钼蓝比色法测定斯越橘成熟果实中还原型抗坏血酸含量及体系优化

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钼蓝比色法测定笃斯越橘成熟果实中还原型抗坏血酸含量

及体系优化-农学论文

钼蓝比色法测定笃斯越橘成熟果实中还原型抗坏血酸含量及体系优化谭智文，宋春艳，郑美香，崔百会，宗成文

（延边大学农学院，吉林延吉１３３００２）

摘要：以笃斯越橘（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍｕｌｉｇｉｎｏｓｕｍ）成熟果实为试材，以钼蓝比色法测定笃斯越橘果实还原型抗坏血酸（Ｒｅｄｕｃｅｄａｓｃｏｒｂｉｃａｃｉｄ，ＡｓＡ）含量进行条件优化。结果表明，３％偏磷酸－乙酸用量为１００μＬ、５％硫酸和５％钼酸铵用量均为２００μＬ、以去离子水补充至１５００μＬ，３０℃干热恒温浴显色４０ｍｉｎ，取出室温下放置１ｈ后，在７００ｎｍ下测定，所得数据稳定，准确性适合用于笃斯越橘果实ＡｓＡ含量的测定；测得含量为（４０．２０±６．２３）ｍｇ／１００ｇＦＷ。

关键词：笃斯越橘（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍｕｌｉｇｉｎｏｓｕｍ）；钼蓝比色法；还原型抗坏血酸；测定与优化

中图分类号：Ｏ６５６．３１文献标识码：A 文章编号：0439－８114（２０15）07－1713-04

DOI:10.14088/https://www.360docs.net/doc/961926800.html,ki.issn0439-8114.2015.07.047

越橘属植物超过４５０种［１］，广泛分布于欧洲、北美洲、中美洲、非洲东南部中部及马达加斯加岛以及亚洲等地。笃斯越橘（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍｕｌｉｇｉｎｏｓｕｍ）为杜鹃花科越桔属落叶灌木［２，３］，是我国一种野生种越橘［４］。笃斯越橘果可鲜食、也可加工，能够提制天然食品色素，浆果酸甜，

果汁含有ＶＣ、ＶＥ［５，６］、Ｚｎ、Ｃｕ等，具有很大的开发前景［６］。目前，关于越橘属植物在抗性生理、光合生理、花色苷功能及分子生物学方面有较多研究［７］。对于越橘果实还原型抗坏血酸（ＡｓＡ）含量的测定及相关方法鲜有报道。

抗坏血酸（ＶＣ）是人体必需的水溶性维生素，在许多新鲜水果、蔬菜中主要以还原型ＶＣ（ＡｓＡ）存在［８］。

ＡｓＡ含量的测定方法有很多，如２，６－二氯靛酚滴定法［９］、碘量法［１０］、分光光度法［１１］、紫外分光光度法［１２］、高效液相色谱法［１３］、钼蓝比色法［１４，１５］等。根据试验测定准度和精度要求，选择简便易行、价格较低的测定方法。

本研究中，笃斯越橘蓝色果实中花青素含量相对较高，不适合用２，６－二氯靛酚滴定法、碘量法进行测定。此外，由于紫外分光光度法操作相对繁琐、光电比浊法易受到亚锡离子干扰，因此两种方法较少被采用；高效液相色谱法是极好的测定方法，能够快速、准确、简便地测定果品中ＶＣ含量，但其仪器较为昂贵，很难应用于普通实验室。钼蓝比色法实质为分光光度法，通过试验条件优化，探究出能够准确、简便、快速地进行越橘中ＡｓＡ含量的测定方法，同时为相关果品测定提供借鉴。

１材料与方法

１．１试验材料

供试材料采自吉林省汪清县兰家林场，笃斯越橘成熟果实采摘后放置于冰盒内，带回实验室，－７０℃冰箱保存。

１．２试验方法

１．２．１试剂与仪器主要试剂：５％的钼酸铵溶液；０．０５ｍｏＬ／Ｌ草酸－０．０００２ｍｏＬ／ＬＥＤＴＡ溶液；５％硫酸溶液；３％偏磷酸－乙酸溶液；１ｍｇ／ｍＬ标准ＶＣ溶液。ＵＶ－２６００型紫外可见分光光度计（日本岛津制作所）；干热恒温器；真空泵。

１．２．２试材处理将试材从冰箱中取出，称量２０ｇ，倒入事先盛有一定量草酸－ＥＤＴＡ溶液研钵内研磨，然后对研磨液进行真空抽滤，滤液即刻用草酸－ＥＤＴＡ溶液定容至２５０ｍＬ，放置４℃冰箱备用。１．２．３试验方法参照文献［１４］方法，改进如下：反应体系总体积为１５００μＬ，ＶＣ标准溶液－草酸－ＥＤＴＡ（或果汁待测液）５００μＬ、３％偏磷酸－乙酸１００μＬ、５％硫酸和５％钼酸铵用量均为２００μＬ，剩余体积以去离子水补充；３０℃干热恒温浴显色４０ｍｉｎ，取出室温下放置４０ｍｉｎ，７００ｎｍ波长条件下测定吸光度。

波长选择试验：分别取０μＬＶＣ标准溶液（对照品）、５０μＬＶＣ标准溶液，采用上述方法并设定紫外可见分光光度计参数，扫描速度为中速；峰值检测，阈值１、点４；在６５０～９００ｎｍ内进行扫描；各试剂用量试验，以０μＬ溶液为参比，吸光度调零，用量梯度为５０μＬ，范围是５０～２５０μＬ；显色温度试验：温度梯度为５℃，范围是１５～３５℃；显色时间及放置时间试验：时间梯度为１０ｍｉｎ，前者范围是１０～５０ｍｉｎ，后者范围是０～９０ｍｉｎ；精密度试验：取平行样品，测定１０次吸光度值；ＶＣ标准溶液曲线制备：ＶＣ标准溶液用量梯度为１０μＬ，范围是０～１００μＬ；加样回收试验：加入５０μＬＶＣ标准溶液。（上述试验数据均为３次测定的均值）

２结果与分析

２．１最适测定波长的选择

在６５０～９００ｎｍ内进行扫描（如图１），结果显示，在６９３～７０２ｎｍ内有较大吸收值（０．６３６），参考文献［１４－１６］中的结果，确定试验测定波长为７００ｎｍ。

２．２偏磷酸－乙酸用量的确定

由图２可以看出，在ＶＣ反应体系中，偏磷酸－乙酸最适加入量为２００μＬ；然而，笃斯越橘反应体系中，偏磷酸－乙酸最适加入量为初始值（５０μＬ），综合考量，最终确定偏磷酸－乙酸用量为１００μＬ。

