金线莲的离体快繁
特种经济动植物２００７．５
金线莲【Ａｎｏｅｃｔｏｃｈｉｌｕｓｒｏｘｂｕｒｇｈｉｉ（Ｗａｌｌ．）Ｌｉｎｄｌ．】别名花叶开唇兰，为兰科开唇兰属多年生草本植物，是一种珍稀中草药。有关部门测定发现，金线莲中氨基酸组成成分含量、抗衰老活性微量元素的含量均高于国产和野生西洋参，在中药界有药王之称。全草味甘，性凉，有清热润肺、消肿解毒的功效。用于治疗肺热咳嗽、肺结核、风湿性关节痛、胃炎、膀胱炎、肾炎、吐血、毒蛇咬伤；还可降低胆固醇，防止血压升高等。
由于人们长期大量采挖和野生动物包括昆虫的咬食，加之近年来的山地开发、生态资源的破坏，野生金线莲数量大为减少，致使药源紧缺，国内外市场供不应求。
金线莲的种子发育不全，在自然条件下发芽率很低，传统的分根扦插繁殖时间长、繁殖系数低，无法大量种植生产。而利用植物组织培养繁殖可大大提高繁殖速度，并有效地保护野生资源，解决中药材来源匮乏的问题，满足人们用药的需要。
在培养基中添加马铃薯提取液来取代水解乳蛋白或其它有机复合物，既降低了成本，又取得了较好的培养效果。
１
离体快繁技术
１．１
外植体的准备
为了获得较多的接种材料和降低污染率，可将植株剪成带２～３节的插条扦插于细河沙与珍珠岩的混合基质中，浇透水，搭一塑料小拱棚，在棚上盖上双层遮阳网，使温度保持在２０～２５℃，湿度在８０％左右，２５天生根发芽。当芽长到１ｃｍ左右时剪下，作为接种材料。采芽前１５天左右不要浇水。也可以直接从产地取嫩枝作为外植体。
１．２培养条件及马铃薯提取液的制作方法
以Ｎ６培养基为基本培养基。根状茎诱导培养基：
Ｎ６＋６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＮＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋１０％马铃薯提取液＋０．０８％活性炭；增殖培养基：Ｎ６＋６－ＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＮＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋１０％马铃薯提取液＋０．０８％活性炭。上述培
养基均加０．７％琼脂和３％白糖，ｐＨ５．５～６．０。培养温度
２０～２５℃，每天光照１２小时，光照度２０００～２５００Ｌｘ。
马铃薯提取液的制作方法：将未发芽的马铃薯去皮，按需制培养基量计算并称量，用清水洗净，切成厚２～３ｍｍ、
长和宽分别为３～４ｃｍ的薄片，放入比需制培养基量少一些的清水中，大火煮开后１５～２０分钟，用单层纱布过滤，其过滤液即为马铃薯提取液。
２生长与分化
２．１无菌材料的获得
将金线莲嫩枝上的叶片去掉，留１～２ｍｍ长的叶柄以保护腋芽；把嫩枝剪成单节茎段，然后将茎段和芽用洗衣粉液摇洗，再用清水洗净，放自来水下冲洗３０分钟以上。
在无菌条件下用７５％乙醇浸泡３０秒，转到０．１％ＨｇＣｌ２液中灭菌５～６分钟，再用无菌水摇洗
３～４次，接种到根状茎诱导培养基上，每瓶接１个茎
段或１个芽。
２．２根状茎的诱导及芽的生长
接种在根状茎诱导培养基上的茎段从第３周开始长出嫩绿色尖尾状的腋芽；１个月时腋芽长成根状
●王勤罗林会
（贵州遵义职业技术学院贵州遵义５６３００６）的离体快繁
金线莲
Ｙ
ａｏｙｏｎｇｚｈｉｗｕ
药用植物３６
特种经济动植物２００７．５
茎；７５～９０天后，根状茎长２～５ｃｍ，有节３～４个，根状茎的下部叶呈鳞片状，上部的１～２片叶为真叶。以芽为外植体的，接入１０天时生根，芽开始生长；１个月时芽长成高２ｃｍ左右的小苗，叶色为它本有的紫黑色；７５～９０天时小苗高７～８ｃｍ，有３～４个节，２～３条根。此时可转接并进入增殖培养阶段。
２．３根状茎及小苗的增殖
将在根状茎诱导培养基上培养了７５～９０天的根状茎及小苗，剪成段（１节１段），转接在增殖培养基上，１瓶接５～６个节段或芽。
接入７天后，根状茎开始生长，并逐渐长成成束的根状茎；７５～９０天后，每束有根状茎３～７条，每条根状茎上有３～４个节，下部节上的叶为鳞片状，上部的为真叶。直立茎段、芽及根状茎上剪下的顶芽，在增殖培养基上培养７天，开始生根长芽，并逐渐长成直立的小苗；７５～９０天后，小苗又长成高７～８ｃｍ、有３～４个节、２～３条根的完整植株。每７５～９０天为１个继代增殖周期，每个继代增殖周期的繁殖系数是：芽的繁殖系数为３～４，茎段的为
９～２８。
２．４瓶苗的移栽
当苗高６～７ｃｍ、有２～３条根、根长１～３ｃｍ时可炼苗移栽。移栽前，将瓶苗移出培养室，放在实验室中炼苗７～１０天，然后打开封口膜，小心取出苗，洗掉根部的培养基，栽入细河沙与珍珠岩的混合基质中（细河沙∶珍珠岩＝３∶１），并给它们搭一塑料小拱棚，在棚上盖上双层遮阳网，使温度保持在２０～２５℃、湿度
８０％左右。栽后２５天生根成活，成活率８０％以上。
２．５移栽苗的管理
金线莲喜温暖、湿润、半阴的环境，通气良好、偏酸的土壤。所以，除冬季外，其他季节均要盖上遮阳网。气候干燥时要常向叶面喷水，每３～５天浇透水１次，使土壤保持湿润。如果用自来水浇灌金线莲，最好先将自来水存放２～３天后再浇。在生长季节，用０．３％尿素加０．２％磷酸二氢钾和０．２％硫酸亚铁灌根，每半个月浇灌１次，连续４～５次。冬季不施肥，少浇水，并保持棚温在１０℃以上。
●刘金柱李桂荣
（河北省迁安市林业局河北迁安０６４４００）河北省迁安市现有条桑面积４０００公顷，每年能生产桑条４５０００吨，除了利用一部分造纸、编织农具（筐、篓）外，剩余部分作为烧柴烧掉。２００２年，引用桑枝生产黑木耳的栽培技术后，使条桑的综合利用上了一个新台阶，增加了农民收入。
经测定，桑条中含粗蛋白５．８４％、
纤维素５１．４８％、木质素１８．８１％、半纤维素２３．０２％、灰分１．５７％，是生产黑木耳的上等原料。
桑枝黑木耳栽培简便，效益较高。１ｋｇ桑枝可产黑木耳１．５～１．８ｋｇ，晾干木耳０．１５～０．１８ｋｇ；１公顷成龄桑园产干桑条５２５０ｋｇ，可产干木耳９４５ｋｇ，产值可达３７
