生物化学检验

值。当这种实验结果出现时，说明患者可能正处于生命危险的边缘状态，此时如能给予及时、有效的治疗，患者生命可以得到挽救；否则，将可能危及患者安全及生命

又称阈值、分界值、鉴别值、指定值、诊断界值、截断点等

用DL或Xc表示，用来排除或确定某一临床情况或预告将会出现某一生理变化现象

过活检、尸检、外科手术、随访等所作出的决定性诊断，又称确诊试验

酶促反应过程中某一底物或产物的特征信号的变化，从而计算出每分钟的信号变化速度，求出酶活性浓度。

标准的值能够与规定的参考标准相联系起来的特性。

代谢动力学理论，指导最适个体化用药方案的制定和调整，保证药物治疗的有效性和安全性。有效血药浓度范围（therapeutic range ）：指最低有效浓度MEC与最低中毒浓度MTC之间的血药浓度范围。

-时间曲线与纵轴和横轴围成的的面积，单位为时间单位×浓度单位

自由基、H2O2、脂质过氧化物、及单线态氧统称为活性氧。

ROS、活性氮RNS等相关物质产生过多，超出氧化物的清除，氧化系统和抗氧化系统失衡，从而导致分子、细胞、机体的损伤。

控制，导致克隆异常性增生而形成的新生物。

是由机体对肿瘤反应而一场产生和/或升高的，反映肿瘤存在或生长的一类物质，包括蛋白质、激素、酶、多胺、及癌基因产物等

°角方向测量透射光强度，并研究其与被检测溶液微粒浓度关系

5°-90°角方向测量散射光强度，并研究其与被检测溶液微粒浓度关系的方法。

的电化学传感器。

散射光发生变化的浊度都称为伪浊度。

多、直径愈小、越接近球形，在电场中移动速度愈快。

TPR）在患者中，应用该诊断试验检查得到阳性结果的百分比。反映诊断试验正确地识别患者的能力，该值愈大愈好

TNR）在非患者中，应用该试验获得阴性结果的百分比。反映诊断试验正确地鉴别非患者的能力，该值愈大愈好

FNR）反映将患者诊断错误的概率，该值愈小愈好。与灵敏度互补的指标，漏诊率=1-Sen

FPR）反映将非患者诊断错误的概率，该值愈小愈好。与特异度互补的指标，误诊率=1-Spe

（PPV或+PV）：在诊断试验结果为阳性的人数中，真正患病者所占的百分率，即试验结果阳性者属于真病例的概率

NPV或-PV）：在诊断试验结果为阴性的人数中，非患病者所占的百分率，即试验结果阴性者属于非病例的概率。也叫非患病者的试验后可能性

值，即真阳性率与假阳性率之比。可用以描述诊断试验阳性时，患病与不患病的机会比

用诊断试验检测患病人群的阴性率与非患病者人群的阴性率之间的比值，即假阴性率与真阴性率之比。可用以描述诊断试验阴性时，患病与不患病的机会比

（1-特异度）为横坐标，将相对的各临界值连接起来的折线图，称为受试者工作者特征曲线，简称受试者工作曲线

生及所需求的信息，通过计算机收集、处理、存储、输送和应用的系统

1μmol底物的酶量为一个国际单位

以酶原形式分泌入血，在一定条件下被激活，从而引起相应的生理或病理变化。出凝血有关的酶或酶原、胆碱酯酶、铜氧化酶及脂蛋白脂肪酶等。

[S]<

[S]>>Km时，反应速率与底物浓度[S]无关，V=V max=K[E]，称为零级反应，反应速率与酶浓度[E]成正比

前列腺酸性磷酸酶等。血液中的含量与相应分泌腺的功能及疾病有关。②细胞内酶：存在于细胞内进行物质代谢的酶，随着细胞的不断更新或破坏可少量释入血液。当其大量出现于血清中时，提示酶的来源组织细胞受损，最常用于临床诊断。

