抗菌药物敏感性试验流程

抗菌药物敏感性试验流程
抗菌药物敏感性试验流程

抗菌药物敏感性试验流程

1. 目的:抗菌药物敏感性试验(药敏试验)的主要目的是检出细菌的耐药性,预测抗菌药物的临床治疗效果,并为临床医生针对某一特定的临床感染问题选用药物提供依据。

2. 适用范围

微生物实验室所有标本,环境。

3. 职责范围

微生物实验室各工作人员。

4. 药敏试验的一般规则

4.1 对任何感染的可疑病原菌,若不能从该菌的种属特征可靠地推知其对抗菌药物的敏感性,就需要进行药敏试验。如果感染是由公认的对某一高效药物敏感的微生物引起,常规不需要进行药敏试验,见附录6[技术说明(1)]。

4.2 同一患者连续分离培养出的同一种细菌,若最初药敏试验显示为敏感株,随后临床出现可疑的耐药表现,需重复进行药敏试验,见附录6 [技术说明(2)]。

4.3 进行细菌耐药性调查和抗生素疗效评估时需进行药敏试验。

4.4 除临床急症细菌学检查标本,并经直接涂片染色证实为单一致病菌外,一般不主张用临床标本直接做药敏试验。直接标本做药敏试验后,必须按标准方法重做一次。

4.5 当感染的性质不清楚、标本内含数种混合生长的细菌或正常菌群,而且这些细菌与感染的关系很小时,通常不必做药敏试验。

5. 常规药敏试验药物选择原则

5.1 选择适合的药物进行药敏试验一般应由临床微生物检验医师与感染科医师、药剂科、医院药事委员会和医院感染委员会成员共同协商作出决定。在选择抗菌药物时应考虑以下因素:

5.1.1 一般情况下,药敏试验所选用的抗菌药物应包含于本单位的处方手册中。

5.1.2 临床微生物实验室所服务的医疗机构的类型、规模及患者的构成不同,其所分离细菌的耐药谱不同,药敏试验的药物选择不同。

5.1.3 菌种类型不同,药敏试验的药物选择不同。

5.2 我国目前主要依照美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)/临床实验室标准化研究所(CLSI)所制定的药敏试验执行标准作为选药指南(见附录1~2)。该指南针对每一菌群所推荐的药物都具有确切的临床疗效,其体外试验结果也可以接受。在附录1~2表内小格中的列出个小框中列出的一群类似药物,由于它们的解释结果和临床效力都很相似,因此不必每个都进行试验。另外,用“或”字表示的一群相关的药物,其抗菌谱和结果解释几乎完全相同,其交叉耐药性和交叉敏感性也几乎完全相同。因此,通常每个小框(组或相关的群)中只选择一种药物进行试验。

5.3 NCCLS文件每年都有补充和更新,为了保证药敏试验的正确性和对临床的指导性,进行药敏试验时应依照最新版本(本规范中提供的是2005年修订的第十五版)。

6. 药敏试验方法

6.1 纸片扩散法

6.1.1 抗菌药物纸片:一般应购买合格的商品化的药敏纸片进行试验,药敏纸片的贮存见附录6[技术说明(3)]。

6.1.2 琼脂培养基非苛养菌的常规药敏试验使用MH(Mueller-Hinton)琼脂,其制备、贮存和使用方法见附录6[技术说明(4)]。

6.1.3 菌悬液的浊度标准使用0.5麦氏(McFarland)标准管,见附录6[技术说明(5)]。

6.1.4 纸片扩散法的操作

6.1.4.1 接种物的制备

6.1.4.1.1 生长法:从琼脂平板上选取至少3~5个形态特征一致的菌落,用接种环接触每个菌落顶部后将细菌转移到含4~5 ml适宜的肉汤培养管(如胰酶消化大豆肉汤)中,将此肉汤培养物置35℃孵育至其浊度等于或超过0.5麦氏标准(通常需2~6小时)。用无菌盐水或肉汤将旺盛生长的肉汤培养基的浊度调整到相当于0.5麦氏标准,细菌数约为1~2×108 CFU/ ml。

6.1.4.1.2 直接菌悬液法:从孵育18~24h的非选择性培养基(如血琼脂)平板上,挑取单个菌落,直接用肉汤或盐水制成悬液作为接种物,然后将浊度调整至0.5麦氏标准。此法是检测苛养菌(如嗜血杆菌属、淋病奈瑟菌和链球菌)和潜在的对甲氧西林耐药的葡萄球菌的推荐方法,见附录6[技术说明(6)]。

6.1.4.2 接种

应在菌悬液制备后15分钟内接种MH琼脂平板。用无菌棉拭蘸取菌液,在管内壁液面上方旋转紧压,将多余菌液挤去,然后在琼脂表面均匀涂布接种3次,每次旋转平板60度以确保接种菌的均匀分布,最后沿平板内缘涂抹一周。

6.1.4.3 贴药敏纸片

接种好的平板可敞开盖子倒置在室温下干燥3~5min,在15min之内用纸片分配器或无菌镊子将纸片贴于琼脂表面并轻压,使纸片与琼脂表面完全接触。各纸片中心相距应大于24mm,通常直径150 mm平板至多贴12个纸片,直径90~100 mm平板至多贴6-7个纸片。某些药物在纸片贴于琼脂平板后几乎立即扩散,一旦纸片贴上后就不能再移动,若要重新放置,可用一个新的纸片贴在平板的另一位置。

6.1.4.4 孵育:纸片贴好后,15min内将平板倒置放入35℃孵箱(苛养菌药敏平板应放置于5%CO2环境中)16~18h后读取结果,见附录6[技术说明(7)]。葡萄球菌和肠球菌必须孵育整24h以检测对苯唑西林和万古霉素的耐药性。

6.1.4.5 结果判读:抑菌圈呈透明圆环状,菌苔生长的平面应该是均匀连续的,如出现明显的单个菌落生长说明接种菌的浓度太低,应重新进行试验。抑菌圈的直径(包含纸片的直径),以毫米数报告(取整数),见附录6[技术说明(8)]。

对某些细菌抑菌圈的判读有特殊要求

6.1.4.5.1 检测苯唑西林和万古霉素对葡萄球菌或肠球菌的抑菌圈需要用透射光(将平板对着光线)。抑菌圈的边缘应不见细菌的明显生长,若只有用放大镜才可发现的微弱生长的细小菌落则可以忽略。)检测葡萄球菌或肠球菌时,在苯唑西林纸片(葡萄球菌)或万古霉素纸片(肠球菌)周围的抑菌圈内有任何可辨的菌落或生长薄膜(包括针尖样菌落)则提示耐药。

6.1.4.5.2 对其他细菌,若在清楚的抑菌圈内有独立的菌落生长,则提示可能接种的菌种不

纯,需要重新分离、鉴定和药敏试验,但此菌落也可能为抗菌药物选择出的高频突变耐药株。

6.1.4.5.3 变形杆菌属的菌株可扩散到某些抗菌药物的抑菌圈内,所以在明显的抑菌圈内有薄膜样爬行生长可以忽略。

6.1.4.5.4 对于链球菌应检测生长抑制圈而不是溶血抑制圈。对于甲氧苄啶和磺胺,拮抗物可使细菌轻微生长(生长菌苔的20%或以下),所以抑菌圈直径的检测应不考虑细微生长的部分而测量比较明显的边缘。

纸片扩散法操作流程及某些特殊细菌的药敏试验要求见附录4、5。

6.2 稀释法:稀释法药敏试验可用于定量测试抗菌药物对细菌的体外活性,分为琼脂稀释法和肉汤稀释法。试验时抗菌药物的浓度通常经过倍比(log2)系列稀释,能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度称为最小抑菌浓度(MIC)。一个特定抗菌药物的测试浓度范围应包含能够检测细菌的解释性折点(敏感、中介和耐药)的浓度,同时也应包含质控参考菌株的MIC。稀释法是标准药敏试验的参考方法,但因操作烦琐,不易在常规工作中开展,常用于临床药理研究和方法学的评价。在稀释法中一般常使用微量稀释法(可与自动微生物分析仪配套使用),其方法如下:

6.2.1 肉汤稀释(常量)法

6.2.1.1 使用无菌的13×100mm试管,每一浓度抗菌药物的量至少为1ml,通常为2ml。6.2.1.2 推荐使用Mueller-Hinton(MH)肉汤,在测试葡萄球菌对苯唑西林的敏感性时,应在肉汤中加入2%NaCl(w/v),MH肉汤按制造厂家的要求制备。

6.2.1.3 抗菌药物的制备、贮存和稀释:药物来源用使用抗菌药物标准品或参考药粉,而不应该使用胃肠道用的制品,对所用的抗菌药物都应分析其标准活力单位,称取药物时应使用校正过的分析天平,用准确称取的抗菌药物配制母液,母液浓度至少应为1000 g/ml,或者是最高测试浓度的10倍,少量的母液可分装于无菌的小瓶中,仔细密封后贮存于-60℃或更低,小瓶可以按需要融化并在当天使用,药物的稀释见附录6[技术说明(9)]。为减少抗菌药物的蒸发和变质,试管应盖紧并于4℃~8℃保存,稀释好的抗菌药物溶液应在5天内使用。

