临床生化检查操作方法

临床生化检查操作方法

临床生化检查是临床医学中常用的一种检查手段,通过对患者的血液、尿液、体液等样本进行化学成分的检测,以及相关酶、蛋白质和代谢物的定量分析,从而获得临床诊断和治疗的重要信息。操作方法的规范性和准确性对于检查结果的可靠性至关重要。以下是临床生化检查的操作方法的详细介绍。

一、采集标本:

1. 血液标本的采集:采用无菌操作技术,首先对患者进行适当的准备工作,观察采血部位的皮肤是否有感染或者受伤,选择最佳的采血部位,用75%酒精或碘伏消毒皮肤。待消毒液干燥后,将采血针插入血管,并用一次性注射器采集适量的血液样本。

2. 尿液标本的采集:让患者进行体位改变,取晨尿或者全天的尿液作为标本。在采集前,要让患者对尿液容器和个人卫生进行准备,然后清洁外生殖器,用无菌尿杯收集尿液。

3. 其他体液标本的采集:根据具体的实验要求进行操作,家居情况下由专业医务人员进行操作。

二、标本处理:

1. 血液标本的处理:采集完成后,将血液标本转移到干净的试剂管中,并用适当的抗凝剂处理,如EDTA、肝素等。对于需要血清的检查,应该在样本凝固后离心分离血清。

2. 尿液标本的处理:将采集的尿液标本转移到干净的试剂管中,进行适当的处理,如稀释、离心、沉淀等。根据实验目的的不同,处理方法也会有所不同。

3. 其他体液标本的处理:根据具体的实验操作要求,进行相应的标本处理。

三、检测操作:

1. 准备实验物品:准备所需的试剂、仪器和耗材等实验物品,并按照相关规范对其进行检验和校准。

2. 样本的加样:将处理好的标本加样到相应的检测仪器中,注意加样的数量和质量以及操作的规范性。

3. 实验操作:按照实验操作手册的要求,进行相应的实验操作,如温度、时间、反应物的加入顺序等方面的操作要求。

4. 数据记录:记录实验操作的过程和结果,包括样本的编号、操作的时间、试剂和仪器的规格、结果的数字和单位等。

四、结果分析和报告:

1. 结果分析:对实验获得的数据进行分析,比对参考值,并结合患者的临床资料进行结果的解释。

2. 结果报告:将结果根据规范做成检查报告,包括检测项目、结果数据、参考值、结果的解释和临床意义等。

五、质量控制:

1. 内部质控:定期对实验室环境、仪器设备、试剂试剂进行质量控制。

2. 外部质控:参与相关的外部质控活动,进行结果的比对和评价,及时发现问题并进行纠正。

对于临床生化检查来说,操作规范性和准确性是至关重要的,只有严格按照标准操作程序进行,才能保证检测结果的准确可靠性。同时,实验操作人员也应该具备相关的理论知识和实践经验,通过不断的学习和实践,提高自己的操作水平和技术能力。生化检查结果对于临床诊断和治疗起着至关重要的作用,因此希望相关实验室能够严格按照操作方法进行操作,提高检测结果的可信度和准确性。

临床生化项目操作规程

总胆红素(T-Bil)标准操作程序(SOP) 【目的】 保证总胆红素检测结果准确,可靠。 【该SOP变动程序】 本SOP的改动,可有任一使用本SOP的工作人员提出,并经下述人员批准签字:专业主管,科室主任。 【本SOP适用范围】 BT-815A半自动生化仪总胆红素重氮法测定。 【试剂来源】 上海荣盛生物技术有限公司。 【标本类型】血清、血浆 【实验原理】 对氨基苯磺酸+亚硝酸钠 ??→ ?盐酸重氮苯磺酸盐 胆红素+重氮苯磺酸盐酸盐 ? ? ?→ ?二甲亚砜重氮复合物(红紫色) 【实验仪器】BT-815A半自动生化仪 【操作步骤】 1、一份R1于一份R2等比例混合。 2、每个病人600微升温浴10分钟备用。 3、取离心后标本30微升加入600微升试剂温浴10分钟,后检测。 【参考值】血清:<5.17mmol/L。 【临床意义】总胆红素的测定对于急性性肝炎,慢性肝炎,肝硬化,胆管炎,胆石症,急性胆囊炎等肝胆疾病和溶血性贫血的诊断具有重要意义。 【注意事项】 1、标本为血清或肝素血浆。标本采集后应避光保存。

丙氨酸氨基转移酶(ALT)标准操作程序(SOP) 【目的】 保证丙氨酸氨基转移酶检测结果准确,可靠。 【该SOP变动程序】 本SOP的改动,可有任一使用本SOP的工作人员提出,并经下述人员批准签字:专业主管,科室主任。 【本SOP适用范围】 BT-815A半自动生化仪丙氨酸氨基转移酶测定。 【试剂来源】 上海荣盛生物技术有限公司 【标本类型】血清、血浆 【实验原理】一步法或者两步法、速率法 L-丙氨酸+α-酮戊二酸→丙酮酸+ L-谷氨酸(ALT催化) 丙酮酸+NADH+H+→L-乳酸+NAD++H2O(LDH催化) 【实验仪器】BT-815A半自动生化仪 【操作步骤】 1.取标本与试剂30/600的比例混匀。 2.上机检测。 【参考值】血清:<40umol/L。 【临床意义】血清ALT活力的检测对中毒性肝炎,病毒性肝炎,肝癌,肝硬化活动期,脂肪肝,阻塞性黄疸,胆管炎,胆囊炎,心血管疾病,心肌梗塞,心肌炎,骨骼肌疾病,内脏和肌肉炎症性坏死等病症的诊断具有重要的价值。 【注意事项】 1、试剂空白吸收光度小于1.000时,勿用。 2、当样本的ALT活力大于1000U/L时,应将样本用生理盐水稀释后再分析,结果乘以稀释倍数。标佳 试剂使用原装试剂参数,具有自动稀释功能。

