2020届河北衡中同卷新高考押题信息考试(一)生物试卷

2020届河北衡中同卷新高考押题信息考试（一）

生物

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注意事项：

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4、答题前，请先将自己的姓名、准考证号用0.5毫米黑色签字笔填写在试题卷和答题卡上的相应位置，并将准考证号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。用2B铅笔将答题卡上试卷类型A后的方框涂黑。

5、选择题的作答：每个小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非选择题答题区域的答案一律无效。

6、主观题的作答：用签字笔直接答在答题卡上对应的答题区域内。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域的答案一律无效。如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新答案；不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。

7、保持答题卡卡面清洁，不折叠，不破损，不得使用涂改液、胶带纸、修正带等。

8、考试结束后，请将本试题卷、答题卡、草稿纸一并依序排列上交。

一、单项选择

1.研究发现：酸可以催化蛋白质、脂肪以及淀粉的水解。研究人员以蛋清为实验材料进行了如下实验：

下列相关说法正确的是( )

A. ①②③过程中，蛋白质的空间结构不变

B. 蛋清中的蛋白质分子比蛋白块a中的蛋白质分子更容易被蛋白酶水解

C. 处理相同时间，蛋白块b明显小于蛋白块c，可证明与无机催化剂相比，酶具有高效性

D. 将盐酸与蛋白酶、蛋白块混合，可直接测定蛋白酶在此pH下的催化效果

【答案】C

【解析】

【详解】A、高温、强酸、酶都会破坏蛋白质分子的空间结构，从而使蛋白质变性，因此①②③过程中，蛋

白质的空间结构会发生改变，A错误；

B、蛋白快a中的蛋白质分子比蛋清中的蛋白质分子更容易被蛋白酶水解，B错误；

C、酶的高效性是通过和无机催化剂对比体现出来的，处理相同时间，由蛋白酶催化形成的蛋白快b明显小于由盐酸催化产生的蛋白快c，因此可证明与无机催化剂相比，酶具有高效性，C正确；

D、强酸可导致蛋白酶变性失活，所以将盐酸与蛋白酶、蛋白快混合，不能测定蛋白酶在此PH下的催化效果，D错误。

故选C。

2.某同学利用某种大小相同的菠菜叶片，分组进行实验。探究不同温度下，菠菜叶片重量的变化情况（均考

mg):

虑为有机物的数量变化），操作流程及记录结果如下图表（单位：

A. 该同学所进行实验

的变量为温度B. 从上表信息可知，在260C-290C之间，随着温度的升高，呼吸作用逐渐增强C. 280C时光合作用实际合成的有机物的量为5mg/h

D. 260C -290C之间，随着温度升高，实际光合作用强度也增强

【答案】C

【解析】

【分析】

分析表格：表中a表示菠菜叶片1h呼吸作用消耗有机物量，代表呼吸速率；b表示1h光合作用制造的有机物总量与2h呼吸作用消耗的有机物总量的差值，因此光合作用实际合成的有机物的量可以用b+2a表示，所以在26℃-29℃之间，光合作用实际合成的有机物的量依次为3+1×2=5 mg/h、3+2×2=7 mg/h、2+3×2=8 mg/h、1+4×2=9 mg/h。

【详解】本题实验的目的探究不同温度下菠菜叶片重量的变化情况，因此该实验的自变量是温度，A正确；表中a表示细胞呼吸速率（1h细胞呼吸消耗有机物的量），由表中数据可知，在26℃-29℃之间，随着温度的升高，呼吸作用逐渐增强，B正确；由以上分析可知光合作用实际合成的有机物的量可以用b+2a表示，因此28℃时光合作用实际合成的有机物的量为2+3×2=8mg/h，C错误；由以上分析可知，在26℃-29℃之间，光合作用实际合成的有机物的量依次为5mg/h、7mg/h、8mg/h、9mg/h，由此可见，在26℃-29℃之间，随着温度升高，实际光合作用强度也增强，D正确。

3.下图是某单基因遗传病的家系图，下列相关分析错误的是（）

A. 12号带有致病基因的概率是1/2

B. 该病的遗传方式为常染色体隐性遗传

C. 7号与8号再生一个患病男孩的概率是1/12

D. 11号的基因型有两种可能，杂合子的可能性大于纯合子

【答案】A

【解析】

【分析】

本题考查常见的人类遗传病的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系、分析图形以及解决问题的能力。