6.2.1.4接种物的准备和接种

6.2.1.4.1汤稀释法推荐的接种物最终接种浓度为5×105CFU/mL。首先通过生长法或直接菌

落悬液法制成浊度为0.5McFarland标准的菌液,用肉汤将上述菌液进行1:100稀释(106CFU/ ml),分别取1 mL接种物,加入装有1 mL抗菌药物肉汤稀释液的各支试管和一支不含抗菌药物的生长质控管中,并将每个试管混匀,这样每个抗菌药物浓度都被1:2稀释,菌液浓度为5×105CFU/ ml。见附录6[技术说明(10)]。

6.2.1.4.2按规定配制的菌液应在15分钟内接种,并取一份接种菌液在非选择琼脂平皿上传代培养,以检查接种物的纯度。

6.2.1.5 孵育:接种好的常量稀释管应放在35℃普通空气孵箱中孵育16~20h,当测试嗜血杆菌和淋病奈瑟菌时,应在5%的CO2中孵育20~24小时,对可能的耐甲氧西林葡萄球菌和耐万古霉素的肠球菌孵育应持续整24小时。

6.2.1.6结果判读在读取和报告所测菌株的MIC前,应检测生长质控管或孔(不含抗菌药物)的细菌生长情况,同时还应检查接种物的传代培养情况以确定其是否被污染及接种量是否合适,质控菌株的MIC值应处于合适的质控范围。生长终点的判读可通过含有抗菌药物的管与生长质控管的比较来进行,通常细菌的生长可通过可见的浊度、一个直径≥2mm的沉淀菌斑或多个小菌斑来显示,能抑制细菌生长的最低抗菌药物浓度为该抗菌药物对被测菌的MIC。见附录6[技术说明(11)]。

6.2.2 肉汤稀释(微量)法:操作方法同常量法。多用商品试剂并与自动仪器配套,详见供应商的产品说明书。自制的含药微量稀释盘应用塑料袋密封包装并立即置于≤-20℃(最好≤-60℃)保存至需要时,在-20℃大多数抗菌药物可保存至少6周,但某些不稳定的抗菌药物除外,如亚胺培南、头孢克洛、克拉维酸等。解冻的抗菌药物溶液不能重新冷冻,因反复冻融会加速某些抗菌药物,特别是β-内酰胺类的降解。

7. 几种重要耐药菌的监测

7.1 肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌中ESBLs 检测的筛选与确证试验

表1 肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌中ESBLs 检测的筛选与确证试验

7.2 纸片扩散法预测葡萄球菌中mecA介导的耐药性

表2 纸片扩散法预测葡萄球菌中mecA介导的耐药性

7.3 高水平氨基糖苷类耐药肠球菌(HLAR)、万古霉素耐药肠球菌(VRE)、万古霉素耐药金黄色葡萄球菌(VRSA)的筛选

表3 HLAR、VRE、VRSA的筛选

8. 药敏试验结果的报告

8.1 报告方式:纸片扩散法报告抑菌圈的直经,稀释法报告所测得的MIC,并根据附录3中药敏试验的解释标准报告报告试验结果是敏感、中介或是耐药。

敏感(S):表明使用所测试药物的日常成人剂量在体内达到的浓度能够有效地杀死或抑制细菌生长。

中介(I):包括一些菌株,其抗菌药物MIC 接近于血液和组织中通常可达到的水平,而抗菌药治疗的反应率可能低于敏感株。“中介”意味着药物在生理浓集的部位具有临床效力(如尿液中的喹诺酮类和β-内酰胺类)或者可用高于正常剂量的药物进行治疗时也可有临床疗效(如β-内酰胺类)。此分类还包括一个缓冲区,它可以避免微小的、未能控制的技术因素造成重大的结果解释错误,特别是对那些药物毒性范围窄的药物。对某些重要药物的中介结果应通过定量报告(MIC值)进一步明确区分为敏感或耐药。

耐药(R):表示使用所测试药物的最大剂量在体内达到的浓度仍不能杀死或抑制细菌生长。注意:如果解释标准中仅给出“S”的标准,那是由于对于某些细菌/抗菌药组合,尚不存在耐药菌株,因此除了“敏感”以外没有标明任何其他分类。如果菌株的试验结果提示“不敏感”,应证实细菌鉴定和药敏试验结果,随后将此菌株保藏和递交到参考实验室用NCCLS 参考稀释法证实其结果。

8.2 推测性药敏结果报告:一般情况下,报告的药物必须是试验过的,但如果另一种药物的试验可提供对该药更为准确的结果则可以例外,通常所试药物应与医院处方手册中的药物相匹配,或者在报告时指明哪些未试药物与所试药物有相似的解释结果。药敏试验中常用的试验药物及其代表的药物见表4

表4 药敏试验中常用的试验药物及其代表的药物

试验药物菌种可被推测的抗菌药物结果

苯唑西林耐药葡萄球菌属所有β-内酰胺类,包括酶抑制剂复合药和碳

青霉烯类均耐药

四环素敏感所有菌属对多西环素、米诺环素敏感

红霉素敏感和耐药链球菌属罗红霉素、克拉霉素、阿奇霉素、地红霉素

敏感和耐药

氨苄西林敏感和耐药肠球菌属不产β-内酰胺酶的肠球菌对阿莫西林、哌拉西林及其与酶抑制剂的复合剂敏感和耐药

氨苄西林敏感粪肠球菌亚胺培南敏感

青霉素敏感葡萄球菌属、淋病奈瑟

所有青霉素类、β-内酰胺酶抑制剂复合物、

头孢类、碳青霉烯类敏感

青霉素敏感和耐药肠球菌不产β-内酰胺酶的肠球菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦的敏感和

耐药

头孢噻吩敏感和耐药肠杆菌科头孢匹林、头孢拉啶、头孢氨苄、头孢克罗、头孢羟氨苄敏感和耐药

氨苄西林敏感和耐药所有菌属阿莫西林、巴氨西林、氨环己西林、海他西

林敏感耐药

磺胺异恶唑敏感和耐药所有菌属所有磺胺类敏感和耐药萘啶酸耐药肠杆菌科所有喹诺酮类耐药头孢噻吩/头孢唑林敏

肠杆菌科所有头孢菌素敏感

青霉素敏感链球菌氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢克洛、头孢唑啉、头孢地尼、头孢吡肟、头孢丙烯、头孢噻肟、头孢布烯、头孢曲松、头孢呋辛、头孢泊肟、头孢唑肟、头孢噻吩、头孢匹林、头孢拉定、亚胺培南、氯碳头孢和美洛培南敏感

8.3 选择性药敏结果报告

NCCLS执行标准中对各种非苛养菌和苛养菌进行常规药敏试验和报告时,根据不同的要求分成A、B、C、U等不同的组。A组:用于常规和首选试验,其结果也应常规报告。B组:包含一些临床上重要、特别针对医院感染的药物,可用于首选试验,但只是选择性地报告临床,见附录6[技术说明(12)]。C组:包括替代性或补充性抗菌药物,见附录6[技术说明(13)]。U组:包含某些仅用于治疗泌尿道感染的抗菌药物(如呋喃妥因和某些喹诺酮类药物),对

除泌尿道以外的感染部位分离的病原菌不应常规报告。其他具有较广治疗指征的药物也可包括于U组,主要针对一些特定的泌尿道致病菌(如铜绿假单胞菌)。

为了提高试验报告与临床的相关性,减少滥用广谱抗菌药物造成的多重耐药菌株的流行,各单位应按本规范的要求和临床具体情况决定报告的抗菌药物药敏试验结果。

8.4特殊情况下的药敏结果报告

8.4.1克雷伯菌属、大肠埃希菌和奇异变型杆菌中的产ESBLs菌株应报告对所有青霉素类、头孢菌素及氨曲南耐药。

8.4.2对于沙门菌属和志贺菌属的分离株只有氨苄西林、一种喹诺酮类药物和磺胺甲恶唑/甲氧苄啶可用于常规试验和报告,第一、第二代头孢菌素和氨基糖苷类抗生素体外可能对这些菌株有活性,但临床却无效,所以对上述药物不应报告为敏感。

8.4.3沙门菌属的肠道外分离株应增加测试并报告氯霉素和一种三代头孢菌素的敏感性。

8.4.4肠球菌属对头孢菌素类、氨基糖苷类(仅筛选高水平耐药性)、磺胺甲恶唑/甲氧苄啶和克林霉素在体外可能有活性,但在临床上耐药,所以不能报告对这些药物敏感。

8.4.5对头孢西丁、苯唑西林耐药或证实有mecA基因或PBP2a的葡萄球菌定义为耐甲氧西林的葡萄球菌(MRS),应报告对所有青霉素类,头孢类和其它β-内酰胺类,如阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦和亚胺培南均耐药。

