浙大微生物.土壤中微生物的分离及一株土壤细菌的鉴定

土壤中微生物的分离及一株土壤细菌的鉴定

平帆

摘要：利用微生物接种、无菌操作、分离等手段，从土壤中分离纯化出细菌、霉菌、放线菌等微生物。通过观察其不同菌种形态特征，初步鉴定各菌种所属类别。从土壤中分离的细菌株，观察其对不同化合物的分解利用状况，进一步鉴定其种属，并了解细菌生理代谢的多样性。

关键词：土壤微生物；细菌；霉菌；放线菌

1前言

土壤是微生物主要指在土壤不同深度分布的微小个体，主要包括细菌、放线菌、真菌、原核生物以及藻类等[1]。土壤微生物是地球地表下数量最巨大的生命形式[2]，在土壤形成、生物地球化学循环、污染物质降解和维持地下水质量发挥及其重要的作用。近年来，随着微生物理论知识的不断完善与生物化学、分子生物学等技术的更新，对土壤微生物群落结构、土壤微生物结构与生态功能等方面研究日益完善。但由于土壤中微生物个体微小、数量庞大、种类繁杂、地域差异性大等原因，目前仅1‐10%的土壤微生物被分离和鉴定，这限制了人类对于土壤微生物在陆地生态系统中重要作用的认识[3,4]。

理论研究中可知[5]，中国南方红壤中SSU rRNA基因拷贝数的大小顺序为细菌＞放线菌＞古菌＞真菌，各微生物类群数量随土壤剖面深度增加而降低，与有机质含量、TN、

C/N呈显著正相关，与土壤黏粒含量呈显著负相关。细菌大多数是异养型，其中酸杆菌门与变形菌门是优势菌种；放线菌以链霉菌属、诺卡菌属于小单胞菌属等为主；古菌以泉古菌门中的热变形菌纲为主，真菌则以子囊菌门为主。土壤中微生物在土壤结构的形成、腐殖质的生成、有机质的积累于分解、黏土矿物的分解中有着重要影响：如腐殖质的形成，依靠特定腐生细菌将土壤中动植物残体和其他有机质进行腐殖化作用。固氮菌则能通过固定空气中的氮来合成蛋白质，间接地增加土壤中氮素含量，从而提升土壤肥力；此外，土壤微生物对地球生物化学循环其重要作用，因其分解作用，在土壤中积累的碳、氮、硫才能以气态或其他形态返回大气中。

本实验为进一步分析浙江大学紫金港地区土壤中微生物特性，将微生物从混杂菌群中分离，获得纯培养后，通过计数、比对菌种形态特征与其生理生化性质，对其进行菌种鉴定。同时在实验实际操作过程中，了解培养基的配置原理与方法，了解常见灭菌方法，熟练掌握分离、纯化、接种微生物与无菌操作方法。

2材料与方法

2.1材料

2.1.1样品

取自浙江大学紫金港校区的新鲜土样。

2.1.2试剂