农残检测方法

1. 农残试剂配置

缓冲溶液：取一包缓冲剂，加入 500ml 蒸馏水，溶解搅拌均匀，密闭、避光、阴凉 处保存。

显色剂：取显色剂一瓶，加入15ml 缓冲溶液溶解，4C 冰箱中保存。

底物：取底物一瓶，加入15ml 蒸馏水溶解，4C 冰箱中保存。

乙酰胆碱酯酶：取乙酰胆碱酯酶一瓶，用 3ml 缓冲溶液溶解，4 C 冰箱中保存。

注：因农残试剂生产厂家众多，使用时请以试剂说明书为准！

2. 样品处理

选取有代表性的蔬菜样品，擦掉样品表面泥土，剪成 1cm 见方碎片，取样品1g ,

放入烧杯或提取瓶中，加入5ml 缓冲溶液，振荡1min ?2min ，倒出提取液，静置3min

5mi n ，待用。

注意：样品不可用水冲洗，应擦去表面泥土等杂物后取样。为了保证取样具有代表性， 叶菜一般取来自不同植株叶片的叶尖部样本，果菜从不同个体的表皮处取样。

3. 对照溶液测试

在提取瓶中加入缓冲溶液，再加入lOOul 酶液、lOOul 15分钟（每批样品的控制时间必须一致 ）。15分钟后再加入 开始显色反应，应立即倒入1cm 比色皿，放入仪器比色池中, 作指示面板按键区的“对照”按钮，仪器开始做对照。 3分钟后仪器自动对照完

成，对 照完成后将对照样取出，保持仪器界面不变。

注意：对照测试必须在第一通道进行，对照测试△ A 应＞，若对照测试的结果小于 以上数值时， 仪器会自动提示 “对照错误” ，须重新做对照， 以保证测量结果的准确性。

（对照测试^ A ＜的原因：一是酶的活性不够，二是反应温度太低。

）

4. 样品溶液测试 另取干净的提取瓶，放入样品提取液，加入 100ul 酶液、 100ul 显色剂，摇匀后于

37C 放置15分钟（放置的时间与对照液放置的时间必须一致）。15分钟后再加入100卩L 底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即倒入1cm 比色皿，放入仪器比色池中，按操作 指示面板按键区的“测量”按钮开始测量， 3分钟后仪器测量完成，显示测量结果。结

显色剂，摇匀后于37 C 放置

100卩L 底物摇匀，此时检液 将仪器调到测量界面 , 按操

果以酶被抑制的程度（抑制率）表示，当蔬菜样品提取液对酶的抑制率》50%寸，表示

蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果，阳性结果的样品需要重复检验2 次以上。

对阳性结果的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。

5.说明

葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物

质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株（体）蔬菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株（体）蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。

甲醛检测方法

1. 试剂配置

甲醛试剂（一）

甲醛试剂（二）：将甲醛试剂（二）①加少量热水溶解，再加入甲醛试剂（二）

②，冷却后定容于50ml容量瓶

注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱4C）保存！甲醛试剂（一）有腐蚀性；配

制好的甲醛试剂（二）可使用一个月。

2. 样品处理

准确称取样品放入哈希管中，加入5滴甲醛试剂（一）和10ml蒸馏水，混匀后盖

紧瓶盖，放入沸水中加热5min,取出冷却至室温，用卩m微孔滤膜过滤，以除去悬浮颗粒，此为待测

溶液。

3. 空白

取蒸馏水10ml于10ml比色管中，加入甲醛试剂（二）1 ml，混合均匀，放入恒温

水浴锅中50C加热15分钟，取出冷却至室温，移入1cm比色皿中，放入仪器相应比色

池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。

4. 测量

移取处理好的样品溶液5ml于10ml比色管中，加入蒸馏水定容至10ml，然后再加

入甲醛试剂（二）1 ml，混合均匀，放入恒温水浴锅中50C加热15分钟，取出冷却至室温，移入1 cm 比色皿中，放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中甲醛浓度值X（mg/kg）。

1. 试剂配置

吊白块试剂（一）

吊白块试剂（二）：将吊白块试剂（二）①加少量热水溶解，再加入吊白块试剂（二） ②，冷却后定容于50ml 容量瓶

注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱 4C ）保存！吊白块试剂（一）有腐蚀性;

配制好的吊白块试剂（二）可使用一个月。

2. 样品处理

准确称取0.2g 样品放入哈希管中，加入5滴吊白块试剂（一）和10ml 蒸馏水，混 匀后盖紧瓶盖，放入沸水中加热5min ,取出冷却至室温，用卩m 微孔滤膜过滤，以除去 悬浮颗粒 ,此为待测溶液。