8.4.6从威胁生命的感染(脑膜炎、菌血症、会厌炎和面部蜂窝组织炎)患者的血和脑脊液中分离的流感嗜血杆菌,常规只报告氨苄西林、一种第三代头孢菌素、美洛培南和氯霉素的药敏结果。

8.4.7对分离于脑脊液中的细菌,下列抗菌药物不作为选择药物进行常规报告,因为用这些药物治疗某些细菌引起的感染可能是无效的,这些药物包括:仅通过口服途径给药的Ⅰ和Ⅱ代头孢菌素(除外头孢呋辛钠)、克林霉素、大环内酯类、四环素类、氟喹诺酮类。

8.5 药敏结果报告单的审核

8.5.1 审核药敏试验药物的选择和结果与菌株鉴定是否符合;

8.5.2 单个药物结果与在特定药物种类中活性规则层次是否一致(如,Ⅲ代头孢对肠杆菌科菌活性高于Ⅰ、Ⅱ代头孢);

8.5.3 分离菌对未被证明耐药的药物(规范中仅有“S”标准的药物)是否敏感。

8.5.4 非常见或不一致的结果应进行如下检查确认:1)誊写错误;2)试验污染(重新检查平板上菌株纯度等);3)病人以前的结果(如病人以前分离的相同菌是否具有非常见的抗菌谱)。如果不能查明非常见或不一致结果的原因,必须重新进行药敏试验或菌株鉴定或按次序进行二者试验。

9. 附录

附录1 非苛养菌常规药敏试验和报告中应考虑的抗菌药物的推荐分组(NCCLS)

附录1(续)不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌、嗜麦芽窄食单胞菌药敏试验分组

附录2 苛养菌常规药敏试验和报告中应考虑的抗菌药物的推荐分组(NCCLS)

附录3 非苛养菌稀释法和纸片法药敏试验的解释标准

抗菌药物和细菌MIC(μg/ml)抑菌圈直径(mm)

敏感耐药敏感中介耐药青霉素

青霉素G

葡萄球菌≤0.1 ≥0.25 ≥29 ≤28 肠球菌≤8 ≥16 ≥15 ≤14 苯唑西林

金黄色和路邓葡萄球菌≤2 ≥4 ≥13 11-12 ≤10 其他凝固酶阴性葡萄球菌≤0.25 ≥0.5 ≥18 ≤17 氨苄西林

肠杆菌科≤8 ≥32 ≥17 14-16 ≤13 葡萄球菌≤0.25 ≥0.5 ≥29 ≤28 肠球菌≤8 ≥16 ≥17 ≤16 阿莫西林/克拉维酸

葡萄球菌≤4/2 ≥8/4 ≥20 ≤19 其他细菌≤8/4 ≥32/16 ≥18 14-17 ≤13 氨苄西林/舒巴坦≤8/4 ≥32/16 ≥15 12-14 ≤11 羧苄西林

铜绿假单胞菌≤128 ≥512 ≥17 14-16 ≤13 纸片法:肠杆菌科和不动杆菌

≤16 ≥64 ≥23 20-22 ≤19 稀释法:铜绿以外的其它革兰阴性杆

美洛西林

铜绿假单胞菌≤64 ≥128 ≥16 ≤15 纸片法:肠杆菌科和不动杆菌≤16 ≥128 ≥21 18-20 ≤17

稀释法:铜绿以外的其它革兰阴性杆

哌拉西林

铜绿假单胞菌≤64 ≥128 ≥18 ≤17

≤16 ≥128 ≥21 18-20 ≤17 纸片法:肠杆菌科和不动杆菌

稀释法:铜绿以外的其它革兰阴性杆

哌拉西林/他唑巴坦

铜绿假单胞菌≤64/4 ≥128/4 ≥18 ≤17

≤16/4 ≥128/4 ≥21 18-20 ≤17 纸片法:肠杆菌科和不动杆菌

稀释法:铜绿以外的其它革兰阴性杆

葡萄球菌≤8/4 ≥16/4 ≥18 ≤17 替卡西林

铜绿假单胞菌≤64 ≥128 ≥15 ≤14

≤16 ≥128 ≥20 15-19 ≤14 纸片法:肠杆菌科和不动杆菌

稀释法:铜绿以外的其它革兰阴性杆

替卡西林/克拉维酸

铜绿假单胞菌≤64/2 ≥128/2 ≥15 ≤14 纸片法:肠杆菌科和不动杆菌

≤16/2 ≥128/2 ≥20 15-19 ≤14 稀释法:铜绿以外的其它革兰阴性杆

葡萄球菌≤8/2 ≥16/2 ≥23 ≤22 阿洛西林

铜绿假单胞菌≤64 ≥128 ≥18 ≤17 头孢菌素

头孢孟多≤8 ≥32 ≥18 15-17 ≤14 头孢唑啉≤8 ≥32 ≥18 15-17 ≤14 头孢吡肟≤8 ≥32 ≥18 15-17 ≤14 头孢美唑≤16 ≥64 ≥16 13-15 ≤12 头孢尼西≤8 ≥32 ≥18 15-17 ≤14 头孢哌酮≤16 ≥64 ≥21 16-20 ≤15 头孢噻肟≤8 ≥64 ≥23 15-22 ≤14 头孢替坦≤16 ≥64 ≥16 13-15 ≤12 头孢西丁

阴性杆菌≤8 ≥32 ≥18 15-17 ≤14 金黄色和路邓葡萄球菌≤2 ≥4 ≥20 ≤19 其他凝固酶阴性葡萄球菌≤0.25 ≥0.5 ≥25 ≤24 头孢他啶≤8 ≥32 ≥18 15-17 ≤14 洋葱伯克霍尔德≥21 18-20 ≤17 头孢唑肟≤8 ≥64 ≥20 15-19 ≤14 头孢曲松≤8 ≥64 ≥21 14-20 ≤13 头孢呋辛钠(注射)≤8 ≥32 ≥18 15-17 ≤14 头孢噻吩≤8 ≥32 ≥18 15-17 ≤14 拉氧头孢≤8 ≥64 ≥23 15-22 ≤14 头孢克洛≤8 ≥32 ≥18 15-17 ≤14 头孢克肟≤1 ≥4 ≥19 16-18 ≤15 头孢他美≤4 ≥16 ≥18 15-17 ≤14 头孢泊肟≤2 ≥8 ≥21 18-20 ≤17 头孢丙烯≤8 ≥32 ≥18 15-17 ≤14 头孢布烯≤8 ≥32 ≥21 18-20 ≤17 头孢呋辛酯(口服)≤4 ≥32 ≥23 15-22 ≤14 氯碳头孢≤8 ≥32 ≥18 15-17 ≤14

单环内酰胺类

氨曲南≤8 ≥32 ≥22 16-21 ≤15 碳青霉烯类

亚胺培南≤4 ≥16 ≥16 14-15 ≤13 美罗培南≤4 ≥16 ≥16 14-15 ≤13 洋葱伯克霍尔德≥20 16-19 ≤15 厄他培兰≤2 ≥8 ≥19 16-18 ≤15 氨基糖苷类

阿米卡星≤16 ≥32 ≥17 15-16 ≤14 卡那霉素≤16 ≥25 ≥18 14-17 ≤1 庆大霉素≤4 ≥8 ≥15 13-14 ≤12 肠球菌(高水平耐药)≤500 ≥500 ≥10 7-9 ≤6 链霉素≥15 12-14 ≤11 奈替米星≤12 ≥32 ≥15 13-14 ≤12 妥布霉素≤4 ≥8 ≥15 13-14 ≤12 糖肽类

替考拉宁

葡萄球菌≤8 ≥32 ≥14 11-13 ≤10 肠球菌≤8 ≥32 ≥14 11-13 ≤10 万古霉素

葡萄球菌≤2 ≥16

肠球菌≤4 ≥32 ≥17 15-16 ≤14 大环内酯类

阿奇霉素≤2 ≥8 ≥18 14-17 ≤13 克拉霉素≤2 ≥8 ≥18 14-17 ≤13 地红霉素≤2 ≥8 ≥19 16-18 ≤15 红霉素≤0.5 ≥8 ≥23 14-22 ≤13

