血浆氨测定及临床意义
血浆氨测定及临床意义
【正常参考值】健康成年人血浆氨浓度为18～72 μmol/L，女性比男性低约10%。【临床意义】
正常情况下，氨在肝脏内转变成尿素。严重肝脏疾病进，氨不能从循环中清除，引起血氨增高。高血氨有神经毒，引起肝性脑病（肝昏迷）。成人血浆氨测定主要用二肝昏迷的监测和处理。
另外，血浆氨测定可用二儿科诊断Reye’s综合征。该综合征有严重低血糖，大块肝坏死，急性肝衰竭，并伴有肝脂肪变性。在肝酶谱增高前，即可见血浆氨增高。对诊断某些先天性代谢紊乱，如鸟氨酸循环的氨基酸代谢缺陷（高血氨）也有一定价值。
实验六肝脏谷丙转氨酶活力测定
肝脏谷丙转氨酶活力测定 进入实验室要注意的问题 安全第一，在实验室中使用挥发性试剂时应在通风橱中进行，以免发生中毒事件；不得在实验室中随意使用明火，因为实验室中有许多易燃易爆药品，使用明火可能引起火灾或引发爆炸事件；不得在实验室吃东西，实验结束后也应将手洗净再吃东西。在实验室中不得嬉戏打闹，更不得用实验药品互相开玩笑。实验中使用药品应尽量节约，不得浪费药品，未使用完的药品因倒人废液缸或指定的容器中，切不可倒入原试剂瓶以免污染试剂。实验完成之前不能离开实验室，如有特殊原因要离开需经实验室负责人批准才能离开。每个实验台内的各种仪器的摆放顺序要牢记，离开实验室前要将仪器按顺序摆放好。养成一个好的习惯。 一．实验目的 了解转氨酶的性质及临床意义，并掌握谷丙转氨酶活力的测定方法 二．实验原理 在氨基酸的分解代谢过程中，联合脱氨基为大多数氨基酸的主要代谢方式，通过转氨基作用与氧化脱氨基的作用偶联而完成。本实验以丙氨酸和 ā-酮戊二酸作为谷丙转氨酶的作用的底物，利用内源性磷酸吡哆醛作为辅酶，在一定条件及时间作用后来测定所生成的丙酮酸的含量来确定其酶的活力。丙酮酸能与2，4二硝基苯肼结合，生成丙酮酸-2，4二硝基苯腙，后者在碱性条件溶液中呈棕色，基吸收光谱的峰为439-530nm，可用于测定丙酮酸的含量。 ā--酮戊二酸与能与2，4二硝基苯肼结合，生成相应的苯腙，但后者在碱性溶液中的吸收光谱与丙酮酸二硝基苯肼稍有差别，在520nm波长处 ā--酮戊二酸二硝基苯腙的吸光度远比丙酮酸2，4二硝基苯腙为低，因此在520nm处吸光度增加的程度与反应体系中的丙酮酸和 ā--酮戊二酸的摩尔比基本上呈线性关系。故可籍此可测定谷丙转氨酶的活力。 三、实验器材 容量瓶100ml 4个500ml 2个；电子天平；玻璃棒；研钵；试管5支；试管架；移液管0.5ml 2支；1ml 2支；5ml 1支；滴管1支；分光光度计，比色皿4个； 四.实验试剂 1标准丙酮酸溶液：准确称取纯化的丙酮酸钠62.5mg，溶于100ml 0.05mol/L H2SO4中，现用现配。 2、谷丙转氨酶底物：称取0.90g L-丙氨酸，29.2mg α-酮戊二酸，先溶于pH7.4 0.1mol/L 的磷酸缓冲液中。然后用1 mol/L NaOH 调节pH到7.4，再用pH7.4 0.1mol/L的磷酸缓冲液定容到100ml，贮存于冰箱中，可使用1周。 3、0.1mol/L pH7.4磷酸缓冲液：称取13.97g K2HPO4和2.69g KH2PO4溶于蒸馏水中，定容到1000ml。 4、0.02% 2,4-二硝基苯肼溶液：称取20mg 2,4-二硝基苯肼溶于少量的1mol/L HCl中。加热溶解，用1mol/L HCl定容到100ml。（后经试验发现取20mg 2,4 - 二硝基苯肼，溶于7ml11.6mol/L的浓盐酸，再定容至100ml效果更好） 5、0.4mol/L NaOH ：称取16g NaOH定容到1000ml。 6、0.9%生理盐水：称取0.9gNaCl，定容到100ml。
生化全套检查项目及临床意义
生化全套检查项目及临床意义 简介 生化全套检查就是指用生物或化学的方法来对人进行身体检查，生化全套检查容包括：肝功能（总蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比，总胆红素、直接、间接胆红素，转氨酶）；血脂（总胆固醇，甘油三酯，高、低密度脂蛋白，载脂蛋白）；空腹血糖；肾功能（肌酐、尿素氮）；尿酸；乳酸脱氢酶；肌酸肌酶等。不同的医院，生化全套检查的项目会有差别，但大致的项目不会相差太大。生化全套检查用途 1、用于常规体检普查 2、疾病的筛查和确证试验 生化全套检查是对身体进行一次全面的检查和对身体情况的一 种了解，有时也可以检查出来潜伏的疾病，如乙肝病毒携带者就需要定期的检查，如肝功能检查，防止病情突然发作，及时进行治疗。 生化全套检查项目 1．血清丙氨酸氨基转移酶测定 2．血清天门冬氨酰基转移酶测定 3．血清γ--谷氨酰基转移酶测定 4．血清碱性磷酸酶 5．血清白蛋白测定 6．血清白蛋白测定
7．球蛋白 8．A/G 9．血清总胆红素测定 10．血清直接胆红素测定 11．血清间接胆红素测定 12．血清前白蛋白测定 13．ALT/AST 14．血清总胆固醇测定 15．血清甘油三酯测定 16．血清高密度脂蛋白胆固醇测定17．血清低密度脂蛋白胆固醇测定18．血清载脂蛋白A1测定 19．血清载脂蛋白B测定 20．血清载脂蛋白a测定 21．尿素测定 22．肌酐测定 23．尿素测定 24．血清碳酸氢盐测定 25．乳酸脱氢酶测定 26．血清肌酸激酶 27．血清肌酸激酶－MB同功酶活性测定28．血清ａ羟基丁酸脱氢酶测定
29．钾测定 30．钠测定 31．氯测定 32．钙测定 33．葡萄糖测定 临床意义： 1.血清丙氨酸氨基转移酶（ALT或GPT）测定的临床意义： 升高：常见于急慢性肝炎、药物性肝损害、脂肪肝、肝硬化、心肌梗塞、心肌炎及胆道疾病等。 2.血清天冬氨酸氨基转移酶（AST或GOT）测定的临床意义： 升高：常见于心肌梗塞发病期、急慢性肝炎、中毒性肝炎、心功能不全、皮肌炎等。 3.血清总蛋白测定的临床意义： 增高：常见于高度脱水症（如腹泻，呕吐，休克，高热）及多发性骨髓瘤。 降低：常见于恶性肿瘤，重症结核，营养及吸收障碍，肝硬化、肾病综合征，溃疡性结肠炎，烧伤，失血等。 4.血清白蛋白测定的临床意义： 增高：常见于严重失水导致血浆浓缩，使白蛋白浓度上升。 降低：基本与总蛋白相同，特别是肝脏病，肾脏疾病更为明显。 5.血清碱性磷酸酶（ALP）测定的临床意义：
