【原创】高中生物人教版实验-观察根尖分生区细胞有丝分裂
PI染色检测细胞周期
1、离心收集细胞，弃上清，用预冷PBS洗细胞两次。 2、加入预冷70%乙醇，于4℃固定过夜，或-20℃长期固定（4℃过夜一般隔天就进行检测，如果想推迟几天测，那就保存在-20℃，有资料说-20℃可以保存一个月，个人建议尽量在最短时间内检测，有些实验是在不同时间点上收细胞，这时我就等最后一次固定完了一块测，基本上也多在一周内检测完毕，没有特地去比较保存时间对检测结果的影响）。 3、细胞染色 离心收集细胞，以1mL的PBS洗细胞一次，加入500uLPBS含50ug/mL溴化乙锭（PI），100ug/mL RNase A，0.2% Triton X-100，4℃避光孵育30分钟（PI我是直接用PBS配成工作浓度，然后加入细胞沉淀混匀，RNA酶现加，但有时不加发现对实验结果也没太大的影响）。 4、流式分析 以标准程序用流式细胞仪检测，一般计数2-3万个细胞，结果用细胞周期拟和软件ModFit分析。 分析时，使用FL2-w和FL2-A显示，去除联体细胞，具体如下图。 细胞周期流式后一般分为G0/G1,S,G2/M期三部份，如果有凋亡，在G0/G1期前面有个凋亡峰(也称sub-G0期),而如果分析时细胞窗口没设置好，可能在最前面还有细胞碎片峰。 结果解读 G0/G1期细胞占总的61.2%，峰位于横座标的45.76 G2/M期占13.07，峰位于横座标的91.43 S期占25.73 G2/G1为2.0（即G2期为4倍体细胞，而G1期为2倍体细胞，比值为2） 峰的变异系数为4.54%（好） 细胞碎片为0.48%，细胞聚集体有0.06%。 总的细胞数（仪器检测到的）为17525个， 在细胞周期中分析的细胞数为17431个（即排除了碎片及聚集体后）
有丝分裂过程中染色体的行为变化
有丝分裂过程中染色体的行为变化 时期染色体特点其他特点图像数目变化规律 间期 2 N 呈细丝状染色质 状态，每条染色体经复 制后，就含有2条姐妹 染色单体 ①合成了大量的 蛋白质②时间比分 裂期长很多③细胞 有适度的生长 前期2N 由细丝状染色质 变成染色体，排列散乱 ①出现纺锤体 ②核仁解体、核 膜消失 中期2N 每条染色体的着 丝点两侧均有纺锤丝 牵引，着丝点排列在赤 道板上，染色体的形态 稳定，数目清晰 ①赤道板是细胞中央的一个平面，实际不存在②中期是观察染色体的最佳 时期 后期4N 着丝点分裂，姐妹 染色单体变成子染色 体，在纺锤丝牵引下向 细胞两极运动 纺锤丝缩短，移向两极的两套染色体形态和数目完全 相同 末期2N 染色体变成丝状 染色质 ①核仁、核膜重新出现②纺锤体消
动植物细胞有丝分裂的比较
适度的生长，参与的细胞器都是核糖体、线粒体；染色体都 在间期复制，后期平均分配到两个子细胞中，保持了亲子代 之间遗传性状的稳定性。 细胞周期的理解 1．定义：是指连续分裂的细胞，从一次分裂完成时开始，到下一次分裂完 成时为止。 2．产生条件：连续分裂的细胞才具有细胞周期，如癌细胞、根尖分生区细胞、形成层细胞、受精卵、骨髓造血干细胞等等。 3．起止点：从一次分裂完成时开始，到下一次分裂完成时为止。 4．表示方法和图解
（1）图示中表示一个细胞周期的是A→A，a+b或c+d，a→f，A+B+C。其中表示分裂间期的是A→B,a或c,a+b。表示分裂期的是B→ A，b或d，c→f。 （2）柱形图中，B组DNA含量在2C到4C之间，说明细胞正处于DNA分子的复制时期；C组细胞中DNA含量已经加倍，说明细胞处于G2期和分裂期。 （3）由于细胞分裂间期比分裂期长，所以我们用显微镜观察处于细胞周期中的细胞时，看到的多是处于分裂间期的细胞。 （4）分裂间期：是指细胞在一次分裂结束之后到下一次分裂之前。它大约占细胞周期的90％－95％。分裂间期为分裂期进行活跃的物质准备，完成DNA 分子的复制和有关蛋白质的合成，同时细胞有适度的生长(如下图所示)。分裂间期分为三个阶段：①DNA合成前期（G1期），此期为DNA复制作准备，主要进行蛋白质和RNA的合成，细胞较快地生长，体积随着细胞内物质地增多而增大； ②DNA合成期（S期），此期主要进行DNA分子的复制，使DNA含量增加一倍； 期），此期DNA合成终止，主要进行蛋白质和RNA的合成，③DNA合成后期（G 2 形成微管蛋白和细胞膜上的蛋白质，为细胞分裂期作准备。\
PI染色检测细胞周期实验步骤
protocol : PI染色检测细胞周期 1、收集细胞：胰酶（含EDTA）消化收集对数生长期细胞（加热处 理后损失多的组宜多收集细胞保证细胞有 0.5-2 X 10*6个），吸取旧培养基到一个新离心管里；少量常温PBS （根据培养皿大小决定量，PBS洗可以保证消化效率）洗2次，清洗的PBS也要收集到上述离心管内【检测凋亡才需收集旧培养基及清洗的 PBS J ;然后胰酶消化 （注意一定要消化完全，显微镜下观察细胞呈单个，而不是成片脱落）后利用旧培养基中和胰酶；离心（1000r/300g 5mi n）收集细胞沉淀。 2、用预冷的PBS清洗细胞两次。 3、固定细胞：用0.5ml预冷的PBS重悬细胞沉淀，使细胞充分悬浮成单细胞，再将重悬细胞加入1.2ml预冷的99.7%无水乙醇（乙醇终浓度70%），吹打混匀以免细胞团聚，4C固定2H至过夜。 4、细胞染色：离心（1000r/300g 5min ）收集固定的细胞，以1.8 mL的PBS洗细胞一次，离心（第一次实验时用7000rpm才把细胞离心下来，但最后流式结果显示细胞没有碎）再次获取细胞沉淀后加入1 00卩IRNaseA 于37 C水浴30min，最后加入400卩lPI避光染色30 min （常温或4C 均可） 【有的试剂盒说明是：每个样本加入500uL染色剂（据样本数，用P BS 临时配好总量，其中 PI 50ug/ml、RNase A 100ug/mL、Trit on X-100 0.2% ） 4 C避光染色30分钟】 5、流式分析以标准程序用流式细胞仪检测，一般计数2-3万个细胞，结