促反应平均速度。

经过酶促反应逐渐被消耗，当剩余的底物量很小（＜1%-5%）时，提示反应信号逐渐达到平衡，即通常所说的终点，所以又称为终点法。

。

”真值”最为接近。

少，系统误差很小，有适当的灵敏度、特异度、较宽的分析范围并且线性良好；重复测定中的随机误差可以忽略不计。

指标符合临床或其他目的的需要。

：分析样品的测定结果，Tb：基础样品的测定结果，Tt - Tb：回收量，C：分析样品中加入的纯分析物的浓度（加入后浓度），回收率（%）＝（Tt -Tb）÷C *100

相互独立测定结果间的一致程度。

样品的允许误差限度。

表示，是临床判断结果具有临床意义的被分析物浓度。

量值的追溯，直到国际单位的过程。

到实际测量现场的过程。

联系起来的检测系统称为—。

测定方法的物质。

干扰）。

——分光元件——单色光——反应液——检测器

——反应液——分光元件——单色光——检测器

了分析仪的工作速度；加试剂周期与取样周期对应。

组成流水式的作业，把样品输送到不同的检测单元，并将各个仪器的检测结果合并输出。

t1/2表示，可以衡量药物清除速度的快慢。

指体内药物从测定部位开始不可逆的消失，包括代谢和排泄过程。又称表观一级清除速度常数，单位时间的倒数。

体内清除的药量与进入体内的药量相等时的血药浓度。

6个t1/2以上的时间，需迅速达到治疗所需Css时，可首先使用增大的剂量，即负荷计量。对半寿期长或需迅速发挥疗效的药物，往往需使用负荷计量。

F，表示血管外用药时，药物被机体吸收进入体循环的分数。

PUFA引发一种自由基链式反应，链式地产生脂质过氧化物，这种作用就称~

K常数L光线通过溶液的距离C溶液浓度）

.用基质效应偏差进行评价。

LIS）：对实验室日常工作、科室管理、学科建设和实验室发展等方面所产生及所需求的信息，通过计算机收集、处理、储存、输送和应用的系统。组成：①临床检验信息（实验室日常工作产生的信息）②实验室管理信息（与实验室管理相关的信息）

选定参考抽样组，测定参考值，集合参考值范围，计算参考值区间。注意事项：参考范围的使用有一定的范围，仅适合于符合参考个体要求的参考人群。参考范围仅覆盖研究人群的95％，因此，参考值范围不能盲目的作为正常与疾病的分界点。综合评估。注意年龄、性别、饮食、药物、个人习惯和体力锻炼等因素的影响。检测方法与参考范围或参考值的关系。

金标准应有可靠性②研究对象应有代表性和可比性③样本含量要足够④诊断指标和方法应标准、具体、可靠⑤金标准与诊断试验应同步盲法测量⑥临界值的选择要合理⑦诊断试验应具有临床实用性

.联合试验：平行试验可提高诊断灵敏度，但降低了特异度；系列试验可提高诊断特异度，但降低了灵敏度

ROC曲线将灵敏度和特异度以图示方法结合在一起，可准确反映某分析方法二者之间的关系，是试验准确性的综合代表。方法简洁、直观，可用肉眼直接作出准确性判断。缺：ROC曲线图上显示的不是真正的判断值，实际的分界值通常没有在图上表示出来。研究分析对象的数目没有在图上表示出来。当样品数减少，图形呈锯状，即使样品数目大，也可能是崎岖不平。画图和计算均比较繁琐。主要作用：①选择合适的临界值：最靠近ROC曲线左上角的临界值时，其假阳性和假阴性的总数最少②比较两种或者两种以上的诊断试验对同种疾病诊断的可靠性：ROC曲线下面积（AUC）越大

很难测定的酶；与酶活性测定一起为临床提供新的资料和信息；在同工酶测定中更有价值。

定时法：测定酶与底物作用反应一定时间后底物或产物变化的总量，计算酶促反应平均速度。优：比较简单，最后测定时酶促反应已经终止，所以仪器无需恒温装置，显色剂的选择也可不考虑对酶活性的影响。缺：无法知道整个酶促反应进程中是否都在处于线性期。利用该法测定酶的活性浓度，必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要非常精确，否则会引起较大误差◆连续监测法：只在酶促反应过程中用仪器检测某一反应产物或底物的浓度随时间变化量，求出酶反应初速度间接计算酶活性浓度的方法。优：无需终止酶促反应，不需要添加其他成色剂，就能将反应物变化的多点测定结果连接成线，观察到整个反应过程，选择线性反应期来计算酶活性，结果准确可靠。要求检测仪器具有恒温装置及自动监测装置，自动化生化分析仪都能达到这些要求。

