黄芪多糖的提取工艺及含量测定研究_图文(精)

安徽农业科学,Journal ofAnhui A一.蹦.2009,37(10:4493,4498责任编辑金琼琼责任校对夏蓉黄芪多糖的提取工艺及含量测定研究

李万才 (滨州职业学院生物工程系。山东滨州256603

摘要[目的]研究黄芪根中多糖的含量,[方法]采用分光光度法测定膜英黄芪中多糖的含量,以葡萄糖为对照品.以苯酚一浓硫酸为显色荆.在波长486m处测定样品溶液的吸光度。【结果]标准曲线为A=51.654C+0.0372.r=0.999

8,脚。为1.28%.BSD2为 1.50%。[结论]该方法操作简单,灵敏度高。

关键词黄芪根;多糖含量;分光光度法

中图分类号s567.23+9文献标识码A 文章编号0517—661l(200910—04493—01

Research on Extraction Process and Content Determination of Astragalus Polysaccharides

LI Wan-cai(Department of Biological Engineering,Binzhou Vocational College,Binzhou,Shandong 256603

Abstract Objective]111P study re.arches the poly鲴echaride content in the Astragalus root.f Method Using spectrophotometry determines polysaceharide content in Astragalus membranaceus.taking slucose酗compari.,“m,taking phenol?concentrated sulfuric acid黯developer and determining the absorbency of sample∞lution

underA=486nln.『Resultl 111P standard curve is A=51.654C+0.0372。r=0.9998. 冗sD.js 1.28%and RSD,is 1.5%(n=5.I Conclusion 111is method is simple,sensitive and accurate.

Key words Astragalus root:Polysaccharides content;Spectrophotometry

黄芪(Radix Astragalus是豆科植物,膜荚黄芪[Astraga— lus

membranaceus(Fisch.Bge.]的干燥根含有多糖、木质素类、黄酮类化合物、香豆苯

醚类、生物碱类、皂苷类、甾体类、氨基酸、微量元素等众多的生物活性物质¨。J,具有补气同表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌之功能博J。膜荚黄芪多糖不仅是机体的重要组成部分。还具有提高机体免疫能力、抗菌、抗病毒、抗衰老、抗肿瘤、抗突变、降血脂、降血糖、防辐射以及改善动物生产性能等功能,同时由于它自身对细胞毒性极小,对正常细胞影响很小,因此将多糖作为药物对于治疗多种免疫缺损疾病和自身免疫疾病有显著的效果。笔者采用可见分光光度法对膜荚黄芪根中多糖的含量进行了测定,旨在为膜荚黄芪的产品开发提供理论依据。

l材料与方法

1.1样品来源膜荚黄芪于lO月份采自山东,采后洗净、晾干,60℃烘干,粉碎后过60目筛备用。

1.2仪器与试剂SX722分光光度计(上海精密仪器仪表有限公司,8453E型紫外分光光度仪(美国Agilent,超声仪 (SK8210HP,水浴锅,酒精计,漏斗,分液漏斗。无水葡萄糖,苯酚分析纯,浓硫酸,95%乙醇,氯仿,正丁醇,活性碳。 1.3多糖的提取与精制一一训称取膜英黄芪根粉100g,加水适量,超声提取3次,30nlin/次,过滤,合并滤液,浓缩,加 95%乙醇至含醇量为80%,静置过夜(4℃,过滤,分离出沉淀,加适量水溶解,加95%乙醇至含醇量为80%,再静置过夜(4℃,过滤。分离出沉淀,加水溶解,除蛋白(氯仿:正丁醇=4:l,共除20次后,加活性炭脱色,抽滤,加95%乙醇至含醇量为80%,静置过夜(4℃,过滤,分离出沉淀,冷冻干燥得多糖0.5051g,密封备用。

1.4溶液的制备

1.4.1葡萄糖标准溶液。精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖0.1g,置100rng容量瓶中,加蒸馏水至刻度,再精密吸取10IIll于另一容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀备用。得O.1

作者简介李万才(1966一,男,山东滨州人.副教授,从事生物技术研究。

收稿日期2009-01-04 ms/m1的葡萄糖标准溶液。

1.4.2苯酚溶液。称取苯酚100g,加0.10g锌片、0.05g NaHCO,。蒸馏,收集182℃馏分,称取该馏分5g,加蒸馏水 95Ⅱd。置棕色瓶中备用,得浓度为5%的苯酚溶液。

