丙肝抗体阳性患者血清中HCV核心抗原的检测

丙肝抗体阳性患者血清中HCV核心抗原的检测
丙肝抗体阳性患者血清中HCV核心抗原的检测

丙型肝炎病毒IgG抗体定量测定

一、目的:规范丙型肝炎病毒IgG抗体测定的标准操作程序,确保丙型肝炎病毒IgG 抗体测定的结果准确有效。 二、适用范围:在AutoLumo A2000化学发光检测仪上定量测定人血清中的丙型肝炎病毒 IgG抗体。 三、临床意义 丙型肝炎是一种广泛流行的病毒性疾病,据 WHO调查,全世界估计有1.7 亿人感染丙型肝炎病毒 (HCV),在不同的国家慢性丙型肝炎病毒感染的流行病学统计是在 0.5%~20%,我国一般人群抗 HCV阳性率为3.2%。而急性丙型肝炎绝大多数都会形成有慢性感染的过程,慢性丙型肝炎病毒感染是肝硬化和肝癌的主要原因之一[1,2]。 丙型肝炎的诊断有赖于 HCV抗体的血清学检定及病毒学检测。HCV抗体阳性代表机体对病毒感染的应答,一般在感染 1~2月后出现抗体,急性和慢性丙型肝炎的区别在于 HCV核心 IgG量的差异,慢性病人的 IgG抗体水平比急性的要高些,并且通常有更长的免疫活性。通过自然恢复或经治疗清除病毒的急性丙型肝炎患者,IgG会在几年之后消失或低于检测下限而无法检出[3]。临床上也应注意到一些血液透析、免疫功能缺陷和自身免疫性疾病患者可出现抗-HCV假阳性,可以采用抗-HCV RIBA或HCV RNA检测确认,有助于确诊这些患者是否合并感染HCV。 四、方法原理 本试剂盒采用间接法原理进行检测。以HCV抗原包被磁微粒,辣根过氧化物酶标记的抗人IgG制备酶结合物,通过免疫反应形成抗原-抗体-酶标记抗体复合物,该复合物催化发光底物发出光子,发光强度与HCV IgG抗体的含量成正比。 五、标本的采集与处理 5. 1. 采用正确医用技术收集血清样本(详见标准血液标本前处理流程)。

乙肝检查结果对照表

1、乙肝表面抗原(HBsAg)阳性:代表被乙肝病毒感染。(病毒数量) 2、乙型肝炎表面抗体(HBsAb或抗-HBs)阳性:代表机体对乙肝病毒有抵抗力,能够杀灭乙肝病毒。(对病毒的抗体) 3、乙肝e抗原(HBeAg)阳性:代表乙肝病毒复制活跃,传染性强。(病毒复制性强弱) 4、乙肝e抗体(HBeAb或抗HBe)阳性:代表病毒复制相对减少,传染性弱。(同上) 5、乙肝核心抗体(HBcAb或抗HBc)阳性:代表感染了乙肝病毒或曾经感染过乙肝病毒已经痊愈。乙肝病毒血清标志物的临床意义(乙肝两对半) HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 意义 + - - - - 急性HBV感染潜伏期 + - + - - 急性肝炎早期,传染性强 + - + - + 急性或慢性感染传染性强 + - - + + 急性或慢性感染后期传染性低 + - - - + 急性或慢性乙型肝炎HBV携带者 + + + - + HBsAg免疫复合物,新的不同亚型感染 + + + + + ①一种亚型的HBsAg及异型的抗HBs(常见) ②血清从HBsAg转化为抗HBs的过程(少见) - + - - + HBV感染,恢复期 - - - + + ①HBV感染已过 ②抗HBs出现前的窗口期 - + - + + HBV感染恢复期 - + - - - ①注射疫苗后

②遥远的过去感染 ③假阳性

乙肝“两对半”化验结果对照表 检查乙型肝炎病毒(HBV)感染最常用的血清学标志是乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(抗-HBs)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(抗-HBe)及乙肝核心抗体(抗-HBc)共5项指标,故称“乙肝两对半”,其作用有三:1.判断有无HBV感染;2.判断HBV感染者传染性的大小;3.作为慢性乙肝患者抗病毒治疗及疗效判断的依据之一,以下是几种常见的结果及意义。 模式HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 诊断结果临床意义 1 +- + -+ “大三阳” 表明有HBV感染且病毒复制活跃,传染性较强 2 +- - + + “小三阳” 表明有HBV感染但病毒复制相对静止,传染性相对较弱 3 +- - - + 恢复初期表明有HBV感染但病毒复制相对静止,传染性相对较弱 4 - + - - + 恢复后期表明曾感染过HBV,但已产生保护性抗体,不具有传染性,也不需注射乙肝疫苗 5 - - - - + 恢复后期表明曾经感染过HBV 6 - + - - - 完全恢复表明注射乙肝疫苗后产生的保护性抗体,若未注射乙肝疫苗,则表明曾经感染过HBV,现已产生保护性抗体,不具有传染性,也不需要再注射乙肝疫苗。 说明:“乙肝两对半”仅反映HBV感染及复制情况并不能完全反映病情轻重,如“大三阳”病情不一定重,而“小三阳”病情不一轻。若要判断乙肝病情的轻重,除要检查“乙肝两对半”外,还应结合肝功能试验、肝纤维化指标及B超、CT表现才能准确判断当前病情。另外,若要更准确地判断HBV的复制状态及病人的传染性,还应做乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)的定量检查。 这个也可以看一下。

