洁净车间沉降菌检测记录.docx
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沉降菌检测记录
记录编号： AI/R QA-005
检测依据 : 《 GB/T16294-2010 医药工业洁净室 ( 区 ) 沉降菌的测试方法》
检测步骤：
1培养皿 ( ￠ 90mm× 15mm的玻璃培养皿 )
1.1 采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现破损或污染的应剔除。
1.2 将培养皿121℃湿热灭菌20 分钟或于180℃干热灭菌 2 小时，灭菌后取出备用。
2培养基配制
2.1取适量培养基，按培养基说明书配制比例加纯化水后加热溶解，溶解后分装于烧瓶，放
入高温灭菌锅， 121℃高温下灭菌 20 分钟后取出备用。
2.2灭菌后的培养基冷却至约60℃，在万级洁净室中的百级超净台上，无菌操作要求下将灭
菌过的培养基分装于培养皿中，每个培养皿约20mL，冷却凝固后便可使用。
2.3制备好的培养基平皿应在2℃ ~8℃保存，一般有效期以一周为宜或按厂商提供的标准执
行，需保存的剩余培养基应采用适宜方法在平皿上做好培养基的名称及制备日期的标记。
3采样方法
将已制备好的培养皿按测点图的要求放置，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5h ，再将培养皿盖盖上后倒置。
4 培养
4.1 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。
4.2 在 30℃-35 ℃培养箱中培养，时间不少于48h。
4.3 培养皿在用于检测时，为避免培养基本身污染，每次取 3 个对照皿同时进行对照试验，
与采样皿同法操作但不需暴露采样，然后与采样后的培养皿一起放入培养箱内培养，作阴性对照培养，结果应无菌落生长。
5 菌落计数
5.1 用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，有条件的可用5-10 倍放大镜检查有否遗漏。
5.2 若培养皿上有 2 个或 2 个以上的菌落重叠，可分辨时仍以 2 个或 2 个以上菌落计数。
检测记录：
时间温度十万级：
湿度
十万级：
检测状态万级：万级：
男换鞋女换鞋物流通道中间品冷库万级二更万级缓冲静压差
测定房间测试数据结果
洁净级别最大允许数平均
编号名称12符合不符合1男一更
2女一更
03二更
4人流缓冲
5物流缓冲
6洁净走廊
7分装间
8冷库缓冲
十万级10/ 皿
9洁具清洗间
10洗瓶间
11洗衣间
12瓶子暂存间
13配置间
14称量间
15万级二更
16万级缓冲
17万级净化室万级3/ 皿
1/2/
3/4/
5/6/
18百级超净台百级1/ 皿7/8/
9/10/
11/12/
13/14/
19阴性对照培养皿数数据1数据2数据3符合不符合
3皿
注： 1、结果判定栏中，用“√”表示。
2、若部分洁净区域检测不符合，则需重新打扫卫生后复测。检测人：复核人：
洁净区沉降菌、浮游菌检测标准操作规程
1.目的：建立沉降菌、浮游菌检测的标准操作程序，用以规范检测操作。 2.范围：适用于公司内部生产洁净区内的沉降菌、浮游菌检测工作 3.责任：中心检验室主任、检验员对本规程的执行负责。 4.内容： 浮游菌检测 4.1.1 检测前的准备 4.1.1.1按照药典规定制作平皿培养基。 4.1.1.2领出检测仪器，去掉防尘护罩。 4.1.1.3先用喷洒方法对仪器及采样管进行消毒，无法喷洒的地方应用擦拭或 浸泡办法进行消毒，消毒后置放十分钟使仪器基本干燥。 4.1.1.4将采样器放在采样工作台面上，拧下采样盖，使整个缝隙完全暴露在 空气中，便于直接采样。 4.1.1.5当在较高位置取样时，可把仪器采样盖拧紧，插上采样塑料管，把管 子延伸到所要采样的空间。 4.1.1.6打开采样器透明外罩，迅速将准备好的平皿放入采样托盘内，拿去平 皿上盖，立即拧上透明外罩密封。 4.1.1.7拧松外罩顶部装有指针的螺母，让指针自然下落或使指针底部刚接触 到培养基为止。 4.1.1.8调节狭缝螺母，使狭缝上升直至到头，再反方向调节使狭缝面下降， 将齐狭缝大螺母侧面的色标线与指针于水平线上。（保持狭缝的底平面与培养基表面相距1-3mm）。
4.1.1.9将指针向上轻轻拔起，使其底部离开培养基表面，并拧紧螺母，使之 固定不动。 4.1.2 采样操作 4.1.2.1将采样器后面板上的电源插上，按下仪器面板上的电源开关，指示灯亮， 时间显示窗内的数码应为“P”。 4.1.2.2根据采样现场环境的洁净度，选择采样时间中的某一档，并按下相应按 钮，指示灯亮，数码由“P”显示为“Y”，约经10分钟后气泵自动开启进 行采样。当采样时间达到时，气泵自动停止运行，数码显示终点采样时间。 4.1.2.3关掉电源开关，打下仪器的活动透明外罩，迅速把平皿上盖盖上并从仪 器中取出。 4.1.2.4按照上述方法，再放入新的平皿，进行第二次采样，直到采样完毕。4.1.2.5采集样品的平皿应置入培养箱，在培养48小时后，按检验规程检查菌 落数。 4.1.2.6采样工作结束，关断仪器电源，将程序： 4.2沉降菌检测 4.2.1消毒φ90mm×15mm的硼硅酸玻璃培养皿。 4.2.2称取普通肉汤琼脂培养基31克，加蒸馏水1000ml，加热溶解分装，经 116℃30分钟灭菌备用。 4.2.3在无菌条件下将消毒的培养基注入培养皿中备用。 4.2.4放平板前应先洗手，穿消毒好的无菌衣、裤、帽、口罩。 4.2.5将已制备好的培养皿按净化级别要求选择放置位置和平皿块数。 4.2.6到车间打开培养皿盖，使培养基表面暴露，再将培养皿盖盖上后倒置。 4.2.7全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。（温度30℃~35℃， 时间不少于48h）。 4.2.8每批培养基应有对照试验，可选2~3只培养皿作对照培养，以检验培养 基本身是否污染。
无菌室沉降菌测试标准操作规程
