最新肿瘤药理学实验方法

(整理)《药理学》实验讲义.

《药理学》实验讲义

实验一药理学实验的基本知识和基本技术 一、目的 1. 掌握基本操作，锻炼动手、动脑能力； 2. 更好地掌握药理学基本理论知识； 3. 培养科学思维 二、基本要求 1. 实验前：预习实验内容并复习相关理论知识； 2. 实验时 ⑴实验器材要妥善保管； ⑵实验操作按步骤进行，仔细观察实验中出现的现象，实事求是地做好记录； ⑶注意节约实验药品； ⑷维持良好的课堂纪律。 3. 实验后 ⑴各组同学将实验动物处死，实验台擦干净，将实验方盘送回准备室； ⑵值日生搞好实验室卫生，将死亡动物送至指定场所； ⑶书写实验报告。 三、实验报告的书写 1. 题目 2. 目的 3. 原理 4. 材料：实验动物，器材，药品 5. 方法：用自己的语言简单扼要描述出来； 6. 结果：要求真实、清楚； 7. 讨论：将实验结果进行比较、分析；实验中有哪些不足之处；结果异常或失败的原因； 8. 结论：将实验结果进行归纳总结，应带有提示性质。 四、药理学实验实验设计原则 1.随机原则 按照机遇均等的原则进行分组。其目的是使一切干扰因素造成的实验误差减少，而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。 2.对照原则 空白对照（指在不加任何处理的条件下进行观察对照）；阴性对照也称假处理对照（给予生理盐水或不含药物的溶媒）；阳性对照也称标准对照（指以已知经典药物在标准条件下与实验药进行对照）。 3.重复原则 能在类似的条件下，把实验结果重复出来，才能算是可靠的实验，重复实验除增加可靠性外，也可以了解实验变异情况。 五、实验动物

1. 动物的选择 （1）小白鼠：适用于需大量动物的实验，如某些药物的筛选，半数致死量的测定。也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。 （2）大白鼠：比较适用于抗炎药物实验，血压测定、利胆、利尿药实验，也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。 （3）豚鼠：因其对组胺敏感，并易于致敏，故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。也常用于离体心脏、心房、肠管实验。又因它对结核敏感，常用于抗结核病药的实验。 （4）家兔：常用于观察研究脑电生理作用，药物对小肠的作用。由于家兔体温变化敏感，也常用于体温实验，用于热原检查。 （5）狗：狗是记录血压，呼吸最常用的大动物。还可利用狗做成胃瘘、肠瘘，以观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。在进行慢性毒性实验时，也常采用狗。2. 实验动物的编号 狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌固定在颈部或耳上。大鼠、小鼠如为白色可用黄色苦味酸在不同的体表标志上标记。 3. 动物固定及给药 （1）小鼠捉拿 小鼠性情较温顺，一般不会咬人，比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中，如进行尾静脉注射时，可使用特殊的固定装置进行固定，如尾静脉注射架或专用小鼠固定筒。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作，如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。 （2）小鼠灌胃 用左手固定鼠，右手持灌胃器，将灌胃针从鼠的口腔插入，压迫鼠的头部，使口腔与食道成一直线,将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食道，可感到轻微的阻力,此时可略改变一下灌胃针方向，以刺激引起吞咽动作，顺势将药液注入。一般灌胃针插入小鼠深度为3～4cm，大鼠或豚鼠为4～6cm。常用灌胃量小鼠为0.2～1ml,大鼠1～4ml,豚鼠1～5ml。 （3）小鼠腹腔注射 先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒，然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下，沿皮下向前推进约0.5 厘米，再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔，此时有落空感，回抽无肠液、尿液后，缓缓推入药液。此法大小鼠用的较多。 （4）皮下注射 注射时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤，右手持注射器将针头刺入,固定后

药理学实验方案

药理学实验方案

元胡止痛片对小鼠镇痛抗炎镇痛活性研究 ——药理实验设计 设计人：级药学一班 张礼杰 515010 信盼 515024 陈茂琴 515026 何朵朵 515028 药学四班 杨森 515101 冯禹 515110 王同月 515102

元胡止痛片中抗炎和镇痛作用研究 1.实验目的：探讨元胡止痛片的镇痛和抗炎作用 2.实验原理：（1）元胡止痛片收载于《元胡止痛片收载于《中国药典》是由元胡、白芷两味药组成的中药复方制剂为行气活血止痛剂临床用于治疗气滞血瘀胃痛、胁痛、头痛及月经痛等症疗效确切。本实验是为验证元胡止痛片的镇痛和抗炎作用进行验证。实验对四川禾邦阳光制药厂家生产元胡止痛片不同剂量进行了药效学研究采用小鼠醋酸扭体法、小鼠热板法和耳肿胀法实验分别测定小鼠扭体反应抑制率、小鼠痛阂值提高率和肿胀率从而确定不同剂量的镇痛和抗炎作用效果。 在基础医学研究中筛选镇痛药的常见致痛方法概括有物理法（热、电、机械）和化学法。动物的疼痛反应常表现出嘶叫、舔足、翘尾、蹦跳及皮肤、肌肉抽搐。化学法，即将某些化学物质，如强酸、强碱、钾离子、缓激肽等，涂布于动物的的某些敏感部位或腹腔注射。腹腔注射损伤物质引起受试动物腹痛，动物表现出“扭体反应”（即腹部内凹、躯干与后肢伸张、臀部高起）。 3.实验方法 :使用小鼠热板法、醋酸扭体法、耳肿胀法 ,并分别建立小鼠疼痛和炎症模型 ,灌胃给予不同剂量元胡止痛片配成的溶液，观察对动物的镇痛和抗炎作用。 4.实验过程： 1.内容

4.1 药品与试剂 元胡止痛片：四川禾邦阳光制药股份有限公司，国药准字z51021658，规格：片芯重0.25g,12片 阿司匹林: 浙江金华市第三制药厂, 国药准字: H13023716, 临用前用蒸馏水配制为适当浓度的混悬液。 4.2动物：健康昆明种小白鼠，雌性，32只 4.3 器材：数控超级恒温槽，烧杯、1ml 注射器、电子秤 4.4分组： 空白对照组 (灌胃0.9%生理盐水 10 mL/kg) 元胡止痛片高、低剂量组 (0.2，0.4mg ／10g) 阳性药阿司匹林对照组 (灌胃阿司匹林 0. 4 g/kg) 4.5人和动物剂量换算公式 小白鼠=20 0026 .0?人/g 2 方法 （1）热板法 1.动物筛选：致痛潜伏期 (痛阈值)为 5~30s 之间的合格雌性小鼠。32只，热板法镇痛试验筛选痛阈值合格的小鼠，取♀小鼠于给药前先用热板仪于55 ± 0． 5 ℃分别测定每只小鼠的正常痛阈值［将小鼠放于智能热板仪上至出现舔后足的所需时间作为痛阈值( s) ，连续 2 次，间隔30 s ，测定平均值即为正常痛阈值］。将舔后足时间＜ 5 s 或＞30 s ，或跳跃者不用于此实验