抗菌药物使用情况分析

抗菌药物使用情况分析 发表时间:2014-03-25T15:16:19.310Z 来源:《中医学报》2013年12月第28卷供稿作者:李桂芬[导读] 在使用抗菌药物的半个世纪以来,很多传染病得以消灭,严重的细菌感染性疾病得到控制。 李桂芬 承德县医院急诊科河北承德067400 【摘要】 目的:了解医院呼吸内科住院患者抗菌药物使用情况,促进抗菌药物的使用合理性。方法:采用回顾性的方法,调查医院2011年10月—2012年1月呼吸科出院的150例住院患者的病例,内容包括患者的性别、年龄、诊断、药物种类、用法用量、联合用药的合理性评价等。结果:150例患者应用抗菌药物13种,其中使用最多的是头孢菌素类。联合药物中以头孢菌素类+阿奇霉素最多用。抗菌药使用平均天数(8±1 5)d,抗菌药物不合理使用情况分析以联合用药不恰当或重复用药最多见。结论:医院的呼吸内科的抗菌药物使用情况基本遵循安 全、有效、经济、合理的原则。 【关键词】抗菌药物;合理用药【中图分类号】R978 2+4 【文献标识码】B【文章编号】1674 8999(2013)12 0162 01 抗菌药物一般是指具有杀菌或抑菌活性的药物,在使用抗菌药物的半个世纪以来,很多传染病得以消灭,严重的细菌感染性疾病得到控制。抗菌药物在人类与疾病斗争中立下了不可磨灭的功劳。但随着抗菌药物的广泛应用,抗菌药物的不合理使用现象依然存在。鉴于呼吸科是实施抗感染治疗的主要科室,抗菌药物的应用较为普遍,对我院呼吸内科2011年10月~2012年1月的出院病历进行了调查分析,在明确指征下选用适宜的抗菌素,避免毒性反应、不良反应的发生及致病菌的耐药性等。1资料与方法 1 1一般资料:2011年10月~2012年1月医院呼吸内科出院患者病历中随机抽取的150例使用抗菌药物的病历进行了调查。患者年龄25—85岁,男66例占44%,女84例占56%。平均住院天数(8±1 5)d。主要临床诊断为:肺部感染、慢性阻塞性肺气肿、支气管哮喘、胸腔积液等。 1 2方法:详细统计每例患者的抗菌药物的应用情况,内容包括患者的年龄、性别、临床诊断、药品名称、用法用量、用药时间、联合用药及过敏等情况,进行用药合理性评价。分析医院抗菌药物的使用的合理性。2结果 2 1抗菌药物应用情况:150例中,应用抗菌药物13种,其中使用最多的是头孢菌素类。抗菌药物使用率位居前7位的药物(见表1)。表1抗菌药物使用率前7位(%) 2 2抗菌药物联用情况:以单种药物为主有52例,两种联用药80例,三种联用药8例。联用药中以阿奇霉素+头孢菌素最多用。 2 3抗菌药使用疗程:抗菌药使用平均天数(8±1 5)d,疗程5—20d。 2 4抗菌药物不合理使用情况分析[1]:根据《抗菌药物临床应用指导原则》及具体病例的情况将不合理用药情况分为6类:⑴用药无指征;⑵用药时间过长,过短或换药频繁;⑶剂量不足或偏大;⑷不恰当联合用药⑸病原菌产生耐药后继续使用;⑹过早停药或感染控制已多日而不及时停药。见表Ⅱ。 2 5病原学检查及药敏试验:150例使用抗菌药物的病例中,有110例进行了病原学检查,检查率75%,检出率68%,药敏试验率98%。 3讨论 150例病例中患者的主要病原菌:肺炎链球菌、流感杆菌、革兰阴性杆菌等。头孢哌酮舒巴坦钠+阿奇霉素使用比较多,主要由于病例中,老年人数多以及有基础病,且长期滥用抗菌药物,细菌耐药性的增加与抗菌药物用量增大呈相关性[2]。本次调查中,大多医师未根据各药的药理学特点、患者的生理、病理特点了解并存疾病的现状,确定用药方案,需要医师使治疗“个体化”,力争最佳疗效。应尽早做病原学检查和药敏试验,正确提取痰培养以及确定痰中病原体是正确使用抗菌药物的有力依据(见表2)。表2抗菌药物不合理使用情况(%)

抗菌药物敏感性试验的技术要求

抗菌药物敏感性试验的技术要求 1 范围 本标准规定了临床抗菌药物敏感性试验的技术要求,包括常规药敏试验的药物选择和报告、药敏试验方法、各种属细菌药敏试验、常见菌特殊耐药表型检测、药敏试验的质量控制、商品化药敏试验检测系统的性能验证。 本标准适用于开展临床微生物学检验的各级临床实验室。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 抗微生物药物敏感性试验Antimicrobial susceptibility testing 检测微生物(本文件特指细菌)对抗微生物药物(本文件特指抗菌药物)的体外敏感性,以指导临床合理选用药物的微生物学试验,简称药敏试验。 2.2 最低抑菌浓度Minimal inhibitory concentration;MIC 在琼脂或肉汤稀释法药物敏感性检测试验中能抑制肉眼可见的微生物生长的最低抗菌药物浓度。2.3 折点Breakpoint 能预测临床治疗效果,用以判断敏感、中介、剂量依赖型敏感、耐药、非敏感的最低抑菌浓度(MIC)或者抑菌圈直径(mm)的数值。 2.3.1 敏感Susceptible;S 当抗菌药物对分离株的MIC值或抑菌圈直径处于敏感范围时,使用推荐剂量进行治疗,该药在感染部位通常达到的浓度可抑制被测菌的生长,临床治疗可能有效。 2.3.2 中介Intermediate;I 当菌株的MIC值或抑菌圈直径处于中介时,该数值接近药物在血液和组织中达到的浓度,从而治疗反应率低于敏感菌群。该分类意味着采用高于常规剂量治疗时或在药物生理浓集的部位,临床治疗可能

有效。该分类同样可作为“缓冲域”,以防止由微小、不可控的技术因素导致的重大偏差,尤其是毒性范围较窄的药物。 2.3.3 剂量依赖型敏感Susceptible-dose dependent;SDD 细菌菌株对抗菌药物的敏感性依赖于抗菌药物的剂量。当某种药物对菌株的MIC或抑菌圈直径在SDD 范围时,临床可通过提高剂量和(或)增加给药频率等修正给药方案以达到临床疗效。 2.3.4 耐药Resistant;R 当抗菌药物对分离株的MIC值或抑菌圈直径处于该分类范围时,使用常规治疗方案,该药在感染部位所达到的药物浓度不能抑制细菌的生长,和(或)被测菌株获得特殊耐药机制,且治疗性研究显示该药临床疗效不确切。 2.3.5 非敏感Nonsusceptible;NS 对于那些因未现或罕现耐药,而仅具有敏感折点的抗菌药物,当该药对某分离株的MIC值高于或抑菌圈直径低于敏感折点时,此分类为非敏感。 2.4 流行病学界值Epidemiological cutoff value;ECV 将微生物群体区分为有或无获得性耐药的MIC值或抑菌圈直径,是群体敏感性的上限。根据ECV,可将菌株分为野生型和非野生型。 2.4.1 野生型 Wild-type;WT 根据ECV值,将抗菌药物(包括抗真菌药物)评估中未获得耐药机制或无敏感性下降的菌株定义为野生型。 2.4.2 非野生型Non-wild-type;NWT 根据ECV值,将抗菌药物(包括抗真菌药物)评估中获得了耐药机制或存在敏感性下降的菌株,定义为非野生型。 2.5 效价Potency 抗菌药物中具有抗菌活性的成分,通过同类标准物质测定得出。单位mg/g、IU/g或用百分比表示。

不常见非发酵菌对常见抗菌药物敏感性分析

不常见非发酵菌对常见抗菌药物敏感性 分析 (作者:___________单位: ___________邮编: ___________) 作者:邬全会卓超苏丹虹陈冬梅袁锦屏 【摘要】目的了解临床分离的伯克霍尔德菌属、金色杆菌属、产碱杆菌属等不常见非发酵菌的耐药性。方法从2004年~2006年临床各种标本中分离到的不常见革兰阴性杆菌用VITEK-2全自动微生物分析仪进行检测鉴定,药物敏感性试验采用纸片扩散法。数据分析采用WHONET5.4软件进行处理、统计和分析。结果两年中中山大学第一附属医院共收集患者首次分离株118株,其中伯克霍尔德菌属47株(其中洋葱伯克霍尔德菌41株,皮氏伯克霍尔德菌6株),金色杆菌属44株(其中脑膜脓毒性金黄杆菌17株,产吲哚金黄杆菌23株),产碱杆菌属27株(其中粪产碱杆菌13株,木糖氧化无色杆菌12株)。 96.6%的菌株来源于痰标本。对伯克霍尔德菌属有较强体外抗菌活性的依次为:复方磺胺甲口恶唑(87.2%)、哌拉西林/三唑巴坦(87.0%)、左氧氟沙星(85.3%)、头孢吡肟(83.0%)、头孢他啶(78.6%)和头孢哌酮/舒巴坦(78.3%)。对金色杆菌属有较强体外抗菌活性以复方磺胺甲口恶唑(87.5%)最高。对产碱杆菌属敏感性较高的药物分别为头孢哌

酮/舒巴坦(84.6%)和美罗培南(77.8%)。结论头孢哌酮/舒巴坦对三种非发酵菌都有较高体外抗菌活性。常规实验室鉴定方法易将三种菌相互混淆,甚至与氧化酶阴性的非发酵菌混淆,这可能是造成各地报道药敏结果差异的原因之一。 【关键词】伯克霍尔德菌属;金色杆菌属;产碱杆菌属;敏感性;头孢哌酮/舒巴坦; ABSTRACT Objective To investigate the antimicrobial susceptibility of uncommon nonfermenting Gram-negative bacilli such as Burkholderi spp., Chryseobacterium spp. and Alcaligenes spp. from a hospital in Guangzhou from 2004 to 2006. Methods Disc diffusion test (KB methods) was employed to study the antimicrobial susceptibility. WHONET 5.4 was applied for date analysis. Results In two years of study from 2004 to 2006, 118 strains were isolated firstly from each patient, including 44 strains of Burkholderia spp. (41 strains of Burkholderia cepacia), 41 strains of Chryseobacterium spp. (17 C. meningosepticum and 23 C.indologenes), 27 strains of Alcaligenes spp. (13 A.faecailis and 12 A.xylosoxidans), 96.6% of strains were isolated from sputum. The susceptibility rates of Burkholderia spp. to trimethoprim/sulfamethoxazole (SMZ/TMP), piperacillin/tazobactam, levofloxacin, cefepime, ceftazidime and cefoperazone/sulbactam were 87.2%, 87.0%,

