2019届人教版 基因工程 单元测试3

基因工程单元测试

学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________

一、单选题

1．下列关于生物工程应用的叙述，错误的是

A．利用植物的微型繁殖技术可以获得遗传特性相同的若干苗木

B．利用反转录法可以获得表达相同蛋白质的若干个cDNA

C．培育抗虫特性相同的转基因棉花植株需要利用植物组织培养技术

D．获得黏性末端相同的两个DNA片段必须利用PCR技术

【答案】D

【解析】

试题分析：植物的微型繁殖技术属于无性繁殖，可以获得遗传特性相同的若干苗木，故A正确。利用反转录法即以mRNA为模板经逆转录酶合成cDNA，因为mRNA相同表达的蛋白质相同，故B正确。培育抗虫特性相同的转基因棉花植株，导入抗虫基因后还需要用植物组织培养技术，故C正确。获得粘性末端相同的两个DNA片段需要用限制性核酸内切酶处理，故D错误。

考点：本题考查基因工程相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度和应用能力。2．有人认为转基因生物势必会打破自然界物种的原有界限，改变生态系统中能量流动和物质循环，会对生态系统的稳定性造成破坏。下列哪项是对上述观点的完全反驳（）

A．种植转基因抗虫作物，可以减少农药的使用量

B．种植抗除草剂农作物可以保护农田土壤环境

C．转基因生物不会改变生物原有的分类地位，充其量只能说明它具有某种新特征的同一物种，不会破坏生态系统的稳定性

D．重组的微生物在降解某些化合物的过程中所产生的中间产物，可能会造成第二次污染

【答案】C

【解析】

试题分析：转基因生物只是转入了少数外源基因，与原来的生物仍是同一物种，所以不会改变自然界物种的原有界限，故C正确。

考点：本题主要考查转基因生物的安全性，意在考查考生能理解所学知识的要点和理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力。3．科学家利用基因工程培育出了耐盐的转基因水稻新品系。下列叙述错误的是（）

A. 如果目的基因的核苷酸序列是全部未知的，可用PCR技术得到

B. 可通过农杆菌的感染以实现重组质粒导入受体细胞

C. 含耐盐基因的水稻细胞可经植物组织培养获得植株

D. 可用较高浓度的盐水浇灌来鉴定水稻植株的耐盐性

【答案】A

【解析】PCR技术获取目的基因的前提条件是要有一段已知的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，A错误；通过农杆菌的感染以实现重组质粒导入受体细胞，这是通过基因工程培育出了耐盐的转基因水稻，B正确；组织培养可以保持亲本的优良性状，含耐盐基因的水稻细胞经植物组织培养获得耐盐的植株，C正确；水稻植株是否耐盐，主要看植株能否在高浓度的盐溶液中生活，因此，可以用较高浓度的盐水浇灌来鉴定水稻植株的耐盐性，D正确。

4．将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新导入大肠杆菌的细胞内，通过发酵就能大量生产人生长激素。下列叙述正确的是（）。

A．发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初级代谢产物。

B．大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传。

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C．大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等。

D．生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA连接酶。

【答案】B

【解析】

试题分析：人的生长激素基因导入大肠杆菌以后形成的生长激素不是大肠杆菌生命活动必须的，是其次级代谢产物，A错误；将人的生长激素基因导入大肠杆菌，实现了基因的重新组合，属于可遗传变异，B正确；质粒的化学本质是小型环装DNA，没有尿嘧啶，C错误；生长激素基因在转录形成RNA时，需要解旋酶和RNA连接酶，D错误。

考点：基因工程、发酵工程

5．在将目的基因导入受体细胞的相关操作中，正确的是（）

A．导入植物细胞时均采用农杆菌转化法

B．转基因动物的获得多数运用基因枪法

C．大肠杆菌作为受体细胞时通常需要使用钙离子处理

D．导入目的基因的动物受精卵在培养液中发育成转基因动物

【答案】C

【解析】

试题分析：将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，A错误；显微注射技术是将目的基因导入动物细胞中最为有效的方法，B错误；大肠杆菌作为受体细胞时通常需要使用钙离子处理，使其成为感受态细胞，C正确；导入目的基因的动物受精卵在培养液中发育成早期胚胎，再经胚胎移植发育成转基因动物，D错误。