1.4.3膜英黄苠多糖溶液。精密称取干燥至恒重的膜荚黄芪多糖0.1g,置100rng 容量瓶中,加蒸馏水至刻度,再精密吸取10nd于另一容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀备用,得 0.1mg/ml的膜荚黄芪多糖溶液。

1.5最大吸收波长的选择分别配制0.1r-,罾/IIlr的葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、醛糖溶液,再分别精密吸取 l ml于具塞试管中。加苯酚试液l IIlI,摇匀,迅速加浓硫酸 5rrII,振摇2min后,于沸水浴中旋转加热15min,取出置冷水中冷却至室温。以苯酚一浓硫酸溶液为空白,用紫外分光光度仪在波长400~800Bin范围内,扫描光谱图,得上述糖溶液的最大吸收波长分别为486,488,479,488、479nnl。以同样的方法处理膜荚黄蓖多糖样品溶液,在波长486nnl处有最大吸收。

2结果与分析

2.1葡萄糖标准曲线的绘制分别精密吸取O.1ms/m1的标准溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0IIll于具塞试管中,再分别加蒸馏水1.0、0.8、0.6,0.4、0.2,0ml,并给试管编号。然后分别加苯酚试液l rnl,摇匀,迅速加浓硫酸5nll。振摇2min 后,于沸水浴中旋转加热15min,取出置冷水中冷却至室温, 以苯酚一浓硫酸溶液为空白,于波长486舳处测吸光度,得回门方程A=51.654C+o.0372,r=o.9998(,l=5,说明线性关系较好。

2.2换算因子(,的测定精密称取已干燥至恒重的膜荚黄芪多糖4.048mg于

100ml容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,摇匀,得多糖供试品溶液。精密吸取该溶液

2lIll,按“2.1”方法,测定波长486illn处的吸光度为2.9322。由回归方程计算供试品中葡萄糖的含量为0.056,W,/wa,按下式计算厶 {=w/c

式中,1,0为供试液中膜荚黄芪多糖的量(4.048rag,由公式 (下转第4498页

安徽农业科学

2009生

往受到限制。而新的生物指纹图谱是能够鉴别生物个体之间差异的电泳图谱,多态性丰富且具有高度的个体特异性和稳定性,非常适合进行品种的鉴定工作旧“。

传统的鉴定手段更多是从生物的形态、结构上进行的鉴别,但生物的外形、结构在环境因素的影响下会发生一定程度的改变,例如同种植物在不同的气候、土壤、水分、日照等条件下,其形态、组织细胞都会有差异,因此有可能会造成错误的鉴别结果,特别是疑难种、易混种,用传统方法较难鉴别。而DNA分子作为遗传信息的直接载体,不受外界因素、生物体发育阶段以及器官组织差异的影响,故以DNA分子特征进行物种鉴别准确可靠Ⅲ】。RAPD技术正是依托DNA 分子特征进行物种鉴别的、新兴、科学的鉴别方法,该技术在传统的鉴别技术基础上提升了一大步,对宁夏枸杞的鉴别起到重要作用。 3结语

枸杞鉴别作为与人类的现实健康生活息息相关的一个内容,在近年来的科研中日益提上日程,从传统鉴别手段的日臻完善,到新兴鉴别手法的蓬勃发展,无论是传统的、抑或是新兴的,其在现实的枸杞鉴别工作中都在继续发挥着各自的作用。传统鉴别方法的优势是注重研究者的个人素质和专业技能,而新兴的高科技鉴别手法无疑注重研究者科学的手段和对精密的实验器材操作。基于不同的研究者素质,以及枸杞鉴别方式的灵活和多样性,传统和新兴的鉴别方式都以其不同的功能在日益发展的枸杞鉴别工作中发挥着各自应有的作用。在期待新的鉴别方式不断更新的同时,传统的鉴别方式同样是不可或缺的。因此,先进的分子生物学技术与传统枸杞鉴别手段的有效结合,是宁夏枸杞鉴别方式的重要途径Ⅲ】,两者的结合可在各自原有鉴别的基础上起到锦上添花的作用。参考文献

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—+一—-卜-??卜一-—卜.-+-.-4--.-+-.