体液常规和生化操作规程及临床意义

体液常规和生化操作规程及临床意义 脑脊液常规检查 一、标本的采集:将脑脊液分别收集于3个无菌小瓶(或试管)中, 每瓶1~2ml即可,第一瓶做细菌学检查,第2瓶做化学或免疫学检查,第3瓶做细胞计数。 标本采集后要立即送检、化验,一般不能超过1小时。因为放置时间过久,其性质可能发生改变,影响检验结果: 1、细胞破坏或沉淀,与纤维蛋白凝集成块,导致细胞分布不均 而使计数不准确; 2、细胞离体后迅速变形乃至渐渐消失,影响分类计数; 3、葡萄迅速分解,造成含糖量降低; 4、细菌溶解,影响细菌的检出。 二、一般性状检查:外观颜色及透明度。 1、血性标本的区分:离心后,上层液体为黄色,隐血试验为阳 性,多为蛛网膜下腔出血,且出血已经超过4小时。如上层 液体澄清无色,红细胞沉降于管底,多为穿刺损伤或因病变 所致的新鲜出血。 2、黄色:除陈旧性出血外,在脑脊髓肿瘤所致脑脊液滞留时, 也可呈黄色。黄疸患者的脑脊液也可呈黄色。 3、米汤样:由于白(脓)细胞增多,可见于各种化脓性细菌引 起的脑膜炎。 4、绿色:可见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌引起的脑 膜炎。 5、褐色或黑色:见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色素瘤。 6、结核性脑膜炎常呈毛玻璃样微混。 三、潘氏球蛋白定性试验: 5、原理:脑脊液中球蛋白与苯酚结合,可形成不溶性蛋白盐而 下沉,产生白色浑浊或沉淀。

6、操作:取饱和石炭酸溶液2~3ml,置于小试验管内,用毛细 滴管滴入脑脊液1~2滴,衬以黑背景,立即观察结果。 7、结果判断:阴性(清晰透明,不显雾状)、弱阳性(呈微白 雾状,在黑色背景下,才能看到)、阳性(灰白色云雾状或 白色浑浊)、强阳性和最强阳性(白色絮状沉淀或白色凝块)。 8、注意事项: (1)红细胞过多时,须离心沉淀,吸取上清液进行试验; (2)试验中所用试管和滴管必须十分洁净,否则容易出现假阳性结果。 (3)饱和石炭酸试剂如不纯,可引起假阳性反应;室温低于10℃,饱和石炭酸饱和度低,亦可引起假阴性结果。 四、临床意义:正常多为阴性。有脑组织和脑膜疾患时常呈阳性反应,如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、梅毒性中枢神经系统疾病、脊髓灰质炎、流行性脑炎等等。脑出血时多呈×阳性反应,如外伤性血液混入脑脊液中,亦可阳呈性反应。 五、白细胞计数: 1、对澄清脑脊液:小试管内放入冰醋酸1~2滴,转动试管,使内 壁沾有冰乙酸后倾去之,然后滴加混匀的脑脊液充入计数池计数。 2、血性标本:将混匀的脑脊液用1%的冰醋酸溶液稀释后进行计 数。 3、参考值:正常人脑脊液中无红细胞,仅有少量白细胞。 成人:(0~8)×106/L 儿童:(0~15)×106/L 4、临床意义: (1)中枢神经系统病变的脑脊液,细胞数可增多,其增多的程度及种类与病变的性质有关。 (2)中枢神经系统病毒感染、结核性或霉菌性脑膜炎时,细胞数可中度增加,常以淋巴细胞为主。 (3)细菌感染时(化脓性脑膜性),细胞数显著增加,以中性粒

临床生化检查操作方法

临床生化检查操作方法 临床生化检查是临床医学中常用的一种检查手段,通过对患者的血液、尿液、体液等样本进行化学成分的检测,以及相关酶、蛋白质和代谢物的定量分析,从而获得临床诊断和治疗的重要信息。操作方法的规范性和准确性对于检查结果的可靠性至关重要。以下是临床生化检查的操作方法的详细介绍。 一、采集标本: 1. 血液标本的采集:采用无菌操作技术,首先对患者进行适当的准备工作,观察采血部位的皮肤是否有感染或者受伤,选择最佳的采血部位,用75%酒精或碘伏消毒皮肤。待消毒液干燥后,将采血针插入血管,并用一次性注射器采集适量的血液样本。 2. 尿液标本的采集:让患者进行体位改变,取晨尿或者全天的尿液作为标本。在采集前,要让患者对尿液容器和个人卫生进行准备,然后清洁外生殖器,用无菌尿杯收集尿液。 3. 其他体液标本的采集:根据具体的实验要求进行操作,家居情况下由专业医务人员进行操作。 二、标本处理:

1. 血液标本的处理:采集完成后,将血液标本转移到干净的试剂管中,并用适当的抗凝剂处理,如EDTA、肝素等。对于需要血清的检查,应该在样本凝固后离心分离血清。 2. 尿液标本的处理:将采集的尿液标本转移到干净的试剂管中,进行适当的处理,如稀释、离心、沉淀等。根据实验目的的不同,处理方法也会有所不同。 3. 其他体液标本的处理:根据具体的实验操作要求,进行相应的标本处理。 三、检测操作: 1. 准备实验物品:准备所需的试剂、仪器和耗材等实验物品,并按照相关规范对其进行检验和校准。 2. 样本的加样:将处理好的标本加样到相应的检测仪器中,注意加样的数量和质量以及操作的规范性。 3. 实验操作:按照实验操作手册的要求,进行相应的实验操作,如温度、时间、反应物的加入顺序等方面的操作要求。 4. 数据记录:记录实验操作的过程和结果,包括样本的编号、操作的时间、试剂和仪器的规格、结果的数字和单位等。

生化检验流程

生化检验流程 认证执行,严格按规定流程进行操作,密切监督,以最大限度的预防误差,给临床和患者提供及时、准确、有用的检验结果。

1、医生开申请单: 检验申请单要认真清楚的填写,姓名、住院号、科别、 检验项目等,要根据临床需要,尽量避免多开和漏开。 2、病人准备:病人准备是检验质量保证的重要环节之一。要求病人处于 安静状态,生活饮食处于日常状态,避免情绪激动、大量运动、过度空腹、饮食、饮酒、服用药物、吸烟等。一般要求空腹8小时早晨采血,血脂类须素食3日,空腹12小时,采血尽量采取相同体位。 3、标本的采集、运送:根据化验申请单确定采血量,采血量应按规定不 能太少,采血时止血带使用不要超过1分钟,注入试管应取下针头,注入真空管不能施压,要让负压自然吸入,以避免溶血,抗凝管要颠倒混匀3次,杜绝在输液的同测手臂上采血,病房采血后,应将试管上的联号贴在申请单上,用申请单包裹血样管。检验科每天早上9点前到病房接收常规生化标本,下午3点出报告,9点未收到常规生化标本,当天不保证出结果。门诊生化10点取标本,下午3点发报告,生化室11.30到抽血处取剩余标本,此批标本不作当天出报告承诺。急诊检查送临检室,由临检室通知生化室,急诊要求用肝素抗凝管,一般1小时内回报,若未用抗凝管,2小时内回报。 4、编号,记账:编血时送检单和血管编号应一致清楚,门诊肝功尽量靠 前,病房肝功、肾功最好分开。记账时应仔细核对病人姓名和钱数,申请单上病人姓名不清楚者,记账时注意在旁边写清楚。 5、标本处理:门诊肝功生化一律采用肝素抗凝血,病房常规生化标本用 促凝管,离心前在水浴箱放30分钟,4小时内不能检测的标本应尽快内分离血清,加盖置2~8度冰箱保存。标本离心要求如下: 1.未抗凝标本(3~5毫升,红盖真空采血管)水浴箱垂直放置30分钟后离 心,肝素抗凝血可立即离心。 2.标本配平,将标本放入离心机,盖上离心机盖 3.打开离心机电源,设定离心转速及离心时间,80—2台式小离心机离心 3500转(约1000g力)5分钟。 5. 待离心机转速停止后或离心转速降至0时,轻轻取出标本,关闭离心机 电源。 6.离心后立即将标本转移至干净不含抗凝剂或防腐剂的试管,原血清液面高 度应不少于1cm,或吸出量不少于0.5ml,同时此管应具有可识别标号。

生化质控操作方法

生化质控操作方法(总2页) -CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1 -CAL-本页仅作为文档封面,使用请直接删除

iChem---330生化分析仪 做质控,样本测试之前,注意一下几点: 一、试剂针,样本针,搅拌杆以及清洗臂的各个位置是否正确,特别是反应杯的位置,如 把试剂或者标本加至反应杯壁上,对测试有影响; 二、所有反应杯是否干净,杯子里有无残留水,反应杯外壁上是否有水,反应槽里是否有 水,如有水,请擦干净; 三、执行清洗程序,观察7阶清洗臂清洗反应杯时,杯子里的水是否会溢出来,7根清洗针 的针尖是否会滴水下来。 质控测试: 一、点击质控液设置,点击增加,输入名称:质控液,批号:852UN,浓度水平:中,样本 盘号:1号样本盘,虚拟号:0,样本杯号:58,然后选中所有项目,分别点击右下角的平均浓度的白色框,输入项目的靶值和标准差,然后选中某个项目,输入其靶值和 标准差(所有项目的靶值和标准差根据说明书的靶值表设定)见附表: 二、依次输入所有要做质控的项目的靶值和标准差,完成之后,点保存即可,保存之后, 检查下所有靶值和浓度有无输错,如有输错,点击修改,然后再保存; 三、然后点击质控申请,选中你刚刚所加的那个质控液的编号,然后点击编号对应的小正 方形,会出现一个小勾勾,右边所有的项目默认都会选中(有绿点代表选中),确认 所做项目无缺漏之后,点击开始测试,它会自动跳到样本检测的那个界面,点开始测 试,就进行质控的测试了(点开始测试之前,注意全部试剂盖子去掉,质控液用样品 杯装着,放在设定的位置); 四、测试完成之后,点击质控结果,点击查询,观察测试值是否在靶值的正负两个标准差 之内,如不在范围之内,请检查质控液,定标,试剂是否正常,机器测试过程中有无 异常现象; 五、如均无异常,调整K因子,公式:新K因子=(均值÷测试值)×定标出来的K因子; 六、定标出来的K因子在定标结果里查看,首先找到定标结果里的因子,例如UREA的 “K”值是0.0086,然后0.0086乘以10000等于86, 86才是真正要换算的K因子; 七、得出新的K因子之后,在定标设置里找到项目UREA,将定标规则修改为K因子法,输 入新的K因子,然后点击保存即可; 八、重新做质控测试,观察质控结果。 质控液复溶步骤 一、小心打开质控液瓶的瓶盖,避免内容物的任何损失。 二、在20-25℃的室温下,准确量取5ml蒸馏水复溶1瓶质控血清。 三、盖上橡皮塞,拧紧瓶盖,使用前避光放置30分钟。