２．２硫酸用量的确定

由图３可以看出，向反应体系中，加入５％硫酸的量为２００μＬ最适，因此，最终确定５％硫酸用量为２００μＬ。

２．３钼酸铵用量的确定

由图４可以看出，在ＶＣ标准溶液反应体系中，５％钼酸铵最适加入量为１５０μＬ；在笃斯越橘反应体系中，５％钼酸铵溶液最适加入量为２００μＬ，综合考虑，选取加入２００μＬ５％钼酸铵溶液为反应体系最适量。２．４显色温度的确定

由图５可以看出，反应体系最适显色温度为３０℃，最终，确定反应温度为３０℃。

２．５显色时间的确定

由图６可以看出，各反应体系，在显色４０ｍｉｎ时显现最大吸光度；虽然笃斯越橘果汁待测液显色时间－吸光度曲线有一定波动，为了试验一致性，确定

显色时间为４０ｍｉｎ。

．６显色后放置时间的确定

由图７可知，各反应体系在显色后６０ｍｉｎ其吸光度较稳定；因此，显色反应后放置６０ｍｉｎ，然后测定其吸光度。

２．６优化试验精密度评价

按照“１．２．３”试验方法，做１０次平行测定，结果如表１所示。ＶＣ标准溶液、笃斯越橘吸光度较稳定，ＲＳＤ≤２．０％，表明优化后反应体系的精密度良好。

２．７标准曲线的制备与样液ＶＣ含量的测定

按“１．２．３”的试验方法，绘制标准ＶＣ加入量与吸光度的关系（如图８），标准ＶＣ含量在０．００６７～０．０４００ｎｇ／μｇ内线性关系较好，服从朗伯－比耳定律，所得线性方程为ｙ＝０．１２３１ｘ－０．０２２５（ｎ＝６），Ｒ２＝０．９９４８，方程拟合较好，能够用于测定。

２．８加样回收试验

参照上述方法进行吸光度值测定（ｎ＝５），结果见表２，平均回收率为８０％～１２０％，ＲＳＤ≤２．０％，说明试验准确度良好。

３小结与讨论

采用钼蓝比色法测定果蔬中ＡｓＡ含量，选取测定波长有所差异，由于反应体系的不同，反应最大波长会有所不同。在最适波长选取上，参考已有研究（７００ｎｍ［１４］、７００．１ｎｍ［１６］、７０５ｎｍ［１５］、７４６ｎｍ［１７］、７６０ｎｍ［１８］、８２０ｎｍ［１９］、８３９ｎｍ［２０］），结合图像扫描，最终选取７００ｎｍ波长。钼蓝比色法能够较好地应用于笃斯

越橘果实ＡｓＡ含量的测定；笃斯越橘成熟果实（蓝果）ＡｓＡ含量为（４０．２０±６．２３）ｍｇ/１００ｇＦＷ）。

参考文献：

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抗坏血酸含量的测定

抗坏血酸含量的测定植物学实验技术一、原理还原型抗坏血酸（AsA）可以把铁离子还原成亚铁离子，亚铁离子与红菲咯啉（4,7-二苯基-1,10-菲咯啉，BP）反应形成红色螯合物。在534nm波长的吸收值与AsA含量正相关，故可用比色法测定。脱氧抗坏血酸（DAsA）可由二硫苏糖醇（DTT）还原成AsA。测定AsA总量，从中减去还原型AsA，即为DAsA含量。二、仪器与用具离心机；分光光度计；研钵；试管。三、试剂 5%三氯乙酸（TCA）；20%TCA；无水乙醇溶液；0.4%磷酸－乙醇溶液；0.5%BP－乙醇溶液；0.03%FeCl3－乙醇溶液；0.6g/L DTT；Na2HPO4－NaOH溶液：以0.2mol/L Na2HPO4和1.2mol/L NaOH等量混合；60mmol/L DTT－乙醇。四、方法 1. 制作标准曲线配制浓度为2mg/L，4mg/L，6mg/L，8mg/L，10mg/L，12mg/L，14mg/L的AsA系列标准液。取各浓度标准液1.0ml于试管中，加入1.0ml 5%TCA、1.0ml乙醇摇匀，再依次加入0.5ml 0.4%H3PO4－乙醇、1.0ml 0.5%BP－乙醇、0.5ml 0.03%FeCl3－乙醇，总体积5.0ml。将溶液置于30℃下反应90min，然后测定A534。以AsA浓度为横坐标，以A534为纵坐标绘制标准曲线，求出线性方程。 2. 提取取植物叶片1.0g，按1∶5（W/V）加入5%TCA研磨，4000r/min离心10min，上清液供测定。 3. 测定（1）AsA测定取1.0ml样品提取液于试管中，按上述相同的方法进行测定，并根据标准曲线计算AsA含量。（2）DAsA测定向1.0ml样品液中加入0.5ml 60mmol/L DTT－乙醇溶液，用Na2HPO4－NaOH混合液，将溶液PH调至7~8，置于室温下10min，使DAsA还原。然后加入0.5ml 20%TCA，把PH调至1~2。按AsA相同方法进行测定，计算出总AsA含量，从中减去AsA，即得DAsA含量。

抗坏血酸检测的实验步骤

动物血清中抗坏血酸（Vc）的测定一、实验目的抗坏血酸（Ascorbic Acid）又叫维生素C（Vitamin C），是一种水溶性维生素.正常成人体内的抗坏血酸代谢活性池中约有1500mg抗坏血酸，最高储存峰值为3000mg抗坏血酸.抗坏血酸在氧化还原代谢反应中起调节作用，缺乏它可引起坏血病.抗坏血酸是一种强力的抗氧化剂、抗病毒和抗炎剂.广泛存在于食品和生物样本中，是一种免疫刺激剂.因此检测抗坏血酸在上述样本内的分布和含量就显得非常重要。二、实验原理三、实验仪器试管、移液枪、漩涡混匀器、水浴锅、离心机、可见分光光度计。四、试剂的配制 1.试剂一应用液的配制（5ml）：试剂一储备液：双蒸水=1：14稀释，混匀制备。 2.试剂二应用液的配制：用时取一支粉剂加0.36 ml的冰醋酸再加水至40 ml, 溶解，4℃保存。 3. 试剂三应用液的配制：因溶解困难，使用前2-4h加无水乙醇60 ml充分溶解，制备，4 ℃保存。 4. 试剂四应用液的配制：用时取0.15 ml 试剂四储备液加水至25 ml制备，避光保存。（现用现配） 5.试剂五：液体6 ml，4 ℃保存。 6.600 ug/ml标准品应用液的配制：取一支标准品粉末溶于10 ml试剂一应用液中，充分混匀，4℃保存。 6ug/ml标准品应用液的配制：取600 ug/ml Vc标准应用液再用试剂一应用液100倍稀释备用，现用现配。注意：维生素C标准品易氧化，因此，最好在样本上清液制备好后再配标准，并在10 min内进行检测。五、实验步骤 1.取实验小鼠，断颈处死，摘除眼球，眼眶取血至1.5 ml EP管，取完血液，然后静置半小时，然后3000 rpm, 离心15 min,然后取上清至新1.5 ml EP 管，3000 rpm, 离心15 min,取上清备用 2.上清液的制备：取步骤一中上清0.15 ml加试剂一应用液0.45 ml,漩涡混匀，放置15 min分钟后离心，3500-4000转/分，离心10分钟，上层清亮液体为上清液。 3.上清液中Vc的测定：

