细胞计数实验

生理实验报告2红细胞计数

红细胞计数 一、实验目的： 学习、掌握应用稀释法计数红细胞的方法 二、实验原理： 1．血液中血细胞数很多，直接计数有一定难度，需要将血液稀释到一定倍数，然后用血细胞计数板计数。 2．在显微镜下计数一定容积的稀释血液中的红细胞，之后需要将其换算成每升血液中所含的红细胞数。 三、实验用品： 器具：显微镜、血细胞计数板、小试管、采血管、1mL和5mL移液管、玻璃棒、刺血针、干棉球 试剂：哺乳动物红细胞稀释液、蒸馏水、75%酒精 四、实验方法与步骤： 1．采血 2．稀释：用移液管取10微升血液，加至2mL红细胞稀释液中3．充池：将盖玻片的一边与计数池的纵线末端接触，然后缓慢放下，使盖玻片平放在计数室两侧的隆起上，醮少许红细胞稀释液靠近盖玻片乾元，靠毛细管作用将稀释液冲入计数池，于高倍镜下观察红细胞分布情况 4．静置计数板2~3min 待经红细胞下沉后，大方格四角以及中央取5个4×4中方格红细胞数，用高倍镜或低倍镜计数

5．计数，计算 注意事项： 1.保证计数板和盖玻片清洁；以防影响计数结果的准确性。 2.一次完成充池，如充池过少、过多、有气泡或出现任何碎片，应拭净计数板及盖玻片后重新操作。 3.充池后平放计数板，不能移动盖玻片。 4.计数板中细胞如果严重分布不均，应重新充池计数。 5.凡压线的细胞应按照数上不数下、数左不数右的原则，避免漏数或重复计数。 五、实验结果观察与记录以及分析： 1．结果计算：（53+113+76+60+64）/5=73.2 每16格平均73.2个红细胞,红细胞数： 73.2×25×200×10×1000000=3.66×10的12次方个／升 2．显微镜下图片 ①空白计数板： 低倍镜：

实验一红细胞计数

实验一红细胞计数 一、实验目的： 掌握红细胞计数原理及技术。 二、实验原理： 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数，经过换算示得每升血液内的红细胞数。 三、实验器材及试剂： 显微镜、血红蛋白吸管、计数板、盖玻片、生理盐水。 四、实验操作： 1、取试管1支，加稀释液3.98ml或1.99ml。 2、用清洁干燥的微量吸管准确吸取末梢血10微升。 3、擦去管尖外部余血、轻轻注入红细胞稀释液底部，再吸取上层稀释液清洗吸管2-3次，立即摇匀。 4、将计数池与盖玻片用软布料擦净，将盖玻片覆盖于计数池上。 5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液，充入计数池中。 6、静止2-3分钟，待经红细胞下沉后，用高倍镜或低倍镜计数中央大方格内四角和正中五个中方格内的红细胞数。 五、计算 N(五个中方格内RBC数)×5×10×106×200=N×1012个/升 ×5：表示5个中方格内RBC数换算为1个大方格内RBC数 × 10：1个大方格容积、0.1ul、换算为1ul内RBC数 × 106：1ul换算为1升内红细胞数 × 200：稀释倍数 六、正常参考值 正常参考值：成年男性：4.00-5.50×1012/升 成年女性：3.50-5.00×1012/升 新生儿： 6.00-7.00×1012/升 实验二血红蛋白测定 一、实验目的： 掌握氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。 二、实验原理： 血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各种血红蛋白可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，再与CNˉ结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋（HicN）。 HicN最大吸收峰540nm，最小吸收波谷504nm，在特定的条件下，毫摩尔消光系数为44L.mmol-1 .cm-1 ，因此根据标本的吸光度，即求得血红蛋白浓度。 三、实验操作： 1、取指血20ul，加到5ml血红蛋白转化液中，混匀，静止5分钟。 2、用分光光度计比色，波长540nm，以蒸馏水或空白转化液调零，测定吸光度。 3、用血红蛋白浓度为50g/L、100g/L、150g/L、200g/L在721型分光光度计上测定吸光度分别为0.13，0.27，0.405，0.54. 四、计算:血红蛋白（g/L）=测定管吸光度×367.7

微生物大小与数量的测定实验报告

山东大学实验报告2017年11月27日 ________________________________________ _________________________ 科目：微生物学实验题目：微生物大小与数量的测定姓名：丁志康 一、目的要求 1.学习并掌握用测微尺测定微生物大小的方法。 2.增强微生物细胞大小的感性认识。 3. 明确血细胞计数板计数的原理。 4. 掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。 二、基本原理 一）微生物大小的测定 1.微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。微生物 大小的测定，需要在显微镜下，借助于特殊的测量工具——测微尺，包括目镜测 微尺和镜台测微尺。 2.镜台测微尺是中央部分可有精确等分线的载玻片，一般是将1mm等分为100格每 格长0.01mm（即10μm）。镜台测微尺并不直接用来测量细胞的大小，而是用于 矫正目镜测微尺每格的相对长度。 3.目镜测微尺是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，有 等分为50小格和100小格两种。测量时，需将其放在接目镜中的隔板上，用以 测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大 倍数不同，目镜测微尺每小格所代表的实际长度也不一样。因此，用目镜测微尺 测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定大放 大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。然后根据微生物 细胞相当于目镜测微尺的格数，即可计算出细胞的实际大小。 4.球菌用直径来表示其大小；杆菌则用宽和长的范围来表示。如金黄色葡萄球菌直 径约为0.8μm，枯草芽孢杆菌大小为0.7~0.8×2~3μm。 二）微生物数量的测定 1.微生物数量的测定有多种方法，本次试验中使用显微镜直接计数法。显微镜直接 计数法是将少量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻 片上(又称计菌器)，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。目前 国内外常用的计菌器有：血细胞计数板、Peteroff-Hauser计菌器以及Hawksley 计菌器等，它们都可用于酵母、细菌、霉菌孢子等悬液的计数，基本原理相同。 后两种计菌器由于盖上盖玻片后，总容积为0.02mm3，而且盖玻片和载波片之间 的距离只有0.02mm，因此可用油浸物镜对细菌等较小的细胞进行观察和计数。（除 了用这些计菌器外，还有在显微镜下直接观察涂片面积与视野面积之比的估算法， 此法一般用于牛乳的细菌学检查。)显微镜直接计数法的优点是直观、快速、操