抗肿瘤药效学指导原则

抗肿瘤药物药效学指导原则 (讨论稿) 1 基本原则 抗肿瘤药物可分为：(1)细胞毒类药物(cytotoxic agent)：包括干扰核酸和蛋白质合成、抑制拓扑异构酶及作用于微管系统的药物等；(2)生物反应调节剂(biological response modifier)；(3)肿瘤耐药逆转剂(resistance reversal agent)；(4)肿瘤治疗增敏剂(oncotherapy sensitizer)；(5)肿瘤血管生成抑制剂(tumor angiogenesis inhibitor)；(6)分化诱导剂(differentiation inducing agent)；(7)生长因子抑制剂(growth factor inhibitor)；(8)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide)等。抗肿瘤药物的药效学包括体内外抗肿瘤试验，评价药物的抗癌活性时，以体内试验结果为主，同时参考体外试验结果以做出正确的结论。I类抗肿瘤新药应进行药物作用机制的初步研究。 2 体外抗肿瘤活性试验 2.1 试验目的(1)对候选化合物进行初步筛选；(2)了解候选化合物的抗瘤谱； (3)为随后进行的体内抗肿瘤试验提供参考，如剂量范围、肿瘤类别等。 2.2 试验方法选用10-15株人癌细胞株，根据试验目的和所选用的方法选择相应的细胞系及适量的细胞接种浓度，按常规细胞培养法进行培养；推荐使用四氮唑盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide, MTT]还原法、XTT{2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulphonyl)-5-[carboxanilide]-2H-tetrazolium hydroxide}还原法、磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)染色法、或51Cr释放试验、集落形成法等测定药物的抗癌作用。药物与细胞共培养的时间一般为48-72 小时，贴壁细胞需先贴壁24 小时后再给药。试验应设阳性及阴性对照组，阳性对照用一定浓度的标准抗肿瘤药，阴性对照为溶媒对照。 2.3 评价标准以同一样品的不同浓度对肿瘤细胞抑制率作图可得到剂量效应曲线，然后采用Logit法计算半数有效浓度(IC50值或EC50值)。体外试验至少重复一次。 3 体内抗肿瘤试验 体内抗肿瘤试验结果是评价候选抗肿瘤化合物有效性的最重要指标。体内抗肿瘤试验必须选用三种以上肿瘤模型，其中至少一种为人癌裸小鼠移植瘤模型或其它人癌小鼠模型。试验结果三种模型均为有效，再重复一次也为有效，评定该化合物对这些实验性肿瘤具有治疗作用。鼓励使用人癌裸小鼠移植瘤模型和多种类的移植瘤模型，以较正确和全面地评价候选化合物的抗瘤活性和抗瘤谱。鼓

药理实验方法学

第一章现代药理学实验方法与技术简介 第一节分子生物学试验方法与技术分子生物技术在药理学实验中应用较为广泛，包括核酸分子探针的标记、核酸分子杂交、多聚酶链反应、蛋白印迹杂交技术、cDNA文库、随机分子库技术、外核基因在真核细胞中的表达、转基因动物、人类基因治疗等。现将更为常用的技术介绍如下： 一、核酸分子探针的标记标记核酸分子探针（nucleic acid probe）是进行核杂交的基础，根据核酸分子探针的来源及性质进行选择，选择的基本原则是具有高度的特异性，探针选择直接影响杂交结果的分析。根据检测对象和目的不同，，可选择不同的探针种类及标记方法。 ㈠探针种类 1．基因组DNA探针是克隆化的各种基因片断，也是最常用的核酸探针，探针应尽可能选用基因编码（外显子），避免使用内含子及其它非编码序列。 2．cDNA探针与mRNA互补的DNA链称cDNA，是一种较为理想的核酸探针，特异性较高。 3．RNA探针RNA与RNA或DNA杂交体的探针稳定性，特异性高。 4．寡核苷酸探针人工合成寡核苷酸片段做探针，可根据需要合成相应序列。 ㈡标记物 常用的探针标记物有两类：放射性同位素和非放射性同位素。标记物的检测具有高度灵敏性和特异性。标记和探针结合不影响杂交的特异性和稳定性。其中放射性同位素是应用最多的探针标记物，但易造成放射性污染，多数同位素的半衰期短，不能长期存放。常用的放射性同位素有32P?3P?35S，有时也用14C,125I或131I。 二、核酸分子杂交（nucleic acid hybridiazation ）是指具有一定同源序列的两条核酸单链在一定的条件下，按碱基互补配对原则形成异质双链的过程。核酸分子杂交是分子生物学领域应用最广泛的技术，灵敏度高、特异性强，主要用于特异DNA或RNA的定性定量检测。 三、聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）是一种体外酶促扩增特异DNA片段的方法。传统的DNA扩增法是分子克隆法，需经过DNA 酶切、链接、转化等步骤构建含有目的基因的载体。然后导入细胞中进行扩增，再用同位素标记的探针进行筛选，操作复杂，耗时。PCR技术灵敏度