考点：基因工程的原理及技术

6．下列关于蛋白质工程的说法，错误的是

A．蛋白质工程使蛋白质更加符合人类需要

B．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行改造

C．蛋白质工程能产生新型蛋白质分子

D．蛋白质工程与基因工程密不可分,又称为第二代基因工程

【答案】B

【解析】蛋白质工程从预期的蛋白质功能出发,使蛋白质更加符合人类需要,A正确；．蛋白质工程是在基因水平上对蛋白质分子进行改造，B错误；蛋白质工程能产生新型蛋白质分子，C正确；蛋白质工程与基因工程密不可分, 蛋白质工程实质上改造了基因结构，又称为第二代基因工程，D正确

【考点定位】蛋白质工程的实质

7．将乙肝抗原基因导入到酵母菌中，通过发酵能大量生产乙肝疫苗。下列叙述正确的是

A．目的基因在酵母菌中表达出抗体

B．目的基因的表达需要线粒体提供能量

C．构建基因表达载体时需用限制性核酸内切酶和DNA聚合酶

D．受体菌内目的基因的转录和翻译发生在同一场所

【答案】B

【解析】将乙肝抗原基因导人到酵母菌中，目的基因在酵母菌中表达出抗原，A错误；目的基因的表达需要能量，而生物体生命活动需要的能量主要由线粒体提供，B正确；、将乙肝抗原基因导人到酵母菌中，不用限制性核酸内切酶和DNA聚合酶处理，C错误；酵母菌是真核生物，目的基因的转录和翻译不在同一场所，D错误。

【考点定位】基因工程的原理及技术；遗传信息的转录和翻译

【名师点睛】将乙肝抗原基因导人到酵母菌中，不用限制性核酸内切酶处理，目的基因转录后需进行加工，才能可用于翻译抗原，目的基因的表达需要能量，而生物体生命活动需要的能量主要由线粒体提供。

8．下列关于限制酶的说法不正确的是（）

A. 限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布

B. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

C. 不同的限制酶切割DNA的切点不同

D. 限制酶的作用是用来提取目的基因

【答案】A

【解析】试题分析：限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，并不是广泛存在于各种生物中，A项错误；一种限制酶能识别双链DNA的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，B、C项正确；在基因工程中限制酶的作用是用来提取目的基因和构建基因表达载体，D项正确。

考点：本题考查限制酶的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。

9．CRISPR/Cas9基因编辑技术可对基因进行定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA 引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割（见下图）。下列相关叙述错误的是（）

A. Cas9蛋白能断裂目标DNA分子中磷酸二酯键

B. 单链向导RNA双链区中嘌呤数等于嘧啶数

C. 该过程可以对基因进行定向改造

D. 单链向导RNA可识别、切割DNA上的目标位点

【答案】D

【解析】Cas9蛋白为核酸内切酶，能断裂目标DNA分子中磷酸二酯键，A正确。单链向导RNA双链区中遵循碱基互补配对原则，嘌呤数等于嘧啶数，B正确。该过程的原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割，因此能对基因进行定向改造，C正确。单链向导RNA可识别目标位点，而DNA由核酸内切酶Cas9负责切割，D错误。

