化妆品微生物检验方法
一、总则
1、范围
本规范规定了化妆品微生物检验得基本要求.
本规范适用于化妆品样品得采集、保存及供检样品制备。
2、仪器与设备
2、１天平。
2、2 高压灭菌器。
2、３振荡器。
２、4三角瓶,２５０mL。
2、５玻璃珠。
２、6 琉璃棒。
2、7刻度吸管，１ｍL、10mＬ.
2、8 研钵或均质器。
2、９恒温水浴箱.
３、培养基与试剂
3、1 生理盐水
成分：
氯化钠8、5g
蒸馏水加至100０ｍL
溶解后,分装到加玻璃珠得三角瓶内，每瓶90 mL,1０3、43kPａ（121℃1５lb）2０min高压灭菌。
３、２SCDLP液体培养基
成分：
酪蛋白胨17g
大豆蛋白胨3g
氯化钠5g
磷酸氢二钾2、５g
葡萄糖1g
吐温80 ７g
蒸馏水１000ｍL
制法:先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后,再与其它成分混合,加热溶解，调pH为7、2~７、3分装，103、４３ｋPａ（1２１℃15lb)2０ｍｉn高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层得吐温80充分混合,冷却至２5℃左右使用.
注：如无酪蛋白胨与大豆蛋白胨,也可用多胨代替。
3、３灭菌液体石蜡。
3、4 灭菌吐温80。
4、样品得采集及注意事项
4、１所采集得样品，应具有代表性,一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量得包装单位.检验时，应分别从两个包装单位以上得样品中共取１0g或10mL。包装量小于20g得样品，采样量可适当增加样品包装数量。
4、2 供检验样品，应严格保持原有得包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得打开,防止样品被污染。
４、3 接到样品后,应立即登记,编写检验序号,并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处,不要冷藏或冷冻。
4、4 若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等,则宜先取出部分样品做细菌检验，再将剩余样品做其它分析。
4、5 在检验过程中，从打开包装到全部检验操作结束,均须防止微生物得再污染与扩散,所用器皿及材料均应
事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行，或在相应条件下，按无菌操作规定进行。
４、6 如检出粪大肠菌群或其它致病菌，自报告发出之日起该菌种及被检样品应保存一个月。
5、供检样品得制备
5、1 液体样品
５、1、1 水溶性得液体样品,可量取10ｍL加到90mL灭菌生理盐水中，如样品少于10mL,仍按10倍稀释法进行.如为5mＬ则加到45mL灭菌生理盐水中,混匀后制成1:10检液。
5、1、2 油性液体样品,取样品1０mL,先加5mL灭菌液体石蜡混匀,再加1０mL灭菌得吐温8０,在40℃~4４℃水浴中充分混合，制成１：10检液。
5、3 固体样品
称取10g,加到９０ｍL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀，使其分散混悬，静置后,取上清液作为1：１0得检液。
如有均质器，上述水溶性膏、霜、粉剂等，可称10g样品加入90ｍL灭菌生理盐水，均质1ｍin～2mｉn；疏水性膏、霜及眉笔、口红等，称1０g样品，加入１0mL灭菌液体石蜡,10mL吐温80，70mＬ灭菌生理盐水,均质3min~5min。
二、菌落总数
1、范围
本规范规定了化妆品中菌落总数得检验方法。
本规范适用于化妆品菌落总数得测定.
2、定义
本规范采用下列定义
菌落总数（Ａerobiｃ bacterｉａｌcounｔ）就是指化妆品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培养基成分、培养温度、培养时间、pＨ值、需氧性质等），1g（1mL)检样中所含菌落得总数。所得结果只包括一群本方法规定得条件下生长得嗜中温得需氧性菌落总数。
测定菌落总数便于判明样品被细菌污染得程度，就是对样品进行卫生总评价得综合依据。
3、仪器与设备
3、1 三角瓶,250mＬ。
3、2 量筒，２00mL。
3、3 pH计或精密pH试纸。
３、4 高压灭菌器.
3、5 试管：15×150ｍｍ。
3、６灭菌平皿:直径9cm。
3、7 灭菌刻度吸管，1０mＬ、1mＬ。
３、8 酒精灯.
3、９恒温培养箱：36℃±1℃。
3、10 放大镜.
4、培养基与试剂
4、１生理盐水:见总则中3、１.
4、2 卵磷脂、吐温80－营养琼脂培养基
4、2、１
成分:
蛋白胨20g
牛肉膏 3g
氯化钠５g
琼脂１５g
卵磷脂１g
吐温80 7g
蒸馏水 1000ｍＬ
４、2、2 制法:先将卵磷脂加到少量蒸馏水中,加热溶解,加入吐温80,将其她成分（除琼脂外)加到其余得蒸馏水中，溶解。加入已溶解得卵磷脂、吐温８0,混匀,调pH值为7、1~7、4，加入琼脂，１03、４3kPa （１21℃15 lb）20ｍin高压灭菌,储存于冷暗处备用。
４、３0、5％氯化三苯四氮唑(2，3，５-tｒiphenyｌteｒazｏｌiｕm cｈｌoｒide,TTＣ）
成分:
TＴC 0、5ｇ
蒸馏水１０0０ｍL
溶解后过滤,１0３、43kＰa（１２1℃15 lb）2０min高压灭菌，装于棕色试剂瓶，置4℃冰箱备用。
５、操作步骤
5、1 用灭菌吸管吸取1:１0稀释得检液2mＬ，分别注入到两个灭菌平皿内,每皿1mＬ。另取1ｍL注入到9m Ｌ灭菌生理盐水试管中(注意勿使吸管接触液面)，更换一支吸管，并充分混匀，制成1：10０检液。吸取２mL，分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1ｍL。如样品含菌量高，还可再稀释成1：10００，1:10０0０，……等,每种稀释度应更换1支吸管.
５、2 将融化并冷至45℃~50℃得卵磷脂吐温80营养琼脂培养基倾注到平皿内，每皿约15 mL，随即转动平皿，使样品与培养基充分混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平皿,置36℃±1℃培养箱内培养４8h±2h。另取一个不加样品得灭菌空平皿,加入约15mL卵磷脂吐温８0营养琼脂培养基,待琼脂凝固后，翻转平皿,置3６℃±１℃培养箱内培养4８h ±2ｈ，为空白对照.
5、３为便于区别化妆品中得颗粒与菌落，可在每10０ｍL卵磷脂吐温8０营养琼脂中加入1mL ０、５%得T ＴC溶液，如有细菌存在,培养后菌落呈红色，而化妆品得颗粒颜色无变化。
6.菌落计数方法
先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5倍～10倍得放大镜检查，以防遗漏.记下各平皿得菌落数后，求出同一个稀释度各平皿生长得平均菌落数。若平皿中有连成片状得菌落或花点样菌落蔓延生长时,该平皿不宜计数。若片状菌落不到平皿中得一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘以2，以代表全皿菌落数。
7、菌落计数及报告方法
7、1 首先选取平均菌落数在30个～３０0个之间得平皿，作为菌落总数测定得范围。当只有一个稀释度得平均菌落数符合此范围时，即以该平皿菌落数乘其稀释倍数（见表１中例1）.
7、2 若有两个稀释度,其平均菌落数均在30个～3００个之间，则应求出两菌落总数之比值来决定，若其比值小于或等于2，应报告其平均数,若大于2则报告其中稀释度较低得平皿得菌落数(见表1中例2及例3)。
7、3 若所有稀释度得平均菌落数均大于3０0个，则应按稀释度最高得平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表１中例4）。
7、4 若所有稀释度得平均菌落数均小于30个,刚应按稀释度最低得平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表１中例５)。
7、５若所有稀释度得平均菌落数均不在30个~３０0个之间,其中一个稀释度大于300个,而相邻得另一稀释度小于3０个时,则以30或300得平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中例6).
7、6 若所有得稀释度均无菌生长，报告数为每g或每mL小于10 CFU。
7、７菌落计数得报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于１00时,采用二位有效数字，在二位有效数字后面得数值，应以四舍五入法计算.为了缩短数字后面零得个数,可用１0得指数来表示（见表１报告方式栏）。在报告菌落数为“不可计"时，应注明样品得稀释度。
表1 细菌计数结果及报告方式
三、粪大肠菌群
1、范围
本规范规定了化妆品中粪大肠菌群得检验方法.
本规范适用于化妆品中粪大肠菌群得检验。
2、定义
本规范采用下列定义
粪大肠菌群（Fecａl colｉforms)系一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌,在44℃±0、5℃培养24h～48h 能发酵乳糖产酸并产气.
该菌直接来自粪便，就是重要得卫生指标菌。
3、仪器
３、1 恒温水浴箱或隔水式恒温箱:44℃±0、5℃.
３、2 温度计.
３、3 显微镜。
３、4 载玻片。
3、5 接种环。
3、6 电磁炉。
3、7 三角瓶，250mＬ。
3、８试管：１5×150mｍ。
3、9 小倒管.
3、１0 pＨ计或ｐH试纸.
３、１１高压灭菌器。
３、１2 灭菌吸管，10mL、1ｍL。
3、１３灭菌平皿:直径90mｍ.
