虫草素化学式
虫草素化学式
虫草素化学式：C10H13N5O3
虫草素又称冬虫夏草素、虫草菌素、蛹虫草菌素，别名3′－脱氧腺苷，化学式为C10H13N5O3，是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗生素。20世纪50年代，野生蛹虫草在吉林长白山一带被发现，研究证实其成分功效远超野生冬虫夏草，故而命名北冬虫夏草。
虫草素
1.前言 蛹虫草为我国传统药用大型真菌，其药用活性成分主要为虫草素。其作为冬虫夏草的替代品之一，虫草素含量较冬虫夏草高约3到6倍。据研究，虫草素有着重要的药用功效和生化用途，因为具有较大的开发利用前景。虫草素的分子式为C10H13O3N5，分子量为251.24，且能溶于水及热乙醇、甲醇，不溶于苯、乙醚、氯仿。目前虫草素纯品在国际市场上的价格约为1500美元/g，其经济效益非常可观，故其提取、分离、纯化的方法很值得研究。 2 人工蛹虫草及虫草素介绍 2.1人工蛹虫草 蛹虫草是一种具有滋补作用的中药和营养品，其所含的虫草素、虫草多糖具有独特的药理及保健作用。蛹虫草人工栽培成功以来药理和毒理等方面的研究得到了广泛的进展。研究表明人工蛹虫草和冬虫夏草有着极相似的作用，无毒副作用。近年来，随着人们对人工蛹虫草的滋补保健功效和多种药用价值的认识，其开发利用研究倍受关注，并在药理、有效成分等方面取得了很大的进展。 2.2虫草素 虫草素具有抗病毒、抑菌、明显抑制肿瘤生长，与环磷酰胺有明显的协同作用，并有降血糖的作用。虫草素的分子式为C10H13O3N5，分子量为251.24，且能溶于水及热乙醇、甲醇，不溶于苯、乙醚、氯仿，紫外光的最大吸收波长为259nm。 2.3 虫草素的结构 Cuningham[1]等首次从蛹虫草中分离出虫草素，采用紫外光谱特征进行鉴定，确定最大吸收波长。同时，用其半宽度、波峰与波谷的比值确定为核苷类化合物。 Frederiksen[2]等从蛹虫草培养基中分离出虫草素采用红外光谱进行了分析确定。 陈顺志[3]等也才用了紫外和红外光谱对从蛹虫草固体培养基分离出的新化合物进行了结构鉴定，结果与虫草素的文献报道一致。同时，还应用了超导核磁共振法进行了分析，进一步确定其为虫草素结构如下：
虫草素提取途径
虫草素提取途径 获取虫草素的办法不外乎三条途径：从天然虫草中提取、人工合成和通过生物工程的方法从北虫草组织液中提取。 化学合成目前处于探索阶段，国外有报道虫草素能够人工合成，但过程复杂且产量极低，因此如何提高蛹虫草中虫草素的含量并实现虫草素的工业化生产,是目前国内外研究的主要方向 天然虫草资源稀缺，价格昂贵，含量甚微，很难成为主要原料。人工合成虫草素虽然在上个世纪六十年代我国曾有报道，但由于合成的起始原料较贵或设备投入巨大或产业化工艺缺失或总收率太低或合成工艺技术无法重复，迄今难以实现产业化。因此，通过生物工程的方法，从人工培育的虫草子实体中提取虫草素，是实现虫草素作为治疗药物产业化生产的最可行的途径。 目前国内虽然有几家企业能生产虫草子实体，由于工厂化大规模培育和提取纯化的关键技术尚未突破，其产品的虫草素含量很低，难以为虫草素开发新药，并实现产业化提供原料药的保障。黑龙江帅亿新能源开发有限公司蛹虫草人工培育、菌种驯化方面已取得了较为显著的成绩，培育的北虫草子实体中虫草素含量稳定地高达1%以上，在国内外居于领先地位。在虫草素提取与纯化方面也取得明显的成果，其制备工艺已经达到大批量工业化水平，虫草素纯度达98.8%以上，处于国际领先水平。 提纯方法 1、虫草素的提取方法：以蛹虫草为材料采用超声波水提法、超声波醇提法、水热回流法和醇热回流法4 种提取方法选择虫草素最优提取方法, 用正交试验方法考察水热回流法中提取温度、提取次数、提取时间、料液比4个因素对虫草素提取效率的影响,确定水热回流法是提取虫草素的最优提取方法，其最佳工艺条件为：用10倍量的水于80℃热回流提取3次每次90 min。 2、虫草素的分离纯化方法：车振明等[26]经过对蛹虫草子实体及培养基的粉碎、石油醚脱脂、80℃～85℃水浴12 h、调节等电点沉淀、732-NH4离子交换树脂的分离、浓缩、4℃下低温结晶，得到一定纯度的虫草素晶体。陈顺志等[27]以蛹虫草人工培养后的发酵物为原料，采用超临界技术萃取核苷类有效成分，并以乙醇等作为夹带剂减压分离获得核苷多组份及单体。Cunnigham等[4]将虫草菌培养液经过滤后用活性炭吸附，再经过洗脱液洗脱和浓缩，得到虫草素晶体。 检测方法
虫草
虫草 1. 简介 冬虫夏草（学名：Cordyceps sinensis），又名中华虫草，是中国传统的名贵中药材，它是由肉座菌目麦角菌科虫草属的冬虫夏草菌寄生于高山草甸土中的蝠蛾幼虫，使幼虫僵化，在适宜条件下，夏季由僵虫头端抽生出长棒状的子座而形成（即冬虫夏草菌的子实体与僵虫菌核（幼虫尸体）构成的复合体）。它主要产于中国青海、西藏、四川、云南、甘肃、贵州等省及自治区的高寒地带和雪山草原。冬虫夏草（学名：Ophiocordyceps sinensis），又名中华虫草，是中国历史中传统的名贵中药材，是由肉座菌目蛇形虫草科蛇形虫草属的冬虫夏草菌寄生于高山草甸土中的蝠蛾幼虫，使幼虫身躯僵化。并在适宜条件下，夏季由僵虫头端抽生出长棒状的子座而形成，即冬虫夏草菌的子实体与僵虫菌核（幼虫尸体）构成的复合体。冬虫夏草主要产于中国大陆青海、西藏、四川、云南、甘肃和贵州等省及自治区的高寒地带和雪山草原冬虫夏草是一种真菌，是一种特殊冬虫夏草的虫和真菌共生的生物体。