益母草颗粒中盐酸水苏碱的含量测定
益 母 草
附件3.4：中药材注释模板-益母草 益母草 Yimucao LEONURI HERBA 别名：茺蔚、益母、益母蒿、坤草、红花艾、益母艾、月母草。 益母草为常用中药，具有活血调经，利尿消肿之功能。始载于《神农本草经》，列为上品。《本草纲目》名茺蔚，列入草部隰草类。陶宏景谓：“今处处有，叶如荏，方茎，子形细长，三棱。”。经核对《植物名实图考》所载茺蔚及附图，与现代所用的益母草相符〔1〕。 全国大部分省市均有分布，以湖北、河南、安徽、江西、湖南、广西为主产区，以野生为主，少量种植，生长于荒野山地、田埂路边、河边等地。 本品先后收载于《中国药典》1963年版、1977年版、1985年版、1990年版、1995年版、2000年版、2005年版。2005年版中国药典中益母草药材中收录了鲜益母草和干益母草，鲜益母草主要作为制剂的原料。干益母草的采集时间与品质有较大关系，应为夏季茎叶茂盛、花未开或初开时采割，经调查目前市场上存在较多的童子益母草，主要作制剂原料，一般为春季幼苗期采割，其有效成分含量比较高，有部分省份的炮制规范中已收载童子益母草，如上海市中药饮片炮制规范，因与习惯使用规格不同，童子益母草是否收入药典有待后续研究。【来源】拉丁学名：Leonurus japonicus Houtt. 原植物形态：一年或二年生草本，高30～120cm。春季幼苗期叶基生，拔节后茎直立，方形，单一或分枝，被微毛。叶对生，基生叶具叶柄，叶片略呈圆形，叶缘5～9浅裂，每裂片具2～3钝齿，基部心形；茎中部的叶具短柄，3深裂，中央裂片常3裂，两侧裂片常再1～裂，小裂片披针形或近线形，先端渐尖，边缘疏生锯齿或近全缘；顶端的叶不分裂，线形，近无柄。花多数，生于叶腋，呈轮伞状，花冠唇形，淡紫色或淡红色，长9～12mm，上下唇近等长，花冠外被长绒毛；雄蕊4枚，2强，子房4裂，柱头2裂。小坚果4枚，三棱状，褐色。花期6～9月，果期9～10月。 【性状】传统经验认为，本品以茎细、质嫩、叶多、色绿者为佳；质老、枯黄、无叶者不能入药。
Q_HGDY 006-2017饲料原料液态益母草粗体物
Q/HGDY 河南官渡兽药制造有限公司企业标准 皮 Q/HGDY006-2017天然植物饲料原料液态益母草粗提物 2017-07-16发布2017-07-22实施河南官渡兽药制造有限公司发布
Q/HGDY006-2017 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由河南官渡兽药制造有限公司提出并负责起草。 本标准主要起草人：韩红霞、董炎超、徐超军、高李强、张珍、陈晓丽。
天然植物饲料原料液态益母草粗提物 1范围 本标准规定了天然植物饲料原料液态益母草粗提物的要求、试验方法、检验规则、标签、包装、运输与贮存。 本标准适用于以天然植物饲料原料益母草经过水粗提、浓缩加工而成的天然植物饲料原料液态益母草粗提物。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备。 GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法。 GB10648饲料标签。 GB13078饲料卫生标准。 GB/T13079饲料中总砷的测定。 GB/T13080饲料中铅的测定原子吸收光谱法。 GB/T13091饲料中沙门氏菌的检测方法。 GB/T14699.1饲料采样。 GB/T18823饲料检测结果判定的允许误差。 GB/T20195动物饲料试样的制备。 JJF1070定量包装商品净含量计量检验规则。 中华人民共和国质量监督检验检疫总局令（2005年）第75号《定量包装商品计量监督管理办法》。 中华人民共和国农业部公告（2013）第1773号《天然植物饲料原料目录》及（2013）第2038号《天然植物饲料原料目录》修订列表。 3要求 3.1原料 应符合《天然植物饲料原料目录》的要求。 3.2感官 色泽均一的液体。 3.3pH值 应为4.0～7.0。 3.4理化、卫生指标 理化、卫生指标应符合表1的规定。 3.5净含量 符合标签标注，偏差符合《定量包装商品计量监督管理办法》之规定。
化学滴定法测定黄连素片有效成分盐酸小檗碱的含量
化学滴定法测定黄连素片有效成分盐酸小檗碱的含量 【摘要】黄连素片为众所周知的市售家庭必备药，其有效成分为盐酸小檗碱。作为启智创新夏令营的实验课题，笔者指导学生以化学滴定法对盐酸小檗碱含量进行测定。在巩固分析化学课堂和实验教学知识的同时将其与实际应用相结合，达到了学以致用的教学目的，提高了学生的学习兴趣。 【关键词】黄连素；盐酸小檗碱；化学滴定；实际应用 黄连为毛茛科黄连属植物黄连、三角叶黄连或云连的干燥根。黄连的有效成分是生物碱，目前已分离的主要生物碱有小檗碱、黄连碱等。其中小檗碱的含量最高，可达10%左右，以盐酸盐的状态存在于黄连中。盐酸小檗碱（分子式为C20H18ClNO4·2H2O，相对分子量Mr = 407.85）的分子结构如下图所示。 图1 盐酸小檗碱的结构式 盐酸小檗碱又称为盐酸黄连素，是一种常用的杀菌药物。主要用于治疗胃肠炎、细菌性痢疾等肠道感染，对眼结膜炎、化脓性中耳炎等也有疗效。此外它还有阻断α-受体、抗心律失常等作用。市售的黄连素片（糖衣片、胶囊）是家庭常备药物，其有效成分即为盐酸小檗碱，它在药品中的含量直接决定着厂家所生产黄连素片的药效高低。因此，测定黄连素片中盐酸小檗碱的含量具有重要的实际意义。 化学物质含量的测定属于分析化学领域的研究内容。分析化学是获得物质化学组成和结构信息的科学，它所解决的主要问题即为物质中含有哪些组分，各种组分的含量是多少以及这些组分是以怎样的状态构成物质。是化学研究中最基础，最根本的领域之一，也是化工、制药、轻化、材料、环境等专业的基础课之一。