８００元。
１培养料的准备
培养黑木耳的桑枝最好用存放１年以上的未发霉、无虫蛀的桑条，粉碎成绿豆粒至黄豆粒大小备用。将桑木屑４３．５ｋｇ、
豆饼粉１ｔ、麦麸５ｋｇ、石膏０．５ｋｇ、石灰粉０．２５ｋｇ、清洁水１５０ｋｇ混合后充分搅拌，打堆闷料，春天闷２小时、秋天闷０．５～１小时。
２装袋杀菌
闷料后立即装袋，避免基料变酸而影响菌丝生长。用宽１７ｃｍ、长３３ｃｍ的专用聚乙烯新角袋装料，边装边压紧，装高１５～２０ｃｍ。装完后，立即用直径７ｃｍ的圆木棒从料面中央旋转打洞至袋底，然后在袋口套上塑料项圈，盖紧无棉盖。建０．１吨／小时蒸汽锅炉１
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技术
黑木耳
用
桑枝栽培Ｔ
ｅｓｅｓｈｕｃａｉ
特色蔬菜３７
草莓组织培养脱毒快繁与应用技术研究
1 草莓组织培养脱毒快繁与应用技术研究 项 目 总 结 报
告 主持完成单位：商丘市农林科学研究所 二0一0年十二月 2 目录 一、项目来 源……………………………………………………………………1 二、项 目实施的意义和依据 (1) （一）品种来源 (1) 1、丰香—草 莓 (1) 2、特征特性 (1) 3、脱毒丰香草莓 (2) （二）项目实施的目 的..................................................................3 1、总体目标 (3) 2、研究组织培养脱毒快繁，加速示范推广，促进农村经济发展 (3)
（三）项目实施的意 义 (3) 1、提高果品产量和质量，增强市场竞争能力 (4) 2、生产无公害果品，促农民致富................................................4 3、发挥增产增收效益潜力，促进产业结构调整 (4) （四）项目实施依据 (4) 1、研究与实施的理论依据.........................................................4 2、“丰香草莓”组织培养技术路线................................................5 3、草莓组织培养的优点............................................................5 三、丰香-草莓的组织培养技术研究 (6) （一）草莓-“丰香”脱毒技术研究…………………………………………… 6 1、研究目的…………………………………………………………………6 2、供试材料…………………………………………………………………6 3、 组织培养环境条件……………………………………………………6 4、 材料的选择与处理……………………………………………………6 5、 生长点的剥取……………………………………………………………7 6、 诱导方法…………………………………………………………………7 7、 病毒的检测……………………………………………………………8 8、 无病毒原种的保存和繁殖………………………………………………8 （二）“草莓-丰香”脱毒与快繁培养基筛选研究………………………………8 1、
金线莲调研报告
金线莲调研报告 ——,福建漳州、厦门 一、金线莲组织培养 1、培养基制作配制培养基 南靖本地大量培养及种植金线莲外，香蕉也是本地一个重要农业种植品种。上山下乡路途中常常可见大片香蕉种植基地。本地金线莲培养企业也在培养基配方中加入香蕉作为添加物，此外还有活性炭。其他配方为企业机密，不对外透露。 分装 加塞 灭菌 2、接种 过程：母苗→取出→去除叶片、根部，留下茎→剪成茎段→置入新培养基→ 摆好茎段→加塞→移至培养室培养4个月→留作母苗↓↘烘干出售出瓶种植 茎段长1cm-3cm,每一茎段留一个茎节每瓶培养基接种25左右个茎段 3、培养培养条件： 培养灯光：普通荧光灯，适宜光强为3000lux左右，但有厂家为控制电费成本低于该光强
培养温度：空调控制为25℃左右 开灯时间：一般为白天关灯，夜间开灯12h。主要为夜间温度低，控制空调电费成本考虑。 培养时间：从接种之日培养至出瓶一般为4个月左右，期间不转接，直至金线莲出瓶。培养目的： 留作母苗：继续留在培养室，作为下一次接种的母苗。烘烤干品：冲洗根部培养基后烘烤成干品后出售。 出瓶种植并洗瓶：出瓶冲洗培养基后进行种植。清洗时应特别注意不要损伤根部，不可使用毛刷，用水漂洗。 4、残次品：残次品：接种剪下的叶片、根茎及炼苗失败的瓶苗洗净培养基后，厂家也将其 烘烤成干品制成茶包低价出售。有的干品在500元/斤左右。 5、典型案例：福建“嘉胜集团”系南靖县乃至福建省最大的金线莲组培集团，该公司有接种室12间，接种工作人员≥200人，金线莲组培苗月产量可达100万瓶。 二、金线莲大棚种植 1、炼苗：瓶苗出培养室后一般炼苗15-30d，或者更久。炼苗一般有专用炼苗大棚，瓶苗出培养室后运至炼苗大棚摆放即可，使瓶苗逐步适应外界的光、温、湿等。 2、出瓶：开盖后适当加水于瓶内，然后摇晃，用手指轻轻勾出苗后，洗净培养基。 3、种植：
金线莲种植投资方案
金线莲投资方案 金线莲别名金线兰、金丝草，为兰科开唇植物花叶兰属多年生珍稀中草药。它在民间使用范围较广，素有“药王”、“金草”、“神药”、“乌人参”等美称。经有关部门测定发现，金丝莲中氨基酸组成、成分、含量及抗衰老活性微量元素的含量均高于国产和野生西洋参。 近3年，金线莲产业发展更是突飞猛进，尤其以福建市场最为火热。目前单以福建省计算，进行金线莲生产和加工的公司就有30多家。尽管生产企业和生产规模连年增加，但是金线莲仍供不应求，这导致了金线莲的价格也逐年走高。因此金线莲无疑具有广阔的市场前景和巨大的经济效益。 方案一：按单卖鲜品计算 一、设施面积： 第一期以300平方米的面积为计算单位，大棚的投资大约为1.5万元。 二、苗木费用：300平方米大约可以种植6万棵，每株苗0.5元，共3万元的购苗费用，其他电费、种植基质、人工等费用2万元。第一期总投入需要投入6.5-7万元。从7月份开始种，10月份收，每棵可以长到重约5克。产量约为600斤鲜品，按平均一斤200元（具体要看销售能力和当地的市场情况）算，销售额为12万元，三个月后就可以收回投入的资金7万元，并实现
