实验二细胞凝集反应和细胞膜通透性的观察报告 (1)
实验二细胞凝集反应和细胞膜通透性的观察
一、实验目的
1、了解细胞糖被的特点和功能，了解植物凝集素的作用
2、了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度
二、实验原理
1、细胞膜表面的有分支状糖外被，细胞间的联系、细胞的生长和分化、免疫反应、肿瘤的发生等都和细胞表面的分支状糖分子有关。凝集素（lectin）是一类含糖并能与糖分子专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞表面间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。
2、细胞膜是细胞与外界环境进行物质交换的结构。可选择性地让某些物质进出细胞，各种物质出入细胞的方式是不同的，水是生物界最普遍的溶剂，水分子可以按照物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散，以至于在高渗环境中，动物细胞会失水而收缩；在低渗环境中，动物细胞会吸水膨胀直至破裂。
本实验将红细胞分别放于各种等渗溶液中，由于红细胞膜对不同溶质的通透性不同，使得不同溶质透入细胞的速度相差很大，有些溶质甚至不能透入细胞。当溶质分子进入细胞后可引起渗透压升高，水分子随即进入细胞，使细胞膨胀，当膨胀到一定程度时，红细胞膜会发生破裂，血红素溢出，此时，原来不透明的红细胞悬液突然变成红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为红细胞溶血。
由于各种溶质进入细胞的速度不同，所以不同的溶质诱导红细胞溶血的时间不同，相反可通过测量溶血时间来估计细胞膜对各种物质通透性的大小。
三、实验材料、器具和试剂
1、器材与仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、直管、5ml量筒、滴管、天平、离心管
2、材料与试剂：土豆块茎，鸡（采血）、5mmol/LNaCl、65 mmol/LNaCl、0.15 mol/LNaCl、0.8 mol/L甲醇、0.8 mol/L丙三醇、2% Triton X-100、氯仿、PBS缓冲液、生理盐水
四、实验步骤
（一）细胞凝集反应
1、2%鸡血红细胞悬液制备：以无菌方法抽取鸡静脉血液（加抗凝剂），用生理盐水洗5次，每次2000rpm离心5 min，最后按沉淀压积的红细胞体积，用生理盐水配成2％红细胞悬液待用。
2、土豆凝集素制备：称取土豆去皮块茎2g → 加10 mL PBS缓冲液，浸泡2h
3、细胞凝集反应：土豆凝集素１滴、2%鸡血红细胞液１滴，载玻片上混匀，静置20min （动作轻柔，不要将红细胞弄破）
4、对照：PBS１滴、2%鸡血红细胞液１滴
5、观察：肉眼观察，同时用显微镜观察，比较两者的不同
（二）细胞膜的通透性观察
1、制备血细胞悬液：取50ml烧杯将鸡血溶于含有抗凝剂的等渗液中按1:10稀释（肝素钠0.2mg/ml,一般范围在0.01-0.2 mg/ml，等渗液为0.15 mol/LNaCl），可见该悬液为一种不透明的红色液体。
2、观察溶血现象：取一支试管加入5ml蒸馏水，加入1ml鸡红细胞悬液，混匀后注意观察溶液颜色的变化，可见溶液由不透明的红色变成透明的红色液体（可将试管贴靠在书上，隔着试管看书中的字，如发现溶血则文字可被看清）。
3、观察鸡红细胞对不同物质的通透性
（1）取一支试管，加入5 mmol/LNaCl溶液5ml和1ml鸡红细胞悬液，轻轻摇匀，用上述方法观察是否出现溶血现象，如出现溶血，记下发生溶血所需要的时间。
（2）按上述方法分别加入下列6种溶液是否导致红细胞溶血并记录实验结果。
① 65 mmol/L NaCl
② 0.15 mol/L NaCl
③ 0.8 mol/L甲醇
④ 0.8 mol/L丙三醇
⑤氯仿
⑥2% Triton X-100
可制备临时装片镜下观察溶血现象，若发生溶血可在镜下看到破碎的红细胞。
五、实验预期结果与作业
细胞凝集反应实验预期结果：PBS对照组的红细胞逐渐向中间靠拢，最终形成中间颜色较深，边缘颜色较浅的红细胞浑浊溶液（溶胶）；土豆凝集素实验组溶液中的红细胞渐渐凝集成颗粒状，逐渐聚拢，最后在液滴中形成一大块血红色的血块。
六、讨论
1、影响细胞凝集的因素有哪些？
答：溶血剂的影响、检测试剂对结果造成影响、血样采集制作过程中的影响、凝集素的浓度、血细胞浓度、在一定浓度范围内，影响细胞凝集的时间以及程度等等。
2、细胞膜通透性观察实验过程中所需注意？
1、不容易识别溶血现象时，对比观察，首先进行等渗和低渗液的实验，可背后放一张白纸辅助观察，也可找一张带字的纸进行观察，透过试管看字是否逐渐清晰，如果清晰，则发生溶血现象；
2、加入试剂后，不能强力摇晃试管，以免造成人为红细胞破裂，影响判断；
因相对分子质量大小对膜通透性有影响，所以将溶血时间适当的延长至15min，若15min 后还不溶，则判断为不溶血；
3、注意同组实验过程的同步性，尤其是加入血液的操作要迅速，实验中判断结果的同学须是同一个人，避免人主观因素造成影响；
3、按照凝集素的亚基特征可分为几类？
部分凝集,只含1个糖结合结构域,它们不能沉积复合糖和凝集细胞;
全凝集,含至少2个相同或非常相似的糖结合结构域,它们可以凝集细胞和沉淀复合糖,绝大多数具凝集功能的植物凝集素属于此类;
嵌合凝集素，是一类融合蛋白,由1个或多个糖结合结构域及1个具有酶活性或其他生物活性的结构域共同组成;
超凝集素,至少含2个以上不同的糖结合结构域。
细胞凝集反应实验报告 山东大学
科目细胞生物学实验题目细胞凝集反应 细胞凝集反应 【实验目的】 1.了解细胞膜的表面结构； 2.掌握凝集素促使细胞凝集的原理； 3.学习研究细胞凝集反应的方法。 【实验原理】 1.凝集素 凝集素是一类含糖（少数例外）并能与糖转移结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。目前已发现近千种植物中含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。常用的为植物凝集素，通常一起被提取的植物命名，如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等，凝集素是他们的总称。 在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞间形成“桥”，从而引起细胞凝集。