【详解】据图分析，9号是Aa，但是不知道10号的基因型，所以无法预测12的基因型，A错误；图中1号、2号正常，他们的女儿6号患病，说明该病是常染色体隐性遗传病，B正确；1号、2号正常，他们的女儿6号患病，说明1号、2号都是杂合子Aa，则7号是Aa的概率是2/3，因为3号是aa，所以8号是Aa，则7号与8号再生一个患病男孩的几率是2/3×1/4×1/2=1/12，C正确；7号是AA的概率为1/3、Aa的概率是2/3，8号是Aa，由于11号个体不患病，排除aa的可能，因此11号为2/5AA、3/5Aa，即杂合的可能性大于纯合的可能性，D正确。故选A。

4.已知某牵牛花的花色由两对独立遗传的基因控制，这两对基因与花色的关系如图所示．此外，a基因存在时抑制B基因的表达．现将基因型为AABB的个体与基因型为aabb的个体杂交得到F1，下列分析正确的是

A. F1全部开红色花

B. 图示过程体现基因对性状的直接控制

C. F1自交后代中花色的表现型及比例是红：白：粉=3：4：9

D. F1测交后代中花色的表现型及比例是红：白：粉=1：1：2

【答案】C

【解析】

【分析】

根据题意和图示分析可知：基因A控制酶A的合成，酶A能将白色色素转化成粉色色素，基因B能控制酶B 的合成，酶B能将粉色色素转化为红色色素。又已知a基因对于B基因的表达有抑制作用，因此红花的基因型为AAB_，粉花的基因型为A_bb和AaB_，白花的基因型为aaB-和aabb。

【详解】基因型为AABB的个体与基因型为aabb的个体杂交得到F1，其基因型为AaBb，由于a基因存在时抑制B基因的表达，所以F1全部开粉色花，A错误；图示过程体现了基因通过控制酶的合成来控制代谢过程，从而控制生物的性状，属于基因对性状控制的间接途径，B错误；F1自交后代基因型可表示为A-B-：A-bb：aaB-：aabb═9：3：3：1．其中基因型为aaB-和aabb的个体为白色；基因型为AAB-的个体为红色；由于a 基因存在时抑制B基因的表达，所以基因型为AaB-和A-bb的个体为粉色。因此，F1自交后代中花色的表现型及比例是红：白：粉=3：4：9，C正确；F1测交后代基因型为AaBb、Aabb、aaBb和aabb，因此，花色的表现型及比例是白：粉：红=2：2：0，D错误。

故选C。

5.下列有关生物体内的物质的叙述正确的是（）

A. 构成烟草花叶病毒遗传物质和细胞能量“通货”的化学元素种类相同

B. 细胞干重中含量最多的化学元素和化合物分别是氧和蛋白质

C. 人体内环境中存在二氧化碳、血浆蛋白、尿素、糖原等物质

D. 细胞膜由脂质和蛋白质组成，脂质中磷脂最丰富

【答案】A

【解析】

【分析】

1、内环境成分

营养物质：水、无机盐、葡萄糖、氨基酸、甘油、脂肪酸、维生素、血浆蛋白等。

细胞合成分泌的物质：抗体、神经递质、激素等。

细胞代谢的产物：尿素、二氧化碳等。

2、细胞膜主要由脂质（约50%）和蛋白质（约40%）组成，此外还有少量糖类（约2%~10%）。

【详解】RNA是烟草花叶病毒的遗传物质，ATP是细胞的能量“通货”，二者的化学元素组成均是C、H、O、N、P，A正确；细胞干重中含量最多的化学元素和化合物分别是碳和蛋白质，B错误；糖原位于肝细胞或肌细胞内，不属于内环境的成分，C错误；细胞膜主要由脂质和蛋白质组成，还含有少量的糖类，其中脂质中磷脂最丰富，D错误。故选A。