为5.23%-9.13%。可见,用分光光度法测定膜荚黄芪根中多糖的含量是可行的,该方法稳定可靠,简单易行。参考文献

容量瓶中,加求适量,80气超声提取30而氓加水至刻度j1圾_一{}]嚆功昔'灏哮j 毯玉荚,等多序岩黄蓼毛4l律成分研究[n中国中药杂

取2

1111于具塞试管中,按“2.1’’的方法,测定波长486姗处

[2]霪舅量锬萎?黼‘多序岩黄芪化学成分研究[J].药学学报.

的吸光度。

多糖(%=CDf/w×100%

式中,C为样品溶液中葡萄糖的浓度;D为样品溶液的稀释倍数i厂为换算因子;∞为样品的质量。由该公式得多糖平均含量为7.35%。

2.4精密度试验精密吸取0.1ms/ml葡萄糖对照品溶液

0.4ml

5份,0.1ms/m1膜荚黄芪多糖供试液O.4

IIll

5份,按

“2.1”的方法,分别测定波长486/lln处的吸光度,计算得

RSDl=1.28%,RSD2=1.50%。

3小结

通过对膜荚黄芪根中多糖含量的测定可知,其多糖含量

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黄芪多糖的提取工艺及含量测定研究

作者:李万才 , LI Wan-cai

作者单位:滨州职业学院生物工程系,山东滨州,256603刊名:安徽农业科学

英文刊名:JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES年,卷

(期:2009,37(10被引用次数:

3次

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本文链接:https://www.360docs.net/doc/e17720606.html,/Periodical_ahnykx200910055.aspx

综述：黄芪多糖的提取工艺研究和应用展望

黄芪多糖的提取工艺研究及应用展望微生物与生化药学生研1001班 2010001295：王朝绚摘要：本文综述了从中药黄芪中提取多糖的不同方法并对其进行比较以及黄芪多糖在抗病毒，免疫调节及血糖调节等方面的生物活性；对黄芪多糖的应用前景进行了展望。关键词：黄芪，多糖，提取分离，生物活性 1 黄芪我国的中草药资源丰富，种类繁多，多达12800多种，其中又以植物类的占大多数。中草药黄芪（membranaceus），属于豆科（Leguminosae），又名黄耆，是植物和中药材的统称，产于内蒙古，山西，甘肃，黑龙江等地。中药材黄芪为豆科草本植物蒙古黄芪，膜荚黄芪的根，味甘，性温，具有补气固表、利水退肿、脱毒排脓、生肌等功效，《中华人民共和国药典》上明列有扶正固本，补中益气的功效。现代医学发现黄芪的药理作用很广，其能增强机体免疫功能，加强细胞代谢，调节DNA复制、RNA和蛋白质的合成，具有固肾、降压、保肝、抗炎的功能[1]。 2 黄芪多糖黄芪多糖（APS）是葡萄糖和阿拉伯糖的多聚糖，是黄芪中含量最多、免疫活性较强的一类物质，是黄芪中重要的天然有效成分。具有促进免疫提高巨噬细胞活性，抑制EAS、双向调节血糖作用[2,3]。其分子量小于8万级的多糖可制成静脉注射液，适用于化疗后的滋补，提高人体免疫力[4]。也可以在化学上对其进行改性使其活性增强，因而具有很好的抗艾滋病和抗凝血的应用前景[5,6]。目前黄芪多糖主要用于出口国外，国内需求量也很大，具有广阔的发展前景[7,8]。但是目前黄芪多糖的提取分离工艺不成熟，效率较差，而且提取的成本较高。因此严重阻碍了黄芪多糖的研究与开发，本文综述了近年来有关黄芪多糖提取工艺的研究，为进一步的研究提供一定依据。 3 黄芪多糖的提取工艺判断黄芪多糖提取工艺的优良，有以下几个方面需要考虑：黄芪多糖的得率；所提粗黄芪多糖的含糖量；整个工艺流程是否经济；不破坏所提取的黄芪多糖的活性。近年来有以下几种提取方法： 3.1 水提醇沉法水提醇沉法的基本工艺为：黄芪根粉—以不同的次数不同量的水煮沸回流不同的时间—合并滤液—调节PH为中性—浓缩—加入一定浓度的乙醇—离心分离—加水溶解—过滤—滤液浓缩至小体积—加乙醇至浓度的80%—乙醇或丙酮洗涤—干燥—粗多糖。水提醇沉法是应用最多的提取黄芪多糖的传统方法，按这种方法得到的黄芪多糖的的