盈利5万元，并且在第二期开始，无需设施的投资。第二期投入10万元计算，可以买苗20万棵，同等价格条件下，全部售完，年底当可实现盈利15万元。 方案二：按单做盆栽计算（300盆） 一、设施成本： 第一期仍以300平方米的面积为计算单位，大棚的投资大约为1.5万元。 二、生产资料费用： 1. 种植篮（盆）10元/个,第一期以300盆计算。需要3000元。 2. 种植基质：按每盆5元计算，需要1500元。 3. 水，电费：2000元计算。 4. 苗木费用：每盆按30元计算，需要9000元。（以1万元计算） 三、人工费用：（包含养护人工成本） 按每盆10元计算，需要3000元 四、销售成本：运输费用：按1万元计算 总投资需要：4万元 效益分析：以每盆280元计算，销售额8.4万元，一期，2个月后可盈利4.4万元。 第二期，省去设施成本1.5万元，按500盆计算，可以实现
金线莲有什么功效和作用
金线莲有什么功效和作用 金线莲别名金线兰、金丝草，为兰科开唇植物花叶兰属多年生珍稀中草药。它在民间使用范围较广，素有“药王”、“金草”、“神药”、“乌人参”等美称。经有关部门测定发现，金丝莲中氨基酸组成、成分、含量及抗衰老活性微量元素的含量均高于国产和野生西洋参。几百年来作为民间常用草药。 1、金线莲的形态特征 根茎较细，节明显，棕褐色。叶上面黑柴色，有金黄色网状脉，下面暗红色，主脉3~7条。总状花序顶生，花序轴被柔毛，萼片淡紫色。气微，味淡。
2、金线莲的药材现状 本品呈皱缩卷曲，不规则状的干燥全草，根茎圆柱形，多弯曲，长1-5cm，表面棕褐色，茎节明显，下部集生2-4片叶，叶互生，多卷缩而完整，展开为宽卵形，表面黑棕色，下面暗红色，部分叶脉紫红色，叶柄基部鞘状抱茎，偶见总状花序顶生，花暗棕色，少见蒴果矩圆形，香气特异，味淡。3、金线莲的成分 含糖类成分（多糖13.326%，低聚糖11.243%，还原糖 9.73%）、牛磺酸、强心甙类、酯类、生物碱、甾体，多种 氨基酸，微量元素及无机元素等。 4、金线莲的要理 （成份中）氨基酸和微量元素两者的含量均高于国产西洋参和野山参；它们与牛磺酸、多糖类成分具有营养、抗衰老、调节人体机体免疫的作用。因此，台湾民众及畲族等群众将其当作补虚的滋补强壮品是有道理的。 性味、功效：甘、平；具清热凉血、袪风利湿、强心利尿、固肾、平肝等功效。 5、金线莲主治 清热凉血，除湿解毒，平衡阴阳、扶正固本，阴阳互补、生津养颜、调和气血、五脏、养寿延年的功用。入肾、心、肺三经，能全面提高人体免疫力，增强人体对疾病的抵抗力。
主治肺热咳嗽，肺结核咯血，尿血，小儿惊风，破伤风，肾炎水肿，风湿痹痛，跌打损伤，毒蛇咬伤、支气管炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、急慢性肝炎、风湿性关节炎肿瘤等疑难病症，也兼除青春痘。 6、金线莲的适宜人群 商务人士 金线莲是工作劳累者保健首选天然饮品：金线莲能入肾、心、肺三经，具有调和五脏、保肝护肝、解酒等功效。 能全面提高人体免疫力，增强人体对疾病的抵抗力。 中老年人 金线莲对支气管炎、肾炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、风湿性关节炎、急慢性肝病、高血压、动脉硬化、脑血栓等均有辅助功效。 小儿 金线莲对小儿高烧不退、咳嗽、急惊风效果好。 女性 金线莲常煲汤饮用，能排毒养颜抗衰老、调节内分泌、调和气血、生津养颜。 青少年 饮用金线莲一段时间，能有效消除青春痘和粉刺。
金线莲栽培方法种植方法
金线莲栽培种植方法 一、金线莲的生态习性： (1)温度 生长适宜温度是20～32℃。金线莲对温度的适应性较强。在栽培过程中，在大棚覆盖下，连续30d的0～5℃的低温对金线莲还无明显伤害。15天34度以上日温，容易造成叶子卷。 (2)水分 金线莲性喜湿润。水分是影响金线莲存活的最主要因子。金线莲不可能在气候干燥、土壤缺水的环境生存。金线莲自然分布于湿度大的森林环境之中及一些溪涧附近。人工栽培要让金线莲处于相对湿度在70％以上的小环境下。可以在栽种盆边经常洒水。 (3)光照 金线莲属喜阴植物，其光合作用的光饱和点低，适宜光照度为3000lux左右。80%遮阳网+80%遮阳网+1层塑料膜。在自然条件下，上层乔木郁闭度70％～80％，下层植被覆盖度40％左右。 (4)土壤 土壤要求疏松、透气、湿润。在自然条件下，腐殖土、黄壤、红壤类型的土壤都有金线莲分布。金线莲宜在偏酸性土壤条件下生根。推荐用优质腐殖质土。 二、金线莲人工栽培技术要点 金线莲的人工栽培现主要采用大棚栽培。建造大棚应根据金线莲的生长要求，选择在有林有水的山沟，以保证阴凉，有水灌溉，冬季避风保暖，减少散热，保持湿度，且交通便利。人工组培苗常年均可栽植，每平方用专用方盘栽种300棵，栽植宜浅忌深，栽后覆盖干净干燥的栽培介质，喷洒清水，棚内温度保持20～30℃，并注意保湿。田间管理的好坏，关系到金线莲的成活率和生长及产量，应着重做好： (1) 光照 棚内透光度的大小与生长发育密切相关，透光以三阳七阴为宜。一般栽培时可用80％遮光网双层控制在3000lx左右。 (2)介质 金线莲属兰科又是药用植物，所以必须使用清洁及适宜的栽培介质栽培，适宜的介质除了须具备良好的透气性外尚须良好的保水性。本公司瓶苗健壮，出瓶即可定植。定植时土壤以红壤与黄壤中的砂壤土为主作为栽培介质，质地疏松，偏酸性，适宜金线莲种植。推荐用泥炭土和珍珠岩.