血氨含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法
血氨含量检测试剂盒说明书可见分光光度法 注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号:BC4380 规格:50T/48S 产品简介： 血氨主要来源是内源性氨和外源性氨。氨在血中保持恒定状态，即血氨的来源和去路保持动态平衡。氨是有毒物质，主要在肝脏行代谢解毒。当肝功能严重损害时，氨不能被解毒。氨在中枢神经系统聚集，从而导致肝性脑病。 本法根据氨的靛酚兰反应原理，通过蛋白沉淀剂将血清（浆）中蛋白沉淀后，利用酚-次氯酸盐直接显色法测定血氨，生成的蓝色靛酚和氨的浓度成正比，在630nm处有特殊吸收峰，据此可由吸光值计算出样品中血氨的含量。 试验中所需的仪器和试剂： 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、蒸馏水、EP管。产品内容： 提取液一：液体40mL×1瓶，4℃保存； 提取液二：液体40mL×1瓶，4℃保存； 试剂一A液：液体7mL×1瓶，4℃保存； 试剂一B液：液体28mL×1瓶，4℃保存；临用前将A液与B液按照体积比1:4混匀，根据试验所需量现配现用； 试剂二：液体35mL×1瓶，4℃保存； 标准品：液体1mL×1支，100μmol/ml氮标准液。 操作步骤： 一、适用范围 本试剂盒可测各种动物血清（浆）等样本中血氨的含量； 二、测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至630nm，蒸馏水调零。 2、标准品的准备：将100μmol/mL的氮标准液用蒸馏水稀释至10、8、6、4、2、1、0.5、0μmol/mL的标 准溶液备用。 3、操作表：（在1.5mL EP管中操作） 试剂名称（μL）空白管测定管标准管 血清（浆）200 标准品稀释液200 蒸馏水200 提取液一500500500 提取液二500500500 充分混匀，3500rpm离心10min，取上清待测 上清液400400400 试剂一400400400 试剂二400400400 充分混匀，37℃水浴20min 取1mL反应液，于1mL玻璃比色皿中测定630nm处吸光值A，分别记为A空白管、A测定管、A标准管。计算ΔA=A测定管-A空白管，ΔA标准=A标准管-A空 白管。 三、血氨含量含量计算 1、标准曲线的绘制： 以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA带入方程得到x（μmol/mL） 2、血氨含量的计算： 血氨含量（μmol/mL）=x×V样÷V样=x。 V样：加入的样品体积，0.2mL。 注意事项 1.同一批检测样本需配1-2个空白管。 2.试剂一配置后尽快使用，若发现变色则不能使用。 3.所用器材和取血装置均应无氨；采血后应立即测定，不能立即测定2-8℃可保留2h；样本禁止溶血。
干化学法测定血氨的临床意义
干化学法测定血氨的临床意义 人体内血氨含量极微，体内氨是蛋白质代谢过程中通过氨基酸脱氨基形成，大部分在肝脏内通过鸟氨酸循环合成尿素。血液中氨的来源主要为肠道中细菌分解尿素和由氨基酸脱氨所生成。此外，组织细胞中有多种脱氨酶，能使蛋白质、核苷酸脱氨而生成氨。在正常情况下，氨的主要去路是在肝脏通过鸟氨酸循环合成尿素。此外，脑和肾脏等器官的氨与谷氨酸作用生成谷氨酰胺后被运输到肝脏，在肝脏转变成尿素或其它含氮化合物后由肾脏排出体外，或形成铵盐随尿排出。是蛋白最终代谢产物。 一、血氨特性 氨对人体有毒，能影响神经细胞的新陈代谢。对人体的中枢神经有潜在的毒副作用，血氨的来源增加和去路减少，都会引起血氨增高。血氨测定对肝性脑病，肝硬化末期肝昏迷，肝衰竭的诊断和鉴别诊断有极其重要的意义，对急性/亚急性肝坏死和雷氏综合症［1］。高血氨症在饮食蛋白过多摄入时也有发现。 二、影响血氨的因素 1、吸烟者是血氨假阳性增高的主要原因，采血前一天午夜后禁止吸烟，严重者采血前应淋浴。 2、实验室周围环境，空气是氨标本污染的主要原因必须通过化学处理。 3、血氨测定应用血浆［2］，不能血清做标本。血液在凝固过程中会产生氨，抗凝剂可用非铵盐的肝素，EDTA和草酸盐三（Li,K,Na）、不能用肝素胺，氟化物。 4、采集标本后15分钟内测定，滞留15分钟就可引起血氨增高，最多30min内检测完成。显著溶血不能用来测定。 5、如超出测定系统线性范围，可用去氨水稀释血浆后重新测定。 三、标本采集 血氨测定的准确性在很大程度上取决于标本的留取收。 1、应用加抗凝剂的密封负压管采集。防止环境中的氨污染标本 2、低温离心5min，取血浆迅速测定，30min内检测完成。 3、如不能立即测定，2～4℃可保留2h，-20℃可稳定24h。 4、红细胞氨浓度是血浆的2.8倍，故标本应禁止溶血，溶血可使红细胞内的氨进入血浆。红细胞和血小板中的γ-谷氨酰基转移酶（γ-GT）、谷丙转氨酶（ALT），可引起血氨的浓度的自然增加，在0、20、37℃时，氨平均增加的比率分别是3.9±0.23、5.2±0.23、 25.2±0.59umol/L/h,在肝病时γ-GT和的ALT活性比正常人的增加很多，γ-GT是血氨测定引起标本氨浓度增加的一个主要因素。为了降低血标本在放置中氨的增加，测定出标本中真实的氨含量，可在血标本中加入γ-GT抑制剂，如6-二氨基-5氧-L-己氨酸（6-diazo-5-oxo-L-norleucin）或硼砂加丝氨酸等。 四、血氨的测定方法 1、原理：血氨测定干片（比色法）方法通过生化系统上使用血氨测定干片和血氨与脑脊液蛋白复合物校准品来完成。血氨测定干片为途覆在聚酯基材上的多层分析成分。将一滴患者样本滴在干片上，并通过扩散层均匀地分布到下面的试剂层。水和非蛋白组分扩通过，散到