抗原或抗体的检测

抗原或抗体的检测

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抗原或抗体的检测 一、检测的原理 借助抗原和抗体在体外特异结合后出现的各种现象,对样品中的抗原或抗体进行定性、定量、定位的检测。 1.抗原与抗体的亲和力(affinity)抗原抗体的结合就像酶与底物的结合,激素与其受体的结合一样不是化学的反应,而是非共价键的可逆的结合。抗原决定簇和抗体分子可变区互补构型,造成两分子间有较强的亲和力。空间构型互补程度不同,抗原和抗体分子之间结合力强弱也不同。互补程度高,则亲和力强。此外,反应温度、酸碱度和离子浓度对抗原和抗体分子上各基因的解离性和电荷特性也有重要的影响,抗体与抗原决定簇之间的结合力大小可用亲合力来表示。高亲合力的抗体与抗原的结合力强,即使抗原浓度很低时也有较多的抗体结合抗原形成免疫复合物。 2.抗原或抗体外检测原理根据抗原抗体结合形成免疫复合物的性状与活性特点,对标本中的抗原或抗体进行定性、定位或定量的检测。定性和定位检测比较简单,即用已知的抗体和待检样品混合,经过一段时间,若有免疫复合物形成的现象发生,就说明待检样品中有相应的抗原存在。若无预期的现象发生,则说明样品中无相应的抗原存在。同理也可用已知的抗原检测样品中是否有相应抗体。 对抗原或抗体进行定量检测时,以反应中加入抗原和抗体的浓度与形成免疫复物的浓度呈函数关系。 (1)根据免疫复合物产生的多少来推算样品中抗原(或抗体)的含量:在一定的反应条件下,加入的已知抗体(或抗原)的浓度一定,反应产生的免疫复合物多少与待检样品中含有相应抗原(或抗体)量成正比。也就是抗体浓度一定时,免疫复合物越多则样品中的抗原量也越多。可用实验性标准曲线推算出样品中抗原(或抗体)的含量。如免疫单向扩散试验、免疫比浊试验和酶联免疫检测等都属于这类方法。 (2)抗原或抗体效价滴定的原理:当抗原抗体复合物形成多少不能反应抗原抗体反应强弱时,就不能以检测反应强度来对抗原或抗体进行定量。在实际工作中,把浓度低的反应成分(抗原或抗体)的浓度固定,把浓度高的另一种反应成分作一系列稀释。例如用人血清作抗原免疫3只家兔,比较3只家兔产生抗体的多少,即滴定3只兔血清抗体效价,可用双向琼脂扩散法来滴定,例如将抗体浓度固定,将抗原作不同的稀释度,分别将抗原或抗体滴入琼脂的相应小孔中,观察免疫兔血清与不同稀释度的抗原出现明显沉淀浅的抗原稀释度(如甲兔的抗体效价为1/2000,而丙免的是1/8000则可比较出后者比前者产生抗体的效价要高)。也就是表示效价的稀释度越高,样品中所含待检成分越多。因人血清(抗原)和抗体(免疫兔血清)相比,浓度高,故应稀释抗原。 二、抗原或抗体检测的实用意义 1.抗体检测的意义检测抗体可用于评价人和动物免疫功能的指标。抗体用于临床治疗或实验研究时也需做纯度分析和定量测定。临床上检测病人的抗病原生物的抗体、抗过敏原的抗体、抗HLA抗原的抗体、血型抗体及各种自身抗体,对有关疾病的诊断有重要意义。 2.抗原检测的意义可做为抗原进行检测的物质可分为以下四类: (1)各种微生物及其大分子产物:用于传染病诊断、微生物的分类及鉴定以及对菌苗、疫苗的研究。 (2)生物体内各种大分子物质:包括各种血清蛋白(如各类免疫球蛋白、补体的各种成分)、可溶性血型物质、多肽类激素、细胞因子及癌胚抗原等均可做为抗原进行检测。在对这些成分的生物学作用的研究以及各种疾病的诊断有重要意义。 (3)人和动物细胞的表面分子:包括细胞表面各种分化抗原(如CD抗原)、同种异型

丙肝标志物的临床意义

丙肝病毒标志物的临床意义 检验科:郭洪晨 一丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab/抗-HCV) 抗-HCV是丙肝病毒感染筛查和诊断较为常用的检测指标,目前多抗原(HCV Core 、NS3 、NS4和NS5抗原)包被的检测试剂(第3代抗-HCV)平均“窗口期”是70天,也就是说人体感染丙肝病毒大约70天以后产生的抗体滴度才能达到试剂检测最低限,70天之前要么没有产生抗体,要么抗体滴度过低不足以被检出,窗口期容易出现漏检的情况。 抗-HCV不是保护性抗体,不能中和或清除丙肝病毒,对人体亦没有保护作用,该抗体阳性只是提示感染了丙肝病毒。丙肝病毒感染者即便自愈或治疗后抗HCV也不一定阴转,仍可持续阳性多年甚至终生。 注意:《丙型肝炎防治指南》(2015年更新版)中明确指出一些自身免疫性疾病患者可出现抗-HCV 假阳性;血液透析和免疫功能缺陷或合并HIV 感染者可出现抗-HCV 假阴性,这些患者和可能处于窗口期的急性丙肝患者加测HCV- RNA有助于确诊。 二丙型肝炎病毒核心抗原(HCV cAg) 丙肝核心抗原检测“窗口期”大约是14天, 与HCV- RNA具有较好的相关性,是间接反应体内病毒载量和复制程度的指标,阳性代表体内存在丙肝病毒,有一定的传染性。 丙肝核心抗原检测适用于丙型肝炎抗HCV血清阳转前“窗口期”感染者及免疫受损或先天性免疫缺陷群体如HIV感染者、长期透析的肾病患者、器官移植患者或先天性免疫功能缺陷的丙肝感染者的筛查。 三丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV- RNA) HCV- RNA是反应丙肝病毒载量和复制情况的直接指标,检测“窗口期”一般是7-11天。 HCV-RNA 定量检测适用于HCV 现症感染的确认、抗病毒治疗前基线病毒载量分析,以及抗病毒治疗过程中及治疗结束后的应答评估。 注意:HCV-RNA是单股正链RNA,本身不稳定;自然界中到处存在大量的RNA酶,加之RNA又不耐高温,所以容易降解,易出现假阴性,不能仅凭一次阴性结果就排除诊断,至少需要在不同时间连续检测两次,结果都阴性才能排除丙肝病毒现症感染。

丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒(胶体金法)

丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒(胶体金法) 【检验目的】 定性测定人血清(浆)中的HCV抗体,用于临床术前的初筛查检测。 【实验原理】 丙型肝炎病毒抗体诊断试剂(胶体金法)采用胶体金免疫层析技术,在玻璃纤维素膜上预包被金标鼠抗人IgG抗体(anti-IgG Ab),在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被丙肝混合抗原(Core、NS3、NS4、NS5)和人IgG抗体。检测阳性样本时,血清样本中HCV-Ab与胶体金标记鼠抗人IgG抗体结合形成复合物,由于层析作用复合物沿纸条向前移动,经过检测线时与预包被的抗原结合形成“Atenti-IgG Ab-HCV Ab-HCV Ag”夹心物而凝聚显色游离金标鼠抗人IgG 抗体则在对照线处与人IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色,15分钟内观察结果即可。 【样本要求】 1、采集静脉血样本必须在无菌条件下操作,并避免样品溶血。 2、如果血清和血浆样品收集后 7天内检测,样品须放在0-4C保存;大于7天必须-20C—下冷冻保存。 3、常规抗凝剂不影响实验结果。 4、溶血、粘稠及高指标本不适于本试剂。含特殊物质的标本可能会导致检测结果不稳定, 在检测前须清除。 5、在标本中加0.1%NaN3不影响实验结果。 【试验方法】 测试条: 1、将待测标本从储存条件下取出,平衡至室温并编号。 2、将胶体金试纸条从包装盒中取出,打开铝箔包装袋,平置于台面上。 3、用塑料滴管加1滴(10卩)样本血清或血浆,加到试纸条指示箭头下端的加样处。 4、随即滴加2滴样本稀释液(约100^)1。 5、加样后,阳性标本可在1~15分钟内检出,建议15分钟后在最终观察并记录实验结果。 测试卡: 1、将待测标本从储存条件下取出,平衡至室温并编号。 2、将胶体金测试卡从包装盒中取出,打开铝箔包装袋,平置于台面上。 3、用塑料滴管加1滴样本血清或血浆,加到测试卡上的 S孔。 4、随即滴加2滴(约100 ^)1样本稀释液到测试卡上的 D孔。 5、加样后,阳性标本可在1~15分钟内检出,建议15分钟后在最终观察并记录实验结果。 【结果判断】 阳性:试纸条/试卡在检测区和对照区位置出现两条紫红色条带。 阴性:试纸条/试卡只在对照线位置出现一条紫红色条带。 失效:对照区(C)未出现紫红色条带,表明不正确的操作过程或试剂盒已变质 损坏。在此情况下,应再次仔细阅读说明书,并用新的试纸条/试卡重新测试。

乙肝表面抗体阳性、核心抗体阳性(Hepatitis B surface antibody is positive, core antibody is positive)

乙肝表面抗体阳性、核心抗体阳性(Hepatitis B surface antibody is positive, core antibody is positive) Hepatitis B surface antibody positive, hepatitis B core antibody positive Hepatitis B surface antibody is a protective antibody of human body, which can protect the body from HBV infection. Hepatitis B core antibody positive is infection or previous infection marker. These two simultaneous positive, indicating that the body was originally infected with hepatitis B, is in recovery or has recovered. Is hepatitis B antibody positive to be vaccinated? Whether to need to fight hepatitis B vaccine has the following two kinds of circumstances: 1, if you are through hepatitis B vaccine to obtain hepatitis B antibody, it is recommended that every three years you strengthen the injection of a hepatitis B vaccine. Since the production of antibody by hepatitis B vaccine, the antibody level decreases with time. Most of our scholars suggest that it is better to strengthen the injection once three years after immunization. No matter how long apart, as long as the surface antibody titer in 10 international units more than /ml, indicating that the body has immunity to hepatitis B virus (variation hepatitis B invalid). Conversely, if the hepatitis B surface antibody titer is below this value, the injection should be enhanced.

丙型肝炎病毒抗体检测说明书

丙型肝炎病毒抗体检测试剂(胶体金法) 说明书 【产品名称】 通用名称:丙型肝炎病毒抗体检测试剂(胶体金法) 【包装规格】 条型单人份:50人份/盒;板型单人份:40人份/盒。 【预期用途】 本产品用于定性检测人血清.血浆样本中的丙型肝炎病毒(HCV)抗体。 丙型肝炎病毒是一种很小的.具有包膜的单股正链RNA病毒,是主要引起非肠道传播的非甲非乙型肝炎病毒,据文献报道,90%以上非肠道传播的非甲非乙型肝炎(NANBH)和25%以上急性散发性肝炎均为HCV感染所致,且35-50%的非甲非乙型肝炎发展为慢性肝炎,与肝癌的发生相关。HCV主要传播通过血源传播,此外还可以其他方式如通过母婴垂直传播,家庭日常接触和性传播等。 【检验原理】 本试剂采用高度特异性的抗体抗原反应原理及胶体金标记免疫层析分析技术,试剂含有被预先固定于膜上检测区(T)的包被用HCV重组抗原。 检测时,样本滴入试剂加样处于预包被的胶体金颗粒结合的标记用HCV重组抗原反应。然后,混合物再毛细效应下向上层析。如是阳性,标记用HCV重组抗原金标粒子在层析过程中先于样本中的HCV重组抗体结合,随后结合物会被固定在膜上的包被用HCV重组抗原结合,在检测区内(T)会出现一条紫红色条带。这条带是包被用HCV重组抗原-HCV抗体-标记用HCV重组抗原金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如是阴性,则检测区内(T)将没有紫红色条带。无论HCV抗体是否存在于样本血样中,一条紫红色条带都会出现在质控区内(C).质控区内(C)所显现的紫红色条带是判定是否有足够样本,层析过程是否正常的标准,同时也作为试剂内控标准。 【主要组成成分】 丙型肝炎病毒抗体检测试剂:包被用HCV重组抗原,标记用HCV重组抗原。羊抗鼠IgG,硝酸纤维素膜,玻璃纤维; 缓冲液:成份为氯化钠,磷酸氢二钠,磷酸二氢钠; 25ul吸管 检测记录表 各组份的包装数量如下: 说明:不同批号试剂中各组份不能够互换使用,以免产生错误结果。