黄芪多糖的提取和含量测定研究

黄芪多糖的提取和含量测定研究黄芪为豆科植物，是蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，主要药理成分是黄芪多糖(APS)和黄芪甙。 APS在医学和兽医临床上研究应用较为广泛，可作为免疫促进剂或调节剂，同时具有抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗应激、抗氧化等作用(张立洲，1996;郭小清等，2004)。目前APS的提取主要采用水提取和 CaO提取两种工艺，水提取分离工艺不成熟，效率较差，提取成本较高，严重影响了APS的研究开发利用。李红民等(2000)报道，用pH9~10的CaO水溶液提取APS，得率显著提高，成本下降。我们用水提取法和CaO溶液提取法进行APS的提取并测定含量，以便从中筛选出较好的提取方法，为生产实践提供参考。 1材料与方法 1.1材料与试剂黄芪根:购自平凉市某中药材门市部。葡萄糖、苯酚、浓硫酸、95%乙醇、丙酮，均为分析纯。21分光光度计，TN 型托盘式扭力天平，容量瓶，水浴锅，干燥器，粉碎机等。 1.2方法 1.2.1黄芪多糖的提取。水提取法用蒸馏水煮沸提取，CaO溶液提取法用 pH9~10的CaO溶液煮沸提取，浓缩时调至pH6.5,以后两法步骤相同。 ?称取黄芪根1kg，去掉杂质和泥土，粉碎成粉末。?黄芪根粉末中加以6~7倍的蒸馏水(或CaO溶液)，煮沸1.5h，用4层纱布过滤，滤渣用同样方法煮沸3次。?合并滤液，调pH至6.5左右，加热浓缩至一定量。?将浓缩液以2 000r/min离心 10min，上清液中加3倍量95%乙醇沉淀。?倾去上清液，沉淀物中再加入95%的乙醇至浓度为 80%，静置，倾出上清。?滤渣用丙酮洗涤2次，过滤。将滤渣放入干燥器中，-20?冷冻真空干燥，即得到APS。

黄芪多糖提取实用工艺研究(改)

抚顺师范高等专科学校黄芪多糖提取方法的研究学生姓名：赵晓玲指导教师：李峰专业名称：食品检验研究方向：黄芪多糖提取方法的研究所在学院：抚顺师范高等专科学校二零一一年七月

目录摘要 (3) 1 前言 (3) 1.1黄芪的生物学特性及生境 (3) 1.1.1膜荚黄芪 (4) 1.1.2蒙古黄芪 (4) 2.1黄芪多糖功效 (5) 2.1.1 黄芪多糖的免疫调节活性 (5) 2.1.2 抗肿瘤作用 (5) 2.1.3 对创伤感染的影响 (5) 2.1.4 保护作用 (5) 2.1.5 对血糖的调节作用 (6) 2.1.6 黄芪多糖抗病毒作用 (6) 2.1.7 黄芪多糖抗细菌作用 (6) 1.3黄芪的成分及药用价值 (6) 1.4研究的意义 (7) 2．材料与试剂 (7) 2.1材料 (7) 2.2仪器 (8) 2.3方法 (8) 3.热水提取草本刺嫩芽根多糖的正交试验结果 (8) 致谢 (11)

摘要鉴于多糖的生物活性的多样化，并且对于人体无毒副作用，是一种具有巨大开发潜力的新型的保健物质，所以从天然植物中提取多糖成为当今保健品研发的热点。基于多糖的药用保健功能，本文从黄芪中提取多糖，对其的提取工艺进行研究。目前黄芪多糖的提取主要采用水提取和CaO提取两种工艺，水提取分离工艺不成熟，效率较差，提取成本较高，严重影响了黄芪多糖的研究开发利用。用pH9~10的CaO水溶液提取黄芪多糖，其得率显著提高，成本下降。关键词：黄芪多糖水提取CaO 1 前言 1.1黄芪的生物学特性及生境黄芪（Milkvetch Root），又名黄耆，为植物和中药材的统称。植物黄芪产于内蒙古、山西、甘肃、黑龙江等地，为国家三级保护植物。中药材黄芪为豆科草本植物蒙古黄芪、膜荚黄芪的根，具有补气固表、利水退肿、托毒排脓、生肌等功效。黄芪的药用迄今已有2000多年的历史，现代研究，黄芪含皂甙、蔗糖、多糖、多种氨基酸、叶酸及硒、锌、铜等多种微量元素。有增强机体免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗应激、降压和较广泛的抗菌作用。但表实邪盛，气滞湿阻，食积停滞，痈疽初起或溃后热毒尚盛等实证，以及阴虚阳亢者，均须禁服。