按照分析方法分类，分析化学可分为化学分析法和仪器分析法两大类，两者相互补充，而标准分析结果常通过化学分析法获得，化学法可以说是仪器法的基础。 化学滴定分析是基于化学反应的一类重要的化学分析法，由于方法成熟，操作简便，省时快速，测定结果准确度较高，是生产实践和科学实验中重要的例行测试手段，即使在仪器分析法快速发展的今天，化学滴定分析法仍然具有很高的实用价值。 盐酸小檗碱含量的测定方法现在主要有色谱法、分光光度法和化学滴定法。化学滴定法是主要测定方法之一。该方法利用了盐酸小檗碱能与重铬酸钾（K2Cr2O7）定量反应生成难溶化合物的性质，用过量K2Cr2O7与盐酸小檗碱进行充分反应，剩余的K2Cr2O7可利用其氧化性，使用间接碘量法，以硫代硫酸钠（Na2S2O3）标准溶液进行氧化还原滴定，从而求出盐酸小檗碱的含量。以上即为盐酸小檗碱化学滴定法的基本原理。此分析过程中，所需知识和实验均为分析化学课堂和实验教学中的重要内容和基础性操作；而该实验的实际意义有所延伸，与人们的日常生活产生了密切联系。本文即以盐酸小檗碱含量测定作为启智夏令营的创新课题，让学生将书本上的知识在实践中得到应用，从而激发学生对科学的兴趣。 1. 实验设计 1.1 实验目的 （1）查阅文献，了解盐酸小檗碱的测定方法 （2）复习硫代硫酸钠标准溶液的配制和保存方法；
盐酸水苏碱在中药生产过程中的含量变化及影响因素研究
盐酸水苏碱在中药生产过程中的含量变化及影响因素研究 【摘要】目的探讨盐酸水苏碱在中药生产过程中的含量变化及影响因素。方法建立盐酸水苏碱HPLC含量测定方法，考察提取、浓缩、干燥工艺中各影响因素对盐酸水苏碱保留率的影响，分析益母草药材储藏过程中的各主要影响因素。结果水提取工艺中提取时间、提取温度、提取次数、水用量对盐酸水苏碱的影响较小；浓缩过程中盐酸水苏碱有一定损失，但浓缩温度、浓缩时间、真空度并非主要影响因素；干燥过程中的温度、真空度、时间等参数对盐酸水苏碱的影响较小。在益母草储藏过程中，见光降解是盐酸水苏碱含量下降的主要原因。结论光对盐酸水苏碱的稳定性有重大影响。 【关键词】盐酸水苏碱益母草高效液相色谱见光降解 Abstract：ObjectiveTo explore the content change of stachydrine hydrochloride in Chinese medicine production process.MethodsAn HPLC method was established stachydrine hydrochloride to determine the content of retention rate of stachydrine hydrochloride was applied as the parameters to investigate the processes of extraction, concentration and drying and the main factors in the storage of herba leonuri was investigated by factorial analysis.ResultsThe influence of time, temperature, frequency, and water volume in extraction process to stachydrine hydrochloride was weak. There is a little loss of stachydrine hydrochloride in concentration process; the influence of temperature, time, and vacuum value to stachydrine hydrochloride was weak. Decompose by light was the most important factor to content decline of stachydrine hydrochloride in the storage of herba leonuri. ConclusionLight showed a marked influence on the stability of stachydrine hydrochloride. Key words：Stachydrine hydrochloride；Herba leonuri；HPLC；Decompose by light 益母草为唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt.的新鲜或干燥地上部分，主治月经不调、胎漏难产、行经腹痛及产后瘀阻等症，有“血家圣药”“经产良药”之称。近年来其逐步被应用于心脑血管疾病的防治，临床效果较好，疗效甚至超过复方丹参注射液［1］。现代药理研究表明［2］，益母草中的益母草碱、盐酸水苏碱等多种生物碱具有较强的兴奋子宫、抗血小板聚集、降低血液黏度、抑制血栓形成等作用。 据统计，药典及部颁标准中含益母草的多数中成药，其盐酸水苏碱的理论保留率［理论保留率（％）＝成品中待测成分的标示总量/处方中待测成分的药典规定最低总量×100%］均低于40％。在产后逐瘀胶囊及妇血安片的成品检验中同样发现，两者的盐酸水苏碱理论保留率均低于20％，部分批次甚至不合格。同时，在对益母草药材进行筛选的过程中发现，各产地的药材盐酸水苏碱含量差异较大，且同一产地新上市药材的含量明显高于去年上市的老药材。为了考察其原因，本研究探讨了中药生产中提取、浓缩、干燥工艺过程对盐酸水苏碱含量的影响，并对益母草药材的稳定性影响因素进行了初步研究。 1 仪器与试药
