脐血造血干细胞移植治疗白血病的研究进展
脐血造血干细胞移植治疗白血病的研究进展[摘要] 人脐血中造血干细胞（HSCs）含量丰富，且免疫细胞功能不成熟，
逐渐被用于治疗多种恶性、非恶性血液系统疾病；脐血在满足一定条件下（HLA 配型、有核细胞及CD34细胞数），其治疗效果甚至优于骨髓移植（BMT）和外周血造血干细胞移植（PBSCT）。作者从HLA配型要求、有核细胞及CD34细胞含量的角度综述脐血HSCs移植的疗效。
［关键词］移植；造血干细胞；双份脐血；白血病；文献综述
自1988年Gluckman等［1］首次用HLA配型相合的同胞供者脐血成功治愈1例Fanconi贫血患儿至今已20余年。随着众多基础和临床研究的开展，人们对脐血（umbilical cord blood，UCB）的认识也日趋完善。大量临床研究已证实脐血移植（umbilical cord blood transplantation，UCBT）后移植物抗宿主病（graft-versus host disease, GVHD）发生率及移植相关死亡率（transplantation-related mortality, TRM）降低，患者总生存期（overall survival, OS）延长［2-4］。总有核细胞（total nucleated cell，TNC）及CD34细胞数是决定移植疗效的主要因素。单份UCBT主要局限于儿童患者，双份UCB可以弥补单份脐血CD34+细胞数的不足用于成人及高体重的恶性血液病患者，扩大了脐血的临床应用范围。现对UCBT临床治疗白血病的研究现状作一概述。
1 脐血造血干细胞
脐血是脐带和胎盘血的统称，其含有丰富的造血干细胞（HSCs）和造血祖细胞（hematopoietic progenitor cells，HPCs）。HSCs通过不对称有丝分裂产生HPCs，其在细胞因子作用下产生形态学上可辨认的各系造血前体细胞,进一步又分化发育成为功能成熟的血细胞。HSCs具有较强的增生能力，能够维持HSC池的干细胞数量。人HSCs表达CD34，而高度纯化的CD34+细胞群主要含有HPCs。体外实验表明，HSCs在SCF、IL-3、IL-6、G-CSF或SCF、TPO、G-CSF或Flt-3配体,SCF、IL-3、IL-6、G-CSF或SCF、TPO、Flt-3配体，SDF（stromal cell-derived factor-1, SDF-1）/CXCL12细胞因子或间充质干细胞的作用下能够大量增殖［5-6］。UCB与骨髓（BM）相比，CD34+CD38-细胞增生较快，并能产生大量的造血前体细胞，其增生能力与端粒的长度有关［6-7］。另外，UCB中T淋巴细胞与BM及外周血干细胞（PBSC）相比，CD45RA+/CD45RO-、CD62L+初始型细胞的比例较高，且Th1型较成人的细胞因子受体CCR5表达减少。此外，UCB细胞亦能产生大量的抗炎因子IL-10［7］。脐血HSCs的生物学特性是其用于治疗白血病的基础。
胚胎干细胞研究进展-干细胞的研究进展
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 胚胎干细胞研究进展-干细胞的研究进展胚胎干细胞研究进展-干细胞的研究进展干细胞的研究进展干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞群体。 近年来干细胞的应用几乎涉及到所有生命科学和生物医学领域。 本文概述了干细胞的生物学特性，并综述了干细胞的可塑性、分离培养及其在基础研究及临床上的应用的研究进展。 最后，展望了今后研究的方向。 干细胞；生物学特性；可塑性；分离培养；应用 Advances in study of stem cells Stem cells are non-specialized cells which have the ability of self-renewal and multiple differentiation potential. The application of stem cells has nearly involved in all the research field on life sciences and biomedicine in recent years. This article summarizes the biological characteristic of stem cells, and reviews the latest progress in the study on stem cells plasticity, isolation, culture in vitro, and its extensive application in basic research and clinical application. The prospects of stem cells are also discussed. stem cells; biological characteristic; plasticity; isolation; culture in vitro; application 干细胞（stem cells）是一类具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细 1 / 10
脐带血造血干细胞库管理办法(试行)
脐带血造血干细胞库管理办法（试行） 第一章总则 第一条为合理利用我国脐带血造血干细胞资源，促进脐带血造血干细胞移植高新技术的发展，确保脐带血 造血干细胞应用的安全性和有效性，特制定本管理办法。 第二条脐带血造血干细胞库是指以人体造血干细胞移植为目的，具有采集、处理、保存和提供造血干细胞 的能力，并具有相当研究实力的特殊血站。 任何单位和个人不得以营利为目的进行脐带血采供活动。 第三条本办法所指脐带血为与孕妇和新生儿血容量和血循环无关的，由新生儿脐带扎断后的远端所采集的 胎盘血。 第四条对脐带血造血干细胞库实行全国统一规划，统一布局，统一标准，统一规范和统一管理制度。 第二章设置审批 第五条国务院卫生行政部门根据我国人口分布、卫生资源、临床造血干细胞移植需要等实际情况，制订我 国脐带血造血干细胞库设置的总体布局和发展规划。 第六条脐带血造血干细胞库的设置必须经国务院卫生行政部门批准。 第七条国务院卫生行政部门成立由有关方面专家组成的脐带血造血干细胞库专家委员会（以下简称专家委
