人教版生物选修一同步配套练习：专题二 微生物的培养与应用 课题2 含答案

专题二课题2

一、选择题

1．关于土壤取样的叙述错误的是(C)

A．土壤取样，应选取肥沃湿润的土壤

B．先铲去表层土3cm左右，再取样

C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌

D．应在火焰旁称取土壤

2．PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能忍受93℃左右的高温。如果请你寻找这种耐高温的酶，你会去哪里寻找(C)

A．土壤中B．海水中

C．热泉中D．冷库中

3．需要在火焰旁操作的有(D)

①土壤取样②称取土壤③稀释土壤④涂布平板⑤微生物的培养

A．①②③④⑤B．②③④⑤

C．③④⑤D．②③④

4．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是(A)

A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂

B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂

C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹红Ⅲ试剂

D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂

[[解析]]以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。

5．用做土壤分解尿素的细菌的分离与计数的培养基要严格(C)

A．防腐B．消毒

C．灭菌D．化疗

6．甲、乙、丙是三种微生物，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基(如下表)。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖，甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是(D)

成分ⅠⅡⅢ

粉状硫10g ＋＋＋

KH2PO4 4g ＋＋＋

FeSO4 0.5g ＋＋＋

蔗糖10g ＋－＋

(NH4)2SO4 0.4g －＋＋

H2O 100mL ＋＋＋

MgSO4·7H2O 9.25 g ＋＋＋

CaCl2 0.5g ＋＋＋

A

B．甲、乙都是自养微生物，丙是异养微生物

C．甲是异养微生物，乙是固氮微生物，丙是自养微生物

D．甲是固氮微生物，乙是自养微生物，丙是异养微生物

[[解析]]利用不同的选择培养基可分离出我们所需的微生物。从表格中可看出，Ⅰ培养基中无氮源，Ⅱ培养基中无碳源，Ⅲ为完全培养基。由此可知，能在Ⅰ中生存的甲只能是固氮微生物，能在Ⅱ中生存的乙是自养微生物，丙只在Ⅲ中存活，为异养微生物。

7．从土壤中分离能分解尿素的细菌，可以利用选择培养基，其成分中一定有(A)

①尿素②有机氮化物

③无机盐④有机碳化物

⑤水⑥无机碳化物

A．①③④⑤B．②③④⑤

C．①③⑤⑥D．②③⑤⑥

[[解析]]本题考查选择培养基的成分。分离分解尿素的细菌需用选择培养基，其中必须将尿素作为唯一氮源。

8．实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触)，将平板置于37℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析，以下叙述不正确的是(D)

A．链霉素能阻止结核杆菌的生长

B．链霉素对结核杆菌比对霍乱菌更有效

C．链霉素对结核杆菌比对伤寒菌更有效

D．链霉素可以用于治疗伤寒病人

[[解析]]从图中可以看出，这是含有链霉素的选择培养基，接种的三种细菌中，霍乱菌和结核杆菌都可以被杀灭，并且链霉素对结核菌杀灭的有效程度大于霍乱菌，而伤寒菌照常生长不受影响，所以选项D错。

9．在缺乏氮源的培养基上，大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加人10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出(C)

A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌

B．固氮细菌、大肠杆菌、放线菌

C．固氮细菌、霉菌、放线菌

D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌

[[解析]]固氮细菌可以在无氮培养基上生长；青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长，但不会抑制霉菌的生长；加入10%的酚的培养基可以抑制细菌和霉菌的生长，但不会抑制放线菌的生长。

10．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是(D)

A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0．1 mL，分别涂布于各组平板上

C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时

D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

[[解析]]检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基；经高温、高压灭菌后倒平板，A项正确；取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0．1mL，分别涂布于不同的平板上，B项正确；接种后要将培养皿倒置，37℃恒温培养24～48小时，C项正确；在确定对照组无菌后，应选择菌落数在30～300的平板进行计数，D项错误。

11．欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作不正确的是(D)

A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释

B．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板

C．可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照

D．用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌

[[解析]]欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，要将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板，同时要将未接种的培养基在相同条件下培养作为对

照，以检查培养基灭菌是否彻底；筛选分解尿素的细菌要用酚红指示剂。

12．下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法，不正确的是(D)

A．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离

B．测定土壤中不同微生物的数量，选用的稀释范围不同

C．如果得到了2个或2个以上菌落数目在30～300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数

D．牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落

[[解析]]样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目。实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落在30～300之间适于计数的平板。土壤中不同类型的微生物的数量不同，因此在测定其数量时，选用的稀释范围也不同。将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，从而说明选择培养基的筛选作用。

二、非选择题

13．探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数。

实验原理：农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表土制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法，可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。

材料用具：农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9mL无菌水的大试管若干、无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿，盛90mL无菌水的锥形瓶、酒精灯、恒温箱。

方法步骤：

(1)倒平板。分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，应在__酒精灯火焰旁__操作。

(2)制备土壤稀释液。取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌移液管吸取上清液1mL，转至9mL无菌水的大试管中，依次稀释到107倍稀释度。为实现无菌操作，试管口和移液管应在离火焰__1～2__cm处。