是冬虫夏草真菌的菌丝体通过各种方式感染蝙蝠蛾（鳞翅目蝙蝠蛾科蝙蝠蛾属昆虫）的幼虫，以其体内的有机物质作为营养能量来源进行寄生生活，经过不断生长发育和分化后，最终菌丝体扭结并形成子座伸出寄主外壳，从而形成的一种特殊的虫菌共生的生物体。入药部位为菌核和子座的复合体。 冬虫夏草是高级滋补名贵中药材，冬虫夏草民间应用历史较早。始载于吴仪洛（1757年）《本草从新》，记有：“冬虫夏草四川嘉定府所产最佳，云南、贵州所产者次之。冬在土中，身活如老蚕，有毛能动，至夏则毛出之，连身俱化为草”。又曰：“冬虫夏草有保肺益肾，止血化痰，已咳嗽……如同民间重视的补品燕窝一样”。以后，本草均有收录。冬虫夏草作为药材输出国外很早，明代中叶（1723年），法国人巴拉南来华采购冬虫夏草带往巴黎，后由英国人带往伦敦。 2. 形态特征 冬虫夏草菌之子座出自寄主幼虫的头部，冬虫夏草单生，细长呈棒球棍状，长4－14厘米，不育顶部长3－8厘米，直径1．5－4厘米;上部为子座头部，稍膨大，呈窄椭圆形，长1．5－4厘米，褐色，除先端小部外，密生多数子囊壳，
虫草素
虫草素培养条件优化试验 虫草素(Codycepin)又名虫草菌素、蛹虫草菌素。虫草素的生物活性及其药理作用: 增强人体免疫功能及抗癌作用、抗菌抗病毒作用、促进新陈代谢。提取和纯化虫草素的活性物质大都来自于蛹虫草,目前从蛹虫草人工培养液及菌丝体中都分离出了虫草素。国内也有化学合成的方法，但其中有除不尽的杂质。李楠等对冬虫夏草及蛹虫草中的虫草素含量作了比较, 发现蛹虫草及冬虫夏草都含有虫草素, 前者含量是后者的2倍。 1材料与方法 1.1.1试剂 培养基配方：白砂糖15g/L 花生仁5 g/L 干酵母10 g/L 磷酸二氢钾1 g/L 硫酸镁0.5 g/L消泡剂0.2 g/L 供试菌株：蛹虫草Cordyceps militaris 菌株M1，由浙江经贸职业技术学院提供。 1.1.2主要仪器：高效液相色谱仪：大连伊利特分析仪器有限公司；全温振荡培养箱：上海智诚分析仪器制造有限公司 1.2.1 试验方法： 按基础培养基配方，初始pH 为7.0，培养温度为26℃，转速为180r/min，培养时间为8d，以10g/L 蛋白胨为氮源，以葡萄糖、蔗糖、D-果糖、乳糖、麦芽糖、淀粉和纤维素为碳源，碳原子含量为600mmol/L，进行不同碳源对菌丝产虫草素影响试验；用选出的碳源，设置其浓度为5、10、15、20、25、30、35、40g/L 进行不同浓度碳
源对菌丝产虫草素影响试验；用选出的碳源及浓度，以蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、NaNO3、尿素、NH4NO3、NH4Cl 为氮源。氮原子含量为40mmol/L，。进行不同氮源对菌丝产虫草素影响试验；用选出的氮源，设置其浓度为2.5、5、7.5、10、12.5、15、17.5g/L进行不同浓度氮源对菌丝产虫草素影响试验。按基础培养基配方，以上述试验选出的适宜碳氮源及浓度，培养温度为26℃，转速为180r/min，培养时间为8d，设置培养液的初始pH 为4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0 和10.0 进行不同初始pH 值对菌丝产虫草素影响试验；用选出的pH，转速为180r/min，培养时间为8d，设置培养温度为16、20、24、28、32℃进行不同培养温度对菌丝产虫草素影响试验；用选出的pH 和养温度，培养时间为8d，设置摇床转速为105、130、155、180、205r/min 进行不同转速对菌丝产虫草素影响试验；用选出的初始pH、培养温度、摇床转速，设置培养时间为4、5、6、7、8、9、10、11d 进行培养时间对菌丝产虫草素的影响试验。以上试验均采用250mL 的三角瓶装入100mL 培养液。上述各处理组均按以下步骤进行试验：先将菌株转接于母种培养基的培养皿内，制成平板菌种，用同一打孔器（直径为3mm）在平板菌种的同一半径上打孔，将3 个菌栓接入试验培养基，置于摇床振荡培养。 1.2.2 虫草素含量的测定： 采用高效液相色谱法（HPLC）测定虫草素含量。色谱条件为：色谱柱：YMC C18 柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相:甲醇:水＝20:80；流速：1mL/min；紫外检测波长：260nm；柱温：室温。样品培养液
蛹虫草
蛹虫草 目录[隐藏] 简介 形态特征 品种介绍 化学成份 药理作用 蛹虫草- 栽培要点、栽培条件 蛹虫草医用价值 参考资料 [编辑本段] 简介 蛹虫草为子囊菌亚门，麦角菌目，麦角菌科、虫草属的模式种。学名为Cordyce psmilitaris，又名北冬虫夏草、北蛹虫草、虫草等。世界性分布天然资源数量很少。由子座（即草部分）与菌核（即虫的尸体部分）两部分组成的复合体。冬季幼虫蛰居土里，菌类寄生其中，吸取营养，幼虫体内充满菌丝而死。到了夏季，自幼虫尸体之上生出幼苗，形似草，夏至前后采集而得。中医认为，虫草入肺肾二经，既能补肺阴，又能补肾阳，主治肾虚，阳痿遗精，腰膝酸痛，病后虚弱，久咳虚弱，劳咳痰血，自汗盗汗等，是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的中药。 [编辑本段] 形态特征 蛹虫草- 形态特征子座单生或数个一起从寄生蛹体的头部或节部长出，颜色为橘黄或橘红色，全长2—8厘米，蛹体颜色为紫色，长约1.5—2厘米。 1.菌丝体 蛹虫草 蛹虫草的菌丝是一种子囊菌，其无性型为蛹草拟青霉。其菌体成熟后可形成子囊孢子（繁殖单位），孢子散发后随风传播，孢子落在适宜的虫体上，便开始萌发形成菌丝体。菌丝体一面不断地发育，一面开始向虫体内蔓延，于是蛹虫就会被真菌感染，