果用细胞周期拟和软件ModFit分析。分析时，使用FL2-W和FL2-A显示，去除联体细胞。
高中生物必修二有丝分裂_减数分裂详尽分析
有丝分裂和减数分裂 有丝分裂 （一）过程 ①着丝点分裂，后期：点裂数加均两极。末期：膜仁重现失两体。 一、减数分裂
（一）相关概念 ①. 同源染色体：两个形状、大小一般都相同，一个来自 父方，一个来自母方，在减数分裂中要配对的染色体。1和 2或3和4 都是一对同源染色体（数目：同源染色体的对数 = 体细胞染色体数减半） ②.联会：同源染色体两两配对的行为。如图 ③.四分体：含有四个姐妹染色单体的配对的一对同源染色 体。1和2或3和4各组成一个四分体 （一个四分体中有两个着丝点、两条染色体、四个DNA分子，四条染色单体）（数目：四分体数= 同源染色体对数= 体细胞染色体数减半） ④.非姐妹染色单体：不是连在同一个着丝点上的染色单体 （二）减数分裂的过程（精子形成过程为例） 同源染色体分 离向细胞两 极，非同源染 着丝点分裂， 染色体一分为 （三）、精子和卵细胞形成的区别
第一次分裂第二次分裂 1个极体 2个极体 滋长（2N）（N） 3个极体 1个卵原细胞 1个初级卵母细胞 1个极体（N）（2N）复制（2N） 1个次级母细胞 （N）1个卵细胞（N） 精原复制初级四分体（交叉互换）次级单体分开精变形精 细胞精母分离（自由组合）精母细胞子 染色体 2N 2N N 2N N N DNA 2C 4C 4C 2C 2C C C
三、DNA 和染色体的数目变化曲线图 1、减数分裂DNA 和染色体的数目变化曲线图 母细胞 母细胞 母细胞 母细胞 减数分裂过程中DNA 的复制发生在间期，此时DNA 数目加倍但是染色体数目不变。染色体和DNA 数目减半发生在减数第一次分裂．．．．．．．，原因是同源染色体分离并进入不．．．．．．．．．．．同的子细胞．．．．．。所以减数第二次分裂过程中无同源染色体．．．．．． 。 2、有丝分裂中DNA 和染色体的数目变化曲线图 有丝分裂过程中DNA 的复制发生在间期，此时DNA 数目加倍但是染色体数目不变。在后期时由于着丝点分裂染色单体分开，此时染色体数目加倍，但是DNA 数目不变。染色体和DNA 数目减半发生在末期．．，原因是染色体分离并进入不同的．．．．．．．．．．．子细胞．．．。有丝分裂过程中始终有同源染色体．．．．．存在．． 。 四、 有丝分裂和减数分裂的比较
PI染色检测细胞周期实验步骤
protocol：PI染色检测细胞周期 1、收集细胞：胰酶（含EDTA）消化收集对数生长期细胞（加热处理后损失多的组宜多收集细胞保证细胞有0.5-2×10*6个），吸取旧培养基到一个新离心管里；少量常温PBS（根据培养皿大小决定量，PBS洗可以保证消化效率）洗2次，清洗的PBS也要收集到上述离心管内【检测凋亡才需收集旧培养基及清洗的PBS】；然后胰酶消化（注意一定要消化完全，显微镜下观察细胞呈单个，而不是成片脱落）后利用旧培养基中和胰酶；离心(1000r/300g5min)收集细胞沉淀。 2、用预冷的PBS清洗细胞两次。 3、固定细胞：用0.5ml预冷的PBS重悬细胞沉淀，使细胞充分悬浮成单细胞，再将重悬细胞加入1.2ml预冷的99.7%无水乙醇(乙醇终浓度70%)，吹打混匀以免细胞团聚，4℃固定2H至过夜。 4、细胞染色：离心（1000r/300g5min）收集固定的细胞，以1.8 mL的PBS洗细胞一次，离心(第一次实验时用7000rpm才把细胞离心下来，但最后流式结果显示细胞没有碎)再次获取细胞沉淀后加入1 00μlRNaseA于37℃水浴30min，最后加入400μlPI避光染色30 min（常温或4℃均可） 【有的试剂盒说明是：每个样本加入500uL染色剂（据样本数，用P BS临时配好总量，其中PI 50ug/ml、RNase A 100ug/mL、Triton X-100 0.2%）4℃避光染色30分钟】 5、流式分析
以标准程序用流式细胞仪检测，一般计数2-3万个细胞，结果用细胞周期拟和软件ModFit分析。分析时，使用FL2-w和FL2-A显示，去除联体细胞。
细胞生物学细胞核思考题
一、最佳选择题(每题2分) 1．关于核被膜下列哪项叙述是错误的。 A．由两层单位膜组成 B．有核孔 C．有核孔复合体 D．外膜附着核蛋白体 E．是封闭的膜结构 2．核膜的特殊作用是。 A．控制核-质之间的物质交换 B．与粗面内质网相通 C．把遗传物质DNA集中于细胞内特定区城 D．附着核糖体 E．控制RNA分子在核-质之间进出 3．下列配对哪项不正确。 A．线粒体-嵴B．纤毛-动力蛋白C．微丝-肌动蛋白D．细胞核一肌球蛋白E．液泡一液泡膜 4．下列哪项配对是错误的。 A．核膜-脂质双层B．核仁-mRNA C．核-DNA复制D．溶酶体-水解酶E．细胞骨架-微管 5．下列细胞器未发现于原核细胞。 A．质膜B．核糖体C核膜D．细胞壁E．液泡 6．下列哪一名词最具包容性。 A．核苷酸B．核苷C．含氮碱基D．嘌呤E．嘧啶 7，下列哪一种含氮碱基在DNA分子中是没有的。 A．胸腺嘧啶B．胞嘧啶C．鸟嘌呤D．尿嘧啶E．腺嘌呤 8．真核细胞的遗传物质DNA分布在。 A．细胞核B．细胞质C．细胞核和内质网D．