员会），负责对脐带血造血干细胞库设置的申请、验收和考评提出论证意见。专家委员会负责制订脐带血 造血干细胞库建设、操作、运行等技术标准。 第八条脐带血造血干细胞库设置的申请者除符合国家规划和布局要求，具备设置一般血站基本条件之外， 还需具备下列条件： （一）具有基本的血液学研究基础和造血干细胞研究能力； （二）具有符合储存不低于1 万份脐带血的高清洁度的空间和冷冻设备的设计规划； （三）具有血细胞生物学、HLA 配型、相关病原体检测、遗传学和冷冻生物学、专供脐带血处理等符合GMP、 GLP 标准的实验室、资料保存室； （四）具有流式细胞仪、程控冷冻仪、PCR 仪和细胞冷冻及相关检测及计算机网络管理等仪器设备； （五）具有独立开展实验血液学、免疫学、造血细胞培养、检测、HLA 配型、病原体检测、冷冻生物学、 管理、质量控制和监测、仪器操作、资料保管和共享等方面的技术、管理和服务人员； （六）具有安全可靠的脐带血来源保证； （七）具备多渠道筹集建设资金运转经费的能力。 第九条设置脐带血造血干细胞库应向所在地省级卫生行政部门提交设置可行性研究报告，内容包括：
治疗白血病的民间偏方
治疗白血病的民间偏方 治疗白血病民间偏方，我们都了解到白血病是种很难治愈的疾病，临床上治疗白血病的方法很多，白血病的治疗是个漫长的过程，在这段时间内患者也有很多的注意事项，下面我们来看一下白血病的治疗方法以及治疗期间的注意事项。 治疗白血病民间偏方，白血病的治疗方法： ⒈常用的白血病的治疗方法有西医的化疗。化疗可以有效的控制白血病的病情，对于一些白血病患者，化疗可以治愈白血病。但是，长期进行化疗很容易造成免疫力低下或丧失。 ⒉常用的白血病的治疗方法还有骨髓移植，通过骨髓移植控制白血病细胞的恶性增生，恢复患者的正常细胞生长。骨髓移植包括自体骨髓移植、异基因骨髓移植、外周干细胞移植三种。 ⒊而中晚期白血病常用的白血病的治疗方法有化疗、骨髓移植、生物调节剂治疗及中医药治疗。在众多治疗白血病的方法中，化疗是白血病中晚期的重要治疗法，能有效缓解症状，延长生存期，并且，化疗亦是骨髓移植前的必要步骤。骨髓移植是中晚期白血病最为有效的治疗方法，50%左右的白血病患者接受骨髓移植后可长期生存，但其亦存在着价格昂贵、骨髓源少的缺点。 治疗白血病民间偏方，白血病的注意事项： ⒈早发现，早诊断。白血病治疗应注意如果出现持续不明原因的贫血、出血、发热、淋巴结肿大等症状时，应及时到医院做相关检查，尽快明确诊断。 ⒉确诊后及时接受治疗。因白血病治疗难度较大，因此白血病治疗应注意要选择专业水平高，医疗条件较好的医院进行治疗，以及时控制病情。 ⒊患者和家属应尽快学习和了解相关知识。兵法上将“知己知彼，百战不殆”，了解了疾病的相关知识，掌握了其中的一些规律，并能采取相应的措施，才能有效的对抗病魔。 ⒋在战略上要藐视疾病，在战术上要重视治疗。白血病，虽然被视为“血癌”，列为不治之症，但是多年来，也确实有众多患者通过积极治疗走向康复，走向新生。而在治疗中如果不认真用药，遵守遗嘱，则难以逃脱复发的厄运，从而加重病情。 ⒌白血病治疗应注意坚持综合治疗，正确认识中医药的作用。目前随着媒体的大量报道，骨髓移植成为白血病患者的关注热点，使人们误以为骨髓移植是唯一的治疗办法。但是，根据临床的观察，骨髓移植的成功率尚不理想，而且花费
干细胞研究进展综述
干细胞研究进展(综述) Advances in the research of stem cells（LR） 【摘要】：干细胞是人体及其各种组织细胞的最初来源,具有高度自我复制、高度增殖和多向分化的潜能。干细胞技术是生物技术领域最具有发展前景和后劲的前沿技术，其已成为世界高新技术的新亮点，势将导致一场医学和生物学革命。干细胞研究正在向现代生命科学和医学的各个领域交叉渗透,干细胞技术也从一种实验室概念逐渐转变成能够看得见的现实。干细胞研究作为一门新兴学科已成为生命科学中的热点。本文对近几年来国内外对干细胞的研究现况作一综述。 【关键词】：干细胞因子帕金森病神经干细胞糖尿病 ABSTRACT：Stem cells are the body and cells of various tissues of origin, has high self replication, high proliferation and multilineage differentiation potential. Stem cell technology is the field of biotechnology has the most development prospect and potential of cutting-edge technology, it has become a new bright spot in the world of high-tech, will lead to a revolution in medicine and biology. The research of stem cell is to modern life science and medical fields intersection, stem cell technology from a laboratory concept gradually transformed to be able to see the reality. Stem cell research as a new discipline has become the hotspot of life science. Based on the domestic and abroad in recent years on stem cell research summarizes. Keywords:Stem cell factor Parkinson disease Neural stem cells Diabetes mellitus 干细胞技术最显著的特征就是能再造一种全新的、正常的甚至更年轻的细胞、组织或器官。由此人们可以用自身或他人的干细胞和干细胞衍生组织、器官替代病变或衰老的组织、器官，并可以广泛涉及用于治疗传统医学方法难以医治的多种顽症。 干细胞研究是一门新兴的学科,干细胞生物学研究与应用几乎涉及所有的生命科学和生物 医学领域。 一、目前干细胞的主要研究热点