4、培养基与试剂
4、1 双倍乳糖胆盐（含中与剂）培养基
成分：
蛋白胨４0g
猪胆盐１0g
乳糖 10ｇ
0、4％溴甲酚紫水溶液５ｍL
卵磷脂 2g
吐温80 14ｇ
蒸馏水 100０mL
制法：将卵磷脂、吐温８0溶解到少量蒸馏水中.将蛋白胨、猪胆盐及乳糖溶解到其余得蒸馏水中,加到一起混匀，调pH到7、4,加入0、4%溴甲酚紫水溶液，混匀,分装试管(每支试管中加一个小倒管)。68、95kPａ（115℃10lb)20m
ｉn高压灭菌.
4、2 伊红美蓝（ＥMB)琼脂
成分：
蛋白胨１0ｇ
乳糖 10g
磷酸氢二钾2g
琼脂2０g
2％伊红水溶液20mL
0、5%美蓝水溶液 1３mL
蒸馏水 1000mL
制法:先将琼脂加到９00mL蒸馏水中，加热溶解,然后加入磷酸氢二钾、蛋白胨，混匀,使之溶解.再以蒸馏水补足至1000ｍL。校正pH值为7、2～7、4，分装于三角瓶内，10３、43kPa(12１℃1５ｌb）１5miｎ高压灭菌备用。临用时加入乳糖并加热融化琼脂.冷至6０℃左右无菌操作加入灭菌得伊红美蓝溶液,摇匀。倾注平皿备用。
4、３蛋白胨水（做靛基质试验用)
成分：
蛋白胨(或胰蛋白胨) 20g
氯化钠5g
蒸馏水 1000mＬ
制法:将上述成分加热融化,调pＨ值为7、0～７、2、分装小试管，１03、４3kPa（121℃15lb）15min高压灭菌。
4、4 靛基质试剂
柯凡克试剂:将5ｇ对二甲氨基苯甲醛溶解于７５mL戊醇中，然后缓慢加入浓盐酸25mL。试验方法：接种细菌于蛋白胨水中,于4４℃±0、5℃培养24h±2h。沿管壁加柯凡克试剂0、3ｍＬ～０、５mL，轻摇试管。阳性者于试剂层显深玫瑰红色。
注:蛋白胨应含有丰富得色氨酸,每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用。
4、5 革兰氏染色液：
4、5、１染液制备
4、5、１、1 结晶紫染色液：
结晶紫 1g
95％乙醇２０ｍL
１％草酸铵水溶液 80ｍL
将结晶紫溶于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。
4、５、1、2 革兰氏碘液：
碘1g
碘化钾２g
蒸馏水加至 300mL
将碘与碘化钾先进行混合,加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后,再加蒸馏水至300mL.
4、５、１、3 脱色液：95％乙醇。
4、５、1、4 复染液:
（1）沙黄复染液：
沙黄 0、25g
９５%乙醇１０mL
蒸馏水９0mL
将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。
(２)稀石碳酸复红液：称取碱性复红10ｇ，研细，加９5％乙醇1０0mＬ，放置过夜，滤纸过滤。取该液10ｍL,加5%石碳酸水溶液９0ｍＬ，混合,即为石碳酸复红液。再取此液１0mＬ加水９０mL，即为稀石碳酸复红液。
4、5、2 染色法
4、5、２、1 将涂片在火焰上固定,滴加结晶紫染色液，染1ｍｉn,水洗.
4、5、2、2 滴加革兰氏碘液，作用１ｍin，水洗。
４、5、2、３滴加95％乙醇脱色,约30s，或将乙醇滴满整个涂片，立即倾去，再用乙醇滴满整个涂片，脱色10s，水洗.
4、5、２、4 滴加复染液,复染1mｉn，水洗,待干,镜检.
4、5、3 染色结果
革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
注：如用１：１0稀释石碳酸复红液做复染，复染时间仅需１0ｓ。
５、操作步骤
5、1 取10mL 1:10稀释得检液，加到10mL双倍乳糖胆盐（含中与剂）培养基中，置4４℃±0、5℃培养箱中培养2４ｈ~４８h，如不产酸也不产气，则报告为粪大肠菌群阴性。
5、2 如产酸产气，则划线接种到伊红美蓝琼脂平板上,置３６℃±1℃培养18h～２4h。同时取该培养液1～２滴接种到蛋白胨水中，置４4℃±0、5℃培养2４ｈ±2h。
经培养后，在上述平板上观察有无典型菌落生长。粪大肠菌群在伊红美蓝琼脂培养基上得典型菌落呈深紫黑色，圆形，边缘整齐,表面光滑湿润,常具有金属光泽.也有得呈紫黑色，不带或略带金属光泽，或粉紫色，中心较深得菌落，亦常为粪大肠菌群，应注意挑选.
5、3 挑取上述可疑菌落,涂片做革兰氏染色镜检。
5、4 在蛋白胨水培养液中，加入靛基质试剂约0、5ｍL，观察靛基质反应。阳性者液面呈玫瑰红色；阴性反应液面呈试剂本色。
6、检验结果报告
根据发酵乳糖产酸产气,平板上有典型菌落，并经证实为革兰氏阴性杆菌,靛基质试验阳性,则可报告被检样品中检出粪大肠菌群。
四、铜绿假单胞菌
1、范围
本规范规定了化妆品中铜绿假单胞菌得检验方法.
本规范适用于化妆品中铜绿假单胞菌得检验。
2、定义
本规范采用了下列定义
铜绿假单胞菌（Pｓeuｄomonaｓ aeruginosa）属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。此外还能液化明胶,还原硝酸盐为亚硝酸盐,在42℃±1℃条件下能生长.
该菌对人有致病力,可使伤处化脓,引起败血症等。
3、仪器
3、1 培养箱:４2℃±１℃、3６℃±１℃.
3、2 三角瓶，2５0mL.
３、3 试管：15×150mm。
3、4 灭菌平皿：直径９0ｍm。
3、５灭菌刻度吸管，10ｍL、１mL.
3、６显微镜。
3、7 载玻片。
３、8 接种针,接种环。
3、9 电磁炉。
3、１0 高压灭菌器.
４、培养基与试剂
４、１SCＤLＰ液体培养基
见总则中3、2。
4、２十六烷基三甲基溴化铵培养基
成分:
牛肉膏３ｇ
蛋白胨 10g
氯化钠5ｇ
十六烷基三甲基溴化铵 0、3g
琼脂 20g
蒸馏水100０mＬ
制法:除琼脂外，将上述成分混合加热溶解，调ｐH为7、4～7、6，加入琼脂，68、９5kPa （115℃10 lb）2０ｍin灭菌后，制成平板备用。
４、3 乙酰胺培养基
成分:
乙酰胺 1０、0g
氯化钠5、0g
无水磷酸氢二钾 1、39ｇ
无水磷酸二氢钾 0、７3ｇ
硫酸镁(ＭｇSO4、7H2O）０、5g
酚红0、0１２g
琼脂 20g
蒸馏水１0０0mL
制法：除琼脂与酚红外，将其它成分加到蒸馏水中,加热溶解,调pH为7、２，加入琼脂、酚红，103、43ｋPａ（121℃１5lb）20min高压灭菌后，制成平板备用。
4、4 绿脓菌素测定用培养基
成分：
蛋白胨 20g
氯化镁 1、4g
硫酸钾 1０ｇ
琼脂 18g
甘油（化学纯） 1０g
蒸馏水１000mL
制法:将蛋白胨、氯化镁与硫酸钾加到蒸馏水中，加温使其溶解,调ｐH至7、4,加入琼脂与甘油，加热溶解,分装于试管内,68、9５ｋＰa (115℃1０lb)20ｍin高压灭菌后，制成斜面备用。
4、5 明胶培养基
成分：
牛肉膏３ｇ
蛋白胨5g
明胶１２0g
蒸馏水10０0mL
制法：取各成分加到蒸馏水中浸泡２0ｍiｎ,随即搅拌加温使之溶解,调pＨ至７、4，分装于试管内，经68、95kPa
（115℃1０lb)２0min高压灭菌后,直立制成高层备用.
