微生物实验室真菌检查质量控制流程
微生物实验室真菌检查质量控制流程
一、目的
规范微生物实验室管理程序，确保临床报告的质量。
二、适用范围
微生物实验室的各类真菌检测。
三、职责
实验室检验人员均必须熟知并遵守本程序。
四、程序
(一)临床样本的采集与处理
1.皮屑边缘、疱壁、脓液、深层趾（指）间皮屑或
活动边缘皮屑，取材前75%酒精消毒，作涂片。
2.甲屑用细挫或牙科磨钻取病甲与正常甲交界处并
且贴近甲床部的甲屑，作涂片。
3.毛发取病发（变色，无光泽，弯曲，脆易折断，
松动易拔除）15根，75%酒精消毒，3～5根作直接镜检。
4.脓液无菌采集，注意颗粒，用无菌蒸馏水稀释后
寻找。可作革兰染色，常规的涂片。
5.采集于无菌试管3～5，立即送检。置冰箱不宜超
过1h。离心后以无菌吸管吸取离心沉淀物1，作墨汁涂片
镜检。
6.血液无菌抽血3～5立即于无菌抗凝管中，:血标
本量为培养基量的1/10，37℃5～7d出现浑浊或菌团，挑取镜检同时移种（注：每天检查完毕后需摇动培养基，37℃震荡培养可加速真菌的生长，提高检出率。不作直接检查，因其直接检查阳性率低。
7.体液、痰液、尿液、粪便①体液标本量10离心沉
淀取2沉淀液做直接镜检培养。②晨痰3～5集于无菌瓶中(无菌生理盐水漱口数次后)，挑取黏液或脓性部分：涂片培养。③早晨中段尿或清洁尿10，离心取沉淀液1做涂片培养（每管种0.5）。④拭子：一般尽量不用，缺点：
A.不能得到足量的标本；
B.采集的标本也不易从棉花纤维
上分离下来.容易干竭。采集标本后应迅速放入内装1~2无菌蒸馏水的试管送检涂片培养。⑤纸盒送检，挑取黏液、脓血、乳酪样部分涂片培养（加抗生素）注：单纯培养阳性，不一定有临床意义，涂片发现菌丝，有诊断意义。
8.组织：标本置无菌平皿中立即送检，置无菌匀浆器加2
蒸馏水，研磨成浆或1～2的小块，涂片培养。
(二)涂片染色和直接镜检的质控
1.氢氧化钾/复方氢氧化钾法：标本置于载玻片上，加一
滴浮载液，盖上盖玻片，放置片刻或微加热，即在火焰上快速通过2～3次，不应使其沸腾，以免结晶，然后轻压盖玻片，驱逐气泡并将标本压薄，用棉拭或吸水纸吸去周
围溢液，置于显微镜下检查。检查时应遮去强光，先在低
倍镜下检查有无菌丝和孢子，然后用高倍镜观察孢子和菌
丝的形态、特征、位置、大小和排列等。
2.胶纸粘贴法：用1×1.5的透明双面胶带贴于取材部位
数分钟后自取材部位揭下，撕去复带在上面的底板纸贴在
载玻片上，使原贴在取材部位的一面暴露在上面，再进行
革兰染色或过碘酸锡夫染色，在操作过程中应注意双向胶
带粘贴在载玻片上时不可贴反，而且要充分展平，否则影
响观察。
革兰染色检查法：在载玻片上滴1滴生理盐水，将所采集的标本均匀涂在载玻片上，自然干燥后，火焰固定或甲醇固定。再选择革兰染色方法，染色后，以油镜观察。
3.染液的质量控制
（1）革兰染液每次新配置和使用中每周一次进行质控，并进行记录。
（2）氢氧化钾/复方氢氧化钾每周进行一次质控。
(三)真菌鉴定质量保证
1.对酵母样真菌如念珠菌或隐球菌在常规临床细菌室已
有较成熟的方法学，可用显色培养基。
2.常规鉴定丝状真菌主要依赖于其生长过程中形态变化
和特点，所以要求从事丝状真菌检测的检验人员应作专业
短期培训；任何实验室都应建立规范的涂片鉴定方法，要
正确区分酵母样真菌或丝状真菌、毛霉菌和曲霉（有顶
囊），对不常见的真菌不要轻易作为污染菌报告。
(四)结果报告
1.药敏岗位检验人员综合真菌鉴定和药敏结果形成检验
报告并签名，微生物实验室负责人或指定人按照相关抗菌
药物试验标准操作规程核对药敏结果，尤其注意异常和少
见结果。
2.告病人结果之前，应确定质控在可接受范围。
3.经双人双核后的报告单交报告发放员分发到各病房或
门诊病人，注意签收并记录。缺乏审核者得报告结果，应
由微生物实验室负责人或指定人在 24 小时内进行评估。
4.血培养阳性涂片为真菌和脑脊液墨汁染色发现隐球菌
的初步报告经核实后，按《三级报告程序》报告。
5.完成分析后的微生物标本，检验人员应按照《检验后
标本保存程序》安全保管标本和平板，要求有明确标识以
备复查。3-5 日后，由废弃物处理岗位人员按照《废弃物
处理程序》处理。
遇到来自临床或病人对检验结果的抱怨，应按照《投诉与抱怨处理程序》处理。
(仅供参考)9203 药品微生物实验室质量管理指导原则
9203药品微生物实验室质量管理指导原则 药品微生物实验室质量管理指导原则用于指导药品微生物检验实验室的质量控制。 药品微生物的检验结果受很多因素的影响，如样品中微生物可能分布不均匀、微生物检验方法的误差较大等。因此，在药品微生物检验中，为保证检验结果的可靠性，必须使用经验证的检测方法并严格按照药品微生物实验室质量管理指导原则要求进行检验。 药品微生物实验室质量管理指导原则包括以下几个方面：人员、培养基、试剂、菌种、环境、设备、样品、检验方法、污染废弃物处理、检测结果质量保证和检测过程质量控制、实验记录、结果的判断和检测报告、文件等。 人员 从事药品微生物试验工作的人员应具备微生物学或相近专业知识的教育背景。 实验人员应依据所在岗位和职责接受相应的培训，在确认他们可以承担某一试验前，他们不能独立从事该项微生物试验。应保证所有人员在上岗前接受胜任工作所必需的设备操作、微生物检验技术等方面的培训，如无菌操作、培养基制备、消毒、灭菌、注平板、菌落计数、菌种的转种、传代和保藏、微生物检查方法和鉴定基本技术等，经考核合格后方可上岗。 实验人员应经过实验室生物安全方面的培训，保证自身安全，防止微生物在实验室内部污染。 实验室应制定所有级别实验人员的继续教育计划，保证知识与技能不断的更新。 检验人员必须熟悉相关检测方法、程序、检测目的和结果评价。微生物实验室的管理者其专业技能和经验水平应与他们的职责范围相符，如：管理技能、实验室安全、试验安排、预算、实验研究、实验结果的评估和数据偏差的调查、技术报告书写等。 实验室应通过参加内部质量控制、能力验证或使用标准菌株等方法客观评估检验人员的能力，必要时对其进行再培训并重新评估。当使用一种非经常使用的方法或技术时，有必要在检测前确认微生物检测人员的操作技能。
医学微生物学A型题