理化检验工艺

理化金相检测工艺编制：审核：批准：

理化检验工艺 1 总则 1.1 为了保证锅炉安装修理改造工程中理化检验工作的质量，保证理化检验和实验的方法及评定结果符合相关标准要求和检验、实验结果准确性，特制定此工艺。 1.2 本工艺适用于本公司承建的工程项目施工过程中的金属结构、锅炉安装修理改造过程中所需的理化和实验项目。 1.3 理化检验工作除执行本工艺外，还应符合国家有关标准、规范的规定，以及设计图纸的要求； 2 编写依据 GB 223.1—1981 《钢铁及合金中碳量的测定》 GB 223.2—1981 《钢铁合金中硫量的测定》 GB 223.3—1988 《钢铁及合金化学分析方法二安替比林甲烷磷钼酸重量法测定磷量》 GB 223.4—1981 《钢铁及合金化学分析方法硝酸铵氧化容量法测定锰量》 GB 223.5—1997 《钢铁及合金化学分析方法还原型硅钼酸盐光度法测定酸溶硅含量》 GB/T 4338—1995 《金属材料高温拉伸试验方法》 GB/T 228—2002 《金属材料室温拉伸试验方法》 GB/T 232—1999 《金属材料弯曲试验方法》 GB/T 13298—1991 《金属显微组织检验方法》

GB/T13299—1991 《钢的显微组织评定方法》 GB/T 1818—1994 《金属表面洛氏硬度试验方法》 GB/T 4340.2—1999 《金属维氏硬度试验第2部分硬度计的检验》GB/T 4340.3—1999 《金属维氏硬度试验第3部分标准硬度块的标定》 GB/T17394—1998 《金属里氏硬度试验方法》 GB/T 4342—1991 《金属显微维氏硬度试验方法》 GB/T 231—2002 《金属布氏硬度试验法》 GB/T 230—2002～2004 《金属洛氏硬度试验法》 GB 4340—1999 《金属维氏硬度试验法》 3 检验工艺 3.1 钢铁五元素测定工艺 3.1.1 碳含量的测定：碳含量的测定常用三种方法：碱石棉吸收重量法、气体容量法和游离碳测定法。 3.1.1.1 碱石棉吸收重量法主要适用于生铁、碳钢、合金钢、高温合金、精密合金、铁粉等。其测定范围：0.10%～5.0%。其方法是将试样置于高温炉中加热并通氧燃烧，使碳氧化成二氧化碳，混合气体经除硫后，以已知重量的内装碱石棉的吸收瓶吸收二氧化碳，称量。由吸收瓶之增重，计算试样中的含碳量。具体分析方法步骤执行GB 223.1—1981《钢铁及合金中碳量的测定》第一章。 3.1.1.2 气体容量法主要适用于生铁、铁粉、碳钢、合金钢、高温合金及精

单脱氢抗坏血酸还原酶活性测定试剂盒使用说明

单脱氢抗坏血酸还原酶活性测定试剂盒使用说明分光光度法货号：BC0650 规格：50T/48S 产品内容：试剂一：液体×1瓶，4℃保存；试剂二：液体×1瓶，室温保存；试剂三：粉剂×1瓶（棕色），4℃保存。临用前加入5mL双蒸水充分溶解；试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入5mL双蒸水充分溶解；试剂五：液体×1瓶，4℃保存。临用前加入5mL试剂二充分溶解。试验中所需的仪器和试剂：研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液器、蒸馏水。产品说明： MDHAR催化MDHA还原MDHA生成AsA；在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。MDHAR催化NADH还原MDHA生成AsA和NAD＋，NADH在340nm有特征吸收峰，但NAD＋没有。通过测定340nm光吸收下降速率，来计算MDHAR活性。操作步骤：一、粗酶液提取： 1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积（ml）1：5-10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1ml试剂一进行冰浴匀浆。10000rpm，4℃离心10min，取上清置冰上待测。

2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（ml）为500-1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml试剂一），冰浴超声超声破碎细胞（功率300w，超声3s，间隔7s，总时间3min）；然后10000rpm，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。二、DHAR测定操作： 1.分光光度计预热30min，调节波长到340nm，蒸馏水调零。 2.试剂二在25℃水浴锅中预热30min以上。 3.空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL试剂三、100μL试剂四和100μL 试剂五、600μL试剂二，最后加入100μL蒸馏水，迅速混匀后于340nm比色，记录30s和150s的吸光值A1和A2，△A=A1-A2。 4.测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL试剂三、100μL试剂四和100μL 试剂五、600μL试剂二，最后加入100μL上清液，迅速混匀后于340nm比色，记录30s和150s的吸光值A3和A4，△A=A3-A4。。三、DHAR活力计算：（1）按蛋白浓度计算活性单位定义：25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1μmol NADH为1U。 MDHAR(U/mg prot)=[(△A测定管-△A空白管)÷ε÷d×V反总×106]÷（Cpr×V样）÷T =0.804×(△A测定管-△A空白管)÷Cpr （2）按样本质量计算活性单位定义：25℃中每克样本每分钟氧化1μmol NADH为1U。 MDHAR(U/g)=[(△A测定管-△A空白管)÷ε÷d×V反总×106]÷（W×V样÷V样总）÷T

汽车用高强度热连轧钢板及钢带第5部分：马氏体钢(标准状态：现行)

I C S77.140.50 H46 中华人民共和国国家标准 G B/T20887.5 2010 汽车用高强度热连轧钢板及钢带第5部分:马氏体钢 C o n t i n u o u s l y h o t r o l l e dh i g h s t r e n g t h s t e e l s h e e t a n d s t r i p f o r a u t o m o b i l e P a r t5:M a r t e n s i t i c s t e e l 2010-09-02发布2011-06-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局

前言 G B/T20887‘汽车用高强度热连轧钢板及钢带“共分为5部分: 第1部分:冷成形用高屈服强度钢第2部分:高扩孔钢第3部分:双相钢第4部分:相变诱导塑性钢第5部分:马氏体钢本部分为G B/T20887的第5部分三本部分的附录A和附录B为资料性附录三本部分由中国钢铁工业协会提出三本部分由全国钢标准化技术委员会归口三本部分起草单位:宝山钢铁股份有限公司二冶金工业信息标准研究院二首钢总公司三本部分主要起草人:李玉光二黄锦花二徐宏伟二涂树林二于成峰二孙忠明二王晓虎二徐海卫二施鸿雁二许晴二黄镇如二陆敏三

