实验动物学复习题

医学实验动物学复习题

名词解释：

实验动物学(laboratory animal science)：是研究实验动物和动物实验的科学。

实验动物（Laboratory Animal）：指经人工培育，对其携带微生物实行控制，遗传背景明确，来源清楚，可用于科学研究、教学、生产、检定及其它科学实验的动物。

实验用动物（Experimental Animal）：指一切用于科学实验的动物。

实验动物化（laboratory animalization)：野生动物、经济动物和观赏动物通过初期的表型分析和筛选，对具有科学实验价值的动物，经过严格的驯养，微生物净化，遗传及饲养环境等因素的控制，按实验要求进行培育，使之达到实验动物的标准。即将野生动物或家畜驯化培育成实验动物的过程。

动物实验(Animal experiment)：为科研、教学、药品检定等目的，对动物进行物理、化学和生物因素处理，观察其反应，获得实验数据，解决科研中问题的过程。

SPF级动物：即无特定病原体动物，指体内无特定（潜在）的微生物和寄生虫存在，但带有非特定的微生物和寄生虫。它除一、二级动物应排除的病原外，体内还不携带主要潜在感染或条件致病和对科研实验

干扰大的病原。SPF动物来源于无菌动物。

无菌动物：利用现有的检测技术在动物体内外任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫的动物。GF动物必须生来就是GF动物，它来源于剖腹产或无菌卵的孵化。；

悉生动物：又称已知菌动物或已知菌丛动物，指在无菌动物体内植入已知微生物的动物，根据植入无菌动物体内菌落数目的不同，GN动物又可分为单菌、双菌、三菌和多菌动物。属四级动物，饲养于隔离系统。

近交系：指至少经连续20代或以上全同胞交配或亲子交配培育而成，品系内所有个体都可追溯到起源于20代或以后代数的一对共同祖先，近交系数达99.8%以上的遗传群体。

封闭群：以非近亲交配方式进行繁殖生产，在不从外部引入新的血缘条件下，至少连续繁殖4代以上的种群。常用的封闭群动物：KM小鼠、NIH小鼠、ICR小鼠；Wistar 、SD （Sprague Dawley）大鼠；Dunkin Harley豚鼠；大耳白兔、新西兰兔、青紫蓝兔等。

品种与品系：品种指具有相似的外貌特征，独特的生物学特性以及稳定的遗传性能，共同遗传来源和一定遗传结构的动物群体。品系是指自交或近交繁殖若干代后，所获得的某些遗传性状相当一致的后代。

亚系：指育成的近交系在繁育过程中，由于残余杂合基因的分离或基因突变、抽样误差导致部分遗传组成改变而形成有遗传差异的近交系动物群体。

支系：由于饲养环境的改变，或对动物进行人为的技术处理，对某些动物特征产生影响，形成不同的支系。同源突变近交系：两个近交系，除了在一个指明位点等位基因不同外，其他遗传基因全部相同，为同源突变近交系。

重组近交系：由两个近交系杂交后，经连续20代兄妹交配育成的近交系。

同源导入近交系：通过杂交-互交-或回交等方式将一个基因导入到近交系中，形成的近交系与原近交系只在一个很小的染色体片段很小的染色体片段的基因不同，称为同源导入近交系。

系统杂交动物：由不同品系或种群之间杂交产生的后代，医学生物学研究常用的杂交群动物是指杂交一代（F1 Hybrid）。

转基因动物：指用实验的方法导入的外源基因,在其染色体基因组内稳定整合并可以表达和传给后代的一类动物；整合在动物基因组内的外源基因称为转基因。

嵌合体动物：只有部分组织细胞基因组中整合有外源基因的动物，称为嵌合体动物。如果整合的部分组织细胞恰为生殖细胞，也可将外原基因遗传给子代。

动物克隆：不经过有性生殖过程，而是通过核移植生产的遗传结构完全相同的动物，称动物克隆。

免疫缺陷动物：由于先天性遗传突变或用人工的方法造成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物。NOD-SCID鼠：非肥胖型糖尿病scid小鼠(NOD-scid)，有SCID 小鼠的特点，同时NK细胞和巨噬细胞