植物离体快繁技术的综述
植物离体快繁技术的综述 黄新 （生物科学技术学院2009级生物技术一班） 摘要：植物快繁技术是一种全新的育苗技术，是现代计算机智能控制技术与生物技术有机结合的高新农业技术。运用植物生长模拟计算机为植物创造最为适宜的温、光、气、热、营养、激素环境，使植物的生理潜能得到最大的发挥，植物的生根基因尽快表达，从而实现植物的快速生根。它的推广应用将会带来一次全新的育苗革命。本文简要介绍植物快繁技术程序、相关培养技术以及植物快繁相关问题的讨论。同时还对植物组织培养脱毒快繁技术的应用前景作了分析。 关键词：植物离体快繁、愈伤组织、不定芽增殖、腋芽增殖、愈伤组织增殖、体细胞胚增殖、玻璃化问题、褐化问题、应用前景 1植物离体快繁概况 1.1研究简史 离体微繁殖技术的应用，首先应归功于Morel，他在1960年首先建立了兰花离体繁殖的方法（原球茎繁殖）。目前已有近400种植物的离体繁殖已获得成功，其中许多具有重要经济价值的花卉(如兰花、菊花、石竹)、果树(草莓、无籽西瓜、葡萄)、经济作物(马铃薯、甘蔗)、林木(桉树、杨树)均已在种苗生产上广泛应用，取得了巨大的经济和社会效益。 我国快速繁殖植物的种类达443种之多荷兰是试管苗的生产王国 1.2植物离体快繁的定义 快速繁殖（rapid clone propagation）：也叫离体繁殖（in vitro
propagation）、微体繁殖（Micropropagation），是指在无菌条件下，将植物体的器官、组织或细胞培养于人工培养基中，并辅以人工控制环境，使其生长出完整植株的繁殖技术。 追究植物组织培养脱毒快繁技术的发展简史，在11世纪就出现的热处理脱毒法，最早解决一些作物的病毒病害问题[1]。本世纪50年代发展的植物组织培养技术为脱毒提供了一条有效途径。现在植物的脱毒技术有多种，其中应用最广泛的有三种：热处理法、茎尖培养脱毒法、抗病毒药剂法，将不同的方法相结合起来应用效果更好。它们的脱毒原理各不相同。 2植物离体快繁的技术程序 无菌材料的建立芽苗的增殖生根及移苗 2.1无菌材料的建立 （1）初代培养：取材消毒接种培养 （2）外植体的选择主要应考虑以下问题： a)繁殖对象的品种典型性。 b)植物在自然条件下的繁殖特点。尽可能取自然繁殖器官的适当 部位作外植体， c)外植体的取材部位和大小、生理状态。 2.2芽苗的增殖 增值方式：不定芽增殖、腋芽增殖、愈伤组织增殖、体细胞胚增殖 2.2.1不定芽增殖 a)不定芽：从现存的芽以外的任何器官、组织上通过器官发生重新形 成的芽称之为不定芽。 b)特点：繁殖系数高、遗传稳定性较好、继代次数有限 c)注意事项：激素浓度不能过高；避免使用2，4-D等活性强的生长素， 以减少变异发生。 2.2.2腋芽增殖 腋芽进行离体培养时可不断生长，逐渐形成芽丛，反复切割和转移可不
浅谈马铃薯脱毒快繁流程步奏及配方教学内容
浅谈马铃薯脱毒快繁流程步奏及配方马铃薯：(Solanumtuberosum)为茄科茄属作物．是全球重要的粮菜兼用作物。马铃薯具有生长期短、产量高、适应性强、营养丰富、耐储运的特点，因此深受生产和消费者的喜爱。但在马铃薯生产中普遍存在种性退化的问题，而病毒侵染是马铃薯退化的根源。由于马铃薯是无性繁殖作物，所以病毒侵染后会世代相传，危害逐年加重。目前，世界上公认的解决马铃薯病毒危害，防止品种退化的有效途径是茎尖离体培养。通过茎尖离体培养培育脱毒基础苗，再通过建立合理的良种繁育体系生产优良种薯是马铃薯高产、稳产、优质的可靠保证。 一脱毒种薯繁育工艺流程 马铃薯脱毒种薯繁育工艺流程如图所示。 二脱毒技术
2.1 脱毒方法 2.1.1 外植体选择及处理 外植体的选择途径一般有3条：①在生长季节从田间挖取植株种植在无菌的盆土中，温室内栽培，取其新长成枝条的芽；②从田间切取枝条，插入营养液中生长，取新抽生枝条上的芽；③块茎在室内发芽，芽经热处理(38℃)2周后再取芽。另外，定期给植株喷施内吸杀菌剂，如0.1％多菌灵和0.1％链霉素的混合液，可以有效提高灭菌效果。经过上述处理之后，要比直接取自田间枝条污染少得多。再加上茎尖分生组织又被彼此重叠的叶原基保护．只要仔细剥取，无须再进行消毒，就能得到无菌的外植体。但为保险起见，在切取外植体之前，可以先进行简单的表面消毒，一般在5％次氯酸钠中处理8～10min即可。虽然顶芽和腋芽都能作为外植体，但顶芽的茎尖生长要比腋芽的快，成活率也高，所以一般取顶芽作为外植体。 2.1.2 剥离茎尖和接种 在超净台上的解剖镜(8～40倍)下进行茎尖剥离。解剖时必须注意使茎尖暴露的时间越短越好．以免超净台的气流风干茎尖。在材料下垫上一块湿润的无菌滤纸也可达到保持茎尖新鲜的目的。在解剖镜下用解剖针将叶片和叶原基剥掉，直到露出圆亮的茎尖生长点。将带有l～2个叶原基的茎尖切下．接种到培养基上。要注意防止交叉污染，尤其是当芽未曾进行过表面灭菌时更要谨慎。 2.1.3 培养 对马铃薯茎尖培养来说，MS和white基本培养基都是较好的培养基，而且附加少量(0.1～0.5 mg／L)的NAA或BA或二者都加，培养效果更好。只有生长点的
浅析植物离体快繁中常见的问1
目录 绪论 (1) 1. 离体快繁过程中的问题、原因及防治措施 (1) 1.1 污染问题 (2) 1.1.1 污染的来源 (2) 2.1.2 污染的防治措施 (2) 1.2 褐变问题 (3) 1.2.1 褐变的原因 (4) 1.2.2 克服外植体褐变的措施 (4) 1.3 玻璃化问题 (4) 1.3.1 玻璃化发生的原因 (4) 1.3.2控制组培苗玻璃化的措施 (5) 1.4 遗传稳定性 (5) 1.4.1 影响遗传稳定性的因素 (6) 1.4.2 提高遗传稳定性，减少变异的措施 (5) 1.5 黄化问题 (5) 1.5.1 黄化原因 (6) 2. 离体快繁的前景与探讨 (6) 2.2适应现状的需求 (6) 2.3存在问题 (6) 参考文献 (6) 致谢 (6)
