青蒿素对肾癌细胞株786—0细胞的增殖和Fascin表达的影响

目的：探讨青蒿素对肾癌细胞株786-0细胞的增殖和Fascin表达的影响。方法：选用786-0肾癌细胞株，分别通过不同浓度的青蒿素作用细胞株，收集不同时间点（0、24、48、72 h）的细胞，运用细胞增殖CCK-8法测定青蒿素对肾癌细胞株786-0细胞的增殖；通过Western Blot检测青蒿素干预后肾癌细胞株786-0细胞Fascin的表达。结果：随着药物浓度的增加，青蒿素可明显抑制肾癌细胞株786-0细胞的增殖（P＜0.01），青蒿素可显著降低肾癌细胞株786-0 Fascin 蛋白的表达（P＜0.05）。

结论：青蒿素通过抑制肾癌细胞增殖和Fascin蛋白的表达，从而抑制肿瘤细胞的恶性增生。

腎癌又称肾细胞癌（renal cell carcinoma，RCC）是指起源于肾皮质的具有异质性的肿瘤[1]。肾癌是泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，同时，肾癌起病隐匿，多发现较晚。目前，膀胱癌各种预防和治疗的药物均不理想或毒副作用较大。研究发现Fascin蛋白在多种恶性肿瘤组织中表达显著上调，其异常表达被认为与肿瘤的发生、进展、侵袭及预后等生物学行为相关[2]。青蒿素是一类传统的抗疟药，随着临床试验的深入研究，其抗肿瘤作用备受关注，而在肾癌方面的研究国内外却报道甚少[3]。本实验以人肾癌细胞株786-0作为研究对象，应用CCK-8法和Western Blot等技术观察青蒿素对肾癌细胞株786-0的增殖和Fascin 蛋白的表达的影响。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料、仪器与试剂材料：肾癌细胞株786-0（购买于上海中科院细胞库）。仪器和试剂：多功能读板机（Beckman PRADIGM）、蒸汽灭菌锅（上海申安医疗器械厂）、电子天平（Satorius公司）、小型离心机（Eppendorf公司）、倒置相差显微镜（日本索尼公司）、Cell Counting Kit-8（CCK-8试剂盒）（上海碧云天生物技术有限公司）、Facsin Monocional Antibody（美国Millipor公司）、羊抗鼠二抗（Santa Cruz公司）、RPMI1640培养基（Gibco公司）、胰蛋白酶（Hyclon 公司）、青蒿素、胎牛血清（Hyclon公司）、磷酸缓冲液（PBS）、96孔细胞培养板、6孔细胞培养板、青霉素/链霉素双抗溶液、二甲亚砜（DMSO）[4]。

1.2 细胞培养将肾癌细胞株786-0细胞于含10%胎牛血清RPMI 1640培养基，5% CO2和37 ℃培养箱中培养。当细胞培养至密度为60%～80%时传代，收集细胞进行后续实验[5]。

1.3 药物处理将青蒿素溶于DMSO，再用细胞完全工作液配制成200、100、50、25 mg/L四个不同浓度的工作液。

1.4 CCK8法测定细胞增殖在96孔板中取24个孔（取板中间孔，周围一圈弃置，加培养基防蒸发），做好相应标记，取4个孔加培养基作为空白组，其余