肉羊人工授精操作技术规程
肉羊人工授精技术标准
肉羊人工授精技术是用假阴道采集种公羊的精液，对精液品质进行检查和稀释后，再用输精器将一定量的精液输入到发情母羊的生殖道内，以代替公、母羊自然交配而繁殖后代的一种技术。
为了使人工授精技术在推广应用中达到规范化要求，提高人工授精技术的效果，特制定本技术规程。
1.主题内容与适用范围
本技术规程规定了肉羊人工授精技术的基本要求和方法。
本规程适用于肉羊人工授精技术的规范化操作。
2.规范性引用文件
下列文件的条款通过本技术规程的引用而成为本规程的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。
3.术语和定义
3.1肉羊人工授精
是指用假阴道采集种公羊的精液，对精液品质进行检查和稀释后，再用输精器将一定量的精液输入到发情母羊的生殖道内，以代替公、母羊自然交配而繁殖后代的一种技术。
3.2采精公羊
是指符合种用标准、育种值高、精液品质良好的种公羊。
3.3台羊
是指健康、体格大小与采精公羊相适应且发情征状明显的母羊或假母羊。
3.4待配母羊
是指准备接受种公羊精液的发情母羊。
3.5试情公羊
指对公羊进行结扎输精管、去势、带试情布等处理，使该公羊可识别出发情母羊而不能与其交配受怀的公羊。
3.6母羊发情鉴定
是指利用试情公羊找出发情母羊的过程。
3.7采精
指是指用假阴道采集种公羊精液的过程。
3.8输精
是指用输精器将一定量的精液输入到发情母羊的生殖道内，以代替公、母羊自然交配的过程。
4 人工授精站(点)的建设与要求
4.1 人工授精站(点)地址的选择应选择与配母羊数量多且相对集中的地方建设人工授精站(点)，输精改良范围以距人工授精站(点)半径距离不超过20km为宜。
4.2 人工授精操作室
4.2.1 采精室和输精室面积为10～12m2，要求地面平整，光线充足，安装紫外灯，室内有1～2个输精架。
4.2.2 精液处理室面积为8～10m2，要求屋顶、墙壁、地面平整，室温应保持在20℃
左右，安装紫外灯。
4.2.3 人工授精操作室的消毒操作室地面用0.1％的新洁尔灭溶液或3％～5％煤酚皂（来苏尔）或石炭酸溶液喷洒消毒，夜间打开紫外线灯消毒。工作服可提前在此进行紫外线消毒。
4.3 种公羊舍要求地势高燥，每只种公羊占有面积约为 2.5～3 m2，并有10～15 m2的运动场。
4.4 待配母羊棚(圈) 应与输精室相连通，其面积可根据母羊群大小来决定。
5 人工授精前的准备工作
5.1采精公羊的准备
5.1.1 采精公羊的选择选择符合种用标准、育种值高、精液品质良好的公羊作为采精公羊。
5.1.2 采精公羊的管理采精公羊应加强饲养和管理，公羊在采精前3周应开始采精1次，前2周每隔3 d采精1次，前1周每隔1d采精1次，以提高种公羊的性欲和精液品质，对于初次采精的公羊，须经调教，使其习惯于假阴道采精。采精公羊阴茎包皮孔部位，如有长毛应事先剪短。采精前用温水清洗种公羊阴茎的包皮，并擦干净。
5.2 台羊的准备应选择健康、体格大小与采精公羊相适应且发情征状明显的母羊或假母羊做台羊。用不发情的母羊做台羊不能引起公羊性欲时，可先用发情的母羊训练几次即可。台羊外阴部用2％来苏水消毒，再用温水擦干净。如用假母羊做台羊，须先经过训练，即先用真母羊为台羊，采精数次，再改用假母羊为台羊。
5.3 母羊发情鉴定
5.3.1 母羊发情征状母羊发情时，常常表现兴奋不安，行为异常，对外界刺激反应敏感，食欲减退，有交配欲，主动接近公羊，在公羊追逐或爬跨时站立不动。发情终止时，拒绝公羊接近和爬跨。发情母羊外阴部松弛、充血、肿胀、阴蒂勃起；阴道充血、松弛，分泌粘液。