医学微生物学(A型题) 一、A2型题：每一道考题是以一个小案例出现的，其下面都有 A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应题号的相应字母所属的方框涂黑。 1．患者男性20岁，于某餐厅就餐后数小时出现头晕、恶心、呕吐等症状。实验室血琼脂平皿培养出现完全溶血环。培养滤液注射幼猫腹腔4小时后出现呕吐症状。此病应诊断为 A．鼠伤寒沙门菌引起的食物中毒 B．产气荚膜梭菌引起的食物中毒 C．金黄色葡萄球菌引起的食物中毒 D．肠炎沙门菌引起的食物中毒 E．肉毒梭菌引起的食物中毒 正确答案:C 2．患儿男12岁，高热、咽痛3天后出现全身皮疹人院。咽拭子经血琼脂平皿培养出现β溶血菌落，显微镜下可见G+呈链状排列的球菌。你的诊断是 A．风湿热 B．猩红热 C．麻疹 D．风疹 E．流脑 正确答案:B 3．患者女性40岁，雨淋后出现发热、胸痛、咳铁锈色痰。体温39℃，肺部X光片发现右肺中叶有大片密度增高阴影。实验室痰培养为G+双球菌，菊糖发酵试验(+)。此病应诊断为 A．继发性肺结核 B．肺炭疽 C．肺实变 D．原发性肺结核 E．大叶性肺炎 正确答案:E 4．1名5岁女童于春季发热2天后，出现剧烈头痛、喷射性呕吐、颈项强直等颅内压增高症状体征，怀疑为患脑膜炎，行腰椎穿刺，取出脑脊液呈化脓性，涂片镜检为G－球菌，部分位于细胞内，荚膳染色显示有荚膜。脑脊液接种于血琼雕(巧克力色)培养基，在含5％～10％CO2的烛缸中菌落生长良好，无α溶血或β溶血环。根据上述结果，如果你作为一名儿科医师，初步诊断为 A．葡萄球菌性化脓性脑膜炎 B．链球菌性化脓性脑膜炎
C．肺炎球菌性化脓性脑膜炎 D．脑膜炎奈氏菌性流行性脑脊髓膜炎 E．淋病奈氏菌性化脓性脑膜炎 正确答案:D 5．某患者高热、肝脾肿大、无黄疸、白细胞计数低于正常值、相对缓脉、肥达试验(Widaltest)结果为：O抗体增高，H抗体不高。你的诊断是 A．伤寒的急性期 B．伤寒的恢复期 C．已并发肠穿孔 D．以往接种过伤寒疫苗 E．可排除肠热症 正确答案:A 6．患者男性，建筑工人。施工中不慎被一生锈铁钉扎伤后来医院应诊。在给患者清创包扎时，还应给此患者注射 A．白百破三联疫苗(DPT) B．胎盘球蛋白 C．破伤风抗毒素(TAT) D．磺胺类抗生素 E．干扰素 正确答案:C 7．一位感冒患者，其急性期咽漱液或鼻咽拭子标本，接种于12日龄鸡胚，35℃培养3天后，收集的羊水和尿囊液，经检测已诊断为流感病毒，拟进一步鉴别流感病毒的型、亚型和毒株，下一步适用的试验方法应该是 A．间接凝集试验 B．细胞吸附(血吸)试验 C．血吸抑 制试验 D．红细胞凝集(血凝)试验 E．血凝抑制试验 正确答案:E 8．男性27岁，森林警察，自诉入冬后突然发热，头疼、腰疼、眼眶疼。体检发现：面部至胸部皮肤潮红，体表多处有出血点及出血斑；血压低，尿少，且可见大量红细胞。在下列病原微生物中，你认为患者感染的病毒最有可能是 A．汉坦病毒 B．登革病毒 C．森林脑炎病毒 D．流行性乙型脑炎病毒
微生物质量控制程序
1.目的: 规范从原料进厂到产品出柜过程中微生物质量控制过程，保证从原料到产品各环节之微生物质量。 2.适用范围： 从原材料进柜、进厂到产品出柜之微生物质量控制过程。 3.程序: 3.1进料包装材料检验。 3.1.1无论是台湾来柜、美国来柜还是大柜采构的包装材料，均到货仓开具 《来料验收单》，货仓验收后将《来料验收单》传到IQC处。 3.1.2 IQC人员据《来料验收单》及相关取样制度对包装材料进行取样，并 开具送检记录，送到化验室待检，必要时可贴上待微检标签。 3.1.3化验室人员收集、核对送检之包装材料与送检记录之准确性，将送检 记录保存作为微生物检验原始记录。 3.1.4化验室人员按相关检验方法及时（当日样品，当日完成）对送检之包装 材料进行五大微生物指标（细菌总数、霉菌总数、金黄色葡萄球菌、绿 脓杆菌、粪大肠菌群）之检验，待检验结果出来后将结果反馈到送检之 IQC与货仓处，不人合格物料需发出不合格通知单。 3.1.5 IQC据微生物检验结果：合格或不合格，在相应包装材料外箱上贴具 微检合格或微检不合格标签，并同时将信息知会货仓，货仓只有在确认 来料合格，且外箱上贴具微检合格标签后(按批次贴)才能认可批箱产品 微生物质量合格，方可发放生产部使用，不合格物料作好标示后待报废
或退回供应产处理。 3.2进料生产原料检验程序。 3.2.1进料后，货仓开具《来料验收单》传送到化验室。 3.2.2化验室根据《来料验收单》据相关规定对生产原料进行编号取样、并作 好原始检验，必要时可贴上待微检标签。 3.2.3对取好样之产品，化验室进行五大微生物指标（细菌总数、霉菌总数、 金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、粪大肠菌群）检验，待检验结果出来后 填具结果报告单发送到相应仓管处，并在生产原料包装上贴具微生物 合格或微生物不合格标签。 3.2.4货仓据化验室发出之检验结果，微检合格并贴具了微检合格标签的物 料方可发放给生产使用，不合格原料作好标示后待报废或退供应商处 理。 3.3制程过程控制， 3.3.1 制程中标出的每一工序流程，其生产之产品均需进行微生物检验， 由相应车间IPQC按取样制度进行取样，并填具送检记录送化验室 待检，结果出来后，化验室将检验结果反馈给车间IPQC与生产人 员，不合格产品需发出不合格通知单，IPQC据检验结果按批次作 好合格或不合格标示，合格之后的产品方可进入下一工序生产。不 合格之产品，可经过处理再使用的则由品管部门会同相关部门进行 处理（如辐射消毒），处理后再进行微生物检验，合格产品则可投 入使用，不合格则报废处理。
【VIP专享】微生物学 肺结核案例分析
微生物学作业 ---案例及思考题 院系：针灸骨伤学院 班级：11医保 学生：韦光红 学号：11216045 教师：王业梅 成绩：