红白细胞计数实验报告

《实验诊断学》实验报告 实验一红细胞、白细胞计数 实验原理 一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后，充入血细胞计数池中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数。用稀醋酸液将血液稀释并破坏红细胞，混匀后充入计数池中，于显微镜下计数一定体积内的白细胞数。根据稀释倍数和计数的容积，换算求得每升血液中的红细胞数量以及白细胞数量。 实验内容与步骤 实验材料： 显微镜、微量吸管、毛细吸管、改良Neubauer计数板、盖玻片、小试管、RBC稀释液、WBC 稀释液、正常人的全血、纱布 实验步骤： 1、红细胞计数准备： 加稀释液，用微量吸管吸取RBC稀释液蒸馏水2.0 ml加到小试管内。 取血，毛细吸管取血10 μl。 用纱布擦去管外的血，轻吹入试管底部，再清洗吸管2-3次，立即混匀。 2、白细胞计数准备： WBC稀释液: 冰醋酸3.0 mL（破坏红细胞） 蒸馏水97.0 mL 亚甲蓝（染色） 小试管加WBC稀释液0.38 mL。 采血，微量吸管取血20 μL。 擦去管外的血，轻吹入试管底部，再清洗吸管2-3次，立即混匀。 充池、观察： 将计数板及盖玻片檫净，将盖玻片覆盖在计数板上。 用滴管吸取混均的红细胞悬液充入上方计数室，静置3-5 min，高倍镜下计数；白细胞悬液充入下方计数室，静置2-3 min，低倍镜下计数。 观察计数，红细胞，高倍镜下计数中央大方格内四角的4个中方格和正中的1个中方格的红细胞，压线细胞的计数按照数上不数下，数左不数右的原则。计数时按照弓形的计数方式，以免漏数或多数。 用低倍镜计数出计数池内四角大方格中的白细胞总数。 实验结果 1、红细胞计数实验结果： 5个中方格内RBC的计数／个=24+27+32+22+25 根据计算公式： RBC/L＝5个中方格内RBC数×5×10×200×106 ＝5个中方格内RBC数/100×1012 推算得出RBC：1.3×1012／L 正常人群的红细胞计数参考区间： 人群红细胞计数（×1012／L）

红细胞计数、白细胞计数实验报告

一.实验原理 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数量。用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入血红细胞计数板，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。 二.实验内容与步骤 1、红细胞计数 （1）器材：显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板 （2）试剂：RBC稀释液①Hayem 稀释液：NaCl, Na2SO4，HgCl2 ②枸橼酸钠甲醛盐水溶液:枸橼酸钠，甲醛，NaCl ③生理盐水或含1%甲醛的生理盐水：仅在急诊或无上述两种稀释液时临时使用 （3）标本：外周血或抗凝血（EDTA抗凝) （4）操作步骤：①小试管加RBC稀释液2.0 ml。 ②采血，取血10 μl。 ③擦去管外的血，轻吹入试管底部，再清洗吸管2~3次，立 即混匀。 ④混匀后充入计数室，静置3~5 min，高倍镜下计数（用高 倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细

胞数。） 2、白细胞计数 （1）器材：显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板 （2）试剂：WBC稀释液：冰醋酸3.0 mL（破坏红细胞）；蒸馏水97.0 mL；亚甲蓝（染色） （3）标本：新鲜全血或末稍血 （4）操作步骤：①小试管加WBC稀释液0.38 mL。 ②采血，微量吸管取血20 μL。 ③擦去管外的血，轻吹入试管底部，再清洗吸管2~3次，立 即混匀。 ④混匀后充入计数室，静置2~3 min，低倍镜下计数（用低 倍镜计数出计数池内四角大方格中的白细胞总数。） 三.实验结果 表一红细胞计数表 RBC/L＝405/100×1012＝4.05×1012／L 表二白细胞计数表 WBC/L ＝112/20×109＝5.6×109／L 实验结果：RBC：4.05×1012／L WBC：5.6×109／L 四.讨论 1、从实验结果与正常范围比较，实验结果没有超出正常范围，提示被采血

血液检查实验报告doc

血液检查实验报告 篇一：血型测定实验报告 血型测定实验报告 一、实验目的： 学习ABO型血的鉴定原理和方法。观察红细胞凝集现象，了解抗原抗体反应。 二、实验原理： 血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A 和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A 型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A 或/和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型。（见表4-3-1-1）三消毒采血针；载玻片；消毒棉签；抗A、抗B血型定型试剂；75%乙醇；受检者血液四、实验步骤 （1）取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用腊笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。 （2）细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml 生理盐水的小试管内，混匀，即得约5％红细胞悬液。采血