益母草
一提到益母草，就有一个不得不讲的感人故事。相传有一个叫茺蔚的小孩，他的母亲在生他时得了“月子病”且多年不愈，几年以后身体越来越虚，乃至卧床不起。小茺蔚眼看着母亲的病越来越重，他暗下决心，要把母亲的病治好。于是他外出为母亲求医问药，然而历尽艰辛却未能如愿。一天，他借宿古庙，庙内老僧见他一片孝心，就送他四句诗，让他去找一种草药。诗云“草茎方方似麻黄，花生节间节生花，三棱黑子叶似艾，能医母疾效可夸。”小茺蔚沿着河岸找了起来，终于找到了那种茎呈四方形、节间开满小花、结有黑色三棱形小果实的植物。母亲服用后不久竟痊愈了。由于这种草是小茺蔚为医治母病而找到的，且又益于妇女，于是人们就把它取名为益母草，它的种子就叫茺蔚子了。 益母草为唇形科多年生草本植物，全草入药。益母草味辛、微苦，性微寒，入心包，肝经，具有去淤生新，活血调经的功效。因其常用于妇女血脉阻滞之月经不调、经行不畅、小腹胀痛、产后恶露不尽等病症的治疗，被视为“妇科经、产要药”。因此，也有人说，益母草是专为女人而生的草，有“坤草”之别称。 痛经者不妨试试益母草煮蛋 痛经是女性朋友的常见疾病之一，多发于未婚或婚后未孕的年轻妇女。其主要症状是月经前后或月经期间下腹疼痛，并伴有腰酸，呕吐等不适。痛经在医学上分为原发性和继发性两种原发性痛经是经妇科检查未发现病理变化者；继发性痛经是生殖器官有明显的器质性病变，如生殖系肿瘤，盆腔炎症等。继发性痛经患者，应在医生的指导下积极治疗原发病。原发性痛经虽不会危及患者生命，但往往会给患者的生活和学习、工作带来极大的影响。其实，原发性痛经的朋友除了月经前及月经期要注意避免劳累、受凉、情绪紧张等因素外，还要坚持饮食疗法，其中用益母草煮鸡蛋就是不错的选择。 益母草煮鸡蛋不仅取材方便，而且烹调方法也非常简单。具体做法为：取鸡蛋两个，益母草30克，元胡15克，放入砂锅中加入适量清水同煮，蛋熟后去壳再煮片刻，去药渣，吃蛋喝汤。经前1天～2天开始服，每日1剂，连服5天～7天。 中医理论认为“不通则痛”，痛经的发生与淤血的存在有着密切关系。方中鸡蛋具有滋阴养血的作用；益母草具有活血化淤的作用。现代药理研究认为益母草可通过松弛痉挛状态下的子宫、缓解炎症等多种途径起到抗痛经的作用；元胡具有行气活血，散淤止痛的作用，是临床上治疗痛经的常用药。三者合用可起到行气、养血，活血、去淤、止痛的作用，是痛经患者的食疗佳品。
试验三糖浆剂煎膏剂的制备
实验三糖浆剂、煎膏剂的制备 3．糖浆剂的制备 （1）单糖浆 【处方】蔗糖42.5g 蒸馏水适量 全量50mL 【制法】取蒸馏水20mL煮沸，加入蔗糖搅拌溶解后，继续加热至沸，用多层纱布或脱脂棉趁热过滤，自滤器上添加适量蒸馏，使其冷至室温时为50mL，搅匀，即得。 【用法与用量】本品含糖量为85%(g/mL)或65%(g/g)，可用于制备其他含药糖浆，或作为液体口服制剂的矫味剂。也可作片剂、丸剂的粘合剂。作包糖衣物料时，浓度应为74%（g/g）左右。 （2）远志糖浆 【处方】远志流浸膏（Extractum Polygalae Liquidum）5mL 浓氨溶液（Ammonia Water）0.1mL 苯甲酸钠（Sodium Benzoate）0.05g 单糖浆（Simple Syrup）加至25mL 【制法】将浓氨溶液稀释成10%稀氨水，与远志流浸膏混合均匀，静置1天～2天备用，再将单糖浆在60℃以下加入远志流浸膏中至规定体积，混合均匀，即得。 【作用与用途】同远志流浸膏。 【用法与用量】口服，一日三次，每次2 mL～5mL。 【贮藏】密封。 4.煎膏剂的制备 益母草膏 【处方】益母草（小段）50g 红糖50g
【制法】取益母草加水煎煮两次，第一煎沸后1小时，第二煎沸后30分钟，用纱布过滤，挤压残渣，滤液合并，浓缩，不断捞去泡沫，浓缩成清膏（比重为1.21～1.25，80~85℃热测），通常浓缩至1:1〈mL:g〉）。另将红糖置小烧杯中，加入1/2量的开水，加热至全溶，用纱布滤过，置蒸发皿中，继续用文火炼至糖成深红色时，停止加热，慢慢将清膏加入其中，搅拌均匀，继续用文火加热收膏，待取少许能平拉成丝，或滴于纸上不见水迹，即得。 【性状】本品为棕黑色稠厚的半流体，气微，味苦、甜。 【鉴别】取本品10g，加水20ml，搅匀，加稀盐酸调节pH值至1～2，离心，取上清液，通过001′7型（732）Na－型强酸性阳离子交换树脂柱（内径0.9cm，柱高12cm）上，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以2mol/L氨溶液40ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸水苏碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4m l，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇－盐酸－乙酸乙酯（8:3:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 【检查】相对密度取本品10g，加水20ml稀释后，依法测定，应为1.10～1.12。 其他应符合煎膏剂项下的各项规定（附录IF）. 【含量测定】取本品3g，置烧杯中，精密称定，加水10ml使溶解，加稀盐酸调节pH值至1～2，通过001′7型（732）Na－型强酸性阳离子交换树脂柱（内径2cm，柱高15cm）上，用水洗至流出液近无色，弃去洗脱液，再用2mol/L氨溶液150ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，静置，取上清液作为供试品溶液。