分解蛹体内的组织，以蛹体内的营养作为其生长发育的物质和能量来源，最后将蛹体内部完全分解。 2.子实体 一般当蛹虫草的菌丝把蛹体内的各种组织和器官分解完毕后，菌丝体发育也进入了一个新的阶段。菌丝体由营养生长开始转为生殖生长，最后扭结后从蛹体空壳的头部、胸部、近尾部等处伸出，形成橘黄色或橘红色的顶部略膨大的呈棒状的子座（子实体）。 [编辑本段] 品种介绍 蛹虫草- 品种介绍中国于1958年在吉林省首次发现，通过鉴定，认为它与冬虫夏草是同一个属，定名为蛹草。主产于云南（昆明、安宁、江川）、吉林（安图、永吉）、辽宁（沈阳）、内蒙古（哲里木盟），生于针、阔叶林或混交林地表土层中鳞翅目昆虫的蛹体上。能采用家蚕和柞蚕蛹人工批量培育，药效、药理与野生种相似甚至更好。 北虫草较之冬虫夏草，具有几个无可比拟的优点： 一是北虫草为虫草属的模式种，分布广泛，为世界各国学者所认识和接受。 二是北虫草已在人工条件下育成了完整子座。 三是北虫草含有虫草菌素和虫草多糖，其独特药理作用已日益引起药学界的高度重视。由于蛹虫草具有以上优点，成为虫草属中药用虫草菌中的佼佼者。 [编辑本段] 化学成份 蛹虫草- 化学成份人工蛹虫草子实体；N6-[β-（乙酰胺甲酰）氧乙基]腺苷；虫草环肽A；核苷；麦角甾醇过氧化物。 蛹虫草- 药理作用现代科学论证科茸蛹虫草不仅具有特殊的营养价值，而且有明显的药用价值。其中尤以虫草酸、虫草素、虫草多 [编辑本段] 药理作用
隆力奇保健产品讲解
隆力奇保健产品远景－－中国四王 已经是中国的蛇王 正在打造中国的虫草王 还将规划中国的灵芝王和人参王 隆力奇蛇保健品 蛇肉：减少和消除疲劳、美容保健 蛇胆：清肝明目、去脂降压、降火除痘 蛇蜕：祛风、解毒、明目、杀虫 蛇鞭：壮阳补肾、填精益髓、强身固本 蛇血：治疗风湿性关节炎、关节变形患者 蛇油：柔嫩肌肤、去皱防衰、防冻治烫 药疗不如食疗，药补不如食补
隆力奇100%纯虫草 源于天然替代野生 菌种源于青海的虫草王保护稀缺资源，国家863重点开发替代野生虫草项目 虫草素介绍 纯虫草素售价4.2万元/克 虫草素的科研论文已经高达100多篇，证实虫草素的功效：防治肾功能衰竭、肝炎、免疫性炎症、慢性心血管疾病、肺气肿、肿瘤、性功能减退、器官移植和失眠等诸多疾病的治疗作用 虫草素更加核心的功效：虫草素对肿瘤、白血病等疾患所具有的极强的潜在的不可替代的药用价值 在冬虫夏草所含主要营养和药效成份中，虫草素是最为突出的，它是天然野生冬虫夏草中唯一特有的有效物质，而不是其它植物、药物、动物所共有的，也不是人工菌丝发酵体中所具有的，也是迄今为止所无法人工合成的。其含量是鉴别虫草质量标准优劣的主要指标。虫草素（Cordycepin）,化学结构为3′-脱氧腺苷，分子式C10H13O3N5。有效成分并确定其结构为3’-脱氧腺苷(3’-deoxyadenosine,3’-dA) 隆力奇买断863项目的附加条件 第一年无条件包销40吨 第二年无条件包销70吨 第三年无条件包销100吨 第四年无条件包销150吨 振兴中华瑰宝任重而道远 独创五个第一 第一个把含量写在包装上 第一个叫板虫草素含量比野生高300% 第一个申请参与制定行业标准 第一个教导胶囊可以煲汤 第一个购买国家技术时承诺包销数量
神奇的蛹虫草--蛹虫草的成分
神奇的蛹虫草.•蛹虫草的成分 有关研究说明，蛹虫草含有蛋白质，脂类、糖类、维生素及多种微量元素, 18种氛基酸齐全，而旦含有虫草酸、虫草索、虫草多糖和SOD等生物活性物质，并旦含量十分丰富。研究者将蛹虫草与野生冬虫夏草的化学成分进行比照研究, 其中蛋白质、糖类、脂类、维生素及多种微量元素、18种氨基酸、虫草素、虫草酸、虫草多糖和SOD等化学成分，在含虽上根本相同。 1.虫草素 瑞金医院终身教授林先生告诉记者，西方医学界十分看好虫草素的药用价值，美国一家企业已进入了临床试验阶段。因此，高纯度的虫草素在国际市场上“身价”不菲，已卖到4万港元lg.：鲜活蛹虫草具有强烈的抑制细窗生长的作用，在虫草成熟期内，竞然检测不出一个有害细I器或致病萌，这是所有食物都不太可能到达的境界。 抚顺师专王琦教授指出，虫草素又称虫草菌素，垦Cunnin-gham等学者于1950年从涌虫草寄生的昆虫组织中别离得到的一种腺昔类活性物质，将其命名为虫草索，并确定其结构式为3•脱纵腺昔。陈尚卫等研究证明，蛹虫草子实体中虫草素的含量约为0.053%;孙月等证明，野生蛹虫草子实体中虫草素的含量略高于以大米为培养基的人工栽培涌虫草子实体，以大米为培养基的人工栽培蛹虫草子实体中虫草素的含量高于其菌统部位。 虫草素能提高外周血液单.核细胞白细胞介素10的分泌和白细咆介素lOmRNA的表达，同时虫草素对诱导产生白细胞介素2的植物凝血素和外周血单核细胞的扩增均有抑制作用。凌建亚等研究说明，蛹虫草能提高机体单核•巨噬细胞的吞噬能力，激活巨噬细胞释放细胞毒素直接杀伤癌细胞。