时应注意先用75％酒精消毒指尖或耳垂。 （3）用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。 （4）竹签两头分别混合，搅匀。 （5） 10～30min后观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。 （6）判断血型根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断其血型。五、实验结果： 我们组本次实验中，载玻片1左边为抗B型定型试剂，呈淡红色，未发生凝聚；右边为抗A型定型试剂，血液在试剂中凝结，试剂较清亮。该受试者1血型为A。 载玻片2左右边的试剂内的血液皆不出现凝结现象，受试者2为O型血。 六、实验讨论： 1.实验中要分清牙签，不要用一牙签一端同时在抗A血清和抗B血清中搅拌，以免造成抗体试剂不纯。 2.实验中我们组发现15分钟后没有出现血凝现象，可用牙签轻轻搅拌一会儿，有些载玻片上就不现了血块，但有些经搅拌后仍不出现血凝现象，表示确实不含相应的抗原。篇二：血糖的测定实验报告

白细胞计数实验报告(仅供参照)

白细胞计数和分类 目的：掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点、 原理：各种白细胞必须经过染色，才易于区分其类别。常用者为瑞氏（Wright’s）染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。测定外周血液中各种白细胞的相对比值，以观察其数量、形态和质量变化，通过显微镜观察染色血涂片，计算血液中各类白细胞的百分率，称为白细胞分类计数。利用白细胞总数和各类白细胞的百分率，即可计算每mm3血液中各类白细胞的绝对值。 实验器材：香柏油、盖玻片、推片、采血针或注射器、小滴管、消毒棉球、瑞氏染液、pH6.4~6.8磷酸盐缓冲液、蒸馏水、计数板及专用盖片、针1ml 刻度移液管、1ml EP管、光学显微镜。20ul刻度移液管、推片 实验步骤 白细胞分类 1．血片制作： 取一滴血，滴于洁净无油脂的玻片一端。左手持玻片，右手再取边缘光滑的另一玻片作为推片。将推片边缘置于血滴前方，然后向后拉，当与血滴接触后，血即均匀附在二玻片之间。此后以二玻片约呈30—45度的角度平稳地向前推至玻片另一端。推时角度要一致，用力应均匀，即推出均匀的血膜（血膜不可过厚、过薄）。将制好的血涂片晾干，不可加热。 注：（1）良好涂片标准：１) 呈头、体、尾舌形 ２) 血膜厚薄适宜 ３) 两边留有空隙（2）涂片好坏与下列因素有关：1）血滴大小 2）推片与玻片之间角度 3）推片速度 2、血涂片的染色步骤： （1）用蜡笔在血膜两端各划一道线，以免染料外溢，置涂片于染色架上。（2）滴加瑞氏染液，共计七八滴数，以盖满血膜为度，静置1分钟。（3）再滴加等量的磷酸缓冲盐溶液，轻轻摇动，并轻吹液体使染色液与缓冲液混合均匀，静置15分钟。 （4）用清水冲洗。切勿先倾去染液再冲洗，否则沉淀物附于血膜上不宜出去。冲洗后斜置血涂片于空气中干燥。或先用滤纸吸取水分迅速干燥，即可镜检。 3、白细胞分类计数：先用低倍镜检查涂片及染色是否均匀。然后加一滴香柏油于血膜厚薄均匀处（一般在体尾交界处），在油镜下由此处开始按其形态特征进行分类计数，计数移动时避免重复。根据所见到的100个白细胞，记录各种白细胞所占的百分数。

实验报告-细胞复苏及细胞鉴别与计数

细胞生物学实验报告 实验二细胞复苏及细胞鉴别与计数 1引言 1.1 实验目的 1. 掌握无菌操作技术。掌握细胞复苏技术。 2. 掌握用血球计数板进行细胞计数的方法。 3. 学习死活细胞鉴别的方法。 4. 了解细胞污染的判定方法。 5. 了解细胞形态的多样性。 1.2 实验原理 1.细胞复苏：以一定的复温速率将冻存的培养物恢复到常温的过程，复苏时要快速融化，必须将冻存在-196℃液氮中的细胞在1分钟内快速融化至37℃，使细胞迅速通过最易受损的温度区间-5-0℃，使冻存时细胞外的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。 2.细胞计数：采用血细胞计数板法，血细胞计数板由一块长约7.5cm，宽 3.5cm的厚玻璃制成，平台中部上下各有一个计数室，每个计数室分9大格，每格边长1mm，面积1mm2，盖上盖玻片后体积为0.1mm3。四角的大格划分为16个中方格，一般用作白细胞、血小板组织培养的细胞计数。中央的大方格则由双线划分为25个中方格，每个中方格面积为0.04mm2，盖上盖玻片后体积为0.004mm3，每个中方格又分成16个小方格，用于红细胞、微生物细胞的计数。细胞计数原则：细胞压线则计上不计下，计左不计右，镜下计数，有时偶尔有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算。对每个试样重复计数3次，取其算数平均值。 2实验仪器、试剂及操作步骤 2.1 实验仪器 超净工作台、倒置相差显微镜、CO2培养箱、酒精灯、酒精棉球、酒精喷壶、试管架、滴管筒 （头）、吸管筒（头）、废液缸、移液器、枪头等 2.2 实验试剂 DMEM培养基、血清、抗生素等 2.3 实验步骤 细胞复苏： 1.实验室和超净工作台消毒，紫外照射20Min左右。 2.穿好实验服，进无菌室前穿鞋套、洗手。 3.关闭紫外灯，开日光灯和开风机，超净工作台台面应整洁，用75%酒精擦双手消毒，擦拭台面。 4.自液氮中取出冷冻管，检查盖子是否旋紧，立即投入40℃水浴锅中解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内 全部融化。 5.正确摆放超净台内的实验用品，点燃酒精灯，准备一次性滴管和移液管。 6.将冻存管放入离心机中800转/分钟离心10分钟。 7.小心将冻存管移入超净台中，用75％的酒精棉球擦拭冻存管外部，打开冻存管用巴氏吸管弃上清， 加1mL的DMEM培养基吹打细胞使之均匀，取90uL细胞悬液和10uL台盼蓝染液于小指管中进行活细胞染色计数。 8.剩余细胞悬液吸至一个细胞培养瓶中，在细胞培养瓶中补加4mL的DMEM培养基，将盖子拧好稍回转，