脐带血干细胞移植治疗糖尿病足患者的护理
易出现误解甚至矛盾。 表1 两组对ICU 护理工作满意、投诉及表扬情况比较 例(%)组别例数 满意 投诉 表扬 对照组558452(81.00)20(3.58)21(3.76)访视组694 668(96.25)2(0.03)82(11.82)χ2 76.26919.46526.562P <0.01 <0.01 <0.01 通过采取出科访视,护士与患者进行面对面的交 谈,可以更加真实地了解患者的想法和护理工作中的不足,采纳患者的意见和建议,对ICU 护理工作实施 持续质量改进,规范护士行为,提升护理质量;同时也 使患者了解ICU 护理工作的特点,消除误会,化解矛盾。表1显示,与对照组相比,访视组对ICU 护理工作满意度和患者表扬显著提高,投诉率显著降低(均P <0.01)。同时,针对访视结果进行奖惩结合评价,营造了人人争当服务明星的氛围。 参考文献:[1] 陈永香,梁军.我国访视护理现状与调查[J ].中华医学 实践杂志,2006,5(2):22223.[2] 黄行芝,刘忠俊,万恩桂.“五心”工作法在护理管理中的 应用[J ].护理学杂志,2004,19(23):42243. (本文编辑 宋春燕) 脐带血干细胞移植治疗糖尿病足患者的护理 杜玲1,方孝梅2,王娜1 Nursing care of p atients with diabetic foot treated by umbilical cord blood stem cell transplantation ∥D u L ing ,Fang X iaomei ,W ang N a 摘要:对3例(4足)糖尿病足合并溃疡、坏疽的患者采用脐血干细胞移植治疗,结果无任何不良反应发生。4足在术后2～4个月溃疡愈合,痛觉、针刺觉、冷感逐渐恢复正常,踝肱指数明显改善,术后半年复查下肢血管CTA 见不同程度的新生毛细血管形成。提出脐带血干细胞移植治疗糖尿病足是一种有效的新方法;积极的心理护理,术中密切配合,术前、术后准确评估患足情况,积极控制血糖,正确处理创面,加强足部护理,合理的出院指导,坚持定期随访观察,可以保证移植效果。关键词:糖尿病足; 脐带血干细胞移植; 护理中图分类号:R473.5 文献标识码:B 文章编号:10014152(2010)13003803 DOI :10.3870/hlxzz.2010.13.038 作者单位:郧阳医学院附属十堰市太和医院1.细胞治疗中心2.门诊部 (湖北十堰,442000) 杜玲(19702),女,本科,主管护师 科研项目:湖北省卫生厅青年科技人才基金项目(QJ X2008238)收稿:20100323;修回:20100414 糖尿病足是糖尿病最严重的慢性并发症之一,也是糖尿病患者致残的重要原因,其发病机制之一为下肢大、小血管和微血管病变[1]。研究显示,外周血干细胞可以分化为血管内皮细胞,形成新生血管[2]。2008年11月我院与深圳北科细胞工程研究所合作开展干细胞技术的临床应用,于2009年3～7月,采用脐带血干细胞移植治疗糖尿病足3例共4足,效果显著,现将护理介绍如下。1 临床资料1.1 一般资料 患者男2例、女1例,年龄58～66岁,平均63.0岁。糖尿病病史分别为2年、9年、11年。2例有高血压病史,1例并发糖尿病双侧视网膜病变;2例为单足多处溃烂并坏疽,1例双膝关节以下多处溃烂并坏疽;入院时查空腹血糖分别是13.2mmol/L 、10.4mmol/L 、11.2mmol/L 。按2005年国务院《医院管理条例》第33条规定对患者的治疗及风险进行如实告知[3],患者对治疗均签署知情同意书,治疗方案经医院医学伦理委员会批准。1.2 糖尿病足专科检查 患者足部溃疡或坏疽病程 2～6个月,Wagner 分级为4～5级;踝肱指数(AB I ) 为0.35～0.46;痛感4分,冷感4分;3例4只患足中3足趾端针刺觉、轻触觉明显减弱,1足消失;皮温监 测示4足皮温均低于正常人4～6℃;2足未触及足背动脉搏动,另2足足背动脉搏动微弱;C T 血管成像(C TA )显示:1例双侧股深动脉中度狭窄,患肢腘动脉以下不规则狭窄,胫前动脉次全闭塞,远端血管显影模糊;1例双膝关节以下多处溃烂并坏疽患者C TA 显示左侧股深、股浅动脉中度狭窄,双侧胫前动脉呈虫蚀状充盈缺损,节段性狭窄,右侧胫后动脉严重狭窄,足背动脉不显影;1例患肢右侧腓动脉近、中段管腔狭窄,不全闭塞,左侧胫前动脉轻度狭窄。3例患者在脐带血干细胞移植前均接受内科常规控制血糖、改善循环、抗感染等综合治疗,辅以常规换药和清创处理,2例还多次行外科扩创治疗,未能使局部情况改善,创口不能愈合。1.3 治疗方法1.3.1 脐带血干细胞的分离培养 脐带血干细胞来自健康分娩孕妇的脐带血,由深圳市北科细胞工程研究所进行分离、提取、培养制成细胞悬液,每份干细胞含量为(4～6)×108个,4℃下冷藏不超过24h ,治疗前在37℃恒温水箱复温至37℃。1.3.2 脐带血干细胞的移植方法 首次采用静脉输注脐带血干细胞悬液1份,间隔5～7d 取膝关节以 ? 83?Journal of Nursing Science J ul.2010 Vol 125 No 113(General Medicine )
造血干细胞移植临床应用研究进展
造血干细胞移植临床应用研究进展
解放军医学院 《血液系统》 论文题目：造血干细胞移植临床应用研究进展 学员姓名： 学号： 研究专业： 2016年月日
造血干细胞移植临床应用研究进展 何艳 ZS15078 造血干细胞移植是现代医学发展的一个重要里程碑，造血干细胞是最早发现，研究最多和最先用于治疗疾病的成体干细胞。血干细胞移植是从60年代逐渐发展起来的一种医疗技术,由于最初是通过抽取供体骨髓而获得造血干细胞,所以又称为骨髓移植。造血干细胞移植(HSCT)是通过大剂量放化疗预处理，清除受者体内的肿瘤或异常细胞，再将自体或异体造血干细胞移植给受者，使受者重建正常造血及免疫系统。目前广泛应用于恶性血液病、非恶性难治性血液病、遗传性疾病和某些实体瘤治疗。造血干细胞移植主要包括骨髓移植、外周血干细胞移植、脐血干细胞移植。由于骨髓为造血器官，早期进行的均为骨髓移植。近10年来，由于科学的进步，人们已可通过一些药物将骨髓中的造血干细胞"动员"到外周血中，通过血细胞分离机分取造血干细胞,称为"外周血干细胞移植"。 一般来说，人体有三个部位生产和存储造血干细胞，大部分在骨髓里，所以叫骨髓造血干细胞。还有一部分在外周血液中，也就是在血管里面有少量的造血干细胞。第三就是在脐带里有大量丰富的造血干细胞。一般根据患者的疾病种类、疾病状态及预后、HLA配型结果及供者年龄等因素综合考虑来选择造血干细胞移植方式。目前异
