ELISA试剂及溶液配制及实验步骤

ELISA试剂及溶液配制及实验步骤
ELISA试剂及溶液配制及实验步骤

ELISA试剂及溶液配制

①包被液:0.05mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.6)

0.75g碳酸钠,1.46g碳酸氢钠,加去离子水定容至500ml。

②0.02mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)

0.2g磷酸二氢钾,2.90g磷酸氢二钠,8g氯化钠,加去离子水定容到1000ml。

③抗体稀释液:0.02mol/L PBS(pH7.4)+0.2%BSA

0.2gBSA加配好的0.02mol/L磷酸盐缓冲液溶解定量至100g。

④封闭液:0.05mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.6)+2.0%BSA

2.0gBSA加配好的0.05mol/L碳酸盐缓冲液溶解定量至100g。

⑤洗涤液:0.02mol/L PBS(pH7.4)+0.05%Tween-20

将50ulTween-20溶入100ml0.02mol/L磷酸盐缓冲液中,震荡混匀。

⑥显色液:TMB-过氧化氢尿素溶液

A液(3,3’,5,5’-四甲基联苯胺,TMB):称取TMB20mg溶于10ml无水乙醇中,完全溶解后,加双蒸水至100ml。

B液(0.1mol/L柠檬酸-0.2mol/L磷酸氢二钠缓冲液,pH5.0-5.4):称取

Na

2HPO

4

·12H

2

O14.34g,柠檬酸1.87g溶于180ml双蒸水,加0.75%过氧化氢尿素

1.28ml,定容至200ml,调pH至5.0-5.4。

将A液和B液按1:l混合后即成TMB-过氧化氢尿素应用液。

⑦终止液:2mol/L H

2SO

4

溶液

10ml98%浓硫酸加入60ml双蒸水中,定容至100ml,室温保存。

⑧酶标二抗:HRP标记的羊抗兔 IgG,应用时用抗体稀释液稀释3000倍。

2.2.6 抗血清的分离

采集血液后,去掉针头,缓慢注入已经灭菌的三角烧瓶中,待凝固后用灭菌滴管将血液沿边缘剥离,室温放置1小时,再放入4℃冰箱过夜(不能冰冻,否则产生溶血),使血清充分析出。第二天取出后以4℃3000r/min离心30min,取上清,分装后-20℃保存备用。

2.2.7 间接ELISA法检测家兔抗血清效价

(1)抗原包被

用包被液(0.05mol/L的碳酸盐缓冲液,pH9.6)把抗原稀释为0.01mg/ml,将稀释好的抗原液于每个酶标板孔中加入100μl。把酶标板置入湿盒内,于4℃包被过夜。

(2)洗板

弃去包被液,用洗涤液加满所有酶标孔,用纱布和卫生纸包住扣干。1次,末次将水扣干。

(3)封闭

在酶联板上每孔加入250μl封闭液(pH9.6, 0.05mol/L碳酸盐缓冲液含2.0%BSA),将酶联板置于湿盒内,4℃孵育过夜。也可37℃孵育2h。

(4)弃去封闭液,洗涤1次同上。

(5)加一抗(家兔抗血清)

将免疫小鼠抗血清10μl 加到990μl 的抗体稀释液中制成1:100的抗血清。(于1.5ml的EP管中操作)。给酶标板上A行的1号孔加100μl的1:100的血清。给酶标板上A行的2到12孔各加入抗体稀释液100 μl,然后给A组的第二孔加入100μl 1:100的抗血清,吹吸十次后吸取100μl的血清加到第三孔,再吹吸十次取100μl加到第四孔,依次加到第12孔,最后从第十二孔中吸出100μl舍弃。这样每孔均为100μl,经过11次二倍稀释,血清稀释度为1:204800。B、C行同上操作。

给D行的前两个孔只加入100μl的抗体稀释液做为空白对照,3-4孔加入100μl稀释100倍的阴性血,5-6孔不加抗原,只用封闭液封闭,每孔加入100μl稀释100倍的抗血清作对照。加完后将酶连板放在湿盒内37℃孵育1h。

(6)洗涤同上。

(7)加酶标二抗

各孔加入稀释倍数为1:3000的酶标二抗(羊抗兔)100μl,37℃湿盒内孵育1h。

(8)洗涤同上

(9)显色

每孔各加A,B液50μl后将酶连板放入湿盒内避光3min左右,当阴性对照孔显蓝绿色时终止。终止时每孔加入50μl的2mol/L浓硫酸[32-34]。

(10)检测

终止后迅速用酶标仪测定酶连板各孔A

405和A

450

的值。

化学实验报告 实验__盐酸标准溶液的配制与标定1

实验报告 姓名:班级:同组人:自评成绩: 项目:盐酸标准溶液的配制与标定课程:学号: 一、实验目的 1. 掌握减量称量法称取基准物质的方法,巩固称量操作。 2. 掌握用无水碳酸钠作基准物质标定盐酸溶液的原理和方法。 3. 正确判断甲基红-溴甲酚绿混合指示剂的滴定终点。 二、实验原理 由于浓盐酸易挥发放出HCl气体,直接配制准确度差,因此配制盐酸标准溶液时需用间接配制法。标定盐酸的基准物质常用无水碳酸钠和硼砂等,本实验采用无水碳酸钠为基准物质,以甲基红-溴甲酚绿混合指示剂指示终点,终点颜色由绿色变为暗紫色。 用Na2CO3标定时反应为: 2HCl + Na2CO3 ══2NaCl+H2O + CO2↑ 注意事项: 由于反应产生H2CO3会使滴定突跃不明显,致使指示剂颜色变化不够敏锐,因此,在接近滴定终点之前,最好把溶液加热煮沸,并摇动以赶走CO2,冷却后再滴定。 三、仪器和药品 仪器:分析天平,称量瓶,酸式滴定管(50mL),锥形瓶(250mL),量筒(50mL),吸量管(2mL),试剂瓶(250mL),烧杯(250mL),电炉子,石棉网。 试剂:盐酸(A.R),无水碳酸钠(基准物质),甲基红-溴甲酚绿混合指示剂。 四、内容及步骤 1. 盐酸溶液(0.1mol/L)的配制 用移液管移取盐酸1.8mL,加水稀释至200mL,混匀,倒入细口瓶中,密塞,备用。 2. 盐酸溶液(0.1mol/L)的标定 用减量称量法称取在270~300℃灼烧至恒重的基准无水碳酸钠三份,每份重 0.15~0.22g,称至小数点后四位,分别置于三个已编号的250mL锥形瓶中,以50mL蒸馏水溶解,加甲基红-溴甲酚绿混合指示剂10滴,用0.1mol/L盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为紫红色,煮沸2分钟,冷却至室温后继续滴定至溶液呈暗紫色为终点,记下消耗HCl标准溶液的体积。平行测定3次,以上平行测定3次的算术平均值为测定结果。 五、实验结果记录与计算 1. 数据记录

