药液中, 浸泡3min, 取出滴去多余的药液, 置于含菌培养基平板的中央, 每皿一片, 用灭菌纸碟浸无菌水作对照。于28℃恒温箱中培养, 每处理3 次重复, 用“十”字形测量法测量抑菌圈直径, 每天测1 次,连续测6 次, 将末次的测量结果用于方差分析。 3孢子萌发法分别按以上3种杀菌剂的使用浓度, 配制成含相应药剂浓度的孢子悬浮液, 然后涂于载玻片上, 置于相对湿度为100% + 水滴的保湿器中培养, 以灭菌水配制成的孢子悬浮液为对照, 每处理 3 次重复, 培养6 h, 镜检孢子的萌发情况, 计算萌发率, 并进行方差分析 4、生长速率法供试药剂分别用定量无菌水稀释成所需浓度,取1mL 稀释液放入灭菌培养皿(直径= 90mm ) , 加9mL 培养基, 充分摇匀, 制成含不同

药剂的培养基, 以加入等体积的无菌水的培养基平板为对照。培养基凝固后, 用打孔器(直径= 6mm ) 制取已活化的病菌菌饼, 菌丝面朝下接种于含药培养基中央,每处理3 次重复, 置于25℃恒温培养箱内黑暗培养, 3d 后交叉测量供试病菌在含不同药剂的培养基上的菌落直径, 与对照比较计算各药剂处理对菌落扩展的生长抑制率, 分析比较不同杀菌剂对供试病菌菌丝生长的影响。室内毒力测定方法采用菌丝生长速率法。在预备试验的基础上, 选择各药剂对病菌菌丝生长抑制率在10%～90%范围内的5个系列浓度; 将供试药剂分别用去离子水稀释成系列浓度, 按培养基与药液体积比9∶1的比例加入到已融化并冷却至50 ℃左右的牛肉膏蛋白胨培养基中, 充分摇匀后迅速倒入灭菌的直径为9 cm培养皿中, 制成系列浓度的含药平板, 以加入等体积的无菌水的牛肉膏蛋白胨平板为对照。用直径为4 mm的打孔器截取在牛肉膏蛋白胨培养基上培养4 d 的病菌菌饼, 把菌饼反接到含药平板中央,每处理设3个重复, 置于25±1 ℃下培养96 h , 用十字交叉法测量菌落直径, 每个菌落按十字交叉法测量2次, 以其平均值代表菌落的大小, 计算抑制率。通过DPS分析软件求出药剂的毒力回归方程及EC50值。菌落扩展直径和药剂的抑制百分率计算公式如下。

农药田间药效试验准则杀菌剂防治柑橘炭疽病江西省地方标准编制说明

《农药田间药效试验准则杀菌剂防治柑橘炭疽病》DB36/TXXX—XXXX 江西省地方标准编制说明一、意义和必要性柑橘是全球最重要的经济作物之一，是世界第一大类水果，是世界第三大贸易农产品。2017年江西省柑橘面积达502万亩，产量387万吨，产值196亿元，柑橘已成为农民的“摇钱树”。柑橘炭疽病是一种世界性的、为害较重的病害。可引起落叶、枝梢枯死，果实腐烂及落果；带病果实常在贮运期间发生腐烂，所以又是一种重要的采后病害。由于柑橘炭疽病严重影响柑橘产量、品质和经济价值，生产上常用杀菌剂对其进行防治，本标准可以用于指导杀菌剂防治柑橘炭疽病的田间药效试验的开展，筛选出安全、经济、有效的防治药剂，减少柑橘炭疽病造成的经济损失，并有力地保障柑橘加工产品的质量安全。二、工作简况 2017年5月，我们依据GB/T1.1－2000《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》实施指南和《江西省地方标准管理办法》的要求，由江西省植保植检局（江西省农药管理局）、赣州市植保植检局、大余县植保植检站、信丰县植保植检站组成主要起草单位,成立标准起草小组，陆续开展了多地多年田间药效试验、标准的起草和本标准的征求意见工作。起草小组成立后，查阅大量国内外相关文献、农药田间药效试验准则等有关技术标准，开展杀菌剂防治柑橘炭疽病田间药效试验。本标准起草后、经反复讨论、广泛征求意见，多次修改后逐步形成本标准文本。三、科研工作基础 1、技术规程的主要起草单位具有近20年的农药田间药效试验工作平台，为本标准的完成提供了强有力的技术保证。近20年来，江西省植保植检局（江西省农药管理局）按照确保农药药效试验的公正性、科学性、权威性以及标准化、信息化、体系化的要求，严格开展各项农药药效评估工作。一是进一步强化了试验质量管理。技术负责人分工把好技术关，单位一把手负总责，分管领导抓落实，专业人员负责试验接收、签订试验协议、制订试验方案、组织安排试验和督查与指导等工作制度。二是进一步稳定了试验队伍的动态管理制度，根据江西省农作物布局，病虫草发生规律以及地理气候，在全省科学地选择了万安、泰和、吉州、樟树、上高、新建、都昌、星子、宁都、信丰、等地30家试验网点100名试