4、6 硝酸盐蛋白胨水培养基
成分：
蛋白胨１０ｇ
酵母浸膏3g
硝酸钾2g
亚硝酸钠０、5g
蒸馏水１00０mL
制法：将蛋白胨与酵母浸膏加到蒸馏水中,加热使之溶解,调pH为7、2,煮沸过滤后补足液量，加入硝酸钾与亚硝酸钠,溶解混匀,分装到加有小倒管得试管中，６8、95ｋPa （１1５℃10 lb）２0min高压灭菌后备用。
４、7 普通琼脂斜面培养基
成分:
蛋白胨10g
牛肉膏3ｇ
氯化钠5ｇ
琼脂１５g
蒸馏水10００mＬ
制法:除琼脂外，将其余成分溶解于蒸馏水中,调pＨ为7、2～７、4,加入琼脂,加热溶解，分装试管,103、４3kPa (12１℃15 ｌｂ)20min高压灭菌后，制成斜面备用。
5、操作步骤
５、１增菌培养:取１:１0样品稀释液10mL加到90mLSＣDLP液体培养基中,置36℃±1℃培养18h～24ｈ。如有铜绿假单胞菌生长,培养液表面多有一层薄菌膜,培养液常呈黄绿色或蓝绿色。
5、２分离培养:从培养液得薄膜处挑取培养物，划线接种在十六烷三甲基溴化铵琼脂平板上，置36℃±1℃培养１８h～24ｈ。凡铜绿假单胞菌在此培养基上，其菌落扁平无定型,向周边扩散或略在蔓延，表面湿润，菌落呈灰白色,菌落周围培养基常扩散有水溶性色素，此培养基选择性强，大肠埃希氏菌不能生长,革兰氏阳性菌生长较差。
在缺乏十六烷三甲基溴化铵琼脂时也可用乙酰胺培养基进行分离,将菌液划线接种于平板上,置36℃±1℃培养2４ｈ±２h,铜绿假单胞菌在此培养基上生长良好,菌落扁平，边缘不整，菌落周围培养基略带粉红色,其它菌落不生长。
5、3 染色镜检:挑取可疑得菌落，涂片，革兰氏染色,镜检为革兰氏阴性者应进行氧化酶试验。
5、4 氧化酶试验：取一小块洁净得白色滤纸片放在灭菌平皿内，用无菌玻璃棒挑取铜绿假单胞菌可疑菌落涂在滤纸上，然后在其上滴加一新配制得1％二甲基对苯二胺试液，在15s～3０ｓ之内，出现粉红色或紫红色时，为氧化酶试验阳性；若培养物不变色，为氧化酶试验阴性。
5、５绿脓菌素试验：取可疑菌落2个～３个,分别接种在绿脓菌素测定培养基上,置36℃±1℃培养2４h±2ｈ，加入氯仿３mL～5mL,充分振荡使培养物中得绿脓菌素溶解于氯仿液内,待氯仿提取液呈蓝色时，用吸管将氯仿移到另一试管中并加入1mol/L得盐酸1mL左右,振荡后,静置片刻.如上层盐酸液内出现粉红色到紫红色时为阳性,表示被检物中有绿脓菌素存在.
5、6 硝酸盐还原产气试验：挑取可疑得铜绿假单胞菌纯培养物，接种在硝酸盐蛋白胨水培养基中，置36℃±1℃培养２4h±2h，观察结果.凡在硝酸盐蛋白胨水培养基内得小倒管中有气体者，即阳性，表明该菌能还原硝酸盐，并将亚硝酸盐分解产生氮气。
5、7 明胶液化试验,取铜绿假单胞菌可疑菌落得纯培养物,穿刺接种在明胶培养基内,置36℃±１℃培养24h±２ｈ,取出放冰箱10min~３0min，如仍呈溶解状或表面溶解时即为明胶液化试验阳性;如凝固不溶者为阴性。
５、8 42℃生长试验：挑取可疑得铜绿假单胞菌纯培养物，接种在普通琼脂斜面培养基上,放在４2℃±１℃培养箱中,培养2４h～48ｈ,铜绿假单胞菌能生长,为阳性,而近似得荧光假单胞菌则不能生长。
６、检验结果报告
被检样品经增菌分离培养后,经证实为革兰氏阴性杆菌,氧化酶及绿脓菌素试验皆为阳性者,即可报告被检样品中
检出铜绿假单胞菌；如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气与42℃生长试验三者皆为阳性时,仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。
五、金黄色葡萄球菌
1、范围
本规范规定了化妆品中金黄色葡萄球菌得检验方法。
本规范适用于化妆品中金黄色葡萄球菌得检验。
2、定义
本规范采用下列定义
金黄色葡萄球菌（Ｓtapｈylococcｕs aurｅus）为革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排列，无芽孢,无荚膜，能分解甘露醇，血浆凝固酶阳性。
该菌就是葡萄球菌中对人类致病力最强得一种,能引起人体局部化脓性病灶,严重时可导致败血症.
3、仪器与设备
3、１显微镜。
3、2 恒温培养箱:36℃±1℃。
３、3 离心机.
3、4 灭菌吸管，1mL、10mL.
3、5 灭菌试管:15×150mm。
３、6 载玻片。
3、７酒精灯.
4、培养基与试剂
4、1 ＳCDLP液体培养基
见总则中3、2。
4、2 7、5%得氯化钠肉汤
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 3g
氯化钠 7５g
蒸馏水加至１０00mL
制法:将上述成分加热溶解，调pＨ为７、4，分装，1０3、４3kPa （1２1℃15lb)15ｍin高压灭菌。
4、3 Baｉｒd Paｒker 氏培养基
成分：
胰蛋白胨1０ｇ
牛肉膏５g
酵母浸膏1ｇ
丙酮酸钠 1０ｇ
甘氨酸１2g
氯化锂(ＬiCｌ·6H2O) 5g
琼脂２０g
蒸馏水 950mL
pH 7、0±0、2
增菌剂得配制：3０%卵黄盐水50mＬ与除菌过滤得1%亚碲酸钾溶液1０mL混合，保存于冰箱内。
制法：将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸完全溶解,冷至２５℃±１℃校正pH。分装每瓶95mL，103、４3kＰa （121℃15 ｌb）高压灭菌15miｎ。临用时加热溶化琼脂，每95mL加入预热至50℃左右得卵黄亚碲酸钾增菌剂5mL，摇匀后
倾注平板.培养基应就是致密不透明得。使用前在冰箱贮存不得超过４8h±2ｈ.
４、４血琼脂培养基
成分：
营养琼脂 10０mL
脱纤维羊血（或兔血） 10mL
制法:将营养琼脂加热融化,待冷至５0℃左右无菌操作加入脱纤维羊血，摇匀,制成平板，置冰箱内备用。
4、5 甘露醇发酵培养基
成分:
蛋白胨 1０g
氯化钠5ｇ
甘露醇 10g
牛肉膏 5g
0、２％麝香草酚蓝溶液 12ｍL
蒸馏水 1００0mＬ
制法:将蛋白胨、氯化钠、牛肉膏加到蒸馏水中,加热溶解,调pH 7、4，加入甘露醇与指示剂,混匀后分装试管中，６８、95kPa(１１5℃10lb）20min灭菌备用。
4、6 兔(人）血浆制备
取3、8%柠檬酸钠溶液，103、４3ｋPa （121℃１5 lb）３０min高压灭菌，1份加兔（人)全血4份,混匀静置;20０0rpm~300０rpm离心3miｎ～5min。血球下沉，取上面血浆.
5、操作步骤
5、1 增菌：取1:10稀释得样品接种到90mL SCＤLP液体培养基中,置36℃±1℃培养箱,培养２４h±２h。
注：如无此培养基也可用7、５％氯化钠肉汤。
5、2 分离：自上述增菌培养液中,取１～2接种环，划线接种在Baird Pａｒker氏培养基,如无此培养基也可划线接种到血琼脂平板,置3６℃±1℃培养箱培养２4h～４8h。在血琼脂平板上菌落呈金黄色，大而突起，圆形，不透明,表面光滑,周围有溶血圈。在Ｂａiｒd Parｋeｒ氏培养基上为圆形,光滑,凸起，湿润，直径2mｍ～3mm，颜色呈灰色到黑色,边缘为淡色，周围为一混浊带,在其外层有一透明带。用接种针接触菌落似有奶油树胶得软度。偶然会遇到非脂肪溶解得类似菌落,但无混浊带及透明带。挑取单个菌落分纯在血琼脂平板上,置36℃±１℃培养２４h±2h。
5、３染色镜检：挑取分纯菌落，涂片，进行革兰氏染色，镜检。金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性菌,排列成葡萄状，无芽孢,无荚膜，致病性葡萄球菌,菌体较小，直径约为0、5μm~1μm。
5、４甘露醇发酵试验:取上述分纯菌落接种到甘露醇发酵培养基中，在培养基液面上加入2mm～3mm高得灭菌液体石蜡，置３６℃±1℃培养箱培养２４ｈ±２h，金黄色葡萄球菌应能发酵甘露醇产酸。
5、５血浆凝固酶试验:吸取１:４新鲜血浆0、５mL，放入灭菌小试管中,加入待检菌24h±２ｈ肉汤培养物0、５ mL。混匀，放36℃±1℃恒温箱或恒温水浴中，每半个小时观察一次,6ｈ之内如呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性与阴性菌株肉汤培养物及肉汤培养基各0、5 mL,分别加入灭菌1：4血浆0、5 mL,混匀，作为对照.
6、检验结果报告
凡在上述选择平板上有可疑菌落生长，经染色镜检，证明为革兰氏阳性葡萄球菌,并能发酵甘露醇产酸,血浆凝固酶试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。
六、霉菌与酵母菌
1、范围
本规范规定了化妆品中霉菌与酵母菌得检验方法。
本规范适用于各种化妆品中霉菌与酵母菌得计数。
2、定义
本规范采用下列定义
霉菌与酵母菌数测定(Deｔeｒmination ｏf mｏlds aｎｄ yeast cｏｕnt）就是指化妆品检样在一定条件下培养后,1g或1mＬ化妆品中所污染得活得霉菌与酵母菌数量，藉以判明化妆品被霉菌与酵母菌污染程度及其一般卫生状况。
本方法根据霉菌与酵母菌特有得形态与培养特性，在虎红培养基上，置28℃±2℃培养７2h，计算所生长得霉菌与酵母菌数.