同一种属中由不同基因或等位基因编码的多肽链单体、纯聚体或杂化体，具有相同的催化作用，但其分子构成、空间构象、理化性质、生物学性质以及器官分布或细

电泳法原理：由于各型同工酶的一级结构或空间构象不同，形状也不同，因而带电性质不同，在电场中的迁移率不同，使各型同工酶分离，然后利用酶催化性质选择合适的显色系统使区带呈色。举例：用于LDH同工酶的测定2抑制法原理：免疫抑制法是利用某一亚基的特异性抗体与同工酶中对应的亚基特异性结合而抑制其活性;化学抑制法是利用一定浓度某些化学试剂选择性抑制某类同工酶。分别测定抑制前后的酶活性，间接计算出各类同工酶活性◆举例：用于心肌梗死的LD1和CK-MB测定

单酶反应直接法：单底物反应测定法，如尿酸紫外法测定，胆红素测定。2 酶偶联法：脱氢酶指示系统，如血清葡萄糖己糖激酶测定，血清尿素测定。3 酶循环法：如甘油浓度测定，血清胆汁酸测定。

上并利用这些物质，通过电极这个变换器将被测物质的浓度转变为电学参数而进行检测的方法

电荷分布而形成双电层，期间产生一定的电位差即膜电位

定，简化了实验程序；试剂酶大多是蛋白质，没有毒性，避免了化学品对环境的污染；酶促反应温和，职称试剂可用于自动分析。代谢物酶法在准确性，精确度，灵敏度和线性测定范围等方面优于传统化学方法

◆平衡法：标本中待测物的量有限，经过酶促反应逐渐被消耗，档剩余底物的量很小（<1%-5%）时，指示反应信号逐渐达到平衡，即通常所说的终点，所以又称为终点法◆速率法：又称动力学法、连续监测法、，测定的是速率（通常指的初速度）◆速/平: 测定时间(较短/较长)检测速度(较快/较慢)检测成本(低/高)产品堆积(影响较小/影响较大)样品色原(影响较小/影响较大)测定仪器(要求电噪声小, A读准到0.0001，温差<0.1%/要求不严)◆联系：所用试剂酶的特异性：指示酶要有跟高的特异性；消除干扰因素；加消除、抑制剂和用双试剂法；试剂中的附加剂；应不抑制酶的活性，不影响试剂的稳定性，不与底物和体液中的物质作用；如何提高灵敏度1,、酶循环法2、荧光法

利用底物和辅酶的反复反应，使待测物的酶促反应产物不断扩增◆特：扩增量决定于循环次数，反应产物的增加，提高了检测灵敏度，减少了共存物质的干扰，达到高灵敏度和特异的要求

挥其催化活性，将脱去每种关键的无机离子，微量元素或辅酶之后，酶即失去了其催化活性，无活性的酶与标本混合标本中的无机离子，微量元素或辅酶使该酶重新复活，复活的比例可反映这些无机离子，微量元素或辅酶的含量◆应用：丙酮酸激酶法或色氨酸酶法测定钾离子；α-半乳糖苷酶法测定钠离子;淀粉酶法测定氯离子；超氧化物歧化酶法测定铜离子；碱性磷酸酶法测定锌离子