血液标本放置时间对血氨测定结果的影响
血液标本放置时间对血氨测定结果的影响 【摘要】目的了解肝素锂抗凝血浆标本放置时间对血氨测定结果的影响。方法将20份新鲜肝素锂抗凝血浆标本立即离心分离血浆，按即时，05、1、15、2 h 测定血氨，并与及时的测定结果进行比较。结果标本放置05 h的测定结果与即时测定结果间差异无统计学意义，标本放置1 h以上的测定结果与即时测定结果间存在显著性差异，标本放置时间越长，血氨测定值越高，差异越显著。结论用肝素锂抗凝全血血浆标本，室温放置05 h对血氨测定结果无明显影响，为了保证血氨测定结果的准确性，血氨标本应在抽血后05 h内完成血氨测定。 【关键词】血氨；升高；时间 正常人体内游离血氨（blood ammonia，BA）含量极低（正常值20～60 μmol/L）[1]，但氨对人体是有毒性的，尤其是对中枢神经系统有毒副作用，它能影响神经细胞的新陈代谢。氨中毒的机制目前不十分清楚，其发生是多种因素的结果[2]。国外学者Kanamori等研究了小鼠体内的氨、谷氨酰胺以及谷氨酰胺合成酶与脑病的关系，表明脑病与氨相关[3]。血氨测定是肝性脑病的诊断与治疗的重要指标[4]。红细胞内氨的含量较血浆中高28倍，故溶血标本或者血液标本久置都会使血浆氨的含量急剧增高。因此在血氨测定的过程中，标本的处置是血氨测定准确性的重要前提。本文对20例门诊患者的标本在不同放置时间进行血氧测定。 1材料与方法 11材料肝素锂抗凝真空管。20份新鲜肝素锂抗凝全血标本。强生V350全自动干式生化分析仪及配套质控。强生V350血氨干片（批号：03212466）。 12方法采集本院门诊患者肝素锂抗凝全血20份，分别编号，以3000r/min 离心5 min，将原始管去盖，直接在强生V350全自动干式生化分析仪上进行血氨测定，作为即时血氨测定值并计算均值和标准差，然后加盖室温放置，分别在05、1、15、2 h测定4个时段的血氨值并计算均值和标准差，与即时测定的血氨结果进行配对资料t检验。 2结果 21标本放置不同时间血氨结果变化趋势见图1。图1显示，标本放置05 h 血氨测定结果与即时血氨测定结果无明显变化，标本放置05 h后血氨浓度逐渐升高，放置时间越长升高越明显。 3讨论 正常人体内游离血氨含量极低，其主要来源于体内蛋白质在代谢过程中产生的氨基酸，以及经脱氨作用分解而来的内源性氨，正常情况这种氨可形成酞胺及
MMFSCNG食品中胆固醇的测定方法
MM_FS_CNG_0356食品 胆固醇 分光光度法 MM_FS_CNG_0356 食品中胆固醇的测定方法 1.适用范围 本方法适用于各类动物性食品中胆固醇的测定。 2.原理概要 当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合反应，产生颜色物质。因此可先对食品样品进行提取和皂化，用硫酸铁铵试剂作为显色剂，测定食品中胆固醇的含量。 3.主要试剂和仪器 .主要试剂 石油醚； 无水乙醇； 浓硫酸； 冰乙酸：优级纯； 磷酸； 胆固醇标准物质； 胆固醇标准液； 胆固醇标准储备液（1mg ／mL ）：精确称取胆固醇100mg ，溶于冰乙酸中，并定容至100mL 。此液至少在2个月内保持稳定； 胆固醇标准常备液（100μg ／mL ）：吸取胆固醇标准储备液10mL ，用冰乙酸定容至100mL 。此液用时临时配制； 铁矾显色剂； 铁矾储备液：溶解硫酸铁铵[ FeNH 4（SO 4）2·H 2O]于100mL85％磷酸中，贮于 干燥器内，此液在室温中稳定； 铁矾显色液：吸取铁矾储备液10mL ，用浓硫酸定容至100mL 。贮于干燥器内，以防吸水； 50％氢氧化钾溶液：称取50g 氢氧化钾，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL ； 5％氯化钠溶液：称取5g 氯化钠，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL ； 钢瓶氮气：纯度％。 .仪器 实验室常用设备； 721型分光光度计； 电热恒温水浴； 电动振荡器； 具玻塞试管：体积10mL 、25mL 。 4.过程简述 .胆固醇标准线 吸取胆固醇标准常备液、、、、分别置于10mL 试管内，在各管内加入冰乙酸使总体积皆达4mL 。沿管壁加入2mL 铁矾显色液，混匀，在15～90min 内，在560～575nm 波长下比色。以胆固醇标准浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标做标准曲线。 .样品测定
胆固醇
胆固醇 人体各组织中皆含有胆固醇，在细胞内除线粒体膜及内质网膜中含量较少外，它是许多生物膜的重要组成成分。 (一)胆固醇的消化吸收 胆固醇是机体内主要的固醇物质。它既是细胞膜的重要组分，又是类固醇激素、维生素D 及胆汁酸的前体。人体每千克体重含胆固醇2g。人们从每天膳食中可摄入约300～500mg 的外源性胆固醇，主要来自肉类、肝、内脏、脑、蛋黄和奶油等。食物中胆固醇酯不溶于水，不易与胆汁酸形成微胶粒，不利于吸收，必须经胰液分泌的胆固醇酯酶将其水解为游离胆固醇后，方能吸收。未被吸收的胆固醇在小肠下段被细菌转化为粪固醇，由粪便排出。 影响胆固醇吸收的因素： ①胆汁酸是促进胆固醇吸收的重要因素，胆汁酸缺乏时，明显降低胆固醇的吸收。