3、仪器与设备
3、1 培养箱:28℃±２℃。
3、2 振荡器。
３、３天平.
３、4 三角瓶，2５0mＬ。
3、５试管:15×1５0mｍ.
3、6 平皿:直径9cm。
３、7 吸管，1mL、10mL.
3、8 量筒，２0０ｍＬ.
3、9 酒精灯。
3、１0 高压灭菌器。
4、培养基与试剂
４、１生理盐水
见总则中３、1。
４、2 虎红（孟加拉红)培养基
成分:
蛋白胨 5g
葡萄糖 10g
磷酸二氢钾１g
硫酸镁（含７H2O） 0、5g
琼脂 20g
1/3０00虎红溶液（四氯四碘荧光素） 1０0mL
蒸馏水 1000ｍL
氯霉素 100mg
制法:将上述各成分（除虎红外)加入蒸馏水中溶解后，再加入虎红溶液。分装后，１03、4３kPa(121℃1５lb)2０ｍin高压灭菌，另用少量乙醇溶解氯霉素，过滤溶解后加入培养基中，若无氯霉素，使用时每1000mL加链霉素30mg。
5、操作步骤
5、1 样品稀释
见总则中供检样品得制备.
5、2 取1:10、 1:100、 1：1０00得检液各1mL分别注入灭菌平皿内，每个稀释度各用2个平皿,注入融化并冷至45℃±1℃左右得虎红培养基，充分摇匀。凝固后，翻转平板,置28℃±1℃培养72h±2h,计数平板内生长得霉菌与酵母菌数。若有霉菌蔓延生长，为避免影响其它霉菌与酵母菌得计数时,于4８h±2h应及时将此平板取出计数。
5、３计算方法：先点数每个平板上生长得霉菌与酵母菌菌落数,求出每个稀释度得平均菌落数。判定结果时，应选取菌落数在５个~50个范围之内得平皿计数，乘以稀释倍数后,即为每g(或每mL)检样中所含得霉菌与酵母菌数.其它范围内得菌落数报告应参照菌落总数得报告方法报告之.
5、4 每g(或每mL)化妆品含霉菌与酵母菌数以CＦU/g（mＬ）表示.
《化妆品微生物标准检验方法》GB 79181～5——87
一、总则 General Principle 1 范围 本规范规定了化妆品微生物学检验总则。 本规范适用于化妆品样品的采集、保存、供检样品制备。 2 仪器和设备 2.1 天平。 2.2 高压灭菌器。 2.3 振荡器。 2.4 三角瓶。 2.5 玻璃珠。 2.6 玻璃棒。 2.7 刻度吸管。 2.8 研钵。 2.9 均质器。 2.10 恒温水浴箱。 2.11 采样用具：不锈钢勺，剪刀，开罐器等。 3 培养基和试剂 3.1 生理盐水 成分：氯化钠8.5g 蒸馏水加至1000 mL 溶解后，分装到加玻璃珠的三角瓶内，每瓶90mL，103.43kPa(15 lb)20min高压灭菌。3.2 SCDLP液体培养基 成分：酪蛋白胨17g 大豆蛋白胨3g 氯化钠5g 磷酸氢二钾 2.5g 葡萄糖 2.5g 卵磷脂1g 吐温80 7g 蒸馏水1000mL 制法：先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后，再与其它成分混合，加热溶解，调pH为7.2～7.3，分装，103.43kPa(15lb)20min高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的吐温80充分混合，冷却至25℃左右使用。 注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。 3.3 灭菌液体石蜡。 3.4灭菌吐温80。
4 样品的采集及注意事项 4.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量小于20g的样品，采样量应适量增加，其总量应大于16g。 4.2 供检验样品，应严格保持原有的包装状态，进口产品应为市售包装。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防止样品被污染。 4.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。 4.4 若只有一份样品而同时需做多种分析，如微生物、毒理、化学等，应先做微生物检验，再将剩余样品做其它分析。 4.5 在检验过程中，从打开包装到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用采样用具、器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行，或在相应条件下，按无菌操作规定进行。 5 供检样品的制备 5.1 液体样品 5.1.1 水溶性的液体样品，量取10mL加到90mL灭菌生理盐水中，混匀后，制成1:10检液。 5.1.2 油性液体样品，取样品10mL，先加5mL灭菌液体石蜡混匀，再加10mL灭菌的吐温80，在40℃～44℃水浴中振荡混合10min，加入灭菌的生理盐水75mL(在40℃～44℃水浴中预温)，在40℃～44℃水浴中乳化，制成1:10的悬液。 5.2 膏、霜、乳剂半固体状样品 5.2.1 亲水性的样品，称取10g，加到装有玻璃珠及90mL灭菌生理盐水的三角瓶中，充分振荡混匀，静置15min。取其上清液作为1:10的检液。 5.2.2 疏水性样品，称取10g，放到灭菌的研钵中，加10mL灭菌液体石蜡，研磨成粘稠状，再加入10mL灭菌吐温80，研磨待溶解后，加70mL灭菌生理盐水，在40℃～44℃水浴中充分混合，制成1:10检液。 5.3 固体样品，称取10g，加到90mL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀，使其分散混悬，静置后，取上清液作为1:10的检液。 如有均质器，上述水溶性膏、霜、粉剂等，可称10g样品加入90mL灭菌生理盐水，均质1min～2min；疏水性膏、霜及眉笔、口红等，称10g样品，加10mL灭菌液体石蜡，10mL灭菌吐温80，70mL灭菌生理盐水，均质3min～5min。
化妆品微生物检验方法
化妆品微生物检验方法https://www.360docs.net/doc/aa9627665.html,work Information Technology Company.2020YEAR
一、总则 1.范围 本规范规定了化妆品微生物检验的基本要求。 本规范适用于化妆品样品的采集、保存及供检样品制备。 2.仪器和设备 2.1 天平。 2.2 高压灭菌器。 2.3 振荡器。 2.4 三角瓶，250mL。 2.5 玻璃珠。 2.6 琉璃棒。 2.7 刻度吸管，1mL、10mL。 2.8 研钵或均质器。 2.9 恒温水浴箱。 3.培养基和试剂 3.1 生理盐水 成分： 氯化钠 8.5g 蒸馏水加至 1000mL 溶解后，分装到加玻璃珠的三角瓶内，每瓶90 mL，103.43kPa (121℃ 15 lb)20min高压灭菌。 3.2 SCDLP液体培养基 成分： 酪蛋白胨 17g 大豆蛋白胨 3g 氯化钠 5g 磷酸氢二钾 2.5g 葡萄糖 1g 吐温80 7g 蒸馏水 1000mL 制法：先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后，再与其它成分混合，加热溶解，调pH为7.2～7.3分装，103.43 kPa (121℃ 15 lb)20min高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的吐温80充分混合，冷却至25℃左右使用。 注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。 3.3 灭菌液体石蜡。 3.4 灭菌吐温80。 4.样品的采集及注意事项 4.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量小于20g的样品，采样量可适当增加样品包装数量。 4.2 供检验样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防止样品被污染。
化妆品微生物检验培训考试试卷A
微生物室上岗人员操作技术基础测试卷A(化妆品） 说明：1.本试卷命题范围为化妆品微生物检测标准汇编·操作规程及相关专业基础知识 2.本测试为闭卷考试，满分为120分，时间为120分钟 3.本测试在人员入职后进行，以检验人员对工作的掌握程度。 姓名：测试时间：年月日 阅卷：成绩： 一、填空题（44*1） 1. 化妆品微生物检验项目包括：、、 、、。 液体供检样品前处理时，水溶性样品用溶解，油溶性样品用溶解。 4.在测定霉菌和酵母菌时，虎红培养基中含有，以抑制其他细菌的生长。 5. 化妆品粪大肠菌群检测时，报告被检样品中检出粪大肠菌群应符合的条件：、、 、。 6.金黄色葡萄球菌革兰氏染色镜检结果为：革兰氏，排列成 状，芽孢，荚膜，致病性葡萄球菌。 7.在电压220V时，普通30W直管型紫外线灯，在室温为20~25℃的使用情况下，紫外线辐射强度（垂直1m处）应≥ 8.卵磷脂吐温80培养基灭菌条件为℃高压灭菌分钟. 9.金黄色葡萄球菌在 Baird-Parker 平板上, 菌落直径为 ,颜色呈 ,边缘为色 ,周围为一带 ,在其外层有一 .圈。一般认为阳性的金黄色葡萄球菌菌株有致病力. 10.检测粪大肠菌群时，所用的双料乳糖胆盐培养基中，溴甲酚紫的作用是 培养基原理是：蛋白胨提供源和源；糖是大肠菌群可发酵的糖类；磷酸氢二钾是；琼脂是培养基凝固剂； 伊红和美蓝是剂和剂，可抑制革兰氏阳性菌，在酸性条件下产生沉淀，形成色菌落或具黑色中心的外围的菌落。 12.高压灭菌锅必须每个月进行一次灭菌效果评价，用菌进行评价检验，而平时也要用进行检测。 13. 10-1 和10-2两个稀释度每ml的菌落数分别是260,28，则菌落总数报告值为