10．质粒之所以能做基因工程的载体，是由于它

A. 含蛋白质，从而能完成生命活动

B. 能够自我复制，且能保持连续性

C. 含RNA，能够指导蛋白质的合成

D. 具有环状结构，能够携带目的基因

【答案】B

【解析】AC、质粒是一种小型环状DNA分子，不含蛋白质，AC错误；

B、质粒能在宿主细胞中能够自我复制，而保持连续性，B正确；

D、质粒具有环状结构，能够携带目的基因，不是作为基因工程载体的必备条件，如原核生物的拟核也是环状结构，也能携带基因，但一般不作为运载体，D错误。

考点：基因工程的原理及技术。

点睛：对于基因工程的运载体可以从以下几方面去把握：

1、常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。）

2、作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。

3、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。

11．下列关于转基因植物的叙述。正确的是（）

A．利用转基因技术可以改良植物的品质

B．转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加

C．动物的生长激素基因转入植物后不能表达

D．如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题

【答案】A

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【解析】

试题分析：利用转基因技术可以改良植物的品质，例如将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米，获得的转基因玉米中赖氨酸的含量比对照提高30%，A项正确；转抗虫基因的植物可对昆虫的抗性进行定向选择，进而导致昆虫群体的抗性基因频率增加，B项错误；自然界中所有生物共用一套遗传密码，所以动物的生长激素基因转入植物后可以表达，C项错误；目前转基因植物的外源基因几乎均来源于自然界，但由于转移的基因有不少是异种生物的基因，同时，由于外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，因此在转基因生物中仍有可能存在安全性问题，D项错误。

考点：本题考查基因工程应用的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。

12．基因检测技术不能应用于

A．侦查罪犯B．预防遗传病

C．基因诊断遗传病D．人工体外受精

【答案】D

【解析】

试题分析：人工体外受精与基因检测没有关系，D错误。

考点：本题考查基因检测技术的应用，意在考查考生的理解应用能力。

13．对转基因生物引起安全性争论的原因不正确的是( )。

A．外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的

B．转移的基因一般是功能已知的基因，且往往属于同种生物的基因

C．科学家对基因的结构不太清楚

D．科学家对基因间的相互作用及基因的调控机制了解有限

【答案】B

【解析】转基因生物转移的基因虽是功能已知的基因，但不少是异种生物的基因，外源基因插入基因组的部位往往是随机的，且科学家对基因的结构、基因间的相互作用及基因调控机制了解有限，所以转基因生物可能会引发食物安全、生物安全、环境安全等方面的问题。

14．重组人胰岛素原基因生产胰岛素，首先要获得目的基因，但一般不用

．．下面哪种方法（）

A．利用聚合酶链式反应，扩增需要的目的基因

B．用化学方法合成目的基因

C．构建基因文库，从文库中调取目的基因

D．直接从细胞内总DNA中分离目的基因

【答案】D

【解析】本题考查目的基因获得方法，属于考纲理解应用层次。常用的获取目的基因的方法有：常用的获得目的基因的方法有⑴从基因文库中获取目的基因⑵利用PCR技术扩增目的基因⑶DNA合成仪直接人工合成。一般不直接从细胞内总DNA中直接分离目的基因，这样具有盲目性，不能得到大量的目的基因。

15．蛋白质工程的基本流程正确的是：

①设计蛋白质分子结构②DNA合成③预期蛋白质功能④据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列

A．①→②→③→④ B．④→②→①→③

C．③→④→①→② D．③→①→④→②

【答案】D

【解析】蛋白质工程的基本流程是：③预期蛋白质功能→①设计预期的蛋白质结构，推测应有氨基酸序列→④据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列（基因）→②DNA合成，最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。故D项正确，A、B、C项错误。

【考点定位】蛋白质工程

16．转基因动物的受体细胞是( )

A.受精卵

B.精细胞

C.卵细胞

D.体细胞

【答案】A

【解析】

试题分析：由于受精卵的全能性最高，并且能够发育成完整个体，因此转基因动物转基因时的理想的受体细胞，A.正确。

考点：本题考查基因工程相关知识，意在考查考生识记所列知识点的能力。

17．下列有关基因专利的叙述，不正确的是( )。

A．基因专利使得基因资源的世界大战极其残酷

B．基因专利威胁着发展中国家的国有医药等产业

C．反对涉及人类固有基因序列的不合理专利行为

D．世界人类基因组组织规定：人类基因组序列所有数据都要保密

【答案】D

【解析】人类的基因数目有限，如果随着被发现，其序列一个个被授予专利，基因资源的世界大战也将极其残酷，发展中国家的国有医药等产业将遭到严重打击。因此，在基因组数据共享问题上，世界人类基因组组织采取了积极行为，反对涉及人类固有基因序列的不合理专利行为。