凝集素引起的血细胞凝集，其细胞膜结构没有发生变化，与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同；另外，凝集素能与不同的糖蛋白特异结合，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集，但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，因此，Ponder提出应称“凝集素组织化学”而不能称为“凝集素免疫组织化学”。 人们利用凝集素与不同的糖蛋白特异性结合的原理，识别和研究不同类型膜结构的生物学特征，以及进行血型鉴定。ABO血型鉴定主要用于临床输血，在皮肤、肾等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体；不孕症和新生儿溶血症病因的分析及亲子鉴定等。另外，凝集素在临床疾病防治、机体生理活动调控以及生物工程等方面展示出了十分广阔的应用前景。如：植物凝集素可抑制受精；芸豆凝集素可直接抑制HIV-1反转录酶的活性，减少HIV感染者的病毒载量；细胞膜表面糖复合物的糖链结构与肿瘤细胞增殖、侵染、转移等发展过程密切相关，凝集素芯片技术实现了对癌症的快速、高通量检测，有助于筛选出癌症相关的糖链标志物。 2.细胞凝集 细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起，成为一簇不规则的细胞团。细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为，细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。 凝集素是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，如植物血球凝集素，伴刀豆凝集素和土豆凝集素等，它具有凝集细胞核刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 3.细胞凝集的反应技术 一、直接凝集反应技术 颗粒性抗原(细菌、螺旋体、红细胞等)与相应的抗体血清混合后，在电解质的参与下，经过一定时间，抗原抗体凝聚成肉眼可见的凝集块，这种现象称为凝集反应。 血清中的抗体称为凝集素。抗原称为凝集原。 细菌或其他凝集原都带有相同的电荷（阴电荷），在悬液中相互排斥而呈均匀的分散状态。抗原与抗体相遇后，由于抗原和抗体分子表面存在着相互对应的化学基团，因而发生特异性结合，称为抗原抗体复合物。由于抗体与抗原结合，降低了抗原分子间的经典排斥力，抗原表面的亲水基团减少，由亲水状态变为疏水状态，此时已有凝集的趋向，在电解质（如生理盐水）参与下，由于例子的作用，中和
山东大学细胞生物学实验四——细胞凝集反应
细胞生物学实验五——细胞膜的通透性实验 13生物基地 201300140059 刘洋 2015-04-29 同组者：吕赞 一、实验目的 1.了解溶血现象及其发生机制。 2.了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。 二、实验原理 细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障，是一种半透膜，可选择性地控制物质进出细胞。将红细胞放在低渗溶液中，水分子大量渗透到细胞内，可使细胞胀破，血红蛋白释放到介质中，溶液由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。由于溶质渗透入细胞的速度不同，溶血时间也不同，因此，发生溶血现象所需的时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。本实验选用红细胞作为细胞膜渗透性的实验材料，将其放入不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。 溶血（Hemolysis）红细胞破裂，血红蛋白逸出称红细胞溶解，简称溶血。可由多种理化因素和毒素引起。在体外，如低渗溶液、机械性强力振荡、突然低温冷冻（-20℃～—25℃）或突然化冻、过酸或过碱，以及酒精、乙醚、皂碱、胆碱盐等均可引起溶血。 哺乳动物血浆的等渗溶液为0.9%NaCl溶液，红细胞在低于0.45%NaCl溶液中，因水渗入，红细胞膨胀而破裂，血红蛋白逸出。在体内，溶血可为溶血性细菌或某些蛇毒侵入、抗原-抗体反应（如输入配血不合的血液）、各种机械性损伤、红细胞内在（膜、酶）缺陷、某些药物等引起。溶血性细菌，如某些溶血性链球菌和产气荚膜杆菌可导致败血症。疟原虫破坏红细胞和某些溶血性蛇毒含卵磷脂酶，使血浆或红细胞的卵磷脂转变为溶血卵磷脂，使红细胞膜分解。 三、实验用品 1.材料 鸡血红细胞 2.试剂 0.85%NaCl溶液、0.085%NaCl溶液、0.8mol/L甲醇溶液、0.8mol/L丙三醇溶液、 6%葡萄糖溶液、2%TritonX-100 3.器材 试管、试管架、滴管、显微镜、离心机。 四、实验步骤 1.取鸡血6ml，加0.85%NaCl溶液4ml，在1000r/min条件下离心5分钟；（RBC压积量 不少于0.6mol） 2.将上述离心后的红细胞按沉淀量配成50%浓度；（总体积应不少于1.2ml） 3.每组取6支试管，分别加入如下溶液各3ml： （1）0.85%NaCl溶液 （2）0.085%NaCl溶液 （3）0.8mol/L（0.3mol/L等渗）甲醇溶液 （4）0.8mol/L（0.3mol/L等渗）丙三醇溶液
细胞膜的渗透性实验报告.doc
姓名：高超学号：201300140020 同组者：樊晓航，王昊明，余敬洋 实验名称：细胞的渗透性实验 一，实验目的： 1．了解细胞膜的渗透性 2 ．了解各种小分子物质跨膜进入红细胞的速度 二，实验原理： 细胞膜具有对物质选择透过的生理功能。脂溶性越高通透性越大，水溶性越高通透性越小；非极性分子比极性容易透过，小分子比大分子容易透过。水分子可通过由膜脂运动而产生的间隙。非极性的小分子如O2、CO2、N2可以很快透过脂双层，不带电荷的极性小分子，如尿素、甘油等也可以透过人工脂双层，尽管速度较慢，分子量略大一点的葡萄糖、蔗糖则很难透过，而膜对带电荷的物质如：H+、Na+、K+、Cl–、HCO3 –是高度不通透的。 将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有的溶质不能渗入，深入的溶质可以提高红细胞的渗透压，所以促进水分进入细胞，引起细胞溶血。由于溶质渗入的速度互补相同，因此溶血时相同。 三，实验器材： 鸡血，0.85%的氯化钠溶液，0.0085%的氯化钠溶液，0.8mol/L的甲醇，0.8mol/L的丙三醇，6%的葡萄糖溶液，2%的Triton X—100溶液，试管六支，离心机，滴管，载玻片，显微镜等