病原微生物学之肺结核案例分析 1973－1977年资料显示，结核病死亡率已下降至30／10万人口，死因顺序也降至第6－7位。 1979、1985及1990年又在全国范围内3次进行大规模随机抽样调查（表2-9-1），结果显示近年来疫情下 降很慢，而全国各地差别也很大。一般而论，城市疫情好转快，农村和贫困地区疫情改善不很大。直至1990年，我国尚有活动性肺结核约600万（患病率523／10万），其中约150万为痰涂片阳性的传染源 （涂阳患病率134／10万），每年死亡24万（死亡率19／10万），为其他各种传染病死亡人数总和的2倍，经发达国家疫情要高出很多倍。因此结核病的预防至关重要，让我们通过以下案例分析来详细了解肺结核。 案例: 赵X女32岁因发热、胸痛、咳嗽、血痰一周入院。近三个月来有低热、午后体温增高、咳嗽曾在本单位诊断为“感冒”予以抗感冒药、先锋霉素等药治疗疗效欠佳。一周来体 温增高、咳嗽加剧痰中带血。半年来有明显厌食、消瘦夜间盗汗。该病人家中2岁小孩入院检查:T:38℃P:88次/分R:28次/分发育正常营养稍差消瘦神志清楚查体合作胸部检 查右下肺扣诊清音左肺扣诊清音听诊右下肺呼吸音减弱。胸部X线平片检查可见双肺纹理增粗，右肺尖有片状阴影。取痰液作细菌培养和抗酸检查均为阴性，PPD试验强阳性。 再次取痰送检经浓缩集菌后涂片抗酸性细菌阳性。经检查后该患者确诊为肺结核（右上肺）即使用雷米封、乙胺丁醇等抗结核治疗。 1、该患者诊断为肺结核的依据？ 答：依据如下 1）症状：发热、胸痛、咳嗽、血痰，厌食、消瘦，夜间盗汗。 2）体征：T：38℃，P：88次／分，R：28次／分。 3）X线检查：胸部X线平片检查可见双肺纹理增粗，右肺尖有片状阴影。 4）实验室检查:PPD试验强阳性，再次取痰送检，经浓缩集菌后涂片，抗酸性细菌阳性 肺结核病是由结核杆菌引起的慢性肺部感染性疾病可累及全身多个器官.临床特点:慢性过程少数可急起发病。常有低热、乏力、温汗、消瘦等全身症状和咳嗽、咯血等呼吸道症状。 肺结核的诊断标准 1）、疑似病例: 凡符合下列项目之一者: 1、痰结核菌检查阴性胸部Ｘ线检查怀疑活动性肺结核病变者。2、痰结核菌检查阴性胸部Ｘ线检查有异常阴影病人有咳嗽、吐痰、低烧、盗汗等肺结核症状或按肺炎治疗观察2-4周未见吸收。3、儿童结核菌素试验5个单位相当于1:2000强阳性反应者伴有结核病临床症状。 2）、确诊病例:凡符合下列项目之一者1、谈结核菌检查阳性包括涂片或培养。谈结合菌阴性胸部Ｘ线检查有典型的活动性结核病变表现。3、肺部病变标本、病理学诊断为结核病变。4、疑似肺结核病者经临床Ｘ线随访、观察后可排除其他肺部病变。 肺结核的临床症状 1)、局部症状:咳嗽、咳痰。早期咳嗽轻微无痰或有少量黏液痰咯血胸痛. 2）、全身症状: 全身毒性症状表现为午后低热、乏力、食欲减退体重减轻、盗汗等 病征原因 1）、咳嗽是肺结核的最多见的局部症状。对久病不愈的病人如发生支气管移位气管因
浅析生活饮用水微生物检验质量控制
浅析生活饮用水微生物检验质量控制 发表时间：2018-05-07T09:54:06.903Z 来源：《健康世界》2018年4期作者：孙菡昕 [导读] 探讨并研究生活饮用水微生物检验质量影响因素 孙菡昕 香坊区卫生监督所 150030 摘要：目的探讨并研究生活饮用水微生物检验质量影响因素，并提出质控措施。方法选取2017年1—12月期间在疾病预防控制中心进行的960件生活饮用水微生物检验为研究对象，回顾分析检测报告，分析影响检测结果的因素，并提出针对性的质量控制措施。结果生活饮用水微生物检验影响因素主要包括环境因素、实验设备因素、人为因素。结论分析生活饮用水微生物检验质量影响因素，并采取有效地措施加强对生活饮用水微生物检验质量控制，具有重要的意义。 关键词：生活饮用水；微生物检验；影响因素 [Abstract] Objective To explore and study the factors affecting the quality of microbiological test in drinking water，and to put forward the quality control measures. Methods from 2017 to December，960 microbiological tests of drinking water in the center for Disease Control and prevention from 1 to December were selected as the research objects. The test reports were analyzed retrospectively，and the factors influencing the detection results were analyzed，and the targeted quality control measures were put forward. Results the factors affecting the microbial test of drinking water mainly include environmental factors，experimental equipment factors and human factors. Conclusion it is of great significance to analyze the influencing factors of microbiological inspection quality of drinking water and take effective measures to enhance the quality control of microbial testing for drinking water. [Key words] drinking water；microbial test；influencing factors 生活飲用水与人类生活、健康息息相关，通过科学、有效的微生物检测，可确保生活饮用水水质合格、水处理符合标准[1]。然而在生活饮用水微生物检验过程中，存在一些影响因素，会影响微生物检验结果。