红细胞计数的注意事项

红细胞计数的注意事项：（1）计数和计算：在2ml红细胞稀释液中加血10μl，混匀后，充入计数池，静置3～5min后，在高倍镜下，计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数。计数时需遵循一定方向逐格进行，以免重复或遗漏，对压线细胞采用数左不数右、数上不数下的原则。（2）清洁：应保证计数板和盖玻片清洁。操作时，勿接触计数板表面，以防污染。使用后，依次用95%乙醇、蒸馏水棉球、清洁绸布擦净.（3）充池：需一次完成充池，如充池过少、过多或有气泡、继续充液，应重新操作，充池后不能移动盖玻片。红细胞在计数池中若分布不均，每个中方格间相差超过20个应重新充池，两次红细胞计数相差不得超过5%. （4）计数板：改良牛鲍计数板每年要鉴定1次，以免影响计数结果的准确性。（5）白细胞影响：通常白细胞总数较少，仅相当于红细胞的1/500～1/1000，对结果影响很小，可以忽略不计。但白细胞过高者（WBC>100×10 9/L），红细胞计数结果应进行校正。方法有两种：一是直接将患者红细胞数减去白细胞数，二是在高倍镜下观察勿将白细胞计入，白细胞体积常比红细胞略大，中央无凹陷，细胞核隐约可见，无黄绿色折光。（6）红细胞稀释液：传统稀释液（Hayem液）由NaCl（氯化钠，调节渗透压）、Na2S04·10H2O（结晶硫酸钠，提高比密防止细胞粘连）、HgCl2.（氯化高汞，防腐）和蒸馏水组成。枸橼酸钠稀释液由枸橼酸钠（抗凝和维持渗透压）、甲醛（防腐和固定红细胞）、氯化钠（调节渗透压）和蒸馏水组成。普通生理盐水或加1%甲醛生理盐水。 瑞士染色的注意事项：（1）血涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。（2）冲洗时应以流水冲洗，不能先倒掉染液，以防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久，以防脱色。如血涂片上有染料颗粒沉积，可滴加甲醇，然后立即用流水冲洗。（3）染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液，然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。（4）瑞氏染色Ⅰ液由瑞氏染料、甲醇（AR级以上）和甘油组成，Ⅱ液为磷酸盐缓冲液（pH6.4～pH6.8）。 血涂片的注意事项：（1）玻片的清洗：新玻片常有游离碱质,因此应用清洗液或10%盐酸浸泡24小时,然后再彻底清洗。用过的玻片可放入适量肥皂水或合成洗涤剂的清水中煮沸20分钟,再用热水将肥皂和血膜洗去,用自来水反复冲洗,必要时再置95%乙醇中浸泡1小时,然后擦干或烤干备用。使用玻片时只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面;,以保持玻片清洁,干燥,中性、无油腻。（2）细胞染色对氢离子浓度十分敏感,在染色过程中玻片必须化学清洁,配制瑞氏染液必须用优质甲醇,稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则各种细胞染色反应异常,致使细胞的识别困难,甚至造成错误。（3）一张良好的血片,要求厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,边缘整齐,两侧留有空隙。血片制好后最好立即固定染色,以免细胞溶解和发生退行性变。（4）血膜未干透,细胞尚未牢固附在玻片上,在染色过程中容易脱落,因此血膜必需充分干燥.（5）染色时间与染液浓度,室温高低,细胞多少有关.染液越淡,室温越低,细胞越多,所需染色时间越长或应适当增加染液量,因此染色时间应视具体情况而定.特别是更换新染料时必须经试染,摸索最佳染色条件.（6）染液不可过少,以防蒸发干燥染料沉着于血片上难冲洗干净.（7）冲洗时应用流水将染液冲去.不能先倒掉染液,以免染料沉着于血片上.（8）染色过深可用甲醇或酒精适当脱色,最好不复染,必须复染时,可将染液先稀释好再复染.（9）染色时应注意保护血膜尾部细胞,不能划掉.因为体积较大细胞常在此处出现.

血液实验实验报告汇总

血液实验实验报告 09 生物技术 摘要：血液在体内承担着物质运输、免疫等重要的生理功能。比较不同动物的血液组成和血细胞的差异，对了了解血液的功能以及不同动物体的特征有重要意义。制作血涂片用于观察红细胞、白细胞、血小板形态；使用血细胞计数板于显微镜下直接计数，计算分别得到红细胞、白细胞数目。 关键字：血液红细胞白细胞血细胞计数血涂片 第一章前言 血液在维持内环境稳定上起着重要作用，具有运输、缓冲、防御等功能。比较不同动物的血液组成和血细胞的差异，对了了解血液的功能以及不同动物体的特征有重要意义。 动物红细胞的形态、大小、数目与动物的进化和生态适应均有一定的关系，一般来说，动物越高等，红细胞的数目越多，而体积越小，同时血细胞也高度分化；白细胞体积（除鱼类）比红细胞大，但比重却比红细胞小。白细胞按其组成又分为粒细胞和无粒细胞。在不同生理状态下，白细胞数目波动较大。 通过观察不同脊椎动物的血涂片，并在镜下计数，即可初步观察到不同脊椎动物血细胞形态变化即数目变化。 第二章材料与方法 2.1 血涂片的制作与观察 2.1.1 材料