细胞核和高尔基体 E．细胞核和线粒体 9．rRNA的主要合成部位是。 A．高尔基体B．核糖体C．粗面内质网D．核仁E．滑面内质网10．关于细胞核下列哪种叙述是错误的。 A．原核细胞与真核细胞主要区别是有无完整的核 B．核的主要功能是贮存遗传信息C．核的形态有时和细胞的形态相适应 D．每个真核细胞只能有一个核E．核仁存在于核内 11．电镜下见到的间期细胞核内侧高电子密度的物质是。 A．RNA B．组蛋白C．异染色质D．常染色质E．核仁 12．核质比反映了细胞核与细胞体积之间的关系，当核质比变大时，说明。 A．细胞质随细胞核的增加而增加B．细胞核不变而细胞质增加 C．细胞质不变而核增大D．细胞核与细胞质均不变E．细胞质不变而核减小13．rRNA是由。 A．线粒体DNA转录而来B．核仁组织者中的DNA转录而来 C．核小体DNA转录而来D．DNA复制出来E．以上都不是 14．细胞核内最重要的物质是。
高中生物有丝分裂
高中生物有丝分裂 2019年3月21日 （考试总分：108 分考试时长： 120 分钟） 一、填空题（本题共计 2 小题，共计 8 分） 1、（4分）某研究小组探究了不同浓度K2CrO4溶液处理对某植物根尖分生组织细胞有丝分裂的影响，实验结果如下表所示。 （1）制作根尖细胞有丝分裂装片的流程为：剪取根尖，放入盐酸和酒精的混合液中______8－12min；将根尖放入清水中漂洗10min；用______溶液对根尖染色15min，压片后制成装片。 （2）镜检时，每个根尖装片大约统计600个细胞，这样每种浓度K2CrO4溶液处理条件下应保证统计___ __个根尖装片，以降低实验误差。 （3）实验结果表明，K2CrO4溶液对有丝分裂、染色体畸变和产生微核的影响依次是_______（填“促进”、“抑制”或“无影响”）。 （4）K2CrO4处理使染色体发生断裂时，带有着丝粒（着丝点）的染色体在完成复制后，姐妹染色单体会在断口处黏合形成“染色体桥”，以下均为有丝分裂____________期图，能观察到“染色体桥”的图像是_____________。 断裂后，没有着丝粒的染色体片段不能被________牵引，在有丝分裂_______期核膜重建后，会被遗留在细胞核外，而成为微核。 2、（4分）（8 分）下图表示某植物根尖细胞的亚显微结构示意图。据图回答下列问题： （1）可以代表洋葱根尖分生区细胞的是图________，参与图中标号6所示结构的形成的重要细胞器是 _________。某一兴趣小组的同学在研究洋葱根尖细胞的分裂中，把该细胞器加以破坏，则细胞分裂后，得到的子细胞可能出现___________。 （2）细胞进行下列各种生命活动，正常情况下图甲细胞_____，图乙细胞____（填编号） ①不增殖②能继续增殖③细胞核DNA 只转录不复制 ④合成蛋白质⑤出现染色体结构⑥有mRNA 经核孔进入细胞质中 二、单选题（本题共计 20 小题，共计 100 分） 3、（5分）关于细胞生命历程的叙述，正确的是 A．细胞分化使不同细胞中蛋白质的种类有差异 B．原癌基因与抑癌基因在正常细胞中不表达 C．真核细胞不存在无丝分裂这一细胞增殖方式 D．胚胎细胞中不存在与细胞凋亡有关的基因 4、（5分）如图为某细胞（2n=4）有丝分裂的一个周期，下列对该图的叙述正确的是 A．a时期，染色体因复制而加倍 B．c时期是观察DNA的最佳时期 C．d时期细胞内染色体数为8 D．e时期最易发生基因突变 5、（5分）关于细胞的有丝分裂，下列叙述中错误的是 A．动物细胞有丝分裂过程中，其纺锤体的形成不同于高等植物细胞 B．人正常细胞有丝分裂时，细胞内最多含有92个DNA分子 C．植物细胞有丝分裂末期与高尔基体的活动密切相关 D．有丝分裂过程中，DNA和染色体数目的加倍不在同一时期 6、（5分）如图所示为部分人体细胞的生命历程。Ⅰ---Ⅳ代表细胞的生命现象，细胞1具有水分减少、代谢减慢的特征，细胞2可以无限增殖。下列叙述错误的是 A．Ⅰ--Ⅳ过程中，遗传物质没有发生改变 B．成体干细胞分化成浆细胞、肝细胞等不能体现细胞的全能性 C．细胞2与正常肝细胞相比，细胞膜表面糖蛋白含量减少 D．效应T细胞作用于细胞1和细胞2的过程属于细胞免疫
流式检测细胞周期要点
1.收集细胞； ～5000rpm离心5min，收集沉淀，重悬于200ul的PBS中，再次离心收集沉淀； ％冰冻乙醇（-20度保存）4度固定过夜or-20度固定1h； 4.离心收集沉淀，PBS洗一次（视沉淀量可忽略）； 5.沉淀重悬于200～500ul的PBS，加入Rnase A 37度水浴1h； 目纱布过滤至流式管，加入PI染色，4度避光30min-1h，上机器。 1、Q：要做胃粘膜组织的DNA含量及倍体检查，但取材后要等几个星期才会做流式细胞术检查，请问：胃组织要怎样保存好呢？用低温保存，还是用乙醇固定？或者固定后再低温下保存？ A：我做过乳腺细胞的DNA含量测定，取得组织以后，先处理成单细胞悬液，然后再加70%冰乙醇固定，要保证冰乙醇的最终浓度为50%，这样固定的细胞悬液可以至少保存12小时，最多可保存一个月，上机检测前再加PI综合染液。我就是这样做的，保存了将近三个星期，结果还可以，变异系数为5%. 2、实验中想用PI分析细胞周期及凋亡率，请教几个问题： Q：（1）所用的RNAs酶用什么配制呢？用PBS配吗？ A：RNaseA用PBS配制没有问题，但是注意要沸水浴去除DNase的活性。 Q：（2）测细胞周期和凋亡率时都要用RNAs酶，可以一起检测吗？ A：用流式细胞仪测定时细胞周期和凋亡率是同时测定的，不用担心。 Q：（3）Triton－x－100是固定剂吧，用了70％的冷乙醇（是4℃吗？），是不是就不用Triton－x－100固定了？ A：Triton X-100是起透化作用的，不是固定剂，可以用75％的乙醇于-20度固定。 Q：（4）还要设什么内参标准（5％鸡红细胞）吗？