功能缺陷,缺少循环补体(Shultz, 1995)，寿命短，6个月出现胸腺瘤。

裸鼠特点和应用：11号染色体上的裸基因(nu)发生突变,导致出现毛发缺乏，呈裸体外表；由于胚胎期第1～6对咽囊发育异常导致先天畸形（先天性胸腺发育不良）；繁育能力差，乳腺发育缺损，以雄性纯合子与雌性杂合子繁育；T细胞缺陷可通过移植成熟T细胞、胸腺细胞得到恢复.。应用：肿瘤学,微生物学,免疫学和寄生虫学等基础医学的研究.微生物学的研究：由于裸鼠的T淋巴细胞功能缺陷,免疫机能低下,是研究病毒,微生物感染机制的良好模型动物。免疫学研究：研究T淋巴细胞的功能；肿瘤学研究：裸小鼠不排斥杂交瘤，腹腔内接种可以生长肿瘤，并能生产含有高效价抗体的大量腹水。如BALB/c裸鼠制备单克隆抗体，产生的抗体量多于有胸腺小鼠。寄生虫的研究：多种寄生虫的感染研究如裸鼠胸腔内接种卡氏肺囊虫, 能复制出卡氏肺囊虫疾病模型；用美洲锥虫感染(肌肉型)裸鼠,产生美洲锥虫慢性感染模型。临床医学研究:外科学研究利用裸鼠异种移植离断后神经,观察离体后神经元的生物学性质；眼科学研究裸鼠眼内注射视网膜母细胞瘤,观察瘤细胞破环视网膜的全过程;皮肤病研究裸鼠感染白色念珠菌,新型隐球菌等,观察其发病机理。

scid的特点和应用：重症联合免疫缺陷小鼠由于16号染色体基因突变，动物临床表现为T、B淋巴细胞发育缺陷，这种变异对放射极为敏感，Scid小鼠NK细胞较高。但人类尚未证实这种缺陷所致的SCID。特点：组织器官变化：外观与正常小鼠无异，生长发育正常，但胸腺、脾、淋巴结的重量为正常的30%，组织学上表现为淋巴细胞缺失；胸腺没有皮质结构，仅留残迹；脾脏无淋巴细胞聚集；淋巴结无明显的皮质区，副皮质区缺失，由网状细胞占据；血液中白细胞总数减少：所有T淋巴细胞和B淋巴细胞功能测试均为阴性，对外源性抗原无细胞免疫和抗体免疫反应；纯合子血清中无免疫球蛋白，缺乏体液、细胞免功能。饲养于SPF环境中。通过移植人免疫组织或细胞，可使SCID小鼠具有人类部分免疫系统，称为SCID-hu 小鼠。SCID小鼠外观与普通小鼠相同，但脾脏和胸腺重量不够正常鼠的10～30%。外周血液中白细胞总数减少，淋巴细胞占白细胞总数的10～20%，正常为70%。

BNX小鼠特点：T、B和NK细胞三联免疫缺陷小鼠（BNX小鼠），成年BNX小鼠高自发性淋巴母细胞瘤；与免疫功能缺陷的患者和肿瘤患者放疗后易高发的淋巴瘤相似，是研究人自发性淋巴瘤的理想模型。

简答题

1．什么是实验动物的标准和标准化？实验动物标准化的意义？

标准化：是指适合科学需要，在产品(实验动物）质量（微生物学和遗传学质量）、品种规格、生产条件（居住环境和营养状况）和实验条件等方面规定的统一标准。

实验动物标准化包括实验动物生产条件、动物质量(微生物质量及遗传学)和动物实验条件的标准化。并对应三种合格证。生物医学实验研究的四个基本条件：Animal，Equipment，Information，Reagent ，简称AEIR 四要素。实验动物质量往往成为制约性要素，影响实验的质量和水平。使用标准的实验动物并在标准的环境条件下进行实验是保证医学生物学研究质量的重要条件。

2. 实验动物标准化的依据是什么？

1.遗传背景直接影响着实验动物结果的准确性和可靠性（不同遗传背景的实验动物其遗传物质有较大差异，生物学特征亦表现不同，因而对同一实验处理的反应性不一样）2、健康状况影响着实验动物生产能否正常进行（如传染病、营养不良）和动物实验结果的可靠性(由于生理差，易引起反应差异，引起数据不可比与重复）3、必须在特定的环境条件下培育保证质量、保证生物安全、保证动物实验结果的可靠性和可重复性；