葛带蕾等研究表明，蛹虫草还可以抑制细胞分裂，促进细胞分化，对T淋巴细胞的转化有明显促进作用，对机体免疫起到调节作用o Jonnidis等报道了蛹虫草的抗肿瘤作用，与其可以抑制DNA和RNA的合成有关。 相关研究说明，虫草素可以选择性抑制mRNA的合成，从而影响癌细胞蛋白质的合成。吴洪臻等报道了虫草素能增强环磷酰胺的的抗癌作用，可以作为临床抗肿瘤药物的辅助药物。Yoshida等报道了皮下注射虫草素能够明显延长艾氏腹水癌接种小鼠的存活时间。虫草素还可以导致白血病细胞调亡和有统分裂细胞S 期和G2期的延长o Sugar等研究了虫草素对侵入型念珠菌的精抗作用，证明虫草素有非常强的抗真菌活性。还有研咒发现，由草素能刺激糖酵解导致三磷腺昔 介绍虫草素提取途径与方法 介绍虫草素提取途径与方法 一、前言： 虫草素(cordycepin)又称冬虫夏草素、虫草菌素、蛹虫草菌素，是冬虫夏草和蛹虫草中(尤其是核苷类)主要活性成分，也是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗生素。虫草素一种天然来源的药物，具有中医医理中冬虫夏草一样的阴阳同补和双向调节人体平衡的功能;它在护肝、保肾、润肺方面由于成分更纯效果更好，而且大补气血，能消除现在不能治愈的痛经、偏头痛、颈椎增生等疾病。从西医医理角度看虫草素具有抗肿瘤、抗衰老、抗菌、抗病毒、免疫调节、改善新陈代谢、清除自由基等多种药理作用，有良好的临床应用前景。目前虫草素的研究现正成为药物化学、抗衰老、美容、保健品领域中一个极其活跃的领域。 二、虫草素药用价值： 1、免疫调节作用 近年来，研究人员发现虫草素具有免疫调节作用。它能够极大地提高了人外周血液单核细胞IL-10的分泌和IL-10mRNA的表达，同时，虫草素对诱导产生IL-2的植物血球凝集素和外周血液单核细胞扩增都有抑制作用，抗IL-10中性抗体也不能完全阻止虫草素对IL-2产生的抑制作用。在虫草素作用下，成熟树突状细胞能诱导调节性T细胞增殖，而且还能抑制细胞分裂，促进细胞的分化，改变胞膜上物质结构分布，对T淋巴细胞转化有促进作用，它还可以提高机体单核巨噬细胞系统的吞噬功能,激活巨噬细胞产生细胞毒素直接杀伤癌细胞。 2 、虫草素的抗肿瘤作用 虫草素对肿瘤的抑制作用一直是广大科学家们关注的热点。研究发现，用虫草素皮下注射接种了艾氏腹水癌的小鼠，可使小鼠中位生存期延长到60 d，而对照组仅为19 d，这说明虫草素对小鼠艾氏腹水癌有明显的抑制作用，能明显延长接种艾氏腹水癌小鼠的存活时间。还有研究表明，虫草素对人鼻咽癌KB细胞和人宫颈癌HeLa细胞等皆 介绍虫草素提取途径与方法 一、前言： 虫草素(cordycepin)又称冬虫夏草素、虫草菌素、蛹虫草菌素，是冬虫夏草和蛹虫草中(尤其 是核苷类)主要活性成分，也是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗生素。虫草素一种天然来 源的药物，具有中医医理中冬虫夏草一样的阴阳同补和双向调节人体平衡的功能;它在护肝、 保肾、润肺方面由于成分更纯效果更好，而且大补气血，能消除现在不能治愈的痛经、偏头痛、颈椎增生等疾病。从西医医理角度看虫草素具有抗肿瘤、抗衰老、抗菌、抗病毒、免疫调节、改善新陈代谢、清除自由基等多种药理作用，有良好的临床应用前景。目前虫草素的研究现正成为药物化学、抗衰老、美容、保健品领域中一个极其活跃的领域。 二、虫草素药用价值： 1、免疫调节作用 近年来，研究人员发现虫草素具有免疫调节作用。它能够极大地提高了人外周血液单核细胞 IL-10的分泌和IL-10mRNA的表达，同时，虫草素对诱导产生IL-2 的植物血球凝集素和外周血液单核细胞扩增都有抑制作用，抗IL-10中性抗体也不能完全阻止虫草素对IL-2产生的抑制作用。在虫草素作用下，成熟树突状细 胞能诱导调节性T细胞增殖，而且还能抑制细胞分裂，促进细胞的分化，改变胞膜上物质 结构分布，对T淋巴细胞转化有促进作用，它还可以提高机体单核巨噬细胞系统的吞噬功 能,激活巨噬细胞产生细胞毒素直接杀伤癌细胞。 2、虫草素的抗肿瘤作用 虫草素对肿瘤的抑制作用一直是广大科学家们关注的热点。研究发现，用虫草素皮下注射接种了艾氏腹水癌的小鼠，可使小鼠中位生存期延长到60d，而对照组仅为19d，这说明虫草素对小鼠艾氏腹水癌有明显的抑制作用，能明显延长接种艾氏腹水癌小鼠的存活时间。还有研究表明，虫草素对人鼻咽癌KB细胞和人宫 颈癌HeLa细胞等皆具有明显的抑制作用。科学家推测虫草素可能有3种抑制肿瘤的机制：一是虫草素的游离羟基可以渗入瘤细胞DNA中而发生作用；二是抑制核苷或核苷酸的磷酸化而生成二磷酸盐和三磷酸盐的衍生物,从而抑制瘤细胞的核酸的合成；三是阻断黄苷酸胺化形成鸟苷酸的过程。 3、虫草素的抗炎作用 人工栽培蛹虫草虫草素含量HPLC检测方法研究 马健生;王雅玲;孙军德;赵轶男;吕国忠 【摘要】应用高效液相色谱法检测蛹虫草子实体及其固体培养基中的虫草素含量,优化了样品前处理条件,色谱柱为MP-C18 (4.6 mm ×150 mm,5 μm),流动相为V(甲醇):V(水)=15:85,流速1 ml/min,柱温25 ℃,样品回收率范围为95.1%～104.2%;同时对比使用3种不同的培养基(大米、小麦、蚕蛹粉)栽培的蛹虫草子实体中虫草素的含量,结果表明生长在大米培养基上的蛹虫草子实体中虫草素含量最高. 