鲤鱼、牛蛙、家鸽、家兔、小白鼠血液样品，洁净载玻片，毛吸管，瑞氏染液，蜡笔 2.1.2方法 取末血样少量置于玻片的一端,左手 持载玻片,右手以边缘平滑的推片的一端 从血滴前方后移接触血滴，血滴即沿推片 散开，推片与载片夹角保持30-45度平稳 地向前移动，载片上保留下一薄层血膜。 待干后用蜡笔在血膜两侧划线，以防染液 溢出。然后将血膜平放在染色架上，加瑞 氏染液2-3滴，使覆盖整个血膜。固定 0.5-1.0分钟，滴加等量或稍多的新鲜蒸 馏水。与染料混匀染色5-10分钟。当液 面浮现一层金黄色金属状物质，表示染液 起了作用。用蒸馏水冲去染液,待自然干燥 后,即可置血涂片于显微镜下进行镜检。 红细胞 淡红色，无核的圆形细胞，因红细胞为双凹形，故边缘部分染色较深，中心较浅，直径7-8微米。 颗粒白细胞 嗜中性颗粒白细胞：体积略大于红细胞，细胞核被染成紫色分叶状，可分1-5叶。直径10-12微米。 嗜酸性颗粒白细胞：略大于嗜中性白细胞，细胞核染成紫色，通常为2叶，胞质充满嗜酸性大圆颗粒，被染成鲜红色。直径10-15微米。 嗜碱性颗粒白细胞：体积略小于嗜酸性白细胞，细胞质中有大小不等被染成紫色的颗粒，颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少，核1-2叶，染成淡蓝色。直径10-11微米。 淋巴细胞 胞质少，常为围绕细胞核的一薄层，其中无颗粒细胞核是肾形或马 蹄形，染成蓝紫色。 血小板 血小板体形甚小，形态不规则，染淡蓝色，内含紫色颗粒，无核，常聚集成团。

实验8 血细胞计数板的使用

血球计数板的使用 Questions： 1.亚甲蓝染色液怎么配制？ 2.计数时是全部计数还是选取其中一部分计数？ 3.菌悬液怎么制备？ 4.加样时可以先加样再盖玻片么？ 5.计数时，若有菌体处于边界线上应怎么计数？ 一、实验目的 1.能正确进行染色操作； 2.能正确使用显微镜； 3.能用血球计数板对微生物进行计数。 二、实验原理 血球计数板可计算活菌和死菌的数目，其用优质厚玻璃制成。每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。计数池两侧各有一支持柱，将特制的专用盖玻片覆盖其上，形成高0.10mm的计数池。计数池画有长、宽各3.0mm的方格，分为9个大方格，每个大格面积为1.0mm².容积为0.1mm（ul），其中，中央大方格用双线分成25个中方格，位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域，用单线划分为16个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域，用单线划分为16个中方格。根椐国际标准局（NBS）规定，大方格每边长度允许误差为±1%。 三、实验仪器

显微镜、血球计数板、接种环、酒精灯 四、实验步骤 1.菌悬液的制备 用平板培养的微生物怎么制备菌悬液？ 操作过程中是否需要无菌操作？ 2.染色 注意染色剂浓度过稀菌体不能充分染色的情况。 3.血球计数板计数室洁净度检查 若有污染，清洗吹干后方能使用。 4.加样 血球计数板盖上盖玻片后，从盖玻片边缘加入菌液，此过程不可有气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽内多余菌液。 用什么加样？ 5.显微计数 静止5min后，观察技术，以每小格内有5-10个菌体为宜。先用低倍镜，再用高倍镜。观察时注意调整光源亮度（可适当调弱）。 为什么要静止5min？ 6.计算 7.清洗血球计数板 用水冲洗，不要用硬物擦洗，以免损坏网格刻度。自行晾干或吹干放入盒内保存。 五、注意事项

红细胞计数、白细胞计数实验报告

.实验原理 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数量。用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入血红细胞计数板，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。 二.实验内容与步骤 1、红细胞计数 （1）器材：显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板 （2）试剂：RBC稀释液①Hayem稀释液：NaCI, Na2SO4, HgCI2②枸橼酸钠甲醛盐水溶液：枸橼酸钠，甲醛，NaCI③生理盐水或含1%P醛的生理盐水：仅在急诊或无上述两种稀释液时临时使用 （3）标本：外周血或抗凝血（EDTA抗凝） （4）操作步骤：①小试管加RBC ffi释液2.0 ml。 ②采血，取血10卩l。 ③擦去管外的血，轻吹入试管底部，再清洗吸管2~3次，立 即混匀。 ④混匀后充入计数室，静置3~5 min，高倍镜下计数（用高倍镜依 次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细 胞数。）

2 、白细胞计数 （1）器材：显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板 （2）试剂：WB（稀释液：冰醋酸3.0 mL （破坏红细胞）；蒸馏水97.0 mL ；亚甲蓝（染色） （3）标本：新鲜全血或末稍血 （4）操作步骤：①小试管加WB（稀释液0.38 mL。 ②采血，微量吸管取血20卩L。 ③擦去管外的血，轻吹入试管底部，再清洗吸管2~3次，立即混 匀。 ④混匀后充入计数室，静置2~3 min，低倍镜下计数（用低倍镜计 数出计数池内四角大方格中的白细胞总数。）三.实验结果 RBC/L = 405/100 X 10 = 4.05 X 10 / L 表二白细胞计数表 9 , WBC/L = 112/20X 109= 5.6X 109/ L 实验结果：RBC 4.05 X 1012/ L 9 WBC 5.6 X 10 / L 四.讨论 1、从实验结果与正常范围比较，实验结果没有超出正常范围，提示被采血 者无病理或生理性异常。

