紫外消毒效果验证方案

紫外线消毒效果验证方案

方案编号：V-SOP-015-01

生效日期：年月日

制订人/日期审核人/日期批准人/日期实

施

实施日期：年月日

目录

一、目的 (3)

二、范围 ............................................................................................................. 错误！未定义书签。

三、验证小组成员及其职责 (3)

四、培训 (3)

五、相关法规或文件的符合性 (4)

六、设备描述 (4)

1. 设备功能描述 (4)

2. 设备参数描述........................................................................................... 错误！未定义书签。

七、确认前准备 (4)

八、验证内容 ..................................................................................................... 错误！未定义书签。

1.1设计确认.................................................................................................. 错误！未定义书签。

1.2安装确认.................................................................................................. 错误！未定义书签。

1.3 运行确认................................................................................................. 错误！未定义书签。

1.4 性能确认................................................................................................. 错误！未定义书签。

九、偏差及偏差处理 (7)

十、完成验证报告 (7)

十一、验证结果评审 (7)

十二、验证文件变更历史及归档 (7)

十三、附件 (7)

一、 目的

本方案为确认紫外线灭菌灯能够对物体表面进行有效的消毒而进行验证。进入净化车

间的零配件或其它物品通过传递窗活，进入微生物室的物品通过传递窗，经过紫外消毒后进入微生物室。为了确认传递窗紫外灯的消毒效果，特起草方案对其进行验证。本验证用于生产车间、微生物室、无菌室传递窗、车间物料缓冲间的紫外灯表面消毒效果检查。

验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需变更时，应填写验证方案变更申请及批准书，报验证委员会批准。 二、 验证小组成员及其职责

三、培训

验证小组组长应在本确认方案批准后组织对本确认小组成员及其相关操作人员进行本确认方案及确认与本方案相关 SOP 、技术资料的专项培训，并确保所有参加本次确认工作的人都已悉知本方案及相关 SOP 、技术资料的要求。

部门 验证小组职务 姓 名 具体职责

是否培训 QA 部

验证负责人

1. 负责确认方案及报告的最终审核批准。 □是 □否

工程部 组员 1. 负责验证的实施。

2. 负责冻干制剂车间净化空调系统的操作、清洁、维护保养，并做好相应的记录。

3. 负责仪器，仪表的校正（附表一）。 □是 □否

生产部 组员 1． 负责制定验证方案及报告。 2． 负责验证的实施。 3． 验证数据的收集。 □是 □否

QC 部 组员 1． 负责与此验证相关的检验，

并出具检验报告。 □是 □否

QA 部 组员 1. 负责验证过程的跟踪、取样。

□是 □否

四、相关法规或文件的符合性

《药品生产验证指南》（2003年版）

《药品生产质量管理规范》（2010年修订版）

洁净厂房设计规范 GB50073-2001

五、功能描述

1. 设备功能描述：

紫外线灭菌灯（简称紫外灯）主要用于洁净工作台、层流罩、物料传递窗、物料传递间或洁净室空气和物体表面的消毒。紫外线波长为136～390nm，以253.7nm的杀菌力最强，但紫外线穿透力极弱，只适用于表面杀菌。紫外灯的杀菌力度随使用时间增加而减退，以点燃100h的输出功率为额定输出功率，把紫外灯点到70％额定功率的点灯时间定为平均寿命，紫外灯使用超过平均寿命时，就达不到预期效果，则必须更换，国产紫外灯“平均寿命一般为2000h。紫外灯通常按相对湿度为60％的基准设计，室内湿度增加时，照射量应相应增加。紫外线强度要求在操作面上达40uW/cm2以上。

六、确认前准备

1.文件资料确认

序号文件名称文件编号存放地点

1 物料进出洁净区标准操作规程C-SOP-006-01 生产部

培养基的配制

紫外灯、照明灯管理制度

2.仪器、试剂的准备：

2.1.仪器

序号仪器名称型号或规格

1 菌落计数器HS-1300-V型

2 紫外线强度测定仪

3 稳压器220V

4 细菌培养箱

5 霉菌培养箱

2.2.器材

序号器材名称型号或规格

1 灭菌刻度吸管1ml，10ml

2 灭菌试管

3 灭菌平皿

4 酒精灯

5 载体 1.0×1.0cm的玻片

2.3.试剂

2.3.1.营养肉汤培养基

2.3.2.改良马丁培养基

2.3.3.金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26 003]

2.3.4.枯草芽孢杆菌[CMCC（B）63 501]

2.3.5.大肠杆菌[CMCC（B）44 102]

2.3.6.白色念珠菌[CMCC（F）98 001]