生活饮用水是微生物的载体，如果人饮用了质量不合格的生活饮用水，极易受到微生物的侵害，从而导致疾病的发生。所以，研究生活饮用水微生物检验影响因素，并提出可行、有效的质量检验控制措施，具有至关重要的作用。结合2017年1—12月期间在该中心进行的960件生活饮用水微生物检验结果，分析生活饮用水微生物检验质量控制措施，进一步为检验人员提供参考依据。现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取2017年1—12月期间在该中心进行的960件生活饮用水作为研究对象。 1.2 方法 1.2.1样本采集选取具有代表性的地点取样，采集过程必须严格执行无菌操作要求，确保水样采集、运输、储存等过程不受污染，且确保在采集4 h内进行检验，以免因放置时间过长造成水样变化或污染。若当天不能检测，应冷藏4℃下，并于24 h内完成检测。 1.2.2材料按照《生活饮用水标准检验方法》（GB /T 5750—2006）要求[2]，配制培养基并经121℃灭菌15 min。培养基制成平板以后，置于培养箱37℃培养24 h，若无菌落生长，证明培养基无菌，符合实验要求。将含有大肠埃希氏标准菌株的菌液接种在培养基上，若大肠埃希氏菌能够正常生长，证明培养基的成分能够满足细菌生长的条件，符合实验要求。 1.2.3实验仪器水浴箱、恒温培养箱、高压灭菌器等。 1.2.4检验方法按照《生活饮用水标准检验方法》（GB /T 5750—2006）要求，依据检验微生物类型，选择最适宜、最准确、最科学的实验检验方法。 2 结果 2.1 不同季节水样微生物检测情况 第一季度合格率最高为97.91%，第三季最低为83.33%。 2.2 不同存放时间水样微生物检测结果 存放24 h的水样菌落总数最多（13 MPN/100 mL），总大肠菌群也最多为（1.8×103）CFU/mL。 2.3 不同体积水样微生物检测结果 100 mL的水样菌落总数与总大肠菌群多于1 mL水样。 2.4 不同培养温度水样微生物检测结果 36℃为最适宜菌落为大肠菌群生长的温度。 3 讨论 3.1 影响生活饮用水微生物检验因素 3.1.1环境因素通过以上分析认识到微生物检测结果容易受到外部环境的影响，并且其操作环境必须在无菌环境进行。若无菌环境遭到破坏，生活饮用水微生物检验结果可能存在误差，影响检验质量。 3.1.2实验设备因素由于实验设备长期使用，若日常维护和保养不到位，可能会导致实验检测结果存在误差。特别是恒温培养箱，需要检定内部不同角落温度是否符合检测需求。细菌的培养温度对其生长效果影响极大。 3.1.3人为因素①若操作技术不规范，可能影响检测结果；②微生物样品被接收之后需要立即进行检测，避免其遭到破坏或者发生变化。样品存放时间越长，菌落总数的检测结果越高。③检测过程中取样体积、检测方法和标准限值的不同，检测结果可能出现不符合规律现象。 3.2 生活饮用水微生物检验质量控制措施 3.2.1控制实验环境加强对实验室环境的控制，依据实验实际需求和性质，检测环境采用超净工作台或洁净间，避免生活饮用水受到
(自己整理供参考)细菌-医学微生物案例分析
医学微生物案例 案例1：小儿3 岁，高热3 天，皮肤有玫瑰疹，出现呕吐、头痛、颈项僵直等脑膜炎刺激征。 问题: 1.可能的诊断是什么?流行性脑脊髓膜炎 2.可能的病原菌是什么?脑膜炎奈瑟菌（奈瑟菌是胞内菌） 3.为什么病人会出现这种表现?病菌经飞沫传播进入咽喉部繁殖，后入血引起菌血症或败血症，引起全身症状、恶心呕吐、出血性皮疹；细菌到达中枢神经系统侵犯脑脊髓膜引起化脓性炎症，产生剧烈头痛、喷射性呕吐、颈项强直等脑膜炎刺激症状。 4.如何明确病原学诊断？采集脑膜炎、血液做标本，如发现中性粒细胞内、外有格兰阴性双球菌，可做初步诊断；抗原-抗体检查（ELLSA 法）。 案例2：某男，9 岁，因张口困难，肌肉酸痛而就诊: 3 天前开始感到不适、头痛发热: 就诊检查过程中逐渐发生四肢僵直、牙关紧闭、脚弓反张。追问亲属证实 2 周前到废旧回收厂玩，不小心脚被牛锈铁钉钉伤，伤口现已基本愈合。 (1) 该患者可能患了什么疾病?破伤风 (2) 该疾病可能是什么微生物引起的感染? 感染的发生机制是什么?破伤风梭菌；破伤风梭菌产生破伤风溶血毒素和破伤风痉挛毒素，破伤风痉挛毒素属神经毒素，对脊髓前角细胞和脑干神经细胞高度亲和，封闭了抑制性神经纤维释放抑制性神经介质，导致全身肌肉强直
性收缩，出现四肢僵直、牙关紧闭、脚弓反张。 (3) 如何防治该类病原菌的感染？对伤口较深的可疑伤口做积极清创，使用大剂量青霉素抑制细胞繁殖；用TAT（破伤风抗毒素）做紧急预防；对易感人群接种百白破（DTP）三联疫苗。 案例3：8 岁儿童李某，放学淋雨后第2天咽喉疼痛，发热。服用维生素C和板蓝根，症状未见好转，1周后出现脸面部浮肿，同时尿少，有血尿。排除原发性肾病综合征。 问题: 1.李某可能感染什么细菌?引起什么疾病?A群链球菌，引起风湿热和急性肾小球炎。 2.该疾病的发病机制是什么?（p98） 3.如何防治？预防：及时治疗病人，减少传染源（飞沫传播）。治疗：使用青霉素G药物治疗。 案例4：某患者男性，29 岁，咳嗽数周。一个月前开始感觉到疲劳、食欲减少，一周后反热、咳嗽，但无痰，又过一周后每天咳出几汤勺带血丝的痰。一个月内体重减轻约 4.5 公斤。该患者不吸烟，未接触工业污染物。体查: T38 ℃，非急性病容，听诊右肺上叶有罗音。胸部x 光显右肺上叶后段空洞。 (1) 最可能的诊断是什么?如何进一步确诊? 致病物质是什么?大叶性肺炎；取痰液、血液做标本检测，发现格兰阳性具有加膜的双球菌
临床检验技士-微生物检验 讲义 32