浅析植物离体快繁中常见的问题 摘要 植物组织培养是20世纪初发展起来的一项新技术，是现代农业生物技术的一个重要组成部分，已经日益广泛地应用于园艺植物的脱毒和快繁等方面。本文针对植物组织培养中常出现的问题进行了分析，探讨了污染、褐变、玻璃化、遗传稳定性、黄化等发生的可能原因，并提出了相应的防治措施。 关键词 离体快繁；污染；褐变；玻璃化；遗传稳定性；黄化 Analysis of the Common Problems in Plant Vitro Propagation Pick to Plant tissue culture is developed in the early 20th century, a new technology of modern agricultural biotechnology, is one of the important constituent, has increasingly widely applied in the enviroment of horticultural plants and rapid propagation, etc. Aiming at the plant tissue culture often appears the question were analyzed, pollution, Browning, vitrification, genetic stability, such as possible reasons Browning, and puts forward the corresponding prevention cuo Key words Propagation in vitro; contamination; browning; vitrification; genetic stability; etiolation
马铃薯脱毒快繁技术研究与应用
马铃薯脱毒快繁技术研究与应用 该项研究主要目的解决病毒性退化对洛阳市马铃薯生产所造成的严重产量损失及常年从外地调种所造成的人力、物力巨大浪费,建立豫西地区脱毒马铃薯种薯繁种体系,进行当地繁种,结合间作套种模式,在生产上大面积应用,实现马铃薯生产的高产高效益。该项研究的技术关键是:茎尖分生组织培养成苗、病毒检测、脱毒试管苗及微型种薯快速高效低成本生产等。 该项研究的技术创新点是:针对豫西的生态条件,在豫西洛阳马铃薯主要病毒类型调查的基础上,研究了马铃薯茎尖分生组织培养成苗及快繁技术,并对常规马铃薯脱毒技术进行了低成本生产技术研究和程序简化研究,在国内首次采用培养基中加入适量的氯溴异氰尿酸,可以取代高压灭菌过程。建立了“二年三季”豫西脱毒马铃薯良种繁育体系,进行当地快繁,供应生产应用。 通过三年的工作取得如下进展:1、明确了豫西马铃薯生产上主要病毒类型及各种病毒的发生频次。经过对样本进行病毒检测,结果表明植株带毒率为54.95%,五种马铃薯病毒发生频率为:PVX24.18%、PVY23.67%、PVS12.09%、PVM4.4%、PLRV9.9%。 在带病毒植株中,一种病毒单独侵染的为68%,两种以上病毒复合侵染的占32%。2、进行了马铃薯茎尖分生组织培养成苗及快速扩繁的技术研究,对马铃薯脱毒种苗、种薯生产中的低成本技术及简化程序进行了研究与应用。 茎尖取材最好用顶芽,切取茎尖大小0.2-0.3CM为宜。合适的培养基是 MS+0.1GA3+6-BA0.5+0.05NAA,温度25℃,光照16h/d,光强1000LX。 生长培养基采用基本MS培养基,温度25℃,光照16h/d,光强2000LX。在试管苗的生产中,采用罐头瓶、固体培养基、在配制培养基时用普通食用白糖替代
《植物组织培养技术》植物脱毒与快繁
《植物组织培养技术》植物脱毒与快繁 模块介绍 本模块针对组培研发岗位的工作职责与任职要求，编排了试验方案设计和数据调查与分析二个实训项目，主要内容包括组培的基本理论、提高组培苗遗传稳定性的措施、组培试验方案的制订等，重点阐述了组培快繁的程序与类型、组培研究的技术路线与试验设计方法、组培快繁的常见问题、组培数据调查与分析方法等。在理论学习的同时，开展项目实践活动，培养学生会设计组培试验、撰写试验方案、编制组培试验观察表和技术指标统计分析，具备组培研发工所要求的理论知识、技能水平和相应的职业素质。模块结构设计见表1。 表1 模块结构设计 项目1 蔬菜组培与快繁/马铃薯脱毒与快繁 一、学习目标
（一）终极目标 掌握植物脱毒与鉴定技术，培育马铃薯等蔬菜脱毒、快繁与脱毒苗的鉴定技术。（二）促成目标 1.熟悉植物脱毒的意义、原理与方法，能够运用脱毒技术培育马铃薯等蔬菜脱毒苗； 2.掌握脱毒苗鉴定技术，清楚马铃薯等蔬菜脱毒苗鉴定方法； 3.清楚马铃薯等蔬菜脱毒苗的保存与无病毒苗繁育体系、方法； 4.提高操作水平和分析解决问题能力，培养团队精神、敬业精神、责任意识。 二、学习内容 1．蔬菜组织培养概况； 2.马铃薯组培概况； 3.马铃薯脱毒种薯繁育流程； 4.脱毒苗的优势(含病毒的种类、传染途径、表现症状与危害)； 5.植物脱毒技术； 6.脱毒苗鉴定技术； 7.马铃薯脱毒苗培育与鉴定； 8.马铃薯脱毒苗快繁与微型薯诱导； 9.马铃薯等蔬菜脱毒苗的保存与繁殖； 10.甘薯脱毒与快繁技术要点（拓展）； 11.大蒜脱毒与快繁技术要点（拓展）； 12.紫背天葵组培与快繁技术（拓展）； 13.结球甘蓝组培与快繁技术（拓展）。 三、知识点 1.蔬菜组织培养概况； 2.马铃薯组培概况； 3.马铃薯脱毒种薯繁育流程； 4.脱毒苗的含义、实质与培育优势(含病毒的种类、传染途径、表现症状与危害)； 5.植物脱毒技术（热处理、微茎尖培养、其它脱毒方法）； 6.脱毒苗鉴定技术（指示植物法、嫁接法等）； 7.马铃薯脱毒苗培育与鉴定； 8.马铃薯脱毒苗快繁与微型薯诱导（实验室诱导、温室生产）。 四、技能点
金线莲生长在什么地方
金线莲生长在什么地方？ 金线莲是极稀有的野生山珍极品，别称金丝线、金耳环、鸟人参等，为兰科开唇兰属多年生草本植物，全草入药有清热凉血、祛风利湿、解毒止痛等功效，在民间传说种能治百病，素有“药王”美称，下面我们就一起来看一看金线莲生长在什么地方吧！
金线莲生长在什么地方？ 金线莲分布于我国福建、台湾、广东、广西、海南、四川、贵州、云南、湖北等地，性喜阴凉、潮湿，尤其喜欢生长在有常绿阔叶树木的沟边、石壁、土质松散的潮湿地带，对环境条件非常苛刻，只能生长在人迹罕至处于原始生态的深山老林内，需要特殊的大自然循环气候、阳光雨露的巧妙结合才能生长。
金线莲种植要什么条件？ 1、温度：金线莲对温度的适应性较强，生长适宜温度20～32℃，在大棚覆盖下连续30天的0～5℃的低温对金线莲还无明显伤害，15天34度以上日温容易造成金线莲叶子卷伤、品质受损。 2、水分：金线莲自然分布于湿度大的森林环境之中及一些溪涧附近，水分是影响金线莲存活的最主要因子，但能在气候干燥、土壤缺水的环境下生存，人工栽培相对湿度在70%以上。 3、光照：金线莲属喜阴植物，其光合作用的光饱和点低，适宜光照度为3000勒克斯左右，自然条件下上层乔木郁闭度7%～80%、下层植被覆盖度40%左右。 4、土壤：金线莲宜在偏酸性土壤条件下生根，土壤要求疏松、透气、湿润，在自然条件下腐殖土、黄壤、红壤类型的土壤都有分布，小规模种植推荐用泥炭土和珍珠岩。