食物中脂肪不足时，也会影响胆固醇的吸收；因为高脂肪膳食不仅具有促进胆汁分泌的作用，脂肪水解产物还有利于形成混合微胶粒，并能促进胆固醇在粘膜细胞中进一步参与形成乳糜微粒，转运入血，所以高脂肪膳食易于导致血胆固醇升高； ②胆固醇在肠道中的吸收率随食物胆固醇含量增加而下降； ③膳食中含饱和脂肪酸过高，可使血浆胆固醇升高，摄入较多不饱和脂肪酸，如亚油酸，血浆胆固醇即降低，这是由于不饱和脂肪酸能促进卵磷脂的合成和提高卵磷脂胆固醇脂肪酰转移酶(LCAT)活性，生成较多胆固醇酯，由高密度脂蛋白转运至肝，再经肠道排出体外； ④植物食物中的谷固醇和膳食纤维可减少胆固醇的吸收，从而可降低血胆固醇；年龄、性别的影响：随着年龄的增长，血浆胆固醇有所增加。50 岁以前，男女之间差别不太明显，60 岁后，女性显著升高，超过男性，在65 岁左右达到高峰，此与妇女绝经有关。血浆胆固醇的变化主要取决于LDL，而脂蛋白代谢受性激素的影响。在男性和缺乏雌激素的女性中，给予雌激素则血中HDL 和VLDL 水平增高，而LDL 浓度下降，女性绝经后雌性激素水平下降，致使血胆固醇升高。
生化全套检查项目及临床意义
生化全套检查项目及临 床意义 Document number：PBGCG-0857-BTDO-0089-PTT1998
生化全套检查项目及临床意义 简介 生化全套检查就是指用生物或化学的方法来对人进行身体检查，生化全套检查内容包括：肝功能（总蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比，总胆红素、直接、间接胆红素，转氨酶）；血脂（总胆固醇，甘油三酯，高、低密度脂蛋白，载脂蛋白）；空腹血糖；肾功能（肌酐、尿素氮）；尿酸；乳酸脱氢酶；肌酸肌酶等。不同的医院，生化全套检查的项目会有差别，但大致的项目不会相差太大。 生化全套检查用途 1、用于常规体检普查 2、疾病的筛查和确证试验 生化全套检查是对身体进行一次全面的检查和对身体情况的一种了解，有时也可以检查出来潜伏的疾病，如乙肝病毒携带者就需要定期的检查，如肝功能检查，防止病情突然发作，及时进行治疗。 生化全套检查项目 1．血清丙氨酸氨基转移酶测定 2．血清天门冬氨酰基转移酶测定 3．血清γ--谷氨酰基转移酶测定 4．血清碱性磷酸酶
5．血清白蛋白测定 6．血清白蛋白测定 7．球蛋白 8．A/G 9．血清总胆红素测定 10．血清直接胆红素测定 11．血清间接胆红素测定 12．血清前白蛋白测定 13．ALT/AST 14．血清总胆固醇测定 15．血清甘油三酯测定 16．血清高密度脂蛋白胆固醇测定17．血清低密度脂蛋白胆固醇测定18．血清载脂蛋白A1测定 19．血清载脂蛋白B测定 20．血清载脂蛋白a测定 21．尿素测定 22．肌酐测定 23．尿素测定 24．血清碳酸氢盐测定 25．乳酸脱氢酶测定 26．血清肌酸激酶
27．血清肌酸激酶－MB同功酶活性测定 28．血清ａ羟基丁酸脱氢酶测定 29．钾测定 30．钠测定 31．氯测定 32．钙测定 33．葡萄糖测定 临床意义： 1.血清丙氨酸氨基转移酶（ALT或GPT）测定的临床意义： 升高：常见于急慢性肝炎、药物性肝损害、脂肪肝、肝硬化、心肌梗塞、心肌炎及胆道疾病等。 2.血清天冬氨酸氨基转移酶（AST或GOT）测定的临床意义： 升高：常见于心肌梗塞发病期、急慢性肝炎、中毒性肝炎、心功能不全、皮肌炎等。 3.血清总蛋白测定的临床意义： 增高：常见于高度脱水症（如腹泻，呕吐，休克，高热）及多发性骨髓瘤。 降低：常见于恶性肿瘤，重症结核，营养及吸收障碍，肝硬化、肾病综合征，溃疡性结肠炎，烧伤，失血等。 4.血清白蛋白测定的临床意义：
高密度脂蛋白胆固醇测定试剂(盒)技术审评规范
高密度脂蛋白胆固醇测定试剂（盒）技术审评规范 （2014版） 一、前言 本审评规范旨在指导注册申请人对高密度脂蛋白胆固醇测定试剂（盒）注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。 本审评规范是对高密度脂蛋白胆固醇测定试剂（盒）的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。 本审评规范是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但需要提供详细的研究资料和验证资料，相关人员应在遵循相关法规的前提下使用本审评规范。 本审评规范是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，本审评规范相关内容也将适时进行调整。 二、适用范围 高密度脂蛋白胆固醇测定试剂（盒）用于体外定量测定人血清和/或血浆中的高密度脂蛋白胆固醇的含量。 从方法学考虑，本文主要指采用分光光度法原理，利用全自动、半自动生化分析仪或分光光度计，在医学实验室进行高密度脂蛋白胆固醇定量检验所使用的临床化学体外诊断试剂。本规范不适用于干式高密度脂蛋白胆固醇测定试剂（盒）。 依据《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》（以下简称《办法》）高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒管理类别为Ⅱ类，分类代号
为6840。