18．下列有关培育转基因动物的相关叙述，正确的是( )

A．整个培育过程的设计和施工都是在细胞水平上进行的

B．转基因动物的培育成功，表明科学家可打破物种界限，定向改造生物性状

C．培育转基因动物所需的目的基因都是从供体细胞中直接分离得到的

D．转基因动物与原动物相比，由于发生了基因突变而使其基因型发生了改变

【答案】B

【解析】

试题分析：整个培育过程的设计和施工都是分子水平上进行的，故A错；培育转基因动物所需的目的基因可以从供体细胞中直接分离得到的，也可以人工合成，故C错；转基因动物的培育成功，表明科学家可打破物种界限，定向改造生物性状，故B正确；转基因动物与原动物相比，由于发生了基因重组而使其基因型发生了改变，故D错。

考点：本题主要考查基因工程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。

19．下列一般不作为基因工程中的标记基因的是（）

A. 四环素抗性基因

B. 绿色荧光蛋白基因

C. 产物具有颜色反应的基因

D. 贮藏蛋白的基因

【答案】D

【解析】四环素抗性基因的表达产物具有抗四环素的功能，可以作为基因工程的标记基因，A正确；绿色荧光蛋白基因的表达产物具有绿色荧光现象，可以作为基因工程的标记基因，B正确；产物具有颜色反应的基因的表达产物能够产生特定的颜色，可以作为基因工程的标记基因，C正确；贮藏蛋白的基因的表达产物不能观察到任何特殊的实验现象，所以不能作为基因工程的标记基因，D错误。

20．下列有关蛋白质工程的说法错误的有( )项

①蛋白质工程无需构建基因表达载体

②通过蛋白质工程改造后的蛋白质有的仍是天然的蛋白质

③蛋白质工程需要用到限制酶和DNA连接酶

④蛋白质工程是在蛋白质分子水平上改造蛋白质的

A. 1

B. 2

C. 3

D. 4

【答案】C

【解析】蛋白质工程是对基因进行修饰改造或重新合成，然后进行表达，须构建基因表

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达载体；蛋白质工程获得的是自然界没有的蛋白质；蛋白质工程是在基因水平上改造基因，然后将改造的基因与运载体结合形成重组DNA分子导入受体细胞完成复制、表达等，所以④错误，③正确。

21．21．下图为某科研小组采用“基因靶向”技术先将小鼠的棕褐毛色基因导入黑色纯种小鼠的胚胎干细胞(ES细胞)中，再将改造后的胚胎干细胞移植回囊胚继续发育成小鼠的过程。据图分析不正确的是( )

A. 该过程使用的工具酶是DNA连接酶和限制性核酸内切酶

B. 完成第Ⅱ步操作得到由两个DNA切段连接成的产物，必定是载体与棕褐毛基因形成的重组DNA分子

C. 第Ⅲ步操作后，还需经过筛选目的基因已成功转移的胚胎干细胞的过程，才能将该胚胎干细胞注射到囊胚中

D. 改造后的胚胎干细胞移植回囊胚能继续发育成小鼠，其根本原因是细胞核中含有一整套的遗传物质

【答案】B

【解析】试题分析：基因工程所需的酶有两种DNA连接酶和限制性核酸内切酶，故A 正确；步骤Ⅱ是基因表达载体的构建，获得载体与棕褐毛色基因形成的重组DNA分子几率很小，还需要筛选，故B错误；第Ⅲ步操作，目的基因不一定能成功转移到胚胎干细胞中，还需要筛选，故C正确；由于胚胎干细胞的细胞核中含有一整套的遗传物质，使得胚胎干细胞移植成功能够发育为小鼠，故D正确。

考点：本题主要考查基因工程和胚胎工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。

22．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是（）

A. 人工合成目的基因

B. 目的基因与运载体结合

C. 将目的基因导入受体细胞

D. 目的基因的检测与鉴定

【答案】C

【解析】人工合成目的基因与目的基因与运载体结合均涉及碱基互补配对；通过分子杂交检测目的基因是否导入受体细胞以及目的基因是否转录也涉及碱基互补配对；将目的基因导入受体细胞与碱基互补配对无关。