四，实验步骤： 1、取鸡血2-3ml加入0.85%的氯化钠溶液4ml，在1000r/min条件下离心5分钟，（RBC压积量不少于0.3ml，否则应补加鸡血） 2、将上述离心的红细胞按沉淀量配成50%浓度的溶液（总体积量不少于0.6ml） 3、取六支试管，分别加入如下溶液个3ml (1)0.85%氯化钠溶液(2)0.0085%的氯化钠溶液(3)0.8m o l/L的甲醇(4)0.85m o l/L丙三醇 (5) 6%的葡萄糖溶液(6) 2%的Triton X—100溶液 4、向上述六支试管中加入50%的红细胞悬液1滴，轻摇混匀，观察是否有溶血现象发生（观察时间1小时），记录溶血时间并于显微镜下观察各种溶液中的细胞。 五，实验现象与结果： 实验结果：
抗生素抑菌试验报告
实验报告：抗生素灭菌效果探究 高二（6）班王一峰 实验器材：培养皿，恒温箱，锥形瓶，滴管，显微镜等 实验药品：琼脂，菌落培养液，多种抗生素。 实验基本原理：抗菌素抗菌的机理大致有如下几种： 1.阻碍细菌细胞壁的合成。以这种方式作用的抗生素主要是β-内酰胺类抗生素（青霉素，头孢菌素类）。哺乳动物的细胞没有细胞壁，不受这类药物的影响。 2.与细菌细胞膜相互作用，增强细菌细胞膜的通透性、打开膜上的离子通道，让细菌内部的有用物质漏出菌体或电解质平衡失调而死。以这种方式作用的抗生素有多粘菌素和短杆菌肽等。 3.与细菌核糖体或其反应底物（如tRNA、mRNA）相互所用，抑制蛋白质的合成——这意味着细胞存活所必需的结构蛋白和酶不能被合成。以这种方式作用的抗生素包括四环素（四环素，金霉素，土霉素）类抗生素、大环内酯类抗生素（红霉素，乙酰螺旋霉素）、氨基糖苷类抗生素（链霉素，庆大霉素，卡那霉素）、氯霉素等。 4.阻碍细菌DNA的复制和转录。阻碍DNA复制将导致细菌细胞分裂繁殖受阻，阻碍DNA 转录成mRNA则导致后续的mRNA翻译合成蛋白的过程受阻。以这种方式作用的主要是人工合成的抗菌剂喹诺酮类（如氧氟沙星，诺氟沙星）。 5.影响叶酸代谢。抑制细菌叶酸代谢过程中的二氢叶酸合成酶和二氢叶酸还原酶，妨碍叶酸代谢。因为叶酸是合成核酸的前体物质，叶酸缺乏导致核酸合成受阻，从而抑制细菌生长繁殖，主要是磺胺类和甲氧苄啶。 通过观察培养皿上涂抹抗生素后产生的抑菌圈大小，同时结合显微镜的观察，比较不同抗菌机理的抗生素的抑菌效果。 实验步骤： 1.用蒸馏水洗净培养皿。在培养皿底部的纱布上放一块薄琼脂片。用滴管均匀低价菌落培养液（内含大肠杆菌，化脓链球菌，金黄色葡萄球菌，霉菌等等）。菌落大致形成直径为20mm 的圆。 2.制做多个基本相当的培养皿。分别滴加2~3滴抗生素： （1）阿莫西林（或盘尼西林）溶液 （2）诺氟沙星溶液 （3）红霉素软膏浸液 （4）盐酸林可霉素注射液 抗生素覆盖区均为直径为5mm的圆。 3.其中，第一种方案作用机理是阻碍细菌细胞壁合成，第二种方案是阻碍DNA转录和复制，第三和第四种方案都是通过与细菌核糖体或反应底物结合抑制蛋白质合成。 4.将四个培养皿放在恒温箱中，等待结果。 实验现象：四个培养皿均出现大小不一的抑菌圈，光学显微镜成像显示，抑菌圈是以抗生素为圆心的同心圆，抑菌圈范围内细菌生长明显受到抑制或消失。抑菌圈外的菌落存在细菌生长。 通过尺可以量得，阿莫西林的抑菌效果最佳，抑菌圈直径约为8mm。而诺氟沙星抑菌圈直径约为6mm，红霉素和林可霉素抑菌圈直径和诺氟沙星为代表的喹诺酮类抗生素大小基本相同。但是显微镜成像显示抑菌范围内的细菌数目减少量不如阿莫西林多，也未发现胞体破裂，抗生素大量分布的现象。 实验结论：
实验1 细胞凝集反应
实验1 细胞凝集反应 （赵海泉主编基础生物学实验指导细胞生物学分册中国农业大学出版社2008.8.） 一、实验目的与原理 1．目的 学习植物凝集素的提取方法，观察红细胞凝集现象。 2．原理 细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为细胞间的联系和识别、细胞的生长和分化、免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。 凝集素（1ectin）是一类含糖并能与糖专一结合的蛋白质（少数例外），它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 二、实验用品 1．材料 土豆块茎，兔血。 2．试剂 0.9 % NaCl溶液，PBS缓冲液（称取7.2 g NaCl、1.48 g Na2HPO4、0.43 g KH2PO4。加蒸馏水定容至1 000 mI，pH 7.2）。 3．器材 离心机，显微镜，天平，注射器，6号针头，载玻片，容量瓶，滴管，离心管等。 三、实验内容与操作 （一）提取凝集素 称取土豆去皮块茎20 g，加100 ml PBS缓液，浸泡2 h，将浸出的粗提液过滤，即为可溶性土豆凝集素提取液。 （二）制备2%的红细胞悬液 以无菌方法抽取兔静脉血液（加抗凝剂）2 mI。加8 mL 0.9 % NaCl溶液，
以2 000 r/min离心5 min，去掉上清液，再加0.9 % NaCl溶液至10 ml，反复洗涤5次。最后按沉淀压积的红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞悬液。（三）凝集反应 用滴管吸取土豆凝集素和2%红细胞液各1滴，置载玻片上，充分混匀，静置20 min后于低倍显微镜下观察血细胞凝集现象。 四、注意事项 1．若沉淀压积的红细胞暂时不用，应将其4℃保存。下次使用前，先洗涤再用生理盐水配成2%红细胞悬液。 2．以PBS液加2%血细胞液作对照实验。 五、作业与思考题 1记录血细胞凝集情况。 2实验课程感想或感受。 教学内容： 1实验室安全教育。 2教学方法改革。创新小导师制 3实验报告写作要求 4本次实验内容讲解。 知识点： 实验动物知识。 采血操作。 凝集素。 显微镜。 记录方法。
细胞膜的渗透性实验报告