第三十二章临床细菌检验的质量控制及实验室安全防护标题记忆 本章内容 1.检验前质量保证 （1）检验申请 （2）标本的采集与运送 2.检验中质量保证 （1）人员 （2）试剂 （3）培养基 （4）设备 （5）检验过程 3.检验后质量保证 （1）检验结果的评审和报告 （2）标本的处理 1.实验室生物安全水平 （1）危险度评估 （2）生物安全基本设备 （3）实验室生物安全水平 2.生物安全保障与生物恐怖 （1）实验室生物安全保障 （2）生物恐怖 3.生物安全技术 （1）实验室技术 （2）意外事故的处理 （3）感染性废弃物的处理 （4）感染性物质的运输 检验前质量保证——检验申请 ·患者姓名、出生日期、病房和床号、年龄和性别。 ·临床表现及当前所用抗菌药物。 ·相关病史。 ·标本来源。 ·检验项目。 ·感染类型或目标微生物。 ·标本采集时间、实验室收到标本时间。 检验前质量保证——标本的采集与运送 原始标本采集质量控制： ·患者准备 ·不同部位标本的采集方法 ·标本运送要求 ·延迟运送时标本的贮藏方法 ·安全运送标本的方法 ·标本标识 ·标本接收 检验中质量保证 1.对细菌检验人员的要求。
2.操作手册。 3.仪器设备的功能监测。 4.培养基的质量控制。 5.试剂、染色液以及抗生素的质量控制。 6.标本检验的质量控制。 7.标准菌株的来源和保存及室内质量的全面控制。 检验后质量保证 ·检验结果的评审与报告：制定“警告/危急”范围；必要时及时发送分级报告；危急值及时报告并记录。 ·标本的处置： 1.任何污染材料未经消毒不能拿出实验室。 2.液体废弃物必须收集在防漏未破的容器内，高浓度化学消毒剂处理。 3.对剩余标本、接种过的培养基、菌种等丢弃前均需适当消毒。 4.动物房的废物在处理前及动物笼被清洗前均需消毒，最好经高压蒸汽灭菌。 5.对于任何有污染的锐器如针头、注射器、玻片等在处理前不要用手接触。 实验室生物安全水平——危险度评估 防止实验室发生病原体或毒素意外暴露及释放。 ·危险度等级划分为四类： 1级：无或极低的个体和群体危险。基本不致病。 2级：个体危险中等，群体危险低。致病，但不严重。 3级：个体危险高，群体危险度低。引起严重疾病，但不传播，预防和治疗措施有效。 4级：个体和群体的危险均高。引起严重疾病，容易传播，缺乏有效的预防和治疗措施。 实验室生物安全水平——生物安全基本设备 1.生物安全柜： 用于处理感染性物质；处理潜在空气传播的物质；离心前后，密封离心杯的装样、取样；可能产生气溶胶的操作。 根据吸入空气的速度、再循环空气量、排出空气量、排风系统、压力设置等，分为三级：①Ⅰ级：能够保护操作者和环境，不能保护操作对象；②Ⅱ级：对操作者和操作对象均有保护；③Ⅲ级：对操作者防护最好。 2.个人防护装备： 用于预防气溶胶、喷溅物暴露等。
近20年微生物事件
近二十年微生物学大事件 闫成亮 （生物制药（2）班生命科学学院黑龙江大学哈尔滨 150080） 摘要：随着科学技术的不断发展，研究微生物的方法也不断进步。近二十年微生物的发展取得较大的成绩。细菌基因组的完整序列测定。2003年4月13日，WTO宣布由11个国家共计14个实验室参加的WHOSARS研究项目组发现SARS病原体为一种属于冠状病毒科的新型病毒。2003年12月开始，禽流感在东亚多国—主要是越南，韩国、泰国—严重爆发，并造成越南多名病人丧生。现在远至东欧多个国家亦有案例。 关键词：基因组序列、SARS、猪流感、禽流感 Nearly twenty years microbiology big events YanChnegLiang （The 2th class of Biological pharmaceutical，class life science， college of Heilongjiang university， Harbin ，150080） Abstract: Along with the science and technology unceasing development, the microbial method also progress. Nearly twenty years the development of microorganisms has made onsiderable achievements. The integrity of the bacterial genome sequence determination. On April 13, 2003, the WTO by 11 countries announced a total of 14 laboratory in WHOSARS research team found that SARS pathogen for a belongs to the coronavirus family new virus. Started in December 2003, bird flu in east Asia nations - mainly Vietnam, South Korea, Thailand, Vietnam, and cause serious outbreak of many patients died. Now far to eastern European countries also have case. Key words: Genome sequence, SARS, Swine flu, Avian flu 2003年3月，科学家们发现了导致SARS的元凶SARS－CoV，并且成功的完成了SARS－CoV基因组的完整测序。SARS－CoV基因组有29727个核苷酸、11个开放阅读框（Opening Reading Frames）组成。它的基因组结构和其他的冠状病毒非常相似。但通过比较遗传史和序列比对表明SARS－cov的特征和以前发现的冠状病毒的特征并不完全相似，它不仅表现有其他冠状病毒共有的特征，还有SARS－CoV本身特有的特征。--SARS相关冠状病毒的基因组序列 我们进行了SARS相关的冠状病毒Tor2分离株（29751个碱基）的基因组测序。基因组序列揭示这个冠状病毒与已知的冠状病毒（包括人类冠状病毒HcoV-OC43,HCoV-229E) 无密切相关。预测病毒蛋白的种系分析表明，该冠状病毒与已知的三族冠状病毒均非密切相似.基因组序列将有助于人类SARS病毒感染、潜在动物宿主的诊断检测（使用PCR和免疫测试法），有助于发展抗病毒制剂(包括中和抗体)和找出公认的疫苗抗原决定簇。SARS冠状病毒在种属分类上属于“ssRNA positiv e-strand viruses”家系的“Nidovirales”族中的“Coronaviridae”系(见Taxonomy)。它是冠状病毒家族中新出现的一个子类（Figure 1）。全长29,736bp，已知有11个编码序列（cds），而其中的一个cds（putative orf1ab polyprotein）与鼠类的肝炎病毒（murine hepatitis