黄芪多糖提取方法的研究-2012

华达专栏囝小肽善冢技或论坛黄芪多糖提取方法的研究董文阳周岩民南京农业大学动物医学院摘要黄芪多糖（ＡＰＳ）为黄芪主要活性成分之一，具有促生长、抗氧化、抗应激和提高免疫力等多种功效。介绍对ＡＰＳ的６种提取方法，包括水提取法、碱醇提取法、超声波提取法、微波提取法、超高压提取法扣超滤法，及每种方法的提取效果，并就ＡＰＳ提取方丢的研究进展做一综述。关键词黄芪黄芪多糖提取中图分类号：Ｓ８１６．７文献标志码：Ｂ文章编号：１００２—２８１３（２０１２）０７—００３２—０３黄芪是历代常用的补益中药，为豆科植物膜荚黄芪或蒙古黄芪的干燥根，具有补中益气、拔毒排脓、敛疮生肌和利水退肿之功效。黄芪多糖（ＡＰＳ）是黄芪中最重要的天然有效成分，包括葡聚糖和杂多糖：葡聚糖有水溶性的１／，一（１—４）（１＿＋６）葡聚糖和水不溶性的ｉｆ，一（１＿４）葡聚糖；杂多糖多为水溶性酸Ｊ睦杂多糖，主要由葡聚糖、鼠李糖、阿拉伯糖和半乳糖组成，少量含有葡醛酸，有些杂多糖仅由葡萄糖和阿拉伯糖组成。药理研究表明：ＡＰＳ具有抗肿瘤、抗衰老、抗辐射及调节血糖等作用；还能促进免疫器官功能和抗体生成，增加机体的非特异性抵抗能力。因其抗菌和抗病毒效果良好，临床常用作免疫增强荆。自２０世纪８０年代以来，为了进一步开发利用ＡＰＳ，许多学者对ＡＰＳ的提取工艺进行了大量研究，以期找出一种更合理和更可行的提取方法。在此就目前已有的多种提取方法进行综述。１一般工艺流程ＡＰＳ是溶于水，不溶于醇的大分子化合物，现行的工艺都是用水煮后将ＡＰＳ提取出来，再用乙收稿日期：２０１２—０２—０８通信作者：周岩民３２饲料研究ＦＥＥＤＲＥＳＥＡＲＣＨＮＯ．０７．２０１２醇将多糖从提取液中沉淀、分离并精制出来。一般工艺条件是用８～１２倍量水，煎煮２－３次，每次１－２ｈ。其工艺流程图如下：２前处理工艺提取ＡＰＳ前一般需对原料黄芪进行物理处理，如：切成黄芪饮片或黄芪粉末。许多学者对其前处理工艺进行研究后发现，通过对原料黄芪进行化学处理或生物学处理可显著提高ＡＰＳ的收率。２．１醇处理法该方法又称醇除水提取法，在提取ＡＰＳ时，先以乙醇为溶剂对黄芪原料进行回流。张昀等先将药材加人５倍量的９５％乙醇回流，除去黄芪中黄芪总皂苷；提取ＡＰＳ时，以１０倍量蒸馏水１００ｏＣ回流３ｈ，过滤，处理，获得ＡＰＳ（收率６．２１％）。吴永平等先用６倍量的９０％乙醇水浴回流提取３次，每次１ｈ；待乙醇挥干后，加５倍量的水，隔水加热提取３次，每次２ｈ；合并水提液，处理获得ＡＰＳ（收率２８．５４％）ｏ以上２种研究方法相似，但收率相差较大，可能与所用乙醇的质量浓度、量、加水量、提取时间和次数有关，具体原因尚待研究。万方数据

黄芪多糖提取工艺研究(改)