细胞膜的渗透性实验报告 篇一：细胞膜通透性实验报告 姓名班级13级生命基地班学号同组者： 科目细胞生物学实验实验题目细胞膜通透性实验 【实验题目】细胞膜通透性实验【实验目的】 1、观察溶血现象并掌握其发生机制。 2、了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。【实验材料与用品】 1. 试剂：0.85% NaCl溶液、0.085% NaCl溶液、0.8mol/L 甲醇溶液、0.8mol/L丙三醇溶液、6% 葡萄糖溶液、2% TritonX-100 2. 器具：离心管、试管架、滴管、显微镜、离心机 3. 材料：鸡血红细胞【实验原理】 细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择性屏障，它是一种半透膜，可选择性控制物质进出细胞。各种物质出入细胞的方式是不同的，水是生物界最普遍的溶剂，通透性高（肾小管、肠上皮、植物根细胞更高），水分子可以从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散，这种现象称为渗透。渗透作用是细胞膜的主要功能之一。 1. 溶血现象将红细胞放在低渗盐溶液中，水分子大量渗到细胞内使细胞涨破，血红蛋白释放到介质当中，介质由不透明的细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液（此时的细胞膜收缩，会
略有不溶性内容物），这种现象称为溶血。 红细胞在等渗盐溶液中短时间之内不会发生溶血，但是由于红细胞的细胞膜对不同物质的通透性不同，时间久了，膜两侧的渗透压平衡会被打破，也会发生溶血。 姓名班级13级生命基地班学号同组者： 科目细胞生物学实验实验题目细胞膜通透性实验 由于各种溶质透过细胞膜的速度不同，因此发生溶血的时间也不相同。发生溶血现象所需的时间，可以作为测量某种物质进入红细胞速度的指标。即溶血时间对应着穿膜速度。 2. 物质穿膜运输的类型（1）被动运输（不耗能）被动运输分为简单扩散（顺浓度梯度扩散）和协助扩散。（通道：载体蛋白、通道蛋白）（2）主动运输（耗能）需要跨膜载体蛋白的协助，这些载体蛋白起到泵的作用，有选择性地把专一溶质逆浓度梯度的穿膜运输。 3. 影响物质穿膜通透性的因素 （1）脂溶性越大的分子越容易穿膜（非极性的物质比极性的物质更容易溶于脂类物质）（2）小分子比大分子更容易穿膜（小的非极性分子，如O2 、CO2等） （3）不带电荷的分子容易穿膜（离子难溶于脂质物质，离子带水膜使体积增大） （4）亲水性分子和离子的穿膜要依赖于专一性的跨膜
细胞凝集反应实验报告
细胞生物学实验报告 一．实验名称：细胞凝集反应 二．实验原理： 细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被。目前认为：细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分支状糖分子有关。 凝集素（lectin）是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 凝集素是指一种从各种植物，无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红血球(含血型物质)，故名凝集素。常用的为植物凝集素(Phytoagglutin, PNA)，通常以其被提取的植物命名，如刀豆素 A(Conconvalina,ConA)、麦胚素(Wheat germ agglutinin, WGA)、花生凝集素 (Peanut agglutinin, PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin, SBA)等，凝集素是它们的总称。凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，它们具有的某些“亲合” 特性，能被免疫细胞化学技术方法所应用。 血型鉴别实验，也是凝集反应的一种。 三．实验用品： 土豆块茎 显微镜，粗天平，载玻片，滴管2支，离心管2支 PBS缓冲液：称取NaCl7.2g，Na2HPO41.48g,KH2PO40.43g,加蒸馏水，定容至1000ml，调pH值到7.2. 4.2%的红细胞 四．实验步骤：
1.称取土豆去皮块茎2g，加10mlPBS缓冲液，浸泡2h，浸出的粗提液中含 有可溶性土豆凝集素。 2.以无菌方法抽取兔子静脉血液（加抗凝剂），加生理盐水3ml，在 1000r/min，离心5min，重复3次离心，最后按压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞液。 3.分别用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞液各一滴，置双凹片左孔内，充 分混匀。 4.同时分别用滴管吸取PBS缓冲液和1%的红细胞悬液各一滴，置双凹片右 孔内，充分混匀，做对照实验。 5.摇晃5—10min后，观察有无发生细胞凝集并置显微镜下观察。 图左为PBS缓冲液对照图右为土豆凝集素
细胞膜的通透性实验报告
细胞膜的通透性实验报告 篇一：细胞膜通透性实验报告 姓名班级13级生命基地班学号同组者： 科目细胞生物学实验实验题目细胞膜通透性实验 【实验题目】细胞膜通透性实验【实验目的】 1、观察溶血现象并掌握其发生机制。 2、了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。【实验材料与用品】 1. 试剂：0.85% NaCl溶液、0.085% NaCl溶液、0.8mol/L 甲醇溶液、0.8mol/L丙三醇溶液、6% 葡萄糖溶液、2% TritonX-100 2. 器具：离心管、试管架、滴管、显微镜、离心机 3. 材料：鸡血红细胞【实验原理】 细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择性屏障，它是一种半透膜，可选择性控制物质进出细胞。各种物质出入细胞的方式是不同的，水是生物界最普遍的溶剂，通透性高（肾小管、肠上皮、植物根细胞更高），水分子可以从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散，这种现象称为渗透。渗透作用是细胞膜的主要功能之一。 1. 溶血现象将红细胞放在低渗盐溶液中，水分子大量渗到细胞内使细胞涨破，血红蛋白释放到介质当中，介质由不透明的细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液（此时的细胞膜收缩，会