3. 空白

取10ml 蒸馏水于10ml 比色管中，加入吊白块试剂（二）1 ml ，混合均匀，放入恒

温水浴锅中50C 加热15分钟，取出冷却至室温，移入1cm 比色皿中，放入仪器相应比 色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照 结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。

4. 测量

移取处理好的样品溶液5ml 于10ml 比色管中，加入蒸馏水定容至10ml ，然后再加 入吊白块试剂（二）1 ml ，混匀后放入恒温水浴锅中50C 加热15分钟，取出冷却至室

温，移入1 cm 比色皿中，放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”

键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中吊白块浓度值

双氧水检测方法 1. 试剂配置

双氧水试剂（一）

双氧水试剂（二）

注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱 4C ）保存！双氧水试剂（一）有腐蚀性,

双氧水试剂（二）有毒。

2. 样品处理

准确称取1.0g 样品放入哈希管中，加2ml 双氧水试剂（一）和6ml 蒸馏水，混匀 后盖紧瓶盖，放入恒温水浴锅 50C 下加热10min ,取出冷却至室温，用 卩m 微孔滤膜

吊白块检测方法

X （ mg/kg ）。

过滤，滤液移入10ml 比色管中，加双氧水试剂（二），再加蒸馏水至 10ml 刻度，此为

待测溶液。

3. 空白

向比色管中加入2ml 双氧水试剂（一）和双氧水试剂（二），再加蒸馏水至 10ml 刻度，混匀，转入1cm 比色皿，放入仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照” 键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测 量完成”。

4. 测量

向待测液中加入 2ml 双氧水试剂（一）和双氧水试剂（二） ，再加蒸馏水至 10ml 刻

度，摇匀，转入1cm 比色皿中，放入仪器比色池中进行测量，测量完成后，仪器会自动 显示样品浓度结果 X （ mg/kg ）。

亚硝酸盐检测方法

1. 试剂配置

加少量热蒸馏水溶解，冷却后定容于 50mL 容量瓶。

棕色容量瓶，避光保存。

亚硝酸盐试剂（五）：加蒸馏水溶解，定容于 100mL 棕色容量瓶,

注意:除试剂（一）需常温保存外所有试剂均需避光、低温（冰箱 硝酸盐试剂（一）容易析出，请用 50C 左右水浴加热1分钟后使用。配制好的亚硝酸

盐试剂（五）有腐蚀性，可放置一个月左右，溶液变绿后不能使用。 2. 样品处理

准确称取0.1g 经搅碎混匀的试样，置于哈希管中，加入 1mL 亚硝酸盐试剂（一）

和5mL 的蒸馏水，密闭后于沸水浴中加热 15min ,取出后冷却至室温，然后一面转动

一面加入1mL 亚硝酸盐试剂（二），摇匀，再加入 1mL 亚硝酸盐试剂（三），以沉淀

亚硝酸盐试剂（一） 亚硝酸盐试剂（二）

加蒸馏水溶解，定容于 50mL 容量瓶。 亚硝酸盐试剂（三）

于 50ml 容量瓶。

将两种亚硝酸盐试剂（三）溶于少量热水中，冷却后定容

亚硝酸盐试剂 （四） :将亚硝酸盐试剂（四）①加亚硝酸试剂（四）

②定容于 100mL 避光保存。

4C ）保存！亚

蛋白质。加水至1Oml 刻度，摇匀，放置小时，除去上层脂肪，余液用卩

m 微孔滤膜过

滤，滤液备用。 3. 对照测试

取5ml 蒸馏水于1Oml 比色管中，加入亚硝酸盐试剂（四），混匀，放置 5min 后加 入试剂

（五），混匀，静置15分钟，转入1cm 比色皿，放入仪器相应比色池中，按操 作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显 示屏下方显示为“对照测量完成”。

4. 样品测定

取5ml 待测溶液于1Oml 比色管中，加入亚硝酸盐试剂（四）混匀，放置 5min 后加

入试剂（五），混匀，静置 15分钟，转入 1cm 比色皿，放入已经做过对照的仪器通道 中按操作提示面板区的“测量”键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中亚硝酸 盐浓度值 X （ mg/kg ）。