临床微生物学与检验测试题及答案
临床微生物学与检验测试题及答案——细菌感染的实验室检查与诊断及细菌生理 一、名词解释 1.血清学诊断 2.培养基 3.基础培养基 4.选择培养基 5.鉴别培养基 6.菌落 二、填空题 1.实验室细菌学检查结果的准确与否和标本的选 择、、有直接关系。 2.辅助诊断风湿热的抗“O”实验属于。 3.血清学试验一般需作两次，其血清分别取自疾病 的和.第二次抗体效价比第一 次时方有诊断意义。 4.对流行性脑炎患者进行细菌学检查，可采集的标本 有、和。 5.进行病原菌的分离培养时，从有正常菌群部位采取的标本应接种 于培养基或培养基。 6.细菌感染实验室检查中，常用的血清学方法 有、和三大类。 7.属于直接凝集反应的血清学试验有和。 三、单项选择题 1.目前在传染病的预防接种中，使用减毒活疫苗比使用灭活疫苗普遍，关于其原因下述不正确的是 A.减毒活疫苗的免疫效果优于灭活疫苗 B.减毒活疫苗刺激机体产生的特异性免疫的持续时间比灭活疫苗长 C.减毒活疫苗能在机体内增殖或干扰野毒株的增殖及致病作用，灭活疫苗则不能 D.减毒活疫苗可诱导机体产生分泌型IgA，故适用于免疫缺陷或低下的患者 E.减毒活疫苗一般只需接种一次即能达到免疫效果，而灭活疫苗需接种多次 2.白百破三联疫苗的组成是
A.百日咳类毒素，白喉类毒素，破伤风类毒素 B.百日咳死疫苗，白喉类毒素，破伤风类毒素 C.百日咳死疫苗，白喉死疫苗，破伤风类毒素 D.百日咳活疫苗，白喉活疫苗，破伤风死疫苗 E.百日咳活疫苗，白喉死疫苗，破伤风死疫苗 3.使用时要注意防止Ⅰ型超敏反应的免疫制剂是 A.丙种球蛋白 B.胎盘球蛋白 C.抗毒素 D.白细胞介素 E.干扰素 4.关于胎盘球蛋白的叙述，错误的是 A.由健康产妇的胎盘和婴儿脐带中提取制备 B.一般含IgM C.一般不会引起超敏反应 D.主要用于麻疹，甲型肝炎和脊髓灰质炎等病毒性疾病的紧急预防 E.免疫效果不如高效价的特异性免疫球蛋白 5.伤寒病人发病第一周内，分离病原菌应采取的标本是 A.血液 B.尿液 C.粪便 D.呕吐物 E.脑脊液 6.咽喉假膜标本涂片染色后，镜检出有异染颗粒的棒状杆菌，其临床意义在于诊断 A.结核病 B.军团病 C.白喉
化妆品微生物检验方法
一、总则 1.范围 本规范规定了化妆品微生物检验的基本要求。 本规范适用于化妆品样品的采集、保存及供检样品制备。 2.仪器和设备 2.1 天平。 2.2 高压灭菌器。 2.3 振荡器。 2.4 三角瓶，250mL。 2.5 玻璃珠。 2.6 琉璃棒。 2.7 刻度吸管，1mL、10mL。 2.8 研钵或均质器。 2.9 恒温水浴箱。 3.培养基和试剂 3.1 生理盐水 成分： 氯化钠8.5g 蒸馏水加至1000mL 溶解后，分装到加玻璃珠的三角瓶内，每瓶90 mL，103.43kPa (121℃15 lb)20min高压灭菌。 3.2 SCDLP液体培养基 成分： 酪蛋白胨17g 大豆蛋白胨3g 氯化钠5g 磷酸氢二钾 2.5g 葡萄糖1g 吐温80 7g 蒸馏水1000mL 制法：先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后，再与其它成分混合，加热溶解，调pH为7.2～7.3分装，103.43 kPa (121℃15 lb)20min高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的吐温80充分混合，冷却至25℃左右使用。 注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。 3.3 灭菌液体石蜡。 3.4 灭菌吐温80。 4.样品的采集及注意事项 4.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量小于20g的样品，采样量可适当增加样品包装数量。 4.2 供检验样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防止样品被污染。
4.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。 4.4 若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品做细菌检验，再将剩余样品做其它分析。 4.5 在检验过程中，从打开包装到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行，或在相应条件下，按无菌操作规定进行。 4.6 如检出粪大肠菌群或其它致病菌，自报告发出之日起该菌种及被检样品应保存一个月。 5.供检样品的制备 5.1 液体样品 5.1.1 水溶性的液体样品，可量取10mL加到90mL灭菌生理盐水中，如样品少于10mL，仍按10倍稀释法进行。如为5mL则加到45mL灭菌生理盐水中，混匀后制成1：10检液。 5.1.2 油性液体样品，取样品10mL,先加5mL灭菌液体石蜡混匀，再加10mL灭菌的吐温80,在40℃～44℃水浴中充分混合，制成1：10检液。 5.3 固体样品 称取10g，加到90mL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀，使其分散混悬，静置后，取上清液作为1：10的检液。 如有均质器，上述水溶性膏、霜、粉剂等，可称10g样品加入90mL灭菌生理盐水，均质1min～2min；疏水性膏、霜及眉笔、口红等，称10g样品，加入10mL灭菌液体石蜡，10mL吐温80,70mL灭菌生理盐水，均质3min～5min。 二、菌落总数 1.范围 本规范规定了化妆品中菌落总数的检验方法。 本规范适用于化妆品菌落总数的测定。 2.定义 本规范采用下列定义 菌落总数（Aerobic bacterial count）是指化妆品检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等），1g(1mL)检样中所含菌落的总数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性菌落总数。 测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品进行卫生总评价的综合依据。 3.仪器和设备 3.1 三角瓶，250mL。 3.2 量筒，200mL。 3.3 pH计或精密pH试纸。 3.4 高压灭菌器。 3.5 试管：15×150mm。 3.6 灭菌平皿：直径9cm。
化妆品备案卫检需要进行的检测项目
化妆品备案卫检需要进行的检测项目 化妆品一般要进行微生物检验、卫生化学检验、pH值测定、毒理学安全性实验、人体安全及功能试验。检验时间一般在2-4个月，有些特殊功能化妆品因为要做人体试验，时间稍长。 1、微生物学检验：包括菌落总数、粪大肠菌群、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、霉菌和酵母菌等检验项目 2、卫生化学检验：包括汞、铅、砷等卫生化学指标的检测，斑蟊、氮芥、巯基乙酸、性激素、甲醛等禁、限用物质含量的检测，以及 pH 值等其他检测； 3、毒理学试验：普通化妆品需要做急性皮肤刺激性试验、急性眼刺激性试验、多次皮肤刺激性试验；特殊用途化妆品除以上三项试验外，还需要做皮肤变态反应试验、皮肤光毒性试验、回复突变试验、体外哺乳动物细胞染色体畸变试验； 4、特殊用途化妆品人体安全性和功效性评价：包括人体斑贴试验、人体试用试验、SPF 值测定、PA值测定、防水性能测定等。 ●检验中特殊情况要求： 1、凡宣称含有α-羟基酸或不宣称含有α-羟基酸，但其含量≥3%的产品需测定α-羟基酸，同时测定pH值，测α-羟基酸1000元，测pH值100元。 2、凡紫外线吸收剂（二氧化钛和氧化锌除外）含量≥%的产品，需加测紫外线吸收剂、皮肤变态反应试验和皮肤光毒性试验。 3、宣称祛痘、除螨、抗粉刺等功能的产品需要测抗生素和甲硝唑指标，费用1000元。 4、宣称去屑功能的产品需要测去屑剂指标，费用1000元。 5、凡含滑石粉的产品，需加测石棉，费用1000元 6、Ames试验可选用体外哺乳动物细胞基因突变试验替代。 7、凡需进行人体试验的，请先在省级检验机构完成毒理学检验，结果合格者方能送到我单位检测；并于送检时提供毒理学报告。 8、样品每包装需大于25克，有些彩妆类产品含量小于10克的，提供的样品总量不少于150克。 9、防晒类只在产品标识SPF值时测定，或根据企业需要；检验以SPF值15为基数，5000元/个，SPF值大于15，每增加5，测定费用再加1000元。 10、防晒类只在产品标识PA+++值时测定，或根据企业需要；检验以PFA值3为基数，3以下，可标注PA+，11000元；PFA
临床微生物学与检验试题