金线莲种植能赚钱吗？ 1、林下种植：金线莲林下种植是利用天然林下环境条件，根据金线莲的生长要求选择在交通相对便利、林木茂密土壤肥沃的山林、缓坡发展种植。 ①投资成本：每亩可栽种金线莲约5～6万棵，每棵苗成本3～5毛，种苗总成本约3万元，人工、遮阳网、围栏、浇灌设备等投入约15000元。 ②种植利润：每棵以3～4克计，总共约200千克，每千克按300元计，收入约6万元。种植成本投入约4.5万，收入6万，每亩利润约1.5万元。 2、简易大棚：金线莲简易大棚种植是根据金线莲适生环境，选择在无工业污染、有天然洁净水源、方便喷灌且靠山边阴面处建立生产基地。 ①投资成本：每亩可栽种金线莲苗约15～20万棵，每棵苗成本3～5毛，种苗总成本约7～9万元，人工、大棚、浇灌设备等投入5～7万元。 ②种植利润：每棵苗以3～4克计，总共约700千克，每千克按300元计，收入约21万元。种植成本投入约15万，收入21万，每亩利润约6万元。 3、高产大棚：金线莲正规高产大棚是目前较大型金线莲种植企业采用的方式，可控温、控湿、通风，土地面积利用率可达200％。
金线莲属多年生草本植物
叶圆盾形，根茎较细，叶柄细长，棕褐色，可攀援。不耐寒，喜温暖湿润，越冬温度10℃以上。花生于叶腋，有黄、红、赭、乳白等色，不整齐。呈皱缩卷曲，不规则状的干燥全草，根茎圆柱形，多弯曲，长1-5cm，表面棕褐色，茎节明显，有金黄色网状脉，下部集生2-4片叶，叶互生，多卷缩而完整，展开为宽卵形，表面黑棕色，下面暗红色，部分叶脉紫红色，主脉3~7条，叶柄基部鞘状抱茎，偶见总状花序顶生，花暗棕色，少见蒴果矩圆形，香气特异，味淡。 3物种分布 福建、台湾、广东、广西、海南、四川、贵州、云南等亚热带及热带。 产地证明：福建明溪：2013年成为全省最好的纯正野生金线莲以及研发养殖基地；被中华人民共和国农业部确定为地理标志保护产品。“明溪金线莲”划定的产地保护范围：明溪县雪峰镇、瀚仙镇、胡坊镇、盖洋镇、夏阳乡、沙溪乡、夏坊乡、枫溪乡、城关乡9个乡镇的56个行政村及自然村。地理坐标为东经116°47′00″～117°35′00″，北纬26°08′00″～26°39′00″。 福建武平：2010年3月“武平金线莲”正式被国家工商总局核准注册地理标志证明商标。 福建永安：2010年2月8日被中国经济林协会授予中国金线莲之乡。 福建南靖：2011年12月30日经中国特产之乡推荐暨宣传活动组织委员会评审，确定南靖县为“中国金线莲之乡”。 福建清流县：2012年12月13日被中国经济林协会授予中国金线莲之乡。 福建石牛山：2012年建立野生天然金线莲培育基地。 4生长习性 金线莲性喜阴凉、潮湿，尤其喜欢生长在有常绿阔叶树木的沟边、石壁、土质松散的潮湿地带，要求温度20℃～32℃，光照约为正常日照的1/3，最忌阳光直射。 5价值应用 成分 金线莲的化学成分与含量确切，具有重要药理活性的物质主要为：黄酮类化合物（槲皮素、异鼠李素)，甾体类化合物（24～异丙烯基胆甾醇、开唇兰甾醇、麦角甾醇、豆甾醇、菜油甾醇、β-谷甾醇等），三萜类化合物（木栓酮、琥珀酸、香豆酸、阿魏酸、胡萝卜苷、棕榈酸、齐墩果酸、熊果酸），糖类成分（多糖13.326%，低聚糖11.243%，还原糖9.73%），生物碱（石杉碱甲和乌头碱），和强心甙类，酯类，牛磺酸等，强心甙类，多种氨基酸，微量元素及无机元素等。
离体快繁
第三章植物离体快速无性繁殖技术和脱毒培养技术 第一节、植物离体快速繁殖技术 一、植物离体快速无性繁殖的概念及其意义 1 概念 离体无性繁殖：指利用组织培养的方法进行植物离体培养，在短时间内获得大量遗传性一致的个体的方法，又称“离体繁殖，快速无性繁殖、微型繁殖”。 试管苗：由离体无性繁殖获得的植株称试管苗。 无性系：指有同一个体通过无性繁殖产生的一个群体，它们的遗传背景基本一致。 2 应用 （1）用来加速难繁殖和繁殖速度慢的植物的繁殖。 （2）无病毒苗木的繁殖。 （3）用于某些杂合园艺植物的繁殖。 （4）用于需要加速繁殖的特殊基因型。 二、植物离体快速无性繁殖的特点 1 优点 （1）首先体现在一个“快”字上。 （2）可人为控制条件，不受大自然的干扰 （3）快速培养脱毒苗。 2局限性 （1）一些植物快速无性繁殖技术的某些环节还没有突破。 （2）要对其成本、技术等进行估算。 （3）随继代次数增多，培养材料的分化能力下降。 三、离体无性繁殖中器官的发生形式 1 不定芽型 ２器官型 ３器官发生型 ４类胚体发生型 ５原球茎型 四、离体无性繁殖的程序 ?无菌母株的制备 ?茎芽的增殖 ?诱导生根 ?炼苗 ?再生植株的鉴定 五、植物组织培养中应注意的问题 １褐变 （１）褐变
褐变：指在组织培养过程中，由培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。 （２）克服褐变的方法 选择适宜的外植体（幼嫩材料、春季取材） 改善营养条件（连续培养） 在培养基中加入一些附加物 ２污染 （１）特点： 细菌污染的特点 在培养材料附近出现黏液状菌斑，一般接种1-2天一5可发现。特别应注意一种呈乳白色的细菌污染，这种细菌为芽孢杆菌，外被荚膜，耐高温，一般灭菌剂难以杀死，可随培养材料、用具传播，可出现在培养基表面，也可呈滴形云雾状存在于培养基内，发现及时淘汰，并对用过的器具严格高温灭菌。 真菌污染的特点 培养基上长霉，一般接种3-5天就可先，霉的颜色有黑、白、黄等，真菌污染的特点是污染部分有不同颜色的霉菌，接种3天，有时多达10天才能表现。 （２）克服方法： ?外植体灭菌不彻底 ?培养基及各种器具清洁灭菌不彻底 ?人为因素 ?超净工作区被污染 ?环境不清洁 ３玻璃化 （１）玻璃化 玻璃化：是试管苗的一种生理失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的茎、叶往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。 （２）克服方法 ?增加固体琼脂浓度，使细胞吸水受到阻碍。 ?提高培养基中的Ｃ、Ｎ比。 ?控制温度，增加自然光照。 ?附加一些物质 第二节、植物的脱毒技术 一、病毒的特性及其侵染 １病毒的特性 ２植物病毒的侵染途径 ３病毒在植物体内分布不均匀的原因 （１）分生组织中无微管系统，病毒不易移动。 （２）在旺盛分裂的分生细胞中，代谢活性很强，有竞争状态，抑制了病毒的复制。（３）在分生组织中存在高水平的内源激素，可以抑制病毒的增殖。 二、脱毒的方法 １物理方法
植物组织培养脱毒快繁技术在马铃薯育种中的应用