三、基本要求 （一）综述资料 综述资料主要包括产品预期用途、临床意义、产品描述、有关生物安全性的说明、研究结果的总结评价以及同类产品上市情况介绍等内容，应符合《办法》和《体外诊断试剂注册申报资料基本要求》（国食药监械〔2007〕609号）的相关要求。下面着重介绍与高密度脂蛋白胆固醇测定试剂（盒）预期用途有关的临床背景情况。 高密度脂蛋白(HDL)具有抵御斑块形成的作用，是一种抗动脉粥样硬化的脂蛋白。它的含量与动脉管腔狭窄程度呈负相关，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）低于0.9mmol/L(35mg/dl)是冠心病危险因素，HDL-C增高，大于1.55mml/L(60mg/dl)被认为是冠心病负危险因素。HDL-C降低也多见于心、脑血管病，肝炎，肝硬化等患者。高脂血症往往伴低HDL-C。肥胖者HDL-C也多偏低。吸烟可使HDL-C下降。饮酒及长期体力活动会使HDL-C升高。测定人血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量是判别低高脂蛋白血症的重要指标。 注：若注册申报产品声称临床意义超出此内容范围，应提供相关文献或临床研究依据。 （二）产品说明书 说明书承载了产品预期用途、试验方法、检测结果解释以及注意事项等重要信息，是指导实验室工作人员正确操作、临床医生针对检验结果给出合理医学解释的重要依据。因此，产品说明书是体外诊断试剂注册申报最重要的文件之一。产品说明书的格式应符合《体外诊断试剂说明书编写审评规范》的要求，结合《体外诊断试剂说明书编写指导原则》的要求，下面对高密度脂蛋白胆固醇测定试剂（盒）
血脂胆固醇正常值一般是多少
血脂胆固醇正常值一般是多少 年纪慢慢变老，感觉身体总是大不如从前了，特别是我们60岁以后的朋友，感觉血脂稠、胆固醇高的现象很普便，有时间又感觉这种情况不知怎么它就发生了，现在关注身体健康也是中老年人的很头疼的问题。那么血脂胆固醇正常值一般是多少才是正常的呢？我总结了几点，希望对大家有所帮助。首先我们对血脂有个正常的认识。血脂是血浆中的中性脂肪（甘油三酯和胆固醇）和类脂（磷脂、糖脂、固醇、类固醇）的总称，广泛存在于人体中。它们是生命细胞的基础代谢必需物质。一般说来，血脂中的主要成份是甘油三酯和胆固醇，其中甘油三酯参与人体内能量代谢，而胆固醇则主要用于合成细胞浆膜、类固醇激素和胆汁酸。血浆中所含脂类统称为血脂，血浆脂类含量虽只占全身脂类总量的极小一部分，但外源性和内源性脂类物质都需经进血液运转于各组织之间。因此，血脂含量可以反映体内脂类代谢的情况。食用高脂肪膳食后，血浆脂类含量大幅度上升，但这是暂时的，通常在3~6小时后可逐渐趋于正常。检测定血脂时，常在饭后12~14小时采血，这样才能较为可靠地反映血脂水平的真实情况。由于血浆胆固醇和甘油三脂水平的升高与动脉粥样硬化的发生有关，因此这两项成为血脂测定的重点项目。 血脂正常值范围。低密度脂蛋白胆固醇控制标准，它的
理想值应为160mg/dL者。 （1）血浆总胆固醇控制标准。其理想值应240mg/dL者。 （2）低密度脂蛋白胆固醇控制标准。它的理想值应为160mg/dL者。 （3）血浆甘油三酯控制标准。其理想值应240mg/dL者。（胆固醇正常值：2.86-5.98mmol/L，如果您的胆固醇数值高于此范围，说明为高胆固醇血症，有发展为动脉粥样硬化的风险。 其次对胆固醇要有一个新的认识。一般，脂类物质主要分为两大类。脂肪（主要是甘油三酯）是人体内含量最多的脂类，是体内的一种主要能量来源；另一类叫类脂，是生物膜的基本成分，约占体重的5%，除包括磷脂、糖脂外，还有很重要的一种叫胆固醇（cholesterol)。 胆固醇在血液中存在于脂蛋白中，其存在形式包括高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、极低密度脂蛋白胆固醇几种。在血中存在的胆固醇绝大多数都是和脂肪酸结合的胆固醇酯，仅有10%不到的胆固醇是以游离态存在的。高密度脂蛋白有助于清除细胞中的胆固醇，而低密度脂蛋白超标一般被认为是心血管疾病的前兆。血液中胆固醇含量每单位在140~199毫克之间，是比较正常的胆固醇水平。 胆固醇是由甾体部分和一条长的侧链组成。人体中胆固醇的总量大约占体重的0.2%，每100克组织中，骨质约含
生化全套检查项目及临床意义
生化全套检查项目及临床意义 临床意义： 1.血清丙氨酸氨基转移酶（ALT或GPT）测定的临床意义： 升高：常见于急慢性肝炎、药物性肝损害、脂肪肝、肝硬化、心肌梗塞、心肌炎及胆道疾病等。 2.血清天冬氨酸氨基转移酶（AST或GOT）测定的临床意义： 升高：常见于心肌梗塞发病期、急慢性肝炎、中毒性肝炎、心功能不全、皮肌炎等。 3.血清总蛋白测定的临床意义： 增高：常见于高度脱水症（如腹泻，呕吐，休克，高热）及多发性骨髓瘤。 降低：常见于恶性肿瘤，重症结核，营养及吸收障碍，肝硬化、肾病综合征，溃疡性结肠炎，烧伤，失血等。 4.血清白蛋白测定的临床意义： 增高：常见于严重失水导致血浆浓缩，使白蛋白浓度上升。 降低：基本与总蛋白相同，特别是肝脏病，肾脏疾病更为明显。 5.血清碱性磷酸酶（ALP）测定的临床意义： 升高：常见于肝癌、肝硬化、阻塞性黄疸、急慢性黄疸型肝炎、骨细胞瘤、骨转移癌、骨折恢复期。另外，少年儿童在生长发育期骨胳系
统活跃，可使ALP增高。 注意：使用不同绶冲液，结果可出现明显差异。 6.血清r-谷氨酰基转移酶（GGT或r－GT）测定的临床意义： 升高：常见于原发性或转移性肝癌、急性肝炎、慢性肝炎活动期肝硬化、急性胰腺炎及心力衰竭等。 7.血清总胆红质测定的临床意义： 增高：肝脏疾病，肝外疾病，原发性胆汁性肝硬化溶血性黄疸急性黄疸性肝炎新生儿黄疸慢性活动期肝炎闭塞性黄疸病毒性肝炎 胆石症阻塞性黄疸胰头癌肝硬化输血错误 8.血清直接胆红素测定临床意义: 增高：常见于阻塞性黄疸，肝癌，胰头癌，胆石症等。 9.血清甘油三酯测定的临床意义: 增高：可以由遗传、饮食因素或继发于某些疾病，如糖尿病、肾病等。TG值2.26mmol/L以上为增多；5.65mmol/L以上为严重高TG血症。 降低：常见于甲亢、肾上腺皮质功能低下、肝实质性病变、原发性B脂蛋白缺乏及吸收不良。 10.血清总胆固醇测定的临床意义: (1)高脂蛋白血症与异常脂蛋白血症的诊断及分类； (2)心、脑血管病的危险因素的判断； (3)CHO增高或过低可以是原发的（包括遗传性），营养因素或继发于某些疾病，如甲状腺病、肾病等。当CHO值在5.17-6.47mmol/L时，为动脉粥样硬化危险边缘；6.47-7.76mmol/L为动脉粥样硬化危险水