23．作为基因的运输工具——运载体，必须具备的条件之一及理由是

A. 能够在宿主细胞中稳定的保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因

B. 具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达

C. 具有某些标记基因，以便目的基因能够与其结合

D. 它的参与一定能够使目的基因在宿主细胞中成功表达

【答案】A

【解析】作为运载体必须具备的条件之一是能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因，A正确；作为运载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶切点，以便于目的基因的插入，B错误；作为运载体必须具备的条件之一是具有某些标记基因，以便检测目的基因是否导入了受体细胞，C错误；基因是选择性表达的，所以目的基因导入受体细胞后不一定能够表达，D错误。

【点睛】本题考查基因工程的相关知识，重点考查基因工程的操作工具，要求考生掌握作为基因运载体的条件，能准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查。24．目前人类利用基因工程的方法成功培育出转基因抗虫棉，以下说法正确的是（）

A. 苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后直接进入棉花的叶肉细胞表达

B. 抗虫基因导人棉花叶肉细胞后，即可通过传粉、受精，使抗虫性状遗传下去

C. 标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因

D. 转基因抗虫棉经过种植，棉铃虫不会产生抗性，这样可以有效消灭棉铃虫

【答案】C

【解析】试题分析：苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后，需要将重组质粒导入农杆菌中，运用农杆菌转化法将目的基因导致棉花的体细胞中，A错误；如果抗虫基因导入棉花叶肉细胞的细胞质中，产生的花粉粒中不含该基因，如果导入细胞核基因中，该转基因植物相当于杂合子，后代会发生性状分离，B错误；基因表达载体中含有标记基因，标记基因用于重组后重组子的筛选，C正确；由于生物变异是不定向的，因此棉铃虫可能抗性，这种抗性逐渐积累，最终可能导致抗虫棉失去杀虫效果，D错误。

考点：基因工程的应用

25．科研小组从埋藏在西伯利亚冻土的中成功地提取了DNA片段，将它注入到小鼠的胚胎中，并在这个胚胎形成软骨和其它骨骼的过程中发挥了重要作用。下列对该项技术及应用前景的分析，合理的是（）

A．要将猛犸象的基因导入到某动物胚胎内，不能用病毒作为运载体

B．利用绝种动物的体细胞经组织培养可望获得人们所需的器官

C．用上述提取的猛犸象基因替换小鼠细胞内的基因，通过克隆技术可以将已灭绝的猛犸象重新复活

D．猛犸象与小鼠共用一套遗传密码，它们合成蛋白质的方式基本相同

【答案】D

【解析】

试题分析：基因工程中常用做运载体的是：质粒、噬菌体、动植物病毒，所以能用病毒作为运载体，A错误；由于动物细胞的全能性受到限制，不能由体细胞通过组织培养得到各种器官，B错误；只是提取了猛犸象的DNA片段，不可能使灭绝的猛犸象重新复活，C错误；猛犸象与小鼠共用一套遗传密码，所以猛犸象的DNA能在小鼠细胞中表达出猛犸象的蛋白质，D正确。

考点：本题考查基因工程的应用等相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。

二、非选择题

26．苦荞是一种有名的经济植物，全世界唯独在中国西南部的云贵川红土高原和北方黄土高原高海拔山岳地区广为种植。其含有的黄酮类化合物具有降血糖、血脂等功效，CHS 是合成黄酮类化合物的关键酶。有人按照图所示流程把经修饰的CHS基因导入苦荞细胞中，培育高产黄酮苦荞品系。请据图回答;

（1）基因工程中常用的运载工具除质粒外还有______________，过程①需要______________酶。

（2）图中将修饰后的CHS基因导入苦荞体细胞的方法称为_____________，在过程②操作前，需先用Ca2+处理农杆菌，使其成为_____________细胞。

（3）简述CHS基因的培育是否成功，不能用抗原—抗体杂交技术进行检测的原因是___________，可以通过比较转基因苦荞与普通苦荞的_____________的含量或测定细胞中CHS的含量进行鉴定。