另取在105℃干燥3小时的盐酸水苏碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含2mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，精密吸取供试品溶液8m l、对照品溶液3m l 与8m l，分别交叉于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇－盐酸－乙酸乙酯（8:3:1）为展开剂，展开，取出，晾干，在105℃加热15分种，放冷，喷以1％三氯化铁乙醇溶液－稀碘化铋钾试液（1:10）混合溶液至斑点显色清晰，晾干，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法进行扫描，波长：λs＝510nm，测量供试品吸光度积分值与对照品吸光度积分值，计算，即得。 本品每1g含盐酸水苏碱不得少于3.6mg。 【功能与主治】活血调经。用于经闭，痛经及产后瘀血腹痛。 【用法与用量】口服，一次9 g～15g，一日2次～3次。 四、思考题 1．煎膏剂、糖浆剂、合剂均为含糖制剂，三者有何区别？
关格片中盐酸小檗碱的含量测定
关格片中盐酸小檗碱的含量测定 孙佳石,董金香*,邱智东 (长春中医药大学药学院,吉林长春130117) 摘 要:目的提高关格片的质量标准。方法应用高效液相色谱法对黄连中有效成分盐酸小檗碱进行了含量测定。结果盐酸小檗碱在0 1998~1 998mg 范围内呈良好线性关系,回归方程为Y =1843459 405 X =45289 6762,r =0 9996。结论含量测定方法简便、灵敏、准确、专属性强。可作为关格片中盐酸小檗碱含量测定的方法。 关键词:关格片;盐酸小檗碱;高效液相色谱法 中图分类号:R285 5 文献标志码:A 文章编号:1007-4813(2009)02-0180-02 作者简介:孙佳石(1982-),女,硕士研究生。研究方向:中药学。*通讯作者:董金香,女,副教授 Tel:0431 ******** 关格片是由苍术、砂仁、冬虫夏草、黄连、石韦等9味中药组成的复方制剂。具有降浊祛湿,温补脾肾的功效。用于治疗慢性肾功能衰竭,属于湿浊型者。症见肢体困重,食少纳呆,恶心呕吐,倦怠无力,腰酸膝软,脘腹胀满,口中黏腻,腰部冷痛,大便不实,舌苔厚腻,脉象沉细[1] 。本品处方中主药黄连,其有效成分盐酸小檗碱含量的高效液相测定方法明确,且选定条件下精密度高、重现性好,所以选择以黄连中的有效成分盐酸小檗碱为含量测定指标是合理的。1 仪器与试药 日本岛津 高效液相色谱仪,SPD 10Avp,浙大N 2000色谱数据工作站。盐酸小檗碱化学对照品(由中国药品生物制品检定所提供,批号:110805-200306,规格:供含量测定)。所用试剂均为色谱纯和分析纯。 2 蛇床子素含量测定 2 1 对照品溶液的制备 精密称取盐酸小檗碱对照品5mg,置于50mL 容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。 2 2 供试品溶液的制备[2] 取本品10片,除去包衣,研细,取约0 6g,精密称定,置125mL 磨口具塞锥形瓶中,精密加入甲醇 盐酸(100 1)溶液50mL,称定重量,超声(功率150W,频率40kHz)处理30min,放冷,再称定重量,用甲醇 盐酸(100 1)溶液补足减失的重量,摇匀,滤过。取续滤液,用0 45 m 微孔滤膜滤过,即得。 2 3 阴性对照品溶液的制备 取不含黄连的处方,按制备工艺制成缺黄连的阴性对照品,再按供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。 2 4 色谱条件[3] 色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(150mm 4 6mm)的色谱柱;流动相:乙腈 -0 05mol/mL 磷酸二氢钠溶液(磷酸试液调节pH 值至3 0)(27:73)为流动相检测波长:346nm;流速:0 8mL/min;柱温:25!;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000。 2 5 线性关系考察 精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液2,5,10,15,20 L,分别注入液相色谱仪,以进样量( L)为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,并绘制标准曲线,Y=1843459 405X=45289 6762,r=0 9996,盐酸小檗碱线性范围为0 1998~1 998mg 。2 6 精密度试验 精密吸取对照品溶液盐酸小檗碱10 L,注入液相色谱仪,连续进样5次,依法测定,结果RSD 分别为0 70%,表明仪器的精密度良好。2 7 稳定性试验 取同一供试品溶液,进样10 L,分别在0,1,4,8,12h 测定,结果所得5个数据的RSD 为2 37%,表明盐酸小檗碱在供试品溶液中12h 内稳定。2 8 重现性试验 取同一批样品共5份,按供试品溶液项下制备,依法独立测定,结果RSD 分别为1 17%,表明该方法重现性良好。 2 9 回收率试验 取同一批样品(盐酸小檗碱6 66428mg/g),共5份,分别精密加入对照品盐酸小檗碱适量,按供试品溶液的制备方法制成检测溶液,并依法测定,结果平均回收率为97 62%,RSD 为0 84%,表明方法准确性较好,方法可行。 2 10 样品测定 取3批样品,每批2份,测定样品中盐酸小檗碱含量,结果3批样品中盐酸小檗碱的含量(mg/g)分别为6 3889,6 7202,7 41875。 (下转第218页) ? 180?