无菌室沉降菌测试标准操作规程 一、目的：建立无菌室中沉降菌的测试标准操作规程，保证微生物检验在规定洁净级别内进行。 二、范围：无菌室的沉降菌的监测。 三、依据：国家标准GB/T 16294-1996。 四、职责：微生物检验人员对本制度的实施负责。 五、内容 1、菌落：细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落，简称CFU。通常用个数表示。 2、测试方法：沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经48小时以上培养，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室的洁净度。 3、所用的仪器和设备 1）高压灭菌锅锅 2）恒温培养箱：必须定期对培养箱进行检定。 3）培养皿：一般采用中90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。使用前将培养皿置于121℃湿热灭菌20分钟。 4、培养基：普通营养琼脂培养基。将培养基加热熔化，冷却至约45℃在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿约15m1。待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入30～35℃恒温培养箱中培养数小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用，制备好的培养基平皿应在2～8℃的环境中存放。 5、测试步骤 1）采样方法：将已制备好的培养皿放置在预先确定的取样点，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上盖后倒置。 2）培养，时间不少于48小时。每批培养基应有对照试验，检查培养基本身是否污染，可每批选定3只培养皿作对照培养。 3）菌落计数：用肉眼直接计数，然后用5～10倍放大镜检查，有否遗漏。若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。 6、注意事项 1）测试用具要做灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。 2）采取一切措施防止人为对样本的污染。 3）对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。 4）由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。 5）采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。 7、测试规则 1）测试状态 （1）沉降菌测试前：被测试洁净室（区）的温湿度须达到规定的要求，静压差、必须控制在规定值内。被测试洁净室（区）已消毒。 （2）测试状态有静态和动态两种，并在报告中注明测试状态。 （3）测试人员：测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。静态测试时，室内测试人员不得多于2个人。
版药典沉降菌检测操作规程.doc
题目：洁净区（室）沉降菌监测标准操作规程 编码：颁发部门：质量部 起草：日期：2015 年月日修订日期：年月日 审核：日期：2015 年月日生效日期： 2016 年月日 批准：日期：2015 年月日发放份数：版次：第 1 版 分发部门：质量部、中心化验室 1.目的：阐述洁净室空气中沉降菌检测操作规程，保证药品质量，防止生产环境 对产品的污染。 2.范围：适用于本公司洁净区 ( 室) 的沉降菌的监测。 3.责任：沉降菌检测员。 4.内容： 基本概念： 菌落 : 细菌培养后 , 由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落 , 简称 CFU.通常 用个数表示。 沉降菌：用 GB/T16292-2010 提及的方法收集空气中的活性微生物粒子，通过 专门的培养基在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 沉降菌菌落数 : 规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以个 / 皿表示。 测试原理 : 本测试方法利用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒 子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，以平板培养皿中的菌落数来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净区的洁净度。 测试方法： 使用的仪器设备和培养基: 高压消毒锅 : 使用时应严格按照操作规程进行。
恒温培养箱 : 必须定期对培养箱的温度计进行检定。 培养皿 : 一般采用φ 90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。使用前将培养皿置于121℃湿热灭菌 20min。 培养基 : 胰酪大豆胨琼脂培养基。 将培养基加热熔化，冷却至约45℃在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每 皿约 15ml。待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入32℃恒温培养箱中培养72 小时若培养基平皿上确无菌落生长即可供采样用，制备好的培养基平皿应在 2-8 ℃的坏境中存放。 测试时间 : 对单向流，如 A 级净化房间内及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运 行不少于 10 分钟后开始。 对非单向流，如 B 级、 C级、 D 级以上的净化房间，测试应在净化空调系 统正常运行不少于 30 分钟开始。 采样点数目及其布置 : 最少采样点数目 : 沉降菌的最少采样点数可按表 1 确定。在满足最少测点数的 同时，不宜满足最少培养皿数，见表 2 表 1 最少采样点数目洁 净度等级 2 面积（ m） A、B级 C 级D级 ＜10 2-3 2 2 ≥10- ＜20 4 2 2 ≥20- ＜40 8 2 2 ≥ 40- ＜ 100 16 4 2 ≥100- ＜200 40 10 3 注：表中的面积，对于单向流洁净室，指的是送风面积，对于非单向流洁净室，
沉降菌检测规程