抗菌药物使用情况分析及改进

2014年5月份抗菌药物使用情况分析及改进 一、药占比、抗菌药物使用率、使用强度: 2014年5月份药占比、抗菌药物使用率和使用强度均继续下降,分别达到39.75、49.3150.2和47.1442.81。药占比和抗菌药物使用率较4月份分别上升了0.9和0.89,抗菌药物使用强度持续下降,比上月降低了4.33DDDS/100人天。药占比和抗菌药物使用率增高的原因经调查主要是一些较常期住院的老病人因为三夏季节的临近,比较集中的办理出院手续,这些长期住院的病人一方面存在或多或少的感染情况,另一方面诊断明确,慢性病多,治疗检查项目少、用药多,因此抗菌药物的使用率和药占比都较高,所以拉升了这两项指标。这两项指标仍然在国家和省卫计委的控制标准以内。抗菌药物使用强度虽然降低幅度较大,已经接近国家要求三级综合医院“努力控制抗菌药物使用强度争取达到40以下”的目标。 药占比超标的科室继续由质控科按标准扣罚科室奖金。对于抗菌药物使用率超标的科室同样的点数扣罚科室奖金。 二、药物及抗菌药物消耗情况: 抗菌药物使用金额前十名的药品如下表:

抗菌药物使用量前十名的药品如下表:

使用金额前十名的药品如下表: 前五名的药品使用量和使用金额较前两个月没有大的变化。5月28日召开药事管理与药物治疗委员会,决定对抗菌药物使用累计3个月居于前三名的美洛西林舒巴坦(0.625和2.5两个规格)进行15%降价处理,对药物使用金额大的新海能降价进药、对耐药率高于75%

的头孢唑林(新泰林)暂停药处理。要求药学部、医务部、监察科、审计科、党办、招标办和采购办共同联合对供应商进行降价进药和停药。进一步加大抗菌药物的监控和干预力度,降低抗菌药物的使用率和使用强度。 三、微生物送检率: 微生物送检率目前除特殊使用级抗菌药物的达标以外,非限制级和限制级抗菌药物的病原学送检率均不达标,问题的关键在于意识和观念的改变。目前对抗菌药物使用前送检率没有采取处罚措施。而特殊抗菌药物的使用有审批机制控制,没有病原学检查,特殊级抗菌药物一般无法使用,所以送检率高。下一步将探索控制到人的做法,如果限制级抗菌药物使用率不能达标,降低抗菌药物的使用权限。 微生物送检情况如下表:

不常见非发酵菌对常见抗菌药物敏感性分析

文章编号:100128689(2007)1220741204不常见非发酵菌对常见抗菌药物敏感性分析 邬全会1 卓超2,3 苏丹虹2 陈冬梅1 袁锦屏2 (1中山大学附属第一医院, 广州510080; 2广州呼吸疾病研究所, 广州510120) 摘要: 目的 了解临床分离的伯克霍尔德菌属、金色杆菌属、产碱杆菌属等不常见非发酵菌的耐药性。方法 从2004年~2006年临床各种标本中分离到的不常见革兰阴性杆菌用V IT EK22全自动微生物分析仪进行检测鉴定,药物敏感性试验采用纸片扩散法。数据分析采用W HON ET5.4软件进行处理、统计和分析。结果 两年中中山大学第一附属医院共收集患者首次分离株118株,其中伯克霍尔德菌属47株(其中洋葱伯克霍尔德菌41株,皮氏伯克霍尔德菌6株),金色杆菌属44株(其中脑膜脓毒性金黄杆菌17株,产吲哚金黄杆菌23株),产碱杆菌属27株(其中粪产碱杆菌13株,木糖氧化无色杆菌12株)。9616%的菌株来源于痰标本。对伯克霍尔德菌属有较强体外抗菌活性的依次为:复方磺胺甲口恶唑(8712%)、哌拉西林 三唑巴坦(8710%)、左氧氟沙星(8513%)、头孢吡肟(8310%)、头孢他啶(7816%)和头孢哌酮 舒巴坦(7813%)。对金色杆菌属有较强体外抗菌活性以复方磺胺甲口恶唑(8715%)最高。对产碱杆菌属敏感性较高的药物分别为头孢哌酮 舒巴坦(8416%)和美罗培南(7718%)。结论 头孢哌酮 舒巴坦对三种非发酵菌都有较高体外抗菌活性。常规实验室鉴定方法易将三种菌相互混淆,甚至与氧化酶阴性的非发酵菌混淆,这可能是造成各地报道药敏结果差异的原因之一。 关键词: 伯克霍尔德菌属; 金色杆菌属; 产碱杆菌属; 敏感性; 头孢哌酮 舒巴坦; 中图分类号:R378 文献标识码:A An ti m icrob i a l susceptib il ity of uncomm on nonferm en ti ng Gram-nega tive bac ill i W u Q uan2hu i1, Zhuo Chao2, Su D an2hong2, Chen Dong2m ei1 and Yuan J in2p ing2 (1T he F irst A ffiliated Ho sp ital,Sun Yat2Sen U n iversity, Guangzhou510080; 2Guangzhou In stitu te of R esp irato ry D iseases, Guangzhou510120) ABSTRACT Objective To investigate the an ti m icrob ial su scep tib ility of uncomm on nonferm en ting Gram2negative bacilli such as B u rkhold eri spp.,Ch ry seobacterium spp.and A lca lig enes spp.from a ho sp ital in Guangzhou from2004to2006. M ethods D isc diffu si on test(KB m ethods)w as em p loyed to study the an ti m icrob ial su scep tib ility.W HON ET5.4w as app lied fo r date analysis. Results In tw o years of study from2004to2006,118strain s w ere iso lated firstly from each p atien t,including44strain s of B u rkhold eria spp. (41strain s of B u rkhold eria cep acia),41strain s of Ch ry seobacterium spp.(17C.m en ing osep ticum and23 C.ind olog enes),27strain s of A lca lig enes spp.(13A.f aeca ilis and12A.xy losox id ans),9616%of strain s w ere iso lated from sp u tum.T he su scep tib ility rates of B u rkhold eria spp.to tri m ethop ri m su lfam ethoxazo le (S M Z TM P),p i p eracillin tazobactam,levofloxacin,cefep i m e,ceftazidi m e and cefop erazone su lbactam w ere 8712%,8710%,8513%,8310%,7816%and7813%,resp ectively.S M Z TM P w as the m o st active agen t again st Ch ry seobacterium spp.w ith the su scep tib le rates of8715%.Cefop erazone su lbactam and m erop enem had the m o st activity again st A lca lig enes spp.w ith su scep tib le rates8416%and7718%,resp ectively. Conclusion Cefop erazone su lbactam w as the better agen t again st the th ree sp ecies and these sp ecies w ere no t distingu ishal by rou tine labo rato ry test,oven so w ith oxydase2negative non2ferm en ting Gram2negatine bactilli w h ich m ay be one of reason s cau sing the differen t su scep tib le rates am ong vari ou s labo rato ries. KEY WORD S B u rkhold eri spp.; Ch ry seobacterium spp.; A lca lig enes spp.; A n ti m icrob ial su scep ti2 b ility; Cefop erazone su lbactam 收稿日期:2006210213 修回日期:2007202228 基金项目:广州市科技局重点攻关项目(编号:20006Z12E0141)。 作者简介:邬全会,男,生于1959年,主管技师。 3通讯作者,Chao-sheep@https://www.360docs.net/doc/9713397165.html,

住院患者抗菌药物使用情况分析

年月住院患者抗菌药物使用情况分析

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2014年3月住院患者抗菌药物使用情况分析 2014年3月随机抽取出院病历,分别对抗菌药物使用率、各科室抗菌药物使用比例、临床分级使用及病原菌检测情况进行统计分析。对医嘱进行点评,分析抗菌药物的合理使用情况,具体反馈如下 1. 各科室抗菌药物使用情况: 备注:科室药品收入包括本科门诊收入 从各科室抗菌药物占药品收入比例可以看出各科室抗菌药物使用相对而言差别较大,可能与各科室收住病人差异及使用药品的不同有关,但如此大的差距说明有的科室相较更应加强抗菌药物的使用。 2 合理用药分析 1.个别科室抗菌药物使用单品过于集中,预防用药档次过高。 2克林霉素不作为手术预防首选药,应在头孢类过敏或怀疑有厌氧菌感染情况下选用 2.2.1 用药指征的掌握 明确用药指征是抗菌药物应用指导原则的首先要考虑的问题,我院就用要选择主 科室 项目 儿科 内二科 内一科 五官科 门急诊 内三科 骨科 妇科 外二 外一 中医 抗菌药物收入 占药品收入比例(%) 10.60 9.57 6.26 27 26.91 6.50 11.55 10.66 34.82 25.77 4.95 抗菌药物使用率(%) 46 43 26 80 26 46 33 60 85 73 46