【点睛】判断元素的含量时，要明确是鲜重还是干重，若是鲜重时氧元素最多，若是干重时碳元素最多。

6.下列各项中能得到精确的实验数据的是（）

A. 用标志重捕法调查藏羚羊的种群密度

B. 对培养液中的酵母菌进行多次计数，取其平均值

C. 孟德尔在豌豆杂交实验中对子代表现型的数量统计

D. 调查人群中白化病人发病率时调查足够大的群体，随机取样并统计

【答案】C

【解析】

【分析】

解答本题时注意审清题干“试验中得到的实验数据为精确值”，有些实验结果是大约估算值，有的是精确的，这需要根据实验目的及方法来判断。

【详解】用标志重捕法调查藏羚羊的种群密度，得到的是估算值，A错误；对培养液中的酵母菌进行多次计数，取其平均值，得到的酵母菌数量是估算值，B错误；孟德尔在豌豆杂交实验中对子代表现型的数量统计，由于直接数出后代的数量，因此得到的是精确值，C正确；调查人群中白化病人发病率时调查足够大的群体，随机取样并统计，由于不是对所有个体进行调查，只能进行抽样调查，所以得到的数值是估算值，D错误。

二、非选择题

7.细胞代谢能在温和条件下快速进行，是由于有酶的催化作用。下图是酶发挥作用的图解，纵坐标表示能量的相对数值。

（1）酶能够加快化学反应速度的原因是酶可以降低化学反应的活化能，从甲图看，酶降低的化学反应活化能是__________（相对值）。与无机催化剂相比较，酶具有高效性，原因是__________在乙图中画出无机催化剂发挥作用的曲线并用文字标明名称。

（2）科技人员从植物中提取了一种淀粉酶，为探究35 ℃温度是否为该淀粉酶的最适温度，某同学设计如下实验：在高于和低于35℃温度下等梯度各设置若干组，按实验要求在各组加入淀粉溶液和该淀粉酶溶液，10分钟后检测实验结果。

①该实验通常用__________（试剂）检测实验结果，通过观察__________来判断反应程度。

②该实验没有调节pH值，混合物pH =7也并不一定是该酶的最适pH值。你认为该实验是否必须在最适pH 值下进行__________（填“需要”或“不需要”），理由是____________________________。

③若甲图酶催化的曲线是最适pH但不是最适温度下的曲线，同样在乙图中画出最适pH最适温度下的曲线并用文字标明。______

【答案】(1). 20(2). 酶降低活化能的作用更显著(3). 略(4). 碘液(5). 是否出现蓝色及颜色（蓝色）深浅(6). 不需要(7). 在一定范围内pH的改变不影响该酶的最适温度（或不会导致该

酶最适温度改变）(8).

【解析】

试题分析：本题考查酶，考查对酶的作用机理、影响因素的理解。解答此题，可根据甲图找出催化剂降低

的反应所需的活化能，反应所需的活化能越低，说明催化效率越高。

（1）从甲图看，酶降低的化学反应活化能是70—50=20。与无机催化剂相比较，酶具有高效性，原因是酶降低活化能的作用更显著。无机催化剂可以降低化学反应活化能，但降低活化能的作用不如酶显著。（2）①探究该淀粉酶的最适温度，通常用碘液检测实验结果，通过观察是否出现蓝色及颜色（蓝色）深浅来判断反应程度。

②该实验不需要在最适pH值下，原因是该实验的自变量是温度，pH为无关变量，保持各实验组pH相同即可。在一定范围内pH的改变不影响该酶的最适温度（或不会导致该酶最适温度改变）。

③甲图酶催化的曲线是最适pH但不是最适温度下的曲线，在最适pH最适温度下反应所需的活化能应更低。

8.回答下列与噬菌体侵染细菌实验有关的问题：

I．1952年，赫尔希和蔡斯利用放射性同位素标记的新技术，完成了著名的噬菌体侵染细菌的实验，下面是实验的部分步骤：

（1）实验的第一步用35S标记噬菌体的蛋白质外壳；第二步把35S标记的噬菌体与细菌混合。如上图所示，第四步离心后的实验结果说明：____________________。

（2）若要大量制备用35S标记的噬菌体，需先用含35S的培养基培养________________，再用噬菌体去侵染_______________。

Ⅱ．在赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌实验中，用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌，在理论上，上清液中不含放射性，下层沉淀物中具有很高的放射性；而实验的实际最终结果显示：在离心后的上清液中，也具有一定的放射性，而下层的沉淀物放射性强度比理论值略低。