生化检验质控操作流程

生化检验质控操作流程 【操作步骤】 一、室内质控品的选择 理想的室内质控品至少应具备以下特点:人血清基质;无传染性;瓶间变异小,酶类项目CV%<2%,其它分析物CV%<1%;冻干品复溶后稳定性好,多数常规生化项目2~8℃稳定7天,-20℃稳定30天;有效期应在1年以上。 二、质控品的正确使用与保存 严格按质控品说明书操作和保存,不使用超过保质期的质控品;冻干质控品的复溶确保所用溶剂的质量和所加溶剂的量的准确性,复溶时应轻轻摇匀,使内容物完全溶解,切忌剧烈振摇,防止泡沫产生,复溶时间不得少于20分钟;质控品要在与患者标本同样测定条件下进行测定;每天至少做两水平以上质控品。 三、室内质控图的绘制 1.均值和质控限的确定 在开始室内质控时,首先要确定质控图的均值和质控限,将质控品应与常规标本一起测定。根据20次质控结果(每天开一瓶,一天测一次),对数据进行离群值检验(剔除超过3s 外的数据),计算出平均数和标准差,作为暂定均值和暂定标准差。 以此暂定均值和标准差作为下一个月室内质控图的均值和

标准差进行室内质控;一个月结束后,将该月的在控结果与前20个质控测定结果汇集在一起,计算累积平均数和累积标准差(第一个月),以此累积平均数和标准差作为下一个月质控图的均值和标准差。 重复上述操作过程,连续三至五个月。以最初20个数据和三至五个月在控数据汇集的所有数据计算的累积平均数和标准差作为质控品有效期内的常规均值和标准差,并以此作为以后室内质控图的均值和标准差。 对稳定性较短的质控品,均值的建立可在3至4天内,每天分析每水平质控品3至4瓶,每瓶进行2至3次重复。收集数据后,计算平均数、标准差和变异系数。对数据进行离群值检验(剔除超过3s的数据)。如果发现离群值,需重新计算余下数据的平均数和标准差。以此均值作为质控图的均值。至于标准差,可采用以前变异系数(CV)来估计新的标准差。以前的标淮差是几个月数据的简单平均或甚至是累积的标准差。这就考虑了检测过程中更多的变异。标准差等于平均数乘以以前变异系数(CV%)。 2.绘制质控图及质控方法(规则)的应用 根据质控品的靶值和质控限绘制质控图,并将原始质控结果记录在质控图表上,保留打印的原始质控记录。将设计的质控规则应用于质控数据,判断每一质控结果是否在控,现多采用Westgard多规则即12s/13s/22s/R4s/41s/10X。

临床检验生化项目操作规程

临床检验生化项目操作规程 临床检验生化项目属于临床诊断领域的重要部分,对于医生的诊断和治疗决策具有重要意义。为了确保生化项目的准确性和可靠性,需要遵守一定的操作规程。下面将介绍临床检验生化项目的一般操作规程。 1.实验室设备准备 (1)检查仪器:确保仪器工作正常、校准合理,满足质控和标准要求。 (2)试剂和材料:按照临床检验项目的要求准备试剂和材料,确保其质量可靠。 (3)标本采集容器:根据项目要求准备适当的标本采集容器,确保标本采集的质量。 2.标本采集 (1)严格按照标本采集要求进行,如抽血后立即转入试剂,避免血液凝固或细胞降解。 (2)遵循采血规范,注意消毒操作,避免交叉污染。 (3)注意采集过程中的标本量,避免过度或不足。 3.标本保存与运输 (1)根据项目要求,将标本储存在适当的环境条件下,如温度、光照等。 (2)确保标本的灵敏度和稳定性,避免因保存条件不当影响结果的准确性。

(3)若需运输标本,采取适当的方式和条件,避免标本的损坏或变质。 4.试剂和标准操作 (1)严格按照试剂使用说明操作,遵循试剂的稀释和混合比例要求。 (2)准确称量试剂,避免因操作不当导致试剂用量过多或过少。 (3)严格遵守试剂保存要求,确保试剂的稳定性和质量。 5.标本处理 (1)根据项目要求,进行标本处理,如离心、分离清液等操作。 (2)标本处理时要控制处理时间和温度,确保得到准确的结果。 (3)避免交叉污染,每次操作后要彻底清洗和消毒实验器皿。 6.仪器操作 (1)操作前按照要求进行仪器校准和质控,确保仪器工作正常。 (2)精确调整仪器的各项参数,以获得准确的检测结果。 (3)注意操作流程和步骤,确保每个样本都得到准确的分析。 7.结果记录与报告