基因造血干细胞移植绝大多数为配型相同的同胞间、半相合父母与子女间、不全相合同胞间的移植，而随着全世界及我国骨髓库的增加，非血缘供者的异基因造血干细胞移植数量也在不断增加。不同移植类型各自优劣不同，自体造血干细胞移植的优点在于不受供者的限制，移植后不发生移植物抗宿主病，不需要使用免疫抑制剂，严重并发症较少，费用较低，缺点是复发率高。异基因造血干细胞移植治疗恶性疾病，植入的供者细胞有持久的抗肿瘤作用，复发率低，但严重并发症多，费用相对较高。近年来,全球每年的骨髓移植病例已超过1万例。中国造血干细胞移植已进入有序健康深入发展的状态,21世纪中国将成为造血干细胞移植的需求大。 骨髓移植技术使众多白细胞患者得到救治，使急性白血病患者的长期生存率提高到50%-70%。为发展此项技术做出了重要贡献的美国医学家托马斯因而获得了1990年度的诺贝尔医学奖。1976年托马斯报道100例晚期白血病病人经HLA相合同胞的骨髓移植后，13例奇迹般长期生存。从此全世界应用骨髓移植治疗白血病，再生障碍性贫血及其他严重血液病，严重血液功能缺陷病，急性放射病，部分恶性肿瘤等方面取得巨大成功，开创临床治疗白血病及恶性肿瘤的新纪元。目前异基因干细胞移植数一直占我国的半数以上，长期存活率已达75%，居国际先进水平以达到75%以上。 造血干细胞移植可以治疗多种血液病、实体瘤、免疫缺陷病和重度急性放射病，这已被很多人所熟悉。然而科学家们在对造血干细胞的研究中还取得了许多新进展并发现许多新功能，研究结果表明造
无关供者脐带血干细胞移植概况_张昊
综述doi:10.3969/j.issn.1009-0002.2013.05.033 无关供者脐带血干细胞移植概况 张昊，王福喜，武文杰，李茜，韩俊领 协和干细胞基因工程有限公司，天津300384 ［摘要］脐带血作为造血干细胞的一大来源，已逐渐获得医学界的认可，随着临床实践的不断展开，对脐带血的使用也趋于标准化。我们通过移植物抗宿主病和治愈情况对骨髓移植与脐带血移植进行了比较，提供了移植用脐带血的择优选取办法及移植的最低细胞剂量，对双份脐带血的选择给出建议，同时对非亲缘脐血与骨髓共输注临床使用情况和嵌合体检测做了介绍与评价。可以看出，在治疗恶性血液病时，脐带血移植是一个可靠的方法。 ［关键词］脐带血；骨髓；无关供者；移植；移植物抗宿主病 ［中图分类号］R551［文献标识码］A［文章编号］1009-0002（2013）05-0741-03 Survey of Transplantation of Umbilical Cord Blood from Unrelated Donor ZHANG Hao*,WANG Fu-Xi,WU Wen-Jie,LI Qian,HAN Jun-Ling Union Stem Cell&Gene Rngineering Co.Ltd.,Tianjing300384,China *Corresponding author,E-mail:zhanghao323@https://www.360docs.net/doc/9a5937620.html, ［Abstract］Recent large international studies suggested that allogeneic umbilical cord blood（UCB）transplantation may potentially emerge as the frontline stem cell source for patients with hematopoietic malignancies because of its ability to confer superior overall and relapse-free survival compared with matched marrow stem cells.In this ar?ticle we showed graft-versus-host disease and survival rate of bone marrow transplantation compare with the UCB transplantation（UCBT）and offered a priority principle for UCB taking;the minimum cell dose for UCBT,when double UCB is supposed to take and chimera detection.So we suggest UCBT is a reliable way to the patients. [Key words]umbilical cord blood;bone marrow;unrelated donor;transplantation;graft-versus-host disease 1989年10月，Gluckman首次将脐带血用于治疗一名儿童患者的全血细胞减少症（范康尼贫血）。此后，脐带血逐渐成为大家所接受的造血干细胞来源而用于医疗。全球现存的脐带血资源相当丰富，自体与公共标本数达400000份，而已用于临床移植的就达20000份之多，日本、澳大利亚和加拿大的脐带血储存与应用都相当发达。2000年以来，自体脐带血储存业务在我国蓬勃发展，北京，天津、上海等城市都成立了供自体储存的脐血库。脐带血储存事业蒸蒸日上，为脐带血的应用打下了坚实的基础，越来越多的关注也随之而来[1-2]。 1骨髓移植与脐带血移植治疗的比较 骨髓、脐带血（UCB）和外周血是现今临床移植所需造血干细胞的三大来源，其中骨髓在临床移植中应用最多，但约30%需要骨髓移植（BMT）的病人无法找到与之HLA配型相匹配的供者，所以脐带血以其来源可靠且丰富、价格低廉、配型要求较BMT 低等特点越来越受到关注。Eapen[3]比较了503例无关供者（UD）脐带血移植（UD-UCBT）和282例全相合无关供者骨髓移植（UD-BMT），其中35例全相合脐血、201例1个位点不合脐血和282例2个位点不合脐血，在此基础上又将细胞数以3×107/kg为界分为高、低细胞数2组。