液体配制及实验方法

(一)液体配制 1.完全培养基 DMEM+10%FBS+1%双抗+(1%HAPS液) 若放置时间长于2周加1%谷氨酰胺 2.PBS 1000ml去离子水中溶解8.0gNaCl、0.2gKCl、2.89gNa2HPO4、0.26gNaH2PO4 3.胰酶 用之前调节PH值至7.6 4.CaCl2 将0.165gCaCl2粉末溶于10ml去离子水中配制成50X的溶液 每5ml胶原酶中加入100μl CaCl2溶液(终浓度3μmol/L)用于激活胶原酶的活性 5.双抗 终浓度:青霉素100万U/100ml 链霉素100万U/100ml 青霉素0.6μg为1个单位链霉素 1.2195μg为一个单位 称取青、链霉素粉末各0.6、1.2195g溶于10mlPBS中再定容至100ml 6.两性霉素B 100mg两性霉素B粉末溶于40mlPBS中,制成浓度为2.5mg/ml(1000X)的浓缩液 每100ml完全培养基中加入100μl 浓缩液,稀释为终浓度2.5μg/ml 7.细胞冻存液 20%DMSO+80%FBS(1mlDMSO+4mlFBS) 8STZ溶液 STZ溶于柠檬酸和柠檬酸三钠的盐溶液中 称取柠檬酸0.105g溶于5mlPBS 称取柠檬酸三钠0.145g溶于5mlPBS中混合两者制成10毫升的溶解液. 再将100mgSTZ粉末溶于该溶解液中制成浓度1%的STZ溶液,调节PH值至4.5,4°避光保存,由于STZ水溶性不稳定,溶液最好在半小时内使用完毕. 9油红O 原液:油红O 0.6g溶于异丙醇(99% )100ml 。 稀释液:油红O 原液20ml ,蒸馏水20ml ,过滤后使用。 10茜素红 称取0.1g茜素红粉溶于100mlPBS,调节PH值到7.2,过滤后使用.

实验室常用溶液及试剂配制(重新排版)

实验室常用溶液及试剂配制 一、实验室常用溶液、试剂的配制-------------------------------------------------------1 表一普通酸碱溶液的配制 表二常用酸碱指示剂配制 表三混合酸碱指示剂配制 表四容量分析基准物质的干燥 表五缓冲溶液的配制 1、氯化钾-盐酸缓冲溶液 2、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、乙酸-乙酸钠缓冲溶液 5、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、氨水-氯化铵缓冲溶液 8、常用缓冲溶液的配制 二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-----------------------------------------------4 1、硝酸银(C AgNO3=0.1mol/L)标准溶液的配制 2、碘(C I2=0.1mol/L)标准溶液的配制 3、硫代硫酸钠(C Na2S2O3=0.1mol/L)标准溶液的配制 4、高氯酸(C HClO4=0.1mol/L)标准溶液的配制 5、盐酸(C HCl=0.1mol/L)标准溶液的配制 6、乙二胺四乙酸二钠(C EDTA =0.1mol/L)标准溶液的配制 7、高锰酸钾(C K2MnO4=0.1mol/L)标准溶液的配制 8、氢氧化钠(C NaOH=1mol/L)标准溶液的配制 三、常见物质的实验室试验方法 ----------------------------------------------------------6 1、柠檬酸(C6H8O7·H2O) 2、钙含量测定(磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca(H2PO4)2·H2O、钙粉等) 3、氟(Fˉ)含量的测定 4、磷(P)的测定 5、硫酸铜(CuSO4·5H2O) 6、硫酸锌(ZnSO4·H2O) 7、硫酸亚铁(FeSO4·H2O) 8、砷 9、硫酸镁(MgSO4) 四、维生素检测--------------------------------------------------------------------------------8 1、甜菜碱盐酸盐 2、氯化胆碱

实验一 溶液的配制

实验一溶液的配制 【实验目的】 1. 掌握几种配制一定浓度溶液的方法和液体、固体试剂的取用方法。 2.熟悉量筒、容量瓶、托盘天平的正确使用方法。 3.了解溶液配制的一般原则。 【实验原理】 溶液浓度有几种不同的表示方法:物质的量浓度、质量浓度、质量摩尔浓度、质量分数、体积分数等等。 物质的量浓度=溶质的物质的量/溶液体积; 质量浓度=溶质质量/溶液体积; 质量摩尔浓度=溶质的物质的量/溶质的质量 质量分数=溶质质量/溶液质量; 体积分数=液体溶质的体积/溶液体积。 要配制一定浓度的溶液,首先要弄清楚是配制哪种类型浓度的溶液(根据浓度的单位判断),再根据所需配制溶液的浓度、体积与溶质的量三者的关系,计算出溶质的量。如果求出的是溶质的质量,则用天平称取溶质;如果求出的是溶质的体积,则用量筒量取溶质的体积。最后加水至所要求的溶液的质量或体积即可。 配制溶液还包括稀释溶液:根据溶液稀释前后溶质的量不变,首先利用稀释公式(如:c1V1=c2V2)计算出浓溶液的体积,然后用量筒量取一定体积的浓溶液,再加蒸馏水稀至所需配制的稀溶液的体积,混合摇匀即可。 配制一般溶液(即溶液浓度准确度要求不高的溶液),可以用量筒、托盘天平等仪器进行配制;但如果要配制标准溶液(即溶液浓度准确度要求高的溶液),则应采用分析天平、移液管、容量瓶等精密仪器进行配制。 【仪器与试剂】