略有不溶性内容物），这种现象称为溶血。 红细胞在等渗盐溶液中短时间之内不会发生溶血，但是由于红细胞的细胞膜对不同物质的通透性不同，时间久了，膜两侧的渗透压平衡会被打破，也会发生溶血。 姓名班级13级生命基地班学号同组者： 科目细胞生物学实验实验题目细胞膜通透性实验 由于各种溶质透过细胞膜的速度不同，因此发生溶血的时间也不相同。发生溶血现象所需的时间，可以作为测量某种物质进入红细胞速度的指标。即溶血时间对应着穿膜速度。 2. 物质穿膜运输的类型（1）被动运输（不耗能）被动运输分为简单扩散（顺浓度梯度扩散）和协助扩散。（通道：载体蛋白、通道蛋白）（2）主动运输（耗能）需要跨膜载体蛋白的协助，这些载体蛋白起到泵的作用，有选择性地把专一溶质逆浓度梯度的穿膜运输。 3. 影响物质穿膜通透性的因素 （1）脂溶性越大的分子越容易穿膜（非极性的物质比极性的物质更容易溶于脂类物质）（2）小分子比大分子更容易穿膜（小的非极性分子，如O2 、CO2等） （3）不带电荷的分子容易穿膜（离子难溶于脂质物质，离子带水膜使体积增大） （4）亲水性分子和离子的穿膜要依赖于专一性的跨膜
细胞凝集反应
科目细胞生物学实验实验题目细胞凝集反应日期2013.03.14 姓名*** 系年级2011级生物基地学号*** 实验二细胞凝集反应 一．实验目的 1.了解细胞膜的表面结构； 2.掌握凝集素促使细胞凝集的原理； 3.学习研究细胞凝集反应的方法； 4.用土豆凝集素诱导血细胞凝集，观察血细胞凝集现象； 5.学习设计实验的平行、对照原则。 二．实验原理 1.凝集素 凝集素（lectin）是一类含糖（少数例外）并能与糖专一性结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。目前已发现近千种植物中含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。常用的有植物凝集素（phytohemagglutinin, PNA），通常一起被提取的植物命名，如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等，凝集素是他们的总称。 土豆块茎凝集素（potato tuber lectin ）是一种能结合几丁质的富含羟脯氨酸的糖蛋白，单体分子量约50, 000，包含至少三个不同的结构域，其中富含胱氨酸的区域与麦胚凝集素（wheat germ agglutinin ，WGA）等几丁质结合蛋白具有同源性。土豆凝集素含有50% （质量分数）的糖组分，其中90% 是阿拉伯糖，另有少量半乳糖；最丰富的氨基酸是羟脯氨酸，其次是半胱氨酸。土豆凝集素在水溶液中主要以单体形式存在，能与细胞膜寡糖链上的N- 乙酰葡萄糖胺特异性结合，这是其具有凝集活性的主要原因。 2.细胞凝集 细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起，成为一簇不规则的细胞团。细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为，细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。 在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。凝集素引起的血细胞凝集（hemagglutination），其细胞膜结构没有发生变化，与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同；另外，凝集素能与不同的糖蛋白特异性集合，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集，但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，因此，Ponder（1983）提出应称“凝集素组织化学”而不能称“凝集素免疫组织化学”。
细胞通透性实验报告
山东大学实验报告2019年3月14日 姓名系年级17级学号同组者 科目细胞实验实验题目观察细胞的通透性仪器编号 一、实验目的 1. 了解溶血现象及细胞通透性的一般规律； 2. 观察细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度； 二、实验原理 细胞膜是一种半透膜,对物质的通透具有选择性，使细胞具有一个相对稳定的内环境。将红细胞放在低渗溶液中，水分子会大量渗到细胞内，使细胞胀破,血红蛋白释放到介质中，发生溶血。将红细胞放入含有不同溶质的溶液中，由于细胞膜对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有的则不能，渗入的溶质能提高红细胞的渗透压，所以促使水分进入细胞。由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血( hemolysis )。随着水分不断进入，红细胞最终破裂并引起溶血。因而发生溶血现象所需的时间长短可以作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。 因此，本实验选用红细胞作为细胞膜透性的实验材料，将其放人不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。 三、实验用品 1.实验材料 鸡血（事先取好，加入Alsever液，混匀后制悬液，4℃保存）； 2.实验试剂 0.85%的氯化钠溶液（等渗溶液）； 0.0085%的氯化钠溶液（低渗溶液） 0.8mol/L的甲醇、0.8mol/L的丙三醇、6%的葡萄糖溶液、2%的Triton X-100 溶液（高渗溶液）； 3.实验器材 试管（此处用的是刻度离心管）六支、离心机、滴管、载玻片、盖玻片、 显微镜等 四、实验步骤 1.取血 吸取预先处理好的鸡血溶液6mL，加入4mL的等渗0.85%的氯化钠溶液， 混匀后放入离心机，1200rpm离心5min；
细胞凝集反应实验
细胞凝集反应 陈素君200900140007 生命科学学院生物科学专业生科四班 联系方式：62510 实验目的： 了解血细胞凝集原理 实验原理： 细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起，成为一簇不规则的细胞团。细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为，细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。 凝集素是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，如植物血球凝集素，伴刀豆凝集素和土豆凝集素等，它具有凝集细胞核刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 实验用品： PBS缓冲液显微镜双凹载玻片滴管 土豆凝集素 土豆凝集素的提取：去皮土豆块茎2g，加10mLPBS缓冲液浸泡24h，所得粗提液中既含有可溶性土豆凝集素. 1%兔血红细胞 2.1%兔血红细胞制备：抽取兔静脉血1mL加抗凝剂，加入3mL生理盐水，1000r/min离心5min，重复洗涤三次。按红细胞压积配成1%红细胞悬浊液。 实验步骤： 1．分别用滴管吸取土豆凝集素和1%兔血红细胞各一滴，置于双凹片左孔混匀。 2．吸取PBS缓冲液各一滴置于双凹片右孔混匀。 3．摇晃5-10min观察，并以低倍镜镜检。 实验结果： 图1a 反应前图1b 反应后 图1 细胞凝集反应的观察（左为混合了PBS的兔血红细胞，右为混合了土豆凝集素的兔血红