高中生物专题练习：细胞的有丝分裂(挑战)(教师版)
高中生物专题练习：细胞的有丝分裂（挑战） 一、单选题 1．洋葱根尖和小鼠骨髓细胞都能用于观察细胞有丝分裂,下列有关叙述正确的是（）A．都需要用盐酸溶液使细胞相互分离 B．都需要用低倍镜找到分裂细胞再换高倍镜观察 C．在有丝分裂中期都能观察到染色体数目加倍 D．在有丝分裂末期都能观察到细胞板 【答案】B 【解析】质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精混合后作为解离液只能用于植物细胞的相互分离；动物细胞之间的相互分离需用胰蛋白酶处理,A错误；使用显微镜时,一般先在低倍镜下找到物像,再换用高倍镜观察,B正确；着丝点断裂,姐妹染色单体分开,染色体数目加倍发生在有丝分裂的后期,C错误；细胞板只会出现在植物细胞的有丝分裂末期,D错误. 2．下列有关细胞增殖的叙述,正确的是（） A．根尖分生区处于分裂期的细胞数目较少,原因是大多数细胞没有进入细胞周期 B．小鼠细胞经减数分裂产生卵细胞的过程中,一个细胞中X染色体的数目最多为4条 C．蛙红细胞的无丝分裂中有染色体和纺锤体的出现 D．人皮肤生发层细胞中,中心粒在间期倍增,染色体在后期倍增 【答案】D 【解析】根尖分生区处于分裂期的细胞数目较少,是由于分裂间期时间长,大多数细胞处于分裂间期,A错误；卵原细胞减数第一次分裂过程中细胞内含两条X染色体,减数第二次分裂过程中含1条或2条X染色体,所以小鼠细胞经减数分裂产生卵细胞的过程中,一个细胞中X染色体的数目最多为2条,B错误；蛙红细胞的无丝分裂中没有染色体和纺锤体的出现,C错误；人皮肤生发层细胞中,中心粒在间期倍增,染色体在后期由于着丝点的分裂而倍增,D正确. 3．用观察活体细胞的显微镜,对分裂期细胞进行一定的处理,可以观察到染色体的动态过程.下列有关观察活体羊胚胎细胞有丝分裂和观察洋葱根尖细胞有丝分裂的永久装片的实验,叙述错误的是（） A．羊胚胎细胞S期进行DNA复制和某些蛋白质的合成 B．不能观察到羊胚胎细胞后期分离的染色体以相同的速率移向两极 C．永久装片观察时需要用到细准焦螺旋和光把视野物像调整清晰
观察洋葱根尖有丝分裂实验
实验十一：观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 一、实验目的： 1、制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片。 2、观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期，比较细胞周期不同时期的时间长短。 3、绘制植物细胞有丝分裂简图。 二、实验原理： 1、高等植物的分生组织有丝分裂较旺盛。 2、有丝分裂各个时期细胞内染色体的形态和行为变化不同，可用高倍显微镜根据各个时期内染色体的变化情况，识别该细胞处于那个时期。 3、细胞核内的染色体易被碱性染料（如龙胆紫）染成深色。 三、程序设计思路 1、洋葱根尖的培养在上实验课之前的3-4天，取洋葱一个，放在广口瓶上。瓶内装满清水，让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方培养。待根长约5cm，取生长健壮的根尖制成临时装片观察。 2、装片的制作 制作流程为：解离—漂洗—染色—制片 解离上午10时至下午2时，剪去洋葱根尖2-3mm，立即放入盛入有盐酸和酒精混合液（1：1）的玻璃皿中，在温室下解离。 3-5min 用药液使组织中的细胞相互分离开来 漂洗待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛入清水的玻璃皿中漂洗。约10min 洗去药液，防止解离过度 染色把根尖放进盛有质量浓度为ml或ml的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）的玻璃皿中染色。3-5min 染料能使染色体着色。 制片用镊子将这段根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖把根尖能碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指轻轻的按压载玻片。使细胞分散开来，有利于观察 3、观察 a低倍镜观察：找到分生区细胞，其特点是细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂b高倍镜观察：在低倍镜观察的基础上换高倍镜，直到看清细胞的物象为止 c仔细观察：先到中期，再找其余各期，注意染色体的特点 d移动观察：慢慢移动装片，完整地观察各个时期（如果自制装片效果不太理想，可以观察洋葱根尖固定装片） 4、绘图 5、记录 四、分析 1、取材分析 （1）取材及用具：a，取材：洋葱（可用葱.蒜代替），质量分数为15%的盐酸，体积分数为95%的酒精，质量浓度为ml或ml的龙胆紫溶液（将龙胆紫溶解在质量分数2%的醋酸溶液中配制而成）或醋酸洋红液，洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片。 b、实验用具：显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，剪子，镊子，滴管。 c、取材分析：取材应为洋葱根尖分生区细胞根尖2-3mm，而且洋葱的根必须有活性。 (2)药品用法用量分析：解离液应为质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精按照1:1比例混合，而且解离时间要控制在3min-5min （3）过程分析：实验核心内容必须严格按照解离——漂洗——染色——制片四步进行