胆固醇含量检测
法测定鸡蛋中胆固醇含量 一、原理 当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合反应，产生颜色物质。因此可先对食品样品进行皂化和提取，用硫磷铁试剂作为显色剂，测定食品中胆固醇的含量。 在样品的冰乙酸提取液中加磷硫铁试剂，胆固醇与试剂反应产生紫红色化合物，颜色的深浅与胆固醇的量成正比，可用分光光度计在波长560nm?处测定。 二、实验仪器及试材 1.仪器：分光光度计、水浴锅 2.试剂：本实验用水均需用蒸馏水或去离子水。试剂纯度均为分析纯。 （1）石油醚（沸点30-60℃）、无水乙醇、冰乙酸。 （2）50%氢氧化钾溶液：称取50g氢氧化钾，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL。 （3）25%氯化钠溶液：称取25g氯化钠，用蒸馏水溶解，并稀释至100mL。 （4）10% 三氯化铁溶液：将10g FeCl3·6 H2O溶于磷酸中，定容至100 mL，储于棕色瓶中，冷藏保存。 （5）磷硫铁试剂：取10% 三氯化铁溶液1.5mL于100mL棕色容量瓶内，加浓硫酸定容至刻度。 （6）胆固醇标准储液：准确称取胆固醇100mg，溶于冰乙酸中，定容至100mL。 （7）胆固醇标准溶液：临用前将储液用冰乙酸稀释10倍。 三、实验方法与步骤 1.样品胆固醇提取 准确称取充分混匀的鸡蛋约0.20g于25mL具塞比色管中，加入0.5mL50%氢氧化钾溶液和4.5mL无水乙醇，振荡混匀，在80℃恒温水浴中皂化20min。皂化时每隔5min振摇一次使皂化完全。皂化完毕，取出比色管，冷却。加入 3mL 25%氯化钠溶液后再加入10mL石油醚，盖紧玻璃塞，振摇1min，静置分层。 取上层石油醚液1mL，置于25mL具塞比色管内，在65℃水浴中让石油醚自然挥发干，加入4mL冰乙酸，轻摇使胆固醇溶解，待测。 2.样品和标准胆固醇含量测定 另取两支25mL具塞比色管，一支（空白管）加入4mL冰乙酸，一支（标准管）加入1mL胆固醇标准溶液（0.1mg/mL）和3mL冰乙酸。包括样品管，各
肝脏谷丙转氨酶活力测定
实验八 肝脏谷丙转氨酶活力测定 实验类型：验证性实验 相关知识 1. 酶活力： 2. 酶活力单位(即酶含量的多少) 国际单位 习惯单位：谷丙转氨酶在37度与底物作用30min 后，能产生2.5ug 的丙酮酸者为一个谷丙转氨酶活力单位 3.转氨酶 4 谷丙转氨酶 一、 实验目的 1． 了解转氨酶的性质及临床意义 2． 掌握谷丙转氨酶活力的测定方法 二、实验原理 丙氨酸及α－酮戊二酸作用为谷丙转氨酶的作用底物，利用内源性磷酸吡哆醛作辅酶，在一定条件下及时间作用后测定所生成的丙酮酸的量来确定酶活力。 丙酮酸能与2,4－二硝基苯肼结合，生成丙酸－2,4二硝基苯腙，后者在碱性溶液中呈现棕色，其吸收光谱的峰为439~530nm ，可用于测定丙酮酸的含量。 α－酮戊二酸也能与2,4－二硝基苯肼结合，生成相应的苯腙，但后者在碱性溶液中吸收光谱为与丙酸－2,4二硝基苯腙的吸光度有差别，在520nm 波长比色时，丙酸－2,4二硝基苯腙吸光度高出3倍。 在520nm 处吸光度增加的程度与反应体系中丙酮酸与α－酮戊二酸的摩尔比基本上呈线性关系，故可以测定谷丙转氨酶的活力。 三、实验器材、试剂、材料 1． 新鲜猪猪脏 2． 722型分光光度计、剪刀、吸管 3． 标准丙酮酸溶液；谷丙转氨酶底物；0.1mol/L 磷酸缓冲液（pH7.4）；0.02%2,4－二硝基 苯肼；0.4mol/L NaOH 溶液 2 ＋ 辅基为磷 2 2 + + ‘ ‘
四、实验操作步聚 1.肝匀浆制备 （1）将猪肝脏用生理盐水冲洗，滤纸吸干，称取肝脏0.25g，剪成小块，置于玻璃匀浆管内（或小研砵中），加入2.25ml预冷的pH7.40.1%mol/L磷酸缓冲 液，制成10%肝匀浆。（每四组1份） （2）吸取肝匀浆0.1ml于另一试管中，加入预冷的0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4） 4.9ml摇匀，为稀释肝匀浆（稀释50倍）（每四组1份） 2.谷丙转氨酶活力测定（每组做1份） 取试管4支按下表加液 五、实验结果与讨论 2.每毫升稀释肝匀浆谷丙转氨酶活力单位（谷丙转氨酶活力计算：规定酶在37度与底物 作用30min后，能产生2.5ug的丙酮酸者为一个谷丙转氨酶活力单位） 3.每克肝脏谷丙氨酶的活力单位。
贫血和低胆固醇血症
贫血和低胆固醇血症 庞家秉李占全崔森冀林华柴克霞（青海大学附属医院青海810001）【中图分类号】R541【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2011）10-1474-02 个体的血脂水平变动幅度较大，而波动的原因鲜为人知。血管疾病的风险性很大程度上取决于血清胆固醇浓度，而血脂水平并不稳定。有研究报道了个体血脂的每日变动情况，变动范围在10-20%之间［1］，其血脂波动并非测量错误或饮食变化所致。 由于胆固醇水平对动脉硬化和冠心病而言是一个风险因子，因而评价贫血患者胆固醇和血红蛋白之间的相关程度就显得十分重要。本综述系统性回顾了贫血患者的低胆固醇血症及可能的促进因素。 1临床报道和成果 Rifkind和Gale［2］于1967年提出血清胆固醇的降低并非归因于一些血清脂蛋白家族的特定减少，低胆固醇血症是由于所有的主要脂蛋白家族成比例减少所致。这一研究结果是基于血浆容量依赖效应的。该研究还表明脾切除术可使小球形红细胞症患者的血清胆固醇值成倍增加；恶性贫血患者接受维生素B12治疗后，血清胆固醇水平上升，且先于血红蛋白的升高。由此得出结论：低胆固醇血症并非贫血本身所致。 