目录摘要 (4) 1 前言 (4) 1.1黄芪的生物学特性及生境 (4) 1.1.1膜荚黄芪 (5) 1.1.2蒙古黄芪 (5) 2.1黄芪多糖功效 (6) 2.1.1 黄芪多糖的免疫调节活性 (6) 2.1.2 抗肿瘤作用 (6) 2.1.3 对创伤感染的影响 (6) 2.1.4 保护作用 (6) 2.1.5 对血糖的调节作用 (7) 2.1.6 黄芪多糖抗病毒作用 (7) 2.1.7 黄芪多糖抗细菌作用 (7) 1.3黄芪的成分及药用价值 (7) 1.4研究的意义 (8) 2．材料与试剂 (8) 2.1材料 (8) 2.2仪器 (9) 2.3方法 (9) 3.热水提取草本刺嫩芽根多糖的正交试验结果 (10) 致谢 (12)

黄芪多糖提取

黄芪多糖提取一、实验目的学习并掌握黄芪多糖的提取技术二、实验原理黄芪为豆科植物的干燥根，主要药理成分是黄芪多糖和黄芪甙，黄芪多糖在医药和畜医临床上研究应用较为广泛，可作为免疫促进剂和调节剂同时具有抗病毒和抗肿瘤，抗衰老，抗应激，抗氧化等作用。能提高未成年家畜的抗病能力，对幼仔猪幼畜经常添加可以减少疾病。三、实验材料黄芪根，氧化钙，95%乙醇，托盘天平，粉碎机，电磁炉，白瓷缸，稀盐酸，纱布，烧杯，玻璃棒四、实验步骤黄芪多糖的提取用CaO溶液提取法。采用PH9~10氧化铝溶液, 煮沸提取，浓缩时调PH6.5左右。 ①称取黄芪根（500g）100g,去掉杂质和泥土，粉碎成粉末。 ②黄芪根加入6~7倍的CaO溶液，煮沸1h,用8层纱布过滤。 ③合并滤液调PH至6.5左右。 ④将浓缩液加入2倍量的95%乙醇沉淀。 ⑤倾去上清液，沉淀物再加入95%乙醇，至浓缩为80%，静置倾出上清液，滤渣即为黄芪多糖。五、实验结果及分析结果

黄芪多糖的物理性状，提取的黄芪多糖为灰白色粉末，易溶于水, 溶液乳白色，无杂质。最后得到的黄芪多糖在酒精中形似豆腐花，灰白色，经洗涤沉淀后的滤渣为黄芪多糖。分析黄芪多糖作为黄芪纤维质的组成部分。纤维在水中的溶胀作用和溶解性差，因此水提取法吸收率低。在碱性溶液中的溶胀作用溶解性显著增加。纤维之间的酯键易断裂而发生剥皮反应，使更多的多糖得以游离而被提取出来。从而提高多糖的回收率。因此黄芪多糖应尽量避免在酸性条件下提取。【下载本文档，可以自由复制内容或自由编辑修改内容，更多精彩文章，期待你的好评和关注，我将一如既往为您服务】

黄芪多糖的提取工艺及含量测定研究_图文(精)

安徽农业科学,Journal ofAnhui A一.蹦.2009,37(10:4493,4498责任编辑金琼琼责任校对夏蓉黄芪多糖的提取工艺及含量测定研究李万才 (滨州职业学院生物工程系。山东滨州256603 摘要[目的]研究黄芪根中多糖的含量,[方法]采用分光光度法测定膜英黄芪中多糖的含量,以葡萄糖为对照品.以苯酚一浓硫酸为显色荆.在波长486m处测定样品溶液的吸光度。【结果]标准曲线为A=51.654C+0.0372.r=0.999 8,脚。为1.28%.BSD2为 1.50%。[结论]该方法操作简单,灵敏度高。关键词黄芪根;多糖含量;分光光度法中图分类号s567.23+9文献标识码A 文章编号0517—661l(200910—04493—01 Research on Extraction Process and Content Determination of Astragalus Polysaccharides LI Wan-cai(Department of Biological Engineering,Binzhou Vocational College,Binzhou,Shandong 256603 Abstract Objective]111P study re.arches the poly鲴echaride content in the Astragalus root.f Method Using spectrophotometry determines polysaceharide content in Astragalus membranaceus.taking slucose酗compari.,“m,taking phenol?concentrated sulfuric acid黯developer and determining the absorbency of sample∞lution underA=486nln.『Resultl 111P standard curve is A=51.654C+0.0372。r=0.9998. 冗sD.js 1.28%and RSD,is 1.5%(n=5.I Conclusion 111is method is simple,sensitive and accurate. Key words Astragalus root:Polysaccharides content;Spectrophotometry 黄芪(Radix Astragalus是豆科植物,膜荚黄芪[Astraga— lus membranaceus(Fisch.Bge.]的干燥根含有多糖、木质素类、黄酮类化合物、香豆苯