烧杯、洗瓶、容量瓶(100mL、250mL、1000mL各一个)、玻璃棒、胶头滴管、托盘天平、药匙、量筒(100mL)、电子天平。 NaCl固体(AR),95%酒精、40%甲醛溶液、碘、碘化钾、重铬酸钾固体(AR)、浓硫酸-重铬酸钾洗液、蒸馏水、NaOH固体(AR)。 【实验步骤】 一、移液管的洗涤 移液管和刻度吸量管一般采用橡皮吸耳球吸取铬酸洗涤液洗涤,沥尽洗涤液后,用自来水冲洗,再用蒸馏水洗涤干净。(具体步骤详见“实验四十六滴定分析基本操作”)。 二、容量瓶的准备与洗涤 1. 容量瓶的准备 使用前要检查是否漏水。检查方法是:往容量瓶中加入约1/3体积的水,盖好瓶塞,瓶外水珠用布或滤纸擦拭干净,左手按住瓶塞,右手拿住瓶底,将瓶倒立2 min,观察瓶塞周围是否有水渗出。如不漏水,将瓶直立,将瓶塞转动约180°后,再倒立试一次。 2. 容量瓶的洗涤 容量瓶一般不用刷子机械地刷洗,其内壁的污渍最好用浓硫酸-重铬酸钾洗液来清洗,小容量瓶可装满洗液浸泡一定时间;容量大的容量瓶则不必装满,注入约1/3体积洗液,塞紧瓶塞,摇动片刻,隔一些时间再摇动几次即可洗净。然后用水冲洗掉洗液,对着光亮检查一下是否已被洗净,内壁水膜是否均匀。如果发现仍有水珠,则应再用洗液浸泡后再检查,直到彻底洗净为止。最后用去离子水(或蒸馏水)洗去自来水。去离子水每次用量约为被洗仪器体积的1/3,一般洗2~3次。 三、溶液的配制 1. 配制250mL生理盐水(9g/L的NaCl溶液) (1)计算:所需NaCl的质量=0.25×9=2.25克。 (2)称量:在天平上称量约2.25克NaCl固体,并将它倒入小烧杯中。 (3)溶解:在盛有NaCl固体的小烧杯中加入适量蒸馏水,用玻璃棒搅拌,

一定物质的量浓度溶液的配制实验报告

班级:姓名:评分: 一定物质的量浓度溶液的配制实验报告 【实验目的】1.练习配制一定C B的溶液 2.加深对物质的量浓度概念的理解 3.练习容量瓶的使用方法。【实验仪器】其中玻璃仪器()【实验药品】NaCl、蒸馏水 实验Ⅰ配制100mL1.00 mol/L的NaCl溶液 【实验步骤】 1.计算:需要NaCl固体的质量为g。(写出计算式:)2.称量:用托盘天平称量时,称量NaCl固体的质量为g。 3.溶解:把称好的NaCl固体放入中,用量筒量取ml蒸馏水溶解。 4.移液:待溶液后,将烧杯中的溶液用引流注入容量瓶中。 5.洗涤:用少量蒸馏水洗涤烧杯内壁次,洗涤液也都注入容量瓶。轻轻摇动容量瓶,使溶液混合均匀。 6.定容:将蒸馏水注入容量瓶,待液面离容量瓶刻度线下时,改用 滴加蒸馏水至。 7.摇匀:盖好容量瓶瓶塞,反复上下颠倒,。 8.装瓶:将配制好的试剂倒入试剂瓶,贴好标签。 注:主要仪器介绍---容量瓶 1.容量瓶是细颈平底玻璃瓶,瓶上标有、和,瓶口配有磨口玻璃塞或塑料塞。 2.常用规格有: mL、 mL、 mL、 mL、 mL等。为了避免在溶解或稀释时因吸热、 放热而影响容量瓶的容积,溶液应先在烧杯中溶解或稀释并冷却至室温后,再将其转移到容量瓶中。 3.使用范围:用来配制一定体积,一定物质的量浓度的溶液 4.注意事项: ①使用前要检查是否漏水(检漏):加水-塞塞-倒立观察-若不漏-正立旋转180°-再倒立观察-不漏。 ②溶解或稀释的操作不能在容量瓶中进行③不能存放溶液或进行化学反应 ④根据所配溶液的体积选取规格⑤使用时手握瓶颈刻度线以上部位,考虑温度因素

实验Ⅱ用98%浓硫酸配制500mL 2.00mol/L稀硫酸 实验用品:实验仪器: (一)实验步骤: 1.计算:需要浓硫酸的体积为mL。(写出计算式:) 2.量取:用量筒量取浓硫酸 3.稀释:。4.移液:待溶液后,将烧杯中的溶液用引流注入容量瓶中。 5.洗涤:用少量蒸馏水洗涤烧杯内壁次,洗涤液也都注入容量瓶。轻轻摇动容量瓶,使溶液混合均匀。 6.定容:将蒸馏水注入容量瓶,待液面离容量瓶刻度线下时,改用 滴加蒸馏水至。 7.摇匀:盖好容量瓶瓶塞,反复上下颠倒,。 8.装瓶:将配制好的试剂倒入试剂瓶,贴好标签。 实验Ⅲ配制480mL 4mol/L NaOH溶液 (一)实验步骤:(选择容量瓶的规格:mL) 1.计算:需要NaOH固体的质量为g。(写出计算式:)2.称量:用托盘天平称量NaOH时,应注意 3.溶解:把称好的NaOH固体放入中,用量筒量取ml蒸馏水溶解。 4.移液:待溶液后,将烧杯中的溶液用引流注入容量瓶中。 5.洗涤:用少量蒸馏水洗涤烧杯内壁次,洗涤液也都注入容量瓶。轻轻摇动容量瓶,使溶液混合均匀。 6.定容:将蒸馏水注入容量瓶,待液面离容量瓶刻度线下时,改用 滴加蒸馏水至。 7.摇匀:盖好容量瓶瓶塞,反复上下颠倒,。 8.装瓶:将配制好的试剂倒入试剂瓶,贴好标签。 思考与讨论: 1.比较上述三个实验的步骤,交流一定物质的量浓度溶液配制的注意事项 2.溶液的溶质:所加的物质一定是溶质? 如:用Na2CO3·H2O配制溶液 温馨提示:实验方案设计包括的内容(一个完整的实验方案) 【实验名称】【实验目的】【实验原理】【实验用品】(仪器〈装置〉、药品及其规格等)【实验步骤】【实验现象、数据等记录及其结果分析】【问题和讨论】(试验设计的评价及改进意见)练习:自行设计实验室制取氧气的实验报告