药理学设计性实验

药理学设计性实验 实验一、石菖蒲的镇静作用 【目的】 1应用小动物自主活动学习镇静药物的实验方法。 2、应用小动物自主活动仪，研究地西泮、石菖蒲对小鼠自发活动的影响。 【原理】小动物自主活动仪的原理：在活动箱内，将一束或几束光线照射到对侧光电感应器上，动物在箱内每活动一次，感应电流发生改变，经过放大装置，使电脉冲驱使继电器启动, 通过记录器记录动物活动次数。 地西泮是镇静催眠的代表药。石菖蒲具有宁心安神作用，其挥发油对中枢有广泛的抑制作用。本实验以小鼠自发活动次数为指标，观察药物的镇静作用。 【动物】小鼠6只，实验前禁食12h o 【药品】0.05%地西泮溶液，石菖蒲水煎液，生理盐水 【主要器材】动物自主活动仪1台，电子称1台，1ml注射器2支，烧杯2杯。 【方法】将6只动物随机分为甲乙丙组，甲组灌胃生理盐水，乙组灌胃石菖蒲水煎液(连续 两天)，丙组灌胃地西泮1次，0.2ml/10。给药后1小时各组动物放入小动物自主仪，先适应2分钟，再记录5分钟内小鼠自主活动次数。 【结果】地西泮、石菖蒲对小鼠自主活动的影响。(结果见表1) 表1地西泮、石菖蒲对小鼠自主活动的影响 参考文献： [1] 胡锦官，顾健，王志旺?石菖蒲及其有效成分对神经系统作用的药理研究[J].中药药药理 与临床.1999.15 (30: 19 [2] 刘新民.石菖蒲的研究现状J].中医药研究.1992. (4): 57 [3] 吴启端，吴清和，石菖蒲的药理学研究进展[J].2006,17 (6) :477-480 实验二、石菖蒲对记忆障碍小鼠模型的改善作用 【目的】 1、学习小鼠跳台原理和操作，正确运用跳台实验仪器对小鼠进行学习记忆能力行为学测试。 2、观察石菖蒲对小鼠记忆获得障碍的疗效作用。 【原理】鼠跳台实验装置由DT-200小鼠跳台测试箱和DT-200小鼠跳台测试仪组成。测试箱由6个小房间构成，一次可同时试验6只动物，每个小房间有一橡皮台，箱底是可通电的 铜栅，在训练期通电小鼠跳下平台在箱底不断被电击，这个过程中小鼠获得记忆，24 h后测 试时观察小鼠第一次跳下平台的时间和 5 min内跳下平台的次数，比较各组老鼠记忆保持的 能力。 戊巴比妥钠能造成小鼠学习记忆障碍。石菖蒲具有开窍醒神，宁心安神的作用，能够促进学习记忆。本实验以小鼠跳下潜伏期及5min内错误次数作为指标，观察药物对小鼠学习

上海药明康德新药开发有限公司肿瘤免疫部岗位内推

上海药明康德新药开发有限公司肿瘤免疫部岗位内推 药明康德新药开发有限公司肿瘤免疫部隶属于药明康德集团，专门提供肿瘤及免疫疾病药物研发服务和解决方案，覆盖从药物发现到临床生物标志物检测的一站化服务。药明康德号称工业界的黄埔军校，在这些您会遇到很多从欧美实验室出来的副教授及优秀博士后，您也会遇到拥有丰富欧美国家生物制药公司工作经验的科学家和外籍科学家们。他们的悉心指导会让您快速成为生物制药行业更优秀的人才。药明康德肿瘤免疫部拥有与国际接轨的领先平台，包括符合GCP规范并通过CAP国际认证的临床生物标志物检测平台和通过AAALAC国际认证的实验动物中心。药明康德肿瘤免疫部拥有阵容强大的研发团队，在上海、苏州和启东均设有研发实验室。具有硕士和博士学历的科学家占百分之七十左右。研发方向囊括当前生物制药企业研究最热门的药物靶点和新技术。药明康德肿瘤免疫部与全球500多家生物制药有合作项目，从2017年FDA审批通过的12个抗肿瘤新药有11个来自我们合作的客户。 近年来肿瘤及自身免疫性疾病生物治疗是行业发展的大方向，公司大力扩展肿瘤免疫部的队伍，现向社会诚聘生物制药领域的英才，让我们相遇在科研气氛浓郁、充满青春气息的药明康德肿瘤免疫部，共同学习，共同成长。 入选去江苏启东工作的科学家，入职后启东政府会对博士学位的员工提供40万元安家费（分5年发放），每个月4000元补

贴，硕士学位的员工提供每个月2500元补贴，重点本科毕业的员工提供每个月1500元补贴，本科毕业的员工提供每个月800元补贴。所有沪籍的员工，政府每年会有2.5万的交通补贴。同时，会提供企业内部经济特价房一套，工作3年内有房车不是梦想，近在眼前。 现精选出以下20多个极具挑战性的职位，可供大家挑选。有意者欢迎投简历到rqyan@https://www.360docs.net/doc/a99216339.html,，yan_ruiqing@https://www.360docs.net/doc/a99216339.html,，帮着内摧。热忱欢迎有工作经验和应届博士生投简历过来，可以将简历直接转发给相应岗位的主管。 职位1：显微注射技术员J11377 工作地点：上海市 所属部门：上海药明康德新药开发有限公司肿瘤免疫部 工作职责 1.利用显微操作技术进行原核注射、囊胚注射、胚胎移植、单精 注射等胚胎操作技术手段，构建小鼠或大鼠转基因模型； 2.参与转基因小鼠及大鼠饲养、繁殖； 3.上级安排的其他工作任务。 任职资格 1.本科或本科学历以上，男女不限； 2.掌握胚胎显微操作技术； 3.熟悉小鼠或大鼠显微注射；

抗肿瘤药物药效学实验方法及指导原则

抗肿瘤药物药效学实验方法及指导原则 一、基本原则 1. 抗肿瘤药物分类 (1) 细胞毒类药物(cytotoxic agent)：包括干扰核酸和蛋白质合成、抑制拓扑异构酶及作用于微管系统的药物等； (2) 生物反应调节剂(biological response modifier)； (3) 肿瘤耐药逆转剂(resistance reversal agent)； (4) 肿瘤治疗增敏剂(oncotherapy sensitizer)； (5) 肿瘤血管生成抑制剂(tumor angiogenesis inhibitor)； （6）分化诱导剂(differentiation inducing agent)； (7) 生长因子抑制剂(growth factor inhibitor)； （8）反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide) 。 2. 抗肿瘤药物药效学需研究内容 2.1 包括体外抗肿瘤试验，体内抗肿瘤试验。 2.2 评价药物的抗癌活性时，以体内试验结果为主，同时参考体外试验结果以做出正确的结论。 2.3 I类抗肿瘤新药应进行药物作用机制初步研究。 二、体外抗肿瘤活性试验 1. 试验目的 1.1 对候选化合物进行初步筛选； 1.2 了解候选化合物的抗瘤谱； 1.3 为随后进行的体内抗肿瘤试验提供参考，如剂量范围、肿瘤类别等。 2. 试验方法 选用10-15株人癌细胞株，根据试验目的选择相应细胞系及适量的细胞接种浓度，按常规细胞培养法进行培养；推荐使用四氮唑盐MTT还原法、XTT 还原法、磺酰罗丹明B(SR染色法、或51Cr释放试验、集落形成法等测定药物的抗癌作用。