结果表明，与UD-BMT相比，HLA全相合及1个位点不合高细胞数UD-UCBT移植相关死亡率相似；UD-UCBT和全相合UD-BMT的原发病复发率相似，且2个位点不合UD-UCBT复发率低于全相合UD-BMT；进一步比较了2个位点不相合UD-UCBT和全相合UD-BMT在6个月和12个月时的复发率，UD-UCBT仍低于UD-BMT；HLA相合UD-BMT、UD-UCBT，1个位点不合的低细胞数UD-UCBT、1个位点不合的高细胞数UD-UCBT和2个位点不合的UCBT的5年EP分别是38%、60%、36%、45%和33%。因此，与全相合UD-BMT相比，1或2个位点不合的UD-UCBT的5年LFS与8/8相合的BMT相似，全相合UCBT的LFS高于全相合UD-BMT。大量询证医学资料[4]表明脐血移植治疗白血病作用更好，UCBT白血病复发率、无病生存率与长 收稿日期：2013-03-06 作者简介：张昊（1982-），男，理学学士，助理研究员，（E-mail）zhang?hao323@https://www.360docs.net/doc/9a5937620.html,
中国异基因造血干细胞移植治疗血液系统疾病专家共识(Ⅱ)——移植后白血病复发(完整版)
中国异基因造血干细胞移植治疗血液系统疾病专家共识(Ⅱ)——移 植后白血病复发(完整版) 白血病复发是异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)失败的主要原因之一。国际骨髓移植登记组(CIBMTR)的资料显示，复发在非血缘和同胞相合移植后的死因中分别占33％和47%[1]。北京大学血液病研究所的资料显示，单倍型和同胞相合移植后的复发相关死亡率在总体人群中分别为15.6％和16.7%[2]，在死因中分别占32％和42%。移植后一旦复发预后很差，目前治疗选择仍然有限；各移植中心在处理移植后复发方面各自进行了探索。本共识综合各移植中心的经验和临床研究，并参考国外文献，进行归纳总结，旨在对移植后白血病复发的诊断和处理原则进行推荐。 一、定义和分类 根据复发时肿瘤负荷分为血液学复发、细胞遗传学和(或)分子生物学复发；根据肿瘤细胞来源可分为供者型复发和受者型复发；从复发部位上可分为髓内复发、髓外复发和髓内伴髓外复发。 1．血液学复发： 指移植后完全缓解的患者外周血中又出现白血病细胞或骨髓中原始细胞≥5％或出现新的病态造血或髓外白血病细胞浸润。 2．细胞遗传学复发： 指移植后已达细胞遗传学完全缓解的患者又出现原有细胞遗传学异常，或性别染色体由完全供者型出现受者一定比例的嵌合(比例界值尚无统一标准，且不等同于白血病细胞的增加)，尚未达到血液学复发的标准。
3．分子生物学复发： 是近年研究的热点，指应用流式细胞术(FCM)和(或)聚合酶链反应(PCR)等分子生物学方法检测到特异或非特异分子生物学标志异常或超过一定界值、尚未达到血液学复发的标准。参见以下微小残留病(MRD)判定标准。 二、MRD检测 (一)常用MRD检测方法 1．染色体： G显带、R显带和(或)荧光原位杂交(FISH)分析证明有白血病细胞或肿瘤细胞特异的染色体易位和融合基因存在，是检测MRD的标志技术。FISH 检测MRD的敏感度为10-2~10-3，检测结果阳性即表明患者体内有残留白血病细胞。 2．FCM ： FCM检测的MRD为白血病相关免疫表型(LAIP)，敏感度达10-4左右。FCM检测MRD在急性淋巴细胞白血病(ALL)尤其是B-ALL中的预测意义较急性髓系白血病(AML)敏感、特异，但移植后各监测时间点的意义、抗体的组合及界值等尚未达到标准化。多个研究在ALL中将<10-4定义为MRD阴性，提示复发率较低、预后良好[3]。 3．PCR技术： PCR技术检测的MRD包括特异分子生物学标志(TEL-AML1、BCR-ABL、AML-ETO、CBFβ-MYH11、NPM1等)和非特异标志(IgH/TCR 重排、WT1等)，敏感性可达到10-5~10-6。 4．供受者嵌合状态的检测：
卫生部办公厅关于印发《脐带血造血干细胞治疗技术管理规范(试行)
卫生部办公厅关于印发《脐带血造血干细胞治疗技术管理规 范(试行)》的通知 【法规类别】采供血机构和血液管理 【发文字号】卫办医政发[2009]189号 【失效依据】国家卫生计生委办公厅关于印发造血干细胞移植技术管理规范(2017年版)等15个“限制临床应用”医疗技术管理规范和质量控制指标的通知 【发布部门】卫生部(已撤销) 【发布日期】2009.11.13 【实施日期】2009.11.13 【时效性】失效 【效力级别】部门规范性文件 卫生部办公厅关于印发《脐带血造血干细胞治疗技术管理规范（试行）》的通知 （卫办医政发〔2009〕189号） 各省、自治区、直辖市卫生厅局，新疆生产建设兵团卫生局： 为贯彻落实《医疗技术临床应用管理办法》，做好脐带血造血干细胞治疗技术审核和临床应用管理，保障医疗质量和医疗安全，我部组织制定了《脐带血造血干细胞治疗技术管理规范（试行）》。现印发给你们，请遵照执行。 二〇〇九年十一月十三日
脐带血造血干细胞 治疗技术管理规范（试行） 为规范脐带血造血干细胞治疗技术的临床应用，保证医疗质量和医疗安全，制定本规范。本规范为技术审核机构对医疗机构申请临床应用脐带血造血干细胞治疗技术进行技术审核的依据，是医疗机构及其医师开展脐带血造血干细胞治疗技术的最低要求。 本治疗技术管理规范适用于脐带血造血干细胞移植技术。 一、医疗机构基本要求 （一）开展脐带血造血干细胞治疗技术的医疗机构应当与其功能、任务相适应，有合法脐带血造血干细胞来源。 （二）三级综合医院、血液病医院或儿童医院，具有卫生行政部门核准登记的血液内科或儿科专业诊疗科目。 1.三级综合医院血液内科开展成人脐带血造血干细胞治疗技术的，还应当具备以下条件： （1）近3年内独立开展脐带血造血干细胞和（或）同种异基因造血干细胞移植15例以上。 （2）有4张床位以上的百级层流病房，配备病人呼叫系统、心电监护仪、电动吸引器、供氧设施。 （3）开展儿童脐带血造血干细胞治疗技术的，还应至少有1名具有副主任医师以上专业技术职务任职资格的儿科医师。 2.三级综合医院儿科开展儿童脐带血造血干细胞治疗技术的，还应当具备以下条件：