【答案】（1）噬菌体、动植物病毒等限制酶和DNA连接

（2）农杆菌转化法感受态

（3）CHS基因通过指导合成CHS（酶），再通过CHS（酶）参与催化合成黄酮类化合物转基因苦荞植株与普通苦荞植株都含有黄酮类化合物黄酮类化合物

【解析】（1）常用的运载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等，形成重组质粒需要限制酶和DNA连接酶。

（2）细菌的质粒一般用农杆菌转化法导入苦荞体细胞。用Ca2+处理农杆菌，使细胞膜处于感受态，增加膜的通透性。

（3）CHS基因通过指导合成CHS（酶），再通过CHS（酶）参与催化合成黄酮类化合物，属于基因间接控制生物体的性状。判断转基因苦荞的培育是否成功，可以比较转基因苦荞与普通苦荞的黄酮类化合物的含量或CHS的含量。

【考点定位】基因工程的应用

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27．现代生物工程技术推动了传统行业的发展，对人类的生产和生活产生了越来越大的影响。下图是利用生物工程技术让羊通过分泌的乳汁生产治疗心脏病药物tPA的大致过程。请据图回答：

（1）步骤①所利用的技术名称是___________，为了快速扩增人tPA基因可以通过_______技术。在该技术反应体系中需要加入原料、酶和过量的引物等，若对一个含tPA基因的DNA扩增6代，则需消耗_____________对引物。

（2）步骤③的受体母羊事先应接受_____________处理。受体母羊对移入子宫的外来胚胎基本上不发生_____________，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。胚胎移植后需对受体母羊进行_______检查。

（3）步骤⑤是从羊分泌的乳汁中提取药物tPA，为了检测乳汁中是否含有所需药物可以用抗tPA蛋白的抗体进行_____________；利用羊分泌的乳汁提取药物tPA有哪些优点___________________。（写两点）

【答案】基因工程（体外DNA重组、转基因、基因拼接技术）PCR63同期发情免疫排斥反应（是否）妊娠抗原抗体杂交产量高、质量好、成本低、易提取

【解析】试题分析：基因工程的基本操作步骤主要包括四步：目的基因的获取，基因表达载体的构建，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测与鉴定。据图分析，①表示基因表达载体的构建，②表示将目的基因导入受体细胞，③表示胚胎移植，④表示目的基因的检测和表达，⑤表示扩大转基因羊群。

（1）过程①表示将羊泌乳基因与人tPA基因重组过程，该技术为转基因技术；大量扩增目的基因可以利用PCR技术。含tPA基因的DNA扩增6代，一共形成了26=64个DNA 分子，所以需要64-1=63对引物。

（2）图中③表示胚胎移植，受体母羊需要进行同期发情处理，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，为胚胎在受体内的存活提供了可能；胚胎移植后需对受体母羊进行妊娠检查。

（3）羊分泌的乳汁中提取的药物tPA是基因控制合成的蛋白质，可以用抗原抗体杂交法检测；利用羊分泌的乳汁提取药物tPA，具有产量高、质量好、成本低、易提取等优点。

【点睛】本题考查了细胞工程和胚胎工程的相关内容，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界中的一些生物学问题。

28．科学家将使啤酒产生丰富泡沫的LTP1基因植入啤酒酵母中，使其产生LTP1蛋白，酿出泡沫丰富的啤酒，具体的操作过程如图所示。（注：限制酶Ⅰ的识别序列和切割位点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切割位点是—↓GATC—）

（1）该技术定向改变了酵母菌的性状，这在可遗传变异中属于___________。

（2）图中所示的基因工程操作过程的A和C分别是___________、___________________。（3）由图中可以看出所用的运载体B是___________。

（4）请画出LTP1基因被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端：___________，请画出B 被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端：___________。分析LTP1基因和B所形成的黏性末端能否黏合?___________。假设能的话，还需利用的一种工具酶是___________。（5）如何检测LTP1基因在啤酒酵母中是否表达?________________________。