作为诊断试剂来测定化合物浓度或酶活性的一类酶◆纯度主要指标：①酶的比活性，酶的比活性越高，酶的纯度越高。②杂酶含量

酶的用量要足够大，能使反应1min~3min达到平衡，以保证较快完成测定。反应要朝正反应方向进行，如果反应的平衡常数太低，可用增加底物浓度、偶联反应移去生成物、改变反应pH等方法，并设标准管一起到达平衡以后测定㎞在保证测定线性的前提下要尽量小◆速率法：所用酶的㎞应足够打，以保证测定线性和较长的反应动态期。㎞太小，可加入竞争性抑制剂加大㎞酶用量要合适，用多了可能导致线性期缩短，甚至一级反应丧失。一般酶用量比平衡法小。速率法酶促反应受很多因素影响，只有很好控制反应速度﹙V﹚才与待测物的浓度成正比例。

密度和准确度，在试验中实际测定的是不精密度与不准确度。无论是精密度还是准确度，强调的都是误差，评价试验的过程就是对误差的测定◆精密度评价：精密度是规定条件下独立测定结果之间的符合程度，精密度的评价采用重复性实验：目的与判断标准；评价前准备和评价步骤；统计分析◆准确度评价：目的要求；比较前准备和评价步骤；统计分析

致测定结果增高或降低◆干扰物质：内源性干扰物：血清中固有的代谢产物，如血清中的甘油，胆红素，脂类，蛋白质，血红蛋白等，治疗药物，肠道营养等。外源性干扰物：样品收集中的添加物如抗凝剂，防腐剂，稳定剂，容器和塞子的污染等，试剂中的杂质和杂酶等

白吸光度自变化。稳定性

待测成分发生反应测定检测信号和反射光强度。

是干扰物为主，次波长处有尽可能相同的光吸收值，而被测物在主次波长处的光吸收值有较大差异，次波长一般大于主波长100nm，主要考虑脂浊问题，免疫比浊法测定是次波长的选择，则是距离主波长越远越好，以得到较高的灵敏度◆优：消除噪音干扰，减少杂散光影响，减少样品本身光吸收的干扰。

,分析速度实用性：通道数量，反应杯数量，一次能容纳的样品数量，试剂瓶容量，总反应时间，吸光度检测范围，检测成本，通道开放程度，检测原理，软件功能。

变化的总量，计算酶促反应平均速度。应用：苦味酸法测定肌酐。

胆道等◆生物转化:肝细胞等生物转化部位◆吸收：给药部位

UV）荧光偏振免疫分析法（FPLA）气相色谱法（GC）高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱—质谱联用法(LC-MS)酶免疫法(ELA)

安全范围窄，治疗指数低●以控制疾病发作或复发为目的的用药●不同治疗目的需不同的血药浓度●药物过量中毒●药物治疗无效查找原因◆药动：●已知治疗浓度范围内存在消除动力学方式转换的药物●首过消除强及生物利用度差异大的药物●存在影响药物体内过程的病理情况：1腹泻、呕吐2肝功能减退3心衰、休克时血流动力学的改变●肾功能减退4.长期用药及可能产生药动学相互作用的联合用药

吞噬细胞杀灭外来病原微生物2参与合成某些重要的生物活性

物质3参与许多酶促反应4

应激对蛋白质和酶的损害；氧化应激对核酸和染色体的损伤；氧化应激对糖分子的损害

敏感性高2特异性好，3有器官特异性4血清中的水平与肿瘤体积大小，临床分期相关，用以判断预后5半衰期短6测定方法精密度，准确性，操作方便

◆反应体系中追加抗体，如果浊度继续增大则提示抗原过剩◆待测标本用两种稀释度测定，浓度高的样本浊度反而降低则提示抗原过剩

AFP最大的作用的用于原发性肝癌临床辅助诊断及高危人群的筛查①原发性肝癌：若持续一个月以上AFP＞500ug/L，并排除其他疾病，ALT基本正常，意味着存在肝癌②用于肝癌的治疗效果及预后评估③动态观察AFP含量和ALT酶活性的变换鉴别诊断良性肝脏疾病，良性肝脏疾病中ALP也升高，但95％小于200ug/L◆AFP与生殖细胞瘤：AFP和HCG 联合检测可用于睾丸肿瘤的分型和分期

f-PSA/t-PSA比值来鉴别良恶性前列腺肿瘤：＜15前列腺癌可能性大，＞0.25提示前列腺肥大◆病情、疗效监测和预后判断◆监测前列腺癌的复发

（1）提高疾病诊断敏感度：实验室将几个不同项目组合成一个大的体检系列来筛查某些疾病，用于健康监督。（2）了解某器官不同功能状态，可以了解肝脏的蛋白质合成功能、胆红素的排泄和转化功能、肝细胞损伤程度（3）快速了解患者多方信息（4）适应现代临床医学需要。区别：危急值报告不同于急诊检验报告。危急值不管是急诊还是常诊都必须用电话立即向医生报告。