脐血干细胞移植知情同意书
附件1 与本项目相关的《知情同意书》样本
山西医学科学院山西大医院 脐血干细胞移植患者知情同意书 患者姓名年龄性别住院号 疾病介绍和治疗建议： 医生已告知我需要进行治疗。治疗的适应症及术前准备一般流程： 1．移植术前讨论参加人员：。 2．目前治疗患者本病的方法：。 3．脐血干细胞移植的适应症： <1>．患者疾病诊断明确； <2>．结合患者的具体情况，目前脐血干细胞移植为治愈疾病的较合适选择； <3>．患者查体无脐血干细胞移植的禁忌症，符合移植要求； <4>. 有可以采用的脐血干细胞来源及必要的经济支持。 4．移植术前的准备： <1>．已对患者病情进行评估，已完成供患者查体，并再次确认HSCT的适应症及移植时机； <2>．根据需要对患者、供者及其家属提供必要的指导； <3>．患者与供者关系：，HLA相合情况：相合。 <4>．预处理方案为：，移植物来源：。 5．移植的一般流程： <1>．患者药浴，进洁净室，行中心静脉插管。 <2>．进行移植前预处理（方案如上所述）。 <3>．按常规进行骨髓和/或外周血造血干细胞输注。 <4>．防治脏器损害、感染及移植物抗宿主病（GVHD）。 <5>．残存白血病监测、免疫重建、远期合并症的防治与随访。 HSCT后的效果：预计非复发死亡率约20%左右，复发率约10%左右，但对于高危白血病，复发率增高。
治疗潜在风险和对策： 医生告知我造血干细胞移植可能动发生的一些风险，有些不常见的风险可能没有在此列出，具体的治疗方案根据不同病人的情况有所不同，医生告诉我可与我的医生讨论有关我治疗的具体内容，如果我有特殊的问题可与我的医生讨论。 1.我理解任何治疗都存在风险。 2.我理解任何所用药物都可能产生副作用，包括轻度的恶心、皮疹等症状到严重的过敏性休克，甚至危及生命。 3.我理解此治疗可能发生的风险和医生的对策： 1) 主要脏器损害：原因包括既往化疗药物累积毒性、预处理药物毒性、感染、贫 血、出血等因素和其它具有使用适应症的药物可能的副作用。心脏、肝、肾、肺、脑等主要脏器的重度损害可危及生命，轻度脏器损害可恢复。相应防治措施会尽可能减少上述因素的损害程度，但不能完全杜绝上述损害的发生。 2) 干细胞输注过程中可能会发生过敏反应和急性左心衰竭；预防措施为输注前应用抗过敏药物、监测出入量及输液速度； 3) 感染：接受移植患者属免疫功能低下人群，易患各种病原导致的感染，内源性病原可活化为活动性感染。感染的临床表现不典型，不同于免疫功能正常病人，病情变化快，抗感染治疗难度大。各种抗感染药物及支持措施的应用大大改进了疗效，但重度感染仍可危及生命。 4) 移植物抗宿主病（GVHD）：异基因移植急性GVHD发生率50%～70%，重度GVHD 死亡率较高。慢性GVHD对生活质量有一定影响，少数严重者可危及生命。抗GVHD措施包括各种免疫抑制剂、相关感染防治措施和支持治疗。 5) 未植入：现行移植方案下异体造血干细胞不植入率约为1%～4 %。 6) 复发：移植后血液病仍存在复发风险。相应措施包括：定期随访；调整免疫抑 制剂；供者淋巴细胞输注（DLI）；化疗；二次移植及采用相应靶向药物预防和治疗如格列卫等。 7) 其他合并症：PTLD（应用ATG患者发生率稍高为10%-20%），出血性膀胱炎，脑出血；贫血；不育；继发肿瘤等。应对措施包括血象监测，输血，酌情
白血病骨髓移植有什么条件
白血病骨髓移植有什么条件 文章目录*一、白血病骨髓移植有什么条件*二、白血病骨髓移植后如何护理*三、白血病其他治疗方法有哪些 白血病骨髓移植有什么条件1、白血病骨髓移植有什么条件白血病骨髓移植首先要有适合的骨髓提供者,最好具有全相合基因提供者。其次必需要求化疗取得的完全缓解并且年龄一般在45岁以下。白血病骨髓移植无严重的肝、肾、心、肺、脑等重要脏器功能损害,没有糖尿病、肝炎、高血压、脑梗、心脏等疾病。 2、骨髓移植是白血病的最佳治疗方法吗 经过对一些大宗的白血病患者的跟踪研究发现通过骨髓移植第一次疾病就可以直接得到缓解,患者的三年的生存率可以提高至少百分之五十,但是如果不做骨髓移植的话患者三年的生存率仅有百分之二十左右。所以不得不说骨髓移植之治疗白血病的良方。其实不光是急性白血病,对于慢性粒细胞白血病骨髓移植同样具有非常强大的效果。通过一些研究发现对于慢性粒细胞白血病而言,几乎骨髓移植几乎是此病的唯一治疗方法,经过治疗患者的五年的生存率可以提高到百分之九十!所以不得不说骨髓移植在白血病治疗方面的强大。 3、白血病骨髓移植是怎样移植的 3.1、第一阶段为准备期(Conditioning),在这时期病人必须先接受超大量的化学药物治疗或全身性放射线电疗,其目的主要
在于彻底破坏原有的免疫力以及尽可能杀死残存于体内的癌细胞; 3.2、第二阶段为骨髓抽取与输入期,在完成准备工作后,在手术室里从捐髓者身上两边肠骨处抽出约每公斤体重十五CC的骨髓,经过滤处理后装入血袋,即可经由病人的中心静脉输入病 人体内而完成骨髓移植; 3.3、第三阶段为移植后照顾期,此阶段亦为最重要时期,因为在新骨髓长出之前,病人最容易发生感染与其他并发症,此时 期的预防处理对于骨髓移植的成功与否,可说是最重要的一环。 白血病骨髓移植后如何护理1、居住环境:保持室内空气新鲜,每天早晚开窗通风各30分钟,减少家庭聚会。移植后半年内或血白细胞计数低于正常时,外出时记得必须戴口罩。为了避免细菌繁殖,喜爱宠物的病人从自身健康的角度考虑,必须割爱。 2、适当锻炼:移植后的病人不但免疫力低下,大部分还会出现双下肢肌肉略有萎缩的情况,因此应先室内后室外,循序渐进 地增加活动量,以恢复体力,增强抵抗力。调整好心态,保持轻松、愉快的心情。保证充足的睡眠,对病人尤为重要。 3、营养补充:病人在接受造血干细胞移植的过程中,能量消耗比较大。大部分患者会出现一定程度的营养不良、体质下降,因此一定要补充适量的营养。要注意多摄入高热量、高蛋白、高维生素饮食,以清淡半流质或面食为主,可以多吃排骨汤、鸡汤、
干细胞及其移植技术初步临床应用的研究进展