临床微生物SOP-室内质量控制管理程序1教学教材
临床微生物SOP-室内质量控制管理程序 1.目的： 规范微生物实验室管理程序，确保临床报告的质量。 2.适用范围： 微生物实验室的所有检验项目。 3.职责： 实验室检验人员均必须熟知并遵守本程序。 4.程序： 4.1 分析前质量管理 4.1.1 检验申请单临床医生应按照《微生物检测项目申请程序》申请临床微生物检测。口头申请追加样本检验项目，必须在样本有效期内申请，并补正式的检验申请单。 4.1.2 生成微生物检验标本标签护士应在核对医嘱、病人信息和检验申请信息后，按照《微生物标本检验标签程序》生成申请单和微生物检验项目标签，并将微生物检验项目标签正确贴于容器上。 4.1.3 标本的采集手册实验室应制定样本采集手册，指导正确采集和处理样本。 4.1.4 样本采集和运输样本采集人员应按照《采样前病人识别程序》确认病人，按照《标本采集、运输程序》采集样本，并在规定的时间和温度范围内，使用指定的运输培养基，安全运送到微生物室。 4.1.5 样本的接收样本接收人员应严格按照《标本接收、识别程序》《标本拒收程序》对标本接收或拒收，并记录。 4.1.6 微生物检验标本信息输入微生物实验室接种实验室岗位检验人员严格按照《微生物标本信息输入程序》录入、核对病人信息和标本信息等质料。 4.1.7 样本储存微生物实验室接种岗位检验人员按照《微生物标本检验前储存程序》正确储存未能及时处理的标本。已经检验的样本应在保证性质稳定的条件下，将样本以适当的方式保留到规定时间内，以便能在出具结果报告后可以复查，
或做补充检验。 4.2 分析中质量管理 4.2.1 试剂的质量控制 4.2.1.1 所有试剂用于检测标本前，必须做质控以评估质量并记录质控结果，只 有质控合格才可以使用。下列试剂每进一批新批号或货号要求用阴、阳性标准菌 株或质控菌株评估其质量（表2-1）。 触酶、氧化酶、凝固酶、β-内酰胺酶、Optochin、X、V 和XV 纸片； 细菌鉴定系统使用的每一种鉴定卡及相关试剂； 表2-1 常用实验试剂质量控制 试剂阳性对照阴性对照监测频率 氧化酶铜绿假单胞菌A TCC27853 大肠埃希菌A TCC25922 每次新配制时及使用中每个工作日 触酶金黄色葡萄球菌A TCC25923 A群链球菌A TCC19615 每次新配制时及使用中每个工作日 靛基质大肠埃希菌A TCC25922 肺炎克雷伯菌A TCC13883 1%蛋白胨水及靛基质试剂:每次新配制 时及使用中每个月1次直接用于检测病人标本有内标准的抗原试验如：金黄色葡萄球菌乳胶凝集试 剂（每天或每次做质控）； 抗血清（至少每半年用阴、阳性质控菌株做质控）； 革兰染液（每周一次用阴、阳性质控片做质控）； 抗酸染液（每次使用要求用阴、阳性质控片做质控）； 自制试剂（每配制一批新试剂做质控）。 4.2.1.2 平行试验新批号试剂使用前必须用老试剂或参考材料平行试验。 4.2.1.3 无厂家商特别说明时，不同批号的试剂不可混用。 4.2.1.4 缺陷或失控试剂只能用于培训员工业务能力，否则报废处理。培训试剂 应明显标记“仅培训使用”，并与检验试剂分开放置。 4.2.2 培养基的质量控制 4.2.2.1 购买的有质量保证标准的培养基实验室应保存制造商所遵循的质量保 证标准，以及每批号产品完成无菌试验、生长试验、生化试验及质量控制性能的 合格证明等文件；无质量保证标准的培养基，每批号和（或）每次购买的产品应 检测相应的性能，包括生长试验或与旧批号平行试验、生长抑制试验（适用时）、 生化反应（适用时）等。
医学微生物学模拟试题(一)
医学微生物学模拟试题(一) [A1型题] 以下每一考题下面有A、 B、 C、 D、 E 5个备选答案，请从中选一个最佳答案，并在答题卡将相应题号的相应字母所属方框涂黑。 1．用来测量细菌大小的单位是 A. cm B．mm C. um D．nm E．Pm 2．细菌缺乏下列哪一种结构仍可存活 A．细胞壁 B．细胞膜 C．细胞质 D．核质 E．以上均可
3．下列有鉴别意义的细菌代谢产物是：A．靛基质 B. 色素 C．H2S D．酸性气体 E．以上均是 4．H—O变异属于 A．毒力变异 B．菌落变异 C．鞭毛变异 D．形态变异 E．耐药性变异 5. 是已知毒物中毒性最强者 A．肉毒毒素 B．破伤风痉挛毒素 C．白喉外毒素 D．霍乱肠毒素 E．金葡萄肠毒素 6．抗毒素 A．为外毒素经甲醛处理后获得 B．可中和游离外毒素的毒性作用。
C．可中和与易感细胞结合的外毒素的毒性作用D．由细菌内毒素刺激机体产生 E．B十C 7．湿热灭菌法中效果最好的是 A．高压蒸气灭菌法 B．流通蒸气法 C．间歇灭菌法 D．巴氏消毒法 E．煮沸法 8．哪种实验不属于细菌的生化反应 A．糖发酵试验 B．外斐试验 C．VP试验 D. 靛基质生化试验 E. 甲基红试验 9．链球菌感染后引起的变态反应性疾病 A．产褥热 B. 风疹 C．风湿热 D．波状热 E．以上均不是
10．关于淋球菌 A．女性感染者比男性更严重 B．G+肾形双球菌 C．空气传播 D．无垂直传染 E．人是惟一宿主 11．关于痢疾杆菌 A．易入血引起败血症 B．菌毛是致病的重要因素 C．不能引起休克 D．福氏痢疾杆菌因能产生外毒素，故引起的痢疾比较严重E．我国以志贺氏痢疾感菌感染多见。 12．肠道致病菌特征 A．抗原结构复杂，均有H、 O抗原 B．在SS琼脂上为无色不透明菌落 C．多数分解乳糖 D．可用免疫血清鉴定分型 E．革兰阴性杆菌 13．霍乱弧菌 A．有周鞭毛，运动十分活泼
微生物分析前质量控制的重要性