汽车用高强度热连轧钢板及钢带第5部分:马氏体钢 1范围本部分规定了马氏体钢热连轧钢板及钢带的分类和代号二尺寸二外形二重量二技术要求二检验和试验二包装二标志及质量证明书等三本部分适用于厚度不大于6mm的马氏体钢热连轧钢带以及由此横切成的钢板及纵切成的纵切钢带,以下简称钢板及钢带三 2规范性引用文件下列文件中的条款通过本部分的引用而成为本部分的条款三凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分,然而,鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本三凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本部分三 G B/T222钢的成品化学成分允许偏差 G B/T223.5钢铁酸溶硅和全硅含量的测定还原型硅钼酸盐分光光度法 G B/T223.9钢铁及合金铝含量的测定铬天青S分光光度法 G B/T223.12钢铁及合金化学分析方法碳酸钠分离-二苯酸铣二肼光度法测定铬量 G B/T223.23钢铁及合金镍含量的测定丁二酮肟分光光度法 G B/T223.26钢铁及合金钼含量的测定硫氰酸盐分光光度法 G B/T223.53钢铁及合金化学分析方法火焰原子吸收分光光度法测量铜量 G B/T223.54钢铁及合金化学分析方法火焰原子吸收分光光度法测定镍量 G B/T223.59钢铁及合金磷含量的测定铋磷钼蓝分光光度法和锑磷钼蓝分光光度法 G B/T223.60钢铁及合金化学分析方法高氯酸脱水重量法测定硅含量 G B/T223.62钢铁及合金化学分析方法乙酸丁酯萃取光度法测定磷量 G B/T223.63钢铁及合金化学分析方法高碘酸钠(钾)光度法测定锰量 G B/T223.64钢铁及合金锰含量的测定火焰原子吸收光谱法 G B/T228金属材料室温拉伸试验方法 G B/T232金属材料弯曲试验方法 G B/T247钢板和钢带包装二标志及质量证明书的一般规定 G B/T709热轧钢板和钢带的尺寸二外形二重量及允许偏差 G B/T2975钢及钢产品力学性能试验取样位置及试样制备 G B/T4336碳素钢和中低合金钢火花源原子发射光谱分析方法(常规法) G B/T6394金属平均晶粒度测定法 G B/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定 G B/T10561钢中非金属夹杂物含量的测定标准评级图显微检验法 G B/T17505钢及钢产品交货一般技术要求 G B/T20066钢和铁化学成分测定用试样的取样和制样方法

抗坏血酸(维生素C)的测定方法

抗坏血酸（维生素C）的测定方法（1）在测定维生素C的国标方法中，荧光法为测定食物中维生素C含量的第一标准方法，2、4－二硝基苯肼法作为第二法。一、荧光法 1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为0.022 g/ml。 2．适用范围 GB12392-90 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定 3．仪器 3．1．实验室常用设备。 3．2．荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。 3．3．打碎机。 4．试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。（1）偏磷酸－乙酸液：称取15g偏磷酸，加入40ml冰乙酸及250ml水，搅拌，放置过夜使之逐渐溶解，加水至500ml。4℃冰箱可保存7～10天。（2）0.15 mol/L硫酸：取10ml硫酸，小心加入水中，再加水稀释至1200ml。（3）偏磷酸－乙酸－硫酸液：以0.15mol/L硫酸液为稀释液，其余同4.1.配制。（4）50％乙酸钠溶液：称取500g乙酸钠（CH3COONa·3H2O），加水至1000ml。（5）硼酸-乙酸钠溶液：称取3g硼酸，溶于100ml乙酸钠溶液（4.4）中。临用前配制。（6）邻苯二胺溶液：称取20mg邻苯二胺，于临用前用水稀释至100ml。（7） 0.04%百里酚蓝指示剂溶液：称取0.1g百里酚蓝，加0.02mol/L氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为10.75ml，磨溶后用水稀释至250ml。变色范围：pH=1.2 红色 pH=2.8 黄色 pH＞4.0 兰色（8）活性炭的活化：加200g炭粉于1L 1+9盐酸中，加热回流1~2h，过滤，用水洗至滤液中无铁离子为止，置于110~120℃烘箱中干燥，备用。（9）标准抗坏血酸标准溶液（1mg/ml）：准确称取50mg抗坏血酸，用溶液（4.1）溶于50ml容量瓶中，并稀释至刻度。抗坏血酸标准使用液（100μg/ml）: 取10ml抗坏血酸标准液，用偏磷酸-乙酸溶液稀释至100ml。定容前试pH值，如其pH＞2.2时，则应用溶液（4.3）稀释。标准曲线的制备：取下述"标准"溶液（抗坏血酸含量10μg/ml）0.5、1.0、1.5和2.0ml 标准系列，取双份分别置于10ml带盖试管中，再用水补充至2.0ml。 5.操作步骤 5.1 样品制备全部实验过程应避光。称取100g鲜样，加100g偏磷酸-乙酸溶液，倒入打碎机内打成匀浆，用百里酚蓝指示剂调试匀浆酸碱度。如呈红色，即可用偏磷酸-乙酸溶液稀释，若呈黄色或兰色，则用偏磷

热轧带肋钢筋GB14992007-中国华西工程设计建设有限公司

GB 1499.2-2007钢筋混凝土用钢第二部分：热轧带肋钢筋 Steel for the reinforcement of concrete— Part 2: Hot rolled ribbed bars (ISO 6935-2:1991,Steel for the reinforcement of concrete— Part2:Ribbed bars,NEQ) 前言 GB1499分为三个部分： ---第1部分：热轧光圆钢筋 ---第2部分：热轧带肋钢筋 ---第3部分：钢筋焊接网。本部分为GB1499的第2部分，对应国际标准ISO6935-2：1991《钢筋混凝土用钢第2部分：带肋钢筋》，与ISO 6935-2：1991的一致性程度为非等效，本部分同时参考了国际标准的修订稿“ISO/DIS 6935-2(2005)”。本部分代替 GB1499-1998《钢筋混凝土用热轧带肋钢筋》。本部分与GB1499-1998相比，主要变化如下： ---适用范围增加细晶粒热轧钢筋； ---增加细晶粒热轧钢筋HRBF335、HRBF400、HRBF500三个牌号； ---增加3.1普通热轧钢筋、3.2细晶粒热轧钢筋、3.11特征值三条定义； ---增加第5章订货内容； ---增加7.5疲劳性能、7.6焊接性能、7.7晶粒度三项技术要求； ---对“表面质量”、“重量偏差的测量”等条款作修改； ---修改钢筋牌号标志：HRB335、HRB400、HRB500分别以3、4、5表示，HRBF335、HRBF400、HRBF500分别以C3、C4、C5表示； ---取消原附录 B“热轧带肋钢筋参考成分”； ---增加现附录 B“特征值检验规则”； ---增加附录 C“钢筋相对肋面积的计算公式”。本标准为条文强制性标准，其中6.4.1条、7.3.5条、7.4.2条、7.5条、表3的尺寸a、b 和附录C为非强制条款，其余均为强制条款。