细胞） 图2a 发生凝集的细胞图2b未发生凝集的细胞 图2 低倍镜（*10）下混合了了土豆凝集素（左）和PBS缓冲溶液（右）的兔血红细胞观察 混合土豆凝集素9分钟时细胞开始发生凝集，可以观察到细小沙粒状的细胞团，随时间流逝小细胞团变大。 如图1可看到，混合了土豆凝集素的兔血红细胞（右侧）聚集成块，周围液体较澄清；而混合了PBS缓冲溶液的兔血红细胞（左侧）未发生凝集，液体浑浊。 低倍镜下镜检（图2）可看到，凝集了的细胞聚成一簇不规则的团，而未发生凝集的红细胞很均匀。 分析与总结： 1．浸出土豆凝集素时选发芽的或发青色的土豆。由此可知发芽土豆不宜食用，因其所含土豆凝集素可让血细胞发生凝集。 2．滴加血红细胞悬浊液时要控制量，半滴即可，过多凝集效果不明显。 3．区分血清与血浆，血清指血液自然沉降后所得上清液，而血浆是血液加抗凝剂后离心所得上清液。 4．凝血是指多个细胞聚集成不规则细胞簇，溶血是红细胞在低渗溶液作用下，肿胀破裂放出血红蛋白的过程。
实验五 凝集反应—医学免疫学实验指导
医学免疫学实验指导 实验五凝集反应 由长沙达尔锋生物科技有限公司整理
【文章介绍】 实验是映证理论，对学生进行基本技能训练和培养科学研究能力的手段。BioRike博瑞克根据《医学免疫学实验指导》一书系统整理了14个实验项目，每个实验说明实验目的，实验原理，实验内容方法，实验要求及注意事项，希望广大师生能够从中有所收获。 BioRike简介：BioRike（中文简称“博瑞克”）是长沙达尔锋生物科技有限公司旗下的产品品牌,由旗下专业的生命科学实验室BioRike博瑞克研发和生产。BioRike是一家致力于生命科学和生物技术领域的高科技实验室，专门从事以Elisa试剂盒、抗体、细胞因子、免疫检测试剂盒、血清等免疫学产品为主的生物试剂的研发与销售。 【实验目的】 1.了解凝集反应的原理、基本类型及其用途。 2.熟悉玻片凝集试验、试管凝集试验、间接凝集试验的实验方法和结果分析。 【实验用品】 1. 材料试剂：伤寒杆菌、大肠杆菌18～24小时琼脂斜面培养物、伤寒杆菌H血清、伤寒杆菌H菌液、待测孕妇尿液、HCG阳性孕妇尿液、1:10稀释伤寒杆菌诊断血清、ABO血型标准血清、类风湿免疫诊断试验（用变性IgG致敏的乳胶颗粒）、HCG致敏乳胶试剂、兔抗HCG诊断血清、待测血清、生理盐水。 2.器材：洁净载玻片、巴氏吸管、乳胶皮头、接种环、酒精灯、特种铅笔（或记号笔）、小试管、牙签、采血针、75%酒精棉球、无菌干棉球、试管架；1ml、5ml刻度吸管、37℃恒温箱（或37℃/56℃水浴箱）、显微镜。 【内容和方法】 一、玻片凝集试验(slide agglutination) 1.原理 玻片凝集试验(slide agglutination)是将已知的抗体直接与未知的颗粒性抗原物质(如细菌、立克次体、钩端螺旋体等)混合，在有适当电解质存在的条件下，如两者对应便发生特异性结合而形成肉眼可见的凝集物，即为阳性；如两者不对应便无凝集物出现，即为阴性。此法属定性试验，主要用于检测抗原，如ABO血型鉴定、细菌鉴定和分型等。 2.方法 （1）取载玻片一张（平置实验台上），用特种铅笔或记号笔划分为3格，并标明1、2、3。 （2）取巴氏吸管一支，套上乳胶皮头后，吸取1:10 稀释的伤寒杆菌诊断血清1～2 滴于第1、2 格内，另取巴氏吸管一支，吸取生理盐水1～2 滴于第3格内。 （3）将接种环在酒精灯火焰上烧灼灭菌，冷却后取少许伤寒杆菌菌培养物与第1、3格内的诊断血清、生理盐水混合并涂抹成均匀悬液。然后用同样方法取少许大肠杆菌培养物与第2格内的的诊断血清混合并涂抹成均匀悬液。静置数分钟后观察结果。 3.结果观察与判定
细胞膜通透性实验报告
【实验题目】 细胞膜通透性实验 【实验目得】 1、观察溶血现象并掌握其发生机制。 2、了解细胞膜得渗透性及各类物质进入细胞得速度. 【实验材料与用品】 １、试剂：0、85％ NａＣl溶液、0、0８5% NaCl溶液、0、８moｌ/L甲醇溶液、0、8mol ／L丙三醇溶 液、６％葡萄糖溶液、2% ＴrｉｔｏnX—１0０ 2、器具：离心管、试管架、滴管、显微镜、离心机 3、材料：鸡血红细胞 【实验原理】 细胞膜就是细胞与环境进行物质交换得选择性屏障，它就是一种半透膜，可选择性控制物质进出细胞．各种物质出入细胞得方式就是不同得，水就是生物界最普遍得溶剂，通透性高（肾小管、肠上皮、植物根细胞更高),水分子可以从渗透压低得一侧通过细胞膜向渗透压高得一侧扩散，这种现象称为渗透.渗透作用就是细胞膜得主要功能之一。 1.溶血现象 将红细胞放在低渗盐溶液中，水分子大量渗到细胞内使细胞涨破,血红蛋白释放到介质当中,介质由不透明得细胞悬液变为红色透明得血红蛋白溶液(此时得细胞膜收缩,会略有不溶性内容物),这种现象称为溶血． 红细胞在等渗盐溶液中短时间之内不会发生溶血,但就是由于红细胞得细胞膜对不同物质得通透性不同，时间久了,膜两侧得渗透压平衡会被打破,也会发生溶血. 由于各种溶质透过细胞膜得速度不同,因此发生溶血得时间也不相同.发生溶血现象所需得时间，可以作为测量某种物质进入红细胞速度得指标。即溶血时间对应着穿膜速度．2.物质穿膜运输得类型 (１）被动运输（不耗能） 被动运输分为简单扩散(顺浓度梯度扩散）与协助扩散。（通道：载体蛋白、通道蛋白）（2）主动运输(耗能)