4、实验动物是人的替身，是活的试剂与度量衡（主要应用的领域包括生命科学、医药科学、生物安全研究、环境保护科学以及军事研究与应用）。

5、标准化是实验成功的保证（保障人员的健康和安全、保证实验动物的健康、保障实验研究的顺利进行、保证实验结果的正确性、精确性和可重复性)。

3. 实验动物标准化研究包括哪些内容？

（1）、研究实验动物品系培育及遗传学控制；（2）、研究实验动物解剖及生物学特点；（3）、研究环境条件、饲料、垫料等对实验动物的影响；（4）、研究实验动物微生物、寄生虫控制及疫病防治；（5）、实验动物福利。

4. 根据实验动物病原质量控制标准（净化程度），将大（小）鼠分几级？兔和豚鼠分几级？

犬和猴分几级？

新标准将实验小鼠和大鼠分为清洁级、无特定病原体级（SPF）和无菌级。豚鼠、地鼠和兔仍保留一级动物（普通动物）、二级动物（清洁动物）、三级动物（无特定病原体动物）或SPF动物、四级动物（无菌动物和悉生动物）。犬和猴分为普通级和SPF级。

5. 不同级别的应用范围？国际上公认适用于所有科研实验的动物级别是？目前国际标准级别的实验动物是？

一级动物（普通动物）应用：由于CV动物是实验动物中微生物学质量的“起码”要求，对实验结果的反应性差，因此国家卫生部1998年已明确规定“普通实验动物（一级）只能用于教学实验和某些科研工作的预实验。卫生部级课题及研究生毕业论文等科研实验必须应用二级以上的实验动物”。

二级动物（清洁动物）应用：国际上普遍认为CL动物仅适用于短期或部分科研实验。我国认为CL动物比CV动物健康，又比SPF动物容易达到质量标准，在动物实验中可以避免动物疾病的影响，其敏感性和重复性较好。因此，这类动物目前可用于大多数科研实验，是国内科研工作者主要使用的标准级别的实验动物。

三级动物（无特定病原体动物）或SPF动物）应用：选择SPF动物，避免了病原体的隐性感染或潜伏感染，以及某些条件性致病菌对实验结果的影响，国际上公认SPF动物适用于所有科研实验，是目前国际标准级别的实验动物。

四级动物（无菌动物）应用：1.在微生物学研究中的应用2.在免疫学研究中的应用3.在放射医学研究中的应用4.在营养、代谢研究中的应用5.在老年病学研究中的应用6.在心血管疾病研究中的应用7.在毒理学研究中的应用8.在肿瘤学研究中的应用9.在宇航医学研究中的应用10. 在寄生虫学研究中的应用11. 在口腔医学研究中的应用

6. 无菌动物在形态学和生理学方面的特点？

（一）形态学改变：①消化系统：无菌动物盲肠及其内容物重量可达体重25%，多数情况下，无菌动物盲肠是普通动物的5～10倍。由于盲肠膨大，肠壁菲薄，常易发生肠扭转导致肠壁破裂而死亡。有关盲肠膨大原因尚无定论。②血液循环系统：心脏相对变小，白细胞数少，且数量波动范围小，与无病原体入侵有关。③免疫系统：由于无菌动物几乎没有受过抗原刺激，其免疫机能基本上处于原始状态。胸腺中网状上皮细胞较大，其胞浆内泡状结构和溶酶体较少，胸腺和淋巴结处于不活跃状态，脾脏变小。

（二）生理学改变：①免疫功能：由于胸腺网状内皮系统、淋巴组织发育不良，淋巴小结内缺乏生发中心，产生γ-球蛋白的能力很弱。血清中IgM、IgG水平低，免疫功能处于原始状态，对异体移植的排斥反应以及自身免疫现象消失或减弱。用低分子无抗原饲料饲喂无菌动物时，血清中几乎不存在γ-球蛋白和特异性抗体。②生长率：无菌禽类>普通禽类；无菌大小鼠≈普通大小鼠无菌豚鼠、家兔<普通豚鼠、家兔。③繁殖率：规律同生长率。④代谢：血中含氮量少，肠管对水的吸收率低，代谢周期比普通动物长。⑤营养：无菌动物体内不能合成VB和VK，易发生缺乏症。⑥抗辐射能力：无菌动物能力强于普通动物，无菌小鼠抗实验性烫伤引起的休克死亡能力也强于普通小鼠。⑦寿命：无菌动物>普通动物。