【期刊名称】《江苏农业科学》 【年(卷),期】2009(000)002 【总页数】2页(P233-234) 【关键词】蛹虫草;虫草素;高效液相色谱 【作者】马健生;王雅玲;孙军德;赵轶男;吕国忠 【作者单位】沈阳农业大学土地环境学院,辽宁沈阳,110161;大连民族学院生命科学学院,辽宁大连,116600;大连民族学院生命科学学院,辽宁大连,116600;沈阳农业大学土地环境学院,辽宁沈阳,110161;大连民族学院生命科学学院,辽宁大 连,116600;大连民族学院生命科学学院,辽宁大连,116600 【正文语种】中文 【中图分类】S646 在中国几个世纪以来，冬虫夏草作为一个被广泛熟知的虫生真菌，一直被用以治疗哮喘和支气管炎，对治疗肾病和提高肾功能同样具有很好功效[1-2]。近年来研究发现，冬虫夏草中的活性成分包括核苷类物质、虫草素、虫草酸、虫草多糖等。其中虫草素(3′-脱氧腺苷酸)是一种核苷类抗生素，具有多种生物活性，被证明能提高人体免疫力，对于肿瘤和致病性的细菌和真菌表现出一定的抗性[3-5]，成为近来研究的热点，已经成功用于治疗在小鼠模型上人类非洲锥虫病(HAT)[6]，被确认在白血病和癌症上有药物应用价值[7]。由于冬虫夏草的自然资源匮乏，并且很难进行人工栽培，致使野生天然冬虫夏草的市场价格非常昂贵，不能满足市场的需求。蛹虫草又叫北虫草，是冬虫夏草的同属异种菌[8]。经过测定，蛹虫草中同样含有冬虫夏草中的各种生物活性成分[9]，而且蛹虫草可以成功地进行人工培养，因此作为冬虫夏草的替代品目前在中国得到了广泛地栽培[10]。蛹虫草可以在许多培养基上栽培，例如大米、小麦、蚕蛹粉等，但其产量和虫草素含量有很大不同。目前蛹虫草子实体及其各种类型产品并没有明确标列其活性成分含量[11-12]，因此怎样评定蛹虫草的品质就成为一个亟待解决的问题。本研究采用高效液相色谱法检测在不同培养基上人工栽培的蛹虫草子实体及培养基中虫草素的含量，并就高效液相色谱具体测定方法和条件进行了优化。 1 材料与方法 1.1 材料和化学试剂 测试样品蛹虫草子实体和培养基由沈阳旭元生物技术有限公司提供，培养基包括大米、小麦和蚕蛹粉培养基。每一个样品取2个不同的批次。虫草素标准品购自Sigma(St. Louis,USA)公司，其他化学试剂包括乙醇和色谱级甲醇购自Burdick & Jackson (Ulsan，South Korea)公司，去离子水用密理博水处理系统制备。 1.2 仪器设备 介绍虫草素提取途径与方法 虫草素是一种由虫草菌（Ophiocordyceps sinensis）产生的可溶性 物质，具有多种生物活性和药理作用。虫草素可以通过多种途径和方法进 行提取，其中常用的有传统提取方法和现代生物技术提取方法。 传统提取方法主要包括水煎法、醇提法和水浸法。其中，水煎法是指 将虫草菌体和虫草草的混合物与水一同加热煮沸，待煮至菌体完全被溶解后，用纱布滤除固体杂质，得到虫草素溶液。醇提法是指将虫草菌体和虫 草草的混合物与醇类有机溶剂（如乙醇）进行浸泡和浸提，在一定温度条 件下，将虫草菌体的活性成分溶解到溶剂中，然后蒸馏或浓缩溶剂，得到 虫草素提取物。水浸法是指将虫草菌体和虫草草放入水中浸泡一段时间后，然后进行过滤或离心，得到虫草素提取物。这些传统提取方法比较简单易行，但提取效果相对较低，同时也不能保证提取物的纯度。 现代生物技术提取方法主要包括微生物发酵法和化学分离法。微生物 发酵法是指采用虫草菌菌株进行发酵培养，使其产生虫草素。首先将虫草 菌菌株进行培养，培养基中添加适宜的碳源、氮源和微量元素，调节培养 条件（温度、湿度、pH等）来促进菌株的生长和产生虫草素。然后通过 离心、滤液、浓缩等操作，获得虫草素发酵液，再通过干燥、粉碎等工艺，得到虫草素提取物。化学分离法是指通过化学方法对虫草菌菌丝体或虫草 草中的成分进行提取和分离，如用有机溶剂提取虫草素，然后用柱层析或 高效液相色谱等方法进一步纯化。 此外，还有超声波辅助提取、微波辅助提取等新型提取方法。超声波 辅助提取是指在虫草素提取过程中，将样品置于超声波辐照区域，利用超 声波的振荡作用和空化效应加速目标物质的释放和萃取，从而实现提取效 果的提高。微波辅助提取是指利用微波加热的特性，使样品中的虫草素迅 硒虫草的功能成分、保健作用及应用前景分析 苏宏灿（综述） 虫草与人参、鹿茸齐名，被誉为中国中药三宝，作为药品和保健品应用已有 数百年历史，并被人们广泛认识和接受。硒虫草除含有一般虫草固有的虫草素、虫草酸、虫草多糖等功能成分外，还富含重要的生命元素-----硒。 1 硒虫草的研制 天然虫草已经报道300多种，在中国分布最广的是冬虫夏草和北虫草。冬虫 夏草已为人们熟知，北虫草是北冬虫夏草的简称，也叫蛹虫草或蛹草，俗名不老草。是虫、菌结合的药用真菌，现代珍稀中草药。北冬虫夏草属于真菌门，子囊菌纲，肉座菌目，麦角菌科，虫草属。它主要生长在我国的北方地区。北虫草不仅含有丰富的蛋白质和氨基酸，而且含有30多种人体所需的微量元素，是上等的滋补佳品。与冬虫夏草具有相似的功能作用。由于野生虫草被大量采掘，其资源几尽枯竭，价格极其昂贵。因此人们广泛的开展了人工虫草培育的尝试，目前深层发酵法生产虫草菌丝体、人工培育北虫草子实体已经获得成功，而且北虫草已经被卫生部批准为薪资源食品。硒虫草，是由圣峰药业选用聚硒能力特别强的北冬虫夏草菌种,利用恩施天然硒资源作为培养基的硒源，采用现代生物组培技术，经反复驯化与生物转换，使无机硒通过虫草菌的分解、吸收、转化成易被人体利用的有机硒虫草子实体，使虫草的有效成份与有机硒的功效相结合，从而发挥更好的生物学作用。 