小鼠脾脏细胞原代培养及观察计数实验报告-山东大学

小鼠脾脏细胞原代培养及观察计数 【实验目的】 1.学习掌握细胞培养的基本原理以及具体方法，并对小鼠脾细胞进行原代培养； 2.掌握无菌操作的具体过程及无菌操作台的使用； 3.学习掌握染色法鉴别细胞的生死状态的原理及方法； 4.学习使用血球计数板对细胞总数及活细胞数进行计数； 【实验原理】 1.细胞培养 细胞培养指的是在无菌条件下，把动、植物细胞从组织中取出，在体外模拟体的生理环境，使离体的细胞在体外生长和繁殖，并且维持其结构和功能的一种培养技术。动物细胞培养可分为原代培养和传代培养。从供体获得组织细胞，在无菌条件下，用胰蛋白酶消化或机械分散等方法，将动物组织分散成单个细胞开始首次培养长出单层细胞的方法称为细胞的原代培养。当培养的动物细胞生长增殖达到一定密度，形成致密的单层细胞时，用胰蛋白酶将细胞消化分散成单细胞，从一个容器中以1：2或其他比例转移到另一个容器中扩大培养的方法，称为细胞的传代培养。传代培养的累计次数就是细胞的培养代数。 高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体的功能活动是十分困难的。但如果把活细胞拿到体外培养、增殖并进行观察和研究，则要方便和简单得多。被培养的动物细胞是非常好的实验对象和实验研究材料，对体外培养的活细胞进行研究可以帮助人类揭开生、老、病、死的规律，探索优生、抗衰老和防治各种疾病的途径和机制，也可以人为地诱导和改变细胞的遗传性状和特性，使其向有利于人类健康长寿的方向发展。因此动物细胞体外培养技术是研究细胞分子机制非常重要的实验手段，被广泛应用于医学、生物技术、基因工程等研究领域。 细胞培养的意义:具有其他生物技术无可比拟的优点；培养条件易改变和控制，便于单因子分析；便于人们直接对细胞结构、细胞生长及发育等过程的观察；在生物学的各个领域（如分子生物学、细胞生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学及病毒学等）已被广泛应用。 细胞培养的局限性：在脱离机体复杂环境下，细胞培养条件与躯体环境有一定距离；观察到的结果有时难以正确反映机体的状况；细胞培养得到的产物少。 培养细胞的条件有水的质量、无菌环境，最适温度、渗透压、气体条件、最适PH、营养条件和培养基质等。 2.细胞死活鉴定 细胞生死状态的鉴别方法主要是化学染色法和荧光染色法。 活细胞和死亡细胞在生理技能和性质上主要存在一下差异： ①细胞膜通透性的差异：活细胞的细胞膜是一种选择性膜，对细胞起保护和屏障作用，只允许物质选择性地通过；而细胞死后，细胞膜受损，其通透性增加。基于此，发展出了以台盼蓝、伊红、苯胺黑、赤藓红、甲基蓝以及荧光染料碘化丙啶或溴化乙啶等为染料鉴别细胞生死状态的方法，上述染料能使死亡细胞着色，而活细胞不被着色。此外，应用植物质壁分离的性质也可鉴定植物细胞的生死状态。活细胞的原生质具有选择透过性，死细胞因其原生质的选择透过性已遭破坏，故与高渗透压溶液接触时不产生质壁分离。 ②代上的差异：活细胞中新代作用强，细胞的酶具有较强的活性和还原能力。基于此，发展处了以荧光素二乙酸酯（FDA）、荧光素二丙酸酯、荧光素二丁酸酯或荧光素二苯甲酰酯等酯化的荧光素鉴别细胞生死状态的方法，上述酯化的荧光素亲脂性提高，容易被细胞吸收进入，活细胞的酯酶具有较强的活性，可将酯化的荧光素分解而释放出能发荧光的荧光素，该物质不能自由透过活的细胞膜，积累在细胞，荧光显微镜下显示有明亮的绿色或黄绿色荧光；而死亡细胞的酯酶因失去活性，不能分解酯化的荧光素，荧光显微镜下显示不发光。另外，可用亚甲基蓝为染料鉴定酵母细胞的生死状态。亚甲基蓝是一无毒染料，氧化型为蓝色，还原型为无色。活细胞因具有较强的还原能力，能使亚甲蓝从蓝色的氧化型变成无色的还原型，故活的酵母细胞在用亚甲基蓝染色后显示无色；死亡酵母细胞或代缓慢的衰老酵母细胞，因无还原能力或还原能力极弱，使亚甲蓝仍处于氧化态，故呈现蓝色或淡蓝色。 3.血球计数板的使用