犬生化检查的步骤

犬生化检查的步骤 犬生化检查是一种常见的临床检验方法,通过分析犬体内的血液成分,可以了解犬的健康状况及内脏功能是否正常。下面将介绍犬生化检查的步骤,以及其对犬的重要意义。 第一步:血液采集 需要采集犬的静脉血样本。通常,犬的前肢内侧的静脉是较为适合的采血部位。在确保采血部位清洁的前提下,用一根注射针或者采血针缓慢地插入静脉,以获取足够的血液样本。 第二步:血液标本处理 采集到的血液样本需要进行处理,以获取血浆或血清。处理方法根据检测项目的不同而有所差异,常见的处理方式包括离心、凝固或添加抗凝剂等。处理后的血液样本中,可以分离出各种生物化学指标,如蛋白质、糖类、脂质、肝功能指标等。 第三步:生化指标检测 在血液标本处理完成后,可以使用生化分析仪器对采集到的血液样本进行检测。根据需要检测的指标,可以选择相应的分析方法。常见的生化指标包括血糖、肝酶、尿酸、胆固醇、肾功能指标等。通过分析这些指标,可以评估犬的糖代谢、肝功能、肾功能以及其他器官的正常运转情况。 第四步:结果分析与诊断

根据检测结果,可以对犬的健康状况进行初步判断。例如,血糖水平的异常可能提示犬是否患有糖尿病;肝酶水平的升高可能意味着犬有肝功能异常等。但是,这些结果仅供参考,还需要结合临床症状和其他检查结果进行综合分析和诊断。 犬生化检查的意义在于帮助兽医了解犬的整体健康状况,并及时发现潜在的疾病。通过检测生化指标,可以早期发现犬的器官功能异常,及时采取治疗措施,有效降低疾病的发展风险。因此,犬生化检查在犬的健康管理中起着重要的作用。 总结起来,犬生化检查的步骤包括血液采集、血液标本处理、生化指标检测以及结果分析与诊断。这一系列步骤可以帮助兽医评估犬的健康状况,及时发现潜在的疾病,并采取相应的治疗措施。犬生化检查对于犬的健康管理具有重要的意义,可以维护犬的身体健康,延长其寿命。因此,对于犬主人来说,定期进行犬生化检查是非常重要的。

检验科生化葡萄糖测定的标准操作规程

葡萄糖测定的标准操作规程 【目的】 体外检测血清中葡萄糖(GLU )的含量。 【职责】 1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP,室负责人监督落实。 2.本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。 【标本类型及实验前准备】 1.受检者的准备 病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况。孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验。此外,有无服用影响的药物以及采血的季节都应做相关记录。 2.静脉采血 除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。 【仪器设备】 东芝TBA-FX8全自动生化分析仪,低速离心机 一、检测原理 本试剂所采用的反应式如下: 葡萄糖ATP HK葡糖糖6磷酸ADP 葡萄糖 6 磷酸 NAD G 6 PDH 6 PG NADH H 式中:ATP为三磷酸腺苷;ADP为二磷酸腺苷;HK为己糖激酶;G-6-PDH为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶;6-PG为6-磷酸葡萄糖酸 上述反应中,NADH的生成量与样本中葡萄糖的浓度成正比,通过在340nm处测定吸光度的变化值,即可测得样本中葡萄糖的浓度。

、试剂 1.试剂 本科使用上海复星长征医学科学有限公司HDL-C试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:试剂1(R1) 三磷酸腺苷0.75mmol/L 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶375U/L NAD15mmol/L 哌嗪-N,N’ -双(2-乙磺酸)缓冲液 50 mmol/L 试剂2(R2) 己糖激酶60KU/L 哌嗪-N,N’ -双(2-乙磺酸)缓冲液 50 mmol/L 2.校准要求 2.1校准品:使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清(货号: 449 5 0/4 5 9 5 0对测定进行校准。 2. 2校准间隔 2. 2. 1试剂批号变更时使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清对测定进行校准后再对临床病人样本进行测定。 2. 2. 2室内质量控制出现问题时使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清对测定进行校准并确认问题得到解决后方可对临床病人样本进行测定。 三、操作 按生化分析仪操作要求结合长征试剂说明书输入测定参数,并按校准、质量控制、 样本测定的顺序进行常规测定。 四、计算 葡糖糖浓度(mmol/L)样本吸光度(A)校准液浓度(mmol/L) 校准品吸光度(A) 五、质控程序

生化检验的方法及原理

生化检验的方法及原理 生化检验是一种通过检测血液、尿液、体液等体内物质的变化来评估人体健康状况的方法。它通过测定体内化学物质的浓度或活性,可以提供有关内脏功能、营养状况、代谢情况以及某些疾病的信息。下面将介绍一些常用的生化检验方法及原理。 1. 血常规检验: 血常规检验是对血液中红细胞、白细胞、血小板等的数量、形态和功能状态进行检查的方法。该检验方法主要包括测定血红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞体积分布宽度、白细胞计数、血小板计数等项目。常用的测定方法包括血细胞自动分析仪、涂片染色和显微镜观察等。血常规检验可以评估机体的贫血程度、血液的凝血功能以及炎症反应等。 2. 肝功能检验: 肝功能检验主要包括测定血清谷丙转氨酶(ALT)、血清谷草转氨酶(AST)、总胆红素、直接胆红素、白蛋白、球蛋白等指标。ALT和AST是血液中常用的肝细胞损伤指标,其升高提示肝细胞受到损伤。总胆红素和直接胆红素可以评估肝脏排泄胆红素的功能,其升高可说明肝功能异常。血清蛋白水平可以反映肝脏合成功能的变化。 3. 肾功能检验: 肾功能检验常用的指标有血尿素氮(BUN)、肌酐、尿酸等。BUN是肾脏排泄