1目的 通过对环境进行沉降菌检测，作为确认环境是否符合规定要求及改善环境的依据。 2范围 沉降菌检测 3职责 检验人员按本规程操作，实验主管监督本规程的实施。 4程序 4.1洁净（区）clean room(area) 对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区域。其建筑结构、装备及其使 用均具有减少对该区域内污染源的介入、产生和滞留的功能。 4.2洁净工作台cleaning work station 一种工作台或者与之类似的一个封闭围挡工作区。其特点是自身能够供给经过过滤 的空气或气体，如垂直层流置、水平层流罩、垂直层流洁净工作、水平层流洁净工作台、 自净器等。 4.3洁净度cleanliness 洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径的悬浮粒子的允许统计数。 4.4菌落colony forming units 细菌培养后，有一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落，简称CFU。通常用个数表示。 4.5沉降菌settling microbe 用本标准提及的方法收集到的活微生物粒子，通过专用的培养基，在适宜的生长条 件下繁殖到可见的菌落数。 4.6单向流unidirectional air flow(曾称为层流laminar flow) 沿着平行流线，以单一通路以一定流速向单一方向流动的气流。 4.7非单向流nonumidirectional air flow(曾称为乱流turbulent flow) 具有多个通路循环特性或气流方向不平行的，不满足单向流定义的气流。 4.8静态测试at-rest test 洁净室（区）净化空气调节系统已处于正常运行状态，工艺设备已安装，洁净室（区） 内没有生产人员的情况下进行的测试。 4.9动态测试operational test 洁净室（区）已处于正常生产状态下进行的测试。 4.10洁净室环境要求、测试项目和频次。见表1 表1洁净室环境要求、测试项目和频次
沉降菌检验标准操作规程
01.0 目的 01.1 阐述洁净室（区）空气中沉降菌检测操作规程，保证药品的质量，防止生产环境对 产品的污染，保证实验室的环境达到检测产品的要求。 02.0 适用范围 02.1 适用于本公司的洁净室（区）的沉降菌监测和洁净度等级的验证。 03.0 人员职责 测试人员对洁净室（区）沉降菌的测试。 04.0 内容 04.1 术语和定义 下列术语和定义适用于本规程。 04.1.1 菌落：细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的细菌集落，简称CFU，通常用 个数来表示。 04.1.2 沉降菌：用GB/T16292-2010 提及的方法收集空气中的活性微生物粒子，通过专门 的培养基在适宜的生长条件下系繁殖到可见到的菌落数。 04.1.3 沉降菌菌落数：规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以cfu/ 皿表示。 04.2 测试原理：本测试方法利用沉降法，即通过自然沉降原理收集空气中的生物粒子于 培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，以平板培 养中的菌落数来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净区的洁净度。 04.3 监测周期：A级洁每次室验做监控， B 级每周一次，C级每季度一次，D级每半年一 次监控。 04.4 测试方法： 04.4.1 使用设备与材料 高压灭菌锅：使用时应严格按照操作规程进行。 恒温恒湿培养箱：必须定期对培养箱进行校验。 培养皿：一般采用φ90mm×15mm培养皿。 培养基：胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）；已灭菌配制好的培养基平皿放入30-35 ℃ 恒温培养箱中培养72 小时，若培养基平皿上确无菌落生生即可供采样用，制备好 的培养基平皿应放在2- 8℃的环境中存放。 清洁剂：75%酒精 04.4.2 测试时间： （1）对单向流，如 A 级净化房间内及超净工作台，测试应在净化空调系统正常运行不 少于10 分钟后开始。
保健食品车间洁净区沉降菌监测标准操作程序精编版
保健食品车间洁净区沉降菌监测标准操作程序 集团企业公司编码：（LL3698-KKI1269-TM2483-LUI12689-ITT289-
保健食品车间洁净区沉降菌监测标准操作程序 一、目的：建立洁净区中沉降菌的标准操作程序，保证产品在规定的洁净级别内生产。 二、适用范围：适用于洁净区的沉降菌的监测。 三、职责：质量监督员、质量检验人员 四、正文： 1 定义： 1.1洁净室：对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区 域。 1.2洁净工作台：处在垂直层流洁净罩下的工作台。 1.3洁净度：洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径的悬 浮粒子的允许统计数在规定范围内。 1.4菌落：细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落，简称CFU。 用个数表示。 2测试方法： 2.1方法概述：利用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生 物粒子于培养基平皿，经48小时以上培养，在适宜的条件下让其 繁殖到可见的菌落数，来评定洁净环境内的活微生物数，并以此 来评定洁净室（区）的洁净度。 2.2 所用的仪器和设备： 2.2.1高压消毒锅：使用时应严格按照操作规程进行。 2.2.2恒温培养箱：必须定期对培养箱的温度计进行检定。 2.2.3培养皿： 2.2. 3.1一般采用￠90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。 2.2. 3.2使用前将培养皿置于121℃湿热灭菌20min。 2.3 培养基：普通营养琼脂培养基。 2.3.1将培养基加热熔化，冷却至约45℃，在无菌操作条件下将培养 基注入培养皿，每皿约15ml。 2.3.2待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入30-35℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用，制备好的培养基平皿在2-8℃的环境中存放。
沉降菌检测标准操作规程ok