（1）在理论上，上清液放射性应该为0，其原因是_______________________________

（2）由于实验数据和理论数据之间有较大的误差，由此对实验过程进行误差分析：

a．在实验中，从噬菌体和大肠杆菌混合培养到用离心机分离，这一段时间如果过长，会使上清液的放射性

含量升高，其原因是______________________________。

b．在实验中，如果有一部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌细胞内，将__________（填“是”或“不是”）误差的来源，理由是_____________________。

（3）噬菌体侵染细菌实验证明了_______________。

（4）上述实验中，__________（填“能”或“不能”）用15N来标记噬菌体的DNA，理由是

__________________________

【答案】(1). 侵染时，T2噬菌体的蛋白质外壳没有进入细菌体内(2). 大肠杆菌(3). 含35S的噬菌体(4). 被32P标记的是噬菌体的DNA，在侵染细菌时，理论上应将噬菌体的DNA全部注入细菌体内，离心后沉淀(5). 部分含32P的噬菌体被细菌裂解释放(6). 是(7). 含32P的噬菌体没有侵染细菌，离心后含32P的噬菌体会到上清液中(8). DNA是遗传物质(9). 不能(10). N元素在DNA和蛋白质中都含有

【解析】

【分析】

噬菌体是病毒，无细胞结构，不能独立生活，故对其进行标记需要先用含放射性的培养基培养大肠杆菌，再用噬菌体侵染被标记的大肠杆菌。

应该用特征元素35S来标记蛋白质外壳，用32P对DNA进行标记。

【详解】Ⅰ（1）35S标记的噬菌体侵染未标记的大肠杆菌，保温、搅拌、离心的结果，放射性主要存在于上清液中，说明蛋白质外壳未进入大肠杆菌细胞内。

（2）要制备35S标记的噬菌体，应该先用含35S的培养基培养大肠杆菌，再用噬菌体侵染被标记的大肠杆菌，即可获得带35S标记的噬菌体。

Ⅱ用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌时，放射性主要集中在沉淀物中。

（1）沉淀物中是较重的大肠杆菌，上清液是较轻的噬菌体。噬菌体侵染大肠杆菌时，只有DNA注入大肠杆菌体内，搅拌离心后未标记的蛋白质外壳在上清液中，被侵染的含32P的大肠杆菌在沉淀中。故理论上上清液放射性应该为0.

（2）a.若保温时间过长，会部分含32P的噬菌体被细菌裂解释放出来，进入上清液中，导致上清液放射性增强。

b. 若保温时间过短，含32P的噬菌体没有侵染细菌，离心后含32P的噬菌体会到上清液中，上清液的放射性也会增加，也会造成误差。

（3）噬菌体侵染细菌的实验证明了DNA是遗传物质。

（4）该实验中应该特征元素35S来标记蛋白质外壳，用32P对DNA进行标记，因为S只存在于蛋白质中，P主要存在于DNA中，这样可以对DNA和蛋白质进行分别标记。若用C、H、O、N进行标记，则会同时标记DNA和蛋白质，无法得出相应的结论。

【点睛】肺炎双球菌体内转化实验只能证明存在转化因子；肺炎双球菌体外转化实验可以证明DNA是遗传物质，其他物质不是；噬菌体侵染细菌的实验可以证明DNA是遗传物质。

9.排便是一种复杂的反射活动，下图为排便反射的部分过程，其中肛门内外括约肌都是一种环形肌肉组织，直肠位于肛门上部。图中“+”表示神经冲动增强，“－”表示神经冲动减弱。请据图回答：

(1)直肠在正常情况下是空虚的，但肠道运动推进粪便进入直肠时，当直肠腔内压力达到某一阈值，可刺激直肠壁内压力感受器产生神经冲动。发出冲动传入腰骶部脊髓内的低级排便中枢，同时上传至___________而产生便意。该过程中兴奋在神经纤维和突触处的传输方向分别是___________(“单向”“双向”)