响应面法优化黄芪多糖的提取工艺

响应面分析法优化黄芪多糖的提取工艺高宛莉，杜瑞卿（河南南阳师范学院生命科学与技术学院，河南南阳473061）摘要为黄芪的进一步开发利用提供参考，选取黄芪多糖提取时间、提取温度和料液比3个因素进行二次回归正交组合设计试验，对其提取工艺参数进行优化研究。结果表明:在提取时间为56min 、温度为84?、水体积为276mL 的条件下，黄芪多糖提取最大预测值为8．979μg /mL ，实际提取值8．945μg /mL ，两者基本相符。利用优化工艺参数提取黄芪多糖时，具有最大的提取产量。关键词黄芪多糖;响应面法;提取产量中图分类号TS244文献标识码A 文章编号1004－8421（2012）11－1263－02Optimization of Extraction Technique of Astragalus polysaccharide via Ｒesponse Surface Methodology GAO Wanli ，DU Ｒuiqing (College of Life Science and Tchnology Nanyang Normal University ，Nanyang ，He ’nan 473061，China )Abstract The effects of different temperature ，time and the ratio of solid to solution on the extraction yield of Astragalus polysaccharide were investigated based on composite design of quadratic regression．The extraction technique parameters were optimized with Ｒesponse Surface Methodology．Experimental data were analyzed by solving the regression equation with Design MATLAB 7．0software．It was indicated that the optimum extraction parameters were temperature 84?，time 142minutes and the water volume 276ml．Under those conditions ，the predicted val-ue of polysaccharide extraction yield from Ｒadix Astragali was8．97878μg．mL －1，which was in consistent with the measured value8．945μg．mL －1．It had maximal extraction yield of Astragalus polysaccharide with optimized technique parameters．Key word radix Astragali ;polysaccharide ;response Surface ;extraction yield 基金项目南阳师范学院科青年科研资助项目(QN2012042) 作者简介高宛莉(1978－)，女，汉族，河南南阳人，实验师，从事生物化学的教学与实验工作。E －mail :duruiqing8@163．com 收稿日期2012-10-14黄芪（Ｒadix Astragali ）为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，是中药补气药中最为常用、且功效显著的一味药物，含有多种对人体健康有益的生物成分与微量元素。黄芪多糖（Astragalus polysaccharide ， APS ）是中药黄芪中的主要成分，近年来研究发现其具有免疫调节、抗氧化、保护心肌、促进骨髓造血干细胞增殖和调节血糖等多方面广泛的药理作用［1－2］，是很有价值的免疫增强剂。近年来，黄芪多糖显著的抗癌作用更受到广泛关注［3－4］。笔者等参照有关文献［5－6］选取提取温度、提取时间、料液比三因素，在单因素试验的基础上［7］，利用二次回归正交组合设计试验（响应面分析法）［8－9］，对黄芪多糖的水提取过程工艺条件进行了研究，以期为黄芪的进一步开发利用打下基础。 1材料与方法1．1材料 1．1．1黄芪。黄芪药材，购自河南省医药公司，为蒙古黄芪。1．1．2 仪器与试剂。TU －1901双光束紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司；ＲE －52旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂；D （+）－葡萄糖，Sigma 公司；其他试剂皆为国产分析纯。1．2方法 1．2．1 多糖含量测定。糖含量测定采用苯酚一硫酸法［10］。标准曲线的绘制：精确称取D （+）－葡萄糖20mg ，用重蒸水定容至100mL 作为标准液。将标准液分别稀释成浓度为30μg /mL 、60μg /mL 、90μg /mL 、150μg /mL 和180μg /mL 的溶液，取不同浓度的溶液各0．3mL 置于10mL 试管中，加入50g /L 重蒸苯酚溶液0．6mL 混合后，迅速加入3mL 98%浓硫酸，混匀，室温静置30min 。用直径10mm 石英比色皿测定489nm 处吸光度，用重蒸水进行空白对照试验。在与标准曲线绘制相同条件下测定多糖样品含量。1．2．2 试验设计。在黄芪多糖提取过程中，影响提取液中多糖含量的因素很多，经初步试验选定提取温度、提取时间、料液比（水体积）作为主要影响因素，以提取液中多糖含量为指标，在单因素试验的基础上［7］采用三因素五水平二次回归正交组合设计试验（响应面分析法）［11］，对提取工艺参数进行了优化，试验因素及水平见表1。表1试验因素、因素水平及水平编码 Table 1Experiment fact0rs ，levels and coding 水平因素提取时间（x 1）min 提取温度（x 2） ?水体积（x 3）mL 上星号臂γ 72100320 上水平16895310零水平06085280下水平－15275250下星号臂－γ4870240Δj 8 10 30 注：Δj =（x j γ－x j 0）/γ，γ=1．287。对因素x j 的各个水平进行线性变换，得到水平编码z j = x j －x j 0 Δj ，试验方案见表2。2 结果与分析三因素五水平二次回归正交组合设计试验结果见表2。利用MATLAB7．0软件，对表2数据进行二次多元回归拟合，得到黄芪多糖提取浓度y 2与三因素z 1、z 2、z 3之间的二次回归方程： y 2=8．69067－0．28795z 1－0．03365z 2－0．09964z 3+0． 17083z 1z 2+0．17758z 1z 3－0．24177z 2z 3－0．40120z 12－0．36497z 22－0．36196z 32 式中， z 1'=z 12－116∑16i =1z i 12=z 12－0．707，z 2'=z 22－116∑16 i =1 z i 22=z 22农技服务，2012，29（11）：1263－1264责任编辑胡先祥责任校对胡先祥