《药理学实验》课程教学活动大纲

《药理学实验》课程教学大纲 （执笔人：尹艳艳审核人：周兰兰教学院长：陈志武）一、课程简介 （一）课程代码： （二）课程名称（含英文名称）： 药理学实验（pharmacology experiments） （三）课程类别： 专业基础课 （四）修读对象： 药学专业 （五）总学时与学分： 其中实验54学时，3学分。 （六）相关课程： 药理学 （七）内容提要 本课程涵盖了药理学部分的模拟实验及经典实验项目，以大量的实验尤其是动物实验为基础，复制疾病动物模型，研究用药后的生物体功能活动变化及其规律，以巩固药理学及相关基础理论知识，进一步强化实验操作技术，提高动手能力，培养分析问题和解决问题的能力。 二、教学目的和教学方法 （一）教学目的 1．加强学生的药理学基本理论、基本知识和基本技能的训练，培养理论联系实际和独立开展科学研究的能力。药理学实验可以帮助学生验证药理学理论知识，巩固和加强对药理学理论的掌握；促进学生对药理学一些抽象概念的理解；了解药理学研究的一些基本方法，培养学生药理学实验设计和科研能力；初步掌握药物研究的基本技能，并且通过科研模拟实验加强学生的创新思维能力的培养。

2.药理学实验主要以学生在教师指导下自己动手操作为主，少量示教实验为辅，并且配合课堂讨论和多媒体等方法，达到既验证理论，巩固和加强药理学理论知识学习的目的，又要做到培养学生科研能力和创新思维的开发。 （二）教学方法 采用课堂讲授、现场指导、模拟实验、双语教学、自主设计、病例讨论和课外训练等多种教学手段相结合的教学方法。 三、实践教学学时分配 四、选用教材和主要教学参考书

1.陈志武,董六一,《药理学实验指导》,中国协和医科大学出版社,2013年10月 2.孔德虎，《医学机能学实验教程》，科学出版社，2009年2月。 五、实验教学内容 实验一、动物捉拿及各种药方法（录像） 主要讲授内容：介绍动物捉拿及各种给药方法 教学时数：3学时 重点与难点： 1.小鼠、大鼠和家兔的捉拿方法。 2.小鼠、大鼠和家兔常见的给药方法 实验二、小鼠戊巴比妥钠LD50和ED50的测定 主要讲授内容：ED50及LD50的概念，其测定方法和小鼠腹腔注射的方法 教学时数：4学时 重点与难点： 1.小鼠腹腔注射的方法。 2.LD50和ED50的计算方法。 思考题或练习题： 1. 半数有效量（ED50）和半数致死量（LD50）测定的目的意义如何？ 2. 药物的剂量与药物作用有何关系？ 3. 治疗指数和安全范围之间有何联系？ 实验三、吗啡的镇痛作用（小鼠热板法和小鼠扭体法） 主要讲授内容： 1.镇痛药物的热板实验方法测定，观察镇痛药的镇痛作用，熟练掌握小鼠皮下注射的方法； 2.镇痛药物的扭体实验方法测定，观察镇痛药的镇痛作用，熟练掌握小鼠腹腔注射的

药理学实验教程资料

药理学实验教程 （中、英文版） 主编 叶春玲 钟玲 暨暨南南大大学学药药学学院院药药理理教教研研室室 22000077年年55月月

药理学实验教程 目目 录录 第一篇 药理学实验基本知识 第一章 药理学实验须知 一、药理学实验课的目的和要求 二、实验结果的整理和实验报告的撰写 第二章 药理学实验设计的基本知识 一、实验设计的基本原则 二、药理实验设计中的剂量问题 三、药理实验设计中的预试问题 第三章 药理学实验的统计处理原则 一、计量资料的统计分析 二、计数资料的统计分析 三、药效和剂量依赖关系（相关性）的统计分析 四、两药药效的等效性分析 第四章 常用实验动物的基本操作 一、实验动物的选择及捉拿固定 二、实验动物的编号 三、实验动物的给药方法 四、实验动物的麻醉和取血 第五章 药理学实验常用仪器操作技术 BL-410生物机能实验系统 第六章 药物剂型与处方学 一、药物剂型 二、处方学 第二篇 药理学总论实验 第一章 药动学实验 实验一 磺胺类药物静脉给药后的药时曲线 实验二 磺胺类药物非血管内给药后的药时曲线 实验三 3P87 计算药物动力学参数

实验四磺胺类药物在体内的分布 实验五磺胺嘧啶的血浆蛋白结合率测定 实验六磺胺类药物在麻醉大鼠体内经胆汁和尿排泄的实验 第二章药效学总论实验 实验一不同给药途径对药物作用的影响 实验二肝功能状态对药物作用的影响 实验三量效关系曲线和有关药效学参数测定 第三章安全性试验 实验一药物急性半数致死量（LD50）的测定 实验二最大耐受量（MTD）测定 第三篇药理学各论实验 第一章传出神经系统药物实验 实验一药物对麻醉动物血压的影响 实验二药物对麻醉动物血流动力学的影响 实验三药物对离体兔主动脉环的作用 第二章中枢神经系统药物实验 实验一药物对小鼠自发活动的影响 实验二药物对益智作用的影响 实验三抗癫痫药和抗惊厥实验 实验四镇痛药实验 第三章心血管系统药物实验 实验一利多卡因对哇巴因诱发心律失常的拮抗作用 实验二强心苷对家兔在体衰竭心脏的作用 实验三药物对垂体后叶素所致的急性心肌缺血心电图变化的影响第四章内脏系统药物实验 实验一呋塞米对小鼠尿量及电解质的影响 实验二药物对组胺诱发豚鼠哮喘的作用 实验三药物对大鼠的利胆作用 第五章激素类及抗炎药物实验 实验一糖皮质激素对毛细血管通透性的影响