乙肝五项对照表

乙肝五项对照表 1乙肝表面抗原(HBsAg) 2乙肝表面抗体(抗-HBs) 3乙肝E抗原(HBeAg) 4乙肝E抗体(抗-HBe) 5乙肝核心抗体(抗-HBc) 第1、3、5阳为大三阳,1、4、5阳为小三阳 乙肝五项检查对照表内容如下: 1、乙肝五项第1项阳性,其余四项阴性。说明是急性病毒感染的潜伏期后期。 2、乙肝五项第135项阳性,其余两项阴性。俗称乙肝大三阳,说明是急、慢性乙肝,传染性相对较强。 3、乙肝五项第145项阳性,其余两项阴性。俗称乙肝小三阳,说明是急、慢性乙肝,传染性相对较弱。 4、乙肝五项第13项阳性,其余三项阴性。说明是急性乙肝的早期。 5、乙肝五项第1345项阳性:说明急性乙肝感染趋向恢复或者为慢性乙肝病毒携带者。乙肝两对半对照表 6、乙肝五项第14项阳性,其余三项阴性。说明慢性乙肝表面抗原携带者易转阴或者是急性感染趋向恢复。 7、乙肝五项第15项阳性,其余三项阴性。说明是急、慢性乙肝即:①急性HBV感染; ②慢性HBsAg携带者;③传染性弱。 8、乙肝五项第5项阳性,其余四项阴性。说明①既往感染未能测出抗-HBs②恢复期HBsAg 已消,抗-HBs尚未出现③无症状HBsAg携带者。 9、乙肝五项第245项阳性,其余两项阴性。说明是乙肝的恢复期,已有免疫力。 10、乙肝五项第2项阳性,其余四项阴性。说明:①曾经注射过乙肝苗并产生了抗体,有免疫力;②曾经有过乙肝病毒的感染,并且有一定的免疫力;③假阳性。 11、乙肝五项第25项阳性,其余三项阴性。说明是接种了乙肝疫苗以后,或是乙肝病毒感染后已康复,已有免疫力。 12、乙肝五项第45项阳性,其余三项阴性。说明是急性乙肝病毒感染的恢复期,或曾经感染过病毒。 13、乙肝五项全阴说明过去和现在未感染过HBV,但目前没有保护性抗体

乙肝五项的检查及临床意义

乙肝五项的检查及临床意义 乙肝两对半即乙肝五项,是确诊和了解乙肝(又称B型肝炎)病情的重要依据。包括:乙肝表面抗原HBsAg、乙肝表面抗体HBsAb、乙肝e抗原 HBeAg、乙肝e抗体HBeAb、乙肝核心抗体HbcAb。正常情况下五项指标全部阴性或乙肝表面抗体HbsAb阳性。其中乙肝两对半检查中的“乙肝大三阳、乙肝小三阳”是了解乙肝(又称B型肝炎)病情最为重要的综合性指标。 一、乙肝两对半(包括了乙肝大三阳、乙肝小三阳)的检查及临床意义 HBV(乙肝病毒)感染后病毒产生的蛋白释放入血导致相应的血清标志物,主要有三对,即即表面抗原(HBsAg)和表面抗体(抗HBs或HBsAb)、e 抗原(HBeAg)和e抗体(抗HBe或HBeAb)、核心抗原(HBcAg)和核心抗体(抗HBc 或HBcAb),但核心抗原在血清中一般不易检出,仅其余两对半在血液中可检测出。 1、乙肝两对半(乙肝五项)的简要临床意义 2、乙肝五项各指标的常见变化与简要临床意义:

以上简单罗列了感染乙肝(B型肝炎)病毒后两对半的常见的一些表现形式,针对个体,可能仍存在其它不同的表现组合,或在转归中。所以碰到不典型的组合,不必担心,建议过段时间再次复检,一般不典型的情况不会持续太久。 3、乙肝两对半检测中乙肝大三阳、小三阳以及部分指标的临床意义及对策

(1)乙肝大三阳(乙肝五项135阳性)--是指两对半检查中,表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)和核心抗体(HBcAb)为阳性。乙肝大三阳,说明乙型肝炎病毒在人体内复制活跃,传染性较强.这类患者体内的血液、唾液、精液、乳汁、宫颈分泌液都可有传染性,如果同时有转氨酶增高者,首先就应注意隔离,在家庭内患者的碗筷等餐具可单独与家人分开,定期消毒。 ★ 专家对策:患者应到专科医院就诊采用抗病毒,提高机体免疫力和对症降酶保肝措施。建议做肝功能和肝B超检查。如果都正常,不要乱治疗,定期每半年做一次肝功能和肝B超检查。可以服用中草药,比较安全有效,服用中草药调节肝脏免疫功能,促进肝细胞修复再生,增强肝的抵抗力,阻止肝脏纤维化。抗HBV-免疫疗法辩证治疗“大三阳”>>> (2)乙肝小三阳(乙肝五项145阳性)--是指在乙肝(又称B型肝炎)的“两对半”检查的五项指标中,表面抗原(HBsAg)、E抗体(HBeAb)和核心抗体(HBcAb)检测均是阳性。提示急性或慢性乙型肝炎,体内病毒复制,为乙型肝炎病毒复制状态。乙肝小三阳通常是由“乙肝大三阳”转变而来,是人体针对E 抗原产生了一定程度的免疫力。 ★ 专家对策:乙肝小三阳(乙肝五项145阳性)应检查HBV-DNA及肝功能,根据具体情况进行综合分析。如果HBV-DNA(+)且肝功能异常,说明病毒复制,传染性强,应该采取以抗病毒为主的综合治疗。如果HBV-DNA(-)且肝功能、B 超及AFP等均长期正常,则说明病毒已复制不活跃,传染性很低,所以已无需隔离与治疗。乙肝小三阳全面解析>>> (3)乙肝五项(2、5项为阳性),其余阴性。既往感染,急性HBV感染已恢复。其中第二项阳性说明已经产生抗体,不用打疫苗。第五项阳性只提示曾被乙肝病毒感染过,现已恢复。 ★ 专家对策:这种情况患者不需要治疗,只要保持好生活规律,劳逸结合,注意加强锻炼,增强体质,做好定期复查即可。 (4)乙肝五项(2、4、5项为阳性),其余阴性。2、4、5阳性表示的意思是:1、急性乙肝感染恢复期;2、既往感染过乙肝;3、注射乙肝疫苗等产生了表面抗体。第二项HBsAb、第五项HBcAb阳性是既往感染并产生抗体的证明,因第四项HBeAb可存在较长时间才被清除,固常可出现2、4、5阳性。 ★ 专家对策:此时是感染乙肝(B型肝炎)病毒以后的恢复期,虽然已经产生了乙肝表面抗体,对乙肝也已经有了免疫力,但是还是必须了解自身表面抗