益母草碱的研究概况
益母草碱的研究概况 摘要：益母草碱有较强的活血化瘀、利水消肿作用,在治疗前列腺增生的研究中有重要意义。综述近年来有关益母草碱的研究情况，包含其理化性质、制备和测定方法、药理评价及毒性研究等,以期为益母草碱的进一步开发应用寻找新的信息和思路。 关键词:益母草碱；理化性质；制备和测定方法；前列腺增生 益母草碱(Leonurine)是益母草的有效成份，具有广泛的生物学活性[1]。近年来研究揭示了其治疗前列腺增生的良药[2]，还具有改善抗血小板聚集、改善血循环、抗炎镇痛、兴奋子宫、保钾利尿和保护心肌等功效[3-4]。文章对近几年益母草碱的研究概进行简要概述，以期为益母草碱的进一步开发应用寻找新的信息和思路。1理化性质 益母草碱是生物碱。几乎不溶于水，熔点238℃（分解），溶于戊醇。益母草碱在自然界中只有极少一部分是以单体的形式存在,多以其盐的形式存在，含一结晶水的盐酸盐（如图1）。益母草碱水加氯化钡生成白色沉淀，再加硝酸，沉淀不溶解。 图1盐酸益母草碱结构 2制备方法 2.1 柱色谱法：硅胶柱色谱法是常用的方法，在一定条件下，硅胶与被分离物质之间产生作用，这种作用是由于硅胶表面与溶质分子之间的范德华力、硅胶表面的硅羟基与待分离物质之间的氢键产生作用，这种方法分离效果好，处理量大是天然产物提取有效成分的常用手段。张琳等[5]应用硅胶柱色谱对益母草碱提取分离。 2.2大孔吸附树脂法：大孔吸附树脂采用特殊吸附剂,通过物理吸附从水溶液中选择性的吸附有机物。该法设备简单、易操作、产品纯度高等优点，因此大孔树脂吸附法在中药精制纯化应用日益广泛。李雪丽等[6]在大孔吸附树脂对益母草总碱提取分离，应用SP825树脂对益母草总黄酮和总生物碱提取分离，并且能提高药材使用率。 2.3合成法：研究报道益母草中益母草碱含量很低，提取法制备得到量很少，分析结构可用化学合成方法来制备。以丁香酸为原料，用氯甲酸乙酯对其活泼的碳基保护和酰化、路易斯酸催化条件下四氢呋喃开环、酰氯的醇解等反应制备羰基化产物（4-乙氧羰基-氧基-丁香酸-丁酯），用该盖布瑞尔成胺法制备益母草胺,最后与甲基异硫脲反应制成益母草碱[7]。此法减少了反应步骤和操作的技术难度,并提高了收率，是常用得到益母草碱的方法。 2.4超声波和微波提取法：传统益母草碱回流提取率较低。相比较微波具有加热迅速和均匀、穿透力强等特点；超声波辅助提取能使细胞破碎完全提取效率高、提取物生物活性不受影响。周本宏等[8]应用超声波提取法的超声频率和强度对益母草碱提取结果影响的探讨。 3测定方法 3.1化学法 3.1.1 沉淀反应：原理是利用益母草碱中硫酸根离子与钡离子形成不溶于硝酸白色沉淀。方法是在益母草碱中加水溶解后，加氯化钡液，生成白色沉淀，加入硝酸后，沉淀不溶解。 3.1.2 显色反应：原理是利用益母草碱中含有酚羟基与三氯化铁反应显色。方法是样品加水溶解，加入三氯化铁振摇，溶液显茶褐色。 3.2紫外分光光度法(UV)：鉴于益母草碱结构中的共轭结构，在200nm-400nm的紫外区有两个吸收峰，一般在217nm和277nm有最大吸收峰，但217nm易受甲醇吸收干扰，277nm没有影响，所以选择277nm作为检测波长。UV快速和精确，不需要贵重仪器，是实验室简单测定益母草碱的方法。 3.3高效液相色谱法(HPLC)：高效液相色谱法高效、高灵敏度、分析和载液速度快、样品不被破坏等，是现代研究益母草碱测定常用方法。巩长芹等[9]发现用酸性流动相测定益母草碱单体时只出现单一的峰。Zhu Q 等[10]对益母草碱混悬液经口服后，用高效液相色谱-质谱联用技术，检测大鼠血浆中样品的含量，这种方法简
双水相体系萃取分离_分光光度法测定益母草中水苏碱
双水相体系萃取分离-分光光度法测定益母草中水苏碱 赵鹂,郭圣荣 第一作者 Te:l (0578)2271458,136********;E -m ai:l xyzhaol@i 126.co m (丽水学院化生学院,丽水323000) 摘要 目的:利用双水相体系分离纯化益母草中的水苏碱,探究萃取机理及效率。方法:利用不同的双水相体系对益母草总生物碱进行提取,研究不同双水相体系、不同析相盐及温度等因素对提取效率的影响。结果:通过实验发现乙醇/磷酸氢二钾双水相体系效果最好。与常规回流提取法相比较,总碱提取率由1 95%提高到3 49%,总碱提取率高出79 5%。结论:按本文方法所形成双水相体系,操作简便,萃取率高,方法重现性好,可适用工业化生产。关键词:益母草;盐酸水苏碱;双水相;提取中图分类号:R 917 文献标识码:A 文章编号:0254-1793(2010)10-1953-04 Extracti on and separation w it h aqueous t wo-phase syste m (ATPS)of t he total al kaloi ds i n leonurus and deter m i ned w it h s pectrophoto m etry Z HAO L,i GUO Sheng-rong (S choo l ofC he m istry and L i fe Sciences ,L i shu iUn i versit y ,L is hu i 323000,Ch i na) Abst ract Objective :To exp l o re the ex traction m echanis