六价铬检测方法

1. 试剂配置

释至100ml ，储存于棕色瓶中置冰箱内保存。

注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱 4C ）保存！六价铬试剂（一）、六价铬试

剂（二）、六价铬试剂（三）、六价铬试剂（四）有腐蚀性；当配制好的六价铬试剂 （五） 溶液色变深后不能使用。

2. 样品处理

操作步骤

① 将待测的粮食、蔬菜、水果类样品洗净晾干，碾碎，混匀备用。禽蛋、水产等

洗净、晾干，取可食部分，混匀备用。

② 取经过预处理的均匀样品 1.OOOg 于哈希管中（敞开），加入试剂（一）纯硝酸，

试剂（二）过氧化氢溶液，轻轻摇匀，放入亚临界水萃取仪中， 从温度升到 14OC

六价铬试剂

一）：加蒸馏水稀释，定容于 lOOmL 容量瓶 六价铬试剂

二）：加蒸馏水稀释，定容于 lOOmL 容量瓶 六价铬试剂

加蒸馏水稀释，定容于 lOOmL 容量瓶 六价铬试剂

四） lOOmL 容量瓶 六价铬试剂 五） 加蒸馏水稀释，定容于 将六价铬试剂（五）①溶解于六价铬试剂（五）②中，加水稀

时开始计时，保持恒温lh ，同时做试剂空白，取出哈希管待自然冷却后，将消解液移入

l0mL 比色管中，将哈希管用水洗净，合并洗液于比色管中，用水稀释至10ml 刻度，混

匀、待测。

3. 对照测试

取10ml 蒸馏水于10ml 比色管中，向比色管内加入六价铬试剂（三）和六价铬试剂（四），混匀，再加入试剂（五）摇匀，放置10min后，转入1cm比色皿，放入仪

器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。

4.样品测定

取待测溶液，加蒸馏水稀释至刻度，再向比色管内加入六价铬试剂（三）和六价铬试剂（四），混匀，再加入试剂（五）摇匀，放置lOmin后，转入1cm比色皿，放入

已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中六价铬浓度值X（mg/kg）。

重金属检测方法

1. 试剂配置

重金属试剂（一）

重金属试剂（二）

重金属试剂（三）：加少量蒸馏水溶解，定容于100ml 容量瓶

重金属试剂（四）：加少量蒸馏水溶解，定容于100ml 容量瓶

注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱4C）保存！重金属试剂（一）、重金属试剂（二）有腐蚀性。

2. 样品处理

操作步骤

③将待测的粮食、蔬菜、水果类样品洗净晾干，碾碎，混匀备用。禽蛋、水产等

洗净、晾干，取可食部分，混匀备用。

④取经过预处理的均匀样品于哈希管中，加入2mL 重金属试剂（一），2mL 重

金属试剂（二），4ml蒸馏水，轻轻摇匀，盖紧上盖，放入超声波提取仪中提取10 分钟，

取出哈希管待自然冷却后，打开上盖，过滤将溶液移入10ml 比

色管中，加重金属试剂（四）调节溶液 PH=9加水至刻度，此为待测溶液。

3. 对照测试

取10ml 蒸馏水于比色管内，加入1ml 重金属试剂（三），混匀，放置 10min 后,

转入1cm 比色皿，放入仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照, 对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。

4. 样品测定

取待测溶液，加蒸馏水稀释至刻度，再向比色管内中加入 1ml 重金属试剂（三）， 混匀，放置lOmin 后，转入1cm 比色皿，放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示 面板区的“测量”键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中重金属浓度值 X

mg/kg ）。

氧化硫检测方法

1. 试剂配置

容于 5Oml 容量瓶

二氧化硫试剂（八）

注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱 4C ）保存！二氧化硫试剂（一）有毒,

氧化硫试剂（七）、二氧化硫试剂（八）有腐蚀性。

2. 样品处理

水溶性固体样如白砂糖称取1.0g ，用少量水溶解，置于10ml 比色管中，加入二氧化 硫试剂

（七）， 5 分钟后加入二氧化硫试剂（八），然后加入 2ml 二氧化硫试剂（一）， 加水至刻度，混匀，此为待测溶液。

其他固体样如饼干、 粉丝称取 1.0g 研磨均匀的试样， 以少量水润湿并移入 10ml 比色 管中，加入 2ml 二氧化硫试剂（一），浸泡 4 小时以上，若上层溶液不澄清可加入二氧 化硫试剂（四）及二氧化硫试剂（五）各，混匀，过滤，加水至刻度，此为待测溶液。 二氧化硫试剂

二氧化硫试剂

二氧化硫试剂

二氧化硫试剂

四） 定容于 500ml 容量瓶 定容于 50ml 容量瓶 定容于 50ml 容量瓶 氧化硫试剂

五） ：将两种二氧化硫试剂（五）混合，用热水溶解，冷却后定

氧化硫试剂 六） :将二氧化硫试剂（六）①溶解定容于 50ml 容量瓶中，取出

20ml 于100ml 容量瓶中,

滴加二氧化硫试剂（六）②混匀使溶液由红变黄，加水至刻 二氧化硫试剂（七） ：加蒸馏水溶解，定容于 50ml 容量瓶

：加蒸馏水溶解， ：加蒸馏水溶解， ：加蒸馏水溶解，