免疫学检验试题(附答案)

免疫学检验试题(一) 1. 免疫监视功能低下时易发生()。 A.自身免疫病 B.超敏反应 C.肿瘤 D.免疫缺陷病 E.移植排斥反应答案C 解析免疫系统的功能之一是对自身偶尔产生的有癌变倾向的细胞进行清除,此即免疫监视功能,免疫监视功能低下时易发生肿瘤。 2. 免疫自稳功能异常可发生()。 A.病毒持续感染 B.肿瘤 C.超敏反应 D.自身免疫病 E.免疫缺陷病答案D 解析免疫系统的功能之一是对自身衰老的组织细胞进行清除,即免疫自稳功能,免疫自稳功能异常可发生自身免疫病。 3. 既具有抗原加工提呈作用又具有杀菌作用的细胞是()。A.树突状细胞 B.巨噬细胞

C.中性粒细胞 D.B 细胞 E.T 细胞答案B 解析树突状细胞、巨噬细胞和B 细胞都有抗原加工提呈作用,但只有巨噬细胞兼有吞噬杀菌作用。 4. 免疫应答过程不包括()。 A.T 细胞在胸腺内分化成熟 B.B 细胞对抗原的特异性识别 C.巨噬细胞对抗原的处理和提呈 D.T 细胞和B 细胞的活化、增殖和分化 E.效应细胞和效应分子的产生和作用答案A 解析免疫应答过程指免疫系统针对抗原的反应过程,不包括免疫细胞的发育过程。 5. 关于外周免疫器官的叙述,不正确的是()。 A.包括淋巴结、脾和黏膜相关淋巴组织 B.发生发育的时间晚于中枢免疫器官 C.是免疫应答发生的场所 D.是免疫细胞发生和成熟的场所 E.是所有淋巴细胞定居的场所答案D 解析免疫细胞发生和成熟的场所在中枢免疫器官,故 D 项不正确。

5. 在正常血清中,含量最高的补体成分是()。 A.C1 B.C3 C.C4 D.C5 E.C4Bp 答案B 解析在正常血清中含量最高的补体成分是C3。 7. 细胞因子不包括()。 A.单核因子 B.淋巴因子 C.生长因子 D.抗体 E.集落刺激因子答案D 解析细胞因子是生物活性的小分子多肽,抗体不是。 8. 体内抗病毒、抗毒素、抗细菌最重要的抗体为()A.IgM B.IgA C.IgG D.IgE E.IgD 答案C 解析IgG 是体内抗感染的最主要的抗体。

丙型病毒性肝炎诊断标准(WS213-2008)

丙型病毒性肝炎诊断标准(WS213-2008) 1范围 本标准规定了丙型病毒性肝炎的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。 本标准适用于全国各级各类医疗卫生机构及其工作人员对丙型病毒性肝炎的诊断、报告。 2缩略语 HCV:丙型病毒性肝炎病毒 抗-HCV:抗丙型病毒性肝炎病毒抗体 HCV RNA:丙型病毒性肝炎病毒核糖核酸 RT-PCR:逆转录聚合酶链反应 EI.ISA:酶联免疫吸附试验 EIA:酶免疫检测 ALT:丙氨酸氨基转移酶 AST:门冬氨酸氨基转移酶 B超:腹部超声显像 CT:计算机断层扫描 MRI:磁共振成像 3诊断依据 3.1流行病学史

3.1.1曾接受过血液、血液制品或其他人体组织、细胞成分治疗,或器官移植。 3.1.2有血液透析史、不洁注射史,或其他消毒不严格的有创检查、治疗史,有静脉注射毒品史。 3.1.3职业供血者,特别是接受过成分血单采回输者。 3.1.4与HCV感染者有性接触史,或HCV感染者(母亲)所生的婴儿。 3.2临床表现 3.2.1急性丙型病毒性肝炎 3.2.1.1病程在6个月以内,全身乏力、食欲减退、恶心和右季肋部疼痛或不适等。 3.2.1.2可有轻度肝肿大、部分患者可出现脾肿大;少数患者可伴低热或出现黄疽。 3.2.1.3部分患者可有关节疼痛等肝外表现。 3.2.1.4部分患者可无明显症状和体征。 3.2.2慢性丙型病毒性肝炎 3.2.2.1病程超过6个月,全身乏力、食欲减退、恶心和右季肋部疼痛或不适等。 3.2.2.2部分患者可有肝病面容、肝掌、蜘蛛痣及轻度肝、脾肿大。 3.2.2.3部分患者可无明显症状和体征。