(2)如环境许可，大脑皮层即发出冲动使排便中枢兴奋性___________，使直肠收缩，肛门括约肌舒张，产生排便反射。同时高级中枢还可有意识地先行深吸气，声门关闭，增加胸腔压力，隔肌下降、腹肌收缩，增加腹内压力，促进直肠收缩，这种调节的意义在于___________。

(3)如环境不允许，在高级神经中枢的控制下阴部神经传出的神经冲动增加，肛门外括约肌___________，制止粪便排出。外括约肌的紧缩力比内括约肌大30%~60%，因而能制止粪便由肛门排出，这可拮抗排便反射，一段时间后直肠内粪便又返回乙状结肠或降结肠，一定范围内，这种结肠逆蠕动对人体正常生命活动是

___________(“有利的”、“不利的”)。但若经常抑制便意，则可使直肠对粪便的压力刺激的敏感性

___________，加之粪便在大肠内停留过久，水分被过多的吸收而变干硬，产生排便困难，这是引起便秘的原因之一。

(4)婴儿分娩时会产生“假性便意”。请分析原因___________。

【答案】(1). 大脑皮层(2). 双向单向(3). 增强(4). 使排便反射得到加强，有利于快速充分排便(5). 收缩(6). 有利(7). 降低(8). 分娩时婴儿头部会间接压迫直肠壁压力感受器产生神经冲动，进而引起排便反射

【解析】

【分析】

题文中给出的是排便反射的示意图，反射活动必须通过反射弧来实现，反射弧的组成为：感受器→传入神经→神经中枢→传出神经→效应器。反射弧的结构必须保持完整，任何一个环节出现问题，反射活动就无法进行。但是反射弧是完整的，如果没有外界刺激不会出现反射活动。

【详解】（1）当直肠腔内压力达到某一阈值，可刺激直肠壁内压力感受器产生神经冲动。发出冲动传入腰骶部脊髓内的低级排便中枢，同时上传至大脑皮层而产生便意。该过程中兴奋在神经纤维传输方向是双向的，在突触处由于递质只能传到下一个神经元，所以的传输方向是单向的。

（2）如环境许可，大脑皮层即发出冲动使排便中枢兴奋性增强，直肠收缩，肛门括约肌舒张，产生排便反射。同时高级中枢还可有意识地先行深吸气，声门关闭，增加胸腔压力，隔肌下降、腹肌收缩，增加腹内压力，促进直肠收缩，这种调节的意义在于使排便反射得到加强，有利于快速充分排便。

（3）排便时，肛门内外括约肌舒张，因此制止排便时，肛门外括约肌收缩，制止粪便排出。外括约肌的紧缩力比内括约肌大30%~60%，因而能制止粪便由肛门排出，这可拮抗排便反射，一段时间后直肠内粪便又返回乙状结肠或降结肠，一定范围内，这种结肠逆蠕动对人体正常生命活动是有利的。但若经常抑制便意，则可使直肠对粪便的压力刺激的敏感性降低，加之粪便在大肠内停留过久，水分被过多的吸收而变干硬，产生排便困难，从而引起便秘。

（4）婴儿分娩时会产生“假性便意”。原因是分娩时婴儿头部会间接压迫直肠壁压力感受器产生神经冲动，进而引起排便反射。

【点睛】神经纤维上是双向的，因为它受到刺激后，变成了外负内正，而其它的地方是外正内负，于是两边都有了电位差，出现了电流。于是神经冲动向两边传导。而神经元间是由突触小体里的突触小泡释放递质传到下一个神经元的，不能倒过来传导，是单向的。

反射是指机体对内在或外在刺激有规律的反应。可分为先天性反射和后天习得性反射两种，通常称为非条件反射和条件反射。

10.下表是森林生态系统能量流动情况调査结果，表中的A、B、C表示生态系统三种生物成分，Pg表示生物同化作用固定能量的总量，Pn表示生物体贮存的能量(Pn=Pg- R),R表示生物呼吸消耗的能量。下图是该森林在遭受大火完全烧毁前后（b点为发生火灾的时间），草本、灌木和乔木植物体内贮存的能量变化示意