单脱氢抗坏血酸还原酶(monodehydroascorbate reductase,MDHAR)活性测定试剂盒说明书

货号: QS1008 规格：50管/48样单脱氢抗坏血酸还原酶（monodehydroascorbate reductase,MDHAR）活性测定试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。测定意义： MDHAR催化MDHA还原生成AsA，在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。测定原理： MDHAR 催化 NADH 还原MDHA 生成 AsA和NAD+，NADH在340 nm有特征吸收峰，但是NAD+没有。通过测定340 nm光吸收下降速率，来计算出MDHAR活性。自备实验用品及仪器：研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和双蒸水试剂组成和配置：试剂一：液体50mL×1瓶，4℃保存。试剂二：液体50mL×1瓶，室温保存。试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加入5mL蒸馏水充分溶解。试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入5mL蒸馏水充分溶解。试剂五：液体25μL×1瓶，4℃保存。临用前加5mL试剂二充分溶解。粗酶液提取： 1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。 2.. 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议 500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；8000g ，4℃离心20min，取上清液置冰上混匀待测。 3. 血清等液体：直接测定。 MDHAR测定操作： 1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。 2. 试剂二在25℃水浴锅中预热30 min。 3. 依次在比色皿中加入100μL试剂三、100μL试剂四、100μL试剂五和600μL试剂二，最后加入100μL上清液，迅速混匀后于340nm比色，记录30s和150s的吸光值A1和A2，△A=A1-A2。 MDHAR活性计算公式： (1). 按蛋白浓度计算 MDHAR活性单位定义：25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。MDHAR (nmol/min /mg prot) = △A÷ε÷d×V反总×109]÷（Cpr×V样）÷T = 804×△A ÷Cpr (2). 按样本质量计算第1页，共2页

水中硅酸盐含量的测定

水中硅酸盐硅含量的测定方法水中硅的测定有重量法和比色法两种，重量法适用于硅含量较高（20毫克/升以上）的水样，比较精确，但甚繁杂，一般都采用钼酸盐比色法（钼黄法或硅钼蓝法）。一、原理在PH值近乎1.2的酸性溶液中，钼酸铵能与活性硅酸盐反应生成黄色的硅钼酸，其成分大致是 SiO2·12MoO3·nH2O。因为硅酸标准溶液配制相当麻烦，加上此硅钼酸溶液的黄色与适当PH条件下铬酸钾溶液的黄色相似，故测定时往往用铬酸钾溶液作永久性标准色阶。水中磷酸盐也能与钼酸铵反应，生成黄色物质（磷钼酸），对本测定有干扰。加入草酸可促使磷钼酸分解消除干扰，亦可用计算法进行校正。每毫克P2O5应从所测的硅酸数值中减去0.5毫克。用硫酸酸化可减低单宁（或鞣酸）的干扰。铁离子形成黄色[FeCl6]3-络离子，对本测定也有干扰，但一般水中铁的含量不会超过20毫克/升，对本测定影响极小。水的混浊与颜色对本测定的干扰，可作重叠比色以抵消灌用磷酸钙胶状沉淀褪色，也可用氧化褪色法消除之。普通玻璃的主要成分是硅酸盐，用玻璃瓶装试剂与水样，会使溶液中硅酸盐增加。故本法参与钼黄反应的试剂和水样，应尽量用塑料瓶或里面涂蜡的玻璃瓶盛装。二、试剂 1、10%钼酸铵溶液称取10克分析纯钼酸铵[（NH4)6Mo7O24·4H2O]溶于少量纯水，并稀释到100毫升，若所得溶液混是，可滴加浓氨水直至澄清为止。 2、1：1盐酸将等体积的分析纯浓盐酸与纯水混合。

3、铬酸钾溶液称取（在105℃烘干的）铬酸钾0.630克，溶于纯水中，全部转入1000毫升容量瓶内，并稀释至刻度（T=0.10毫克SiO2/毫升）。 4、1%硼砂溶液称取10克硼砂（Na2B4O7·10H2O)溶于少量纯水中，并稀释到1升。 5、10%草酸溶液称取10克草酸（H2C2O4·2H2O）溶于少量纯水中，并稀释到100毫升。三、测定步骤 1、水样的处理若水样有色或混浊影响测定时，最好和不吸附硅酸盐的磷酸钙胶状沉淀来褪色。处理如下：在200毫升容量瓶中用移液管加入100毫升水样，加1毫升2.5%磷酸二氢钠溶液，摇匀，再加1毫升10%氯化钙溶液和1毫升2.5%氢氧化铵溶液。用纯水将溶液稀释到刻度，混匀后静置20分钟，用干滤纸过滤，取滤液50毫升（相当于25毫升水样）进行分析。若用上述方法尚不能使水样褪色，则可进一步将滤液氧化：在100毫升滤液中，加数毫升1：1盐酸和少许固体过硫酸铵，加热煮沸至溶液颜色褪去。若还不褪色，可再加少许过硫酸铵再煮沸。待溶液冷却后，取50毫升此溶液进行比色。 2、色阶的配标准制取8支50毫升比色管分别按下表加入铬酸钾溶液，并在各管中分别加入25毫升硼砂溶液，用纯水稀释到50毫升，充分摇匀。放置5-10分钟，加1.5毫升草酸溶液（若确知没有磷酸盐则可不加），充分摇匀。放置2分钟后，即与模拟标准色阶进行目视综合比色，15分钟内要比色完。四计算硅酸盐（毫克SiO2/升）= V S/V x*C S*f 式中：V S、C S为等色时标准管的体积（毫升）及浓度（毫克SiO2/升）； V x为等色时水样管的体积（毫升）； f为水样的体积校正因数。

谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase, GR)活性测定试剂盒说明书

货号：QS1111 规格：50管/48样谷胱甘肽还原酶（glutathione reductase, GR）活性测定试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。测定意义： GR是广泛存在于真核和原核生物中的一种黄素蛋白氧化还原酶，是谷胱甘肽氧化还原循环的关键酶之一（通常昆虫中GR被TrxR取代）。GR催化NADPH还原GSSG生成GSH，有助于维持体内GSH/GSSG比值。GR在氧化胁迫反应中对活性氧清除起关键作用，此外GR还参与抗坏血酸－谷胱甘肽循环途径。测定原理： GR能催化NADPH还原GSSG再生GSH，同时NADPH脱氢生成NADP+；NADPH在340 nm有特征吸收峰，相反NADP+在该波长无吸收峰；通过测定340 nm吸光度下降速率来测定NADPH脱氢速率，从而计算GR活性。自备实验用品及仪器：紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、移液器、1mL石英比色皿和蒸馏水试剂组成和配置：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入5.0 mL蒸馏水，混匀。试剂三：液体×1支，4℃保存。粗酶液提取： 1.组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心15min，取上清，置冰上待测。 2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500 万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心15min，取上清置于冰上待测。 3.血清等液体：直接测定。操作步骤： 1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。 2. 试剂一置于25℃（普通物质）或者37℃（哺乳动物）中预热30min。 3. 空白管：取1mL石英比色皿，加入850μL试剂一，100μL试剂二，50μL试剂三，充分混匀，于340nm 处测定10 s和190 s吸光度，记为A空1和A空2，△A空白管= A空1﹣A空2。 4. 测定管：取1mL石英比色皿，加入750μL试剂一，100μL试剂二，100μL上清液，50μL 试剂三，充分混匀，于340nm测定10 s和190 s吸光度，记为A测1和A测2，△A测定管= A 测1﹣A测2。注意：空白管只需要测定一次。计算公式：第1页，共2页