常用实验试剂配制

1DEPC水(1‰) 1000ml 水 1ml DEPC 根据需要确定要配的体积,泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用,泡24小时。配液体的DEPC水37℃过夜,送至高压,然后配相关溶液。 20.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris 1000ml DEPC水 用HCL调ph至7.5,高压备用。 3 4%PFA的配制(ph 7.0)40g PFA 1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压) 将溶液持续加热至60℃左右,搅拌之至完全溶解,注意温度不要超过65℃,否则PFA降解失效。 30.2% 甘油/0.1M tris 20ml 甘油 980ml 0.1Mtris 4 20XSSC Nacl 175.3g (ph 7.0)柠檬酸钠88.2g DEPC水1000ml 分别稀释至2XSSC和0.2XSSC备用 5 HEPES 溶液HEPES 23.8g (ph6.8-8.0)DEPC H2O 100ml 6 50X Denhaldt′s 液 聚蔗糖(Ficoll 400)0.2g 聚乙烯吡咯烷酮(polyvinypyrrolidone) 0.2g 牛血清蛋白(BSA)0.2g DEPC 水20ml 7 预杂交buffer Deinoized formanmid 5ml 20X SSC 1.5ml 1M HEPES 0.5ml 50X Denhanldt′s液1ml 龟精DNA 0.6ml(4ug/ul) DEPC水 1.4ml 龟精DNA 要先95℃10-15min加热变性,随即冰浴。杂交buffer分装后-20℃保存。 8Washing buffer (ph7.5) maleic acid 5.8g NACL 4.4g Tween(吐温) 1.5ml 定容至500ml溶质浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 0.3% Tween 9Maleic acid buffer (ph7.5) Maleic acid 5.8g Nacl 4.4g 定容至500ml 溶质的浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 10Detection buffer

实验一 溶液的配制(基础化学)

实验一溶液的配制 一、实验目的 1.常用仪器的认知。 2.掌握一般溶液的配制方法和基本操作。 3.掌握练习吸量管、容量瓶正确使用方法,练习电子天平的使用。 4.掌握溶液的质量摩尔浓度,物质的量浓度概念和计算方法。 二、实验原理 浓度的表示方法 (一)用固体配置(ω) 1、质量分数(ω) ω=m质/m液m质=(ω*V剂)/(1-ω) 2 质量摩尔浓度(b) b=n质/m剂b= (m质/M质) /ρV剂m质= M质b V剂 3、物质的量浓度(c) c= n 质/ V 液 =(m 质 /M 质 ) /V 液 m 质 = c V 液 M 质 (二) 用液体或浓溶液配置 1、质量分数(十字交叉法) (1)混合两种已知浓度的溶液,配置所需浓度溶液的计算方法。 例:由85%和40%的溶液遏制60%的溶液,则 85 20 需用20份85%的溶液和25份40%的溶液。 60 40 25 (2)用溶剂稀释原理配置成所需溶液浓度 35 20 需用20份35%的溶液和15份0%的溶液。 20 0 15 2、物质的量浓度 (1)由已知物质的量浓度溶液稀释 c= n 质/ V 液 n=cV V 原 =(c 新 V 新 )/c 原 三、实验用品 1、仪器:电子天平、烧杯、量筒、容量瓶、吸量管、洗耳球、移液管、胶头滴管、玻璃棒等; 2、药品:固体药品CaCl2 液体药品- H2SO4(浓)

四、实验步骤 (二)溶液配制 1.粗配溶液 (1)配制50 mol 0.5mol·L-1的CaCl2溶液 算出配制此溶液所需的固体氯化钙和水各为几克,将水量换算成体积。用干燥小烧杯(100mL),用台式天平迅速称出所需氯化钙,用量筒将所需蒸馏水的大部分加到烧杯中,搅拌溶解,冷至室温,用量筒量取剩余部分蒸馏水倒入烧杯即可。 2. 准确配制一定浓度溶液 (2)准确配制1.0mol/L H2SO4溶液50mL 计算配制 1.0mol/L H2SO4溶液所需浓H2SO4溶液体积,用吸量管吸取浓H2SO4溶液转入到50mL容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度。 六、思考题 1.稀释浓硫酸应如何操作,为什么? 2.用移液管时,哪只手拿洗耳球,哪只手拿移液管?

液体洗涤剂的配制实验报告

实验日期成绩 同组人××× 闽南师范大学应用化学专业实验报告 题目:液体洗涤剂的配制 应化×××B1组 0 前言 实验目的:1.掌握配制液体洗涤剂的配方原理和工艺:2.了解配方中各组分的作用。 概述:现代洗涤剂是含有多种成份的复杂混合物。其中表面活性剂是起清洁作用的主要成份,洗涤剂中的其他成份或是为改善和增加表面活性剂的清洗效能、或是为适应某些特殊需要、或是为制成所需产品形式而加入的。各种表面活性剂和各种助剂都具有各自的特性,这些性质各异的成份混在一起,由于它们之间相互作用便会产生更加理想的洗涤效果。反之,若配方设计不当,各组份的性质也会相互抵消,产生不利的影响。因此洗涤剂的配方是决定某种洗涤产品成功与否的关键因素。洗涤剂配方的变化始终反映着洗涤工业的技术水平和社会生活水平。[1] 液体洗涤剂制造简便,只需将表面活性剂、助剂和其他添加剂,以及经过处理的水,送入混合机进行混合,即得产品。液体洗涤剂的制造不用一系列的加热干燥设备,具有节约能源、使用方便、溶解迅速等优点。液体洗涤剂要求各组分的相容性最为重要。因是液体,配方中的组分必须良好相容,才能保证产品的稳定,使之在一定温度、一定时间内无结晶、无沉淀、不分层、不混浊、不改变气味、不影响使用效果。稳定性主要取决于配方的组成,但也与制备工艺条件、操作技术以及保管条件等有关。[2] 配方的设计原理:洗涤剂的组成主要包括表面活性剂、助剂和辅助剂。在选择液体洗涤剂的主要组分时,可遵循以下一些通用原则:(1)有良好的表面活性和降低表面张力的能力,在水相中有良好的溶解能力;(2)表面活性剂在油/水界面能形成稳定的紧密排列的凝聚态膜;(3)表面活性剂能适当增大水相黏度,以减少液滴的碰撞和聚结速度;(4)要能用最小的浓度和最低的成本达到所要求的洗涤效果。[3] 1 实验方案 1.1 实验材料 仪器:传热式恒温加热磁力搅拌器、台秤、酸式滴定管、烧杯(200ml、100ml)、玻璃棒、量筒(10mL、100mL)、滴管、托盘天平、秒表、精密pH试纸、磁石