要表现在:①、没有根据病人的病情选择适当的药物,抗菌药物使用起点偏高。如白内障手术患者,临床用头孢哌酮舒巴坦进行治疗。②、联合用指征掌握不严,多种抗菌药物联合应用。患者诊断为骨折及皮肤挫裂伤,无病原菌检查及药敏试验,医生却联合使用抗菌药物。 2.2.2 抗菌药物给药时间间隔分析 头孢类、青霉素类药物为时间依赖性抗菌药物有,其杀菌效果取决于血药浓度超过最低抑菌浓度的时间,与血药峰浓度高低不相关。头孢菌素、青霉素类药物半衰期较短,日剂量应分为3~4次且0.5~1小时内滴完。我院头孢菌素类每日一次给药较为普遍,提示给药间隔不尽合理。 2.2.3 用药不良反应分析 抗菌药物在临床的广泛应用,尤其是住院患者静脉给药为注射用药的主要途径,发生的不良反应不容忽视,无论是单用还是联合使用,头孢菌素的不良反应发生率在我院较其他药发生率要高,这与头孢菌素类使用品种较多及临床使用频率成正相关性,从不良反应类型来看,以皮肤过敏反应为主,主要表现为皮疹、荨麻疹及瘙痒等症状,其它临床表现为潮红、腹痛、腹泻、紫绀等较少见。这些症状较为常见,一般均易治愈。 2.2.4 抗菌药物的序贯疗法 序贯疗法是指抗菌药物在治疗严重感染性疾病时,初期采用胃肠外给药(一般为静脉给药) ,当病人的情况一经改善(通常在用药3~5 d) ,迅速转为口服抗菌药物的一种方法。 整改措施: 1.加强学习《处方管理办法》、《抗菌药物临床应用管理办法》、加强学习 相关的药理知识,提高医务人员合理用药水平。 4

抗菌药物使用情况分析归纳

For personal use only in study and research; not for commercial use 2012年1月干部老年科抗菌药物使用情况分析总结 一、住院病人用药情况分析 1、抗菌药物使用率1月共出院患者56人,其中使用抗菌药物的病历数为22份,抗菌药物使用率为39.28%,等同于上级规定的不高于40%的比例。 2、青霉素药物使用的病历数为6份,占使用抗菌药物总病历数的27.2%。 3、头孢类药物使用的病历数为10份,占使用抗菌药物总病历数的45.45%。 4、大环内酯类药物使用的病历数为 6份,占使用抗菌药物总病历数的27.2%。 5、喹诺酮类药物使用的病历数为4份,占使用抗菌药物总病历数的18.18%。 6、氨基糖苷类药物使用的病历数为2份,占使用抗菌药物总病历数的9.09%。 7、碳氢霉烯类药物使用的病历数为5份,占使用抗菌药物总病历数的22.7%。 8、二联以上抗菌药物使用的病历数为10份,占使用抗菌药物总病历数的45.45%,应用的抗菌指征和抗菌药物种类的选择均较正确合理,但存在1例用药时程过长。 综上所述,我科住院病人应用抗菌药物情况总体上看较为合理,抗菌药物分级管理合格率为100%,临床合理用药水平正在不断提高。 二、总结 从病历的情况来对我科抗菌药物使用情况进行分析总结,可以看出我科抗菌药物的使用日趋合理,抗菌药物分级管理合格率为100%。1月住院病人抗菌药

物使用率为39.28%,较去年同期下降了1.2 %,说明了我院合理应用抗菌药物的工作已制度化规范化,但存在1例用药时程过长,因此,提请各位临床医师注意遵循《抗菌药物临床应用指导原则》等文件的规定,合理应用抗菌药物,降低细菌耐药率,以安全、有效、经济、合理的用药为患者提供优质的医疗服务。 2012年2月干部老年科抗菌药物使用情况分析总结

实验11-抗生素的抑菌试验

实验十一抗生素的抑菌试验 一目的要求 1、掌握纸片法测定抗生素抗菌作用的基本方法 2、了解抗生素的抗菌谱 二实验原理 抗生素是某些植物与微生物生长到对数期前后所产生的次生代谢产物,其在低浓度下可其它微生物生长具抑制作用或杀死作用的物质。抗生素对敏感微生物的作用机理分为抑制细胞壁的形成、破坏细胞膜的功能、干扰蛋白质合成及阻碍核酸的合成。 由于不同微生物对不同抗生素的敏感性不一样,抗生素的作用对象就有一定的范围,这种作用范围成为抗生素的抗菌谱,作用对象广的抗生素称为广谱抗生素,作用对象少的抗生素称为窄谱抗生素。而且当某种抗生素长时间用于敏感微生物生长后,即使同一种菌的不同菌株对不同药物的敏感性也常发生改变,甚至出现耐药菌株,亦即产生抗性菌株,则抗生素将失去对抗性菌株生长的抵制,只以采用新的抗生素才可能控制抗性菌株的生长与繁殖,因而不断开发新的抗生素是保健人类身体健康的重要工作。新抗生素产生菌的分离筛选应通过拮抗菌发酵,然后以发酵产物进行抗菌活性实验,根据实验结果而获得产新抗生素的菌株。微生物代谢产物的抗菌活性常以管碟法与纸法进行检测,根据透明抑菌圈的有无与大小作为依据。 三实验器材 1、菌种枯草杆菌、大肠杆菌。 2、培养基MH(Mueller-Hintion)琼脂。 3、试剂青霉素、链霉素。 四方法步骤 1、无菌滤纸片以孔径6mm打孔器将滤纸打为圆形纸片,放入培养皿内,121℃蒸汽湿热灭菌,100℃烘干2h。 2、抗生素溶液制备将取适量青霉素、链霉素,以无菌水溶解。 3、指示菌悬浮液的制备枯草杆菌、大肠杆菌斜面菌种分别以无菌水洗下菌苔细胞,到入无菌三角瓶内,制备适宜浓度的细胞悬浮液。 4、混菌平板制备取批示菌细胞悬浮液1mL加入无菌培养皿内,再加入温度为43~45℃的PDA培养基或牛肉膏蛋白胨琼脂培养基20mL,立即振荡使细胞与培养基混合均匀,静置冷凝。 5、平板加抗生素溶液将滤纸片在抗生素溶液中充分浸泡2min以上,然后将纸片放于混菌平板上,每皿呈三角形放3点,每点贴放纸片2张。 6、培养与观察将平板放于33℃左右的温度培养,每24h测量一次透明抑菌圈直径,共测量3次。

我院抗菌药物的使用现状及存在的问题分析

我院抗菌药物的使用现状及存在问题分析 中国就是抗菌药物生产与使用大国,抗菌药物不合理使用现象较为严重,WHO 对世界不同地区的监测报告指出,中国全国医院抗菌药物使用率高达74%,联合使用>2种抗菌药物的比率占抗菌药物使用的58%,远远高于30%的国际水平。就整个国家来说,有50%的人患病时使用抗菌药物,但事实上,只有25%的患者患病时需要使用。近年来,滥用抗生素导致的细菌耐药率上升、新的多重耐药菌的不断出现,我国卫生部为了进一步规范抗菌药物的使用,先后发布了《抗菌药物临床应用指导原则》、《抗菌药物临床应用管理办法》、《卫生部办公厅关于抗菌药物临床应用管理有关问题的通知》等文件,2011年至2013年连续3年的“全国抗菌药物临床应用专项整治活动方案的出台,更就是掀起了督查医院不合理应用抗菌药物的热潮。 一、我院使用抗菌药物情况 1、整治前 抗菌药物在我国滥用现象明显,在我院,情况也不容东观。如抽查门、急诊处方时,发现诊断为感冒、发烧甚至有一例诊断为病毒性上呼吸道感染的患者都应用了抗菌药物。根据统计,2011年共抽查了4174张门、急诊处方,使用了抗菌药物处方1499张,占35、91%,属于不合理应用抗菌药物处方有89张,占5、94%。联用2种抗菌药物的处方有501张,占33、42%,联用三种抗菌药物处方的有12张,占0、80%。住院科室的情况也好不了多少,在病历抽查中发现,无论就是哪一类的切口手术都会在术后使用抗菌药物,而且很多时候都就是二联甚至就是三联的。住院患者使用率达70%,外科高达97%,更让人难以置信的就是,皮肤科抗菌药物使用率竟然100%,DDD值也大得吓人,192DDD,全院抗菌药物使用强为89DDD。抗菌药物用金额占药品使用总金额的37、82%,在医院药品使用金额排名前10位中,就有3到4个品种就是抗菌药物,其中1到2个品种就是排名前5的,滥用现象明显。 2、整治后 随着一系列整治抗菌药物滥用的相关文件出台,我院按照上级的部署要求开展了抗菌药物专项管理与治理活动,并陆续制定了相关的规章制度来加强医院抗菌药物临床应用管理,提高抗菌药物临床应用水平,控制细菌的耐药,现取得了一定的成效。据统计,2015年1月-8月抽查门、急诊处方7343张,使用了抗菌药物处方1136张,占15、47%,属于不合理使用抗菌药物处方12张,占1、06%,联用2种抗菌药物的处方有42张,占3、70%,联用三种抗菌药物处方的有12张,占0、26%。根据2015年抗菌药物专项点评结果显示,我院住院患者抗菌药物使用率为