药理学实验考核方法

不同考核方法对药理学实验成绩的影响 任亮1，张志国1，付宜静 2 （1.河南省漯河医学高等专科学校河南漯河 462002； 2.河南省漯河医学高等专科学校第一附属医院河南漯河 462001）[摘要]目的：通过分析和比较在不同实验考核方法影响下，三年制临床医学专科学生药理学实验成绩的差异，希望能够找到对实验全过程监控的，行之有效的药理学实验考核办法。方法：将原始记录和操作评估分别引入药理学实验考核中，建立原始记录考核法实验组及操作评估考核法实验组，并以传统考核方法为对照组，观察不同考核方法影响下学生实验考核成绩的不同，比较优秀率和及格率的差异，分析产生差异的原因。结果：原始记录考核法实验组的实验成绩与对照组比较，有非常显著性差异（P<0.01），优秀率和及格率均明显高于对照组。操作评估考核法实验组的实验成绩与对照组比较，有显著性差异（P<0.05），优秀率和及格率均高于对照组。结论：原始记录考核法和操作评估考核法均能够对实验过程进行有效监测，较全面地反映学生实验完成情况，显著提高实验考核成绩和学生各方面素质。相比较而言，原始记录考核法能够更好提高药理学实验教学的质量，符合药理学实验教学的特点，便于执行和操作，是一种行之有效的考核方法。 [关键词] 药理学；实验考核；原始记录；操作评估 随着高校在实验教学方面投入的不断加大，药理学实验在硬件方面有了很大的改善。但在药理学实验教学长期中存在的，如学生预习的自觉性不强，主动性和参与性不强，教师对过程监控性不足等问题，却没有很好地解决，甚至有不断恶化的趋势。笔者认为，造成这种现状的主要原因，与药理学实验缺乏较为科学的考核方法有着密切的关系。传统的药理学实验考核主要以实验报告完成情况作为依据，忽视了对学生实验过程的监督与评价，不能全面反映学生的动手能力、观察能力和科研协作能力等诸多能力。因此，建立一种合理的、可行的，能在实验过程中动态监测学生实验情况，全面反映学生综合素质的考核方法，是当前药理学实验教学中急需解决的重要问题。

药理实验方法学重点

一．1.首过效应：口服给药后，药物在到达体循环之前，经肠道、肠壁和肝脏的代谢分解使进入生物体内的相对药量降低。2，判断方法：尾静脉给药AUC和门静脉给药AUC—比较判断肝首过—是—尾静脉》门静脉;门静脉给药和十二指肠给药AUC—比较判断肠首过—是—门静脉》十二指肠十二指肠和灌胃给药AUC—比较判断胃首过—是—十二指肠AUC》灌胃AUC 二．简述肾外包扎性高血压模型制备的基本原理和注意事项?答：原理：肾外异物包扎，可致肾周围炎，肾外形成一层纤维性鞘膜，压迫肾实质，造成肾组织缺血，使肾素形成增加，进而使血管紧张素含量增加，血压上升。属肾性高血压模型。注意事项：1)肾外包扎材料除自制双层孔胶薄膜和玻璃纸外，还可用绸布、乳胶、火棉胶等材料。肾外包扎应足够紧，但不能勒破组织。2) 如果要制造2肾1扎型，则一侧肾包扎后无需切除另一侧肾，术后3~6个月10%~20%动物形成高血压；如果要制造2肾2扎型，则一侧肾包扎后同法包扎另一侧肾，术后3~4周70%以上动物形成高血压。三、（一）佐剂性关节炎1.大鼠AA的制备：选用雄性Lewis、Wistar或SD大鼠，体重200g左右，将每鼠右后足趾皮内注射完全弗氏佐剂（CFA）0.1ml致炎。CFA是将卡介苗或死结合分枝杆菌加入已经高压灭菌的液体石蜡中，浓度为10mg/ml。原发病变主要表现为早起致炎局部的炎症反应，致炎后18h右后足的肿胀达峰值，持续3d后逐渐减轻，8d后再度肿胀；继发病变一般出现于致炎后10d左右，表现为对侧和前肢的肿胀，耳和尾部出现“关节炎”小结，变应性角膜翳以及体重下降等等。2.小鼠AA 的制备：选用雄性C57BL/6小鼠，8周龄，4%氟烷吸入麻醉，左侧胫-跗关节皮下两点皮下注射100ulCFA，CFA浓度为5ug/ul，对照组同方法注射液状石蜡。造模后22d处死。造模24h 内原发侧关节出现急性肿胀，第9天肿胀较严重。模型组穿格子数和活动度明显降低。造模后小鼠对于机械异常性疼痛和热痛出现明显退缩反应。（二）II型胶原诱导的关节炎 1.小鼠CIA的制备：将鸡或牛II型胶原（CII）溶解于0.01mol/L的醋酸后与同等容积的含有低浓度卡介苗的液体石蜡油（ALCB）充分乳化，CII和ALCB的计量均为4mg/mL.,乳化在冰浴中进行。在小鼠（18g左右）根部多点皮内注射乳化剂0.1ml，第21d在尾根部加强注射。加强注射后，由第三者检查关节炎的发生情况。2.大鼠CIA的制备：CII溶解于0.01mol/L 的醋酸中（CII终浓度为4mg/ml），充分研磨，4度过夜，讲CII溶液滴加至冷的不完全弗氏佐剂（IFA）中，等体积混合，充分乳化。大鼠（体重150g左右）尾根部和背部分多点皮内注射0.1mLCII乳化剂。7d后同法再坚强注射一次。对照组注射0.01mol/L醋酸和IFA的乳化液。从第20d后开始，用组织测量仪测定后足趾的容积。评价指标：足趾肿胀度、全身表现评分、关节肿胀数、关节炎指数、X线评分、关节炎病理评分。四、祛痰药的药理试验方法 1).呼吸道分泌液量测定法小鼠酚红实验法,基本原理：利用酚红小鼠腹腔注射后部分从气道排泄的特点，测定小鼠气道酚红排泄量，以判断受试药对气道通透性和分泌液量的影响.操作步骤：小鼠饥饿16-18h--注射酚红前30min受试药物灌胃--腹腔注射酚红药 物，30min 后处死--血凝后，分离气管、气管插管并与注射器相连--用5% NaHco3 0.8ml 洗气管，反复三次--合并洗液，放置，得透明红色上清液，用分光光度计波长545nm比色，根据酚红标准曲线计算出酚红量。注意事项：1.待小鼠体内血液凝固后，再切开颈部，以免血液中酚红影响。2.气道内注入NaHco3溶液后吸出时要轻轻进行，一旦用力过度，肺泡会破裂液体流入胸腔。2)呼吸道纤毛运动实验法---鸽纤毛运动实验法原理：利用气管纤毛运动带动颗粒物从气管内固定的向口腔方向的速度，测定药物祛痰药物，一般测运动2cm所需的时间.操作步骤：鸽气管分离，做2cm的标记---切开气管，将软木屑放在2cm向心端--记录2cm所需时间，观察给药前后0.5h的速度，正常是3-4min。注意事项：鸽气管暴露实验注意温度，等待时颈部用生理盐水湿润纱布防治干燥.3)豚鼠气道黏液黏蛋白的测定.原理：气道黏液主要由杯细胞和黏液性腺细胞产生和分泌，内含黏蛋白，为黏多糖和蛋白质。无机酸存在下，己糖醛酸从黏多糖中释放与咔唑起缩合反应，形成有色物，在530nm比色测定.操作：豚鼠麻醉处死，取气管称重----剪开气管用棉棒取黏液--水洗，离心，取上清液