一、选择题(A型): !、下列细菌中哪一种细菌在血平板上一般不出现溶血环? A、金黄色葡萄球菌 B、表皮葡萄球菌 C、甲型链球菌 D、肺炎双球菌 2、进行玻片法血浆凝固酶试验不需要下列哪种材料? A、免血浆 B、生理盐水 C、2%红细胞悬液 D、待检细菌 3、UMI系统不包括下列哪一项试验? A、尿素酶 B、甲基红 C、靛基质 D、动力 4、麦康凯培养基和克氏双糖铁共有的成分是: A、葡萄糖 B、酚红 C、中性红 D、乳糖 5、对浓汁标本进行细菌学鉴定,下列哪一项试验一般不包括在内? A、涂片染色镜检 B、血平板分离培养 C、血浆凝固酶试验 D、抗"O"试验 6、乙链在血清肉汤中的生长情况是： A、完全沉淀生长 B、均匀混浊生长 C、部分沉淀生长 D、形成菌膜 7、甲基红试验和VP试验阳性表明被检菌具有以下哪一特性： A、分解乳糖产酸产气 B、分解葡萄糖生成丙酮酸 C、生成甲醇、甲醛 D、以上全部 8、下列哪一项不符合霍乱弧菌的特点 A、有动力 B、抵抗力较强 C、耐碱不耐酸 D、在自然界广泛存在，人是唯一易感者 9、对于一个脓汁标本，首先应进行的检验步骤是： A、涂片镜检 B、接种血平板 C、含硫氨基酸 D、苯丙氨酸 10、抗"O"试验管法中，溶血素应预先用还原剂处理，原因是： A、还原被氧化的S溶血素，恢复溶血能力 B、溶血素O对热不敏感 C、溶血素S对氧敏感 D、以上全错 11、观察乙型溶血性链球菌典型形态，选择哪一种培养基可得理想结果： A、普通琼脂平板 B、普通肉汤 C、血琼脂平板 D、血清肉汤 12、对脑膜炎奈瑟氏菌的标本采送，哪一种是错误的？ A、低温 B、保温 C、防干燥 D、快速 13、区别志贺氏菌和沙门氏菌可采用下列哪种试验？ A、氧化酶试验 B、乳糖发酵试验 C、葡萄糖发酵 D、动力试验 14、下列哪一项可用于区别肺炎双球菌和甲型链球菌？ A、胆汁溶菌试验和甘露醇发酵试验 B、溶血试验和胆汁溶菌试验 C、菊糖发酵试验和胆汁溶菌试验 D、溶血试验和菊糖发酵试验
临床微生物学与检验习题集
临床微生物学及检验习题集 第一部分基础题绪论一、名词解释:微生物()、微生物学()、医学微生物学( )二、选择题1．下列描述的微生物中，不是所有微生物共同特征的是A个体微小B 分布广泛C 种类繁多D 只能在活细胞内生长繁殖E 结构简单2．不属于原核细胞型微生物的是A 细菌B真菌 C支原体 D 衣原体E立克次体3属于真核细胞型微生物的是 A 螺旋体 B 放线菌 C 真菌 D 细菌 E 立克次体4下列那种微生物属于非细胞型微生物 A 细菌B衣原体 C支原体 D病毒 E立克次体 细菌的形态及结构 一、名词解释：1.肽聚糖（）2.脂多糖()3. 质粒（）4. 异染颗粒()5. 革兰染色()6. 芽胞()7荚膜() 二、选择：1．及真核细胞结构相比较，细菌所特有的一种重要结构是A核蛋白体（核糖体）B线粒体C高尔基体 D细胞膜 E 细胞壁2．及细菌运动有关的结构是A鞭毛B菌毛C纤毛D荚膜E轴丝3．及内毒素有关的细菌结构是A外膜层B核膜C线粒体膜D荚膜E细胞膜4．芽胞及细菌致病有关的是A抗吞噬B产生毒素C耐热性D粘附于感染部位E侵袭力 5．细菌核质以外的遗传物质是 A B 核蛋白体 C质粒D异染颗粒 E性菌毛 6．及细菌粘附功能有关的细菌结构是A菌毛B荚膜 C中介体D 胞浆膜E细胞膜
7．不属于细菌基本结构的是A鞭毛B细胞质C 细胞膜D核质（拟核）E细胞壁 8．细菌内毒素的主要成份是 A 肽聚糖 B 蛋白质 C鞭毛 D 核酸E脂多糖 9．及细菌感染侵袭相关的结构是A 中介体B 细胞膜 C异染质颗粒D 芽胞E 荚膜 10．青霉素的抗菌作用机理是A 干扰细菌蛋白质的合成B抑制细菌的核酸代谢C抑制细菌的酶活性D破坏细菌细胞壁中的肽聚糖E破坏细胞膜11细菌的L型是指：A细菌的休眠状态B细胞壁缺陷型细菌C非致病菌D不可逆性变异的细菌E光滑型—粗糙型菌落()变异 12．溶菌酶杀菌的作用机理是：A裂解聚糖骨架的β-1，4糖苷键 B竞争肽聚糖合成中所需的转肽酶C及核蛋白体的小亚基结合 D竞争性抑制叶酸的合成代谢 E破坏细胞膜 13．关于细菌的L型错误的是：A主要由肽聚糖结构的缺损引起的B可在体外试验中形成C呈多形性D需在高渗透压的培养基中分离培养E失去产生毒素的能力而使其致病力减弱 14．细菌的革兰染色性不同是由于A细胞核结构B细胞壁结构C 细胞膜结构同D磷酸壁的有无 E中介体的有无15．细菌哪种结构类似真核细胞线粒体A核蛋白体B中介体C胞质颗粒D质粒 E 核质16．需用电子显微镜才能观察到的结构是A荚膜B异染颗粒C鞭毛D菌毛 E芽胞17．革兰染色所用试剂的顺序是A稀释
化妆品微生物标准检验方法定稿版
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化妆品微生物标准检验方法 总则（GB7918.1—87） 1?样品的采集及注意事项 1.1所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10ml。包装量小的样品，取样量可酌减。 1.2供检样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得启开，以防再污染。 1.3接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。 1.4若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品作细菌检验，再将剩余样品作其他分析。 1.5在检验过程中，从开封到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行。或在相应条件下，按无菌操作规定进行。 1.6如检出粪大肠菌群或其他致病菌，自报告发出起该菌种及被检样品应保存一个月奋查。 2?供检样品的制备 2.1培养基和试剂
：氯化钠?8.5g，蒸馏水?1000m溶解后，分装到加玻璃珠的锥形瓶内，每瓶90ml，121℃（151b）20min高压灭菌。 ,成分：酪蛋白胨17g，大豆蛋白胨?3g，氯化钠?5g，磷酸氢二钾?2.5g，葡萄糖?2.5g，卵磷脂?1g，吐温80?。7g，蒸馏水?1000ml，制法：将上述成分混合后，加热溶解，调pH 为7.2. 3分装，121℃（151b）20min高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的法温80充分混合，冷却至25℃左右使用。 注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用日本多胨代替。 2.2.仪器： 2.3不同类型样品的检样制备。 ： 。 n。 本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所归口。 本标准由“化妆品微生物标准检验方法”起草小组起草。 本标准主要起草人周淑玉。 本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所负责解释。
化妆品微生物标准检验方法
化妆品微生物标准检验方法 总则（GB7918.1—87）? 1?样品的采集及注意事项 1.1所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10ml。包装量小的样品，取样量可酌减。 1.2供检样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得启开，以防再污染。 1.3接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。 1.4若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品作细菌检验，再将剩余样品作其他分析。 1.5在检验过程中，从开封到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行。或在相应条件下，按无菌操作规定进行。 1.6如检出粪大肠菌群或其他致病菌，自报告发出起该菌种及被检样品应保存一个月奋查。 2?供检样品的制备 2.1培养基和试剂 ：氯化钠?8.5g，蒸馏水?1000m溶解后，分装到加玻璃珠的锥形瓶内，每瓶90ml，121℃（151b）20min高压灭菌。,成分：?酪蛋白胨?17g，大豆蛋白胨?3g，氯化钠?5g，磷酸氢二钾?2.5g，葡萄糖?2.5g，卵磷脂?1g，吐温80?。7g，蒸馏水?1000ml，制法：将上述成分混合后，加热溶解，调pH为7.2？.3分装，121℃（151b）20min高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的法温80充分混合，冷却至25℃左右使用。 注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用日本多胨代替。 2.2.仪器： 2.3不同类型样品的检样制备。 ： 。 n。 本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所归口。 本标准由“化妆品微生物标准检验方法”起草小组起草。 本标准主要起草人周淑玉。 本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所负责解释。?