7. 根据实验动物的遗传质量控制标准（基因的纯和程度），将实验动物分几种？

按照遗传学控制标准—基因的纯合程度，基因的纯合程度，实验动物分近交系、封闭群和杂交动物。

8. 品种和品系，区别是什么？

品种指具有相似的外貌特征，独特的生物学特性以及稳定的遗传性能，共同遗传来源和一定遗传结构的动物群体。品系是指自交或近交繁殖若干代后，所获得的某些遗传性状相当一致的后代。

品系与品种差异：1、品系比品种的群体特点更加突出。2、品系的性状及适应性必须相同。3、品系的基因型相同。

9. 什么是近交系？常用的几种小（大）鼠近交系的名称？

近交系指至少经连续20代或以上全同胞交配或亲子交配培育而成，品系内所有个体都可追溯到起源于20代或以后代数的一对共同祖先，近交系数达99.8%以上的遗传群体。

常用小鼠近交系名称和缩写：B=C57BL；B6=C57BL/6；C=BALB/c；CB=CBA；C3=C3H；D=DBA；D2=DBA/2 10. 近交系亚系和支系发生的原因？

通常下述三种情况会发生亚系分化：a) 在兄妹交配代数达40 代以前形成的分支（即分支发生于F20 到F40 之间）；b) 一个分支与其他分支分开繁殖超过100 代；c) 产生这种差异的原因可能是残留杂合、突变或遗传污染（genetic contamination）, 即一个近交系与本品系动物之间杂交引起遗传改变。由于饲养环境的改变，或对动物进行人为的技术处理，对某些动物特征产生影响，形成不同的支系。

11. 近交系动物的特点？

基因纯合性( homozygosity )、遗传稳定性( stability )、遗传同源性( isogenicity )、表型一致性( uniformity )、独特性( individuality )、可分辨性( identification )、分布的广泛性、资料可查性

12. 同源性？同源突变、同源导入和分离近交系？

同源性（homologous）：指基因的来源相同，即控制同类性状的基因。同源突变近交系（coisogenic inbred strain）：两个近交系，除一个指明位点等位基因不同外，其他遗传基因相同。分离近交系( segregating inbred strain )：培育近交系的同时，采取一定的交配方法使个别位点的基因处于杂合状态，从而分离出该基因位点上带有不同等位基因的两个近交亚系。

13. 杂交一代动物，特点和应用？

杂交一代动物：由两个无关的近交品系杂交而繁殖的第一代动物，其遗传组成均等地来自两个近交品系，个体遗传均一，并具有表现型相同的动物。特点：1、杂交优势，克服了近交引起的近交衰退。2、遗传与表型上的均质性；具有相同的基因型。3、分布广泛。应用：1、干细胞研究。2、移植免疫研究。3、细胞动力学研究。4、单抗研究

14. 封闭群动物，特点，应用？常用封闭群小（大）鼠的名称？

封闭群动物是以非近亲交配方式进行繁殖生产，在不从外部引入新的血缘条件下，至少连续繁殖4(5)代以上的种群。特点：①一定的杂合性：不引入新的基因，又不使群体内基因丢失。②相对的稳定性：群体在一定范围内保持相对稳定的遗传特征。③个体差异取决于祖代动物。④较强的繁殖力、抗病力。⑤群体易保存有模型价值的突变基因。应用：①封闭群动物（outbred stock）的遗传组成具有很高的杂合性，类似人群体遗传的异质性组成，对人类遗传学研究、药物筛选、毒性试验、生物制品和化学药品的鉴定等方面有不可替代的作用。②可大量供应，用于预试验、教学。③携带突变基因，通常可导致动物某些方面的异常，成为生理学、胚胎学和医学研究的模型。如：SHR（自发性高血压大鼠）。④可携带大量的隐性有害基因，评估群体对自发或诱发突变的遗传负荷能力。常用封闭群小鼠：①ICR小鼠②NIH小鼠③CFW小鼠④LACA小鼠