干细胞及其移植技术初步临床应用的研究进展 发表时间：2014-07-25T09:12:50.280Z 来源：《中外健康文摘》2014年第23期供稿作者：赵淑艳 [导读] 干细胞研究是目前生物医学研究的前沿领域，其在生物学、胚胎发育学、医学、药学等方面展示出愈来愈明显的应用前景。赵淑艳(淄博市中心血站 255033) 【中图分类号】R319 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）23-0022-02 干细胞是具有多分化潜能和自我复制的细胞系，无论在体内还是体外培养都能表现为长期存活，不断地自我繁殖，在一定的微环境中可以诱导分化为所需要的组织细胞，有很强的可塑性。干细胞研究是目前生物医学研究的前沿领域，其在生物学、胚胎发育学、医学、药学等方面展示出愈来愈明显的应用前景。 1.干细胞的相关背景知识 1901年，Reguard[1]等人在研究精子形成过程的实验中首次提出了干细胞的概念，之后学者们对干细胞不断地研究探索，随着新的血液分析方法的建立，研究发现某种细胞克隆可以使遭受致命放射损伤的小鼠造血功能恢复，从而推动了干细胞的研究[2,3]，之后随着对成体干细胞与胚胎干细胞的深入研究，根据分化能力的不同将干细胞分为3 类：（1）全能干细胞；（2）多能干细胞；（3）兼能干细胞；按其来源分类可分为外周血干细胞、骨髓干细胞和脐血干细胞。 2.胚胎干细胞与血细胞治疗 胚胎干细胞(embryonic stem cell，ES细胞)是从早期胚胎的内细胞团或原始生殖细胞分离出来的多潜能细胞系。 由人ES细胞发育而来的各种细胞可为器官移植、组织损伤修复和细胞治疗等临床应用提供可靠的细胞来源，从而为许多由于供体缺乏而难以根治的疾病提供了治愈的机会，如肾衰竭或白血病等的治疗。有学者成功地向神经系统有缺陷的实验鼠体内移植了由胚胎干细胞分化成的神经胶质细胞，结果表明这种人工培育的细胞能真正取代动物自身的细胞[4]。由此可见，胚胎干细胞移植技术和其它先进生物技术的联合应用，在未来的几年内可能在移植医学领域的革命性进步。 3.脐血干细胞及其移植技术的临床应用 脐血干细胞与骨髓干细胞和外周血相比，具有采集方便、细胞免疫性不成熟、移植过程中不需要严格配型等优点，具体如下：首先，脐血干细胞来源丰富，且相对于自体骨髓干细胞，脐血干细胞获得较简便，受感染几率减少；其次，脐带血中T淋巴细胞表型及功能均为不成熟表现，人类白细胞抗原Ⅱ类抗原表达率低，几乎没有抗体，移植后排异反应弱或不出现；再次，脐带血干细胞比外周血干细胞和骨髓干细胞更为原始，其自我繁殖能力最强，繁殖速度最快。 由于以上诸多优点，因此脐带血造血干/祖细胞具有极大的临床应用价值。《血站管理办法》等法规将脐血库作为“特殊血库”，明确干细胞的采集与供应属于血站的工作范畴。 有学者通过对脐带血进行采集、分离和检测，制备脐带血干细胞制剂进行局部移植，用来治疗肝硬化失代偿和股骨头坏死。结果发现制备的脐带血干细胞制剂有核细胞计数，均达到治疗剂量，肝硬化失代偿期患者治疗后白蛋白水平逐步升高，1个月后与治疗前相比有明显升高（P<0.05）。肝硬化和股骨头缺血坏死患者治疗后临床症状均有好转。由此可见，脐带血干细胞移植可为临床多种疾病的有效治疗提供一种新手段[6]。 然而，脐血干细胞移植技术目前仍不够成熟和完善，需要扩大移植病例数，要结合回顾性研究或前瞻性、随机对照研究这种技术的优缺点，还需长期的临床评估。 4.外周血干细胞及其移植技术的临床应用 外周血干细胞作为成体干细胞的主要来源之一，是一种兼能干细胞，具有只能向一种或密切相关的几种细胞类型分化的潜能，在器官损伤疾病的治疗中有广泛的应用。应用外周血造血干细胞的优点在于移植的产品纯度高，对供者造成的痛苦小，治疗效果明显，费用低廉，技术风险小，不会产生排异反应，具有广泛推广的应用价值。 体外造血干细胞的扩增在临床应用方面是一直未能解决的难题，最近的研究表明，利用Notch配体可以在体外高效扩增脐带血造血干细胞，并且利用该方法扩增造血干细胞为临床造血干细胞移植开展了前期的临床试验。有学者通过研究比较了脐血干细胞移植与自体外周血干细胞移植对治疗肝硬化腹水患者的效果，结果发现两种治疗方法的患者的谷丙转氨酶、白蛋白及总胆红素等肝功能指标数据比较无明显的统计学意义（P>0.05）；脐血干细胞移植组大量腹水患者11例，治疗后腹水消失6例，明显减少5例；自体外周血干细胞移植治疗组大量腹水患者9名，治疗后腹水消失5例，明显减少4例。可见两种治疗方法具有相类似的疗效[7]。 值得注意的是，在外周血干细胞采集过程中，人们通常更加关注如何提高采集效率，而忽略了供者血小板损伤对整个移植过程的影响。血小板的降低不但危害供者生命安全，还会直接影响干细胞的采集量及采集次数，这是关系到患者移植成功与否的重要因素之一。 5.展望 干细胞移植在临床上的应用前景十分广泛，同时，还需考虑到临床真正应用干细胞技术,必然牵涉到干细胞工程化问题，显然自体干细胞移植不适合工程化生产，而应用同种异体或异种干细胞移植需要解决免疫排斥问题。另外，现今还无有效的手段来防止移植遗传性疾病的可能，各种干细胞移植技术的远期效果还需长期的临床观察。 参考文献 [1] Regaud C.Etudes sur la structure destubes semenifere et sur la spermatogenese chez les mammiferes. Part 1.Archives d’Anatomie microscopiques et de Morphologie experimentale,1901;4:101. [2] Baserga A,Zavagli G.Ferrata’s stem cells:an historical review on hemocytoblasts and hemohistioblasts.Blood cells,1981;7(3):537. [3]Thomson JA,Kalishman J,Golos TG,et al.Isolation of a primate embryonic stem cell line.Proc Natl Acad Sci USA,1995;92(17):7844. [4]王常勇，吕双红，李贤仁.人胚胎干细胞研究的现状与前景.中华医院管理杂志,2001,6(17):381-384. [5]裴雪涛.干细胞研究进展与血细胞治疗.中国输血杂志,2010,10（23）：756-757. [6]范娅涵,蒋天伦,黎儒青,等.治疗用脐血干细胞的制备及初步临床应用.中国输血杂志,2010,3(23):179-182. [7]李翠莹，赵景兰,张利,等.脐血与自体外周血干细胞移植治疗肝硬化腹水的疗效比较.中国输血杂志,2010,3(23):182-184.