2.3.7.稀释液（0.1％吐温80，0.1％蛋白胨溶液）

2.3.8.枯草杆菌黑色变种（ATTC 9372）芽孢黑曲霉（ATTC16404）等细胞及其芽孢和

真菌悬液及菌片。

2.4.紫外线照度计。

3. 培养基的制备：

序号名称用量配制方法

1 营养肉汤培养基20g

称取营养肉汤培养基20克，加1000ml纯化水，加热

溶解，加热至沸，冷却至常温，分装于适宜容器，置

高压灭菌器灭菌121℃×30分钟。

纯化水1000ml

2 改良马丁培养基28.0g 根据需要量称取改良马丁培养基粉，按配方比例加入

纯化水，水浴加热使溶解，调pH至6.4±0.2，分装于

适宜容器，置高压灭菌器灭菌121℃×30分钟。

纯化水1000ml

4.方法验证试验

4.1.辐照强度测定：开启紫外灯5min后，用中心波长为253.7nm的紫外线强度测定

仪在灯管下方垂直1.5m处分别测量其辐照度值（uW/cm2）。

4.2.测量时，电压应稳定在220V。

4.3.普通型或低臭氧型直管紫外线灯（30W），在灯管下方垂直1.5m的中心处，新

灯管的辐照度值应≥90 uW/cm2 。使用中的灯管的辐照度值应≥70 uW/cm2 ，低

于此值者应予更换。

4.4.照射剂量：表面消毒接受的照射剂量，应达杀灭目标微生物所需。对大肠杆菌，

照射剂量应达到7.5×103u W·s/cm2,对金黄色葡萄球、白色念珠菌、枯草芽孢

杆菌应达到2.53×104u W·s/cm2。

4.5.照射剂量计算：

照射剂量（u W·s/cm2 ）＝紫外灯管强度（uW/cm2）×时间（s）

根据照射剂量确定物品的放置位置与紫外灯的照射时间。

细菌及其芽孢和真菌杀灭效果的测定

5.菌液的制备

序号接种菌种名称接种培养基配制方法

1 金黄色葡萄球菌新鲜培养物

营养肉汤培养基30～35℃培养18～24小时大肠杆菌新鲜培养物

2 枯草芽孢杆菌新鲜培养物

白色念珠菌新鲜培养物改良马丁培养基23～28℃培养24～48小时

5.1.金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、白色念珠菌培养后，将菌液进行

活菌计数。

5.2.将灭菌载体平放于灭菌平皿内，每个载体滴注定量菌悬液，（载体回收菌量达5

×105～5×106 cfu/片），涂匀，放37℃培养箱烘干备用。

5.3.开启紫外灯5min后，将16个染菌玻片平放于灭菌平皿内，水平放于距紫外1.5m、

处照射，于4个不同间隔时间（15min、30 min、45 min、60 min）各取出4个染菌玻片，分别投入4个盛有5ml洗脱液试管中，振打80次。

5.4.经适当稀释后，取1ml洗脱液，作平板倾注，每个染菌玻片接种两个，细菌放

30～35℃培养48小时作活菌计数，真菌放23～28℃培养72小时作活菌计数。

5.5.阳性对照，除不做照射处理外，取4个染菌玻片，分别投入4个盛有5ml洗脱

液试管中，振打80次。培养按5.4同样操作。

5.6.计算杀灭率

阳性对照回收菌数－试验组回收菌数

杀灭率（％）＝×100％

阳性对照回收菌数

5.7.判定标准对指示菌杀灭率≥99.9％判为消毒合格。

验证结果记录：试验菌数量测定原始记录

七、偏差及偏差处理

1.验证方案与实际情况不符，或者无法执行时，需要及时修改验证方案。

2.当验证数据没有达到预期结果时，分析数据偏离程度，并确定：是否进行重复实验；

是否扩大数据偏离范围；是否需要重新校正测量仪器、方法等。

3.偏差及偏差处理必须如实、详细记录在验证报告中。

八、完成验证报告：

1.整理总结验证过程各项验证、试验结果记录。

2.拟定日常监测程序及验证周期。

3.验证结果评定与结论。

九、验证结果评审：

验证委员会负责对验证结果进行综合评审，做出验证结论。

十、验证文件变更历史及归档：

1.变更历史

2.由验证小组组长负责整理记录及报告，交QA部存档。

十一、附件

附表一 仪器仪表校验记录

检查人： 日期：

名称 仪器编号

是否有校验合格证

校验日期 有效期至

[是][否] 年 月 日 年 月 日 [是][否] 年 月 日 年 月 日 [是][否] 年 月 日 年 月 日 [是][否] 年 月 日 年 月 日 [是][否] 年 月 日 年 月 日 [是][否] 年 月 日 年 月 日 [是][否] 年 月 日 年 月 日 [是][否] 年 月 日 年 月 日 [是][否] 年 月 日 年 月 日 [是][否] 年 月 日 年 月 日 [是][否] 年 月 日

年 月 日

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[是][否] 年 月 日 年 月 日