15. 免疫缺陷、渗漏现象

免疫缺陷动物：由于先天性遗传突变或用人工的方法造成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物。

渗漏现象：少数SCID小鼠的免疫功能可出现极小程度的恢复,把这种现象称为渗漏现象。

16. 单一和联合免疫缺陷动物的特点，与人类相似的疾病动物模型？

单一免疫缺陷动物：T细胞缺陷动物：Nude(nu):裸小鼠,(run)裸大鼠；B细胞缺陷动物：X-link immunodeficiency(xid)小鼠,称为CBA/N小鼠，马属动物；NK细胞缺陷动物：Beige(bg)小鼠、Motheaten (me)小鼠。

联合免疫缺陷动物：Severe combined immunodeficiency(scid): T、B细胞缺陷小鼠non-obese diabetic(nod):自然杀伤和吞噬细胞缺陷小鼠自然杀伤和吞噬细胞缺陷小鼠Nod-scid:T、B、NK和macrophage细胞缺乏小鼠。与人类相似的疾病动物模型：动脉粥样硬化、糖尿病、肝炎

17. 影响人体肿瘤裸鼠移植成功的因素？

人体肿瘤细胞本身的特征、裸鼠免疫功能状态、裸鼠背景、移植部位和途径、激素和宿主性别、鼠龄、其它因素。

18. 实验动物的相似性原则包括哪些？

①组织结构的相似性②系统机能的相似性③生理和繁殖特性的相似性④体液成分的相似性⑤解剖特性方面⑥疾病特点的相似性。

19. 实验动物选择的基本原则包括哪些？

①相似性原则②特殊性（易化）原则③标准化原则④规格化原则⑤经济性原则

20. 转基因动物与克隆动物的区别；

前者是将外源基因通过不同的方式引入受体细胞，随受体细胞经分化发育成为动物个体。基因是人工合成的。后者是供体细胞的细胞核与受体去核的细胞融合，移植到母体内发育成为动物个体。基因是供体细胞核中包含的全部基因。

21. 动物克隆技术的基本方法；

“核移植”是克隆动物的基本方法。将身体某一部位的细胞核取出（如耳上皮或乳腺细胞的细胞核）,移植到去掉核的卵细胞中，再移植到雌性动物的子宫中孕育成与核供体动物在遗传上完全相同个体。

22. 目前克隆技术有几种细胞核移植；

①胚胎细胞核移植②胚胎干细胞核移植③胎儿成纤维细胞核移植④体细胞核移植

23. 动物实验的3R原则是什么？在填写《广州医学院动物实验福利伦理审查申请书》时，如何从实验人员、实验动物和动物实验三方面体现3R原则？

3R原则：减少(reduction)、替代(replacement)、优化(refinement)原则。替代：是指使用低等级动物代替高等级动物，或不使用活着的脊椎动物进行实验，而采用其它方法达到与动物实验相同的目的。用低等动物替代高等动物、用小动物替代大动物；用组织学实验替代整体动物实验；用分子生物学方法替代动物实验；人工合成材料替代动物实验；计算机模拟替代动物实验。减少：是指如果某一研究方案中必须使用实验动物，同时又没有可行的替代方法，则应把使用动物的数量降低到实现科研目的所需的最小量。通过使用适合的动物品种、品系和高质量的实验动物，改进实验设计，规范实验操作程序等，达到动物使用数量的减少。优化：通过改善动物设施、饲养管理和实验条件，精选实验动物、技术路线和实验手段，优化实验操作技术等方法，尽量减少实验过程对动物机体的损伤，减轻动物遭受的痛苦和应激反应，使动物实验得出科学的结果。从动物人道主义观念理解，实验动物为人类健康做出了牺牲，人类应该负责任地、人道地对待动物。从科学角度理解，优化实验程序，减少动物因紧张、痛苦而表现出的非正常特性，是取得科学数据的重要前提。