微生物分析前质量控制的重要性 目的分析研究在临床微生物检验分析之前，进行质量控制的意义和重要性。方法以本院2010年1月~2012年12月住院患者以及门诊科所收取的微生物检验标本10000份为对象进行回顾性分析，统计分析标本检验中所产生误差的比率以及产生误差的原因，探讨分析前质量控制在其中所扮演的角色。结果10000份样本中，共有958份发生实验室误差，误差发生比例为9.58%。误差发生原因主要包括分析前质量控制不当、检验操作失误以及后期结果处理失误等，其中分析前质量控制不当所带来的误差有783份，占实验室误差总数的81.7%。结论分析前质量控制的失误是造成临床微生物检验分析结果误差最重要原因，因而应与有关科室合作联系，加强对检验分析前质量控制的重视，只有高质量的分析前质量控制才能保证高质量的临床检验和准确的检验结果。 标签：微生物检验；分析前质量控制；重要性；实验室误差 在临床上对微生物进行检验分析时，有很多影响检验结果的因素，其中检验前的质量控制是最重要的因素之一[1]。合格的分析前治疗控制是准确检验结果的重要保证，但在临床上往往被忽略，且由于要求检验科人员与医生护士等密切配合共同重视，难度较大，因而难以控制，成为国内外实验室质量管理工作的难点和要点[2]。为分析研究造成实验室微生物检验分析误差发生的原因，并探讨分析前质量控制在其中的重要性，以我院检验科检验的10000份样本为资料进行分析，报道如下： 1资料与方法 1.1 一般资料本文所用之标本来自2010年1月~2012年1月，我院住院患者和门诊科患者送检检验科进行临床检验分析的微生物标本10000份，其中包括3530分痰标本，2900份尿液标本，2470份血液标本以及1100份分泌物标本。 1.2方法对上述检验资料进行统计分析，显示该10000份标本在检验中有958份发生实验室误差，实验室误差发生率为9.58%，对造成误差发生的原因进行统计学上的回顾性分析，探讨误差发生的原因，并着重分析检验分析前质量控制在其中发挥的作用。 1.3统计学处理该次研究结果数据均采用百分比记录整理且所有统计数据均在SPSS19.0统计学软件上予以处理，组间差异均使用χ2检验，结果显著差异表示为P＜0.05，无显著差异表示为P>0.05。 2结果 分析结果显示，在958份发生实验室误差的微生物样本中，有450份为痰标本，占46.96%，220份为尿液标本，所占比例为22.97%，158例为血压标本，所占比例为16.49%，130例为分泌物，所占比例为13.57%。对造成误差的原因
微生物检验标本检验前的质量控制分析
微生物检验标本检验前的质量控制分析 发表时间：2018-11-21T09:53:24.757Z 来源：《世界复合医学》2018年第09期作者：王巍 [导读] 对微生物检验前进行质量控制，可提高检验准确率及治疗效果。 哈尔滨市疾病预防控制中心黑龙江哈尔滨 150010 摘要：目的：总结微生物检验标本前开展质量控制的具体方法及应用效果。方法：选取2016年5月至2017年5月我中心收治的78例呼吸道感染病例作为观察对象，根据随机分配的原则分为观察组（n=39）和对照组（n=39），两组均进行微生物病原学和药敏试验，并给予对症治疗，观察组在微生物检验前实施质量控制，对照组进行常规检验，观察检验结果和治疗结果。结果：药敏试验后，进行抗生素治疗，观察组总有效率92.31%，高于对照组74.36%（P<0.05）；经质量控制后进行微生物检验，观察组检出病原菌种类更多，且检出率更高，与对照组比较（P<0.05）。结论：对微生物检验前进行质量控制，可提高检验准确率及治疗效果。 关键词：微生物检验；质量控制；应用效果 Microbiological test specimen quality control before inspection Abstract: Objective: To summarize the specific methods and application effects of quality control before microbiological test specimens. Methods: 78 cases of respiratory infections admitted to our hospital from May 2016 to May 2017 were selected as observation subjects. According to the principle of randomization, they were divided into observation group (n=39) and control group (n=39). Microbial pathogens and drug susceptibility tests were carried out, and symptomatic treatment was given. The observation group was subjected to quality control before microbiological examination, and the control group was subjected to routine examination to observe the test results and treatment results. RESULTS: After the drug sensitivity test, antibiotic treatment was performed. The total effective rate of the observation group was 92.31%, which was higher than that of the control group (74.36%) (P<0.05). After quality control, the microbial test was performed. The observation group detected more pathogens and examined. The rate of outflow was higher than that of the control group (P<0.05). Conclusion: Quality control before microbiological testing can improve the accuracy of the test and the therapeutic effect. Key words: microbiological test; quality control; application effect 微生物检验标本的质量控制过程包括检验前、检验期间及检验后3个阶段，现在大部分实验室都存在完善的检验期间和检验后质量控制制度与措施，因为检验前阶段涉及到其他科室的工作人员、患者和标本运送等环节，以及标本的采集、留取、储存及运输等，属于检验全程质量控制的薄弱环节和难点。