冰醋酸法制作大鼠胃溃疡模型

1 前言

胃溃疡是临床常见疾病。尽管当前对于胃溃疡的认识，特别是在有关于胃溃疡的治疗方面已经有了很大的进步。但想要更进一步得了解胃溃疡的病因、病发机制、病理、以及在治疗等方面有更一步的发展，都还需要进行更进一步的研究。虽然纤维内窥镜技术的不断完善，使从人体胃内采取活体组织标本进行研究已不再困难，但动物胃溃疡实验模型对于胃溃疡的研究仍然相当重要，甚至可以说是一种不可替代的方法。建立合理的动物模型并对其加以研究试验是现代医学认识生命科学客观规律的重要方法和手段，特定的动物模型能被有意识地改变那些现实条件下不可能或不容易排除的因素，使通过它可以更加准确地观察实验结果，并将动物的生物特征和疾病特点与人类的疾病进行比较，从而更方便有效地认识人类疾病规律和研究疾病的防治措施。通过对稳定可控的动物胃溃疡模型的操作，人们可按设计要求尽可能地去除非目的性混杂因素、增加处理因素、而且可以观察疾病发展的动态的全过程并对其进行研究。当今，建立大鼠胃溃疡模型的方法已有许多种，如：幽门结扎法、水浸拘束法、冰醋酸法、磷酸组胺法、消炎痛法、利血平法、乙醇法等。其中冰醋酸诱导大鼠胃溃疡模型方法可靠，重复性好，溃疡深而太，与人类的慢性胃溃疡极为相似，在筛选治疗慢性溃疡药物、观察药物治疗效果方面应用广泛，是实验研究中较常用的造模方法。

2 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 实验动物

健康成年雌性SD大鼠12只，购自长春生物制品研究所

2.1.2 药品

冰醋酸

水合氯醛

2.2 方法

2.2.1 制模前准备将12只健康成年实验用大鼠随机平均分成4组，分别为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。在开始制模前先将试验所用大鼠禁食24h，其间只供应饮水。

2.2.2 制模制模时先取实验组大鼠，以10%水合氯醛按照0.2ml/100g比例对其进行腹腔给药，待麻醉后将大鼠仰卧固定，去毛，用75%乙醇进行消毒，用手术刀从剑突下部沿腹白线打开长度约2cm的刀口，打开腹腔。通过刀口找到胃，轻轻将整个胃移出腹腔，

观察胃部情况是否正常。取注射器吸取适量冰醋酸（其中低剂量组每只注射冰醋酸0.01ml、中剂量组每只注射冰醋酸0.03ml、高剂量组每只注射冰醋酸0.05ml），将针头沿胃窦部进入，将冰醋酸注入至胃壁肌层与浆膜层之间。其中低剂量组每只注射冰醋酸0.01ml、中剂量组每只注射冰醋酸0.03ml、高剂量组每只注射冰醋酸0.05ml。将胃放回腹腔，操作完毕后覆盖网膜，缝合刀口，分别缝合腹膜、腹壁各层组织、皮肤。将大鼠放回笼中继续饲养。

2.2.3 制模后观察制模手术后，待试验大鼠苏醒将实验组与对照组比较，观察实验组大鼠活动情况、毛色情况等的变化。将实验大鼠在所对应笼中笼中饲养四天，并对实验组和对照组加以比较，观察实验组大鼠活动情况、毛色情况等的变化，对这期间死亡的实验大鼠进行解剖，并分析死亡原因，将死亡的实验大鼠从笼中取出，打开该大鼠腹腔，找到胃脏，将其取出腹腔外，用剪刀剪断贲门近端和幽门远端，再以弯眼科剪一刃插入幽门断端，沿大弯侧剪开鼠胃，观察大鼠胃窦情况。并制模手术后第三天将大鼠禁食只给水饲养24h。制模手术后第四天，将经过空腹处理的实验组大鼠取出笼，以10%水合氯醛按照0.2ml/100g比例进行腹腔给药麻醉，待麻醉后将大鼠仰卧固定，分别拆开之前在大鼠腹部缝合的皮肤和组织，重新取出胃部，观察胃部情况，是否有溃疡生成及生成的溃疡面积大小。