代谢废物的指标,其升高可以反映肾脏排泄功能的下降。肌酐是肌肉代谢废物,其浓度增高可提示肾小球滤过功能减退。尿酸是嘌呤代谢产物,尿酸增高可与痛风等疾病相关。 4. 血糖检测: 血糖检测是评估糖代谢情况和糖尿病诊断的常用方法。常用的检测方法有空腹血糖、餐后血糖、糖化血红蛋白等。其中空腹血糖是指在至少8小时禁食后测定的血糖浓度,可以鉴别糖尿病和糖尿病前期。餐后血糖是指进食后2小时的血糖浓度,可以评估胰岛功能及胰岛素敏感性。糖化血红蛋白是反映血糖控制情况的指标,其浓度升高可预测糖尿病的并发症。 5. 血脂检测: 血脂检测是为了评估血液中脂质成分的含量和分布,以及心脑血管疾病的风险。常用的检测指标有总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇等。总胆固醇和甘油三酯是评估血液脂质紊乱的指标,高密度脂蛋白胆固醇被认为是“好胆固醇”,低密度脂蛋白胆固醇是“坏胆固醇”,两者浓度高低与心脑血管疾病的发生相关。 6. 电解质检测: 电解质检测是评估血液中钠离子、钾离子、氯离子等电解质的浓度和平衡的指标。正常的电解质平衡对于维持细胞功能和神经传导至关重要。电解质异常可导致神经、心脏和肾脏等器官功能异常。常用的检测方法有离子选择电极法、

生化检验操作规程

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生化检验操作规程 一. 血脂血糖 1.胆固醇 (1)方法学:胆固醇氧化酶法 (2)实验仪器:上海科华卓越330全自动生化分析仪 (3) 试剂成分:R1-胆固醇酯酶,抗坏血酸氧化酶,过氧化物酶,ESPAS,R2-胆固醇氧化酶,4-氨基安替比林 (4)操作流程:开机->进入主程序->开始->杯空白测定->正常->将待测管放入样品盘检测孔中(如1孔)->进入样品界面->在界面左侧输入相应起始样品号(如1号)以及相应起始杯号(如1杯)->在右侧检测项目界面中选择“胆固醇”->点击下方申请测试->开始测试->加样针吸取样品管内血清3μL于比色盘的1号比色杯中->试剂针吸取胆固醇 R1试剂250μL于1号比色杯中->搅拌器搅拌混匀->37℃恒温5分钟->试剂针再吸取胆固醇 R2试剂125μL于1号比色杯中->搅拌器再次搅拌混匀->37℃恒温5分钟后比色测定->结果数据传至主程序开始菜单内的报告列表界面->检测完毕->在报告列表输入检验报告单相关信息->点击右下方打印报告->签字审核后发单。 (5)注意事项: ①保证比色盘与试剂盘的洁净,定期检查。每日检查试剂剩余量,及时补足。 ②注意主程序界面内的试剂盘的温度变化,一旦持续增高,则考虑冷冻剂问题,予以更换。 ③保证样品的良好待检状态,样本为血清,肝素或EDTA抗凝血浆,若当时不能检测则可2℃~8℃冷藏保存。过度溶血的宜重新取血,若无法重新取血的应在检验报告单上注明,脂血的样本也应在检验报告单上标注,并且稀释后再行检测,黄疸的应先做空白对照,再行检测并将结果减去空白对照后再行出单。 ④每日跟随样品进行质控检测绘出质控图,观察质控值是否在2SD以内,3SD为失控限,以便据此观察机器与试剂的状态是否在控。 ⑤注意试剂的效期问题,定期检查试剂是否变质,保证试剂在有效期内使用。避免接触眼睛、皮肤与衣物,若接触后应用大量清水清洗受害部位或衣服,擦拭干净接触的物品,以免中毒或损坏衣物。 2.甘油三酯 (1)方法学:甘油三酯氧化酶法 (2)实验仪器:上海科华卓越330全自动生化分析仪 (3) 试剂成分:R1-甘油-3-磷酸氧化酶,抗坏血酸氧化酶,甘油激酶,4-氨基安替比林 ,R2-脂蛋白脂肪酶,过氧化物酶,ESPAS (4)操作流程:开机->进入主程序->开始->杯空白测定->正常->将待测管放入样品盘检测孔中(如2孔)->进入样品界面->在界面左侧输入相应起始样品号(如2号)以及相应起始杯号(如2杯)->在右侧检测项目界面中选择“甘油三酯”->点击下方申请测试->开始测试->加样针吸取样品管内血清4μL于比色盘的2号比色杯中->试剂针吸取甘油三酯 R1试剂250μL 于2号比色杯中->搅拌器搅拌混匀->37℃恒温5分钟->试剂针再吸取甘油三酯R2试剂125μL于2号比色杯中->搅拌器再次搅拌混匀->37℃恒温5分钟后比色测定->结果数据传至主程序开始菜单内的报告列表界面->检测完毕->在报告列表输入检验报告单相关信息->点击右下方打印报告->签字审核后发单。 (5)注意事项: ①保证比色盘与试剂盘的洁净,定期检查。每日检查试剂剩余量,及时补足。