m and effecti v e of the separation -purificati o n o f stachydri n e in aqueous t w o-phase syste m s .M ethods :U sing d ifferent aqueous t w o-phase syste m to extract the to tal alka l o ids i n Leonurus ,study t h e affecti o ns of the salts ,te m perature and organic phase .R esults :Co m pari n g w ith conventional m ethods ,the ex traction rate o f total alka l o ids o f l e onurus i n aqueous t w o -phase syste m w as up to 3 49%when using the ethano l /K 2H PO 4/w ater ATPS as so l v ent and w hich is the best resu lt in different aqueous t w o-phase syste m.C onclusion :The t w o aqueous phase syste m for stachydri n e extracti o n is easy to operate ,good reproducti v ity ,and can be app li e d i n m ass pr oducti o n .K ey w ords :leonurus ;stachydri n e hydrochloride ;aqueous t w o-phase syste m ;ex tracti o n 益母草为唇形科植物益母草(Leonurus hetero phy llus Sw eet)的干燥地上部分,是常用中药,主要成分为生物碱类和黄酮类化合物等。临床用其流浸膏或复方制剂治疗月经不调、痛经、阴道炎症等妇科常见病[1~4] 。已知益母草中所含有效成分为总生物碱,主要包括益母草碱(leonuri n e)和盐酸水苏碱(stachydrine hydroch lori d e)等。盐酸水苏碱为益母草中生物碱类含量测定的指标性成分,中国药典 2005年版采用薄层扫描法测定[5] ,用乙醇提取样品,浓缩后通过活性炭一氧化铝柱纯化得到供试品溶液,回流提取方法耗时且提取率较低。其他传统的萃取分离法主要采用与水互不相溶的有机溶剂作萃取溶剂,这种异相萃取的传质速率通常较低,必须经过较长时间振荡或多次萃取才能达到定量萃取,工作量大且溶剂大多有毒性。采用均相萃取、异相 分离的双水相萃取(Aqueous t w o -phase extraction , ATPS)[6~9] 可以较好地克服以上萃取分离的缺点。在研究的双水相萃取体系中,多数是对基于水溶性高聚物的双水相萃取 [6~8] 。普通的能与水互溶的有 机溶剂在无机盐存在下也可生成双水相体系[9~12] 。与基于高聚物的双水相萃取相比,基于水溶性有机溶剂和盐水相的双水相萃取体系具有价廉、低毒、分相清晰、萃取相不含粘度大、难处理的聚合物、对测定干扰小等特点。 用双水相提取益母草中的水苏碱含量目前未见报道,本文研究了水溶性有机溶剂乙醇、丙醇及丙酮在不同无机盐作用下双水相萃取分离水苏碱,建立了乙醇-K 2H P O 4双水相萃取分离水苏碱,用紫外分光光度法测定含量,获得较好实验结果。
级中药成分提起与分离复习题
练习(2) （一）填空题： ?生物碱的碱性来源于____氮___原子，能使该原子电子云密度增加的，其碱性____强___。 ?生物碱分子中若具有___内酯或内酰胺_______结构，在____碱水______溶液中加热可使其开环成盐而溶于_____有机溶剂______；含_____羧基，酚羟______基的两性生物碱既可溶于 _________碱__水，又可溶于酸水中。 ?生物碱盐，用不同碱度的碱碱化后，分别用有机溶剂萃取。若想分离出碱性不同的生物碱，其加入强弱碱的顺序应由______弱_____到___强_______，提出的生物碱的碱性顺序应由__弱 ______到_____强_____。游离生物碱用有机溶剂溶解后，加入不同酸度的酸，使它分步成盐，分别溶入酸水中，使各生物碱分离，其加入酸的酸性顺序应由到_____强__至_____弱____。酸水中依次提出的生物碱的碱性顺序应由____强_____到___弱________。 ?A型题（单项选择题） ?1、生物碱有碱性是因为其分子结构中含有 ?A、碳原子 B、氢原子C、氧原子 D、硫原子E、氮原子 ?2、具有挥发性的生物碱是 ?A、益母草碱 B、咖啡因C、乌头碱D、麻黄碱 E、利血平 ?3、水溶性生物碱从化学结构上分析大多属于 ?A、酰胺类生物碱 B、季铵类生物碱 C、仲胺类生物碱 ?D、酯类生物碱E、叔胺类生物碱 ?4、生物碱沉淀反应一般在何种溶液中进行 ?A、水溶液B、酸水溶液C、碱溶液 D、乙醇液 E、氯仿液 ?5、下列生物碱碱性最强的是 ?A、咖啡因pKa=1.22 B、小檗碱pKa=11.5 C、罂粟碱pKa=6.13 ?D、L－麻黄碱pKa=9.58 E、胡椒碱pKa=1.42 ?6、下列哪种是供电子基 ?A、苯基 B、羰基 C、羟基 D、双键 E、烷基 ?7、从水提取液中萃取水溶性生物碱，宜用何种溶剂 ?A、氯仿 B、正丁醇 C、苯 D、水 E、乙醇 ?8、生物碱进行TLC时，以硅胶为吸附剂，则展开剂必须是 ?A、碱性B、酸性 C、中性D、乙酸乙酯E、乙醚 ?9、酸水法提取生物碱时常用的酸是 ?A、0.5％～1.0％硫酸B、0.5％～1.0％硝酸C、37％盐酸 ?D、60％～65％磷酸E、10％～20％盐酸 ?10、雷氏铵盐沉淀法可用于分离或纯化的生物碱是 ?A、季铵型生物碱B、叔胺型生物碱C、肿胺型生物碱 ?D、伯胺型生物碱E、以上均可 ?11、生物总碱溶于亲脂性有机溶剂中，用pH值由高到低的酸性缓冲液萃取，最先得到的是?A、弱碱性生物碱 B、中强碱性生物碱 C、极弱碱性生物碱 ?D、强碱性生物碱 E、酰胺型生物碱 ?12、麻黄碱与伪麻黄碱的分离是利用其 ?A、盐酸盐溶解度不同B、硫酸盐溶解度不同C、草酸盐溶解度不同 ?D、酒石酸盐溶解度不同E、醋酸盐溶解度不同 ?13．临床上应用的黄连素主要含有 ?A．阿托品B．小檗碱C．黄连碱D．药根碱E．小檗胺
益母草药材中水苏碱成分应用高效液相色谱法的检测结果分析
益母草药材中水苏碱成分应用高效液相色谱法的检测结果分析 发表时间：2018-11-02T10:58:43.390Z 来源：《中国误诊学杂志》2018年第25期作者：宋妍 [导读] 结论高效液相色谱法检测方式快捷简便，专属性强，检测结果精准，能够对益母草颗粒质量进行有效的控制。天津医科大学第二医院天津 300211 摘要：目的对于益母草药材中水苏碱成分采取高效液相色谱法进行检测的具体方法以及检测结果开展分析与总结。方法色谱条件选取AgilentSB-C18柱，流动相选取乙腈-冰乙酸，流速调整为每分钟0.3ml，质谱检测选取正离子电喷雾离子源，受到多反应监测模式下开展监测。结果盐酸水苏碱浓度处于0.2μg/ml到10.0μg/ml范围中和峰面积表现为良好线性关系，回收率为102.6%。结论高效液相色谱法检测方式快捷简便，专属性强，检测结果精准，能够对益母草颗粒质量进行有效的控制。 关键词：益母草药材；水苏碱成分；高效液相色谱法 益母草颗粒主要是由益母草、木香、当归以及川芎四味中药所组成，通过加工提取制作而成，益母草颗粒存在行气止痛以及活血调经的作用，临床中一般用来治疗月经不调、气滞血瘀、产后淤血腹痛以及调经，其中益母草中药材属于君药，具有良好的活血化瘀效果，所以临床中对于益母草药材开展有效的质量控制十分关键。益母草药材质量控制方式主要包括高效液相色谱法以及薄层色谱扫描法对盐酸水苏碱含量进行检测，高效液相色谱法对于盐酸水苏碱含量进行检测选取氨基柱与C18柱与离子交换色谱柱为色谱柱，此外利用蒸发光检测器施行分析[1]。本文对于益母草药材中水苏碱成分采取高效液相色谱法进行检测的具体方法以及检测结果开展分析与总结，现汇报如下。 1资料与方法 1.1一般资料 选取美国高效液相色谱仪，电子天平，超声波清洗器，盐酸水苏碱对照品进行含量测定使用，益母草颗粒，乙腈属于色谱纯，水选取市面所售娃哈哈纯净水，冰乙酸属于优级纯，剩余检测试剂属于分析纯。 1.2方法 色谱条件选取AgilentSB-C18柱，流动相选取乙腈-冰乙酸，流速调整为每分钟0.3ml，柱温30摄氏度，进样量5μl，离子源选取大气压电喷雾离子源，扫描方式选取正离子，施行全扫描、离子扫描和二级全扫描，干燥气温度300摄氏度，辅助气流速每分钟8L，毛细管电压为4000V，采取多反应监测模式进行含量检测。 严格称取盐酸水苏碱对照品，称取量为12.55mg，放置到量瓶中，置入乙醇进行溶解，摇匀，选取对照品储备液1ml，放置到量瓶中，置入乙醇稀释，摇匀作为对照品使用溶液。 选取5包颗粒内容物，进行研磨，称取5g置入量瓶中，放置乙醇进行超声处理20分钟，放置到室温之后置入乙醇进行稀释，摇匀并且过滤，选取2ml放置到量瓶，置入乙醇，摇匀，通过微孔滤膜进行过滤。 选取上述对照品溶液，阴性对照对照溶液分别5μl，置入高效液相色谱仪，根据上述色谱和质谱条件进行测定，对于色谱图进行记录，盐酸水苏碱保留时间3.5分钟，溶液中其他杂质不会对样品中盐酸水苏碱测定进行干扰，阴性样品在盐酸水苏碱色谱峰保留时间没有出现干扰峰，代表专属性良好[2]。 2结果 盐酸水苏碱浓度处于0.2μg/ml到10.0μg/ml范围中和峰面积表现为良好线性关系，回收率为102.6%，详见表1。表1 样品检测情况比较 3讨论 制备供试品溶液方面，本次实验对于不同超声提取时间，分别为10分钟、20分钟、30分钟以及40分钟施行考察，结果表明，超声提取20分钟可以完全提取样品中盐酸水苏碱。对于选择流动相方面，流动相中的乙腈和冰乙酸比例通过多次配比，当其比例为70比30期间，样品中其他成分对于盐酸水苏碱检测不会产生干扰，同时盐酸水苏碱出峰时间比较适当，峰形以及理论塔板数最佳，所以建议保持此种比例开展测定[3]。对于质谱条件考察方面，为确保盐酸水苏碱各子离子峰信号表达处于最强，施行正离子模式与负离子模式加以检测，开展二级质谱扫描，对裂解电压和碰撞能压进行优化，通过多次试验发挥最理想的质谱条件。益母草颗粒原质量标准中含量检测，利用薄层色谱扫描法施行检测，处理方式较为繁琐，检测所需时间比较长，数据的重现性比较差，采取高效液相色谱法，对于色谱柱的要求比较高，样品提取程序复杂，部分方式通过检测的灵敏度不佳[4]。本文通过高效液相色谱法对益母草颗粒中盐酸水苏碱含量加以检测，存在理想的选择性与专业性，检测灵敏度比较高，色谱柱选择十分普通并且常用，操作方法简单，重复性佳[5]。根据本文的研究显示，色谱条件选取AgilentSB-C18柱，流动相选取乙腈-冰乙酸，流速调整为每分钟0.3ml，质谱检测选取正离子电喷雾离子源，受到多反应监测模式下开展监测，结果表明，盐酸水苏碱浓度处于0.2μg/ml到10.0μg/ml范围中和峰面积表现为良好线性关系，回收率为102.6%。综上所述，对于益母草药材中水苏碱成分采取高效液相色谱法检测效果理想，具有临床推广价值。