实验四果蔬维生素C (抗坏血酸)的测定(荧光法)

实验四果蔬维生素C (抗坏血酸)的测定（荧光法）抗坏血酸溶于水，稍溶于丙酮与低级醇类。结晶抗坏血酸稳定，水溶液易氧化，遇空气中氧、热、光、碱性物质，特别是在有氧化酶及痕量铜、铁等重金属离子存在时，可促进其氧化破坏进程。酸性、冷藏、隔氧，可延缓食品中抗坏血酸的破坏。国内外用于食物中维生素C含量测定的主要方法有三种，即荧光法、2，4二硝基苯肼法、2，6二氯酚靛酚滴定法。2，6二氯酚靛酚滴定法只能测定食物中还原型抗坏血酸。由于脱氢型抗坏血酸在人体内与还原型抗坏血酸具有同样的生理功能。在一般情况下，测定食物中总抗坏血酸。2，4二硝基苯肼法和荧光法都是测定食物中总抗坏血酸含量的方法。2，4二硝基苯肼法是比色法，易受杂质干扰，灵敏度较低，而荧光法的灵敏度高于比色法2～3个数量级。另外，2，4二硝基苯肼法采用85％的浓硫酸作溶剂，实验时不易操作。荧光法利用硼酸对脱氢抗坏血酸的掩蔽作用可测出杂质的荧光值，从而提高方法的专一性。因此，荧光法具有灵敏度较高、选择性好、易于操作等优点，但此方法易受仪器条件的限制，所以国标方法中选用荧光法为测定食物中维生素C含量的第一标准方法，而将2，4二硝基苯肼法作为第二法。一、实验目的与要求 1 理解食物中维生素C的分布规律以及维生素C的理化特性。 2 学会用常规的比色法测定食物中维生素C的操作技巧。 3 理解测定维生素C的基本原理。二、实验原理 1 样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline），其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。 2 脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为0.22g/ml。 3 适用范围根据GB 12392—1990进行检测，本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。三、实验仪器与试剂 1 仪器（1）实验室常用设备；（2）荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计；（3）捣碎机。 2 试剂配制（1）本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯级试剂。（2）偏磷酸乙酸液：称取15g偏磷酸，加40ml冰乙酸及250ml水，搅拌，放置过夜使之逐渐溶解，加水至500ml。4℃冰箱可保存7～10d。（3） 0.15mol/L H2SO4 ：取10ml硫酸，小心加入水中，再加水稀释至1200ml。（4）偏磷酸乙酸硫酸液：以0.15mol/L硫酸液为稀释液，其余同偏磷酸乙酸液的配制。（5） 50％乙酸钠溶液：称取500g乙酸钠（CH3COONa·3H2O），加水至1000ml。（6）硼酸乙酸钠溶液：称取3g硼酸，溶于100ml乙酸钠溶液中。临用前配制。（7）邻苯二胺溶液：称取20mg邻苯二胺，于临用前用水稀释至100ml。（8） 0.04%百里酚蓝指示剂溶液：称取0.1g百里酚蓝，加以0.02mol/L氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为10.75ml，磨溶后用水稀释至250ml。变色范围： pH＝1.2红色 pH＝2.8黄色

石墨烯负载铂纳米粒子,抗坏血酸还原

高效、清洁的石墨烯负载的铂纳米团簇的合成在直接甲醇燃料电池的应用摘要石墨烯负载的铂纳米团簇是由一个高效、清洁的方法合成，使用这个方法时石墨烯氧化物和铂离子的前体会因为抗坏血酸而在一步法工艺中降低。所得到的铂纳米团簇连接的石墨烯复合材料（PtNCs /石墨烯）通过X-射线衍射（XRD），场发射扫描电子显微镜（FE-SEM），透射电子显微镜（TEM）和能量色散X射线光谱（EDS）检测，可以直接显示，Pt纳米团簇可以成功的在石墨烯上形成,并很好地分布在石墨烯薄片的边缘和褶皱上。进一步的电化学表征——包括循环伏安法（CV）和当前的方法表明：与普通的炭黑Vulcan XC-72和石墨负载Pt纳米团簇相比较，PtNCs /graphene具有明显更高的电催化活性和甲醇电氧化稳定性。这将导致PtNCs/graphene进一步作为一种新的电极材料在直接甲醇燃料电池（DMFC）中的应用。 1.介绍几十年来，在直接甲醇燃料电池(DMFC)中，一直使用甲醇作为燃料而产生强化利益。DMFC 与其他的燃料电池相比，主要的优点是它具有便携性、它所需的原料甲醇容易获得、它具有较高的能量密度——一个数量级大于压缩氢气。然而甲醇交叉和中间物的毒效应,如一氧化碳(CO)对催化剂的毒性影响是影响DMFC在商业市场上应用的主要限制。减少中间物产生的不良效应和提升催化剂效率是当前研究DMFC的主要问题。在DMFC的甲醇氧化反应中主要选择铂作为催化剂，是由于它是在这个反应中催化活性最高的纯金属。但是铂高昂的价格和自然界中的有限供应束缚了它在DMFC中的应用。而铂不稳定的催化能力会产生具有毒效应的中间产物，是另外一个主要的障碍。众所周知，催化剂的比活性主要取决于它们的分布和大小。为了降低铂的负载和提高它的催化活性，可以控制铂的大小在纳米尺寸之类，这个方法也是最有效的。由于具有很高的表面积体积比，拥有小而窄的分布特征的铂纳米粒子是高效电催化活性材料的理想当选者。因此，具有高比表面和强导电性的支持材料对增强铂的电催化活性和利用率是至关重要的。石墨烯，这非凡的二维材料带来了广泛的利益，作为铂的支持材料，它被寄予厚望。与传统的碳材料相比，石墨烯具有更大的比表面积、更好的机械强度和更高的导电性。所有的碳原子以sp2杂化形式紧密的结合在一起，这使得这种特殊的材料具有蜂巢晶格和原子厚度。因此，作为电极材料，石墨烯在许多领域展现了美好的发展前景，比如燃料电池、超级电容器、太阳能电池。考虑到它的高比表面及极好的机械电导性能，石墨烯被认为是最有发展前景的负载铂纳米粒子的支持材料。因此，最近几年许多科学家在研究将石墨烯与铂纳米粒子结合起来的方法。一般情况下，它们是分离的，需要在胶质分子聚合物的帮助下结合在一起。逐步的程序将操作和桥接代理使用变得复杂，这将会降低铂的催化活性。我们以前的报告认为，通过抗坏血酸（在甲醇氧化反应中表现了很高的催化活性）来减少铂前体的产生从而在基质上合成铂纳米粒子是有可能的。在最近的报道中，也证实了抗坏血酸会减少氧化石墨烯表面的氧化官能团如羧基和环氧