细胞有丝分裂练习题
细胞有丝分裂练习题 1. 图1表示某哺乳动物的一个器官中一些处于分裂状态的细胞图像，图2表示相关过程中 细胞核内的DNA含量变化曲线示意图，有关叙述中错误的是 A．图1中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ细胞分别对应图2中的i、d、m区段 B．一个细胞经过图2曲线所示过程，最多可产生8个子细胞 C．图1和图2中，只有Ⅰ细胞和g、i对应的区段可能发生基因重组 D．图1中有4个染色体组的是Ⅱ和Ⅲ，图2中a、f对应的区段可能发生基因突变 2.（2010，汕头）下列染色体的叙述正确的是（） ①染色体的元素组成与核糖体基本是基本一样的 ②基因全部位于染色体上 ③用光学显微镜观察洋葱根尖分生区细胞都可以看到染色体 ④减数分裂过程中初级性母细胞与次级性母细胞中都存在染色体 ⑤大肠杆菌细胞有丝分裂中期可以用电子显微镜观察到染色体 ⑥人的骨髓细胞在进行增殖时，也会有染色体的出现 A．①③⑥ B ③④⑤ C ①④⑥ D ②⑤⑥ 3. 下图为某一动物细胞分裂图像和相关图形,下列叙述错误 ．．的是 A．图A、D、E对应图F中BC阶段，图B、C对应图F中DE阶段 B．图C所示细胞的名称为次级精母细胞 C．具有两个染色体组的细胞为图A、C、D、E D．动物睾丸中可以同时含有上述A-E所示时期的细胞 4. （2013江西）一般细胞分裂情况下,与其他过程不处同一时期的过程是（） A.细胞体积增大 B.中心体的倍增 以高度螺旋化状态存在 D．DNA中A和T碱基之间氢键的断裂 5.科学家用含15N的硝酸盐作为标记物浸泡蚕豆幼苗，并追踪蚕豆根尖细胞的分裂情况，得到蚕豆根尖分生区细胞连续分裂的数据如下，则下列叙述中正确的是（）
A．蚕豆根尖细胞完成一次分裂所需时间为2h B．15N会出现在细胞中的DNA和某些蛋白质中 C．蚕豆根尖细胞的中出现赤道板的时期有0～2h、～、～ D．核糖体、高尔基体、线粒体、叶绿体在蚕豆根尖细胞分裂过程中活动旺盛 6.下图1、图2分别表示某种生物细胞有丝分裂过程中某一时期的模式图,图3表示有丝分 裂中不同时期每条染色体上DNA分子数变化,图4表示有丝分裂中不同时期染色体和DNA的数量关系.下列有关叙述不正确的是? （） A．图1所示细胞中共有4条染色体,8个DNA分子；图2所示细胞中共有0条姐妹染色单体B．处于图3中B→C段的可以是图1所示细胞；完成图3中C→D段变化的细胞分裂时期是后期 C．有丝分裂过程中不会出现?图4中d所示的情况 D．图4中a可对应图3中的B→C段；图4中c对应图3中的A→B段 7.根据每个细胞中核DNA相对含量的不同，将某高等哺乳动物辜丸中连续增殖的精原细胞归为A．B．C三组，每组细胞数目如图l所示；将辜丸中参与配子形成过程的细胞归为D，E，F三组，每组细胞数目如图2所示；根据细胞中每条染色体上DNA含量在细胞周期中的变化绘制曲线，如图3所示。下列叙述中错误的是 A．图1中的B组细胞位于图3中的甲～乙段，细胞中发生的主要变化是DNA的复制和有关蛋白质的合成 B．图l中C组的细胞不都位于图3的乙～丙段 C．图2中F组细胞变成E组细胞的过程发生在图3的丙～丁段 D．图2中D组细胞表示精细胞，E组细胞可表示精原细胞，也可表示次级精母细胞
细胞周期同步化
细胞周期同步化 在细胞培养过程中，细胞多处于不同的细胞周期时相中，其中有少数细胞在进行有丝分裂活动，其余细胞分别处于G1、S和G2各期。不同时相的细胞对药物干预存在不同反应，会影响实验的重复性，因此，需要获得周期一致性的细胞。利用细胞同步化技术可使细胞大量的处于同一细胞时期，并可获得该时期大量的物质，如细胞中期时的染色体。细胞周期同步化(synchronization)是指为了研究某一时相细胞的代谢、增殖、基因表达或凋亡，借助某种自然或人为的实验手段,使细胞群体中处于细胞周期不同时相的细胞停留在同一时相( 除了G0期的细胞)的现象。细胞同步化本质上包括用一定的方法获得一定数量的同步化细胞群和使细胞进入同步化生长的两层含义。 DNA 合成抑制法是通过抑制DNA合成将细胞同步于同一时期的方法。高浓度TdR(胸腺嘧啶核苷)双阻断法是目前常用的抑制DNA 合成的同步化方法。它可逆地抑制DNA 合成，而不影响其他时期细胞的转运，最终可将细胞群阻断在S 期或G1 /S 交界处。其原理是: Td Ｒ是细胞DNA 合成不可缺少的前体，但向培养基中加入过量TdＲ，可形成过量的三磷酸腺苷，后者能反馈抑制其他核苷酸的磷酸化，从而抑制DNA 合成。它将细胞同步于G1 /S期交界处，同步化程度高，适用于任何培养体系，可将几乎所有的细胞同步化，但是容易产生非均衡生长，个别细胞体积增大。TdＲ双阻断法因为简单易行且可逆，在肿瘤药理方面对细胞周期同步化的实验中得到了广泛的应用。羟基脲、5-氟脱氧尿嘧啶、阿糖胞苷、氨甲蝶呤和高浓度ADR、GDR也属于DNA合成抑制剂，它们与TdR作用相似，均可通过抑制DNA合成达到同步化的目的。 中期阻断法是利用破坏微管的药物将细胞阻断在M期从而得到同一时期细胞的方法，常用的药物有秋水仙素等。秋水仙素通过抑制微管的聚合，进而抑制有丝分裂装置的形成，将细胞阻断于有丝分裂中期然后再释放使细胞达到同步化。中期阻断法非平衡生长问题不明显，但可逆性比较差，当阻断时间过长时，许多细胞产生异常分裂。过去研究中也发现，同步后的细胞的生长能力明显不如撤去阻断剂后得到的S期细胞旺盛。秋水仙胺、Nocodazole也是目前常用的中期阻断剂。 经过同步化之后的细胞可以通过流式细胞术对其周期进行分析。将细胞用PI（碘化丙啶）染液进行染色，使用流式细胞仪对细胞内DNA的相对含量进行测定，可分析细胞周期各时相的百分比。由于细胞的DNA含量在不同时期有显著的差异，因此可以将细胞分成