血常规实验报告

五常规报告单分析 一、相关项目 1. rbc、hb、mcv(平均红细胞体积)、hct(红细胞压积)、mch(平均rbc血红蛋白含量)、 mchc(平均rbc血红蛋白浓度)、rdw(rbc体积分布宽度); 2. wbc、dc(ly、mo、gr)绝对值； 3. plt、pct(血小板比积)、pdw(血小板体积分布宽度)、mpv(平均血小板体积) 二、各主要参数的临床意义及参考范围（★） 1. rbc及hb增多：是指单位容积血液中rbc数及hb量高于参考值上限。一般经多次检 查成年男性rbc>6.0×1012/l，hb>160g/l，女性rbc>5.5×1012/l，hb>150g/l 时认为增多。可分为相对增多和绝对增多。①相对增多，是因血浆容量减少，血浆中水分丢 失，血液浓缩使rbc容量相对增多。见于严重呕吐、腹泻、大量出汗、大面积烧伤等。②绝 对增多，临床上称为rbc增多症，可分为原发和继发两类，原者即真红。 2. rbc及hb减少：是指单位容积循环血液中rbc数、hb量及血细胞比容(hct)低于参考 值，通常称贫血。以血红蛋白为标准，成人男性hb<120g/l,成人女性hb<110g/l,皆可 认为是贫血。临床上还根据hb减低的程度将贫血分为四级：轻度：hb<90g/l；中度：hb： 90-60g/l；重度：hb：60-30g/l；极重度：hb<30g/l。引起减少原因包括两类：①生理性 减少：婴儿从出生3个月起-15岁以前的儿童；妊娠中、后期孕妇血浆容量增加，使血液稀 释，；老年人骨髓造血容量逐渐减少，使造血功能减低，均可导致rbc、hb减少，统称生理性 贫血。②病理性减少：见于各种贫血。 3.参考值（※） 成人男 成人女 新生儿 4.血细胞压积(hct) hct可反映rbc的增多或减少，但受血浆容量的影响，同时也受rbc体积大小的影响。 参考值：男：0.4-0.5l/l；女：0.37-0.48l/l。 5.mcv(平均rbc比容) 参考值：血细胞仪：80-100fl 6.mch(平均hb含量) 参考值：血细胞仪：27-34pg 7.mchc(平均rbc、hb浓度) 参考值：320-360g/l rbc 4.0-5.5×1012/l 3.5-5.0×1012/l 6.0-7.0×1012/l hb 120-160g/l 110-150g/l 170-200g/l 临床意义：根据上述三项rbc平均值可进行贫血的形态学分类。 ⑴正细胞性贫血：见于aa、先天性贫血、多数溶贫、骨髓病性贫 血如白血病等。 ⑵大细胞性贫血：见于叶酸、b12缺乏所引起的ma、如营养不良 性贫血、妊娠期、婴儿期ma及恶性贫血。 ⑶小细胞低色素性贫血：见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫 血、mds-ras。 ⑷单纯小细胞性贫血：见于慢性感染、炎症、肝病、尿毒症、恶 性肿瘤、风湿性疾病所致的贫血。 8.rdw(rbc体积分布宽度)是反映rbc体积大小不等程度的客观指标，对贫血的诊断有重 要意义。

实验六酵母菌细胞总数的测定

实验六酵母菌细胞总数的测定 一、目的要求 1.学习并掌握血球计数板计数的原理； 2.掌握利用血球计数板进行微生物计数的方法。 二、实验材料 1.菌种：酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）麦芽汁培养液 2.其它：显微镜、血球计数板、手动计数器、擦镜纸、吸水纸等 三、基本原理 利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微生物计数方法。该方法是将菌悬液放在血球计数板与盖玻片之间容积一定的计数室中，在显微镜下进行计数，然后根据计数结果计算单位体积内的微生物总数目。 血球计数板是一块特制的载玻片，其上由4条槽构成3个平台。中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分为9个大方格，中间的大方格即为计数室。计数室的边长为1mm，中间平台下陷0.1mm，故盖上盖玻片后计数室的容积为0.1mm3。血球计数板的构造如下。 图6-1 血球计数板构造 常见血球计数板的计数室有两种规格：一种是16×25型，即计数室共分为16个中方格，每个中方格又分为25个小方格；另一种是25×16型，即计数室先被分成25个中方格，每个中方格又分为16个小方格。但无论是哪一种规格的血球计数板，其计数室的小方格都是400个。我们采用的是25×16型。 计数时，通常数5个中方格的总菌数，再换算成1ml菌液中的总菌数。计算公式如下： 1ml菌液中总菌数＝5×104 A·B A为5个中方格中的总菌数，B为稀释倍数 四、操作步骤 1.菌悬液的制备：以无菌生理盐水将酿酒酵母培养物制成浓度适当的菌悬液。 2.加样品：将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌的毛细滴管将摇匀的酵母菌悬 液由盖玻片边缘滴一小滴，让菌液沿缝隙靠毛细作用自动进入计数室（注意取样前要摇

实验一 血涂片的制备

实验二、血涂片的制备和血细胞的观察 目的要求 1.掌握血涂片的的制备方法 2.认识红细胞及各种白细胞的典型形态 基本原理 涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本，染色后可对血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作。 实验用品 1.器材：医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片； 2.试剂：Wright’s染液：Wright’s色素粉末0.1g，溶于60 ml甲醇。 方法与步骤 1．采血采血前用70％酒精棉球消毒人的指腹或耳垂，干后用采血针刺破指腹或耳垂的皮肤；动物采血时先将耳部剪毛，酒精消毒后，刺破动物耳部皮肤，挤去第一滴血不要（因含单核白细胞较多）。 2．涂片挤出第二滴血置于载玻片的一端，再取另一张边缘光滑的载玻片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状，两玻片的角度以45°为宜（角度过大血膜较厚，角度小则血膜薄），轻轻将载玻片向前推进，即涂成血液薄膜（图2-2）。推进时速度要一致，否则血膜成波浪形，厚薄不匀，初学者可把玻片放在桌上操作。 3．染色待涂片在空气中完全干燥后，滴加数滴Wright’s染液盖满血膜为止，染色1～3 min。然后滴加等量的缓冲液（pH6.4）或蒸馏水，使其与染液均匀混合，静置2～5 min。用蒸馏水冲去染液，吸水纸吸干。 4．镜检显微镜观察可见人红细胞为凹圆盘形，无核，淡红色，缘部分染色较深，中心较浅，直径7-8微米。白细胞数目少，为圆形。 颗粒白细胞（1）嗜中性颗粒白细胞：体积略大于红细胞，细胞核被染成紫色分叶状，可分1-5叶，直径10-12微米；（2）嗜酸性颗粒白细胞：略大于嗜中性白细胞，细胞核染成紫色，通常为2叶，胞质充满嗜酸性大圆颗粒，被染成鲜红色，直径10-15微米；（3）嗜碱性颗粒白细胞：体积略小于嗜酸性白细胞，细胞质中有大小不等被染成紫色的颗粒，颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少，核1-2叶，染成淡蓝色，直径10-11微米。 无颗粒白细胞（1）淋巴细胞：可观察到中、小型两种。小淋巴细胞与红细胞大小相似，圆形，核致密，染成深紫色。周围仅一薄层嗜碱性染成淡蓝的细胞质。中淋巴细胞较大，核圆形。直径6-8微米。（2）单核细胞：体积最大，细胞圆形。胞质染成灰蓝色。核呈肾形或马蹄形，染色略浅于淋巴细胞的核。直径14-20微米。 血小板为不规则小体，直径2 - 3微米。其周围部分浅蓝色，中央有细小的紫红色颗粒，聚集成群。 实验报告内容 绘制人血涂片镜下图