5.3.2 试情要求每天早晨和傍晚坚持对输精母羊进行试情。试情公羊可采用带试情布或输精管结扎、阴茎移位术等方法处理，试情公羊与母羊的比例以1:40～50为宜。试情公羊进入母羊群后，发现主动接近公羊并接受公羊爬跨的母羊，鉴定为发情母羊。
5.4 人工授精器械的清洗与消毒
5.4.1 人工授精器械的清洗人工授精所用器械在每次使用后，将采精、输精及与精液接触的所有器械都要求用2％～3％的碳酸钠或洗涤剂彻底清洗干净，再用清水冲洗2～3次，最后再用蒸馏水冲洗一次。并保持清洁、干燥，存放于清洁的柜内。
5.4.2 人工授精器械的消毒
假阴道内胎、玻璃棒、温度计、金属镊子需用75％酒精棉球擦拭消毒。输精器、集精杯、润滑剂、稀释液、生理盐水棉球、毛巾、纱布、保存运输精液用的玻璃容器需经高压蒸汽消毒，要求消毒温度达到115℃，维持30分钟。当连续为数只母羊输精时，每使用一次，输精器的前端用75％酒精棉球由前向后擦拭消毒，切忌将酒精挤入到输精器内，待酒精干燥后，再用生理盐水棉球擦拭后，方可为另一只母羊输精。使用后的开膣器需洗涤干净消毒后，再用灭菌生理盐水棉球冲洗两次。凡是接触精液的器械，如假阴道内胎、集精杯，输精器、保存运输精液用的容器均应经过彻底消毒之后，再用经灭菌的稀释液冲洗两次，以保持精子的适宜环境。
5.5 精液稀释液种类及配制
5.5.1 奶类稀释液将健康母牛或母羊的新鲜乳汁用4层纱布过滤，将过滤后的乳汁经水浴(92～95℃)消毒15min，降温至40℃以下，除去奶皮，加入青霉素10～20万单位/100ml 即可应用。
5.5.2 柠檬酸钠—卵黄—葡萄糖稀释液取葡萄糖3g、柠檬酸钠 1.4g，加蒸馏水至100m1。取上液80 m1，加卵黄20 m1，青霉素10万单位。
5.5.3 生理盐水 0.85％氯化钠溶液．
6 采精
6.1 安装假阴道
6.1.1 安装内胎首先检查所用的内胎有无损坏和沙眼。安装时先将内胎装入外壳，使光面朝内，并要求两头等长，然后将内胎一端翻套在外壳上，依同法套好另一端，此时勿使内胎有扭转情况，并使松紧适度，然后在两端分别套上橡皮圈固定之。用长柄镊子夹上70％酒精棉球消毒内胎，从内向外旋转，勿留空间，要求彻底，待酒精挥发后，用生理盐水棉球多次擦拭。将消毒好的集精杯用生理盐水棉球多次擦之，然后安装在假阴道的一端。
6.1.2 灌注温水左手握住假阴道的中部，右手用量杯或吸水球将温水（50～55℃）从灌水孔灌入，水量约为外壳与内胎间容量的1/2～1/3为宜。实践中常以竖立假阴道，水达灌水孔即可。最后装上带活塞的气嘴，并将活塞关好。
6.1.3 涂抹润滑剂。用消毒玻璃棒取少许经消毒的凡士林涂抹一薄层，涂抹深度以假阴道长度的前1/3～1/2处为宜。
6.1.4 检温、吹气加压用消毒的温度计插入假阴道内检查温度，以采精时达39～42℃为宜。若温度过高或过低，可用冷水或热水加以调节。当温度适宜时向夹层注入空气，使假阴道采精口端形成三角形裂隙为宜。最后用纱布盖好入口，准备采精。
6.2 采精方法采精人员右手握住假阴道后端,固定好集精杯(瓶)，并将气嘴活塞朝下，蹲在台羊右后侧，让假阴道靠近母羊的臀部，在公羊跨上母羊背侧的同时，将假阴道与地面保持35～40度角迅速将公羊的阴茎引入假阴道内，切勿用手抓碰摩擦阴茎。若假阴道内温度、压力、滑度适宜，当公羊后躯急速用力向前一冲时，即已射精，此时，顺公羊向后移下动作之势取下假阴道，并迅速将集精杯一端向下把假阴道竖起，然后打开活塞上的气嘴，放出空气，取下集精杯，用集精杯盖盖好送精液处理室待检。