肿瘤专科临床药师工作指南

肿瘤专科临床药学 肿瘤学是研究恶性肿瘤的发生过程与防治措施的学科，它包括两部分内容：一是主要阐述肿瘤病的流行病学、病因学与发病学、病理学与生物学特征、癌前病变、实验室与动物实验研究、癌转移与复发的机理、肿瘤增殖动力学与时间学、肿瘤免疫学与遗传学、抗癌药物筛选与临床前药理研究、早期诊断与临床综合诊断、新诊断技术与治疗方法的开拓及应用、防治机构的建立、普查与预防措施等；二是临床肿瘤学部分，主要阐述各类恶性肿瘤的流行病学特征、病理学及临床病期分类、临床表现、诊断及鉴别诊断、治疗学及疗效评价、预防措施等。 临床药师学习与实践主要侧重于临床肿瘤的内科治疗，即以肿瘤发生机理与诊断等为基础，以较为常见的肿瘤病种为线索，以各类药物临床合理应用为目的，通过临床实践，真正建立以“病人为中心”的观念，树立团队合作共同承担为病人服务的理念。 一、培训目标 （一）学习和巩固相关的临床医学知识，强化本专业的药物知识，构建开展临床肿瘤药物治疗的背景知识结构，逐步形成临床思维模式。 （二）通过1年时间的理论知识及临床实践技能的培训，掌握临床肿瘤学科的基本知识，熟悉肿瘤学临床医疗过程。要求能准备询问病史，正确书写医疗文书，掌握临床常见肿瘤的诊断及处理原则。 （三）掌握常用抗肿瘤药物的单独治疗和组合治疗方案的药理、药效、药动、毒理、药物相互作用、配伍禁忌（物理、化学和药效的）、剂型、药物评价。 二、培训方法 （一）培训时间：全脱产培训一年。全年实际工作（学习）日不得少于49周，1960小时，其中临床实践时间不得少于1765小时，业务知识学习时间不得少于195小时。 （二）培训老师：一名专职临床药师和一名主治医师以上专业技术职称肿瘤科临床医师组成培训小组，每个培训小组带1～2名受训者参与临床用药实践。 三、培训内容与要求 通过一年的临床药师规范化培训，受训学员应达到“四个基本和四项技能”，即符合肿瘤学培训各项基本要求，达到承担临床任务和自我提高的基本素质，建立独立或协作处理问题的基本能力，掌握临床操作和沟通的基本技能；四项技能是临床知识与医疗文件技能，临床药物知识与用药实践技能，交流沟通技能以及专业学习与科研技能。具体要求如下：（一）综合素质培训 1.具有较强的职业责任感，良好的心理、思想素质与职业道德、法律意识，尊重患者，维护其合理用药权益。 2.掌握《药品管理法》、《医疗机构药事管理暂行规定》、《处方管理办法（试行）》、《抗菌药物临床应用指导原则》等法律法规文件的相关内容。 （二）临床知识与技能培训 1.掌握临床肿瘤学科的基础理论、基本知识，熟悉肿瘤学临床医疗过程。 2.了解肿瘤科疾病治疗结果的判断指标与方法 3.具有阅读理解病历的能力 4.熟悉下列诊疗方法和技术在肿瘤疾病诊疗中的应用价值 （1）病史采集：准确询问病史，熟悉疼痛、发热、呼吸困难、出血（呕血、咯血、血尿等）等常见症状在肿瘤科疾病诊疗中的应用价值。 （2）体格检查

药理学实验方法

word 药理学实验方法 第－讲实验动物的选择 在药理学实验中，要根据实验目的，选择不同动物，常用动物有： １、青蛙和蟾蜍 心脏（离体、在体）实验, 制备坐骨Ｎ－腓肠标本等。 ２、小白鼠： 药物初筛：镇痛、耐缺氧、抗肿瘤药物、LD５０测定、避孕药实验等。 ３、大白鼠： 抗炎作用，大白鼠踝关节肿胀实验，血压测量，胆管插管等。 长期性毒性试验。 ４、豚鼠： 对组胺敏感，并易于致敏，常用抗过敏药（平喘药、抗组胺药）实验。离体心房、心脏、肠管实验等。 豚鼠对结核菌也敏感，也用于抗结核病药物实验。 5、兔： 家兔易得，驯服，便于静脉注射和灌胃，常用于观察药物对心脏的作用和对CNS 的作用。 又由于其体温变化较敏感，也常用于体温实验及热原检查。 家兔也常用于避孕药实验。 6、猫： 猫的血压比较稳定，具有咳咳嗽反射和呕吐动作。因而常用于心血管药物实验和镇咳药、镇吐药实验。 7、狗： 狗的血压比较稳定，常用于降压药、升压药和抗休克药实验。 狗比较容易驯服，最适用于慢性实验。手术造瘘（胃、肠）以便观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。 此外，长期毒性实验也常用狗来进行。 * 附:给药途径及剂量限制 1. 小白鼠 （1）灌畏法:0.1～0.25ml／10g体重。 （2）皮下注射：0.1～0.3ml／10g体重。 （3）肌肉注射：0.2ml／每侧。 （4）腔注射：0.1～0.25ml／10g体重。 （5）静脉注射：0.05～0.1ml／10g体重。 1.大白鼠 （1）灌畏法:2.0ml／10og体重。<3.0ml/只。 （2）腔注射：0.1～0.25ml／10g体重。 第二讲实验动物的麻醉和处死 一、各种实验动物的麻醉药物和麻醉方法