高中生物有丝分裂和减数分裂资料
有丝分裂和减数分裂 有丝分裂： （一）过程 时期 间期 :①变化：完成DNA的复制和有关蛋白质的合成 ②结果：每个染色体都形成两个姐妹染色单体，呈染色质形态 前期 :①出现染色体 ②核膜、核仁消失 ③出现纺锤体 中期: ①所有染色体的着丝点都排列在赤道板上。 后期 :①着丝点分裂，姐妹染色单体分开，成为两个子染色体。并分别向两极移动 末期:①染色体变成染色质，②核膜、核仁重现，③纺锤体消失，④在赤道板位置出现细胞板，并扩展成分隔两个子细胞的细胞壁 前期：膜仁消失显两体。中期：形定数晰赤道齐。后期：点裂数加均两极。末期：膜仁重现失两体。 （二）、动、植物有丝分裂的比较 相同点 : 分裂过程基本相同，染色体变化规律相同 不同点: 前期由细胞两极发出的纺锤丝形成纺锤体(植物） 由两组中心体发出星射线形成纺锤体（动物）
末期: 细胞中部形成细胞板→细胞壁，将细胞均分为两个子细胞（植物）细胞膜从细胞的中央_凹陷，将细胞缢裂成两部分（动物） 减数分裂： （一）相关概念 ①. 同源染色体：两个形状、大小一般都相同，一个来自父方，一个来自母方，在减数分裂中要配对的染色体。1和2或3和4 都是一对同源染色体（数目：同源染色体的对数= 体细胞染色体数减半） ②.联会：同源染色体两两配对的行为。 ③.四分体：含有四个姐妹染色单体的配对的一对同源染色体。1和2或3和4各组成一个四分体（一个四分体中有两个着丝点、两条染色体、四个DNA分子，四条染色单体）（数目：四分体数= 同源染色体对数= 体细胞染色体数减半） ④.非姐妹染色单体：不是连在同一个着丝点上的染色单体 （二）减数分裂的过程 间期：精原细胞体积增大，染色体复制，初级精母细胞形成 减数第一次分裂 前期同源染色体联会，四分体出现，非姐妹染色单体交叉互换初级精母细胞 中期同源染色体排列在赤道板上初级精母细胞 后期同源染色体分离向细胞两极，非同源染色体自由组合初级精母细胞 末期形成两个次级精母细胞，染色体数目减半次级精母细胞
细胞有丝分裂过程
细胞的有丝分裂 一、真核细胞的分裂方式 真核生物的分裂方式主要有有丝分裂和无丝分裂两种，其中有丝分裂是真核生物增值体细胞的主要方式。 二、细胞周期 指连续分裂的细胞从一次分裂结束到下一次分裂结束所经历的整个过程。每一个细胞周期包括一个分裂期和一个分裂间期。细胞的分裂过程包括：细胞核的分裂和细胞质的分裂（胞质分裂）。 三、有丝分裂 1.过程（以动植物细胞为例） （1）细胞核的分裂 分裂间期：（复制合成非等闲）可见核膜核仁，染色体的复制（DNA复制、蛋白质合成）。 G1期：合成DNA所需蛋白质的合成和核糖体的增生 S期：DNA的复制 G2期：有丝分裂所必须的一些蛋白质的合成 前期：（膜仁消失现两体）核膜、核仁消失，染色体出现，散乱排布纺锤体中央，纺锤体出现 A.染色质经螺旋化形成染色体 B.植物细胞两极发出纺锤丝形成纺锤体 C.核膜解题，形成分散的小泡 中期：（形定数晰赤道齐）：染色体的着丝点整齐的排在赤道板平面上，染色体形态比较稳定，数目比较清晰，便于观察。 A.着丝粒整齐的排列在细胞中央的一个平面上 B.染色体缩短到最小程度，便于观察和研究 后期：（点裂数增均两极）着丝点分裂，姐妹染色单体分开，成为两条子染色体，由纺锤丝牵引着分别向细胞的两极移动，染色体数目暂时加倍。 A.染色体的着丝粒分裂,染色单体分开形成两条独立的染色体 B.染色体数目加倍，DNA数目不变 C.两套相同的染色体被拉向细胞两极 末期：（两体消失膜仁现）染色体、纺锤体消失，核膜、核仁出现，染色体变成染色质。 A.染色体伸展重新形成染色质状态 B.核膜重新形成 C.核内染色体数目与分裂前相同 注意：有丝分裂中各时期始终有同源染色体，但无同源染色体联会和分离。 (2)细胞质的分裂 时间：有丝分裂后期或末期
细胞增殖细胞周期的测定方法
苑中2011 届高三生物二轮专题复习学案 1 “细胞增殖”相关知识的建构（2 课时）一、减数分裂与基因的分离、自由 组合定律请画出能体现基因自由组合现象的细胞分裂图像 例1、（08 江苏）某种昆虫长翅（A）对残翅（a）为显性，直翅（B）对弯翅（b）为显性，有刺刚毛（D）对无刺刚毛（d）为显性，控制这3 对性状的基因均位于常染色体上。现有这种昆虫一个体基因型如下图所示，请回答下列问题。（1）长翅与残翅、直翅与弯翅两对相对性状的遗传是否遵 循基因自由组合定律，并说明理由。。（2）该昆虫一个初级精母细胞产生的精细胞的基因型为____________。（3）该昆虫细胞有丝分裂后期，移向细胞同一极的基因有。（4）该昆虫细胞分裂中复制形成的两个D 基因发生分离的时期 有______ 。（5）为验证基因自由组合定律，可用来与该昆虫进行交配的异性个体的基因型分别是 _______________________________________________ ____________________________ 。二、细胞分裂与可遗传变异请画出可遗传变异种类的概念图苑中2011 届高三生物二轮专题复习学案 2 1、基因重组（非同源染色体的自由组合、交叉互换）例2、（07 广东）在减数分裂中每对同源染色体配对形成四分体，四分体中的非姐妹染色单体 之间经常发生交换。实验表明，交换也可以发生在某些生物体的有丝分裂中，这种现