3 结果

3.1 外观观察

制模手术的当天，每只实验用大鼠都能够在制模手术后苏醒、活动、饮水，但食欲有所下降，活动量减少，毛皮蓬松没有光泽。制模后第一天，在高剂量组出现一只实验大鼠死亡的现象。经解剖分析，该大鼠的死亡原因为制模实验后的缝合腹壁组织时伤及大鼠腹腔内的消化道，造成腹腔内的感染，最终导致该大鼠的死亡，与对其注射冰醋酸的剂量无关。观察大鼠胃窦情况，可以发现该大鼠胃部已经产生明显溃疡：该溃疡的基底部蒙有白色厚苔,其边缘光整,四周粘膜有充血水肿现象。其他实验大鼠均基本正常，能正常活动，饮食、饮水，但与对照组大鼠相比饮食量明显较少，活动量较少，毛皮较松散、缺乏光泽。制模后第二天，观察时发现中剂量组出现一只实验鼠死亡的现象。观察大鼠胃窦情况，可以发现该大鼠胃部溃疡面较小，并有明显的穿孔现象。经过解剖分析该大鼠死亡原因为在制模手术过程中，当用注射器将冰醋酸注射入大鼠胃部时注射器针头将其胃壁穿透，造成其胃部穿孔，导致死亡，死亡原因与对其注射冰醋酸的剂量无关。其他实验组大鼠均表现无异常，同前一天相比在活动、饮食、饮水等方面有所好转，但同对照组大鼠相比饮食量明显较少，活动量较少，毛皮较松散、缺乏光泽。制模手术后第三天，中剂量组出现一只实验鼠死亡的情况（该实验鼠在之前的制模手术中在将胃部取出腹腔时伤到了脾脏）。观察大鼠胃窦情况，可以发现该大鼠胃部已经产生溃疡：在溃疡的基底部有黄白色厚苔,其边缘光整,四周粘膜有充血水肿现象。经解剖分析，该大鼠死亡原因为之前制模手术时造成的脾脏创伤，与注射冰醋酸剂量无关。其他实验组

大鼠均表现无异常，同前一天相比在活动、饮食、饮水等方面有所好转，但同对照组大鼠相比饮食量明显较少，活动量较少，毛皮较松散、缺乏光泽。制模手术后第四天，试验组大鼠没有出现新死亡大鼠。实验组大鼠活动，毛皮光泽等均较前一天有所好转，但与对照组相比活动量依然较小。

3.2 解剖观察

高剂量组剩余实验鼠胃窦处出现明显溃疡现象，溃疡基底部有黄白色厚苔,其边缘光整,四周粘膜有充血水肿现象，大体呈椭圆形，直径分别为0.6cm 、0.7cm 。中剂量组剩余大鼠胃窦部有明显溃疡样现象出现，同高剂量组相比该溃疡面积较小，基底部有黄白色厚苔,其边缘光整,四周粘膜有充血水肿，呈椭圆形，直径为0.4cm 。低剂量组大鼠胃窦前壁黏膜轻度充血水肿,但未见出现明显的溃疡。

表1大鼠胃部溃疡情况表

Table 1 Table of stomach ulcers in rats

图1 低剂量组胃部的溃疡情况

Figure 1 Gastric ulcer cases of low dose group

组别

对照组 低剂量组 中剂量组 高剂量组 剩余实验鼠数

3 3 1 2 溃疡产生情况 无溃疡 胃窦前壁黏膜轻

度充血水肿,但

未见出现明显的

溃疡 有溃疡出现，基底部有黄白色厚苔,其边缘光整,四周粘膜有充血水肿，呈椭圆形，直径为0.4cm 有溃疡出现，溃疡基底部有黄白色厚苔,其边缘光整,四周粘膜有充血水肿现象，大体呈椭圆形，直径分别为0.6cm 、0.7cm

图2 中剂量组胃部的溃疡情况

Figure 2 stomach ulcer cases of middle-dose group

图3 高剂量组胃部的溃疡情况

Figure 3 stomach ulcer cases of high dose group

4 讨论

建立动物模型的基本思想是改进制模方法，使模型尽量与临床疾病相似。大鼠的胃溃疡模型有水浸应激性大鼠胃溃疡模型、幽门结扎型大鼠胃溃疡模型、药物诱发型溃疡、乙醇致大鼠胃溃疡模型、冰醋酸酸烧灼型慢性胃溃疡模型等多种形式，其中冰醋酸酸烧灼型慢性胃溃疡模型具有方法可靠,重复性好,溃疡深而大,且与人类的慢性胃溃疡极为相似等特点，因此该模型制作法在胃溃疡的实验研究中应用较广，所以能够正确、熟练的了解并使用该方法是对胃溃疡病的病因、发病机制、病理、病理生理、治疗等各方面进行更深层次研究的重要前提条件。因此有必要对该方法进行试验，验证，改进，以使其操作步骤及试验中所用到试剂的用法用量有更加准确的了解，方便在以后在对胃溃疡病的病因、发病机制、病理、病理生理、治疗等各方面进行更深层次研究时的应用。