中药药理学实验说课讲解

中药药理学实验

实验1 附子炮制前后致小白鼠中毒表现的影响（6学时）【目的】观察生附子和制附子致小白鼠的死亡数量，评价炮制对附子毒性的作用。 【器材】1ml注射器、鼠笼、天平。 【药品】生附子水煎醇沉液（上清液）0.5g/ml、制附子水煎醇沉液（上清液）0.5g/ml。 【动物】小鼠，雌雄各半，体重18 ～ 22 g。 【方法】小鼠20只，雌雄各半，随机分为2组。按0.2ml/10g腹腔注射给药，第1组给予生附子水煎醇沉液，第2组给予制附子水煎醇沉液。观察并记录30min内各组小鼠死亡情况。 【结果】记录生附子水煎醇沉液组与制附子水煎醇沉液组动物死亡数，比较两者毒性的大小。 【注意事项】生附子和制附子水煎液制备时均应煎煮4小时以上。 【思考题】 根据实验结果讨论炮制前后附子毒性作用差异的原因。

实验2 生大黄、制大黄以及大黄、芒硝配伍对小白鼠小肠运动 的影响（炭末法）（4学时） [目的]了解生大黄、制大黄对肠蠕动的影响以及大黄与芒硝配伍的药理意义。[原理]利用黑色炭末作为指示剂，观察炭末在肠道的推进距离。口服生大黄可刺激肠蠕动加速，有泻下作用，故对胃肠实热有“釜底抽薪”之功。大黄久煎或炮制之后，致泻成份分解，作用减弱，而芒硝在肠内不易被吸收，使肠内渗透压升高，大量水分保留在肠腔，机械性刺激肠壁而致泻。故生大黄与芒硝配伍有“增水行舟，润燥软坚”之功效，致泻作用增强。 [器材]手术剪、眼科镊、直尺、注射器、灌胃针头、天平，烧杯，搪瓷盘或蛙板。 [药品] 炭末生理盐水混悬液0.1g/m（炭末为活性炭），生大黄水煎液1g/ml(含炭末0.1g/m1)，制大黄水煎液1g/ml(含炭末0.1g/ml，生大黄水煎液加芒硝（生大黄1g/ml+芒硝0.5g/ml+炭末0.1g/m1)，苦味酸。 [动物]小白鼠。 [方法] 取禁食20~24h成年、体重相近的12只小白鼠，随机分为4组，每组3只，用苦味酸标记。分别用上述4种炭末液0.3ml/10g体重灌胃。给药30min后脱颈椎处死，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端至回盲部的肠管，置于托盘上。轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度作为“小肠总长度”。从幽门

药学大实验实验指导药理学部分

药学实验（药理学实验）实验五不同给药途径、给药剂量对药物作用的影响 (一)不同给药途径对药物作用的影响 ?实验目的 观察不同给药途径对药物（硫酸镁）作用的影响，了解核酸镁不同给药途径产生不同作用的原因； 掌握硫酸镁的作用以及小鼠灌胃、腹腔注射方法 ?实验原理 硫酸镁为一种容积性泻药（此外还有刺激性和润滑性泻药），口服在肠道难吸收，在肠内形成高渗压而阻止肠内水分的吸收，从而扩张肠道、刺激肠壁、促进肠道蠕动，产生泻下作用。注射给药可使血中Mg2+增加，由于Ca2+和Mg2+化学结构相似，Ca2+和Mg2+间存在相互拮抗作用，Ca2+参与运动神经末梢Ach释放，而Mg2+拮抗Ca2+这种作用，结果使神经肌肉接头处Ach减少，骨骼肌紧张性降低，肌肉松弛。同时对中枢神经及心血管系统产生抑制作用。因此产生抗惊厥及降压效果。本实验观察不同给药途径对硫酸镁作用性质的影响。 大多数药物需进入血液分布到作用部位才能发生作用。药物自给药部位进入全身血液循环的过程为吸收（absorption），吸收速度的快慢及吸收数量的多少直接影响药物的起效时间及强度。其中给药途径是决定药物起效时间及强度的重要因素之一。给药途径不

同，则药物吸收快慢亦不同，其吸收快慢顺序除静脉注射外是：腹腔注射>吸入>舌下>直肠>肌内注射>皮下注射>口服>皮肤。给药途径不同，其吸收程度又不同，由此使药物作用强度不同。药物经不同给药途径所致的吸收程度是：吸入、舌下、直肠、肌内注射较为完全，口服次之，皮下较差；皮肤表面吸收程度最差，一定要脂溶性特别高的药物才能通过此途径较好地吸收。而胃肠道给药，影响因素较多，包括有首关消除的影响等，使药物吸收程度有所不同。 首关消除（first pass elimination）：从胃肠道吸收入门静脉系统的药物在到达全身血循环前必先通过肝脏，如果肝脏对其代谢能力很强或由胆汁排泄的量大，则使进入全身血循环内的有效药物量明显减少，这种作用称为首关消除。有的药物在被吸收进入肠壁细胞内而被代谢一部分也属首关消除。首关消除也称首关代谢（first pass metabolism）或首关效应（first pass effect）。注射、舌下和直肠给药可避免肝代谢。 ?实验学时 2学时 ?实验对象 小白鼠，体重18-22g，雌雄不限 ?实验器材 1ml注射器2支、小白鼠灌胃针头1个、5号针头1个、250ml烧杯2个 ?药品与试剂