益母草有效成分及提取技术
益母草有效成分及提取技术 摘要：本文对益母草的提取工艺、化学成分、刚定含童方法及药理研究进展进行综述 关键词：益母草，提取工艺，有效成分 益母草为唇形科植物益母草（Leonurus japonicus Houtt.）的干燥地上部分，具有活血调经、利尿消肿的功效，常用于月经不调、痛经、经闭、恶露不尽、水肿尿少、急性肾炎水肿等. 益母草的主要活性成分是益母草碱和水苏碱. 一、有效成分：益母草的主要化学成分有生物碱类、二萜类、黄酮 类、挥发油及微量元素 二、提取： 2.1.1 煎煮法益母草药材6份，每份100 g，分别以水、1％盐酸溶液为溶媒提取3次，提取时间为10倍量2.0 h、6倍量1.5 h、5倍量1.0 h，每种溶媒各提取3份，提取物浓缩，备用。 2.1.2 回流提取法益母草药材6份，每份100 g，分别以95％乙醇、0.1%盐酸乙醇溶液为溶媒提取3次，提取时间为10倍量2.0 h、6倍量1.5 h、5倍量1.0 h，每种溶媒各提取3份，提取物浓缩，备用。 2.1.3 超声提取法益母草药材12份，每份100 g，分别以10倍量的水、1％盐酸溶液、95％乙醇、0.1%盐酸乙醇溶液为溶媒在59KHz的超声发生器中提取2次，每次40 min，每种溶媒各提取3份，提取物浓缩，备用。 2.1.4 SFE-CO2法益母草药材3份，每份100 g，均用氨水湿润碱化，
置超临界萃取装置内，加入夹带剂（95％乙醇）0.5倍量，于萃取压力30MPa，萃取温度70 ℃，解析压力10MPa，解析温度45 ℃的条件下萃取4 h，萃取物备用。 三、益母草的药理作用 1、抗炎镇痛的作用：益母草碱具有抗慢性非特异性炎症的镇痛, 有效抑制炎症增殖反应, 对于药流后的止血及子宫复旧具有积极的治疗作用。从动物实验证实抗炎作用。机理研究采用放射免疫法及化学分析法, 分别检测大鼠口服后血液雌、孕激素及子宫平滑肌。、及、含量的变化, 可通过抑制痉挛子宫的活动, 抗炎, 降低子宫平滑肌上。含量及升高体内孕激素水平等多种途径缓解痛经症状。对血液流变学的作用益母草碱对急性血疲证大鼠血液流变学的实验, 可有效降低血液粘度, 提高红细胞变形能力。 2、对淋巴微循环的作用：益母草的注射液能明显增强失血性休克大鼠肠系膜淋巴管自主收缩频率及收缩性, 扩张微淋巴管口径, 使微淋巴的活性增强, 对失血性休克时的淋巴微循环障碍有非常好的改善作用。 3、利尿作用：益母草生物碱对大鼠的利尿用研究, 证实可作为一种作用和缓的保钾利尿剂。 4、心肌保护作用：益母草对在体或离体心脏缺血, 再灌注均有缺血预适应同等的心肌保护作用。 5、益母草的肾毒性研究：益母草和复方益母草胶囊长毒实验对比, 益母草提取物给大鼠灌胃, 连续天, 结果益母草高、低剂量都会造成不
Venusil HILIC丙基酰胺亲水作用液相色谱柱
Venusil HILIC丙基酰胺亲水作用液相色谱柱，键合相为中性的酰胺基团。在处理强极性化合物方面，Venusil HILIC色谱柱比反相C18色谱柱表现出更大的优势，利用亲水作用色谱原理，可保留或分离强极性、水溶性碱性有机化合物。 HILIC是一种亲水作用色谱模式，其洗脱是以化合物亲水性/极性增加的次序排列，典型的流动相是乙腈（40%--97%）－水（或挥发性缓冲盐），所以HILIC色谱具有和反相色谱互补的选择性，同时它可以使用更高挥发性的流动相，增加了HILIC色谱的LC/MS分析灵敏度，降低了分离的压力。同时HILIC色谱摒弃了离子对试剂，极大的方便了制备色谱方法的开发。Venusil HILIC色谱柱与传统的氨基柱和硅胶柱相比，Venusil HILIC色谱柱具有更好的重现性和寿命。Venusil HILIC是是替代氨基柱和硅胶柱的最佳选择。 硅胶纯度>99.999%；pH适用范围2.0-8.0；孔径100? 水溶性维生素分析（与硅胶柱比较） 另外，Venusil HILIC 由于其出色的亲水性用于测益母草中的盐酸水苏碱已经被中国药典所收录。 从化学结构上看，盐酸益母草碱和盐酸水苏碱由于含有较多的极性基团（-OH、-NH2、-COOH）和孤对电子，水溶性特别强，因此普通的C18反相色谱柱已不能满足此类化合物的分析要求，最重要的原因即亲水性成分在C18柱上没有保留。而丙基酰胺键合硅胶（HILIC)克服了传统正相色谱柱在水相条件下不稳定的缺点,其常使用流动相是和反相色谱相同的水相缓冲液(< 40%)及有机溶剂,但是其梯度条件通常是初始为高比例有机相，逐步加大水相含量;极性丙基酰胺键合硅胶的HILIC色谱柱在反相条件下，可以有效的保留极性化合物，是一种崭新的极性化合物HPLC分离解决方式. 可用于奶粉中双氰胺检测！