3.2.3丙型病毒性肝炎肝硬化 3.2.3.1可有全身乏力、食欲减退、恶心和右季肋部疼痛或不适等。 3.2.3.2可有肝病面容、肝掌、蜘蛛痣及腹壁或食管、胃底静脉曲张及脾脏肿大和脾功能亢进。 3.2.3.3失代偿期患者可有腹水、肝性脑病及消化道出血史。 3.3实验室检查 3.3.1急性丙型病毒性肝炎有血清ALT、AST升高,部分病例可有血清胆红素升高。部分慢性丙型病毒性肝炎和丙型病毒性肝炎肝硬化患者亦可有ALT、AST升高。 3.3.2血清抗-HCV阳性。 3.3.3血清HCV RNA阳性。 3.4组织病理学检查 3.4.1急性丙型病毒性肝炎 可有小叶内及汇管区炎症等多种病变,其组织学特征包括:a)单核细胞增多症样病变,即单个核细胞浸润于肝窦中,形成串珠状; b)肝细胞大泡性脂肪变性; c)胆管损伤伴汇管区大量淋巴细胞浸润,甚至有淋巴滤泡形成; d)常见界面性炎症。

乙型肝炎核心抗体定量检测

乙型肝炎核心抗体定量检测(Antibody to Hepatitis B Virus Core Antigen,anti-HBc/CORE) 1、检验目的 检测HBcAb主要是用于乙型肝炎的的诊断、了解乙肝病毒感染者的感染状况,另外还用于乙型肝炎的流行病学调查。 2、方法原理 采用了美国雅培公司的专利技术—微粒子酶免疫分析(MEIA),即以HBcAg包被微粒子(M-Ag)与标本中的HBcAb形成M-Ag-Ab 复合物,当复合物被转移到纤维杯上时,微粒子就不可逆地结合到纤维杯表面的玻璃纤维上,并与加入的碱性磷酸酶标记HBcAb 结合,洗去未结合的游离物质,加入底物—四甲基伞形酮磷酸盐,碱性磷酸酶脱去底物的磷酸基而发出荧光,通过MEIA光路元件检测而得到定量结果。 3、性能指标 MEIA定量检测HBcAb不精密度CVs为5.8-10.4%,检出限<1.0 PEI unit/ml),灵敏度1.0 PEI unit/ml,特异性对99.9%。 4、标本收集 4.1标本类型:静脉血或动脉血的血清或血浆标本均可作为检测标本(抗凝剂可用肝素钠、枸橼酸钠、ACD、CPDA-1或EDTA,抗凝剂的质量应符合化试药品要求——化学纯或分析纯,使用的比例以厂家推荐为准);其他体液如尿液、唾液、精液、羊水、胸水、腹水、乳汁等体液可以作为检测标本,但加热灭活的血清和血库的库存血则不宜作为检测标本。

4.2标本留取:以空腹为宜,收到标本后最好立即离心留取血清或血浆(凝固血应待其充分凝固后收集血清),不能有残留的红细胞、纤维蛋白丝,使用肝素治疗的病人宜在肝素治疗前抽血。4.3标本保存:留取的标本最好在3小时内检测,不能立即检测的应放臵于2-8℃最长达14天(可以含有凝块但要密闭以防蒸发),或者-10℃最长达14天(不能反复冻融也不能含有凝块和红细胞)。 4.4标本容器:盛放标本的容器必须为洁净的一次性真空采血管、玻璃试管、一次性的不同规格的塑料离心管 4.5标本外送:如涉及到需要外送的标本,必须以规定的容器(0.5ml塑料离心管)存放并密封,并根据邮寄规则和要求进行包装,运送时还要放入冰袋(2-8℃)或干冰(-10℃)由专人运送至指定地点指定接收人。 4.6拒收标本:凡与4.1-4.5所述内容不符的标本,检验人员应向临床或就诊者说明拒收标本的原因,并提出解决的方案或建议。 5、分析系统 5.1分析仪器:为美国雅培公司提供的AXSYM全自动免疫分析仪,仪器校准请参见仪器操作规程。 5.2分析试剂:为美国雅培公司提供的配套的HBcAb试剂盒,规格为100test/盒,2-8℃贮存,有效期6个月;在效期内使用试剂。 5.3定标试剂:为美国雅培公司提供的配套的HBcAb试剂盒中所附带,2-8℃贮存,有效期6个月;每换一次不同批号试剂均应进行重新定标。 5.4质控试剂:为美国雅培公司提供的配套的质控品,分为高、低二个浓度,2-8℃贮存,有效期6个月;每天随常规工作

ELISA检测方法

ELISA(酶联免疫吸附测定,enzyme linked immunosorbent assay)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。 基本原理: ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。 ③在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。 ④加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅有无定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。 双抗夹心法 夹心法常用于检测大分子抗原,一般的操作步骤为: ①将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体; ②加入待测检体,检体中若含有待测的抗原,则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结; ③洗去多余待测检体,加入另一种对抗原专一的一次抗体,与待测抗原进行键结; ④洗去多余未键结一次抗体,加入带有酶的二次抗体,与一次抗体键结; ⑤洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或仪器读取呈色结果。 间接法 间接法常用于检测抗体,一般的操作步骤为: ①将已知的抗原固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原。

②加入待测检体,检体中若含有待测的一次抗体,则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。 ③洗去多余待测检体,加入带有酶的二次抗体,与待测的一次抗体键结。 ④洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酶呈色,藉仪器(ELISA reader)测定塑胶盘中的吸光值(OD值),以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。 竞争法 竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制,一般用于检测小分子抗原,其操作步骤为: ①将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体; ②加入待测检体,使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结; ③加入带有酶的抗原,此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结,由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限,因此当检体中抗原的量越多,则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少,亦即,两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结,即所谓竞争法之由来。 ④洗去检体与带有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,当检体中抗原量越多,代表塑胶孔盘内留下之带有酶的抗原越少,显色也就越浅。 注:当需要侦测无法获得两种以上单一性抗体的抗原,或是不易得到足够的纯化抗体以固著于孔盘上时,一般会考虑使用竞争法ELISA。