2 硒虫草的功能成分分析 国际国内许多研究单位对天然冬虫夏草和北虫草（人工培育）功能成分、微 量元素以及氨基酸含量进行了分析，圣峰药业委托广州分析测试中心、中山市卫生检验中心、鄂西南农副产品监督检验中心、湖北省地质矿产局恩施实验室等单位对硒虫草进行了相关分析。结果显示，人工培育的北虫草、硒虫草与天然冬虫夏草比较，三者在有机和无机营养成分种类上基本一致，但在主要功能成分含量上人工培 北冬虫夏草（蛹虫草）成分及作用 1、北冬虫夏草的化学成份： 现代医学研究证明，人工栽培的北虫草蛋白质含量高达40.7％，比天然冬虫夏草高1.5倍。其蛋白质由19种氨基酸组成，氨基酸总量与天然冬虫夏草基本一致。而且必须氨基酸种类齐全，数量充足，比例适当，占氨基酸总量的35.47％。人工栽培的北虫草含21种微量元素，其中硒、铁、锌、锰、钼、钙、磷等含量丰富，其中硒的含量达0.44毫克／千克，比天然冬虫夏草高3倍。人工栽培的北虫草含丰富的维生素A、维生素C和B族维生素，有较高的营养价值。而北虫草中含有的虫草酸、虫草素、虫草多糖、超氧化物歧化酶（SOD）、核苷酸类衍生物等生物活性物质更具有良好的药用价值。其中虫草素的含量是天然冬虫夏草的20～200多倍。 其化学成份结构式、分子式如下： 虫草酸(cordycepic acid) 分子式C7H12O6 分子量192，化学名称为1，3，4，5－四羟基环己酸， 溶点为m.168℃ 虫草素（cordycepin） 化学名称为3’－去氧腺苷，溶点为m.225－226℃ 虫草多糖(Biological Response Modifier)简称BRM 活性成份：β－（1－3）－D－葡聚糖，结构：β－（1－3）；β－（1－6）；螺旋 分子量：大于1.0×105时有抗肿瘤活性，平均4.5×105，溶解温度：96℃ 分解温度：大于100℃ 2药理作用研究 2.1虫草素的药理作用 虫草素具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗约氏疟原虫等作用，有细胞毒性，属腺苷的结构类似物。体外试验表明，它是RNA合成的强烈抑制剂，能抑制小鼠肿瘤细胞系mRNA和病毒的RNA合成，其作用类似于嘌呤核苷酸生物合成的负反馈抑制剂。虫草素主要可抑制葡萄球菌、链球菌、鼻疽杆菌、炭前杆菌、猪出血性败血症杆菌、多种枯草杆菌和鸟型结核杆菌。 中药蚕蛹虫草对人喉癌细胞（Hep-2）作用后喉癌细胞曲线和克隆形成试验表明，蚕蛹虫草具有抗喉癌作用。以5g/kg给小鼠腹腔注射蝙蝠蛾拟青霉，能增强艾氏实体癌小鼠NK 细胞活性，可浓度依赖性地抑制3H-TdR、3H-UR、3H-Leu掺入到艾氏腹水癌细胞DNA、RNA 和蛋白质分子中。蚕蛹虫草对小鼠S180有明显的抑制作用，延长了荷瘤小鼠寿命；蚕蛹虫草可明显抑制小鼠Lewis肺癌的原发生长和自发性肺部转移。从以上结果推断，虫草的抗癌活性可能与该药含有的核苷及脱氧核苷类似物有关，其可通过干扰癌细胞DNA、RNA和蛋白质合成，达到抑制肿瘤细胞生长的目的。 2.2 腺苷的药理作用 腺苷作为虫草的主要活性成分，作用包括舒张血管平滑肌，抑制心肌收缩，抑制血小板凝聚，增加冠脉和脑血流量，降低脑豪氧量以及减慢心率，防止心率失常和镇静。冯鸣国等就人工冬虫夏草菌丝体对血管扩张作用的研究证实，菌丝的醇提物能增加犬的冠脉血流量，降低大冠脉、脑及外周血管阻力；能对抗乌头碱和氯化钡引起的麻醉大鼠的心率失常，提高豚鼠心脏哇巴因中毒的耐受量，使麻醉大鼠和豚鼠心率减慢，还可降低离体豚鼠心脏的心肌收缩力。 5X极草 5X极草是什么？5X极草有什么功效？怎样鉴别冬虫夏草？冬虫夏草怎样吃最科学？5X极草含片和福临门冬虫夏草含片有什么区别？本文为您详细介绍5X述极草。 冬虫夏草是一种真菌，是一种特殊的虫和真菌共生的生物体。简称虫草。是冬虫夏草真菌的菌丝体通过各种方式感染蝙蝠蛾（鳞翅目蝙蝠蛾科蝙蝠蛾属昆虫）的幼虫，以其体内的有机物质作为营养能量来源进行寄生生活，经过不断生长发育和分化后，最终菌丝体扭结并形成子座伸出寄主外壳，从而形成的一种特殊的虫菌共生的生物体。入药部位为菌核和子座的复合体 真正的冬虫夏草均为野生，生长在海拔3000米至5000米的高山草地灌木带上面的雪线附近的草坡上，对自然环境要求高。夏季，虫子卵产于地面，经过一个月左右孵化变成幼虫后钻入潮湿松软的土层。土里的一种霉菌侵袭了幼虫，在幼虫体内生长。经过一个冬天，到第二年春天来临，霉菌菌丝开始生长，到夏天时长出地面，外观象一根小草，这样，幼虫的躯壳与霉菌菌丝共同组成了一个完整的“冬虫夏草”。 冬虫夏草的功效 冬虫夏草一直被誉为我国“中药之王”，与人参、鹿茸一起被称为中国三大补品，位列三大补品之首。早在1757年《本草从新》中就有“冬虫夏草甘平保肺，益肾，补精髓，止血化痰，已劳咳，治膈症皆良”的记载。中国传统医学认为，冬虫夏草性味甘、平，入肺肾经，功能益肺、肾、止咳嗽、补虚损、益精气。中国现代中医认为，冬虫夏草能治劳咳痰血、化痰止血、自汗盗汗、阳痿遗精、年老衰弱、慢性咳喘及腰膝酸痛等症，在提升人体免疫力以及抗癌方面具有其他药物所无法替代的优势。现代医学临床研究表明，冬虫夏草吞噬肿瘤细胞的能力是硒的4倍，冬虫夏草所含虫草素能明显增强红细胞粘附肿瘤细胞的能力，抑制肿瘤生长和转移，能明显提升白血球和血小板数量，迅速改善放化疗后的呕吐恶心、胃口差、头发脱落、失眠等症状。 