执行编写部门：文件编号：替代版本： 编写人签名：年月日 审核人签名：年月日 批准人签名：年月日 分发部门：执行日期： 沉降菌检验标准操作规程 1.目的 本文件规定了洁净室（区）中沉降菌检验的操作方法，保证检验人员操作规范化、标准化，确保洁净室洁净度。 2.范围 标准规定了医药工业洁净区中沉降菌的测试条件、测试方法。本标准适用于医药工业洁净室（区），无菌室（区）（包括洁净工作台）的沉降菌测定。本公司规定对万级净化实验室沉降菌检测项目进行一星期/次的检验。 3．职责 QC操作人员、QC管理人员严格按照此规程执行；相关使用人员做好洁净室清洁维护工作。 4.内容 4.1. 定义 4.1.1.洁净室（区） 对尘埃及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区域。其建筑结构、装备及其 使用均具有减少对区域内污染源的介入、产生和滞留的功能。 4.1.2.洁净工作台 一种工作台或者与之类似的一个封闭围档工作区。其特点是自身能够供给经过过 滤的空气或气体，垂直层流罩、水平层流罩、垂直层流洁净工作、水平层流洁净 工作台、自净器等。 4.1.3.洁净度 洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径的悬浮粒子的允许统计数。 4.1.4.菌落 细菌培养后，由一个或几个细菌系列而形成的一细菌集落，简称CFU。通常用个
数表示。 4.1. 5.沉降菌 用本标准提及的方法收集到的活微生物粒子，通过专用的培养基，在适宜的生长 条件下繁殖到可见菌落数。 4.1.6.静态测试 洁净室（区）净化空气调节系统已处于正常运行状态，工艺设备已安装，洁净室（区）内没有生产人员的情况下进行的测试。 4.1.7.动态测试 洁净室（区）已处于正常状态下进行的测试。 4.2. 测试方法 4.2.1.方法概述 采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若 干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌 落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。4.2.2.测试仪器和设备 高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱、培养皿。 4.2.3.培养基 营养琼脂培养基：培养基的准备及灭菌依照培养基配制及灵敏度测试标准操作规程准备。 4.2.4.测试步骤 4.2.4.1.采样 将已制备好的培养皿按5.3.4.1.3的要求放置，打开培养皿盖，使培养基表面 暴露于空气中0.5h，再将培养皿盖盖上后倒置。 4.2.4.2.培养 全部采样结束后，将培养皿倒置于在30～35℃生化培养箱中培养48h。每批 培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿作 对照培养。 4.2.4.3.菌落计数 4.2.4.3.1用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5-10倍放大镜检
沉降菌测试方法..
沉降菌测试方法 1、把ф90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180℃后，干烤2小时。 2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。 3、待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于33℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可采样用。制备好培养皿宜在2—8℃环境中保存。 4、采样时，一般在100级层流罩中放置3个培养皿，在100000级，10000级按面积大小一般放2个培养皿。打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上后倒置于恒温培养箱33℃培养，时间不小于48小时，采样点位置离地0.8m—1.5m左右。 5、将培养皿举起用肉眼直接计数，用记号笔点记然后用5—10倍放大镜检查是否遗漏，若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，分辨时仍以2个或2个以上菌落计数，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并注意细菌菌落与培养基沉淀物区别。 6、沉降菌测试前，被测洁净室已消毒。被测洁净室温湿度须达到规定要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值，测试状态有静态和动态两种，测试状态选择须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。 7、测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别工作服，静态测试时，室测试人员不得多于2人。测试时间对单向流100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始，对非单向流，100000级以上净化
房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min 后开始。 8、平均菌落数计算：M 1+M 2+M 3 平均菌落数= .........21n Mn M M ++ n —培养皿总数 M 1—1号培养皿菌落数 M 2—2号培养皿菌落数 M n —n 号培养皿菌落数 用平均菌落数判断洁净空气中微生物。洁净室平均菌落数必须低于所选定的评定标准，（100级≤1个；10000级≤3个；100000级≤10个）。若某洁净室平均菌落数超过标准，则必须对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。 人员进出洁净生产区的一般程序： 人员进出无菌操作洁净生产区程序：
药典沉降菌检测操作规程
程，保证药品质量，防止生产环境对产品的污染。 2.范围：适用于本公司洁净区(室)的沉降菌的监测。 3.责任：沉降菌检测员。 4.内容： 4.1基本概念： 4.1.1菌落:细菌培养后,由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落,简称CFU.通常用个数表示。 4.1.2沉降菌：用GB/T16292-2010提及的方法收集空气中的活性微生物粒子，通过专门的培养基在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 4.1.3沉降菌菌落数:规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以个/皿表示。 4.2测试原理:本测试方法利用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，以平板培养皿中的菌落数来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净区的洁净度。