24.实验动物学基本内容

1、研究实验动物品系培育及遗传学控制；

2、研究实验动物解剖及生物学特点；

3、研究环境条件、饲料、垫料等对实验动物的影响；

4、研究实验动物微生物、寄生虫控制及疫病防治；

5、实验动物福利

6、研究人类疾病动物模型或模型动物；

7、研究动物实验的基本条件、方法、技术；

8、比较医学

9、动物实验伦理和替代方法。

25.按照空气净化的程度，实验动物环境可分为几类？简述国家标准对屏障环境主要影响因素的控制要求。简述屏障环境中人员、动物和物品的运行原则及路线。

实验动物环境分外环境和内环境。

屏障环境要求：1、与外界相对隔离的设施，适合饲养清洁动物和SPF动物；2、物品要求灭菌；3、人员进入要求更衣、淋浴、穿灭菌服、戴口罩手套；4、动物要求采取检疫措施；5、空气采取三级过滤，空气洁净度达到7级。

进入屏障环境的人员、动物和物品要分别遵循一定的运行路线：人员：更衣--淋浴--更衣--清洁走廊--饲养室或动物实验室--污染走廊--洗刷消毒室--更衣--外部区域。物品：包装--高压消毒（已包装消毒的可经传递窗，清洁笼具经消毒液的渡槽）--清洁准备室--清洁物品储存室--饲养室或动物实验室--（污物经包装处理）污染走廊--外部区域。动物：动物（带专用包装）--传递窗--检疫室--清洁走廊--饲育室或实验室--（实验后或生产供应）--（经包装）污染走廊--外部区域。

27.人类疾病动物模型的基本概念，举例说明按产生原因进行分类的各类模型特点。

人类疾病动物模型（Animal models of human diseases）：为阐明人类疾病的发生机制或建立治疗方法而制作

的、具有人类疾病模拟表现的实验动物。

按产生原因分类：1.诱发性动物模型（experimental animal models）：是通过人为方式使实验动物受到物理、化学、生物等致病因素的作用，而发生类似某些人类疾病的动物模型。也叫实验性动物模型。优点——制作方法简便，实验条件简单，影响因素容易控制，在短时间内可以复制大量的动物模型。2.自发性动物模型（spontaneous animal models）：指实验动物未经任何有意识地人工处置，在自然情况下所发生的疾病，或由于基因突变的异常表现通过遗传育种保留下来的动物疾病模型。其中包括突变系的遗传疾病和近交系的肿瘤疾病模型。优点——疾病的发生、发展与人类相应的疾病很相似，均是在自然条件发生的疾病。3.抗疾病型动物模型：指特定的疾病不会在某种动物身上发生，从而可以用来探讨疾病的抵抗力。（东方田鼠）。

4.生物医学动物模型：指利用健康动物生物学特征来提供人类疾病相似表现的疾病模型。（长爪沙鼠、鹿、兔）。

28.简述兔和豚鼠的主要采血方法及注意事项。

兔子耳缘静脉注射（采血）操作规程：1先拔去注射部位的被毛；2用手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈；3用消毒酒精消毒注射部位；4左手食指和中指托住注射部位的耳缘，大拇指顺势按在耳上面固定住兔耳；5右手持6号针头（连注射器）尽量从静脉的远端刺入6当针头有回流血时，移动拇指于针头上以固定针头；7将药液以均匀的速度注入；或以均匀的速度抽取血液8注射（采血）完毕，拔出针头；用消毒棉球（棉签）压迫针眼片刻。

注意：兔耳部血管分布清晰，耳中央为动脉，耳外缘为静脉。内缘静脉深不易固定，故不用；外缘静脉表浅易固定，常用。

大小鼠、沙鼠采血：1.眼眶后静脉丛(窦)取血：（1）先将毛细管浸泡在1％肝素溶液中数分钟，取出干燥备用。（2）将大小鼠、沙鼠侧卧位固定，（或将动物麻醉后进行）；（3）左手拇指、食指抓住两鼠耳之间的颈部头皮，轻压颈部两侧，致大小鼠、沙鼠静脉血回流障碍，眼球外突，眶后静脉丛充血。（4）右手持毛细管由大小鼠、沙鼠的内毗部插入结膜，使毛细管与眶壁平行地向喉头方向推进，深度约2—5mm 。（5）轻轻旋动毛细管，使其穿破静脉丛，让血流顺毛细管流出。采血量：0.2—1ml／次。2、摘除眼球采血法(1)左手抓住大小鼠颈部皮肤，轻压在实验台上，取侧卧位; (2)左手食指尽量将大小鼠眼周皮肤往颈后压，使眼球突出；(3)用眼科弯镊夹去眼球，将鼠倒立，用试管接住流出的血液。(4)采血完毕即用纱布压迫止血。采血量：每次0.6-2.0ml/次。