小吞噬实验报告

篇一：巨噬细胞吞噬实验&沉淀实验实验报告 实验二 一巨噬细胞吞噬功能实验 【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞，局域活跃的吞噬功能。吞噬细胞受抗原刺激后活化，可使吞噬功能明显增强。 在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠腹腔注射鸡血红细胞，30min后处死小鼠，取出腹腔液，以冷亚甲蓝染色，显微镜下计数吞噬红细胞的百分数，及观察吞噬细胞内鸡红细胞的数目，以判断吞噬细胞的杀伤能力，由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。 【方法】体内法： （1）实验前3小时，小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。 （2）实验时，每只小鼠注射鸡红细胞1ml，轻柔腹部，使其在腹腔中分布均匀，利于吞噬。（3）30min后，将小鼠拉颈处死，固定，打开腹腔暴露肠管，用载玻片轻擦腹腔，使腹腔液均匀涂于载玻片过，再滴一滴0.03%冷亚甲蓝溶液，盖上盖玻片。 （4）高倍镜下进行观察，计数。 【结果】 【分析】 在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液，可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并且可看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。 二沉淀反应双向琼脂扩散实验【原理】将可溶性抗原与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内，二者均可发生扩散，并且随扩散距离的增大浓度降低，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。本实验是定性实验，常用于分析抗原抗体的纯度关系以及相互关系。 【方法】 （1）制板：将熔化的1%琼脂加在载玻片上约5ml （2）打孔：待琼脂凝固后，将载玻片置于打孔样板上，用打孔器打孔 （3）加样：在中央孔内加抗体，上下两孔加抗原1，左右加抗原二，每孔加10μl （4）结果观察：将琼脂板置于湿盒，37℃一天后观察结果。 【结果】 在中央孔与添加抗原1的孔之间出现沉淀线，有抗原抗体反应，为阳性反应，说明抗原1与抗体相对应。中央孔与添加抗原2的孔之间没有沉淀线，说明抗原2与抗体之间不相对应。【分析】抗体与抗原发生扩散时，随扩散距离的增大浓度降低，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。当有沉淀线出现时，说明有抗原抗体反应。 琼脂铺板时要一次铺成，并且铺设均匀。 打孔时要注意垂直打孔，注意不要有裂隙产生。篇二：中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验) 中性粒细胞吞噬功能试验（小吞噬试验） 实验目的 1.熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法。 实验原理血液中的中性粒细胞即小吞噬细胞，通过趋化、调理、吞入和杀菌等几个步骤，能吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物，是机体非特异性免疫的重要组成部分。实验材料 实验方法 片。 瑞氏染色法：取瑞氏染液数滴滴于上述血片上先染1分钟。然后加等量蒸馏水，轻轻晃动混匀，继续染5分钟，水洗，用吸水纸吸干后镜检。 结果观察油镜检查：寻找中性粒细胞，如果染色结果正确，可见细胞核及被吞噬的细菌染

环境工程微生物学实验四 微生物数量的测定实验报告

南昌大学实验报告 学生姓名：学号：专业班级： 实验类型：√验证□综合□设计□创新实验日期：实验成绩： 实验四微生物数量的测定 一、实验目的： 1了解血球计数板测定微生物数量的原理； 2 了解血球计数板的结构，学习并掌握血球计数板计数微生物数量的技术，包括样品的点样、菌数计数的方法与计算； 二、实验基本原理： 镜检计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有杂菌或杂质常不易分辨。菌体较大的酵母菌或霉菌泡子可采用血球计数板；一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽(Petroff Hausser)细菌计数板。两种计数板的原理和部件相同，只是细菌计数板较薄，可以使用油镜观察。而血球计数板较厚，不能使用油镜，故细菌不易看清。 血球计数板是一块特制的厚载玻片，载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个方格网。每个方格网共分9大格，其中间的一大格(又称为计数室)常被用作微生物的计数。计数室的刻度有两种：一种是大方格分为16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格；另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即每个大方格都由400个小方格组成。 每个大方格边长为1mm，则每一大方格的面积为1mm2，每个小方格的面积为1／400mm2，盖上盖玻片后，盖玻片与计数室底部之间的高度为0.1mm，所以每个计数室(大方格)的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为l／4000mm3。使用血球计数板直接计数时，先要测定每个小方格(或中方格)中微生物的数量，再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞的数量。 本方法适用于细胞数较多的样品测定（每毫升105～106以上），当样品中的细胞浓度较低时，须选择其他方法测定，否则因误差太大而影响实验结果。