生化实验的基本操作注意事项

生化实验的基本操作注意事项 (一)搅拌和振荡 1.配制溶液时,必须随时搅拌或振荡混合。配制完了时,必须充分搅拌或振荡混合。 2.搅拌使用的玻璃搅棒,必须两头都烧圆滑。 3.搅棒的粗细长短,必须与容器的大小和所配制的溶液的多少呈适当比例关系。不能用长而粗的搅棒去搅拌小离心管中的少量溶液。 4.搅拌时,尽量使搅棒沿着器壁运动,不搅入空气,不使溶液飞溅。 5.倾入液体时,必须沿器壁慢慢倾人以免有大量空气混入。倾倒表面张力低的液体(如蛋白质溶液)时,更需缓慢仔细。 6.振荡溶液时,应沿着圆圈转动容器,不应上下振荡。 7.振荡混合小离心管中液体时,可将离心管握在手中,以手腕、肘或肩作轴来旋转离心管; 也可由一手持离心管上端用另一手弹动离心管;也可用一手大拇指和食指持管的上端,用其余三个手指弹动离心管。手指持管的松紧要随着振动的幅度变化。还可以把双手掌心相对合拢,住离心管,来回挫动。 8.在容量瓶中,混合液体时,应倒持容量瓶摇动,用食指或手心顶住瓶塞,并不时翻转容量瓶。 9.在分液漏斗中振荡液体时,应用一手在适当斜度下倒持漏斗,用食指或手心顶住瓶塞,并用另一手控制漏斗的活塞。一边振荡,一边开动活塞,使气体可以随时由漏斗泄出。 10.研磨配制肢体溶液时,要使杵棒沿着研钵的单方向进行,不要来回研磨。 (二)沉淀的过滤和洗涤 1.过滤沉淀一般使用滤纸。 2.应根据沉淀的性质选择不同的滤纸.胶状沉淀,应使用质松孔大的滤纸.一般大小颗粒的结晶形成沉淀,应使用致密孔小的滤纸。而极细的沉淀,则应使用致密孔最小的滤纸。滤纸越致密,过滤就越慢。 3.滤纸的大小要由沉淀量来决定,并不是由溶液的体积来决定。沉淀量应装到滤纸高度的1/3左右。最多不应超过1/2,通常使用直径为7-9厘米的圆形滤纸。 4.折叠滤纸应先整齐的对折,错开一点再对折,打开后形成一边一层,一边三层的圆锥体。折叠尖端时不可过于用力,以免容易出洞。放入漏斗中时,滤纸边缘应完全吻合。撕去三层一边的外面两层部分的尖端,使滤纸上缘能更好的贴在漏斗的壁上,不留缝隙。而下面部分则有空隙以利于提高过滤速度。 5.滤纸上缘一般应低于漏斗口上周0.5至1厘米。润湿滤纸时应用指尖轻压滤纸赶净滤纸和漏斗间的气泡,使滤纸紧贴漏斗壁。同时漏斗颈内必须充满液体,这样,才可籍液体的重量而对于待液体产生吸滤作用。 6.过渡时,为了防止沉淀堵塞滤纸的孔洞,通常采用倾泄法,即先小心的把溶液倾入漏斗而不使沉淀流

生化检验质控操作流程

生化检验质控操作流程

生化检验质控操作流程 【操作步骤】 一、室内质控品的选择 理想的室内质控品至少应具备以下特点:人血清基质;无传染性;瓶间变异小,酶类项目CV%<2%,其它分析物CV%<1%;冻干品复溶后稳定性好,多数常规生化项目2~8℃稳定7天,-20℃稳定30天;有效期应在1年以上。 二、质控品的正确使用与保存 严格按质控品说明书操作和保存,不使用超过保质期的质控品;冻干质控品的复溶确保所用溶剂的质量和所加溶剂的量的准确性,复溶时应轻轻摇匀,使内容物完全溶解,切忌剧烈振摇,防止泡沫产生,复溶时间不得少于20分钟;质控品要在与患者标本同样测定条件下进行测定;每天至少做两水平以上质控品。 三、室内质控图的绘制 1.均值和质控限的确定 在开始室内质控时,首先要确定质控图的均值和质控限,将质控品应与常规标本一起测定。根据20次质控结果(每天开一瓶,一天测一次),对数据进行离群值检验(剔除超过3s 外的数据),计算出平均数和标准差,作为暂定均值和暂定标准差。 以此暂定均值和标准差作为下一个月室内质控图的均值和

变质或者被污染。如果结果仍不在允许范围,则进行下一步。 3.进行仪器维护,重测失控项目。检查仪器状态,查明光源是否需要更换,比色杯是否需要清洗或更换,对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂,此时可更换试剂以查明原因。如果结果仍不在允许范围,则进行下一步。 4.重新校准,重测失控项目。用新的校准液校准仪器,排除校准液的原因。 5.请专家帮助。如果前五步都未能得到在控结果,那可能是仪器或试剂的原因,只有和仪器或试剂厂家联系请求技术支援。 五、室内质控数据的管理 1.每月室内质控数据统计处理 每月末,应对当月的所有质控数据进行汇总和统计处理,计算的内容至少应包括:当月每个测定项目原始质控数据及除外失控数据后的平均数、标准差和变异系数;当月及以前每个测定项目所有在控数据的累积平均数、标准差和变异系数。 2.每月室内质控数据的保存 每个月的月末,应将当月的所有质控数据汇总整理后存档保存,存档的质控数据包括:当月所有项目原始质控数据;当月所有项目质控数据的质控图;上述所有计算的数据(包括