29.按微生物控制程度可将实验动物分为哪几级？他们各自特点？

答：可将实验动物分为四类：

无菌动物(Germfree animal, GF)指用现有的实验手段检测，动物的体表体内不携带任何微生物和寄生虫的实验动物。

特点：1在动物体内外任何部位均检不出任何细菌、真菌、原虫、内外寄生虫。

2无菌动物必须是生来就无菌的动物。

3消化系统：(1)盲肠肥大；(2)肠道肌层薄，肠绒毛变细变短；(3)肝脏变小；

4循环系统：(1)心脏变小；(2)白细胞数变少，且数量波动范围小；

5免疫系统：(1)胸腺，淋巴组织，网状内皮系统发育不良。(2)脾脏小，无二级滤泡；

6免疫功能：(1)血清中IgG、IgM水平低，几乎不存在丙种球蛋白和特异性抗体。(2)免疫应

答速度慢，过敏反应、对异体移植物的排斥反应以及自身免疫现象消

失或减弱。

7生长率：(1)不同种属不同；(2)无菌鸟类生长率高于同种普通鸟；(3)无菌大、小鼠与普通鼠

差不多；(4)无菌豚鼠和无菌兔比普通的慢；

8生殖：(1)无菌大、小鼠略高于普通大小鼠；(2)豚鼠和兔繁殖能力比普通级低。

9代谢和营养：无菌动物血中含氮量少，肠管对水的吸收率低，代谢周期比普通动物长；体内

不能合成维生素B和K，易产生这两种维生素的缺乏症。

10抗辐射能力：无菌动物抗辐射能力强，抗实验性烫伤和抗休克死亡能力也强于普通动物。

11寿命：无菌动物的寿命普遍长于普通动物。

悉生动物(Gnotobiotic animal, GN) 又称已知菌动物，指动物体内带有明确的微生物种类的动物。

特点：1微生物特点：体内携带有已知微生物

2来源：无菌动物植入微生物

3饲养管理：必须饲养在温湿度恒定的空气净化的隔离系统中，实行严格的微生物控制。

4GN动物是动物与微生物的共生复合体。肠道存在能合成维生素和氨基酸的细菌，不会出现维生素缺乏症。生活力、抵抗力明显增强，易于饲养。

无特定病原体动物（Specific pathogen free animal，简称SPF动物)——指不携带特定病原体（细菌、病毒、寄生虫），但带有未知的微生物群的动物。

特点：1微生物特点：SPF动物除一、二级动物应排除的病原体外，不携带主要潜在感染或条件致病和对研究实验干扰大的病原。小鼠病原菌应排除16种，病毒11种；大鼠病原菌应排除16种，病毒7种。

2来源：SPF动物来源于无菌动物或剖腹产动物。

3饲养管理：SPF动物必须饲养在温湿度恒定的空气净化的屏障系统中，实行严格的微生物控制。

4与悉生动物比较

相同点：1）体内无病原微生物，实验结果准确可靠。2）带有非致病的其他微生物。

不同点：1）悉生动物带有的微生物是已知的，SPF动物所带微生物情况不清楚。2）悉生动物饲养在隔离环境中，SPF动物饲养在屏障环境内。

清洁动物(Clean animal, CL)——微生物控制级别介于SPF动物和普通动物之间的动物

特点：1微生物特点：清洁级动物比普通级动物要求排除的微生物和寄生虫多，但比SPF动物少。清洁级动物除肉眼观察无病外，尸体解剖时，主要脏器、组织无论是肉眼观看还是病理组织切片均应