血清丙型肝炎病毒抗体检测作业指导书

血清丙型肝炎病毒抗体检测作业指导书(ELISA) 原理 在微孔条上预包被丙型肝炎病毒(HCV)重组嵌合抗原,采用ELISA法检测丙型肝炎病毒抗体。样品加入已有样品稀释液的包被抗原反应孔,在随后的温育过程中,若样品中含特异抗体,则该抗体与包被抗原形成抗原抗体复合物被吸附到固相,再加入酶标记的第二,最终形成抗原-抗体-酶标二抗复合物,洗涤除去未结合的游离酶,加入显色剂后显色。 标本采集 2.1 采集前病人准备:受检者应空腹 2.2 标本种类:血清或血浆 2.3 标本要求:采集病人静脉血2ml,室温放置不超过4小时,分离血清备用。 标本储存:2-8°C保存不应超过1周,-20°C不应超过3个月,-70°C长期保存,应避免反复冻融。

标本运输:密封,室温运输。 标本拒收标准:污染、标本量不足、严重溶血或脂血标本不宜作此项检测。 试剂 6.1 试剂名称:丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒 6.2 试剂生产厂家:河南华美生物工程有限公司。6.3 包装规格:96Test/Kit 6.4 试剂盒组成:包被反应板,样品稀释液,酶标记抗体,阳性对照血清,阴性对照血清,浓缩洗涤液,底物A,底物B,终止液,封口膜,密封袋。 6.5 试剂储存条件及有效期:2-8°C避光保存,有效期6个月。 仪器设备 7.1 仪器名称:自动酶标仪 7.2 仪器厂家:KHB 7.3 仪器型号:ST360 操作步骤

8.1 平衡:将试剂盒各组分取出,平衡至室温(18-25°C),微孔板开封后,余者及时以自封袋封存。 8.2 配液:浓缩洗涤液配制前充分摇匀(如有晶体应充分溶解),浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1:19稀释后使用。 8.3 编号:将微孔条固定于支架,按序编号。 8.4 加样品稀释液:用加样器在微孔反应条板孔中加入样品稀释液,每孔100μl,空下四孔准备加对照。 8.5 加标本和留空白:将每份待检标本各10μl分别加入已有样品稀释液的各孔中,留下一孔不加标本作空白对照,标好位置。 8.6 加对照:在预先空下的四孔中用加样器分别加入阴性对照一孔,阳性对照三孔,每孔100μl,标好位置。对照应在所有标本加完以后再加,以保证阈值准确性。 8.7 温育(一):充分混匀,加上封板膜,置37℃温育30分钟。

乙肝核心抗体阳性是什么意思

乙肝核心抗体阳性是什么意思 乙肝核心抗体阳性是什么意思?许多人并不是很了解,当看到乙肝核心抗体阳性时,就会误以为得了乙肝。通过国家的宣传和乙肝携带者自身的努力,乙肝歧视现在有着改观,完全没有歧视的心理或者恐慌的心理需要一段时间,当经常接触的人在乙肝五项检查中有问题时,对乙肝知识缺乏深入的了解和学习,心理还是有所担心和犹豫。 乙肝核心抗体呈阳性的临床意义: 1)无症状乙肝表面抗原携带者滴度太低不能检测出来,而乙肝核心抗体可以。 2)在恢复期时,当乙肝表面抗原已减少止不能测出,而乙肝表面抗原尚未转为乙肝表面抗体之际,可以测乙肝核心抗体。 3)乙肝核心抗体比乙肝表面抗体持续的时间长。 4)乙肝核心抗体阳性表示曾经感染过乙肝病毒,现处于急性感染恢复期,或处于急、慢性感染。 核心抗体是什么?核心抗体的作用: 由于乙肝核心抗原在血中很快被裂解,所以在血清中查不出来,但是它具有抗原性,能刺激身体的免疫系统产生特性抗体,即乙肝核心抗体,所以检测乙肝核心抗体可以了解人体是否有过核心抗原的刺激,即是否有过乙肝病毒的感染。所以说乙肝核心抗体是一项病毒感染的标志。HBcAb是乙肝核心抗体的英文缩写,它是病毒刺激肝细胞产生的一种免疫球蛋白,也叫抗-HBc,其中有IgG、IgM、IgA和IgE型,临床上常规检测的有IgM和IgG型。它和HBcAg是一对相对应的抗原抗体系统。HBcAb阳性的出现表明肝内乙肝病毒复制活跃,肝细胞受损较重,并且传染性较强。

在急性HBV感染中,HBcAb的产生通常在HBsAg出现后3~5周。此时,HBsAg 已经消失,HBsAb尚未阳转。HBcAb的检出反映乙肝病毒在复制,无保护作用,不能中和乙肝核心抗原。 HbcAb阳性并不能说明任何问题 如果乙肝表面抗体和乙肝核心抗体表现阳性,单独后者是阴或者是阳都说明不了任何问题,因为它是感染病毒后最早呈阳性,也是最晚转阴性的一项,而且有些人一辈子都是阳性,前者是阳性说明你曾经感染过乙肝病毒,现在已经对病毒有了免疫。 HBcAb弱阳性的出现可以有以下几种情况 1、HBcAb弱阳性说明以前感染过乙肝病毒,目前已经康复,但没有产生保护性抗体乙肝表面抗体。或者乙肝表面抗体已经消失,但乙肝核心抗体依然存在。这是因为乙肝核心抗体比乙肝表面抗体的存在时间要长很多,有些人感染乙肝病毒康复后,HBcAb可终身阳性或者弱阳性。此时HBcAb弱阳性只是说明曾经感染过乙肝病毒。 2、HBcAb弱阳性也可能是隐性乙肝病毒感染后的一种表现。 3、乙肝患者经过治疗,其他各项指标已经转阴,只剩下少量乙肝核心抗体也可出现HBcAb弱阳性。 有必要检查抗-HBc IgM和抗-HBc IgG 1、抗-HBc IgM是HBV感染出现较早的抗体,90%出现在发病的第一周,在血清中可持续2~134周。IgM的高滴度出现,是诊断HBV急性感染的重要指标。抗-HBc IgM的表达,在一定程度上反映了肝组织的炎症活动状态。抗-HBc IgM与HBV 复制的标志物(HBeAg、HBV DNA)有相关性,但不是HBV复制的敏感指标。因此,抗-HBc IgM即是HBV的感染性指标,也被认为是传染性指标。