植物组织培养脱毒快繁技术在马铃薯育种中的应用 摘要：脱除病毒是植物组织培养深入探讨研究中的一个技术难题。本文简要介绍植物组织培养的基本原理和方法，综述植物脱除病毒的热处理、茎尖培养和抗病毒药剂三种方法的原理和技术方法，介绍了几种常用的病毒检测方法。本文以马铃薯为例，重点介绍了利用热处理加茎尖组织培养法获得马铃薯脱毒苗的具体技术方法，脱毒率可达100%。同时还对植物组织培养脱毒快繁技术的应用前景作了分析。 关键词：茎尖培养，脱毒快繁技术，病毒检测，应用前景. 1．脱毒技术及其原理 植物组织培养脱毒快繁是人工在无菌条件下利用植物体的一部分，在人工控制的营养和环境条件下繁殖植物，脱除病毒得到无毒苗株，继而在大田快速繁殖的技术。脱毒及离体快繁，是目前植物组织培养应用最多、最广泛和是有效的一个方面。现在植物的脱毒技术有多种，其中应用最广泛的有三种：热处理法、茎尖培养脱毒法、抗病毒药剂法，将不同的方法相结合起来应用效果更好。 1.1 热处理法 1.1.1 概述 热处理法是利用病毒和寄主植物对高温的忍耐性的差异，使植物的生长速度超过病毒的扩散速度，得到一小部分不含病毒的植物分生组织，然后进行无毒个体培育。 热处理可通过热水浸泡或湿热空气进行。热水浸泡对休眠芽效果较好，湿热空气对活跃生长的茎尖效果较好，既能消除病毒又能使寄主植物有较高的存活机会。热空气处理比较容易进行，把旺盛生长的植物移入到1个热疗室中，在35~40℃下处理一段时间即可，处理时间的长短，可由几分钟到数月不等[3] 。热处理的方法有恒温处理和变温处理，处理的材料可以是植株，也可以是接穗。 1.12原理 热处理脱毒是根据病毒与寄生细胞对高温的忍耐程度不同，选择适当的温度和处理时间，植物组织中的很多病毒被部分地或完全地钝化而可控制其的活动，但很少伤害甚至不伤害寄主组织，从而让植物细胞加快生长，使生长点附近不带病毒，从而达到脱毒的目的。 1.2 茎尖培养脱毒法 1.2.1 概述 茎尖培养脱毒就是采取茎尖分生组织离体培养的方法获取无病毒试管苗，其方法是在解剖镜下，用解剖刀进行迅速准确地茎尖剥离，因为茎尖分生组织基本不带病毒，利用植物茎尖分生组织进行离体培养，再结合病毒检测，就可以获得无病毒的植株。 茎尖培养脱毒法脱毒率高，脱毒速度快，能在较短的时间内得到较多的原种繁殖材料，但这种方法存在的缺点是植物的存活率低。为了克服这一缺点，现在经常是将茎尖培养与热处理相结合来使用。茎尖培养与热处理相结合之所以能够提高脱毒效果，是由于热处理可使植物生长本身所具有的顶端免疫区得以扩大，有利于切取较大的茎尖（1mm左右），从而能够提高培养或嫁接的成活率。 1.2.2 原理 茎尖培养脱毒的原理是植物体内病毒靠维管束系统移动，分生组织中没有维管束存在，病毒只靠胞间连丝移动，速度很慢，难以追上生长活跃的分生组织，所以旺盛生长的根尖、茎尖一般都无病毒或很少有病毒分布。 据研究，植物体内某一部分组织器官不带病毒的原因是：分生组织的细胞生长速度快，病毒在植物体内繁殖的速度相对较慢，而且病毒的传播是靠筛管组织进行转移或通过细胞间连丝传递给其他细胞，因此病毒的传递扩散也受到一定限制，这样便造成植物体的部分组织细胞没
金线莲大棚栽培技术
金线莲大棚栽培技术 金线莲别名金线兰、金丝草，为兰科开唇植物花叶兰属多年生珍稀中草药。它在民间使用范围较广，素有“药王”、“金草”、“神药”、“乌人参”等美称。 金线莲别名金线兰、金丝草，为兰科开唇植物花叶兰属多年生珍稀中草药。它在民间使用范围较广，素有“药王”、“金草”、“神药”、“乌人参”等美称。经有关部门测定发现，金丝莲中氨基酸组成、成分、含量及抗衰老活性微量元素的含量均高于国产和野生西洋参。目前，我国对金线莲的药用研究仅涉及文献考证、栽培、组培及商品调查等。 金线莲全草均可入药，其味平、甘，有清热凉血、祛风利湿、解毒、止痛、镇咳等功效，主治咯血、支气管炎、肾炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、风湿性关节炎肿瘤等疑难病症。 金线莲属植物有30多种，一般分布在海拔300～1200米的丘陵地；我国福建、广东、广西、海南、四川、贵州、云南均有野生金丝莲。它性喜阴凉、潮湿，尤其喜欢生长在有常绿阔叶树木的沟边、石壁、土质松散的潮湿地带，要求温度18～20℃，光照约为正常日照的1／3，最忌阳光直射。其株高8～20厘米，根茎细软，茎圆筒形，先端直立，基部成匍匐状，茎节明显；叶互生具柄，呈椭圆形，叶面有光泽、墨绿色中有金黄脉网，叶背淡紫红色；花为完全花，总状花序具有1～6朵松散的花，花序梗长8～13厘米，被柔毛，花苞片淡紫色，卵状披针形。金线莲除药用外，还是一种极具观赏价值的室内观叶珍品。由于其对生态环境要求严格，加之近年自然环境遭受严重
破坏，野生金线莲越来越少，因而商品价格居高不下，鲜草公斤价达150元以上，干草公斤价达1200～1700元。因此，国内有关单位经过研究实践，目前人工栽培技术已进入推广阶段。 人工栽培金线莲主要是采用大棚栽培。建造大棚应根据金线莲的生长要求，选择在有林有水的山沟，以保证阴凉，有水灌溉，冬季避风保暖，减少散热，保持湿度，且交通便利。大棚的透光度在40％～50％，大棚结构以北高南低的斜面为宜，棚前柱高1.5米，后柱高1.2米，柱距2～5米，顶铺约5厘米厚的茅草，上盖一层塑料薄膜，棚内畦高30～50厘米，畦宽1.2米。也可在棚内搭棚梁，进行立体种植，人工组培苗常年均可栽植，每平方米500～1000株，栽植宜浅忌深，栽后覆盖干净干燥的苔藓，喷洒清水，棚内温度不超过25℃，并注意保湿、保温。云南省和广东均可供应大面积生产所需的组培苗。 田间管理的好坏，关系到金线莲的成活率和生长及产量，应着重做好： 1、松土除草。 2、施肥。栽植后的生长阶段，通常施用豆饼、猪粪、牛马粪等农家肥，并在每100公斤肥液中加少量的硫酸亚铁，以促进叶色浓绿而富有光泽。在生长季节，每隔半个月还可用0.3％尿素加0.2％磷酸二氢钾溶液喷一次，连喷4次。施肥时切忌污染金线莲叶片，不慎污染，应立即喷清水。 3、适时浇水，提高土壤、空气湿度。 4、搭盖遮阴棚，调节透光度。棚内透光度的大小与生长发育密
第五章 茎尖培养与快速繁殖
第五章茎尖培养与快速繁殖 第一节茎尖培养脱毒技术 一、培育无病毒苗的意义 植物病毒病：由病毒和类病毒、支原体等引起，已发现此类病害700多种，无性繁殖植物严重；无特效药，培育无毒种苗是主要防治措施。 获得无病毒种苗的途径： 1）从现有种质中筛选无毒单株； 2）已感染植株脱毒。 二、植物脱毒的方法 1. 热处理：病原物与植物耐热性不同，将植物在较高温度下处理一段时间，病原物钝化、失活或不能繁殖，而植物所受影响较小、生长较快，使病毒减少甚至消灭。 方法： 1) 温汤浸渍：50℃温水中浸10分钟~数小时，简便易行，适用于休眠器官、接穗或种子。 2) 热空气处理：在温热治疗室/箱内，35~40℃，几十分钟~数月。对茎尖效果较好，热处理后取较大茎尖培养，可提高成活率与脱毒率。 注意：易受伤，掌握温度与时间。 2. 茎尖培养脱毒 3. 其他途径脱毒 3.1 愈伤组织培养脱毒：花器官、珠心胚等愈伤中存在无病毒细胞群，从再生植株可得到无病毒苗。 3.2 茎尖微体嫁接脱毒：在无菌条件下，将切取的茎尖嫁接到培养的砧(zhen)木苗上。 3.3 抗病毒剂的应用： 抗病毒醚: 可抑制病毒复制和扩散， 嘌呤和嘧啶类似物; 抗菌素