本研究以2016年5月至2017年5月收治的78例呼吸道感染病例作为观察对象，分析微生物检验标本前开展质量控制的具体方法及应用效果，现报道如下。 1.资料与方法 1.1一般资料 选取2016年5月-2017年5月我院收治的78例呼吸道感染病例作为观察对象，所有患者经痰培养，结果均呈阳性，对所有标本进行微生物检验，根据随机分配的原则分为观察组和对照组，每组39例，观察组微生物检验前进行质量控制，其中女20例、男19例，年龄12-47岁、平均（29.5±2.3）岁；对照组行常规微生物检验，其中女18例、男21例，年龄13-44岁、平均（28.5±2.1）岁,2组患者基线资料均衡性高（P>0.05）。 1.2方法 对照组进行常规微生物检验，包括常规标本采集、保存、转送、镜检，实施病原分离培养、药敏试验等，在此期间不开展质量控制措施。观察组在微生物检验前实施质量控制，制定标准监管制度以及检验流程，分别从检验人员、培养基、检验仪器及操作等方面进行质量控制。检验人员应该具备扎实的检验操作技能，必须经过严格考核合格后才能上岗操作；培养基应贴有制作时间以及有效期，保证其使用前的无菌性，且该培养基应保证pH颜色、成分以及配制体积均能达到检验要求；确保检验仪器工作正常，保证检验结果的准确性；检验人员应严格按照检验流程执行，并规范操作，若在操作过程中有偏差，则立即上报，重检。同时还应:强化临床各科室间的沟通，听取意见和建议，不断完善检验工作流程，严格按照程序进行，以防违规操作;严格评估检验结果，分析其准确性，认真核实不合格的检验结果;设立咨询服务台，通知制定标本采集知识手册，对患者进行微生物检验的应用价值、标本采集要求与注意事项、准备工作等相关知识的教育;加强对检验人员进行培训，全面提升检验人员的业务水平;做好不合格标本的记录工作，一发现不合格标本立即向临床科室汇报;强化卫生管理，对微生物检验的各个流程进行质检。 2.结果 经质量控制后进行微生物检验，观察组检出病原菌种类更多，且检出率更高，与对照组比较（P<0.05）。 对标本进行药敏试验后，采用抗生素对症治疗，观察组总有效率92.31%，高于对照组的74.36%，两组比较（P<0.05）。
医学微生物学教学病例讨论
第二篇附录医学微生物学教学病例讨论（一）一病人高热、咳脓痰。血 白细胞升高，中性９３％。Ｘ线胸片示肺脓肿。一个月前病人背部皮肤脓肿，至今未愈。（书P109、册P231，金黄色葡萄球菌） 讨论：１．可能的诊断是什么？最可能的病原菌为何？ ２．如何明确病原学诊断？ （二）一新生儿室暴发败血症。血培养阳性，标本经涂片染色镜检为革兰染色阳性球菌。（书P79，细菌性医院感染） 讨论：１．感染是如何发生的？这是一起什么性质的感染？如何明确感染源？ ２．怎样明确病原学诊断？还要做那些检查？有什么需要特别注意的？ ３．怎样防止新的感染病例的再次发生？ （三）一７０岁老年妇女患尿路感染，经予以口服氨苄青霉素治疗，５天后尿路感染症状缓解。为防复发，继续用药一周，结果出现腹泻、发热。粪检发现大量革兰阳性球菌，革兰阴性杆菌反而较少，未分离到痢疾杆菌、致病性大肠杆菌和沙门菌。（书P61、册P245-6，菌群失调症）讨论：１．消化道症状是由什么原因引起的？可能的病原体为何？ ２．怎样明确病原学诊断？还要做那些检查？ ３．这是什么性质的感染？ （四）一旅游团中突然有部分团员出现头晕、恶心、腹痛、呕吐。追问发现，凡发病者早餐均食用的蛋炒饭。返回旅店进一步追查发现，前晚值班厨师正患甲沟炎，是他将今晨用于蛋炒饭的冷饭分装后放置４℃冰箱的。（书P109，金黄色葡萄球菌） 讨论：１．旅游团部分团员患的是什么病？可能的病原菌是什么？ ２．怎样明确病原学诊断？ （五）一患儿突然高热３９.２℃，６小时后昏迷。全身出现猩红热样皮疹、扩散性红斑。查体时发现咽喉部红肿和扁桃体肿大，但后来仔细检查时发现右脚趾处化脓性病灶。血白细胞升高，中性粒细胞８９％。低血压、休克。无脑膜刺激症。（书P113，化脓性链球菌） 讨论：１．可能的诊断是什么？如何明确诊断？ ２．可能的致病因素是什么？致病机理如何？ （六）一２７岁女性，因头痛３天、发烧、寒战2小时来医院就诊。查体见体温４０.２℃，血压119／80mmHg，四肢有散在红色斑点，无脑膜刺激征，扁桃体红肿，肺部检查未见异常。２年前因车祸曾行脾切除。人院后４小时突然意识模糊，进而昏迷，血压降至７０／３０mmHg。虽经抗生素治疗，输血和抗休克治疗，血压仍持续下降，４８小时后死亡。血培养发现有革兰阳性、瓜子状成双或短链状排列的细菌生长。（书P113，链球菌中毒休克综合征） 讨论：１．可能的诊断是什么？可能的病原菌是什么？如何明确诊断？ ２．本例在发病原因上有何特点？ （七）一新生儿出生４２小时后出现发热、呼吸急促、卤门饱满、喷射性呕吐、颈项强直。脑脊液检查见有革兰阳性球菌。该患儿出生时娩出顺利，但其母有胎膜早破发生。（书P114，肺炎链球菌） 讨论：１．可能的诊断是什么？有那些依据？ ２．可能的病原菌是什么？如何明确病原学诊断？ （八）一６３岁老年男性，以发热、心慌、胸闷为主诉要求住院治疗。老人以往曾经确诊高血压冠心病。2周前曾拔牙以便装义齿。１周前开始发热，自服抗生素治疗无效，近两天来心慌、胸闷、气急。查体：体温38.7℃，心脏听诊有杂音，血白细胞升高，其中中性粒细胞明显增高。（书