无病变。血清病毒抗体检测可检测出一定滴度的抗体。小鼠病原菌应排除10种，病毒5种；

大鼠病原菌应排除10种，病毒2种。

2来源：清洁动物来源于SPF动物、无菌动物、悉生动物或剖腹产动物。

3饲养管理：清洁级动物饲养于温湿度恒定的空气净化的屏障系统中。

其所用的饲料、垫料、饮用水、笼器具等都经过消毒灭菌处理。

工作人员需换灭菌工作服、鞋、帽、口罩等进入动物室进行操作。

普通动物(Conventional animal, CV)——不携带人兽共患病和动物烈性传染病的病原体。

特点：1、微生物学特点：要求不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病的病原。是微生物

控制要求最低。

2、饲养管理：饲养于开放系统。但仍然对温度，湿度，饲料，垫料，饮水，卫生等有一定控

制。

3、生理学特点：外观健康，饮食排泄正常，无异常分泌物，无临床症状，脏器无眼观病灶。

30.什么叫SPF级动物？写出英文全称及其在医学中的作用。

答：无特定病原体动物（Specific pathogen free animal，简称SPF动物)——指不携带特定病原体（细菌、病毒、寄生虫），但带有未知的微生物群的动物。

目前国际上公认SPF动物适用于所有科研实验，是国际标准级别的实验动物。

1）血清、疫苗的制造：用无病的动物组织、脏器来生产各种疫苗和细菌病毒性诊断血清。

2）生物学鉴定；用于鉴定破伤风毒素、结核菌素、狂犬病疫苗等。

3）实验外科学的短期或长期研究：例如一些放射实验、烧伤实验等。

4）其他研究工作：如药理学、毒理学、肿瘤免疫学、传染病学等。

31．微生物寄生虫潜在感染对实验研究的影响

答：寄生虫感染对实验的干扰1掠夺宿主的营养2体表寄生虫对宿主的干扰3对宿主产生机械损伤4产生毒性作用。

32. 比较洁净动物和普通动物的特点

答：1洁净动物通常是指来源于剖腹产、实行严格的微生物控制、饲养于空气净化系统设施内的动物，包括清洁动物、SPF动物、悉生动物和无菌动物。洁净动物与普通动物相比，在很多方面均存在一定差异。2洁净动物与普通动物相比，在血液学、血液生化指标及主要脏器系数方面均产生一定变化。如清洁级大鼠与普通大鼠相比，白细胞较少，其中中性粒细胞少，淋巴细胞相对增加；血清碱性磷酸酶、胆红素、胆固醇值较高；尿素氮、肌酐值比较低；空肠淋巴结、脾脏较轻；肺、肾组织形态比普通大鼠健康。33. 实验动物环境监控与动物实验结果的关系

答：实验动物的性状实际上是遗传和环境因素相互作用的结果。基因型——表现型——演出型。周围环境对于动物的表现型和演出型有一定的影响，动物实验实际上是控制实验动物的演出型，并对演出型动物作严格策划的处理；只有演出型稳定，实验结果才有良好的可重复性和高度的可信性。

34. 实验动物环境因素的分类以及影响实验动物的各种环境因素

分类： 1 气候因素：温度、湿度、气流、风速等；2 理化因素：光照、噪声、粉尘、臭气（NH3、H2S 等）、杀虫剂、消毒剂、有害气体等；3 营养因素：饲料、饮水、笼具、垫料等；4 生物和栖居因素：各种病原体（细菌、病毒、寄生虫等）、落菌数、社会因素和饲养密度等。

35.营养因素对动物实验结果的影响

非营养研究时的影响：1、对动物采食量的影响；2、对动物生长发育的影响；3、对动物生理生化指标的影响；4、对动物免疫功能的影响；5、对动物疾病的发生、发展和转归的影响；6、对动物麻醉反应的影响；

7、饲料中其它因素的影响。

营养研究时的影响：1动物早期的营养状况对营养研究的影响；2动物实验时的营养对所研究营养问题的影响；3动物日粮对营养研究的影响

36. 实验动物设施的分类，以及它们分别适合饲养哪些等级的动物。

分类：普通环境、屏障环境、隔离环境。

普通环境适合养普通动物；屏障环境适合养无特定病原体动物SPF；隔离环境适合养悉生动物和无菌动物。

以上答案均为本人整理，若有错误请自行斧正。。。