蛹虫草中虫草素的研究与开发进展 摘要虫草素是冬虫夏草和蛹虫草中主要活性成分之一，具有抗菌消炎、抗肿瘤、降血脂、清除体内自由基等方面的药理作用。该文介绍虫草素的药理作用，并总结其开发研究进展。关键词虫草素；分离纯化；测定方法；产品开发 虫草隶属于肉座菌目虫草科虫草属【1】。虫草素又名虫草菌素、冬虫夏草素，属嘌呤类生物碱，是第1个从真菌中分离出来的核苷类抗菌素。虫草素结构式如图1所示，分子式为C10H13N5O3，熔点230～231 ℃，最大吸收波长为259 nm，碱性，针状或片状结晶。 1 虫草素的药理作用 Cunningham等于1951年发现昆虫组织如被蛹虫草寄生则不易腐烂，经研究从中分离出虫草素。之后，众多学者对虫草素进行了研究，证实虫草素具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗炎、免疫调节、改善新陈代谢、清除自由基等作用。Kodama等【6】研发的以虫草素为主要成分的新药已在临床上试用于白血病的治疗，具有良好的临床应用前景。目前虫草素的研究正成为药物化学、抗衰老、美容、保健品等领域中极其热门的一部分。 2 虫草素的开发 2.1 虫草素的生产 2.1.1 虫草素的固体发酵法。虫草素虽然可以经生物合成获得，但由于反应时间长、产量低、排放大量对人体有害的有机溶剂而不常用，通过虫草菌丝体人工培养一直是国内外的研究热点。万涛等【7】通过正交旋转组合试验，确定蛹虫草固体发酵虫草素的最佳培养基配方为水料比1.1 mL/g，营养水中酵母膏的用量为22.6 g/L、蛋白胨的用量为6.0 g/L、葡萄糖的用量为25.4 g/L，KH2PO4的用量为2 g/L，MgSO4的用量为0.5 g/L，营养水pH值6.6。通过正交试验，确定蛹虫草固体发酵虫草素的最佳环境条件为：光照强度4 400 lx，每日光照时间18 h，温度18～22 ℃。按照上述优化的培养基配方和环境条件进行固体发酵生产虫草素，经过大约13 d的培养，培养基中虫草素的含量可达到0.60%以上。与传统液体发酵方法相比，利用蛹虫草固体发酵虫草素的最高产量比普通液体发酵的最高产量高近2倍，并且生产周期缩短2 d。 2.1.2 虫草素的液体发酵法。国内外虫草素的制备主要通过液体发酵法获取。MAO XB等主要从培养基质方面对利用液体发酵获取不同含量虫草素进行研究，发现以葡萄糖为碳源时虫草素产量最高，当葡萄糖的浓度为40 g/L时虫草素的产量可达到262.7 mg/L，当葡萄糖的浓度超过55 g/L时对虫草素的合成反而不利；以酵母提取物和蛋白胨的混合物为氮源，其比例为3℃1时虫草素产量可以达到最大；在培养基中添加铵离子的浓度为40 mmol/L时虫草素含量最大，当浓度超过160 mmol/L后虫草素的含量明显下降。万涛等【7】主要从培养条件方面对蛹虫草液体培养生产虫草素进行相关研究，发现pH值为4，培养方式为振荡培养8 d和静置培养16 d相结合，摇床转速为150 r/min，温度为25 ℃时虫草素的产量最高。DAS等主要从菌种方面对虫草素的液体发酵进行相关研究，发现虫草素的分泌与菌株特性有很大关系，G81-3高产突变菌株在合适的培养基中虫草素的产量比传统野生型产量提高72%，达到8.6 g/L。 2.2 虫草素的分离及纯化 虫草素的分离纯化方法主要有离子交换树脂法、超临界萃取技术和活性炭吸附法。毛宁等对利用离子交换树脂分离纯化虫草素的工艺条件进行了研究，发现选择合适的离子交换树脂对虫草素的分离纯化过程非常重要，选择吸附能力较强及吸附量较多的树脂可以有效提高蛹虫草中虫草素分离纯化的效率和产率。超临界萃取法是以CO2作为超临界流体对虫草素进行分离纯化，超临界技术具有操作温度低、分离效率高、无毒、无溶剂残留、无二次污染、不损害活性天然成分的结构等优点，但是这种方法所得虫草素的含量较低，成本较高。Cuuningham等采用活性炭对经过过滤的蛹虫草培养液进行吸附，再将培养液进行洗脱和浓 HPLC测定祁连产冬虫夏草中虫草素和虫 草酸的含量 汪陈才 （2008 B,青海师范大学，化学系） 摘要为建立一种有效的利用高效液相色谱法（HPLC）测定冬虫夏草中虫草素和虫草酸含量的方法，用甲醇超声提取虫草素、水超声提取虫草酸，再利用高效液相色谱、示差折光检测器和紫外检测器分别测定冬虫夏草中虫草素和虫草酸含量。通过对样品进行预处理，色谱条件和方法指标的验证，建立了定量检测虫草中虫草素和虫草酸的一种有效方法，二者精密度( RSD) ≤1.77% 。虫草素、虫草酸检出限为50 ng/mL 和1.5 μg/mL。测得样品中虫草素和虫草酸的平均组分含量为0.258mg·g-1和79.7mg·g-1二者回收率在93.7%～98.4%之间。该方法具有快速、准确、简便的特点。 