EDTA标准溶液的配制与标定实验报告

EDTA标准溶液的配制与标定 一、实验目的 (1)、掌握EDTA标准溶液的配制与标定方法。 (2)、掌握铬黑T指示剂的应用条件和终点颜色变化。二、实验原理 EDTA(Na 2H 2 Y)标准溶液可用直接法配制,也可以先配制粗略浓度,再用金属Zn、 ZnO、CaCO 3或MgSO 4 · 7H 2 O等标准物质来标定。当用金属锌标定时,用铬黑T(H 3 In) 做指示剂,在pH=10的款冲溶液中进行,滴定到溶液呈蓝色时为止。滴定反应式: 指示剂反应 Hln2- + Zn2+ = Znln- + H+ ) 滴定反应 H2Y2- + Zn2+ = ZnY2- + 2H+ 终点反应 Znln- + H2Y2-? ZnY2- + Hln2- + H+ 二、实验注意事项 (1)、称取EDTA和金属时,保留四位有效数; (2)、控制好滴定速度; (3)、加热锌溶解时,用表面皿盖住以免蒸发掉。 ? 三、主要仪器与药品 仪器:酸式滴定管、25ml移液管、250ml容量瓶、250ml锥形瓶、250ml烧杯、表面皿。 药品:EDTA二钠盐、金属锌、1:1的氨水、1:1的HCl 、铬黑T指示剂、氨水—NH4Cl缓冲液(PH=10) 四、实验过程及原始数据记录 (1)、称取分析纯EDTA二钠盐左右,配制成500ml溶液。 (2)、称取~金属Zn,加入1:1 HCl 5ml,盖好表面皿,使锌完全溶解,用水冲洗表面皿及烧杯内壁,然后将溶液移入250ml容量瓶中,再加水至刻度摇均,用25ml移液管吸此溶液置于250ml锥形瓶中,滴加1:1 氨水至开始出现Zn(OH) 2白色沉淀,再加PH=10的缓冲溶液10ml ,加水稀释至100ml ,加入少许(约)铬黑T指示剂,用待标定的EDTA溶液滴定至溶液由酒红色变为纯蓝色,即为滴定终点。 ( EDTA的标定[ m(Zn) = ]

溶液配制与滴定操作实验报告

溶液配制与滴定操作实验报告 (文章一):实验报告_酸碱标准溶液的配制和标定实验一酸碱标准溶液的配制和标定实验目的 1. 掌握标准溶液的配制方法。 2. 掌握滴定法定量测定溶液浓度的原理,熟悉滴定管、移液管的准备、使用及滴定操作。 3. 熟悉甲基橙和酚酞指示剂的使用和终点的确定。实验原理酸碱滴定法是化学定量分析中最基本的分析方法。一般能与酸或碱直接(或间接)发生酸碱反应的物质大多可用酸碱滴定法测定他们的浓度。按酸碱反应方程式中的化学计量系数之比,酸与碱完全中和时的pH值称为化学计量点,达到化学计量点时,应满足如下基本关系:cA V A ?cBVB ?A?B 式中,cA、V A、?A分别为酸的“物质的量”浓度、体积、化学计量系数;cB、VB、?B分别为碱的“物质的量”浓度、体积、化学计量系数。其中,酸、碱的化学计量系数由酸碱反应方程式决定。由于酸、碱的强弱程度不同,因此酸碱滴定的化学计量点不一定在pH=7处。通常,酸碱溶液为无色,酸碱中和是否完全,需用指示剂的变色来判断。指示剂往往是一些有机的弱酸或弱碱,它们在不同pH值条件下颜色不同。用作指示剂时,其变色点(在化学计量点附近)的pH值称为滴定终点。选用指示剂要注意:①变色点与化学计量点尽量一致;②颜色变化明显;③指示剂用量适当。酸碱滴定中常用HCl和NaOH溶液作为标准溶液,但由于浓HCl容易

挥发,NaOH固体容易吸收空气中的H2O和CO2,直接配成的溶液其浓度不能达到标准溶液的精度,只能用标定法加以标定。基准物质H2C2O4的分子式确定,化学性质稳定,不易脱水或吸水,可以准确称量,所以,本实验采用(H2C2O4·2H2O,摩尔质量为12 6.07g·mol-1)为基准物质,配成H2C2O4标准溶液。以酚酞为指示剂,用H2C2O4标准溶液标定NaOH溶液;再以甲基橙为指示剂,用标定后的NaOH标准溶液滴定HCl溶液,从而得到HCl标准溶液。仪器与试剂电子天平,酸式滴定管(50 mL),碱式滴定管(50 mL),容量瓶(250 mL),移液管(25 mL),吸耳球,锥形瓶(250 mL),试剂瓶,量筒,洗瓶,滴定台,蝴蝶夹,烧杯,玻棒,滴瓶,滴管。H2C2O4标准溶液(约0.05 mol·L-1,学生通过直接法[1]自行配制),HCl溶液(0.1 mol·L-1),NaOH溶液(0.1 mol·L-1),酚酞(1%),甲基橙(0.1%)。实验内容 1. 准备用自来水冲洗酸式滴定管、碱式滴定管、容量瓶、移液管,再用去离子水洗涤2~3次,备用。用去污粉洗涤锥形瓶、量筒、烧杯,依次用自来水,去离子水洗净。 2. 0.1 mol·L-1 HCl溶液和0.1 mol·L-1 NaOH溶液的配制(实验室备好)HCl溶液的配制:用洁净的量筒量取浓盐酸4~ 4.5 mL,倒入洁净的试剂瓶中,用水稀释至500 mL,盖上玻璃塞,摇匀,贴上标签备用。NaOH溶液的配制:通过计算求出配制1 L NaOH溶液所需固体NaOH数量,在电子天平上用小烧杯称氢氧化钠,加水溶解,然后将溶液倾入洁净的试剂瓶中,用水稀释至1 L,以橡