抗菌药物敏感性分析

一概况 2011年第二季度我院送检的细菌培养标本共766份,阳性203例(阳性率26.5%)阳性率较一季度略有上升;其中血培养225例,阳性34例(阳性率15.1%);其他培养541份,阳性193例(阳性率35.7%)。阳性率排在前几位的细菌依次是:1)肠杆菌科细菌共57例,其中:大肠埃希菌25例,肺炎克雷伯菌12例,沙雷菌7例,阴沟肠杆菌5例,奇异变形杆菌6例,产气肠杆菌2例; 2)非发酵菌55例,其中铜绿假单胞菌26例,鲍氏不动杆菌18例,洋葱伯克霍尔德菌11例;3)真菌47例(其中白色念珠菌37例,光滑8例,克柔2例;4)葡萄球菌属34例(其中金葡8例,凝固酶阴性葡萄球菌26例)。 二本季度常见细菌抗生素敏感性分析 表1葡萄球菌属(共32例)抗生素敏感性分析 抗生素 金葡菌(n=8)凝固酶阴性葡萄球菌(n=24)敏感株数敏感率% 敏感株数敏感率% PEN 青霉素0 0 1 4.2 TSU 复方新诺明7 87.5 16 66.7 GEN 庆大霉素 4 50 11 45.8 ERY 红霉素0 0 4 16.7 CLI 克林霉素 3 37.5 10 41.7 TET 四环素 5 62.5 17 70.8 MIN 米诺环素7 87.5 21 87.5 VAN 万古霉素8 100 24 100 RFA 利福平 5 62.5 20 83.3 NOR 诺氟沙星 3 37.5 10 41.7 LVX 左氧氟沙星 5 62.5 11 45.8 FUR 呋喃妥因8 100 24 100 QDA 喹奴普汀达福普汀8 100 23 95.8 本季度检出的革兰染色阳性球菌未发现万古霉素耐药株;MRSA的检出率为62.5%(5/8),MRCNS的检出率为75%(18/24)。由表1可见,二季度金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌的药物敏感性相似,葡萄球菌属对万古霉素、呋喃妥因、喹奴普汀达福普汀、米诺环素及复方新诺明的敏感率较高,而对青霉素、庆大霉素、红霉素、克林霉素及诺氟沙星的耐药性较为普遍,说明该几种药物已不适宜用于葡萄球菌引起的感染。

纸片法抗菌药物敏感实验操作标准

纸片法抗菌药物敏感实验操作标准 4.3标准比浊管 用硫酸钡比浊管(0、5麦氏比浊标准),标定接种菌液浓度。比浊管制备方 法如下:(1)0、048mol/L BaCl 2,(1、175% w/v BaCl 2 ·2H 2 O)0、5ml, 加到99、5ml的0、18 mol/L(0.36N)H 2SO 4 (1%v/v)溶液中,制成比浊管;(2) 用光径为1cm的分光光度计测定光吸收来标定比浊管。0、5麦氏标准比浊管在625nm波长的吸收光度应为0、08-0、1;(3)选管径与制备菌液试管相同的螺口试管,每管分装4-6ml;(4)将试管帽拧紧,放室温暗处保存;(5)用前,将比浊管在旋转振荡器上混匀。如出现大颗粒,应更换;(6)每个月更换比浊管或复检比浊管的浊度。 5操作步骤 5、1 制备接种菌液 5、1、1增菌法步骤如下:(1)选琼脂平板上形态相同的菌落至少4-5个,用接种环挑其顶部,移至4-5ml肉汤或大豆酪蛋白消化液中;(2)置35℃培养至菌液浓度达到或超过比浊管浓度(一般需2-6小时),浓度约1-2×108CFU/ml;(3)用生理盐水或肉汤校正菌液浓度,与比浊管相同。可用光电比浊。目测比浊须在适当光照下以黑色线条为反衬。 5、1、2 直接菌悬液法步骤如下:(1)做常规药敏试验,可直接用过夜培养的菌落(必须用无选择性培养基平板,如普通琼脂培养基)在盐水或肉汤中制备接种菌液。菌液浓度调至0、5麦氏管;(2)此法适用于在肉汤培养基中生长不好的细菌如嗜血杆菌、淋病奈瑟氏菌与链球菌及葡萄球菌的甲氧苯青霉素或苯唑青霉素的耐药试验;(3)当用此法做复方磺胺药的试验时,从平板上直接挑菌落时会携带相当量的拮抗剂,造成敏感菌株的抑菌环内出现轻微的生长菌膜。 5.2 接种平板步骤如下:(1)校正的菌液须在15分钟内使用。用一无菌棉试子蘸取菌液并在上端管壁旋转挤压几次,去掉过多的菌液;(2)用试子涂布整个琼脂平板表面,反复涂布几次,每次将平皿旋转60度,保证涂布均匀。(3)将平皿盖打开3-5分钟,使培养基表面的水份吸收掉。然后贴药敏纸片;(4)注意:避免用过浓的菌液,禁用未经稀释菌或其她不标准菌液接种平板。 5、3贴纸片 (1)接种平板后,贴上药敏纸片。用镊子或针尖压一下纸片使其与培养基表面贴牢。纸片要贴得均匀,纸片与纸片中心距离不得小于24mm。原则上,直径150mm得平板贴12张纸片,直径100mm平板贴5张纸片。纸片贴后不应再移动,因为有些药物会立即扩散;(2)贴上纸片15分钟内,须把平板倒放在35℃恒温箱中。因为抑菌环解释标准就是在普通环境中标定的,所以除嗜血杆菌与淋病 奈瑟氏菌外,平板不可放在高CO 2的环境中。CO 2 与某些因素作用可使抑菌环增 大。 5、4 读取结果 (1)经16-18小时培养后,观察结果。菌液浓度适合且涂得好,抑菌环规则,细菌呈融合生长。如果出现单个菌落,说明接种量小,需重做试验,测量抑菌环直径须包含纸片直径:手持平皿从背面目测检查每块平板,借反射光(黑色无放光背景),用卡尺、普通尺或特制的模板量取抑菌环直径,单位为毫米。培养基中如果加了血液,须打开平皿盖,借反射光,从正面量抑菌环。如果就是葡萄球菌或肠球菌,须培养24小时后,经投射光检查苯唑青霉素与万古霉素的抑菌

细菌对抗菌药物敏感试验

怀化医专《微生物学检验》教案编号:10

细菌对抗菌药物敏感试验 药敏试验(antimicrobial susceptibility,AST) (一)概念:在体外检测药物抑制或杀死细菌能力的试验。 (二)检测意义: 1、疾病的治疗:指导用药。 2、耐药菌检测和流行病学调查。 3、评价新药抗菌作用。 4、某些菌种的鉴定。 第一节临床常用的抗菌药物 抗菌药物:是指具有杀菌或抑菌活性的抗生素和化学合成药物。 一、青霉素类抗生素: 青霉素种类抗菌活性 1、天然青霉素不产青霉素酶的G+G-球菌、普雷沃菌等。 青霉素G、青霉素V 2、耐青霉素酶青霉素产青霉素酶的G+G-球菌 甲氧西林、奈夫西林、苯唑西林等 3、广谱青霉素青霉素G敏感细菌、大部分大肠埃希菌、 氨苄西林、阿莫西林奇异变形杆菌、流感嗜血杆菌等G-菌 替卡西林、羧苄西林、氨苄西林无效的G-菌,产β-内酰胺酶 美洛西林、派拉西林克雷伯菌、铜绿假单胞菌、肠杆菌、厌氧菌 二、头孢菌素类抗生素: 1、第一代头孢菌素 (头孢噻啶、头孢噻吩、头孢氨苄、头孢唑啉、头孢羟氨苄等) 作用:对G+菌作用强,如金葡菌、链球菌等。 2、第二代头孢菌素 (头孢羟唑、头孢呋辛、头孢克洛、头孢尼西、头孢雷特等) 作用:产青β-内酰胺酶G-菌有作用,如肠杆菌科细菌,铜绿假单胞菌等。 3、第三代头孢菌素 注射用头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢派酮:对产青β-内酰胺酶G-菌有很大