4.3测试方法： 4.3.1使用的仪器设备和培养基: 高压消毒锅:使用时应严格按照操作规程进行。 恒温培养箱:必须定期对培养箱的温度计进行检定。 培养皿:一般采用φ90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。使用前将培养皿置于121℃湿热灭菌20min。 培养基:胰酪大豆胨琼脂培养基。 将培养基加热熔化，冷却至约45℃在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入32℃恒温培养箱中培养72 小时若培养基平皿上确无菌落生长即可供采样用，制备好的培养基平皿应在2-8℃的坏境中存放。 4.3.2测试时间: 对单向流，如A级净化房间内及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后开始。 对非单向流，如B级、C级、D级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30分钟开始。 4.3.3采样点数目及其布置: 最少采样点数目:沉降菌的最少采样点数可按表1确定。在满足最少测点数的同时，不宜满足最少培养皿数，见表2 表1 最少采样点数目
沉降菌检验标准操作规程
01.0目的 01.1阐述洁净室（区）空气中沉降菌检测操作规程，保证药品的质量，防止生产环境对 产品的污染，保证实验室的环境达到检测产品的要求。 02.0适用范围 02.1适用于本公司的洁净室（区）的沉降菌监测和洁净度等级的验证。 03.0人员职责 测试人员对洁净室（区）沉降菌的测试。 04.0内容 04.1术语和定义 下列术语和定义适用于本规程。 04.1.1菌落：细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的细菌集落，简称CFU，通常 用个数来表示。 04.1.2沉降菌：用GB/T16292-2010 提及的方法收集空气中的活性微生物粒子，通过专门 的培养基在适宜的生长条件下系繁殖到可见到的菌落数。 04.1.3沉降菌菌落数：规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以cfu/ 皿表示。 04.2测试原理：本测试方法利用沉降法，即通过自然沉降原理收集空气中的生物粒子于 培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，以平板培 养中的菌落数来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净区的洁净度。 04.3监测周期：A级洁每次室验做监控，B级每周一次，C级每季度一次，D级每半年 一次监控。 04.4测试方法： 04.4.1使用设备与材料 高压灭菌锅：使用时应严格按照操作规程进行。 恒温恒湿培养箱：必须定期对培养箱进行校验。 培养皿：一般采用φ90mm×15mm培养皿。 培养基：胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）；已灭菌配制好的培养基平皿放入30-35℃ 恒温培养箱中培养72小时，若培养基平皿上确无菌落生生即可供采样用，制备好 的培养基平皿应放在2-8℃的环境中存放。
沉降菌检测操作规程
●1、目的 规范洁净区和洁净室沉降菌测试条件和测试方法。 ●2、适用范围 适用于公司洁净区、洁净室或局部空气净化区域（如：洁净工作台）的沉降菌的测试和环境验证。 ●3、引用文件 ?化妆品卫生规范-2007 ?GB/T 16294-2010 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法 ●4、定义 ? 4.1 沉降菌：用本测试规定的方法收集空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件 下繁殖的可见菌落数。 ? 4.2 沉降菌菌落数：规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以（个/皿）表示 ●5、仪器和设备 ? 5.1 灭菌培养皿90mm *15mm ? 5.2 培养基。 ? 5.3 恒温培养箱。 ? 5.4 高压灭菌器。 ? 5.5 放大镜 ●6、培养基和试剂 ? 6.1 生理盐水： 成份﹕氯化钠 8.5g 蒸馏水加至 1000ml 制法﹕溶解后﹐分装到加玻璃珠的三角瓶内﹐每瓶90ml﹐121℃（15 1b）2 0 mi n，高压灭菌。 ? 6.2 卵磷脂、吐温80—营养琼脂培养基 6.2.1 成分：蛋白胨20g 牛肉膏3g
File Name:沉降菌检测操作规程P age 2 of 3 氯化钠5g 琼脂15g 卵磷脂1g 吐温80 7g 蒸馏水1000mL 6.2.2制法：先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温80，将其他成分（除琼脂外）加到 其余的蒸馏水中，溶解。加入已溶解的卵磷脂、?吐温80，混匀，调pH 值为7.1～7.4，加 入琼脂，103.43kPa（121℃15 lb）20min 高压灭菌，储存于冷暗处备用。 ●7、操作步骤 ?7.1 取样： 7.1.1 取样点的设置： A) 最少取样点数：灌装间、制造间3个，其他洁净区2 个； B) 取样点的位置：取样点应均匀分布在待测试区域内，一般离地高度为0.8m左右，关键设备处 可增加取样点； C）每个取样点一般取样一次，每次一般为2个取样皿； D) 布置采样点时，应避免回风口； 7.1.2 取样时间：可采用动态取样和静态取样： A) 动态取样：正常生产，且空气净化系统正常运转30分钟后开始取样； B）静态取样：员工己撤离生产区域，且空气净化系统正常运转至少20分钟后；静态取样时人员 不得多于2人； 7.1.3 取样 A）将制备好的培养皿逐个放置到采样点，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养皿暴露在空气中； B）静态测试时，培养皿的暴露时间为30分钟以上；动态测试时，培养皿的暴露时间不得大于4个小时 ?7.2 置于37±1℃恒温培养箱内培养至少48小时，记录每个平皿的菌落数； ●8、菌落计数方法： ?8.1先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5 倍～10 倍的放大镜检查，以防遗漏； ?每个测点的沉降菌总数为该测点所有培养皿菌落数的平均数； ●9、结果评定： ?9.1 每个测点的菌落数必需低于该洁净区的标准时判定符合要求； ?9.2 静态测试时，如某测点的的菌落平均数超过标准，应再重新取样两次，两次都低于标准时才能判