【答案】）基因重组提取目的基因将目的基因导入受体细胞质粒

能DNA连接酶检测转基因啤酒酵母能否产生LTP1蛋白

【解析】（1）基因工程可定向改变生物的性状，从变异的角度分析应属于基因重组。（2）图中A表示提取目的基因，C表示将目的基因导入受体细胞。（3）由图中可以看出所用

的运载体B是环状的质粒。（4）限制酶Ⅰ的识别序列和切割位点是—G↓GATCC—，其切割后形成的黏性末端是；限制酶Ⅱ的识别序列和切割位点是—↓GATC—，

其切割后形成的黏性末端是。LTP1基因和质粒的黏性末端相同，因此在DNA 连接酶的作用下能黏合。（5）检测LTP1基因在啤酒酵母中能否表达的方法是检测转基因啤酒酵母能否产生LTP1蛋白。

29．下图是利用基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图，请据图回答：

（1）过程②必需的酶是____________酶，为了提高实验成功率，通常利用____________技术获得大量标记的外源基因。

（2）利用人的皮肤细胞__________（填“能”或“不能”）完成①的过程，理由是____________________。

（3）在利用AB获得C过程中，必须用____________切割A和B，再加入____________，才可以形成C。

（4）下列四条DNA分子，彼此间能够粘连起来拼接成新的DNA分子的一组是____________。

A.①②

B.②③

C.③④

D.②④

（5）不同生物间基因的移植成功，说明生物共有一套______________________。

【答案】逆转录PCR不能皮肤细胞中的胰岛素基因未表达（未转录），不能形成胰岛素mRNA同一种限制酶DNA连接酶D遗传密码

【解析】试题分析：本题考查基因工程及应用的相关内容。图中利用②逆转录法获取目的基因，再通过③PCR技术扩增目的基因，再将目的基因导入大肠杆菌中进行表达。（1）过程②必需的酶是逆转录酶，为了提高实验成功率，通常利用PCR技术获得大量标记的外源基因。

（2）由于胰岛素是由胰岛B细胞合成和分泌的，该基因仅在胰岛B细胞内转录成mRNA，利用人的皮肤细胞不能完成①的过程。

（3）构建重组质粒，必须先用同一种限制酶切割A和B，再利用DNA连接酶，才可以形成重组质粒C。

（4）彼此间能够粘连起来拼接成新的DNA分子的两个DNA片段应该具有可以相互配对的黏性末端，只有②④的黏性末端可以互补配对，D项正确。

（5）不同生物间基因的移植成功，说明生物共有一套遗传密码。

30．下图为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图。据图回答：

（1）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含_______________的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。上图为获得抗虫棉技术的流程。A过程需要的酶有________、_______。图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是______。C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________。（2）离体棉花叶片组织经C、D、E成功地培育出了转基因抗虫植株，此过程涉及的细胞工程技术是_________________，该技术的原理是________________。

（3）检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用______________与提取出的___________做分子杂交。

（4）科学家将植株细胞培养到____________阶段，再包上人工种皮，制成了神奇的人工种子，以便更好地大面积推广培养。

【答案】卡那霉素抗性基因限制性核酸内切酶DNA连接酶农杆菌转化法卡那霉素植物组织培养细胞全能性标记的目的基因mRNA分子胚状体

【解析】试题分析：本题考查基因工程、细胞工程，考查对基因工程、植物组织培养操作程序的理解和识记，解答此题，可根据题中培育流程图判断各过程的名称及其方法、原理。

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（1）含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。上图为获得抗虫棉技术的流程。A过程为基因表达载体的构建，需要用同样的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，然后用DNA连接酶连接。图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是农杆菌转化法。C过程需要根据标记基因选择含有抗虫基因的植物细胞，培养基中需要加入卡那霉素。

（2）离体棉花叶片组织经植物组织培养技术培育为植株，该技术依据的原理是细胞全能性。

（3）检测目的基因是否转录出mRNA，可用标记的目的基因作为探针，与提取出的mRNA分子做分子杂交，若出现杂交分子，说明目的基因已转录。

（4）制备人工种子应将植株细胞培养到胚状体阶段，再包上人工种皮。