临床生物化学实验原理、方法及检测介绍

临床生物化学实验原理、分析方法及检测技术 中国中医研究院广安门医院临床检测中心 生物化学实验——是把化学(分析技术)和生物化学(实验反应原理)的方法应用于疾病的诊断、治疗、监控的实验分支。 一个生化实验的最后测定结果应包括四大部分来完成。 一、实验反应原理及分析方法(理论依据) 二、实验检测技术(手段)生化仪的分析技术。 三、质量控制程序(质量保证)室内质控、室间质评、仪器、试剂、人员五要 素。 四、临床意义(目的)咨询服务、异常结果的解释。 实验反应原理及分析方法(理论依据) 一个生物化学实验的反应原理设计,首先要找出所检测的化学特性,如测定体液(首先是血液)中酶的含量血液中除少数酶(如凝血溶血酶、铜氧化酶及假性胆碱脂酶等)含量较多外,血液正常生理状况下含量微乎其微。一般每毫升含微微克()水平,要直接测定如此微量物质是相当困难的。用免疫化学方法可测定全部酶蛋白分子含量(不论其有无活性)而用化学方法测定只能测定酶的催化活性,间接计算出酶的含量。目前利用酶具有催化活性这一特性,在临床上已普遍应用测定酶蛋白,同时还可以测定三大代谢的产物,如糖、脂类、蛋白质、这样也就建立起利用酶促反应的一级反应测定代谢物的方法。一级反应—反应速度及底物浓度成正比,因此只有当酶反应为一级反应时,才能准确测定底物含量,(如测定血糖、总甘油三脂、总胆固醇等)。从此在临床试剂盒的方法中出现了以酶为试剂测定各种代谢产物。 临床化学方法的分类 特别是自动生化仪方法的特点

以往临床化学实验都采用比色法进行各个项目的测定,这是因为比色法具有微量、迅速、准确的优点,特别适合于微量的生物体体液中各项物质测定。 在一般比色法中,手工使用比色计或分光光度计可以测定各种反应溶液的吸光度,但由于很难控制测定时间和反应温度,很难准确记录反应过程中吸光度变化,因此,毫不奇怪在很长一段时间内我们所使用的方法,都是在呈色反应达到完全或者反应达到平衡时,吸光度达到稳定时才进行测定。即所谓平衡法或终点法。 但自从自动生化仪出现后,从根本上改变了上述情况。通过各项先进技术,人们可以精确测定反应的动态过程。并可以准确计算任何一段反应时间内的反应速率,这样大大开阔了临床化学家对方法选择。除经典的终点法外还可以进行动态测定。这样不仅缩短了操作时间,大大提高了工作效率,还可进行一些用常规比色方法不能进行的测定。如测定酶反应的初速度()等等。测酶初速度()只能用分光光度法。 因此,用好自动生化仪一个重要前提必须对自动生化仪可以提供的测试方法类型有所了解。 生化自动分析仪特点: 1 精确测定反应的动态过程; 2 准确计算任何一段反应时间内的反应速率; 3 除经典的终点法外还可以进行动态测定。 分析方法的分类 临床化学常用方法按表1分类:

第二节 血液生化检验

第二节血液生化检验 血液生化检验主要用血浆和血清。目前,在临床检验中多采用检验试条或试剂盒,或干式、湿式生化仪。根据仪器的自动化程度分为全自动生化仪和半自动生化仪。血液生化检验绝大部分都是使用仪器、试剂盒或试条检验。这里主要介绍部分检验项目的自配试剂和试验步骤。 一、血糖测定 血糖指血液中的葡萄糖,正常情况下糖的分解代谢与合成代谢保持动态平衡,血糖的浓度相对稳定,病理状态下血糖浓度的改变对于判断糖代谢的异常及相关疾病的诊断有重要意义。目前常用邻甲苯胺法测定血糖。 (一)原理 己醛糖溶液在酸性与加热情况下脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛,再与邻甲苯胺缩合成芳香族第一级蓝色席夫氏碱,其颜色深浅与葡萄糖含量成正比。 (二)试剂 1.邻甲苯胺硼酸溶液:称取硫脲1.5 g溶于冰醋酸883.2 mL,再加邻甲苯胺76.8 mL,混合后加入6%饱和硼酸溶液40 mL,充分混匀,置于棕色瓶备用,可保存数月。 饱和硼酸溶液:称取硼酸6 g,溶于100 mL蒸馏水中,放置一夜过滤即可应用。 2.葡萄糖标准贮存液(1mL=10 mg):精确称取葡萄糖 1.0 g,加0.25%苯甲酸(安息香酸)溶液至100 mL。 3.葡萄糖标准应用液(1mL=1mg):用0.25%苯甲酸溶液将贮存液作10倍稀释。 (三)方法 按表2.10操作。 表2.10 操作方法(单位:mL) 标准管测定管 血清—0.1 葡萄糖标准应用液0.1 — 邻甲苯胺硼酸试剂 5.0 5.0 置100℃水浴加温5~8 min,冷水冷却,在30 min内用520~620 nm滤光板比色,用蒸馏水做空白。 (四)计算 测定管光密度/标准管光密度×100=白糖值(mg/100 mL)。 (五)正常值见表2.11。 表2.11 健康家畜血糖正常值(mg/100 mL) 动物平均值变动范围资料来源 牛67.46 52.76~84.89 成都市乳品公司等 犊牛60.68 60.8~108.52 成都市乳品公司等 水牛58.02 51.0~85.0 江苏农科院 绵羊35~60 Kaneko 仔猪(断奶) 90.90 48.50~133.80 山西忻县地区牧医所 马93.00 68.00~118.00 军需大学 犬70~100 Bloom 猫77~118 Bloom (六)临床诊断价值 1.血糖升高 (1)生理性或一时性升高如单胃动物饲后2~4 h、精神紧张、兴奋、对动物的强制保定、疼

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