洁净车间沉降菌检测记录
沉降菌检测记录 记录编号：AI/R QA-005 检测依据:《GB/T16294-2010医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法》 检测步骤： 1 培养皿(￠90mm×15mm的玻璃培养皿) 采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现破损或污染的应剔除。 将培养皿121℃湿热灭菌20分钟或于180℃干热灭菌2小时，灭菌后取出备用。 2 培养基配制 取适量培养基，按培养基说明书配制比例加纯化水后加热溶解，溶解后分装于烧瓶，放入高温灭菌锅，121℃高温下灭菌20分钟后取出备用。 灭菌后的培养基冷却至约60℃，在万级洁净室中的百级超净台上，无菌操作要求下将灭菌过的培养基分装于培养皿中，每个培养皿约20mL，冷却凝固后便可使用。 制备好的培养基平皿应在2℃~8℃保存，一般有效期以一周为宜或按厂商提供的标准执行，需保存的剩余培养基应采用适宜方法在平皿上做好培养基的名称及制备日期的标记。 3 采样方法 将已制备好的培养皿按测点图的要求放置，打开培养皿盖，使培养基表面暴露，再将培养皿盖盖上后倒置。 4 培养 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。 在30℃-35℃培养箱中培养，时间不少于48h。 培养皿在用于检测时，为避免培养基本身污染，每次取3个对照皿同时进行对照试验，与采样皿同法操作但不需暴露采样，然后与采样后的培养皿一起放入培养箱内培养，作阴性对照培养，结果应无菌落生长。 5 菌落计数 用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，有条件的可用5-10倍放大镜检查有否遗漏。若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。 检测记录：
注：1、结果判定栏中，用“√”表示。 2、若部分洁净区域检测不符合，则需重新打扫卫生后复测。检测人：复核人：
洁净室(区)沉降菌检测标准操作规程
目的 制定标准的洁净室（区）沉降菌的测试方法，指导沉降菌的测试工作。 范围 适用于洁净室（区）沉降菌的测定和验证。 责任 QC微生物室检验员负责洁净室（区）沉降菌的测试，QC主管和QA部门负责对测试的数据进行统计分析。 程序 1.定义 1.1.菌落：微生物培养后，由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落， 简称CFU。 1.2.沉降菌：通过自然沉降原理收集在空气中的活微生物粒子，通过专用的培 养基，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数。 1.3.动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态设备在指定的方式下进行， 并且有指定的人员按照规范操作的状态。 2.测试方法 2.1.测试过程 2.1.1.设备和培养基：恒温培养箱、购买预灌装TSA平皿或者自制TSA平皿。 2.2.测试条件 2.2.1.洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应（无特殊 要求时，温度在18~26℃，相对湿度在45%~65%为宜）。 2.2.2.风速、压差应在合格范围内。 2.2. 3.动态测试。
2.3.测试方法 2.3.1.将准备好的培养皿按采样点要求放置或放在沉降架上（约1.0m）。将采 样台面取样位置或采样辅助设施表面消毒，打开培养皿，将培养皿盖置于已消毒位置，将培养皿置于培养皿盖上，使培养基表面充分暴露后，将培养皿盖盖上后倒置。 2.3.2.在每一只培养皿上标记好具体的取样位置及取样日期，将所有培养皿在 QC微生物室进行培养观察。 2.4.培养观察计数 2.4.1.全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养，在20~25℃培养 箱中培养3天，30~35℃培养箱中培养2天后观察计数。 2.4.2.每批培养基应有阴性对照试验，检验培养基本身是否污染。可每次选定 2只培养皿作对照培养。 2.5.计算 2.5.1.平均菌落数M= M1＋M2＋…MN N M1＝1号培养皿菌落数 M2＝2号培养皿菌落数 Mn＝n号培养皿菌落数 n＝培养皿总数 2.5.2.结果判定 2.5.2.1.最终结果采用平均值。但每个碟的菌落数亦不得多于标准规定。 2.5.2.2.如有一个碟的菌落数超过标准规定，平均却符合规定，也以不合格论。 2.5.2. 3.静态测试时，若某洁净室（区）内的平均菌落数超过评定标准，则必须 对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。 2.6.注意事项 2.6.1.若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以 上菌落计数。 2.6.2.采取一切措施防止人为因素对样本的污染。
沉降菌检验标准操作规程
01.0目得 01.1阐述洁净室(区）空气中沉降菌检测操作规程,保证药品得质量,防止生产环境对产品 得污染,保证实验室得环境达到检测产品得要求。 02.0适用范围 02.1适用于本公司得洁净室(区)得沉降菌监测与洁净度等级得验证。 03.0人员职责 测试人员对洁净室（区）沉降菌得测试. 04.0内容 04.1术语与定义 下列术语与定义适用于本规程。 04.1.1菌落:细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成得细菌集落，简称CFU，通常用 个数来表示. 04.1.2沉降菌：用GB/T１62９２－2010提及得方法收集空气中得活性微生物粒子,通过 专门得培养基在适宜得生长条件下系繁殖到可见到得菌落数. 04.1.3沉降菌菌落数：规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌得数目,以cfu／皿 表示. 04.2测试原理：本测试方法利用沉降法，即通过自然沉降原理收集空气中得生物粒子于 培养基平皿，经若干时间，在适宜得条件下让其繁殖到可见得菌落数，以平板培 养中得菌落数来评定洁净环境内得活微生物数，并以此来评定洁净区得洁净度。 04.3监测周期：A级洁每次室验做监控,B级每周一次,C级每季度一次,D级每半年一次 监控. 04.4测试方法: 04.4.1使用设备与材料 高压灭菌锅：使用时应严格按照操作规程进行。 恒温恒湿培养箱:必须定期对培养箱进行校验。 培养皿:一般采用φ90ｍm×15mm培养皿。 培养基:胰酪大豆胨琼脂培养基（TＳA)；已灭菌配制好得培养基平皿放入30－ 35℃恒温培养箱中培养72小时,若培养基平皿上确无菌落生生即可供采样用,制备 好得培养基平皿应放在2—8℃得环境中存放。 清洁剂:75%酒精 04.4.2测试时间: （１)对单向流，如A级净化房间内及超净工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后开始。 (2)对非单向流,如B级、Ｃ级、D级以上得净化房间,测试应在净化空调系统正常运行不 少于30分钟后开始。 （3)培养皿得采样时间：静态测试时，培养皿暴露时间为３0miｎ以上；