三、茎尖培养脱毒技术 1、原理 病毒在植物体内分布不均匀，茎尖等生长点因为无维管束，病毒只能通过胞间连丝传递，赶不上细胞分裂和生长的速度，所以茎尖几乎不含病毒。 茎尖培养脱毒效果好，后代稳定，目前广泛应用。 2、脱毒技术 2.1 操作 取无菌顶稍1~2 cm→解剖镜(8—40倍)下→剥去幼叶→切取茎尖0.2～0.5 mm、带1~2个叶原基→接种。 注意：随切随接，防止变干；茎尖小较好，但太小不易成活，过大又不能保证完全脱毒。 草莓：茎尖0.2~0.3mm，脱毒率100%；1mm，脱毒率50%。 2.2 培养基 基本培养基: MS、White、B5等。 碳源: 蔗糖效果好，可用白砂糖 激素：2,4-D、IAA、NAA等，通常低浓度。 2.3 继代培养 初代培养长成的新梢→切成小段→增殖培养基→1个月左右→新梢又可扩繁→→建立和维持茎尖无性系。 继代培养常用MS培养基。 2.4 生根与移栽 常用生根方法： 用1/2、1/3、1/4MS或White培养基，附加NAA、IAA、IBA等，最好加活性炭(0.3％)。 或者： 将新梢基部浸入50~100mg/L的IBA中4-8h，然后转入无激素培养基中生根。移栽：同前。 3、脱毒苗的鉴定 3.1 酶联免疫法（ELISA）
生姜脱毒和组培快繁及栽培技术的研究
生姜脱毒和组培快繁及栽培技术的研究生姜属姜科姜属多年生宿根植物，营养丰富是药、食、加工等多用途经济作物，是我国重要的外贸产品。生产上生姜只能靠少数品种长期无性繁殖，易感染多种病毒，使姜体内积累多种病毒，从而导致生姜产量下降、品质降低，种性退化，—般减30% ~ 50%，严重制约了生姜的生产发展。国内外目前尚无高抗病毒的生姜品种和高效杀病毒药剂，因此采用茎尖组织培养脱毒生姜苗，成为防治病毒，高生姜产量和品质的首选方法。 本研究旨在通过热处理和茎尖培养相结合的方法，以优质姜种为材料，通过热处理法催芽、表面消毒、茎尖分生组织剥取、无菌苗诱导培养、增殖诱导培养、生根诱导等一系列实验操作及培养基配方优化，并在每个不同的培养阶段进行检测，建立脱毒良种繁育体系的工艺流程，有效去除引起生姜种性退化的烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)两种主要病毒。该项研究为脱毒姜种的快速繁殖提供了技术保障，为生产应用提供了技术支撑。 1 生姜的脱毒处理 精选块大、肉厚、皮色黄亮和无病虫害的健壮姜块，在自来水下洗掉泥巴，再用少量洗衣粉浸泡10min，用毛笔轻轻刷洗种姜表面,用自来水冲洗2h，沥干水分。在38℃恒温培养箱进行热处理4周，使病毒饨化失活，同时可诱导出不定芽，待长出2 ~ 5cm左右的芽后再进行茎尖脱毒。将长出新芽切下，用流水冲洗干净，置超净工作台上，用75%酒精处理30秒，再用0.1%升汞消毒数分钟，无菌水冲洗
6 ~ 8次后，在40倍体式显微镜下剥取0.2 ~ 0.3毫米茎尖分生组织，接种于诱导培养基上。待成苗后应用血清学鉴定, 获得脱毒苗。 2 脱毒苗的培养 以MS为基础培养基，以MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L为茎尖诱导分化培养基；以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L为生姜最适继代培养基；以MS+NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L为生根培养基。所配制的培养基中，糖浓度为3%，脂为0.7%，pH值为5.8。 诱导培养时，，先进行7天暗培养，再进行光培养。温度与光照条件要求与生姜生长期的光温条件相符，可控制在（25±2）℃，光照强度为3000 ~ 4000Lux，光照时间为14 ~ 16个小时。 3 组培苗的驯化及移栽 待培养瓶里的生姜苗具有3 ~ 4片叶，5 ~ 6条根，根长至2 ~ 4cm 时即可移栽。第1 d 在培养室里打开瓶盖(即半开半盖)，第2d把瓶盖揭掉，并在培养瓶中放人少许水，以防止组培苗的失水及培养基的污染，第3d移出培养室，放在室温中，以逐渐适应室外温度。移栽前应洗净附着在组培苗根部的培养基, 以免招致细菌繁殖, 导致组培苗感染腐烂死亡, 冲洗时谨防伤根,以确保移植成活。以蛭石+泥炭为移栽基质, 移栽后每天喷雾保湿, 栽后3d棚内相对湿度保持在85% ~ 90%, 1个月后就可考查移栽成活率。田间肥水管理与普通生姜相同，11月可收获姜种。
金线莲产业的趋势与前景
金线莲产业的发展趋势与前景 第一节 金线莲其物、其名及其中医作用描述 1、金线莲简介 金线莲( Anoectochilus Formosanus Hayata)别名金线兰、金丝线、金耳环、乌人参、金线虎头蕉、金线入骨消、金钱草、金线石松、金石蚕、少年红、小叶金耳环、麻叶菜。别名繁多，均与金相关，在闽北山区还有称之为“金不换”等，由此可见它的珍贵。 这些名字均来自其叶片特征，常见的福建金线莲叶面墨紫色，有金黄色网状脉，背面暗红色；台湾金线莲则页面为墨绿，页面网状脉偏白。记载中称金线莲味甘，性凉，治百病，有"药王"、"金草"、"神药"的美称。 2、金线莲的药用及保健价值 中医药中称，金线莲“清热凉血，除湿解毒，平衡阴阳、扶正固本，阴阳互补、生津养颜、调和气血、五脏、养寿延年的功用”；“入肾、心、肺三经”。 自古中医总结金线莲用于治疗肺热咳嗽，肺结核咯血，尿血，小儿惊风，破伤风，肾炎水肿，风湿痹痛，跌打损伤，毒蛇咬伤、支气管炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、急慢性肝炎、风湿性关节炎肿瘤等疑难病症。 健康人服用之后有提高免疫力，增强人体对疾病的抵抗力，提高人体耐受力等，被福建台湾地区土著民所器重，用于滋补、强身健体。 3、野生金线莲的分布 金线莲是兰科开唇兰属植物，有30多种，分布在海拔300m－1200m的丘陵地带。主要产于我国福建、广东、广西，海南、四川、贵州、云南也有野生金线莲的分布。 4、金线莲的名利争夺 福建是野生金线莲分布最广的一个省份，其利用历史也最为悠久，对于金线莲的名利争夺最为激烈。其中，2010年初，福建永安市被评定为“中国金线莲之乡”；2010年5月，“武平金线莲”被核准注册地理标志证明商标。下一步会有更激烈的竞争。