海水一活性硅酸盐的测定一硅钼蓝分光光度法

FHZDZHS0036 海水活性硅酸盐的测定硅钼蓝分光光度法 F-HZ-DZ-HS-0036 海水一活性硅酸盐的测定一硅钼蓝分光光度法 1 范围本方法适用于硅酸盐含量较低的海水的测定。 2 原理活性硅酸盐在酸性介质中与钼酸铵反应，生成黄色的硅钼黄，当加入含有草酸(消除磷和砷的干扰)的对甲替氨基苯酚-亚硫酸钠还原剂，硅钼黄被还原为硅钼蓝，于812nm波长测定其吸光度。 3 试剂为取得好的结果，使用优级纯等硅含量低的试剂。试剂溶液及纯水用塑料瓶保存，可降低空白值，本法中所用水均指无硅蒸馏水或等效纯水。 3.1 硫酸，1+3：在搅拌下，将1体积硫酸(ρ1.84g/mL，优级纯)缓慢地加入3体积水中，冷却后盛于聚乙烯瓶中。 3.2 钼酸铵(酸性)溶液：称取2.0g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]，溶于70mL水，加6mL盐酸（ρ1.19g/mL）稀释至100mL（如浑浊应过滤），贮于聚乙烯瓶中。 3.3 草酸溶液，100g/L：称取10g草酸（H2C2O4·2H2O，优级纯），溶于水，稀释至100mL，过滤，贮于聚乙烯瓶中。 3.4 对甲替氨基酚(硫酸盐)-亚硫酸钠溶液：称取5g对甲替氨基酚(米吐尔)[(CH3NHC6H4OH)2·H2SO4]，溶于240mL水，加3g亚硫酸钠

（Na2SO3），溶解后稀释至250mL，贮于棕色试剂瓶中，并密封保存于冰箱中，此溶液可稳定一个月。 3.5 还原剂：将100mL对甲替氨基酚-亚硫酸钠溶液和60mL草酸溶液混合，加120mL硫酸（1+3），搅匀，冷却后稀释至300mL，贮于聚乙烯瓶中，此溶液临用时配制。 3.6 硅标准溶液 3.6.1 硅酸盐标准溶液系列(国家海洋局第二海洋研究所配制生产) 硅酸盐标准也可按下述方法自行配制，但必须定期用二所标准溶液校准。 3.6.2 用氟硅酸钠配制，300mg/L硅：将氟硅酸钠（Na2SiF6，优级纯）在105℃烘1h，取出置于干燥器中冷却至室温，称取2.0087g氟硅酸钠置于塑料烧杯中，加入约600mL水。用磁力搅拌至完全溶解（需半小时）移入1000mL容量瓶中，加水并稀释至刻度，摇匀。此溶液1.00mL 含300.0μg硅.贮于塑料瓶中，有效期一年。 3.6.3 用二氧化硅配制，300mg/L硅：称取0.6418g研细至200目二氧化硅(光谱纯)或色层用硅胶(SiO2高纯，经1000℃灼烧1h)于铂坩埚中，加4g无水碳酸钠（Na2CO3）混匀。在960℃～1000℃高温炉中融熔1h，取出冷却后用热水溶解，移入1000mL容量瓶中。用水稀释至刻度，摇匀。移入干燥的聚乙烯瓶中，此溶液1.00mL含300.0μg硅，有效期一年。 1 3.6.4 硅标准使用溶液，15.0μg/mL：移取5.00mL硅标准溶液（300.0

风力发电设备用轴承钢第1部分：偏航、变桨轴承用钢(标准状态：现行)

I C S77.140.20 H40 中华人民共和国国家标准 G B/T29913.1 2013 风力发电设备用轴承钢第1部分:偏航二变桨轴承用钢 B e a r i n g s t e e l f o rw i n d p o w e r e q u i p m e n t P a r t1:Y a w i n g a n d v a r i a b l e p i t c hb e a r i n g s t e e l (I S O683-17:1999,H e a t-t r e a t e d s t e e l s,a l l o y s t e e l s a n d f r e e-c u t t i n g s t e e l s P a r t17:B a l l a n d r o l l e r b e a r i n g s t e e l s,N E Q) 2013-11-27发布2014-08-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局

前言本部分为G B/T29913的第1部分三本部分按G B/T1.1 2009给出的规则起草三本部分使用重新起草法参考I S O683-17:1999‘热处理钢二合金钢和易切削钢第17部分:滚珠和滚柱轴承钢“编制,与I S O683-17:1999的一致性程度为非等效三本部分由中国钢铁工业协会提出三本部分由全国钢标准化技术委员会(S A C/T C183)归口三本部分起草单位:江阴兴澄特种钢铁有限公司二冶金工业信息标准研究院二洛阳轴研科技股份有限公司二湖北新冶钢有限公司三本部分主要起草人:刘谦二郭艳二栾燕二雷建中二许晓红二傅金明二汪质刚三

实验四果蔬维生素C(抗坏血酸)的测定(荧光法)

实验四果蔬维生素 C （抗坏血酸）的测定（荧光法）抗坏血酸溶于水，稍溶于丙酮与低级醇类。结晶抗坏血酸稳定，水溶液易氧化，遇空气中氧、热、光、碱性物质，特别是在有氧化酶及痕量铜、铁等重金属离子存在时，可促进其氧化破坏进程。酸性、冷藏、隔氧，可延缓食品中抗坏血酸的破坏。国内外用于食物中维生素 C含量测定的主要方法有三种，即荧光法、 2，4 二硝基苯肼法、 2，6 二氯酚靛酚滴定法。 2， 6 二氯酚靛酚滴定法只能测定食物中还原型抗坏血酸。由于脱氢型抗坏血酸在人体内与还原型抗坏血酸具有同样的生理功能。在一般情况下，测定食物中总抗坏血酸。 2，4 二硝基苯肼法和荧光法都是测定食物中总抗坏血酸含量的方法。 2，4 二硝基苯肼法是比色法，易受杂质干扰，灵敏度较低，而荧光法的灵敏度高于比色法 2～3 个数量级。另外，2，4 二硝基苯肼法采用85％的浓硫酸作溶剂，实验时不易操作。荧光法利用硼酸对脱氢抗坏血酸的掩蔽作用可测出杂质的荧光值，从而提高方法的专一性。因此，荧光法具有灵敏度较高、选择性好、易于操作等优点，但此方法易受仪器条件的限制，所以国标方法中选用荧光法为测定食物中维生素C含量的第一标准方法，而将 2， 4 二硝基苯肼法作为第二法。一、实验目的与要求 1 理解食物中维生素 C 的分布规律以及维生素 C 的理化特性。 2 学会用常规的比色法测定食物中维生素 C 的操作技巧。 3 理解测定维生素 C 的基本原理。二、实验原理 1 样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（ OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（ quinoxaline），其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。 2 脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与 OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为 0.22g/ml。 3 适用范围根据 GB12392—1990 进行检测，本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。