化学实验报告配置氯化钠溶液

化学实验报告 【实验目的】 1、练习配制一定溶质质量分数或量浓度一定的溶液。 2、加深对溶质的质量分数以及量浓度概念的理解。 【实验器材】 托盘天平、烧杯、玻璃棒、药匙、量筒、胶头滴管。 氯化钠、浓盐酸溶液、蒸馏水、容量瓶、漏斗。 【实验步骤】 1、配置质量分数为6%的氯化钠溶液 (1)计算:配制50g质量分数为6%的氯化钠溶液所需氯化钠和水的质量分别为:NaCl:50g*6%=3g ;水:47g。 (2)称量:用托盘天平称取所需的氯化钠,放入烧杯中。 (3)量取:用量筒量取所需的水(水的密度可近似看作1g/cm3),倒入盛有氯化钠的烧杯中。 (4)溶解:用玻璃棒搅拌,使氯化钠溶解。 2、用已配制好的质量分数为6%的氯化钠溶液(密度约为cm3),配制50g质量分数为3%的氯化钠溶液。 (1)计算:所得溶液中,氯化钠的质量为50g*3%=,所以需要质量分数为6%的氯化钠溶液25g(体积为26ml),蒸馏水25g(体积约为25ml) (2)量取:用量筒量取所需的氯化钠溶液和水,倒入烧杯中。 (3)混匀:用玻璃棒搅拌,使溶液混合均匀。 将上述配制好的溶液分别转入试剂瓶内,并贴上标签,区分开来。 3、配制250ml,2mol/L的稀盐酸 (1)计算所需浓盐酸的体积 设所需浓盐酸的体积为V1,则 C1*V1=*2mol/L 12mol/L*V1=*2mol/L 解得该体积为 (2)用量筒量取的浓盐酸 (3)在烧杯中加入少量(大大少于250ml)的水和量取好的浓盐酸,用玻璃棒搅拌稀释。 (4)使用漏斗将烧杯内的溶液转移到容量瓶中。 (5)用水洗涤盛过盐酸的量筒和烧杯,并把洗涤液转移至容量瓶。 (6)定容:用胶头滴管继续加水,直至溶液凹液面达到250ml刻度。 (7)压紧容量瓶瓶盖将溶液摇匀。

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法 1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L □配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。 2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。 3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 pH值浓HCl 7.4 约70mL 7.6 约60mL 8.0 约42mL 4. 将溶解定容至1L。 5. 高温高压灭菌后,室温保存。 注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。 2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl (pH8.8)□配制量1L □配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。 2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。 3. 用浓盐酸调pH值至8.8。 4. 将溶液定容至1L。 5. 高温高压灭菌后,室温保存。 注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。 3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L □配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。 1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL 500 mM EDTA(pH8.0)20mL 2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。 3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。 4. 室温保存。 4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠 (pH5.2)□配制量100mL □配置方法1. 称取40.8gNaOAc?3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。 2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。 3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。 4. 高温高压灭菌后,室温保存。 5、PBS Buffer□组份浓度137 mM NaCl,2.7mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4 □配制量1L □配置方法1. 称量下列试剂,置于1L烧杯中。 NaCl 8 g KCl 0.2g Na2HPO4 1.42 g KH2PO4 0.27g 2. 向烧杯中加入约800 mL的去离子水,充分搅拌溶解。 3. 滴加HCl将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1L。 4. 高温高压灭菌后,室温保存。 注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。 6、10 M醋酸铵□组份浓度10 M醋酸铵 □配制量100mL □配置方法1. 称量77.1g醋酸铵置于100~200 mL烧杯中,加入约30 mL的去离子水搅拌溶解。 2.加去离子水将溶液定容至100mL。 3.使用0.22μm滤膜过滤除菌。 4.密封瓶口于室温保存。 注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。 7、Tris- HCl平衡苯酚□配置方法 1. 使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。 2. 操作注意:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。所有操作均应在通风橱中进行,与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。 3. 苯酚平衡:因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相,因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到7.8以上,苯酚平衡操作方法如下: ①液化苯酚应贮存于-20℃,此时的苯酚呈现结晶状态。从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温,然后在68℃水浴中使苯酚充分溶解。 ②加入羟基喹啉(8-Quinolinol)至终浓度0.1%。该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂,同时因其呈黄色。有助于方便识别有机相。 ③加入等体积的1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。 ④重复操作步骤③。 ⑤加入等体积的0.1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。 ⑥重复操作步骤⑤,稍微残留部分上层水相。 ⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。 ⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。 8、苯酚/氯仿/异戊醇□配置方法 1. 说明:从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯/酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)。氯仿可使蛋白(25 :24 :1)质变性并有助于液相与有机相的分离,而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。 2. 配置方法:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24:1)均匀混合后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。

实验室溶液配制技巧

实验室溶液配制技巧 液体溶液配制可以说是实验室分析人员最基础的一门技术,也是每天工作中的必选项。液体溶液的配置包括溶质的计算、移液、定容等基础操作,还包括一些混合溶液的前后加入顺序及利用一些试剂自身的化学性质,掌握了溶液配制的技巧,可以大大缩短配置时间,提高实验效率。 我们都知道,溶液是由至少两种物质组成的均一、稳定的混合物,被分散的物质(溶质)以分子或更小的质点分散于另一物质(溶剂)中。溶液是混合物。种类分为:一般溶液和标准溶液。一般溶液只是专指液体溶液。 一般溶液的配制过程 1.计算:计算配制所需固体溶质的质量或液体浓溶液的体积。 2.称量:用托盘天平称量固体质量或用量筒或移液管量取液体体积。 3.溶解:在烧杯中溶解或稀释溶质,恢复至室温(如不能完全溶解可适当加热)。检查容量瓶是否漏水。 4.转移:将烧杯内冷却后的溶液沿玻璃棒小心转入一定体积的容量瓶中(玻璃棒下端应靠在容量瓶刻度线以下)。 5.洗涤:用蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒2~3次,并将洗涤液转入容器中,振荡,使溶液混合均匀。 6.定容:向容量瓶中加水至刻度线以下1~2cm处时,改用胶头滴管加水,使溶液凹面恰好与刻度线相切。 7.摇匀:盖好瓶塞,用食指顶住瓶塞,另一只手的手指托住瓶底,反复上下颠倒,使溶液混合均匀。 8.装瓶,贴签。 举例:配制500mL,L碳酸钠溶液步骤及注意事项 所需的仪器: 烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、分析天平、药匙、量筒 步骤:

第一步:计算:所需碳酸钠的质量=**106=克; 第二步:称量:在天平上称量克碳酸钠固体,并将它倒入小烧杯中; 第三步:溶解:在盛有碳酸钠固体的小烧杯中加入适量蒸馏水,用玻璃棒搅拌,使其溶解; 第四步:移液:将溶液沿玻璃棒注入500mL容量瓶中; 第五步:洗涤:用蒸馏水洗烧杯2~3次,并倒入容量瓶中; 第六步:定容:倒水至刻度线1~2cm处改用胶头滴管滴到与凹液面平直; 第七步:摇匀:盖好瓶塞,上下颠倒、摇匀; 第八步:装瓶、贴签; 误差分析: 固体药品的称量与液体药品的量取是否准确; 把溶液向容量瓶中转移,溶液洒了; 未洗涤烧杯和玻璃棒; 用待配液润洗了容量瓶; 定容时水加多了或加少了; 定容时未平视刻度线。 仰视、俯视对溶液浓度有何影响 ★俯视刻度线,实际加水量未到刻度线,使溶液的物质的量浓度增大; ★仰视刻度线,实际加水量超过刻度线,使溶液的物质的量浓度减小。 标准溶液配制过程 标准溶液(standard solution),指的是援引美国加联数据库定义已知准确浓度的溶液。在滴定分析中常用作滴定剂。在其他的分析方法中用标准溶液绘制工作曲线或作计算标准。 标准溶液包括铁、锰、镍、铜、硅、钒等金属、非金属还有石油类、阴离子、标准样品及标准溶液(单标及混标共100多种)。 标准溶液配制方法有两种,一种是直接法,即准确称量基准物质,溶解后定容至一定体积;另一种是标定法,即先配制成近似需要的浓度,再用基准物质或用标准溶液来进行标定。

溶液的配制

实验3 溶液的配制 一、实验目的 了解实验室常用溶液的配制方法和基本操作 熟悉比重计、移液管、容量瓶的使用方法。 二、实验原理 溶液的配制是化学实验的基本工作环节之一,根据实验要求不同溶液的配制方法有粗配和精配即一般浓度的溶液和标准浓度的溶液,粗配借助的称量仪器一般是准确度不高的天平,如台秤或电子秤(分度为0.01g),量器有量筒、带刻度的烧杯或试剂瓶。准确浓度的溶液配制选用至少是分度为0.1mg的分析天平如半自动电光天平或电子天平,量器选用吸量管、移液管、容量瓶。对于易水解物质的溶液配制时,需加一定量的与其阴离子匹配的酸抑制其水解。对于易被氧化的溶液的配制应加相应的还原剂,抑制其氧化。如配制硫酸亚铁溶液需加入稀硫酸和少量铁粉;无论用哪一种配制方法首先要确定固体溶质的质量或液体体积。 溶液配制流程:计算取样量-称取或量取-溶解-稀释到刻度(定容) 详细配制步骤: (1)计算:计算配制所需固体溶质的质量或液体浓溶液的体积。(2)取样:用天平称量固体质量或用量器量取液体体积。 (3)溶解:在烧杯中溶解或稀释溶质,恢复至室温(如不能完全溶解可适当加热)。 (4)稀释定容:

第一、准确定容:将烧杯内冷却后的溶液沿玻璃棒小心转入一定体积的容量瓶中(玻璃棒下端应靠在容量瓶刻度线以下)。用蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒2~3次,并将洗涤液转入容器中,振荡,使溶液混合均匀。向容量瓶中加水至刻度线以下1cm ~2cm 处时,改用胶头滴管加水,使溶液凹面恰好与刻度线相切。摇匀:盖好瓶塞,用食指顶住瓶塞,另一只手的手指托住瓶底,反复上下颠倒,使溶液混合均匀。最后将配制好的溶液倒入润洗好的试剂瓶中,贴好标签。 第二、粗略定容:溶解后直接在烧杯中加溶剂至刻度或转移到试剂瓶中加水到刻度。 (5)计算依据:溶质质量或物质的量不变 粗配: 1、4%CuSO 4溶液25g ,计算称取CuSO 4·5H 2O 的质量 m=4%×50×249.68159.68 =1.56g (用台秤取样,用量筒加水?) 2、用浓硫酸配制3mol/L 的硫酸50mL 取浓硫酸多少?浓硫酸浓度为在此处键入公式。18mol/L ,V= =8.3(mL) 3、用未知浓度的HAc 溶液配制0.2mol/L 的HAc 溶液50mL ,如何确定取样量,先测定未知液的密度d 后查表确定相对浓度ρ,计算取样量 V x ρd=0.2×50×60×10-3 标准溶液配制: 配制0.1000mol/L 碳酸钠溶液100mL 称样量预算:0.1000×100×105.99×10-3=1.0599g ,然后选择50mL 或

配制一定物质的量浓度的溶液实验报告(新)

配制一定物质的量浓度的溶液实验报告 实验目的 1、练习配制一定物质的量浓度的溶液。 2、加深对物质的量浓度概念的理解。 3、练习容量瓶、胶头滴管的使用方法。 实验原理 n=C V,配制标准浓度的溶液 实验用品 烧杯、容量瓶(100mL)、胶头滴管、量筒、玻璃棒、药匙、滤纸、托盘天平、NaCl(s)、蒸馏水。 实验步骤 (1)计算所需溶质的量 (2)称量:固体用托盘天平,液体用量筒(或滴定管/移液管)移取。 (3)溶解或稀释(用玻璃棒搅拌) (4)移液:把烧杯液体引流入容量瓶(用玻璃棒引流)。 (5)洗涤:洗涤烧杯和玻璃棒2~3次,洗涤液一并移入容量瓶,振荡摇匀。 (6)定容:向容量瓶中注入蒸馏水至距离刻度线2~3 cm处改用胶头滴管滴蒸馏水至溶液凹液面与刻度线正好相切。(要求平视) (7)盖好瓶塞,反复上下颠倒,摇匀。 实验结果 计算出溶质的质量 实验结论 (1)配制一定物质的量浓度的溶液是将一定质量或体积的溶质按所配溶液的体积在选定的容量瓶中定容,因而不需要计算水的用量。 (2)不能配制任意体积的一定物质的量浓度的溶液。这是因为在配制的过程中是用容量瓶来定容的,而容量瓶的规格又是有限的,常用的有50 mL、100 mL、250 mL、500 mL、和1000 mL等。所以只能配制体积与容量瓶容积相同的一定物质的量浓度的溶液。 备注 重点注意事项: (1)容量瓶使用之前一定要检查瓶塞是否漏水; (2)配制一定体积的溶液时,容量瓶的规格必须与要配制的溶液的体积相同; (3)不能把溶质直接放入容量瓶中溶解或稀释; (4)溶解时放热的必须冷却至室温后才能移液; (5)定容后,经反复颠倒,摇匀后会出现容量瓶中的液面低于容量瓶刻度线的情况,这时不能再向容量瓶中加入蒸馏水。因为定容后液体的体积刚好为容量瓶标定容积。上述情况的出现主要是部分溶液在润湿容量瓶磨口时有所损失; (6)如果加水定容时超过了刻度线,不能将