Westerman［3］所作的研究验证了低胆固醇血症与各型贫血的关系，诸如巨幼细胞贫血、遗传性球形细胞症、纯合子镰状细胞疾病、再生障碍性贫血和肝关联性贫血。该研究还定期随访患者，以确定何种因素导致这一关联，并评估了低胆固醇血症对红细胞的作用。经用维生素B12或叶酸治疗后，巨幼细胞贫血患者的血浆胆固醇水平升高（r=0.898, p=0.003; r和p 值指血细胞压积和胆固醇之间的关联）。治疗后，二者平行升高。遗传性球形细胞症患者在切脾后二者均升高（r=0.797,p=0.009）。镰状细胞贫血患者治疗前二者均低，输血后二者升高。随着红细胞压积升高，胆固醇水平在治疗后也升高（r=0.315,p=0.172）。再生障碍性贫血患者输血后二者也升高（r=0.502,p=0.006）。 这一研究表明，在贫血初始及与低胆固醇血症关联的整个贫血过程中，血浆胆固醇水平与红细胞压积密切相关。无论红细胞压积改变的原因如何，这种关联仍可确定。由于低胆固醇血症发生于各型贫血，且贫血治疗后胆固醇水平上升，因而认为红细胞压积降低导致了低胆固醇血症，而非贫血的类型。另一方面也表明，在正常个体和已切脾近似于预处理的遗传性球形细胞症患者中，低胆固醇血症并不导致相关联的贫血。该研究还指出，细胞压积和胆固醇之间的关联性很有可能与胆固醇分布的改变或血浆稀释有关，这源于输血后胆固醇水平迅速发生了改变，也源于单纯性贫血中红细胞压积与胆固醇水平之间密切的联系。 El-Hazmi等人［4］进行的一项研究似乎支持血浆稀释论。该研究针对45位镰状细胞贫血患者（HbSS）和45位年龄、性别匹配的正常血红蛋白对照者（HbAA）的血浆胆固醇和甘油三酯水平进行了调查。镰状细胞患者的血红蛋白和血浆胆固醇水平明显低于正常对照组 （P<0.001，t检验）。但是，两组的甘油三酯水平均未明显改变。胆固醇与血红蛋白的关联性遵从线性方程：胆固醇=1.536（mmol/L）+0.232×［血红蛋白］。关联系数（r）是0.289（P<0.05）。其结论是：镰状细胞贫血患者的低胆固醇血症可能归因于特发性胆固醇生成减少，胆固醇利用增多，肝功能异常或血浆容量增加。关于镰状细胞贫血的血红蛋白和胆固醇之间存在的正相关，作者令人信服的解释是血浆容量的单一改变（血液稀释）。 Dessi等人［5］对G6p脱氢酶缺乏的儿童进行了研究。这些儿童经蚕豆摄入诱导可发生溶血性贫血。研究显示，他们的总胆固醇、LDL和HDL胆固醇均降低，而且发现这种减少与骨髓增生有关。结论是：胆固醇浓度的变化归因于增殖细胞利用胆固醇的增加。
血氨检测临床意义
正常人体游离血氨含量极低（血氨正常值20～60μmol/L）. 临床意义：血氨值偏高可能影响肝病患者肝昏迷的发生.其根据主要是：①本病发作时患者血氨及脑脊液中氨浓度明显升高；②给某些肝硬变或慢性肝病患者大量高蛋白饮食或含铵药物,可诱发本病；限制蛋白质摄入和采取降血氨治疗后,病情有好转,可使患者从昏迷中清醒.③给动物喂食大剂量铵盐可使门静脉血氨浓度升高,当超过肝脏处理氨的能力时,体循环血氨升高,动物出现神经症状及昏迷. 氨对中枢神经系统的毒性作用,目前认为主要是造成脑能量代障碍,以及直接干扰神经细胞膜的正常功能而造成.但是氨中毒不是肝性脑病的唯一发病机制.因为部分患者血氨并不增高,另一些血氨增高的肝病患者并不出现肝性脑病,昏迷程度也不与血氨升高呈平行关系,降低血氨措施并不对每个病例都有效 血氨（blood ammonia；plasma ammonia；serum ammonia）：体各组织各种氨基酸分解代产生的氨以及由肠管吸收进来的氨进入血液，形成血氨。血氨正常值20～60μmol/L。 、血清：22—45umol/L或40—80ug/dl（酶法）。换算成SI单位因素：0.587.
血氨测定的临床意义 2011-05-25 06:31:46 作者：佚名来源：网络 人体血氨（Plasma ammonia）含量极微，但氨对人体有毒，能影响神经细胞的新代。血氨的来源增加和去路减少，都会引起血氨增高。血氨测定对肝性脑病的诊断和鉴别诊断有极其重要的意义。 一、生化特性 血液中氨的 人体血氨（Plasma ammonia）含量极微，但氨对人体有毒，能影响神经细胞的新代。血氨的来源增加和去路减少，都会引起血氨增高。血氨测定对肝性脑病的诊断和鉴别诊断有极其重要的意义。 一、生化特性 血液中氨的来源主要为肠道中细菌分解尿素和由氨基酸脱氨所生成。此外，组织细胞中有多种脱氨酶，能使蛋白质、核苷酸脱氨而生成氨。在正常情况下，氨的主要去路是在肝脏通过鸟氨酸循环合成尿素。此外，脑和肾脏等器官的氨与谷氨酸作用生成谷氨酰胺后被运输到肝脏，在肝脏转变成尿素或其它含氮化合物后由肾脏排出体外，或形成铵盐随尿排出。 二、标本 血氨测定的准确性在很大程度上取决于标本的留取收集。血氨测定不能用血清做标本。应用抗凝血做标本，抗凝剂可用非铵盐的肝素、EDTA和草酸盐三种。血氨测定时，标本的正确留取和收集方法如下：
测定血氨的必备条件
测定血氨的必备条件 氨是人体蛋白质代谢的终产物，对人体中枢神经系统有潜在的毒性作用。其检查主要用于肝昏迷的检测和对症处理。 目前，很多医院为了避免诸多干扰因素而普遍采取清晨采血。血氨检测的干扰因素主要是体现在两个方面：一是外在因素的干扰，如含氨的抗凝剂、含氨根材质做的试管、分析过程中受到氨的污染等。再就是内在因素的干扰即标本在放置过程中氨的析出，血样离开人体后血浆中谷氨酰氨和多肽易水解释放出氨，而红细胞内氨含量比血浆中氨含量高出约2.8倍，因此标本放置时间越长，其血氨浓度将越高。要克服这两方面的干扰因素后才能保证血氨的正确测定。 要解决外在因素的干扰，很大程度上取决于标本的留取和收集。血氨测定不能用血清做标本，应选用抗凝管全血做标本。抗凝剂可选用除氨盐的肝素、EDTA，而抗凝剂的纯度高低对血氨检测结果也有很大影响，高纯度的抗凝剂不会使血氨升高。试管等容器必须是除氨材质的合格容器，否则血氨检测也将会受到干扰。 血氨测定时，标本的正确留取和收集方法如下： 1.用除氨材质的EDTA盐或肝素抗凝管，可采用注射器抽取后立即放入提前准备好的试管内加盖密封，目前各大医院均使用的是合格的除氨真空采血针和真空采血试管采集血样。 2.血液放入试管中后轻轻颠倒混匀5-8次，不可剧烈混匀，以免造成溶血，导致结果偏高。 3.混匀后立即检测，如不能立即测定，必须放置2～4℃冰箱冷藏