象称为有丝分裂交换。图39—1 是某高等动物一个表皮细胞发生有丝分裂交换的示意图，其中D 和d，E 和e，F 和 f 表示某对同源染色体上的三对等位基因。图39—1 交换 过程示意图（左：交换前的染色体；右：交换后的染色体）（1）请问该细胞在发生有丝分裂交换后，产生几种基因型 的子代表皮细胞？并分别写出基因型 _______________________________________________ __________________。（2）如果不考虑该生物产生配子时发生的交换，那么该生物产生的配子有几种基因型？并 写出基因型 _______________________________________________ _____________。（3）如果图39—1 是该生物的精原细胞在产生精细胞时发生减数分裂交换后的结果，请问由它产 生的配子类型有几种？并写出基因型 ______________________________。（4）如果细胞在减数分裂和有丝分裂中都发生交换，你认为哪一种分裂方式对于遗传多样性的贡献更大？为什么？ _______________________________________________。 2、染色体变异（染色体结构变异、染色体数目变异）例 3、（10 苏州高二期末）右下图表示某生物体的细胞进行减数 分裂过程中，其中联会的两对染色体之间出现异常的
高中生物 有丝分裂基本过程梳理
有丝分裂基本过程梳理 1．细胞周期：是指连续分裂的细胞从上一次分裂结束到下一次分裂结束所经历的整个过程。对于细胞周期的概念应注意两点：①连续分裂的细胞；②具有分裂能力的细胞。故减数分裂不具有周期性。 例1、下图表示细胞有丝分裂一个细胞周期所用的时间。下列说法正确的是（） ①甲→乙的过程表示分裂期②乙→甲的过程表示分裂间期 ③一个细胞周期是指甲→甲的全过程 ④一个细胞周期是指乙→乙的全过程 A．①②③B．①②④C．③D．④ 解析：细胞周期的时间是从上一次分裂结束到下一次分裂结束，所以④正确；细胞周期包括细胞间期和分裂期，细胞间期所占的时间长，所以①和②正确。 答案：B 2．分裂间期：是有丝分裂的准备阶段，此时细胞内发生着活跃的代谢变化，其中主要的变化是完成DNA分子的复制和有关蛋白质的合成。分裂间期可以分为G1期（合成DNA所需蛋白质的合成和核糖体的增生）、S期（完成DNA分子的复制）和G2期（有丝分裂所必需的一些蛋白质的合成）。 分裂间期最主要的物质变化是将细胞核中携带有遗传物质的染 色质进行复制，染色质复制的结果是DNA分子数加倍，形成姐妹染 色单体，染色体数目不变（如右图所示）。 例2、细胞增殖过程中DNA含量会发生变化。通过测定一定数量细胞的DNA数量，可分析其细胞分为三组，每组的细胞数如右图。从图中所示结 果分析其细胞周期。不正确的是（） A．乙组细胞正在进行DNA复制 B．细胞分裂间期的时间比分裂期长 C．丙组中只有部分细胞的染色体数目加倍 D．将周期阻断在DNA前会导致甲组细胞数减少 解析：由图可知，乙组细胞正在进行DNA复制；丙组细胞内DNA分子数加倍，处于细胞分裂前、中、后三个时期，后期的细胞染色体数目才加倍；将周期阻断在DNA复制前会导致乙组细胞数减少，故D不正确。 答案：D 3．分裂期：分裂期又可以分为4个时期，即前期、中期、后期和末期。事实上，细胞分裂是一个连续的过程，这几个时期之间并没有明显的界限。 （1）前期：主要变化特点是膜、仁消失显两体（核膜逐渐解体， 形成分散的小泡，核仁逐渐消失；显现纺锤体和染色体）。其中最主要 的变化是染色体的出现。如右图所示。动植物细胞前期纺锤体形成方 式不同（详见例6解析）。 例3、下列哪一项叙述以表明动物细胞正在进行有丝分裂（）
有丝分裂实验过程
实验原理 在植物体中，有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞。高等植物细胞有丝分裂的过程，分为分裂问期和有丝分裂期的前期、中期、后期、末期。可以用高倍镜观察植物细胞有丝分裂的过程，根据各个时期细胞内染色体或染色质）的变化情况，识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。细胞核内的染色体容易被碱性染料（如龙胆紫、醋酸洋红）溶液着色。 目的要求 1．观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。 2．学会制作洋葱根尖有丝分裂装片的生物技术。 3．学会使用高倍镜和绘生物图的方法。 材料 洋葱（可以用蒜、葱代替）。 用具 显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿3个，、剪刀，镊子，滴管。 药品 质量分数为15％的盐酸，酒精的体积分数为95％的溶液，龙胆紫的质量浓度为0．01 g ／mL的或0．02 g／mL的溶液（或醋酸洋红液）。 方法步骤 一、洋葱根尖的培养 在上实验课之前的3d～4d，取洋葱一个，放在广口瓶上。瓶内装满清水，让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方，注意经常换水，使洋葱的底部总是接触到水。