常规实验所用溶液配方大全

常规实验所用溶液配方大全 配制 组分浓度: 0.5mol/l EDTA, PH=8 配制量:500ml 配制方法(1)称取93.06克,置于500 ml烧杯中 (2)加入约400ml dd H2O.用热磁力搅拌器充分搅拌 (3)用NaOH调节PH值到8,约用10克固体NaOH (4)在溶液冷却后,再用NaOH调节至PH=8 (5)加dd H2O将溶液定容到500 ml (6)高温高压灭菌后,室温保存 2.NaOH溶液的配制 组分浓度:5 mol/l NaOH 配制量:100 ml 配制方法(1)称取固体NaOH20克于容器中 (2)加入dd H2O定容到100 ml 3.100 mmol/l Tris-HCl的配制 组分浓度: mmol/l Tris-HCl, PH=6.4 配制量:250 ml 配制方法(1)称取3.025克Tris于250 ml烧杯中. (2)加入约200ml dd H2O充分搅拌溶解. (3)用浓盐酸调节PH值到6.4.所用浓盐酸约3 ml (4)将溶液定容至250ml (5)用棕色瓶分装于4度冰箱中 (6)如使用,用水浴加热溶解. 4.氯仿-异戊醇的配制: 配制方法(1)简单的体积混合,既要求比例为24:1即可 (2)储存于棕色玻璃瓶子中 (3)置于4度冰箱以便日后使用 5.去污剂: CTAB:可将细胞膜裂解,使DNA释放到提取液中,同时也使组织匀浆中的蛋白质变性. EDTA:能与DNase的辅助因子Mg2+结合,使DNase失去活性,不能降解从细胞中释放的DNA. 6.还原剂巯基乙醇:它抑制从细胞中释放的多酚氧仿.防止植物组织发黄变褐. 7.氯仿—异戊醇:它可把组织匀浆中变性的蛋白质除去,将DNA与细胞中的蛋白质、碳 水化合物等分开除去. 8.RNase:它可去除核酸中的RNA,只留下DNA. 9.硅珠悬浮液的配制 (1)称取1.2g硅珠粉,溶解于10ml无菌水中. (2)放入4℃冰箱备用.

溶液的配制实验教学设计

溶液的配制实验教学设计 实验名称:配制100g10%的氯化钠溶液 实验目的: 1、掌握溶液的配制及步骤。 2、熟悉仪器的使用。 实验器材:托盘天平(砝码)、药匙、量筒(100ml)、胶头滴管、烧杯、玻璃棒、大小相同的同种(质量相同)的纸片 药品:氯化钠粉末一瓶、蒸馏水一瓶 教学过程: 一、让各小组将相关溶液配制的实验方案上交并说出方案的可行性及优缺点。 二、让大家相互交流得出配制溶液的实验步骤及注意事项。 三、让学生指出实验室所需仪器。 对实验所需仪器、药品逐一检查,并向实验监督员报告 四、实行实验,教师实行指导,记录各组的试验不足。 第一步:计算。(确定配制溶液浓度5%,计算并填写所需氯化钠和水的质量氯化钠5克,水95克) 第二步:称取氯化钠质量。(托盘天平归零并调节平衡,在托盘天平两端各放一张质量相等的纸片。取下氯化钠瓶塞、倒放瓶塞,用药匙取出氯化钠、即时盖塞。用镊子把砝码或游码固定质量5克、称量、读数、倒入待测烧杯待溶。砝码游码分别归位。) 第三步:量取水的体积。(取盛水瓶塞并倒放瓶塞,标签贴手心,

向量筒内倾倒水,并倾斜量筒,倒到快到95的刻度线,立即停这时候要用胶头滴管,因为胶头滴管和量筒是配套使用的。先捏瘪胶头滴管的胶头,然后放入水中,松开后拿出水面,逐量滴加水至定量。为了防止拿胶头滴管的手抖动,采用拿毛笔的方法拿滴管:中指和无名之夹住滴管,大拇指和和食指挤压胶头。水平放置量筒,平视量筒读数。倒入装有氯化钠的烧杯。) 第四步:溶解(用玻璃棒轻轻搅拌氯化钠与水的混合物至完全溶解,防止溶液溅出,或搅拌用力过猛损坏仪器。) 第五步:保存(将配置好的溶液倒入试剂瓶存放、贴上标签。)第六步:清洗仪器、整理、复位(清洗烧杯、玻璃棒) 第七步:填写实验记录(配制的质量分数为5% 氯化钠的质量5克水的体积95毫升) 五、实行讨论,让同学们指出不准确的实验操作导致的后果。

实验常用试剂,缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法 Ampicillin(氨卡青霉素)100mg/ml □组份浓度100mg/ml Ampicillin □配制量50mL □配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。 2.加入40mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。 3.用0.22μm滤膜过滤除菌。 4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。 Kan(卡那霉素)50mg/ml □组分浓度50mg/ml卡那霉素 □配制量50mL □配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。 2.加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50mL。 3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。 4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。 IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml □组份浓度24mg/L IPTG □配制量50mL □配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。

2.加入40mL 灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。 3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。 4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。 X- Gal 20mg/m □组份浓度20mg/L X-Gal □配制量50mL □配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。 2.加入40mL DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解, 定容至50mL。 3.小份分装(1mL/份)后,-20℃避光保存。 LB培养基 □组份浓度1%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)Yeast Extract,1%(W/V)NaCl □配制量1L □配置方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中 Tryptone(胰化蛋白胨)10g Yeast Extract(酵母提取物)5g NaCl(氯化钠)10g 2.加入约800mL 的去离子水,充分搅拌溶解。 3.滴加5N NaOH(约0.2mL),调节pH值至7.2-7.3。

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