(3)涂布。按照107～103稀释度的顺序分别吸取0．1mL进行平板涂布。每个稀释度下，无氮培养基至少涂布__3__个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布__1__个平板。

(4)培养。放入恒温箱内，在适宜温度条件下培养3d～4d。一般每隔__24__小时统计一次，选取__菌落数目稳定__时的记录作为结果，这样可以防止__因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目__。

(5)细菌的计数。当菌落数目稳定时，选取菌落数在__30～300__的平板进行计数。如果测试

的平均值为50，则每克样品中的菌落数是__5×107__。(稀释度是105)

(6)预期结果。相等稀释度下，牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数__多于__(填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。理由是__无氮培养基上可以生存和繁殖的只是土壤中的自生固氮菌，而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类的生存__。

[[解析]]考查微生物的分离及计数。要分离自生固氮菌，采用选择培养基分离的方法，缺乏氮源的培养基可用来分离自生固氮微生物，而其他微生物因缺乏氮源不能生长。实验步骤一般是：配制无氮培养基→灭菌→倒平板→系列稀释→涂布平板→培养→观察并计数。实验中要注意无菌操作和设计对照等。

14．(2018·河北省衡水中学高三大联考)科研人员发现，工业污水中有一种极难降解的含氮有机物NS(无色的NS与碘作用可形成蓝色反应)，但可被NS分解菌高效降解。请分析回答下列问题：

(1)在筛选NS分解菌的过程中，以NS为唯一氮源的培养基属于__选择__培养基，NS可为NS分解菌提供生长所需的__碳源和氮源__等营养物质。若要对NS分解菌加以纯化并计数，可采用__稀释涂布平板__法接种。

(2)NS分解菌培养过程中，获得纯净培养物的关键是__防止外来杂菌的污染(或“无菌技术”)__，为排除杂菌污染，应设置的对照实验是__不接种的空白培养基__。

(3)欲鉴定筛选得到的NS分解菌是否具有实用价值，在培养NS分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入__碘__用于颜色反应鉴别NS分解菌。若用上述培养基比较不同菌株降解NS能力的大小，请用简洁的语言写出设计思路：__用含相同NS浓度的上述培养基培养不同菌株，一定时间后，通过测定菌落周围透明圈的大小(或直径)来确定不同菌株降解NS能力的大小__。

[[解析]]本题以筛选NS分解菌为载体考查微生物的培养和分离的相关知识，解题时需要考生将课本上的相关知识迁移过来，结合题意作答。

(1)在筛选NS分解菌的过程中，以NS为唯一氮源的培养基能抑制其他不需要的微生物的生长，而促进所需要的NS分解菌的生长，所以该培养基属于选择培养基；NS是一种含氮的有机物，所以NS可为NS分解菌提供生长所需的碳源和氮源等营养物质。若要对NS分解菌加以纯化并计数，可采用稀释涂布平板法接种。

(2)微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的污染(或“无菌技术”)，为排除杂菌污染，应设置不接种的空白培养基做对照实验。

(3)无色的NS与碘作用可形成蓝色反应，所以可在培养基中加入碘，以用于颜色反应鉴别

NS分解菌；可用含相同NS浓度的上述培养基培养不同菌株，一定时间后，通过测定菌落周围透明圈的大小(或直径)来确定不同菌株降解NS能力的大小。

15．(2017·西宁四中高二月考)下图是从土壤中筛选分解尿素细菌的过程，请回答下列问题。

(1)图中选择培养基应以__尿素__为唯一氮源；鉴别培养基还需添加__酚红__作指示剂，分解尿素细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成__红__色。

(2)土壤中的细菌将尿素分解为__氨__之后，才能被植物利用，土壤中的细菌之所以能将尿素分解，是因为细菌能合成__脲酶__。

(3)制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是__调整pH__和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是__高压蒸汽灭菌__。倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是__防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染__。

(4)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0．1 ml，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为191、16、326、173和182。该过程采取的接种方法是__稀释涂布平板法__，每克土壤样品中的细菌数量为__1．82__×108个；与血细胞计数板相比，此计数方法测得的细菌数较__少__(填“多”或“少”)。

[[解析]]本题考查微生物的培养，考查对培养基成分、制备方法、微生物分离计数方法的理解和识记。

(1)筛选分解尿素细菌，培养基应以尿素为唯一氮源；鉴别培养基还需添加酚红作指示剂，分解尿素细菌分解尿素产生NH3，酚红遇碱性溶液显红色，菌落周围的指示剂将变成红色。

(2)土壤中的细菌将尿素分解为氨之后，才能被植物利用。细菌能合成脲酶，所以能将尿素分解。

(3)制备培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行调整pH和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌。倒平板时待平板冷凝后，将平板倒置，防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染。

(4)在5个细菌培养基平板上，长出的细菌菌落数分别为191、16、326、173和182，统计菌落数在30 ～300 之间的平板，菌落数平均值为(191＋173＋182)/3＝182，每克土壤样品中的细菌数量为182÷0．1×105＝1．82×108个；分离计数采取的接种方法是稀释涂布平板法；可能位置

较近的两个或多个细菌形成一个菌落，与血细胞计数板相比，此计数方法测得的细菌数目较少。