农药药效试验怎么做-流程

第五章农药登记田间药效试验方法第一节农药登记田间药效试验的特点一、基本概念农药登记田间药效试验是界于小试研制试验和大田示范试验之间，由中试产品所进行的小区区验证试验，是试验药剂与常规药剂、无药剂处理区对照进行的试验，是在不同年份、不同自然条件下通过试验，检验产品对作物病、虫、草、鼠害的实际防治效果，了解其对作物的安全性及对天敌等有益生物的影响等，也就是是为农药登记提供审批依据。二、试验的特点 1．为农药产品登记注册提供审批依据。《农药管理条例》第六条规定：“国家实行农药登记制度。生产（包括原药生产、制剂加工和分装）农药和进口农药，必须进行登记”。第八条规定，申请农药登记时，其研制者、生产者或者向中国出售农药的外国企业应当提交田间药效试验资料。田间试验是我国农药登记的第一阶段。 2．登记田间药效试验必须准确、可靠。登记田间药效试验决定农药产品登记后在农业生产中的实际防治效果和安全性。试验的目的就是要通过登记试验提出试验药剂的推荐使用剂量、使用方法、使用注意事项等，登记审批要以此为依据，企业以皮制作标签，农民要按标签说明防治病虫害。所以责任重大。 3．田间药效试验必须真实、科学。农药试验数据是审批部门决定一个农药产品是否能够成为一个商品的重要依据。因此，田间药效试验数据必须真实、科学。 4．田间药效试验是验证农药产品质量的重要手段。农药产品质量标准往往使用仪器来检测；而农药产品对靶标作物的防治效果、对

作物的安全性、对有益生物的影响以及将来推广使用中应注意的一些问题等只能通过田间药效试验来获得。 5．登记田间药效试验实行批准（许可）制度。田间药效试验需企业申请，经农业部农药检定所审查批准（许可），给予批准号或许可证后才能实施试验。 6．登记药效试验的试验样品实行封样检测管理。从2003年5月1日起施行。 7．登记田间药效试验单位实行认证管理制度。第二节农药登记田间药效试验要求一、试验设计基本原理英国人Fisher提出，试验应遵循以下三项基本原则：重复原则。所有试验应有重复。随机分配原则。任何试验单位都有同等的概率接受任何一个处理。局部控制原则。试验单位如品种、性别、出生、体重等具有一致性。二、试验前准备 (二)试验方案 1.通常由厂家提供提供初步的试验方案，包括：药剂名称及含量、有效成份种类、配比（混剂）、防治作物、供试作物、药使用使用浓度、施药方法、施药次数、施药时期、调查时间和次数等内容。 2.试验单位有义务对试验方案根据当地情况提出建议，经与企业协商，对不合理的部分进行个性补充并细化。（二）药剂准备 1.试验药剂：一般设低、中、高三个浓度梯度，除草剂还需设中剂量的倍量以测定除草剂对作物的安全性。大田试验采用有效成份g/hm2；果树采用有交效成份mg/kg。 2.对照药剂：应是已登记并在生产上对作物安全、防治效果好的

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田间药效试验设计方案

田间药效试验设计方案进行农药田间药效试验之前，必须制定试验计划和方案，明确试验的目的、要求、方法以及各项技术措施的规格要求，以便试验的各项工作按计划进行，也便于在进行过程中检查执行情况，保证试验任务的完成。田间试验设计的主要目的是减少试验误差，提高试验的精确度，使试验人员能从试验结果中获得无偏差的处理平均值及试验误差的估计值，从而能进行正确而有效的比较。在药效试验中要减少试验误差，就必须对试验误差来源，通过试验设计加以克服。在试验过程中如何减少试验误差应注意以下几个方面： 1.试验地的选择选择有代表性的试验地是使土壤差异减少至最少限度的一个重要措施，对提高试验准确度有很大作用。选择试验地要考虑到： 1.1、试验地的地势应平坦，肥力水平均匀一致。 1.2、试验地的作物生长整齐、树势一致，而且防治对象常年发生较重且为害程度比较均匀，且每小区的害虫虫口密度和病害的发病情况大致相同。特别是杀菌剂试验，要选择高度感染供试对象病害的品种进行试验。 1.3、试验地的田间管理水平相对一致，并符合当地的实际情况。 1.4、试验地应选择离房屋、道路、水塘稍远的开阔农田，以保证人、畜安全和免受外来因素的偶然影响。 1.5、试验地周围最好种植相同的作物，以免试验地孤立而易遭受其它因素为害。 2.试验药剂处理供试农药和对照农药的剂型和含量要合乎规格，无变质、失效现象，并有详细的标签和说明书，标明生产厂家、出厂日期等。评价一种农药产品不同剂量的药效试验，至少要有供试产品的3个浓度梯度、1个常规标准农药的常用浓度和1个空白对照等5个处理。如供试的农药产品是混配制剂，而且各个单剂已登记过，除设混剂本身3个浓度梯度和1个空白对照外，还应设混剂中各个单剂的常规处理浓度，共6个处理。 3.设置重复次数试验设置重复次数越多，试验误差越少。但在实际应用中，并不是重复次数越多就越好。因为多于一定的重复次数，误差的减少很慢，而人力、物力的花费也大大增加，是不值得的。重复次数的多少，一般应根据试验所要求的精确度、试验地土壤差

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