高压脉冲电场灭菌参数及电穿孔机制研究

摘要.....................................................................................................................................................I ABSTRACT.........................................................................................................................................II 目录...................................................................................................................................................IV 第一章绪论.. (1)

1.1本文选题的研究背景及意义 (1)

1.2传统灭菌技术 (2)

1.2.1热力灭菌 (2)

1.2.2辐照灭菌 (3)

1.2.3化学灭菌 (3)

1.3高压脉冲电场灭菌技术的原理与优势 (4)

1.3.1高压脉冲电场技术原理 (4)

1.3.2高压脉冲电场灭菌技术的优点 (6)

1.4高压脉冲电场技术发展与现状 (6)

1.4.1国内外研究现状 (6)

1.4.2高压脉冲电场灭菌技术的主要应用领域 (7)

1.5本文主要研究内容 (8)

第二章高压脉冲电场技术灭菌参数优化 (10)

2.1实验材料 (10)

2.2实验设备 (10)

2.3实验方法 (12)

2.3.1微生物菌种 (12)

2.3.2培养基配置 (12)

2.3.3微生物菌种培养 (12)

2.3.4高压脉冲电场处理 (13)

2.3.5微生物计数 (13)

2.4结果与分析 (13)

2.4.1电场强度对酵母细胞与大肠杆菌灭菌效果的影响 (13)

2.4.2高压脉冲电场处理时间对酵母细胞灭菌效果的影响 (14)

2.4.3高压脉冲电场脉宽对酵母细胞和大肠杆菌灭菌效果的影响 (14)

2.4.4高压脉冲电场频率对酵母细胞存活率的影响 (15)

2.5本章总结 (15)

第三章电场强度对酵母细胞酶活性变化和致死双重效应研究 (17)

3.1实验试剂 (17)

3.2实验设备 (18)

3.3实验方法 (18)

3.3.1微生物菌种的制备 (18)

3.3.2高压脉冲电场处理 (19)

3.3.3PEF处理后酿酒酵母悬浮液温度测定 (19)

3.3.4C-FDA/PI染色 (19)

3.3.5染色酿酒酵母流式细胞仪采集 (19)

3.4结果与分析 (20)

3.4.1不同电场强度PEF处理酿酒酵母悬浮液温度变化 (20)

3.4.2C-FDA/PI单染以及双染酵母细胞流式图谱分析 (20)

3.4.3高压脉冲电场处理对酿酒酵母活性与致死双重效应的影响 (21)

3.4.4高压脉冲电场处理对酿酒酵母细胞相对大小及表面积的影响 (22)

3.5本章总结 (22)

第四章基于纳米颗粒的电穿孔机制研究 (24)

4.1实验试剂 (25)

4.2实验设备 (25)

4.3实验方法 (26)

4.3.1培养基配置 (26)

4.3.2微生物培养 (26)

4.3.3高压脉冲电场系统及处理 (26)

4.3.4扫描电镜分析 (27)

4.4结果与分析 (27)

4.4.1细胞膜结构变化扫描电镜结果分析 (27)

4.4.2基于纳米级荧光微球的酵母细胞膜穿孔初步探究 (27)

4.4.3PEF处理后酵母细胞致死与穿孔对比分析 (29)

4.4.4高压脉冲电场强度与细胞膜穿孔孔径大小关系 (30)

4.4.5高压脉冲电场处理时间为细胞膜电穿孔孔径大小关系 (32)

4.5本章总结 (32)

第五章总结与展望 (34)

5.1工作总结 (34)

5.2论文创新点 (34)

5.3研究展望 (34)

致谢 (36)

参考文献 (37)

附录 (41)