6.3 采精次数种公羊每天可采精1～2次
7 精液品质检查
7.1 精液的感官检查
正常羊精液为乳白色，无味或略带腥味。凡带有腐败臭味，出现红色、褐色的精液均不可用于输精。公羊的射精量一般为1—1.5 ml。
7.2 精液的显微镜检查
7.2.1 密度分为密（25亿精子以上/毫升）、中（20～25亿精子/毫升）、稀（20亿精子以下/毫升）三级。“密”指在视野中精子之间距离小于一个精子的长度；“中”指在视野中精子之间距离大约等于一个精子的长度；“稀”指在视野中精子之间距离大于一个精子的长度。
7.2.2 精子数用血球计数盘计算出每毫升精液的精子数。每1～2周测定1次。
7.2.3活率以呈直线前进运动的精子数占全部精子的百分率来评定。如查100％的精子呈直线前进运动者评为1.0；90％的精子呈直线前进运动者评为0.9，依此类推。
8 精液的稀释
8.1 稀释倍数应视精液密度、活率和选用的稀释液而定。每1个输精剂量0.1～0.2m1，保持有效精子数在2000万个以上。
8.2 稀释方法精液稀释的温度要与精液的温度一致，在20～25℃时进行稀释。将与精液等温的稀释液沿精液瓶壁缓缓倒入，用经消毒的细玻璃棒轻轻搅匀。进行大倍稀释，先以1：5作第1次稀释，放置10min后再稀释所需倍数。
8.3 精液评定精液稀释后，应进行精子活率评定，以检验稀释效果。
9 精液的保存和运输
9.1 精液保存
9.1.1 常温保存将稀释好的精液置于常温环境(15～25℃)中可保存12h左右。
9.1.2 低温保存将按低温保存稀释后的精液置于2～5℃条件下保存。在整个保存期间应尽量保持温度恒定，防止升温或忽高忽低。
9.1.3冷冻保存将精液用液氮(-196℃)冷冻起来用液氮罐可进行长期保存。
9.2 精液的运输精液运输距离较近，不必进行降温，将装有精液的集精杯或小试管口封严，用棉花包好后放入保温瓶中即可。较远距离运输时，可采用低温保存运输，将精液置于放有冰块的保温瓶内进行运输，到达地点后将精液取出，并在室温或温水中使其温度升至18～25℃。长距离运输可将精液冷冻保存后用液氮罐进行运输。运输的关键是防止途中精液温度发生巨烈变化和剧烈振动。
9.3 经运输和保存的精液，需再经精液品质检查合格后，方能用于输精。
10 输精
10.1 输精母羊的准备
10.1.1 外阴清洗消毒在输精前先用0.1/1000的高锰酸钾或2％的来苏水消毒输配母羊外阴部，再用温水洗掉药液并擦干，最后以生理盐水棉球擦拭。
10.1.2 输精母羊的保定将发情母羊两后肢担在横杠式输精架上或站立在输精坑边，或由工作人员保定母羊。
10.2 输精
10.2.1 输精时间母羊需经发情鉴定及健康检查后方允许给予输精。母羊输精时间一般在母羊发情后12～24h输精。即：早晨发现发情，可在当天下午输精一次，第2d早上再复配一次；傍晚发现发情，则在第2d上、下午各输精1次。如母羊继续发情，可再行输精1次。
10.2.2 输精剂量每头份的输精量，原精液可为0.05～0.1m1，稀释后精液应为0.1～0.2ml。每头份输精量中直线前进运动的精子数应不少于2000万个。精子活率达0.5以上。
10.2.3 输精部位子宫颈外口内，深度约1～2cm。
10.2.4 输精方法将经消毒的开膣器轻缓地插入阴道，打开阴道，寻找子宫颈外口，再将输精器插入输精部位进行输精。输精器及开膣器在为每只母羊使用后，须经消毒才可为另一只母羊输精。
11 记录工作
11.1为了总结经验，提高受胎率，人工授精站及输精点须分别做好种公羊采精记录及母羊配种繁殖记录。
11.2 各项记录必须按时、准确，定期进行统计分析。