骨髓移植在小儿白血病治疗中的应用研究
骨髓移植在小儿白血病治疗中的应用研究 发表时间：2016-12-02T14:24:00.760Z 来源：《心理医生》2016年23期作者：乔淑敏宋秀玲岳屹囡王易[导读] 探讨骨髓移植治疗小儿白血病的临床效果。 （1济宁医学院附属济宁市第一人民医院山东济宁 272011）（2苏州大学附属儿童医院江苏苏州 215000）【摘要】目的：探讨骨髓移植治疗小儿白血病的临床效果。方法：对2015年3月-2016年3月期间我院血液科收治的5例接受骨髓移植治疗的白血病儿童的临床资料进行回顾分析，其中急性淋巴细胞白血病3例，急性髓细胞性白血病2例，由中华骨髓库提供HLA相合非亲缘供髓，预处理后对5例白血病患儿实施骨髓移植手术，手术均顺利进行。结果：5例白血病患儿经骨髓移植后均获得造血重建，4例经DNA短串联重复序列多态性分析证实供体骨髓植活。结论：骨髓移植是治疗急慢性白血病的有效方法，可提升患儿的生存希望。 【关键词】骨髓移植;小儿; 白血病; 治疗效果【中图分类号】R720.5 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）23-0100-02 【Abstract】Objective To investigate the clinical effect of bone marrow transplantation in the treatment of children with leukemia. Methods The clinical data underwent bone marrow transplantation for the treatment of children with leukemia during the period from March 2015 to March 2016 in the Department of Hematology in our hospital 5 cases were analyzed retrospectively, including 3 cases of acute lymphocytic leukemia, 2 cases of acute myeloid leukemia, HLA provided by the China bone marrow which unrelated donor marrow, after pretreatment of bone marrow transplantation surgery on implementation 5 cases of leukemia patients, surgery were performed successfully. Results 5 cases of children with leukemia after bone marrow transplantation were obtained hematopoietic reconstitution, the DNA short tandem repeat polymorphism analysis confirmed the donor bone marrow graft. Conclusion Bone marrow transplantation is an effective method to treat acute and chronic leukemia, which can improve the survival of patients with acute and chronic leukemia.. 【Key words】Bone marrow transplantation; Children; Leukemia; Treatment effect 白血病是临床上常见的肿瘤之一，尤其好发于儿童和青少年。白血病的发病率较高，死亡率在儿童及35岁以下成年人中居首位。白血病是造血细胞的恶性克隆性病变，随着白细胞分化、成熟的能力逐渐丧失，导致恶性细胞在体内逐渐积累，最终影响到人的健康[1]。随着医学技术的不断发展，白血病的治疗取得了较大的进步，其中骨髓移植（Bone marrow transplantation,BMT）已经成为治疗白血病的重要手段。BMT的出现为这些患者带来了生存的希望，本文针对其在小儿白血病治疗中的应用进行简述。 1.资料与方法 1.1 基本资料 选择2015年3月-2016年3月期间我院血液科收治的5例接受骨髓移植治疗的白血病儿童作为研究对象，男患儿3例，女患儿2例；年龄3～11岁，平均年龄（7.2±2.3）岁；其中急性淋巴细胞白血病3例，急性髓细胞性白血病2例。由中华骨髓库提供HLA相合非亲缘供髓。 1.2 方法 移植前给予马利兰-环磷酰胺与处理方案，骨髓从采集到输注进入患儿体内不超过20h，输注骨髓后，及时给予并发症预防护理，移植后28～30d给予骨髓常规、骨髓活检和染色体检查，通过DNA短串联重复序列多态性分析确定是否植活，并以供受者间ABO血型不合者以及性别不同者亦以血型变化和染色体变化作为判断依据[2]。 2.结果 5例白血病患儿经骨髓移植后均获得造血重建，4例经DNA短串联重复序列多态性分析证实供体骨髓植活，另1例急性淋巴细胞白血病患儿死于间质性肺炎。 3.讨论 骨髓移植（BMT）是近现代发展起来的一种新兴的治疗方式，主要用于治疗恶性血液病、肿瘤、免疫缺陷病、放射病及某些遗传性疾病[3]。BMT在白血病治疗中具有十分重要意义，BMT是指供体的正常骨髓移植到患者的体内，通过正常骨髓在患者的骨髓腔内进行增殖、分化，逐渐替代原来的造血细胞，使患者逐渐恢复正常的免疫功能。根据来源不同可分为同基因骨髓移植（syngenieBMT）、同种异基因骨髓移植（allogeneieBMT）、自身骨髓移植（autologousBMT）等3种方式，本组研究采用的是同种异基因骨髓移植。白血病患者在接受骨髓移植治疗前后，需要接受化疗和放射治疗，从而杀灭全身的白血病细胞，通过骨盈移植使得患者的免疫功能得以重建和恢复正常，使患者恢复健康状态[4]。大量临床报道表明，移植时临床状况好者的生存质量和生存期会更好，而缓解期移植的临床效果较好，因此本组5例白血病患儿均在第1次缓解期进行BTM，全部患儿在移植后均获得造血重建，但仅有4例经DNA短串联重复序列多态性分析证实供体骨髓植活，且随访数月未见严重并发症。 近年来，国内白血病治疗已经取得了飞跃性的进步，尽管与发达国家的医学技术存在较大差距，但骨髓移植技术也在临床应用中日趋成熟，成功挽救了无数患者和家庭[5]。结合我国目前的医疗环境，供体难觅和高昂的医疗费用仍是大多数白血病家庭面临的主要的困境，目前提高移植技术仍是较为切合我国实际的研究方向。【参考文献】 [1]郄丽萍,刘建平,王向文.异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病一例[J].内蒙古医学杂志,2015,47(7):894-895. [2]冯全管,曾丽蓉,杨文华.中医药治疗微小残留白血病研究进展[J].山西医药杂志,2016,45(7):789-792. [3]郑丹丹,孙伟玲,周永明.中医药治疗急性白血病的研究进展[J].医学综述,2014, 20(1):120-123. [4]马东升,叶芳.骨髓增生异常综合征转化为急性髓系白血病机制的研究进展[J].白血病·淋巴瘤,2015,24(12):765-768. [5]冯术青,宋旭东,高峰,等.实时定量PCR技术检测BCR-ABL水平在异基因造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病中的应用[J].中华移植杂志:电子版,2014, 8(4):22-26.