药物血浆浓度的测定及半衰期的计算

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一、实验目的

1.以磺胺嘧啶钠为例学习测定药物血浆浓度、药物血浆半衰期(ｔ1/2) 及表观分布容积(Ｖｄ)

等药动学参数的基本方法。

2.理解常用药动学参数的临床意义。

二、实验材料

1.实验动物：家兔1只

2.器材:试管24支，移液吸管(10mｌ1支，１mｌ2支,2ml ７支），移液器1支,吸头若

干,试管夹,试管架，离心机，72２型分光光度计，手术剪，眼科剪,止血钳,动脉夹，眼科镊,

缝线，药棉,纱布，捆扎绳,注射器(10ml １支,5mｌ1支)。

3.药品:５％磺胶略啶钠溶液,7.５%三氯醋酸溶液,０.5%亚硝酸钠溶液,0。５％麝香草酚钠溶液

（溶于2０％氢氧化钠浓度内)，草酸钾结晶，２0％乌拉坦容液，肝索注射液，生理盐水。

三、实验方法和步骤

1.取试管6支,依次用A1、A2、Ａ3……A６标记，各加入７.５%三氯醋酸2mｌ备用。

2.取试管6支，依次用Ｂ１、Ｂ2、Ｂ3……B6标记,各加人草酸钾结晶几粒。

3.取家兔1只，称重，以20% 乌拉坦溶液1g/kg (5 ｍl/kｇ) 耳缘静脉注射麻醉，背位固定

于手术台上，正中切开颈部皮肤，分离一侧颈总动脉，结扎其远心端,并在近心端夹上动

脉夹,以阻断血流,再将放血导管向心脏方向插人颈总动脉内,用线打活结固定。

4.松开动脉夹,放血约１ml，置于B 管，迅速摇匀抗凝,然后耳缘静脉注人5% 磺胺嘧啶钠１5

０mg／kg （3 mｌ/ｋｇ)，记录注完时间（准确到分钟）。

5.给药后５、1０、2０、３０、40 mｉn，用同样方法放血约1ml,分别置于B2、Ｂ３、B4、Ｂ

5、Ｂ６管，迅速摇匀，记录取血标本的准确时间,然后B1~ B6管以1５００转/min 离心5 min,

准确吸取上层血浆5０μl加人相应的各A 管，各管以15０0转1分离心5 ｍｉn,分别取

离心后的上清液1．5 mｌ,加０。5％亚硝酸钠溶液0.５ｍl,摇勾，再加０.５％麝香草

酚1ｍl,可见橙红色反应。以给药前血样为空白对照,用７22 型分光光度计于525m 波长

处进行比色,测定各取血时间点的光密度，用标准曲线方程计算磺胺嘧啶钠浓度.

6.标准曲线的制作用免血配制不同浓度的磺胺嘧啶钠溶液，按方法５项进行重氮化及偶联反

应，分别测定吸光度。以磺胺嘧啶钠溶液浓度为横坐标,其吸光度为纵坐标，进行直线回

归，求标准曲线回归方程。

四、实验结果

给药后不同时间点的磺胺嘧啶钠浓度

管号 1 2 3 4 ５６

给药时间0.0５8 0。09８0.０8６0.075 0。074 0．07５吸光度值/ ３０。7１24 ２３。707１１７。２855 １6。7017 17.28５５磺胺嘧啶钠浓

度

/ 1．４873 1.3７49 1.2377 1.2２２8 １。2377 对数磺胺嘧啶

钠浓度

/ 5 １5 2０40 6０

K和ｔ１/2换算

五、实验讨论

1.磺胺类药物检测机制

磺胺类药物为对氨基苯磺酰胺类化合物,在酸性溶液中，可与亚硝酸钠起重氮反应,产生重氮盐。在碱性溶液中,重氮盐可与酚类化合物（麝香草酚）起偶氮反应,形成橙红色的

偶氮化合物。采用分光光度检测法,在525nｍ波长进行比色测定。根据Beer-Lamｂert定

律，药物浓度与光密度呈正比关系。

2.一级消除动力学规律

多数药物在体内按一级动力学的规律而消除，静脉注射给药后,不同时间采血，测定血浆浓度,以药物浓度的对数值为纵坐标，时间为横坐标，其药时曲线常呈直线.

图1。零级＆一级消除动力学曲线

该直线的方程为：lｇCｔ=lgＣ０+(—Ｋ/２。20３)t

根据此曲线方程可求出斜率b值。消除速率常数K＝-2.３03ｂ，进而求出血浆半衰期。

药物血浆半衰期为t1／2=0．69３/K

六、实验反思

实验过程中,家兔在实验过程中发生死亡,在实验过程中每次取血后从动脉导管中反推肝素，而肝素并不是造成家兔死亡的主因。推测是由于反复逆流推送肝素,可能使心肌前负荷不稳定改变，心脏搏动异常，以至于发生心室肌颤动，这可能是实验过程中家兔的主要死亡原因。

除此之外,也可能由于实验时程较长,不断取血，取血量过多后导致家兔缺血性休克的发生。