沉降菌测试方法
沉降菌测试方法 1、把ф90m m×15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180℃后，干烤2小时。 2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。 3、待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于33℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可采样用。制备好培养皿宜在2—8℃环境中保存。 4、采样时，一般在100级层流罩中放置3个培养皿，在100000级，10000级按面积大小一般放2个培养皿。打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上后倒置于恒温培养箱33℃培养，时间不小于48小时，采样点位置离地0.8m—1.5m左右。 5、将培养皿举起用肉眼直接计数，用记号笔点记然后用5—10倍放大镜检查是否遗漏，若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，分辨时仍以2个或2个以上菌落计数，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并注意细菌菌落与培养基沉淀物区别。 6、沉降菌测试前，被测洁净室已消毒。被测洁净室温湿度须达到规定要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内，测试状态有静态和动态两种，测试状态选择须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。 7、测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别工作服，静态测试时，室内测试人员不得多于2人。测试时间对单向流100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始，对非单向流，100000级以上净
化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min 后开始。 8、平均菌落数计算：M 1+M 2+M 3 平均菌落数= .........21n Mn M M ++ n —培养皿总数 M 1—1号培养皿菌落数 M 2—2号培养皿菌落数 M n —n 号培养皿菌落数 用平均菌落数判断洁净空气中微生物。洁净室内平均菌落数必须低于所选定的评定标准，（100级≤1个；10000级≤3个；100000级≤10个）。若某洁净室内平均菌落数超过标准，则必须对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。 人员进出洁净生产区的一般程序： 人员进出无菌操作洁净生产区程序：
沉降菌监测规程
沉降菌监测规程 一、目的 建立沉降菌监测方法，规范沉降菌监测操作。 二、范围 适用于西厂区车间洁净室、无菌检查室、阳性室、洗衣房、取样间、微生物室的沉降菌监测。 三、职责 检验中心人员负责车间洁净室、洗衣房、取样间的采样工作；负责各部分所需的材料准备、培养、菌落计数，以及无菌检查室、阳性室、微生物室监测的采样内容的执行。 质量中心负责人负责本规程执行情况的监督检查。 四、内容： 1.仪器与用具 1.1 培养皿（φ90mm） 1.2 恒温培养箱 1.3 高压蒸汽灭菌锅 2.监测程序 2.1 将已准备好的合格的空白培养皿放入物料缓冲间。 2.2 检测人员按人员进入洁净区的要求穿好洁净服，戴好口罩进入洁净室。 2.3 按此《沉降菌监测规程（西厂区）》对环境进行监测。 3.测试规则 3.1测试条件 3.1.1温度和相对湿度 沉降菌测试前，被测试洁净室（区）的温度和相对湿度应与生产工艺等要求相适应（温度控制在18～26℃，相对湿度控制在45%～65%之间）。 3.1.2压差 沉降菌测试前，洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净室（区）之间的压差应当不低于10帕斯卡，空气洁净度级别要求高的洁净室（区）对相邻的空气洁净级别低的洁净室（区）一般要求相对正压。 3.1.3换气次数、空气流速
3.2测试状态 静态测试：静态测试时，室内测试人员不得多于2人。 动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态下进行的测试。 测试状态有静态和动态两种，测试状态的选择必须符合生产的要求，并在报告中注明测试状态。（在正常的生产操作监测外，可在系统验证、清洁或消毒等操作完成后增加微生物监测。） 3.3测试时间 3.3.1对单向流，如C级背景下的局部A级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始。 3.3.2 对非单向流，如C级、D级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。 3.4测试方法 采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。 3.4.1采样方法 静态：将已制备好的培养皿按4项的要求及采样点平面图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中0.5h后，再将培养皿盖盖上。 动态：将已制备好的培养皿按4项的要求及采样点平面图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中4h后，再将培养皿盖盖上。动态取样应当避免对洁净区造成不良影响。 3.4.2培养 3.4.2.1全部采样结束后,将培养皿倒置于30℃～35℃恒温培养箱中培养，时间不少于72h。 3.4.2.2用于检测的培养皿应经过预培养合格后使用，为避免运输过程造成影响，在每次取样时，取3个培养皿与其他采样皿同法操作但不暴露采样，然后与采样后的培养皿同时培养，结果应无菌生长。 3.4.3菌落计数 3.4.3.1用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查是否有遗漏。 3.4.3.2若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。 3.5 测试人员要求 测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。