抗菌活性。 口服用头孢克肟、头孢布坦等:对肠球菌、铜绿假单胞菌及不动杆菌无用。 4、第四代头孢菌素(头孢匹罗、头孢匹美) 作用:对肠杆菌科细菌和铜绿假单胞菌作用强。 三、其它β-内酰胺类抗生素: 1、单环β-内酰胺类抗生素(氨曲南、卡芦莫南) 对G-菌作用强 2、头霉素类:对G+菌、厌氧菌作用较好 氧头孢烯类抗生素:抗菌谱广,对产β-内酰胺酶G-菌作用强,对产酶的金葡菌有效3、碳青酶烯类抗生素(亚胺培南、米洛培南等) 广谱(最广),抗菌活力强 4、β-内酰胺酶抑制剂(克拉维酸、舒巴坦、他唑巴坦) 与β-内酰胺类抗生素联用能增强后者的抗菌活性。 四、氨基糖苷类抗生素: 链霉素、卡那霉素、妥布霉素、庆大霉素、奈替米星、阿米卡星等 作用:对需氧G-杆菌有强大抗菌活性 对沙雷菌属、气单胞菌属、产碱杆菌、不动杆菌属、分枝杆菌属也有一定抗菌活性。但对G-球菌效果差。 五、喹诺酮类抗生素: 第一代:(新恶酸等)窄谱抗生素(G-) 第二代:(环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星等)对G+G-菌均有作用。 第三代:(斯帕沙星、妥舒沙星、左氟沙星等)超广谱抗生素。 六、大环内酯类抗生素: 红霉素、麦迪霉素、乙酰螺旋霉素等 作用:和青霉素相似,主要是G+菌、厌氧菌。 新一代:克拉霉素、罗红霉素、地红霉素、氟红霉素、阿齐霉素等。 七、四环素、氯霉素、林可酰胺类抗生素: 八、糖肽类抗生素 九、磺胺类药物及其增效剂

XXXX医院抗菌药物使用情况分析

XXXXXX医院 2013年9月份我院抗菌药物使用情况分析为进一步加强我院抗菌药物临床应用管理,促进抗菌药物合理使用,有效控制细菌耐药,保证医疗质量和医疗安全,现将我院9月份抗菌药物应用情况调查反馈如下: (一)2013年9月XXXXX医院处方汇总 2013年9月份门急诊处方分析结果汇总如下:处方评价涉及9个临床科室,处方抽样时间2013年9月1日—9月30日,评价处方总数:随机抽取处方114张。其中用药品种总数209种,处方中基本药物品种数106种,国家基本药物占处方用药的百分率为50.7%。处方中使用药品通用名总数为114张,药品通用名占处方用药的百分率为100%。合理处方总数为112张,不合理处方百分率为0.87%。合理处方百分率为98.2%。 (二)、各科室抗菌药物临床应用 1、2013年9月份门诊患者抗菌药物处方比例

2、2013年9月份住院患者抗菌药物使用率% 3、2013年9月份住院患者抗菌药物使用强度(DDDs/百人天)

4、2013年9月份接受抗菌药物治疗的住院患者抗菌药物使用前微生物检验样品送检率 5、2013年9月份接受限制使用级抗菌药物治疗的住院患者抗菌药物使用前微生物检验样品送检率

6、2013年9月份无特殊使用级抗菌药物使用情况 7、2013年9月份Ⅰ类切口手术患者预防使用抗菌药物比例 8、2013年9月份Ⅰ类切口手术情况统计

(三)、我院住院9月份抗菌药使用量排名前十位: ①注射用头孢呋辛钠②注射用头孢西丁③注射用头孢噻肟钠④左氧 氟沙星注射液⑤阿莫西林克拉维酸钾注射液⑥注射用头孢哌酮舒巴坦钠⑦注射用磷霉素钠⑧注射用阿奇霉素⑨克林霉素磷酸酯注射液⑩环丙沙星注射液 1、使用情况分析 抽查显示,我院住院患者9月份抗菌药物使用率为43%,较上月相比明显下降,达到了国家规定的抗菌药物使用率60%的要求,病原学送检率67%达到了接受抗菌药物治疗的住院患者抗菌药物使用前微生物检验样品送检率达到30%的要求。 此次抽查的外科30份病历中,Ⅰ类切口有15例,使用抗菌素的有8例,用药时机和用药疗程均有不合理。 2、不合理用药分析 我院抗菌药物的使用存在一些不合理之处,主要有:①预防与治疗用抗菌药物的选用欠妥;②抗菌药物使用时间过长;③抗菌药物的用法用量不当;④无适应症联合用药。⑤没有按照卫生部抗菌药物分级管理规定使用抗菌药物。 3、结论 本院大部分的Ⅰ类切口手术能按照规范要求使用抗菌药物预防手术部位感染,但同时也存在给药时机不当,术后用药时间偏长,抗菌药物选择不合理及联用

实验六抗菌药物的体外药效试验

实验六、抗菌药物的体外药效试验 (药敏试验) 各种病原菌对抗菌药物的敏感性不同,同种细菌的不同菌株对同一药物的敏感性有差异,检测细菌对抗菌药物的敏感性,可筛选最有疗效的药物,用于临床对控制细菌性传染病的流行至关重要。此外,通过药物敏感试验可为新抗菌药物的筛选提供依据。药敏试验的方法很多,普遍使用的有滤纸片扩散试验 (Kirby-BaueerDiceDiffusion);最低抑菌浓度试验(MinimumInhibitoryConcentration,MIC)和最低杀菌浓度试验(MinimumBactericidalConcentration,MBC)。 [目的要求] 1、熟悉体外抗菌试验操作技术。 2、掌握药物抗菌能力体外测定的常用方法及其用途。 [实验原理] 常用的体外测定药物抑菌能力的方法有两大类:琼脂渗透法与浓度系列稀释法。琼脂渗透法时利用药物能够渗透至琼脂培养基的性能,将实验菌混入琼脂培养基后倾注成平板;或将试验菌均匀涂于琼脂平板的表面,然后用不同的方法将药物置于已含试验菌的琼脂平板上。根据加药的操作方法不同而有滤纸片法、打洞法、管碟法及挖沟法等。经适宜温度培养后观察药物的抑菌能力。浓度系列稀释法时把药物稀释成不同的系列浓度,混入培养基内,加入一定量的试验菌,经适宜温度培养后观察结果,求得药物的最低抑菌浓度(MIC)。 1、细菌:所用细菌应包括主要致病菌。革兰氏阳性球菌包括金黄色葡萄球菌(产酶与不产酶菌株)、表皮葡萄球菌,链球菌、肠球菌等。革兰氏阴性球菌如淋球菌等。革兰氏阴性杆菌包括流感杆菌、肠杆菌科细菌8~10种,绿脓杆菌与其它假单孢菌属及不动杆菌属等,厌氧菌包括脆弱类杆菌、消化球菌和消化链球菌等。对临床应用有代表性的菌株数量,创新药应不小于1000株。其它类新药根据新药抗菌谱宽窄可作200-500株。试验时应包括有国际公认质控菌株(如金葡菌ATCC25925,大肠杆菌ATCC25922和绿脓杆菌ATCC27853等)。

抗菌药物敏感试验、细菌耐药性检测题库1-1-6

抗菌药物敏感试验、细菌耐药性检测题库 1-1-6

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]下列关于K-B纸片扩散法操作的描述错误的是() A.各纸片中心距离不小于24mm B.纸片距平板内缘不应大于15mm C.直径90mm的平皿可贴6张纸片 D.纸片贴牢后避免移动 E.培养16~18小时后读结果 本题要点为纸片扩散法,其药物纸片各中心应相距24mm,纸片距平板内缘15mm,35℃培养16~18小时后阅读结果。

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]培养基的pH过低时,其抑菌圈可扩大的是() A.米诺环素 B.庆大霉素 C.红霉素 D.诺氟沙星 E.头孢菌素 本题要点为纸片扩散法的培养基要求,其pH值为7.2~7.4,过高或过低的pH值会影响药物效能。碱性可扩大氨基糖苷类药物的抑菌圈,酸性可扩大四环素类药物的抑菌圈,米诺环素为四环素类抗菌药物。

辽宁11选5 https://www.360docs.net/doc/9713397165.html, 问题: [单选,A2型题,A1A2型题]ESBL菌株感染者治疗应选用() A.青霉素 B.氨苄青霉素 C.头孢氨苄 D.亚胺培南-西司他丁 E.氨曲南 目前认为亚胺培南是治疗产ESBL菌感染的最佳选择,产ESBL菌重症感染的患者应首选亚胺培南治疗。

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]可同时做测定某种药物对多株菌的MIC的方法为() A.纸片琼脂扩散法 B.肉汤稀释法 C.琼脂稀释法 D.E试验 E.直接药敏试验 琼脂稀释法是将不同剂量的抗菌药物,加入融化并冷至50℃左右的定量MH琼脂中,制成含不同递减浓度抗菌药物的平板,接种受试菌,孵育后观察细菌生长情况,以抑制细菌生长的琼脂平板所含最低药物浓度为MIC。本法优点是可在一个平板上同时做多株菌MIC测定,结果可靠,易发现污染菌;缺点是制备含药琼脂平板费时费力。

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