需要跨膜载体蛋白得协助,这些载体蛋白起到泵得作用,有选择性地把专一溶质逆浓度梯度得穿膜运输。 3. 影响物质穿膜通透性得因素 （1）脂溶性越大得分子越容易穿膜（非极性得物质比极性得物质更容易溶于脂类物质） （2）小分子比大分子更容易穿膜（小得非极性分子,如Ｏ2 、ＣO 2等) （3）不带电荷得分子容易穿膜（离子难溶于脂质物质,离子带水膜使体积增大) （4）亲水性分子与离子得穿膜要依赖于专一性得跨膜蛋白 【实验步骤】 一、大体流程 二、具体操作 1. 取鸡血6ml,加0、８5%N ａＣl 溶液4ml,在1000r ／min 条件下离心5分钟;(RBC 压积量不 少于 0、6ｍol ） 2. 将上述离心后得红细胞按沉淀量配成5０%浓度;（总体积应不少于1、2ｍl) 3. 每组取6支试管，分别加入如下溶液各3ml: （1)０、85％ＮａＣl 溶液 (2）0、085％ＮａＣl 溶液 (3)0、８ｍo ｌ／L(0、3m ｏl/L 等渗)甲醇溶液 (4)0、8mol ／L(0、3ｍol/L 等渗)丙三醇溶液 (5)6%(5%等渗)葡萄糖溶液 （6)2%(1、５%等渗）T ｒi ｔon Ｘ—100 ４、 向上述6支试管中分别加入５0%红细胞悬液1滴，轻摇混匀,观察试管中就是否有溶血现象发生 (观察时间１小时),记录溶血时间,并于显微镜下观察各溶液得细胞． 【实验结果与分析】 I 、实验结果 取6只试管分别加入等量得不同溶质 6只试管分别滴加50%红细胞悬液1滴 混匀后,观察并记录溶血时间 在显微镜下观 察细胞形态 配置50%得鸡血红细胞悬液
细胞凝集试验报告
细胞凝集反应实验报告 【摘要】细胞凝集素可以将不同的细胞粘连在一起，在显微镜下可以观察到最终形成大的细胞团块，可以观察到细胞的凝集现象。通过不同的变量，控制细胞凝集反应因素，观察细胞凝集程度。 【关键字】血细胞凝集素凝集反应 【背景介绍】 细胞凝集指细胞与细胞之间通过某种凝集素的作用而相互粘连在一起的现象，最终形成大的细胞团块，在不用显微镜时即可用肉眼看到的明显的现象。早在1896年，Widal就利用伤寒患者的血清与伤寒杆菌发生特异性凝集的现象，有效地诊断伤寒病。至1900年，Landsteriner在特异性血凝现象的基础上发现了人类血型，并于1930年获得了诺贝尔奖。凝集实验灵敏度高，方法简便，迄今已成为通用的免疫学实验技术，广泛应用于临床检验。 凝集素是一种能够与糖类物质特异性结合的糖蛋白，具有一个以上同糖结合的位点，因此能够参与细胞识别和粘连，从而将不同的细胞联系起来。常见的凝集素有刀豆素A、麦胚素、花生凝集素、大豆凝集素等。凝集素主要的作用就是凝集细胞和刺激细胞分裂，在细胞间形成“桥”的作用，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 细胞的凝集与细胞的细胞膜有关，细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被，目前普遍认为，细胞间的联系，以及细胞的生长分化，免疫反应等都与细胞表面的糖蛋白有关。 细胞凝集的作用很多，机体免疫中反应中，细菌等颗粒性病原体
会与凝集素结合而产生凝集反应，从而被更好的清除。 细胞凝集在实际中应用广泛，在临床上血细胞的凝集作用可用于血型鉴定，同时凝集素可以作为饲料添加剂，帮助抵御感染。 【实验材料】 1、试剂：土豆凝集素（已制备好）、2%兔血红细胞悬液、PBS缓 冲液、生理盐水。 2、仪器：移液管、离心管、离心机、有凹坑的载玻片、带刻度的 试管若干、显微镜。 【实验方法】 1、检查实验所用的仪器是否完备，完好，准备实验； 2、土豆切片，取2g放入10ml的PBS缓冲液中浸泡2h，获取土豆凝集素（此步骤已有老师准备好）； 3、梯度稀释制备不同浓度的土豆悬浮液：取1ml的土豆凝集素悬浮液原液于其中一只试管中，并编号1×；另取0.5ml的土豆悬浮液原液于另一只试管中，加入0.5ml的PBS缓冲液，并编号0.5×；再去一只试管，加入1ml的PBS缓冲液，并编号0×； 4、取1ml已制备好的2%的兔血细胞悬液，通过系列稀释将血细胞悬液制备成不同浓度：在1ml的试管上编号为2%；在标号2%的试管中取0.5ml于另一只试管中，在试管中加入0.5ml生理盐水，混合均匀并编号1%；在1%的试管中取0.5ml的细胞悬液于另一只试管中，并加入0.5ml的生理盐水，混合均匀编号0.5%；（在实验时由于各方面原因，误将已制备好的2%兔细胞悬液当做兔的静脉血，而加入3ml 的生理盐水，进行离心分离，从而重复实验不必要的步骤，需要在以
实验一 细胞凝集反应
实验一细胞凝集反应 1.实验目的 1.1了解细胞膜的表面结构。 1.2掌握凝集素促使细胞凝集的原理。 1.3学习研究细胞凝集反应的方法。 1.4掌握耳缘静脉兔子取血的方法。 2．实验原理 凝集素是一类含糖（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。目前已发现近千种植物中含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，特能提的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。常用的为植物凝集素，通常以其被提取的植物命名，如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等，凝集素是他们的总称。 在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞膜结构间形成“桥”，从而引起细胞凝集。凝集素引起的血细胞凝集，其细胞膜结构没有发生变化，与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同；另外，凝集素能与不同的糖蛋白特异性结合，加入域凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集，但是凝集素能与不同的糖蛋白特异性结合，加入与凝集素互补的的糖可以抑制细胞的凝集，但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，因此，Ponder(1983)提出应称“凝集素组织化学”而不能称为“凝集素免疫组织化学”。 凝集素使细胞凝集与血小板凝血的原理不同。当人体受伤流血时，血小板就迅速向血管破裂处大量聚集。它们首先释放肾上腺素、5－羟色胺等具有收缩血管作用的物质，使受损血管不同程度地紧闭，减少血流量。然后血小板一旦与非血管内膜表面接触，便会迅速扩展，颗粒向中央集中，并伸出多个伪足，转变成树突型血小板，大部分颗粒随即释放，血小板之间融合，成为粘性变形血小板。粘性变形血小板在伤口大量堆积粘附形成血栓，堵住伤口，制止流血。如果伤口很大那还要与纤维蛋白一起封堵。血小板凝血是一个生理反应，要注意与凝集素使细胞凝集相区分。 3.实验用品 3.1材料家兔 3.2试剂 PBS缓冲液土豆凝集素
红细胞膜通透性的实验及分析
细胞学实验论文