待根长5 cm时，可取生长健壮的根尖制片观察。 二、装片的制作 1．解离下午2时是洋葱有丝分裂的高峰期，可在此时剪取洋葱的根尖 2 mm～ 3 mm，立即放入盛有氯化氢的质量分数为匕％的溶液和酒精的体积分数为95％溶液的混合液（1：1）的玻璃皿中，在室温下解离3 min～5 min后取出根尖。 2．漂洗待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min. 3．染色把洋葱根尖放进盛有龙胆紫的质量浓度为0．01g／mL 或0．02 g/mL的溶液（或醋酸洋红液）的玻璃皿中，染色3 min～5 min。 4．制片用镊子将这段洋葱根采取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并且用镊子尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指轻轻地压盖玻片，这样可以使细胞分散开来。 三、洋葱根尖细胞有丝分裂的观察 1．低倍镜观察 把制作成的洋葱根尖装片先放在低倍镜下观察，慢慢移动装片，要求找到分生巨细胞，它的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。 2．高倍镜观察 找到分生区细胞后，把低倍镜移走，换上高倍镜，用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，直到看清细胞物像为止。 3．仔细观察，可先找出处于细胞分裂期中期的细胞，然后再找出前期、后期、末期的细胞。注意观察各个时期细胞内染色体变化的特点。 4．在一个视野里，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。 5．如果自制装片效果不太理想，可以观察教师演示的洋葱根尖细胞有丝分裂的固定装片。
有丝分裂过程中的染色体DNA数量变化分析
有丝分裂过程中的染色体、DNA数量变化例析有丝分裂的结果和意义是子代细胞内的遗传物质与亲代细胞是一致的，保持了亲子代细胞遗传的稳定性。那么为什么会出现这种结果？下面我们通过分析有丝分裂过程中的染色体、DNA数量变化来进行解释。 一、染色体、姐妹染色单体、着丝粒、DNA的关系图 下图中A是通常所说的一个染色体（质），B是经过复制的一个染色体，包含两个姐妹染色单体，两个姐妹染色单体是完全相同的，其含有的物质也与A完全相同，它们通过一个共同的着丝粒相连。B的着丝粒分裂后，就变成了两个完全相同的染色体（C）。也就是说，染色体复制后至着丝粒分裂之前，染色体的个数不变，但包含有染色单体，也仅在这一段时间内有染色单体。 A的一个染色体上有1个DNA分子，而B的一条染色体中含2个DNA分子，分别位于2个染色单体上。C中每个染色体只含一个DNA分子。 细胞中染色体上的DNA分子数的计算：有染色单体时，DNA分子数＝染色单体数；没有染色单体时，DNA分子数＝染色体数。 特别提醒： （1）染色体数目的计算，以着丝粒为依据（人为规定的，有几个着丝点就是几个染色体）。 （2）一条染色体上DNA的数目在复制前后不同：当有染色单体时——染色体∶染色单体∶DNA=1∶2∶2；没有染色单体时——染色体∶染色单体∶DNA=1∶0∶1。 例1、细胞周期的各阶段中，一个细胞中的染色体和DNA分子数量比不可能是下列中的（） 解析：本题以细胞分裂时染色体和DNA数目变化为核心考点，综合考查识图、分析判断能力。在细胞分裂中，染色体和DNA数目比有两种情况：在染色体中无单体时，染色体数目和DNA分子数目比为1∶1；在染色体中有染色单体时，因为每一条染色单体上有一个DNA分子，即一个染色体上有2个DNA。 答案：A
流式检测细胞周期和凋亡实验步骤
流式细胞技术检测细胞周期分布 1) 已转染miRNA mimics的细胞培养达到85％融合时，用胰酶消化细胞。1000 rpm，离心5min，收集细胞沉淀； 2) 已消毒的PBS重悬细胞，1000 rpm/min，离心5 min，收集细胞。重复此步骤2次，以除去胰酶； 3) 加入预冷的70%乙醇固定细胞过夜； 4) 第二天1000rpm，离心5 min，收集细胞沉淀，PBS重悬两次，以除去乙醇； 5) 离心后加入500ul PBS重悬细胞，加入碘化丙锭(PI)染色液(含50mg/L PI，1g/L Triton X-100，100g/L RNase)混匀，4℃避光孵育30min。 6）流式细胞仪FACStar (美国BD公司) 检测。接收的信号经Cellquest软件处理，对检测细胞的荧光强度进行分析。实验重复3次。 2.11流式细胞技术检测细胞凋亡水平 1) 已转染BART6-3p mimics的细胞培养达到85％融合时，将上清培养液收集至离心管内；常常 2）PBS清洗贴壁细胞3次，用胰酶消化细胞（注意：消化时不可过度），收集于第一步的离心管内； 3) 1000 rpm离心5min，弃上清收集细胞，PBS轻轻重悬后，加入195 ulAnnexin V-FITC结合液，吹打混匀，重悬细胞，加入5ul Annexin V，轻轻混匀。避光室温孵育15min； 4) 加入10 ul PI染色液，轻轻混匀，避光孵育； 空白：Annexin V—FITC结合液200ul 双染：185ul结合液+5 ulAnnexin V—FITC+10ul PI 单染：195ul结合液+5ul Annexin V—FITC 190ul结合液+10PI 5) 进行流式细胞仪检测，Annexin V-FITC为绿色荧光，PI为红色荧光。