图。

（1）据表分析回答:从能量输入和输出角度看，这个生态系统仍处于逐渐发展壮大之中，判断的依据是

_________________________________________________________ 。

（2）据图分析回答：

①a-b段，三类植物在群落中的斑块镶嵌分布，形成了群落的________结构。

②b-d段，显示火灾植物群落的演替情况，该演替类型属于_____演替。

③在整个演替过程中，生产者固定的太阳能总量的变化趋势是___________。

④该生态系统具有自我调节能力的基础是_____________。

【答案】(1). 该生态系统输入的总能量大于所有生物消耗能量之和或答Pg(生产者的)>R(所有生物的呼吸消耗)(2). 水平结构(3). 次生(4). 逐渐增大直至稳定(5). 负反馈调节

【解析】

【分析】

根据表格数据分析，已知Pg表示生物同化作用固定能量的总量，Pn表示生物体贮存的能量（Pn=Pg-R），R 表示生物呼吸消耗的能量，则B同化的能量最多，贮存的能量和呼吸消耗的能量也最多，故B是生产者，再根据能量传递效率为10%-20%计算可知A是消费者，则C是分解者。据图分析，曲线图中a～b段，同一地段种群密度有差别，常呈镶嵌分布，为群落水平结构；b～d段，从各种植物出现先后时间，推断演替的过程是：草本植物群落→灌木群落→乔木群落。

【详解】（1）在该生态系统中，从能量输入和输出角度看，输入的总能量为生产者固定的总能量Pg（生产者）=870.7千焦/m2/年，输出的总能量=所有生物消耗能量之和=13.1+501.3+0.6+79.1+191.4=785.5千焦/m2/年，870.7>785.5，即生态系统输入的总能量大于所有生物消耗能量之和，说明这个生态系统仍处于逐渐发展壮大之中。

（2）①图中a～b段，三类植物在群落中的斑块镶嵌分布，体现群落水平结构的特点。

②b～d段，从各种植物出现的先后时间可推断演替的过程是：草本植物群落→灌木群落→乔木群落，属于次生演替。

③在整个演替过程中，生产者固定的太阳能总量越来越多，最后趋于稳定。

④负反馈调节生态系统自我调节能力的基础。

【点睛】解答本题的关键是掌握能量流动的特点，能够根据表格数据中同化量的多少和传递效率判断A、B、C代表的生物成分的种类，明确生态系统的能量流动是从生产者固定太阳能开始的。

11.酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题：

（1）配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的

____________________，及时对培养基进行分装，并进行____________________灭菌。

（2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约_______________（在25 ℃、50 ℃或80 ℃中选择）的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。

（3）挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有___________________。a．为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌

b．划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落

c．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量

d．可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株

（4）步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和__________________供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数，理论上_______色细胞的个数应不少于__________，才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。

【答案】(1). pH(2). 高压蒸汽（湿热）(3). 50 ℃(4). a、b、d(5). 氧气(6). 无(7).

30

【解析】

【分析】

配制培养基的操作步骤为称量→溶化→定容→调pH→培养基的分装→包扎→灭菌。据图分析，从土壤样品中分离该类酵母的实验流程为①称量土样→②梯度稀释→③平板浇注分离→④划线纯化→⑤扩大培养。【详解】（1）配制培养基时，按照培养基配方准确称量、溶化，然后调节培养基的pH并对培养基进行分装，接着利用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。

（2）在步骤③中待培养基冷却至50 ℃左右时倒平板。

（3）接种针、接种环使用前都必须灭菌，做到无菌操作，a正确；划线时应避免划破培养基表面，以防止大量酵母菌聚集，不能形成正常菌落，b正确；该实验的目的是获得利用工业废甲醇作为碳源的酵母菌，不需要测定酵母菌中的甲醇含量，c错误；可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株，d正确。

（4）酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖，因此为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和氧气；活细胞膜具有选择透过性，经等体积台盼蓝染液染色，无色细胞才能计数；为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数（假设为n），达到每毫升3×109个活细胞的预期密度，而台盼蓝与菌液等体积加入，则n÷80×400÷（0.1×103）×1000÷2=3×109，n=30，即每个中方格中酵母菌不少于30。

【点睛】解答本题

成及实验细节，根据公式计算血球计数板中活菌的数量。的关键是识记微生物的培养基的配制过程、灭菌、接种等知识点，掌握血球计数板的构