可保留2h。 用全血标本离心取血浆检测时标本的正确留取方法如下： 1.用除氨材质的EDTA盐或肝素抗凝剂为添加剂和以除氨处理的PET材质的试管作为容器，使用真空采血系统将血液标本采集好。 2.血标本放入真空采血管中后，将离心速度调至为2000-2500转低温离心5min，取血浆迅速测定，30min内完成检测。 3.如不能立即测定，需将血浆单独取出2～4℃可保留2h，－20℃可稳定24h. 4.红细胞内氨浓度是细胞外的2.8倍，故离心时不可用高转速离心以防止标本溶血。 要想把影响因素减少到最低，使检测值离血氨的真值最近，时间是关键。最好是采集好血样后，立即检测，半个小时内检测完毕。如条件实在有限，全血标本在2～4℃保存，两小时内必须检测完毕。血浆标本应在采血后，立即分离血浆，单独取血浆冷藏保存，二小时内完成检测，方能保证结果的准确性。 目前，我公司根据市场需求研发出肝素分离胶试管，EDTAK2分离胶试管。使用肝素分离胶或EDTAK2分离胶试管离心后无需单独取血浆，因分离胶已将血细胞与血浆完全分离，可原管冷藏，安全，同时也避免了临床检验血氨因时间关系而导致的检测结果不准确等问题。 市场部：夏文静
血清胆固醇含量的测定实验报告
实验二 血清胆固醇含量的测定的实验报告 实验目的：学会利用氧化酶法测定血清胆固醇含量的原理和方法。 实验原理：血清胆固醇由游离胆固醇（30%）和胆固醇酯（70%）组成。血清胆固醇经酯化酶水解后，生成游离胆固醇和脂肪酸；在胆固醇氧化酶的作用下，游离胆固醇产生的H 2O 2与4-氨基安替比林和DHBS 反应生成微红色的醌亚胺。醌亚胺在520nm 有特异吸收，反应产生的颜色与胆固醇含量成正比。 胆固醇酯+ H 2O ???→?胆固醇酯酶 胆固醇+脂肪酸 胆固醇+O 2?? ??→?胆固醇氧化酶 △4胆甾烯酮+ H 2O 2 H 2O 2+4-氨基安替比林+DHBS ???→?过氧化物酶 醌亚胺+ H 2O 实验步骤： 1、取2支试管分别加入的血清和标准胆固醇溶液，并分别标注为“H ”和“SH ”试管。往每支试管加入的沉淀剂，在室温下静置15min ，用2000rad/min 的离心机分离10min 。 2、准备5支试管分别标注为“T ”（总胆固醇）、“H ”（高密度脂蛋白胆固醇）、“ST ”（标准总胆固醇）、“SH ”（标准高密度脂蛋白胆固醇）、“B ”（空白实验）。按照下表准备各支试管：（标准胆固醇浓度为50mg/dL ）
3、准备好以上试管后，充分混合并在37。 的温度下放置20min ，用波长520nm 的分光光度计测量各支试管的吸光度值。 实验结果： 计算公式：总胆固醇=ST T 吸光度值吸光度值×02 .01 .0×50 高密度脂蛋白胆固醇=SH H 吸光度值吸光度值×50 代入数据得：总胆固醇=252 .0167 .0×02.01.0×50=（mg/dL ） 高密度脂蛋白胆固醇=430 .0605 .0×50=（mg/dL ）
生物化学--实验九血浆胆固醇总量的测定
一、授课题目：血清总胆固醇的测定（硫磷铁法）讲授学时数： 3学时 二、授课教师姓名：孙千鸿单位：昆医海源学院生化，化学综合实验室 职称：助教职务： 三、使用教材（包括名称、主编、版次、出版社、出版时间）：《生物化学实验教 程》 四、本次授课的目的、要求（掌握、熟悉、了解）： 1、掌握血清胆固醇的测定的原理，临床意义。 2、熟悉血清胆固醇的测定的方法。 五、本次授课的重点、难点： 重点：血清胆固醇的测定的方法。 难点：血清胆固醇的测定的原理。 六、教学方法和教学手段： 1、联系相关课程内容，引入后续内容的方式。 2、引导式、启发式教学方法。 3、以示教为主。 4、激发学生的学习兴趣，以学生动手操作为主。
七、本次授课的设计方案，包括： 1、各部分内容的讲授时间分配、拟采用的教学方案、多媒体及板书设计、专业外语词汇等。 A、本次授课分为八部分内容讲授，各部分内容的讲授时间分配、拟采用的教学方案如下： 1）联系相关课程内容，讲授血清中总胆固醇的分类、来源。（4分钟） 2）以引导式教学介绍影响血清总胆固醇水平的多种因素。（2分钟）3）为了激发学生的实验兴趣，以启发式教学方式着重讲解血清总胆固醇升高的临床意义。（5分钟） 4）讲解硫磷铁法测定血清总胆固醇含量的原理。（5分钟） 5）以实际操作演示实验的操作步骤。（15分钟） 6）实验结果的分析，强调计算公式。（3分钟） 7）实验的注意事项。（5分钟） 8）布置下次实验预习内容（1分钟） B、板书设计： 1）目的要求： 2）实验原理： 3）实验操作： 4）注意事项：
5）结果与讨论： 6）预习下次实验： 2、重点和难点的讲授方法、时间分配等。 1）实验原理（16分钟） a、联系相关课程内容，介绍血清中总胆固醇的分类、来源以及去路。（4分钟） b、以引导式教学方式，以引导式教学介绍影响血清总胆固醇水平的多种因素。（2分钟） c、为了激发学生的实验兴趣，以启发式教学方式着重讲解血清总胆固醇升高的临床意义。（5分钟） d、讲解硫磷铁法测定血清总胆固醇含量的原理。（5分钟） 2）实验操作（15分钟） a、以实际操作演示抽提滤液的制作过程，强调混匀的操作要领。（5分钟） b、以实际操作示教，详细介绍离心机的使用，强调离心前平衡的重要性。（2分钟） c、以实际操作示教，样品的加入，强调加样顺序，混匀时的注意事项。（5分钟） d、复习分光光度计的使用，比色后记录数据。（3分钟） 3）引导学生对实验数据进行计算，并分析结果。（3分钟） 5）强调实验注意事项。（5分钟）