红细胞膜通透性的实验及分析 路路*，李秋菊，罗敏惠，母振炜，孟凡琳， 姜雅莉，平措宗吉，王大鹏，吴玲 【摘要】细胞膜是细胞与外界环境进行物质交换的结构，可以选择性地让某些物质进出细胞，但是各种物质进出细胞的方式是不同的。由于细胞膜对于不同物质的通透性不同，使得不同溶质渗入细胞的速度相差很大，甚至有些不能渗入细胞中。本次实验的目的在于了解分子量、脂溶性大小、电解质和非电解质溶液对细胞膜通透性的影响；观察红细胞的溶血现象；建立等渗概念并理解溶血原理。实验以人和鸡的红细胞为材料，用自然渗透的方法进行实验，通过测量红细胞的溶血时间来估计细胞膜对各种物质通透性的大小，得出了各物质通过细胞膜的一般性规律。 【关键词】红细胞；细胞膜；等渗；渗透性；结果分析 新近国内外有关红细胞膜的表面超精细结构的研究包括了红细胞膜流动性、膜载体与膜离子信道等各方面，涉及到信息和分子识别传导的有关问题。可见对于细胞膜结构和功能的研究具有十分重要的意义和应用价值，是一个重要的研究内容。细胞膜渗透性试验是细胞生物学实验的一个组成部分，有助于我们本科生对有关于细胞膜功能的理解，在对于各物质进出细胞的一般规律进行分析的过程中进一步加深对细胞膜本质的认识，同时在其中提高我们分析问题的能力。 在等渗溶液中，红细胞保持正常大小和双凹圆碟形；在渗透压递减的一系列溶液中，由于水分子的摄入超过水分子的流出，导致红细
胞逐渐胀大，当体积增加30%时成为球形；体积增加到45%--60%则细胞膜损伤而发生溶血，此时血红蛋白逸出细胞外。一个非常明显的现象就是在试管中细胞形态的絮状物消失，溶液由细胞存在的悬浊液变为非细胞结构的澄清液。这一现象是判别细胞是否溶血的一个现象证据。将红细胞放入各种等渗溶液中，由于红细胞对于各种溶质的通透性不同，有的溶质可以渗入，有的不可以渗入，渗入的溶质能提高红细胞的渗透压后促使水分进入细胞，从而引起溶血；由于溶质进入速度互不相同，因此溶血时间也不相同。根据溶血现象是否发生以及溶血时间的快慢，来判断细胞膜对各类溶质渗透性的大小和强弱。 基于上述的研究状况所得的理论知识和本次实验，本文重在阐述细胞膜对于不同物质通透性的一般规律。 1.材料和方法 1.1实验材料 1.1.1生物材料本实验用的血细胞取材方便，新鲜的动物的红细胞都可以。我们采用了鸡的血细胞和人的红细胞作为实验材料，即抗凝人血和鸡血的稀释液（一份血液加入九份生理盐水进行稀释），观察到的结果和现象十分明显。 1.1.2化学试剂 0.17mol/L氯化钠溶液、0.17mol/L氯化铵、0.17mol/L醋酸铵、0.17mol/L硝酸钠、0.12mol/L草酸铵、0.12mol/L 硫酸钠、0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L甘油、0.32mol/L乙醇、 0.32mol/L丙酮、0.32mol/L乙二醇。 1.2实验方法
血型测定实验报
血型测定实验报告 一、实验目的： 学习ABO型血的鉴定原理和方法。观察红细胞凝集现象，了解抗原抗体反应。 二、实验原理： 血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B 抗体，则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B 抗原而分为A、B、AB、O四型。（见表4-3-1-1） 三 消毒采血针；载玻片；消毒棉签；抗A、抗B血型定型试剂；75%乙醇；受检者血液四、实验步骤 （1）取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用腊笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。 （2）细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml生理盐水的小试管内，混匀，即得约5％红细胞悬液。采血时应注意先用75％酒精消毒指尖或耳垂。 （3）用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。 （4）竹签两头分别混合，搅匀。 （5）10～30min后观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。 （6）判断血型根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断其血型。 五、实验结果： 我们组本次实验中，载玻片1左边为抗B型定型试剂，呈淡红色，未发生凝聚；右边为抗A 型定型试剂，血液在试剂中凝结，试剂较清亮。该受试者1血型为A。 载玻片2左右边的试剂内的血液皆不出现凝结现象，受试者2为O型血。 六、实验讨论： 1.实验中要分清牙签，不要用一牙签一端同时在抗A血清和抗B血清中搅拌，以免造成抗体试剂不纯。 2.实验中我们组发现15分钟后没有出现血凝现象，可用牙签轻轻搅拌一会儿，有些载玻片上就不现了血块，但有些经搅拌后仍不出现血凝现象，表示确实不含相应的抗原。 精品文档
细胞凝集反应
细胞凝集反应 一、实验目的 1.了解细胞膜的表面结构 2.掌握凝集素促进细胞凝集的方法 3.学习研究细胞凝集反应的方法 二、实验原理 凝集素是一类可逆结合特异糖基的蛋白质，能与细胞外被的寡糖链相连接，使细胞发生凝集：①细胞质膜外表面的一层黏性多糖物质构成的，细胞被在细胞间的联系和识别、细胞的生长分化、免疫反应及肿瘤发生等过程中发挥着重要作用；②动物细胞表面的糖蛋白、糖脂中的糖链伸向膜表面，它们是细胞识别、细胞免疫及细胞接触抑制现象的必要组分；③凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一性结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果。④凝集素与糖分子结合有一定的专一性和结合价，并与细胞膜上受体的分布有关。 三、实验用品 1 ．器材: 显微镜、天平、载玻片、滴管、离心管、烧杯、10ml移液管、试管、试管架 2 ．材料: 土豆块茎 3 ．试剂: 兔子血、抗凝血剂、PBS、土豆块茎、生理盐水和其他等渗液。 四、实验步骤 1.去皮土豆块茎2g，加10mLPBS缓冲液浸泡24h，所得粗提液中既含有可溶性土豆凝集素. 2.抽取兔静脉血1mL加抗凝剂，加入3mL生理盐水，1000r/min离心5min，重复洗涤三次。按红细胞压积配成1%红细胞悬浊液。 3.分别用滴管吸取土豆凝集素和1%兔血红细胞各一滴，置于双凹片左孔混匀；吸取PBS缓冲液各一滴置于双凹片右孔混匀。 4.摇晃5-10min观察，并以低倍镜镜检。 五、实验结果 如图1可看到，混合了土豆凝集素的兔血红细胞（右侧）聚集成块，周围液体较澄清；而混合了PBS缓冲溶液的兔血红细胞（左侧）未发生凝集，液体浑浊。 低倍镜下镜检（图2）可看到，凝集了的细胞聚成一簇不规则的团，而未发生凝集的红细胞很均匀。