关键字: 高效液相色谱虫草虫草素虫草酸 Abstract:A high performance liquid chromatographic (HPLC) with diode- array detector (DAD) and refractive index detector ( RID) method for the determination of cordycepin and cordycep acid in cordyceps sinensis was studied. Both of it were extracted by Methanol and water with Ultrasonic wave. Then by using high performance liquid chromatography, refractive index detector and a UV detector were measured in Cordyceps and cordycepic acid content. Based on the sample pretreatment, chromatographic conditions and method validation, establishes the quantitative detection of cordycepin and cordycepic acid is an effective method. Their precision (RSD) were lower than 1.77%. The samples of cordycepin and cordycep acid content averages are 0.258 mg•g1and 79.7mg•g-1. Their recovery were between 91.9% and 93.7%. The method is rapid, accurate and simple features. Key words HPLC; Cordyceps sinensis; Cordycepin; Cordycep acid 冬虫夏草(Cordyceps Sinensis)与人参、鹿茸齐名，为中国三宝之一。又名虫草、冬虫草，是麦角菌科冬虫夏草菌的子座及其寄主蝙蝠蛾科昆虫冬虫夏草蝙蝠蛾幼虫尸体的复合体[1]。其生存条件苛刻，主产于四川、青海、西藏、云南等海拔4000～5000米的高山草甸中，是我国名贵中药材[2]。由于其具有抗菌、抗炎、抗肿瘤、调节免疫系统、调节心律失常、保护肝损伤、降血糖、镇静、抗缺氧和抗疲劳等诸多功效[3]，近十多年来，我国在对冬虫夏草的资源调查、无性型确认、成分分析、临床应用及虫草产品开发等方面取得了可喜的成绩[4]。由于其资源的稀缺性和其诸多独特的药用价值，成为国内外国内外食品保健领域的研究热点。研究人员已从冬虫夏草中分离出3-去氧腺苷（虫草素）、尿嘧啶、次黄嘌呤、肌苷、鸟苷、甘露醇（虫草酸）等核苷类成分[3] 。本文利用高效液相色谱测定虫草中常见的两种活性物质虫草素和虫草酸。虫草素( Cordycepin ) 是冬虫夏草有效成分之一，其分子式为C10H13N5O3, 相对分子质量为251.24 , 结构式如图1所示, 为3 - 脱氧腺苷( 3 - Deoxyadenosine ) [6]。它具有改善心脑血管循环、调节心律失常、抑制神经递质释放和调节腺苷酸环化酶活性等功效。虫草素的提取方法有回流提取法、超声波提取法等[7], 其测定方法有薄层色谱法、高效液相色谱法和毛细管电泳冲法等[8]。虫草酸具有抗肝组织纤维化，抗脂质过氧化，同时由于 HPLC测定大鼠全血中虫草素药代动力学方法的建立 Wu Lingyu;Wang Xueyan;Chen Zhibao;Xu Hongyue;Li Yan;Tang Xudong;Yu Lu 【摘要】建立一种灵敏、稳定的检测血液中虫草素及其代谢物的高效液相色谱方法,并报告采用该方法进行药代动力学的初步研究.大鼠全血0.5 mL,加入甲醇1mL,涡旋振荡2 min,超声10 min,4℃条件下10 000 r·min-1离心15 min,取上清室温条件下氮气吹干,用体积分数为0.06的乙腈溶液0.5 mL复溶,4℃条件下15 000 r·min-1离心10 min,取上清过0.22μm微孔滤膜进行HPLC检测;色谱条件为Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈冰,6:94(V/V),流速0.8 mL· min-1,柱温30℃,紫外检测波长259 nm.虫草素在0.1～5.0 μg· mL-1浓度范围内线性关系良好,线性回归方程为Y=10.97X-11.73,相关系数r=0.998 0血液样品中虫草素在高、中、低浓度的回收率分别为99.63％、95.37％和93.26％.全血中虫草素的药物代谢动力学初步研究的结果为给药后10～120 min内均未检测到虫草素原型,相同色谱条件下,保留时间为8.8 min左右检测到一虫草素的未知代谢物,且该物质在30 min时含量最高,随后逐渐降低.对该产物富集后通过质谱检测得未知代谢物分子量为252 M.该方法灵敏度高,重现性好,可用于大鼠全血中虫草素的代谢研究;研究结果同时表明,虫草素在大鼠体内代谢速度快,按40 mg·kg-1剂量灌胃,即使灌胃给药后10 min也未检测到虫草素原型. 【期刊名称】《黑龙江八一农垦大学学报》 【年(卷),期】2018(030)006 【总页数】6页(P69-74)介绍虫草素提取途径与方法
介绍虫草素提取途径与方法
人工栽培蛹虫草虫草素含量HPLC检测方法研究
介绍虫草素提取途径与方法
硒虫草的功能成分
北冬虫夏草蛹虫草成分及作用
5X极草
蛹虫草中虫草素的研究与开发进展
虫草中虫草素和虫草酸含量的测定 汪陈才
HPLC测定大鼠全血中虫草素药代动力学方法的建立