洁净区沉降菌培养检验操作规程
管理文件 一、目的：规范洁净区沉降菌培养检验操作标准 二、适用范围：洁净区沉降菌培养检验操作操作 三、责任者：质量管理部 四、内容： 1.沉降菌培养 1.1由QC人员将复核的培养皿转移至恒温培养箱； 1.2培养前，培养箱温度应设为32℃或者22℃，1小时后检测培养箱温度是否恢复正常；1.3采用大豆酪蛋白琼脂培养基配制的培养皿时，在32℃的培养箱中培养，培养时间为2天；采用沙氏培养基配制的培养皿时，在22℃培养箱中培养，时间为5天； 1.4培养时每天检测培养箱温度一次，以培养箱中温度计温度为准。 2.检测（菌落计数） 2.1用肉眼对培养皿上所有菌落直接计数，专人复核是否计数有遗漏； 2.2若平板上有2个或者2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数；2.3计数时一般用透射光对培养皿背面或正面仔细观察，不要漏记培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别。必要时，用显微镜鉴别； 2.4将所计数菌落进行记录，然后进行结果计算。 3.结果计算： 3.1用计数方法得出各个培养皿的菌落数， 按下式计算： 式中： M——平均菌落数 M 1——1号培养皿菌落数
M ——2号培养皿菌落数 2 Mn——n号培养皿菌落数 N——培养皿总数 3.2结果评定： 3.2.1用平均菌落数判断洁净室（区）空气中微生物； 3.2.2洁净室（区）内的平均菌落数必须低于所选定的评定标准； 3.2.3若某洁净室（区）内的平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。 4.洁净区沉降菌检测标准： 4.1洁净区沉降菌检测静态标准： 4.2洁净区沉降菌检测动态标准： 5.非主要工作区的其他洁净区域，静态测试频次为每半年测试一次，动态测试频次为每一年 测试一次。
药典沉降菌检测操作规程
药典沉降菌检测操 作规程
1.目的：阐述洁净室空气中沉降菌检测操作规程，保证药品质量，防止生产环境对产品的污染。 2.范围：适用于本公司洁净区(室)的沉降菌的监测。 3.责任：沉降菌检测员。 4.内容： 4.1基本概念： 4.1.1菌落:细菌培养后,由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落,简称CFU.一般见个数表示。 4.1.2沉降菌：用GB/T16292- 提及的方法收集空气中的活性微生物粒子，经过专门的培养基在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 4.1.3沉降菌菌落数:规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以个/皿表示。
4.2测试原理:本测试方法利用沉降法，即经过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，以平板培养皿中的菌落数来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净区的洁净度。 4.3测试方法： 4.3.1使用的仪器设备和培养基: 高压消毒锅:使用时应严格按照操作规程进行。 恒温培养箱:必须定期对培养箱的温度计进行检定。 培养皿:一般采用φ90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。使用前将培养皿置于121℃湿热灭菌20min。 培养基:胰酪大豆胨琼脂培养基。 将培养基加热熔化，冷却至约45℃在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入32℃恒温培养箱中培养72 小时若培养基平皿上确无菌落生长即可供采样用，制备好的培养基平皿应在2-8℃的坏境中存放。 4.3.2测试时间: 对单向流，如A级净化房间内及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后开始。
沉降菌测试原始记录
微生物检验室沉降菌测试原始记录 评定标准十万级w 10CFU 皿；万级w 3CFU 皿；百级w 1CFU 皿 RSB60-00 °C 采样点图示 见附图： 报告日期 _________
结 论 _______________________ 检验者 ____________ 复核者 ___________________ RSB64-00 固体制剂车间沉降菌测试原始记录（ 2） 编 号______________________ 测试依据 SPG108-01 环境温度________________ °C 培养基批号__________________ 测试单位 ______________ 测试状态 ______________ 相对湿度% _____________ 培养温度 ______________ 采样点图示 见附图：
评定标准：十万级w 10CFU皿；万级w 3CFU皿；百级w 1CFU皿 结论___________________检验者_________________ 复核者______________ RSB63-00 固体制剂车间沉降菌测试原始记录（1 ）
评定标准： 十万级w 10CFU/皿； 万级w 3CFU/皿； 百级w 1CFU/皿 结 论 检验者 复核者 _____________________ RSB61-00 原料车间沉降菌测试原始记录 编 号 ______________________ 测试单位 ________________ 测试依据 SPG108-01 测试状态 _______________ 环境温度 _______________ ° C 相对湿度% ______________ 培养基批号 _________________ 培养温度 _________________ °C 静压差 ___________________ 检测日期 __________________ 报告 采样点图示 见附图： 日期