通过制模手术试验总结。在麻醉方面本实验采用以10%水合氯醛按照0.2ml/100g

比例对大鼠进行腹腔给药，麻醉效果与实验用鼠个体差异有关，总体约4min麻醉起效，麻醉持续约时间40min以上，在麻醉时间内能够完成从固定到缝合的所有步骤。使用冰醋酸制作大鼠胃溃疡动物模型，有两种冰醋酸的给予方法可以选择，一种是在大鼠胃窦前壁注入冰醋酸的方法，另一种是用滤纸片浸渍冰乙酸在胃窦部浆膜面贴敷2次，每次30s左右。本实验采用的是用冰醋酸注射于大鼠胃窦前壁的方法，对鼠胃进行冰醋酸注射时冰醋酸的剂量在0.03ml—0.05ml间均可在鼠胃部形成溃疡，溃疡面积基本随所注射的冰醋酸剂量成正比例上升。在制模手术的操作方面，在取出鼠胃时应小心谨慎，避免伤及鼠胃和其他内脏器官，缝合时应也避免伤及大鼠内脏，手术过程注意消毒，避免大鼠毛发进入腹腔内造成腹腔内感染，导致实验鼠死亡。

5 结论

通过采用向大鼠胃壁肌层与浆膜层之间注射冰醋酸的方法可以制备大鼠胃溃疡模型。制模过程中所用麻醉剂可以是10%水合氯醛，注射剂量为0.2ml/100g。向大鼠胃部注射冰醋酸的剂量0.03ml-0.05ml。

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致谢

光阴荏苒，日月如梭，在农大的四年学习时间即将过去，四年的光阴让我成长，让我从青涩走向成熟。在漫长的人生旅程中，四年时间并不算长，但对我而言，这即是磨砺青春、挥洒书生意气的四年，也是承受师恩、增长才干、提高学识的四年。我将以一个新农大人的面貌，重新投入到火热的工作和事业中。在此，谨对培育我的母校、教导我的老师、帮助我的同学们致予最诚挚的谢意和敬意。

六十年农大，风霜砥砺，桃李芬芳。吉林农业大学作为吉林省唯一一所重点高等农业学府，她雄厚的师资力量、悠久的文化积淀、笃定的治学理念和深远的情怀在省内国内甚至国际社会早已享有盛名，也是我心仪已久，决意投在门下的重要原因。在农大生命科学学院学习的四年里，我亲身体会到各位老师和前辈们严谨求实的治学态度、渊博卓著的学识才华和传道授业、以身作则、高尚无私的敬业精神，已经超脱了知识传授和文化交流的范畴，形成独立自主、兼容并包的治学氛围和积极进取、紧贴实际、关心家国的人文情怀。我为我能在吉林农业大学生命科学学院学习而感到荣幸和自豪，相信这将是我人生当中最重要最难忘的一段经历。

在此，我特别要感谢我的论文指导老师赵福广先生。赵老师吉林农业大学众多优秀的教师中的一员，他学识渊博，专业精通，对教育事业怀着深厚的感情；他诲人不倦，与同学们保持着良好的沟通并经常给予科学的指导和热心的勉励。就本篇毕业论文总结报告而言，从提纲、草拟、修改到最后定稿，赵老师都给予了一而再、再而三的精心批阅，每个环节都凝结老师努力的付出和辛劳的汗水。毋庸讳言，老师的道德文章将成为我人生的座标和里程碑。

我还要感谢给予我很多关心和帮助的同学们，四年学习生活使我们结下深厚的友谊。俗话说天下没有不散之筵席，在这毕业之际，我衷心地同学和朋友们在以后的人生道路上越走越宽广，也深深相信在未来的日子里我们将一路携手前行，会有很多的碰撞和交流，我们将始终记得我们曾在农大校园同窗学习，这将给予我克服困难、不断前进的精神动力。