食品中还原型抗坏血酸的测定

食品中还原型抗坏血酸的测定 1 范围本标准规定了食品中抗坏血酸的分光光度法。本标准适用于各类食品中的还原型抗坏血酸的测定。本标准不适用于脱氢行抗坏血酸的测定。 2 原理在乙酸溶液中，抗坏血酸与固蓝盐B反应生成黄色的草酰肼–2–羟基丁酰内酯衍生物，在最大吸收波长420处测定吸光度，与标准系列比较定量。 3 试剂 3.1 乙酸溶液（12%）：吸收12mL冰乙酸，加水稀释至100mL。 3.2 乙酸溶液（2%）：吸收2mL冰乙酸，加水稀释至100mL。 3.3 乙二胺四乙酸二钠溶液（35g/L）：称取 3.5g乙二胺四乙酸二钠[C10H14N2O8Na·2H2O]于水中，加热使之溶解后，放冷，并稀释至100 mL。 3.4 蛋白沉淀剂 3.4.1 乙酸锌溶液（220g/L）：称取22.0g乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O],加3 mL冰乙酸溶于水，并稀释至100 mL。 3.4.2 亚铁氰化钾溶液（106g/L）：称取10.6g亚铁氰化钾[K4Fe(CN)4·3H2O],加水溶解至100 mL。 3.5 显色剂：固蓝盐B（Fast Blue Salt B）溶液（2g/L）：准确称取0.3125g固蓝盐B，加水溶解于100 mL。 3.6 抗坏血酸标准储备溶液（2.0mg/mL）：精密称取0.2000g抗坏血酸，加20 mL 乙酸溶液（12%），溶解后移入100 mL棕色容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升相当于2.0mg抗坏血酸（10℃下冰箱内贮存在2d内稳定）。 3.7 抗坏血酸标准使用液（0.1g/L）：用移液管精密吸取5.0 mL抗坏血酸标准储备溶液（2.0g/L）于100 mL棕色容量瓶内，加5 mL乙酸溶液（12%），用水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升相当于100μg/mL抗坏血酸（临用时配制）。 4 仪器 4.1 分光光度计。 4.2 捣碎机。 4.3 离心沉淀机。 4.4 10mL具塞玻璃比色管。 5 分析步骤 5.1 试样溶液的制备 5.1.1 非蛋白性食

钢筋混凝土用热轧碳素钢-不锈钢复合钢筋(标准状态：现行)

I C S77.140.60 H44 中华人民共和国国家标准 G B/T36707 2018 钢筋混凝土用热轧碳素钢-不锈钢复合钢筋 H o t r o l l e d c a r b o n s t e e l a n d s t a i n l e s s s t e e l c l a db a r s f o r t h e r e i n f o r c e m e n t o f c o n c r e t e 2018-09-17发布2019-06-01实施国家市场监督管理总局

中华人民共和国国家标准钢筋混凝土用热轧碳素钢-不锈钢复合钢筋 G B/T36707 2018 * 中国标准出版社出版发行北京市朝阳区和平里西街甲2号(100029)北京市西城区三里河北街16号(100045)网址:w w w.s p c.o r g.c n 服务热线:400-168-0010 2018年9月第一版 * 书号:155066四1-61494

前言本标准按照G B/T1.1 2009给出的规则起草三本标准由中国钢铁工业协会提出三本标准由全国钢标准化技术委员会(S A C/T C183)归口三本标准起草单位:湖南三泰新材料股份有限公司二中冶建筑研究总院有限公司二钢铁研究总院二冶金工业信息标准研究院三本标准主要起草人:向勇二李聚良二朱建国二李昭东二王玉婕二李晓滨二陈颖二陈洁二刘宝石三

钢筋混凝土用热轧碳素钢-不锈钢复合钢筋 1范围本标准规定了钢筋混凝土用热轧碳素钢-不锈钢复合钢筋的分类二牌号二订货内容二尺寸二外形二重量及允许偏差二技术要求二试验方法二检验规则二包装二标志和质量证明书三本标准适用于以不锈钢做覆层二碳素钢(或低合金钢)做基材通过热轧法生产的不锈钢复合钢筋(以下简称钢筋 )三 2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的三凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件三凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件三 G B/T222钢的成品化学成分允许偏差 G B/T223.5钢铁酸溶硅和全硅含量的测定还原型硅钼酸盐分光光度法 G B/T223.11钢铁及合金铬含量的测定可视滴定或电位滴定法 G B/T223.12钢铁及合金化学分析方法碳酸钠分离-二苯碳酰二肼光度法测定铬量 G B/T223.14钢铁及合金化学分析方法钽试剂萃取光度法测定钒含量 G B/T223.19钢铁及合金化学分析方法新亚铜灵-三氯甲烷萃取光度法测定铜量 G B/T223.23钢铁及合金镍含量的测定丁二酮肟分光光度法 G B/T223.25钢铁及合金化学分析方法丁二酮肟重量法测定镍量 G B/T223.26钢铁及合金钼含量的测定硫氰酸盐分光光度法 G B/T223.28钢铁及合金化学分析方法α-安息香肟重量法测定钼量 G B/T223.36钢铁及合金化学分析方法蒸馏分离-中和滴定法测定氮量 G B/T223.37钢铁及合金化学分析方法蒸馏分离-靛酚蓝光度法测定氮量 G B/T223.40钢铁及合金铌含量的测定氯磺酚S分光光度法 G B/T223.58钢铁及合金化学分析方法亚砷酸钠-亚硝酸钠滴定法测定锰量 G B/T223.59钢铁及合金磷含量的测定铋磷钼蓝分光光度法和锑磷钼蓝分光光度法 G B/T223.60钢铁及合金化学分析方法高氯酸脱水重量法测定硅含量 G B/T223.63钢铁及合金化学分析方法高碘酸钠(钾)光度法测定锰量 G B/T223.67钢铁及合金硫含量的测定次甲基蓝分光光度法 G B/T223.68钢铁及合金化学分析方法管式炉内燃烧后碘酸钾滴定法测定硫含量 G B/T223.69钢铁及合金碳含量的测定管式炉内燃烧后气体容量法 G B/T223.71钢铁及合金化学分析方法管式炉内燃烧后重量法测定碳含量 G B/T223.72钢铁及合金硫含量的测定重量法 G B/T223.85钢铁及合金硫含量的测定感应炉燃烧后红外吸收法 G B/T223.86钢铁及合金总碳含量的测定感应炉燃烧后红外吸收法 G B/T1499.1钢筋混凝土用钢第1部分:热轧光圆钢筋 G B/T1499.2钢筋混凝土用钢第2部分:热轧带肋钢筋