临床微生物学与检验试题库
临床微生物学与检验习题集 本习题集由三部分构成,第一部分为基础题,主要测试学生对每一章节内容得掌握程度;第二部分为综合题,侧重考查学生综合分析问题得能力及对本门课程掌握得程度;第三部分为病例分析题,考查学生利用所学知识解决实际问题得能力。 第一部分基础题 绪论 二、选择题 1．下列描述得微生物中,不就是所有微生物共同特征得就是 A 个体微小 B 分布广泛 C 种类繁多 D 只能在活细胞内生长繁殖 E 结构简单 2．不属于原核细胞型微生物得就是 A 细菌 B 真菌 C 支原体 D 衣原体 E 立克次体 3．属于真核细胞型微生物得就是 A 螺旋体 B 放线菌 C 真菌 D 细菌 E 立克次体 4.下列那种微生物属于非细胞型微生物 A 细菌 B 衣原体 C 支原体 D 病毒 E 立克次体 二、选择: 1．与真核细胞结构相比较,细菌所特有得一种重要结构就是 A 核蛋白体(核糖体) B 线粒体 C 高尔基体 D 细胞膜 E 细胞壁 2．与细菌运动有关得结构就是 A 鞭毛 B 菌毛 C 纤毛 D 荚膜 E 轴丝 3．与内毒素有关得细菌结构就是 A 外膜层 B 核膜 C 线粒体膜 D 荚膜 E 细胞膜 4．芽胞与细菌致病有关得特征就是 A 抗吞噬 B 产生毒素 C 耐热性 D 粘附于感染部位 E 侵袭力 5．细菌核质以外得遗传物质就是 A mRNA B 核蛋白体 C 质粒 D 异染颗粒
E 性菌毛 6.与细菌粘附功能有关得细菌结构就是 A 菌毛 B 荚膜 C 中介体 D 胞浆膜 E 细胞膜 7.不属于细菌基本结构得就是 A 鞭毛 B 细胞质 C 细胞膜 D 核质(拟核) E 细胞壁 8.细菌内毒素得主要成份就是 A 肽聚糖 B 蛋白质 C 鞭毛 D 核酸 E 脂多糖 9.与细菌感染侵袭相关得结构就是 A 中介体 B 细胞膜 C 异染质颗粒 D 芽胞 E 荚膜 10.青霉素得抗菌作用机理就是 A 干扰细菌蛋白质得合成 B 抑制细菌得核酸代谢 C 抑制细菌得酶活性 D 破坏细菌细胞壁中得肽聚糖 E 破坏细胞膜 11.细菌得L型就是指 A 细菌得休眠状态 B 细胞壁缺陷型细菌 C 非致病菌 D 不可逆性变异得细菌 E 光滑型—粗糙型菌落(S—R)变异 12.溶菌酶杀菌得作用机理就是 A 裂解聚糖骨架得β-1,4糖苷键 B 竞争肽聚糖合成中所需得转肽酶 C 与核蛋白体得小亚基结合 D 竞争性抑制叶酸得合成代谢 E 破坏细胞膜 13.关于细菌得L型,错误得说法就是 A 主要就是由肽聚糖结构得缺损引起得 B 可在体外试验中形成 C 呈多形性 D 需在高渗透压得培养基中分离培养E失去产生毒素得能力而使其致病力减弱 14.细菌得革兰染色性不同就是由于 A 细胞核结构得不同 B 细胞壁结构得不同 C 细胞膜结构得不同 D 磷酸壁得有无 E 中介体得有无 15.细菌哪种结构得功能类似真核细胞得线粒体 A 核蛋白体 B 中介体 C 胞质颗粒 D 质粒 E 核质 16.需用电子显微镜才能观察到得结构就是 A 荚膜 B 异染颗粒 C 鞭毛 D 菌毛
临床微生物学与检验测试题及答案
临床微生物学与检验测试题及答案一一细菌感染的实验室检查与诊断及细菌生理 一、名词解释 1. 血清学诊断 o 拉圭苴 2. 培养基 3. 基础培养基 4. 选择培养基 5. 鉴别培养基 6. 菌落 二、填空题 1. 实验室细菌学检查结果的准确与否和标本的选 择、____________________ 、____________________ 有直接关系。 2. 辅助诊断风湿热的抗“ O'实验属于_____________________ 。 3. 血清学试验一般需作两次，其血清分别取自疾病 的____________________ 和 __________________ .第二次抗体效价比第一 次____________________ 时方有诊断意义。 4. 对流行性脑炎患者进行细菌学检查，可采集的标本 有____________________ 、 ___________________ 和___________________ 。 5. 进行病原菌的分离培养时，从有正常菌群部位采取的标本应接种 于____________________ 培养基或 _____________________ 培养基。 6. 细菌感染实验室检查中，常用的血清学方法 有____________________ 、 _____________________ 和______________________ 三大类。 7. 属于直接凝集反应的血清学试验有 _____________________ 和______________________ 三、单项选择题 1. 目前在传染病的预防接种中，使用减毒活疫苗比使用灭活疫苗普遍，关于其原因下述 不正确的是 A. 减毒活疫苗的免疫效果优于灭活疫苗 B. 减毒活疫苗刺激机体产生的特异性免疫的持续时间比灭活疫苗长 C. 减毒活疫苗能在机体内增殖或干扰野毒株的增殖及致病作用，灭活疫苗则不能 D. 减毒活疫苗可诱导机体产生分泌型IgA ,故适用于免疫缺陷或低下的患者
临床微生物学与检验测试题及标准答案
临床微生物学与检验测试题及答案
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临床微生物学与检验测试题及答案——细菌感染的实验室检查与诊断及细菌生理 一、名词解释 1.血清学诊断 2.培养基 3.基础培养基 4.选择培养基 5.鉴别培养基 6.菌落 二、填空题 1.实验室细菌学检查结果的准确与否和标本的选 择、、有直接关系。 2.辅助诊断风湿热的抗“O”实验属于。 3.血清学试验一般需作两次，其血清分别取自疾病 的和.第二次抗体效价比第一 次时方有诊断意义。 4.对流行性脑炎患者进行细菌学检查，可采集的标本 有、和。 5.进行病原菌的分离培养时，从有正常菌群部位采取的标本应接种 于培养基或培养基。 6.细菌感染实验室检查中，常用的血清学方法 有、和三大类。 7.属于直接凝集反应的血清学试验有和。 三、单项选择题 1.目前在传染病的预防接种中，使用减毒活疫苗比使用灭活疫苗普遍，关于其原因下述不正确的是 A.减毒活疫苗的免疫效果优于灭活疫苗 B.减毒活疫苗刺激机体产生的特异性免疫的持续时间比灭活疫苗长 C.减毒活疫苗能在机体内增殖或干扰野毒株的增殖及致病作用，灭活疫苗则不能 D.减毒活疫苗可诱导机体产生分泌型IgA，故适用于免疫缺陷或低下的患者 E.减毒活疫苗一般只需接种一次即能达到免疫效果，而灭活疫苗需接种多次
2.白百破三联疫苗的组成是 A.百日咳类毒素，白喉类毒素，破伤风类毒素 B.百日咳死疫苗，白喉类毒素，破伤风类毒素 C.百日咳死疫苗，白喉死疫苗，破伤风类毒素 D.百日咳活疫苗，白喉活疫苗，破伤风死疫苗 E.百日咳活疫苗，白喉死疫苗，破伤风死疫苗 3.使用时要注意防止Ⅰ型超敏反应的免疫制剂是 A.丙种球蛋白 B.胎盘球蛋白 C.抗毒素 D.白细胞介素 E.干扰素 4.关于胎盘球蛋白的叙述，错误的是 A.由健康产妇的胎盘和婴儿脐带中提取制备 B.一般含IgM C.一般不会引起超敏反应 D.主要用于麻疹，甲型肝炎和脊髓灰质炎等病毒性疾病的紧急预防 E.免疫效果不如高效价的特异性免疫球蛋白 5.伤寒病人发病第一周内，分离病原菌应采取的标本是 A.血液 B.尿液 C.粪便 D.呕吐物 E.脑脊液 6.咽喉假膜标本涂片染色后，镜检出有异染颗粒的棒状杆菌，其临床意义在于诊断 A.结核病 B.军团病
临床微生物学检验名词解释
1.微生物microorganism：是存在于自然界的一大群形体微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百至数万倍才能观察到的微小生物。 2.微生物学microbiology：是生物学的一个分支，是研究微生物的类型、分部、形态结构、生命活动及其规律、遗传、进化，以及人类、动物、植物等相互关系的一门科学。 3.医学微生物学medical microbiology：主要是研究与医学和疾病有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性，以及特异性诊断和防治措施的学科，目的是控制和消灭微生物引起的感染性疾病，以保证和提高人类的健康水平。 4.细菌L型bacterial L form：细菌在体内外受到各种直接或间接的理化或生物因素影响后导致细胞壁肽聚糖直接破坏或合成被抑制进而形成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌。 5.?原生质体protoplast：细菌变成为L型后，细胞壁完全缺失，细菌仅被一层细胞膜包裹。 6.原生质球spheroplast：源于革兰阴性菌的L型。 7.中介体mesosome：细菌细胞膜可内陷形成一种特有的结构，是部分胞膜折叠形成的泡囊状、管状或薄层状结构，在电子显微镜下方能看到。 8.?质粒plasmid：是细菌染色体外的遗传物质，存在于细胞质中，是小的双股闭合环状DNA分子，可独立于染色体存在并复制，也可整合到染色体上。 9.芽孢：很多革兰阳性菌在一定条件下可在菌体内部形成具有多层膜包裹的原型或卵圆形的小体，是细菌代谢处于相对静止状态、维持生存、具有特殊抵抗力的休眠结构。 10.热原质pyrogen：是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热的的物质。 11.?噬菌体bacteriophage or phage：是感染细菌、真菌、放线菌和螺旋体等微生物的病毒，只能在活的宿主菌内复制，噬菌体的DNA不仅随着它的感染可在宿主菌之间及宿主菌与噬菌体之间传播，而且还能赋予宿主菌某些生物学性状。 12.?毒性噬菌体virulent phase：为感染宿主后，能在宿主菌细胞内独立复制增殖，产生许多子代噬菌体并最终裂解细菌的噬菌体。 13.溶源性细菌lysogenic：染色体上有前噬菌体的细菌。 14.溶原性噬菌体lysogenic phase：为感染宿主菌后，将其基因组整合到宿主菌染色体上或像质粒存在于细胞之中，随细菌的DNA复制而复制，并随细菌的分裂而传代的噬菌体。15.转座子transposon，Tn：是一类在细菌的染色体、质粒或噬菌体之间自行移动的遗传成分，是细菌基因组中一段特异的具有转位特性的独立DNA序列。 16.突变mutation：是细菌遗传物质的结构发生突然而稳定的改变，导致的变异可传于后代。 17.?转化transformation：是供体菌游离的DNA片段直接进入受体菌，使受体菌获得新的性状。 18.?接合conjugation：是细菌通过性菌毛相互连接沟通，将遗传物质（质粒）从供体菌转移给受体菌。 19.?转导transduction：是以温和噬菌体为载体，将供体菌的遗传物质转移到受体菌中，使后者获得新的性状。 20.?溶原性转换lysogenic conversion：是侵入细菌的噬菌体在溶原期可以前噬菌体形