丙肝核心抗原和丙肝抗体联合检测在丙肝感染诊断中的临床价值

丙肝核心抗原和丙肝抗体联合检测在丙肝感染诊断中的临床价值 目的探讨丙肝核心抗原(HCV-cAg)和丙肝抗体(HCV-Ab)联合检测对提高丙肝患者早期感染诊断中临床价值。方法对324例临床标本同时检测HCV-cAg和HCV-Ab,并对HCV-cAg阳性标本和HCV-cAg阴性且HCV-Ab阴性标本进一步检测丙肝RNA(HCV-RNA)。结果单独检测HCV-Ab,丙肝的检出率为22.5%,联合检测HCV-cAg和HCV-Ab则丙肝的检出率为27.8%,在73例HCV-Ab阳性的标本中,HCV-cAg的阳性率达41.1%;在251例HCV-Ab阴性的标本中,HCV-cAg阳性的例数为17例,丙肝的漏诊率达 6.8%;如果以HCV-RNA检测结果为标准,则HCV-cAg与HCV-RNA检测结果的符合率达93.6%,特异性达98.3%。结论HCV-cAg和HCV-RNA具有高度的相关性,联合检测HCV-cAg核心抗原和HCV-Ab抗体是防范HCV广泛传播和诊疗的有效手段。 标签:丙型肝炎;丙肝核心抗原;丙肝抗体;丙肝RNA,酶联免疫法 根据统计显示,目前全球丙肝的感染人数约为2亿人,而我国丙肝感染率大概为3.2%[1]。约60%的丙肝感染都是无症状的,发病隐蔽,易转慢性至纤维化,所以早期正确诊断病毒感染,防止病毒继续传播尤显重要。丙肝筛查的常用方法是检测丙肝抗体,其次是检测丙肝核心抗原和丙肝RNA,HCV-RNA由于其价格昂贵限制其广泛使用;根据国内外近十几年的许多研究报道显示,HCV-cAg的灵敏度与HCV-RNA接近[2],且价格便宜,所以其使用所以其应用越来越受到重视。本文将对我院高危丙肝患者首次诊查的血清标本进行HCV-cAg、HCV-Ab 和HCV-RNA检测,分析HCV-cAg和HCV-Ab的联合检测在提高丙肝感染诊断中的价值。 1 资料与方法 1.1一般资料所有样本来自我院2014年1月~2015年1月的消化内科、传染科、血透科、肿瘤科和急诊科等共计324例,年龄分布:16~85岁,中位年龄:42岁,其中男性:185例,女性139例,所有患者标本均为首次就诊所采集的标本。 1.2试剂和仪器丙肝抗体试剂来自厦门英科新创公司,丙肝核心抗原试剂来自湖南景达生物公司,HCVRNA核酸扩增PCR检测试剂由广州达安基因公司提供,所用内标质控品购置卫生部临检中心,达安基因DA7600荧光扩增仪PCR 一台,雅培公司I2000全自动免疫分析仪一台。 1.3分析检测方法丙肝抗体和丙肝核心抗原检测采用标准酶联免疫吸附试验法(ELISA),按全自动免疫分析仪SOP文书标准化操作,丙肝RNA检测采用DA7600荧光扩增PCR仪,所有检测都与质控品同步进行确保结果准确可靠。324例临床标本同时检测HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-RNA;对HCV-cAg检测结果与HCV-RNA检测结果进行比较分析。

丙型肝炎病毒

丙型肝炎由丙型肝炎病毒(HCV)感染所致,主要由血液/体液传播。据世界卫生组织估计,全球有亿人感染HCV。在我国健康人群抗HCV阳性率为%~%,约3800万人。由于病毒生物学特点和宿主免疫功能等多方面因素,机体免疫往往难以有效清除病毒,致使约 50%~80%HCV感染者发展为慢性肝炎,其中20%~30%将发展成肝硬化。肝硬化患者中每年有1%~4%发展成为肝细胞癌症。 一、基因组特征: 丙型肝炎病毒呈球形颗粒,直径约为50nm,有一脂质包膜。基因组为单链正链RNA,链长月。整个基因组只有一个ORF,编码一条由3010~3033个氨基酸组成的聚蛋白前体,该蛋白前体在病毒蛋白酶和宿主信号肽酶作用下,裂解为病毒的结构蛋白和非结构蛋白。(如图所示) 在HCV基因组中,5’端有一个长度和序列非常稳定的非编码区(UTR),由341个核苷酸组成,形成4个二级结构域,为病毒复制和翻译所必需。此区是整个基因组中最保守的区域,所以常常选择该区域的基因序列作为基因扩增的靶序列,这样可以检测出目前已知的所有HCV基因型。3’端UTR包括3个结构域:靠近5’端为基因型特异的多变区(不同基因型之间的核苷酸序列差异较大;相同基因型之间核苷酸序列比较保守);居中部分为一个多聚U区域(poly U),含有50~62个核苷酸,对病毒RNA复制至关重要,但不同基因型的HCV的多聚U区域长度不等;3’端尾部为高度保守的发夹样结构,称为X-tail。通过定点突变破坏这一结构会导致RNA病毒复制的显著降低,说明该区域对RNA病毒有效复制同样重要。5’端和3’端UTR之间是一个ORF并且分成9个区域:核心区→E1区→NS1/E2区→NS2区→NS3区→NS4a区→NS4b区→NS5a区→NS5b区。其中NS5b区域在不同型HCV中同源性较低,可作为HCV分型依据。 二、分类 急性丙型肝炎——成人急性丙型肝炎病情相对较轻,多数为急性无黄疸型肝炎,ALT升高为主,少数为急性黄疸型肝炎,黄疸为轻度或中度升高。可出现恶心,食欲下降,全身无力,尿黄眼黄等表现。单纯丙肝病毒感染极少引起肝功能衰竭。在自然状态下,其中仅有15%的患者能够自发清除HCV达到痊愈,在不进行抗病毒治疗干预的情况下,85%的患者则发

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