肿瘤药理试验方法与技术

第七节 肿瘤药理实验方法与技术 肿瘤药理实验方法无外乎体内和体外实验两种。从实验目的上看，又可以分成抗癌作用和抗癌作用机制研究两种。 一、抗癌作用研究 （一）体外实验法：用培养的肿瘤细胞系进行。 1、噻唑蓝（MTT ）法 在培养的活细胞线粒体中与NADP 相关的脱氢酶可将黄色的四氮唑（MTT ）催化成不溶性的蓝紫色的甲替，将甲替用二甲基亚砜（DMSO ）溶解后，利用酶标仪（试验波长570nm ，参比波长450nm ）测定光密度值，按照公式 实验组光密度值 肿瘤细胞生长抑制率（%）=（1 - ）×100% 对照组光密度值 计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率。用系列浓度的药物可制作肿瘤细胞生长抑制率的量效曲线。 2、染料排斥法 本方法是根据活细胞具有排斥某些染料的功能，而死细胞因胞膜破坏而易于被染料着色的原理，在培养的对数生长期的细胞悬液中加入伊红、台盼蓝、或苯胺黑等染料，在室温下放置5分钟后，在15分钟用血球计数板计数200个细胞。根据公式 未染细胞数 活细胞率（%）= ×100% 细胞总数 3、生长曲线法 本方法是根据肿瘤的Gompertzian 生长曲线而设计。培养的肿瘤细胞在初期为指数增殖期，随着细胞密度的增加，因代谢产物的积聚和营养物质的消耗，增殖趋于减缓乃至停止，进入所谓的平台期。在培养后的的即刻、1、2、3、 4、 5、7天的细胞，用台盼蓝染色，细胞计数，然后取细胞对数对培养时间作图可获细胞生长曲线。1）将生长曲线外延至Y 轴可获得截距No`，用公式 %100No No`-No ?=对增殖细胞的杀伤力 计算药物对增殖细胞的杀伤力（No`是对照组的的截距） 2）用Nt 代表接种后t 小时的细胞数， 用公式 TD = 0.301t / logNt - LogNo 计算药物对细胞增增时间（TD ）的影响。 3）取平台期每毫升的细胞均数，比较细胞生长的饱合密度（Ns ）。 4、集落形成法 本方法利用分裂≥6代以上的克隆原单细胞子细胞可形成集落成簇（每簇细胞数＞50）的能力，比较药物对单个肿瘤细胞增殖能力的影响。本方法有贴壁法和半固体培养法两种。

分子肿瘤药理学综述

近年来FDA批准抗肿瘤药物靶点概况及新靶点相关研究 【摘要】肿瘤已经严重威胁人类健康，随着肿瘤生物学和细胞生物学的发展，越来越多的抗肿瘤新靶点和新机制被发现，为肿瘤治疗提供新途径。本综述总结近年FDA批准的抗肿瘤药物的靶点概况及近年抗肿瘤新靶点的研究进展。 【关键词】抗肿瘤药物 FDA 新靶点 肿瘤已成为严重威胁人类健康的重大疾病之一，目前国内外临床上广泛使用的抗肿瘤药物有100 多种，抗肿瘤药物关注的靶标大多集中于把肿瘤细胞杀死，但部分未杀死的细胞和几乎难以杀死的肿瘤"干细胞"(或者称为肿瘤起始细胞)仍旧存活，如何将这部分癌细胞杀死是治疗癌症的一大难关。随着对肿瘤细胞内的信号转导、细胞周期调控、细胞凋亡过程的深入研究，抗肿瘤药物的发展由传统的细胞毒药物转向以分子为靶向的药物，因为这类药选择性高、毒性低。文章主要介绍近年来抗肿瘤药物相关靶点及抗肿瘤药物新靶点的研究进展。 1 近年FDA批准的抗肿瘤药物概况 近几年，抗肿瘤分子靶向治疗成为了研究热点，它是以过度表达的肿瘤细胞分子为靶点，从而抑制肿瘤细胞的过度增殖、浸润和远处转移，对正常细胞损伤小而具有良好的特异性。分析近年FDA 批准上市的新药: 获批的抗肿瘤药物数量在上市新药中仍占主要地位，获批的抗肿瘤药物确以靶向药物为主，并且从单靶点药物向多靶点药物转移【1】。 1.1单靶点小分子抗肿瘤药物 1.1.1 PI3K/AKT/mTOＲ信号通路抑制剂【1】 PI3K/AKT /mTOＲ是与细胞凋亡和细胞增殖关系密切的信号传导通路之一，该通路在多种恶性肿瘤中处于高度激活状态，在肿瘤的发生发展中扮演了重要的角色。2014 年1 月13 日美国吉利德科学公司申请idlalisib 用于治疗耐受无痛性非霍奇金淋巴瘤( iNHL) ，该药是首个上市的磷脂酰肌醇-3 激酶( PI3K) delta 口服抑制剂。idlalisib通过抑制PI3K delta，从而阻断某些驱动B 细胞存活的信号通路发挥抗肿瘤作用。 1.1.2 酪氨酸激酶抑制剂【5】 酪氨酸激酶抑制剂可作为三磷酸腺苷( ATP) 与酪氨酸激酶结合的竞争性抑制剂，也可作为酪氨酸的类似物，阻断酪氨酸激酶的活性，抑制肿瘤细胞增殖，已成为靶向抗肿瘤药物开发最多的领域。阿西替尼是ＦＤＡ于２０１２年批准用于临床治疗的１种小分子酪氨酸激酶抑制剂，能有效抑制ＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ２、ＶＥＧＦＲ３，临床上主要用于其他治疗无效的晚期ＲＣＣ患者。 1.1.3 MAPK 信号通路抑制剂 丝裂原活化蛋白激酶( MAPKs) 是胞内一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，能将细胞外信号转导至细胞及核内，参与细胞运动、凋亡、分化及生长增殖等多种生理过程。部分突变的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶( BＲAF) 是该通路重要的转导因子，位于MAPK/EＲK 通路入口。研究显示，黑色素瘤患者存在BＲAF 蛋白突变，BＲAF 蛋白的活性激增，引起肿瘤细胞恶性增殖。MAPK 信号通路已成为一个有希望的抗黑色素瘤治疗靶点。dabrafenib为BＲAF 抑制剂，适用于携带BＲAF V600E 突变的、手术不可切除性黑色素瘤或转移性黑色素瘤成人患者，不适用于有野生型BＲAF 的黑色素瘤患者治疗。FDA 还批准曲美替尼( trametinib) 作为首个上市的分裂原活化MEK 抑制剂。trametinib 作为一种口服片剂，其适应症与dabrafenib 相同，但是不适用于既往接受过BＲAF 抑制剂治疗的患者。 1.1.4聚腺苷二磷酸核糖聚合酶( PARP) 抑制剂 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶( PARP) 抑制剂可通过阻断肿瘤细胞中一种与细胞修复相关的酶，杀死肿瘤细胞来达到治疗特定基因突变型癌症患者的效果。由阿斯利康公司研发的奥拉帕尼( olaparib) 是一种口服小分子，首个上市的PARP抑制剂，具有治疗DNA修复缺陷的肿瘤的潜力。olaparib 国际多中心II 期临床试验结果表明，其作为一种单药疗法，可用于携带BRCA