临床微生物学及检验教学大纲
临床微生物学与检验教学大纲长沙医学院医学检验系
微生物学与检验教学大纲 前言 适用专业:医学检验专业 课程的性质、目的及任务： 微生物学及检验是医学微生物学、临床微生物学以及微生物学技术密切结合的一门新兴学科，是医学检验专业的一门专业主干课程，它综合了临床医学、免疫学、临床抗生素学和医院流行病学等几方面的知识和技能，研究感染性疾病的病原体特征，提供快速、准确的病原学诊断，密切结合临床提出及时有效的治疗方案，对医院内感染进行动态监控。 课程内容：该课程包括医学微生物学和临床微生物学两部分，前者主要研究与医学有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性、以及防治措施的学科。后者侧重于研究感染性疾病，快速、准确的诊断病原体的策略与方法，为临床诊断提供依据。教学内容覆盖了《医学微生物学》和《临床微生物学及微生物学检验》两本教材，在教学过程中将两本教材的内容有机融合在一起。本课程包括五篇：细菌学总论，细菌学各论及检验，真菌学及检验，病毒学及检验，微生物学检验。 课程教学基本要求： 1．掌握微生物的基本特性。 2．掌握病原微生物对人体的致病性以及人体的抗感染免疫 3．掌握微生物学检验的基本技术。 4．掌握各类临床标本的采集方法、检验程序及常规检验方法。 5．选择最佳鉴定方法对感染性病原体进行鉴定或快速诊断。 6．熟悉感染性疾病的预防及治疗原则。 7．了解病原微生物学检验的新方法、新技术及发展动向。 8．能够正确运用微生物实验室常用自动化仪器和微量装置。 9．能够进行正确的抗菌药物敏感实验并准确报告。 10.能够对实验结果进行正确的分析及致病性评价。 教学模式及教学环节： 微生物学及检验是一门实践性、应用性很强的课程，在广泛吸纳国内外先进教学方法的基础上，结合本课程的特点，经过多年的教学改革实践，形成了风格迥异的教学模式，即将传统沿用的“理论与实验教学”改为“理论与实验合二为一”，课堂上以学生为主体，以直观、形象、立体的实验内容为切入点，同时辅以讨论、交流、归纳等诸多教学实践活动，将理论与实验相融合，学生参与、老师引导并行，同时根据不同的教学内容，采用不同的灵活多样的教学实践活动，充分调动学生学习的主动性，课堂效率大大提高。本着不断充实和丰富提高的原则，在总结教改经验的基础上制定了本教学大纲。 学时分配： 在教学过程中理论与实验时间为1:1，本课程总学时数为162学时，其中：第一篇细菌学总论40学时（理论21学时，实验19学时）；第二篇细菌学各论及检验70学时（理论34学时，实验36学时）；第三篇真菌学及检验10学时（理论
化妆品微生物标准检验方法总则及注解
化妆品微生物标准检验方法总则及注解 中华人民共和国国家标准 化妆品微生物标准检验方法 UDC 668：576 .85.07 总则 (GB7918.1－87) Standard methods of microbiological examination for cosmetics General rules 1 样品的采集及注意事项 1.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10ml。包装量小的样品，取样量可酌减。 1.2 供检样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得启开，以防再污染。 1.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放不室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。 1.4 若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品作细菌检验，再将剩余样品作其他分析。 1.5 在检验过程中，从开封到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行。或在相应条件下，按无菌操作规定进行。 1.6 如检出烘大肠菌群或其他致病菌，自报告发出起该菌种及被检样品应保存一个月备查。 2 供检样品的制备 2.1 培养基和试剂 2.1.1 生理盐水 氯化钠 8.5g 蒸馏水 1000ml
溶解后，分装到加玻璃珠的锥形瓶内，每瓶90ml，121℃(15 1b)20min高灭菌。 2.1.2 SCDLP液体培养基 成分：酪蛋白胨 17g 大豆蛋白胨 3g 氯化钠 5g 磷酸氢二钾 2.5g 葡萄糖 2.5g 卵磷脂 1g 吐温80 7g 蒸馏水 1000ml 制法：将上述成分混合后，加热溶解，凋pH为7.2～7.3分装，121℃(15 1b)20min 高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的吐温80充分混合，冷却至25℃左右使用。注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用日本多胨代替。 2.1.3 灭菌液体石蜡。 2.1.4 灭菌吐温80。 2.2 仪器 2.2.1 天平。 2.2.2 灭菌锥形瓶：内含玻璃珠及90ml稀释液。 2.2.3 灭菌刻度吸管：10ml、5ml。 2.2.4 水浴箱。 2.2.5 灭菌研钵及灭菌研棒。 2.2.6 均质器。 2.3 不同类型样品的检样制备 2.3.1 液体样品
化妆品中微生物的控制指标和检测标准
化妆品中微生物的控制指标和检测标准 微生物对化妆品的污染，不仅影响产品本身的质量，而更严重的是它危及消 费者的健康和安全。因此世界各国极为重视，各国都制定了化妆品中微生物的卫生标准，将化妆品中微生物的污染状况作为产品的一个质量指标，以防止和控制微生物对化妆品的污染，这对提高化妆品的质量和保证化妆品的安全性具有重要的意义。 (1)化妆品中微生物的控制指标关于化妆品中微生物的控制指标，世界上并无统一标准，各国都是依据本国的情况自己制定化妆品的微生物指标。需要说明两点： ①在各国关于化妆品中微生物控制指标的第一项是细菌总数指标，如我国规定在眼部、口唇、口腔粘膜用化妆品以及婴儿和儿童用化妆品细菌总数不得大于500个／ml或500个／8，其他化妆品细菌总数不得大于1000个／mi或1000个屯。它是指在单位容量(m1)(或单位重量(g))中的细菌个数，这里讲的细菌计数单位是个。而在实际检测化妆品的细菌总数时，活的细菌总数是通过对检测试样处理后，在一定条件下培养生长出来的细菌菌落形式单位(colony—formingunits，以cfu表示)的个数。 菌落(colony)它是微生物细菌存在的一种特有形式，是指细菌在固体培养基上发育而形成的能被肉眼所识别的生长物，它是由数以万计的相同细菌聚积而成的，，故又有细菌集落之称。所以菌落总数是指每g或每m1化妆品中所含的活菌 能于固体培养基上，在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。基于化妆品 中心以化工行业技术需求和科技进步为导向，以资源整合、技术共享为基础，分析测试、技术咨询为载体，致力于搭建产研结合的桥梁。以“专心、专业、专注“为宗旨，致力于实现研究和应用的对接，从而推动化工行业的发展。
化妆品微生物标准检验方
化妆品微生物标准检验方法 总则 1 范围 本标准规定了化妆品微生物学检验的基本要求。 本标准适用于化妆品样品的采集、保存及供检样品制备。 2 仪器和设备 2.1 天平，0.01g 2.2 高压灭菌器。 2.3 振荡器。 2.4 三角瓶，250mL。 2.5 玻璃珠。 2.6 玻璃棒。 2.7 刻度吸管，1mL、10mL。 2.8 研钵或均质器。 2.9 恒温水浴箱。 3 培养基和试剂 3.1 生理盐水 成分：氯化钠8.5g 蒸馏水加至1000mL 溶解后，分装到加玻璃珠的三角瓶内，每瓶90mL，103.43kPa（121℃15 lb）20min 高压灭菌。 3.2 SCDLP 液体培养基 成分：酪蛋白胨17g 大豆蛋白胨3g 氯化钠5g 磷酸氢二钾2.5g 葡萄糖2.5g 卵磷脂1g 吐温80 7g 蒸馏水1000mL 制法：先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后，再与其它成分混合，加热溶解，调pH 为7.2～7.3 分装，103.43kPa（121℃15 lb）20min 高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的 吐温80 充分混合，冷却至25℃左右使用。 注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。 3.3 灭菌液体石蜡。 3.4 灭菌吐温80。 4 样品的采集及注意事项 4.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包4 装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g 或10mL。包装量小于20g 的样品，采样时可适当增加样品包装数量。 4.2 供检验样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防 止样品被污染。 4.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。 4.4 若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品 做细菌检验，再将剩余样品做其它分析。 4.5 在检验过程中，从打开包装到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散， 所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在符合生物安全要求的实验室中进行。 5 供检样品的制备 5.1 液体样品 5.1.1 水溶性的液体样品，可量取10mL 加到90mL 灭菌生理盐水中，混匀后，制成1：10 检液。