黄芪多糖提取物含量鉴别

黄芪多糖提取物含量鉴别针对四川广汉三星堆植物化工有限责任公司提供给本公司的黄芪多糖提取物，通过多批次的性状观察，觉得其黄芪多糖含量不高。通过上网搜索黄芪多糖含量鉴别方法，做了一下实验: 性状:观察其颜色，真的黄芪多糖颜色应为黄色或淡黄色，有青草的气味，味道微甜带苦味。本公司的口服级的黄芪多糖通过其实验，以上现象均没有表现，注射剂的有。吸潮:黄芪多糖的性质决定着有其吸潮性。口服级短时间内无吸潮现象(30分钟内)，而注射级的有。醇沉实验:90%的酒精能沉淀黄芪多糖，能使其聚集。对比之后，口服级的有聚集现象，但根据前面的实验，口服级的应该是劣质黄芪多糖或加入其糊精麦芽糖的复合物，而注射级的只有轻微的聚集物，且与标准不符合，说明注射级的含量也不高，加入了葡萄糖(黑色背景上明显看到有白色颗粒状物质，系黄芪多糖提取物种加入葡萄糖)。加80%乙醇剔除蛋白质后，离心，加入无水乙醇，两者均未见有白色絮状沉淀，放置冰箱冷藏后，也无变化。说明两种级别的黄芪多糖的含量很低且质量不好。广汉三星带回来的样品: 从颜色气味吸潮性对比均比目前我公司用的要好，颜色符合质量较好黄芪多糖的标准，口服和注射均有吸潮性有青草气味。醇沉实验: 90%的酒精沉淀黄芪多糖，口服级的聚集物较多，注射级的较少。但是两者聚集物并没有想象中的好，还是加入了其他糖类。

加水溶解口服和注射的5g后，口服的溶解较慢，注射溶解较快，口服的液面上有轻微的泡沫，而注射的没有，说明两者含黄芪甲苷很少。注射的溶解快说明不是纯黄芪多糖，加入的其他糖类。加入无水乙醇后，口服的有白色絮状沉淀生成，而注射的没有，从现象上来看，口服的含黄芪多糖含量高些(可能是一些质量较差的，如:黄芪多糖链被破坏了)，注射的无现象。含量测定时:注射级的含量达到了70%以上，肯定加入的其他单糖，对方是56%，而口服的测出的含量只有24%，与对方提供的含量50%左右不吻合，结合试验来看，口服的确实含有黄芪多糖，成分较高，试验也有现象和结果，但质量差，价值不高。薄层色谱对比，我公司先用的均无法测到黄芪甲苷，而提供方的样品在于对照品相应的位置上显相同颜色的斑点，但是斑点不明显，黄芪甲苷含量少。由此建议:提供的样品可以做临床试验，考察其黄芪多糖实际的免疫效果，或者询问供应商是不是还存在更好的黄芪多糖提取物。