始至检验报告单发出，一般要经过以下步骤：医生申请患者准备，标本采集，标本标识与核对，标本运输与受检，标本处理，标本检测，数据确认，结果审核，标本存贮与复检，质量信息反馈等程序。质量控制的主要内容：设施与环境，仪器和设备，实验室检测系统。

经过校准，检定、厂家验收合格或检查功能正常仪器，表明该仪器设备为合格状态或正常状态。黄色标识：部分缺陷，但不影响检测所需的某项功能，经过校准、检定或质控仍然合格，表明该仪器设备为准用或降级使用.红色标识：仪器设备处于维修状态或损坏、性能无法确定或经检定校准不合格，表明该仪器设备为停用状态。

的仪器、试剂。校准品、质控品、消耗品、操作程序、质量控制程序等的组合。完整性和有效性：核实检测系统性能：如果实验室的检测系统具有溯源性，并已被许多实验室广泛应用，实验室只需核实系统已被认可的性能。精密度和准确度。确认检测系统性能；如果实验室购置的检测系统在国内刚刚推出，但产品的分析性能已经由厂商进行了详细的评价，所有的分析性能资料已被生产厂商所在国的有关监督机构认可，且获得了生产许可证，实验室在使用该检测系统检测患者标本前应对该检测系统的基本性能进行评估。确认实验应做精密度、准确度和结果可报告范围。评价检测系统性能：一个新的检测系统或对原有检测系统的任何改变都必须对该系统的性能进行全面评估，内容有精密度。准确度、可报告范围、分析灵敏度、分析特异性和参考区间。

:IFCC根据分析方法的准确性与精密度的不同，将其分为决定性方法、参考方法和常规方法三级◆分级?决定性方法：定义：准确度最高，系统误差最小，其测定结果与“真值”最为接近.主要方法：重量分析法、中子活化法、同位素稀释﹣质谱分析法等.用途：用于评价参考方法与一级标准品，不直接用于鉴定常规方法的准确性?参考方法：定义：准确度与精密度已经被充分证实，且经公证的权威机构颁布的方法。干扰因素少，系统误差很小，有适当的灵敏度、特异度、较宽的分析范围并且线性良好：重复测定中的随机误差可以忽略不计。用途：能在条件优越的实验室作常规分析。主要用于鉴定常规方法、鉴定二级标准品和为质控血清定值、商品试剂盒的质量评价?常规方法：具有足够的精密度、准确度和特异度，有适当的分析范围，经济适用，其性能指标符合临床或其它目的的需要。常规方法在作出评定以后，经有关学术组织认可，可以作为推荐方法。

：它的一种或几种物理或化学性质已经充分确定，可用以校正仪器和某种测定方法的物质。分级◆一级标准品：它是已经确定的稳定而均一的物质，其数值已由决定性方法确定，所含杂质已经定量。用于校正决定性方法，评价和校正参考方法以及为“二级标准品”定值◆二级标准品：可以是纯溶液（水或有机溶剂的溶液），也可以存在于相似基质中。可由实验室自己配制或为商品，示值必须用一级标准品和参考方法并由训练有素的，能熟练掌握参考方法的操作者确定。主要用于常规方法的标化和控制物的定值◆校准品：用二级标准品和常规方法测定到。用于常规测定中的标准。

具有弹性速率功能，能选择读数时间前段仍呈线性的吸光度值计算结果，使酶活性测定的线性范围扩大◆优：减少了重新检测的频率；避免了高酶活力样品的错误数据，得到准确的病人结果；减少了试剂的消耗，并缩短了发报告的时间，消除了稀释样品的重做引入的误差.