生物制品学复习资料

名解

佐剂：通过改变可溶性抗原的物理状态延长体内存留时间，非特异性刺激机体免疫反应，增强免疫效果。

血液制品：由健康人血浆或特异免疫人血浆中分离、提纯或由重组DNA技术制成的血浆蛋白组分或血细胞组分制品，如人血白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因子、红细胞浓缩物等，用于诊断、治疗或被动免疫预防。

成分血：成分血是指通过离心、过滤等方法制备的治疗性血液成分。一份全血通常可分离2~4份有临床治疗价值的血液成分。

悬浮红细胞（suspended red blood cells, SRBC）：又称添加剂红细胞，通过离心以去除全血中尽可能多的血浆，并代以红细胞保存液所制成的红细胞成分血。红细胞悬液的红细胞比容为0.50-0.65。该制品具有保存期长（可达35天）、输注顺畅的优点。

红细胞添加液（保存液）：对某一种血液制剂进行再加工时，针对某一血液成分而加入的能保持和（或）营养该血液成分生物活性，维持其生理功能的一类药剂称为添加液。

冰冻红细胞（frozen red blood cells, FRBC）：采用特定的方法将自采集日期6天内全血或悬浮红细胞中的红细胞分离出，并将一定浓度和容量的甘油与其混合后，使用速冻设备进行速冻或直接置于-65℃以下的条件下保存的红细胞成分血，称为冰冻红细胞。

新鲜冰冻血浆（FFP ）：fresh frozen plasma 定义：在全血采集后6小时（保养液为ACD）或8小时（保养液为CPD或CPDA-1）内，但不超过18小时将血浆分离出并速冻呈固态的成分血。

单采血小板：使用血细胞分离机在全封闭的条件下自动将符合要求的献血者血液中的血小板分离并悬浮于一定量血浆内的单采成分血。含有的血小板数量≥2.5×1011每袋。每份单采血小板约相当于10袋常规浓缩血小板的总量。

冰冻血浆：采用特定的方法在全血有效期内，将血浆分离出并冰冻呈固态的成分血，或从新鲜冰冻血浆中分离出冷沉淀凝血因子后将剩余部分冰冻呈固态的成分血。

冷沉淀：保存期内的新鲜冰冻血浆在1～6℃融化后，分离出大部分血浆，剩余的白色不溶解物，在1小时内速冻呈固态的成分血，称为冷沉淀凝血因子（俗称冷沉淀）。

促红细胞生成素（EPO）：来源：肾脏产生，受组织内氧分压的调节；功能：促进红细胞系列的增殖、分化、成熟；血液中EPO的水平可用ELISA测定。

细胞因子（cytokine, CK）：细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质，能调节细胞的生长与分化，在机体免疫免疫系统中起着传递和调节免疫信息作用，维持机体正常生理功能。生物制品学(biologicology)是指研究各类生物制品的来源、结构、功能、特点、应用、生产工艺、原理、现状、存在问题与发展前景等诸多方面知识的一门学科。

生物制品（biological product）是以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为原料，应用传统技术或现代生物技术制成，用于人类疾病的预防、治疗以及诊断的药品。

药品生产质量管理规范（GMP):是用科学、合理、规范化的条件和方法来控制药品生产的全过程，将差错发生的可能性降到最低，从而保证生产出优质药品的一套管理制度。

疫苗（vaccine）：用减毒或杀死的病原生物或其抗原性物质所制成，可诱导机体产生特异性体液或细胞免疫，使机体获得保护或消灭致病原的生物制品。

灭活疫苗（inactivated vaccine）：又称死疫苗，是用化学或物理的方法，将具有感染性的完整的病原微生物杀死，使其失去传染性而保留抗原性而成。

减毒活疫苗（live-attenuated vaccine）：用人工诱变、从自然界筛选出的毒力高度降低、无毒的活的病原微生物制成的疫苗，可模拟自然发生隐性感染，诱发理想的免疫应答而又不产生临床症状。

亚单位疫苗：是由提取或合成细菌、病毒的特殊蛋白结构制成的疫苗。不是完整的病原微生物，而是其结构的一部分。

基因工程疫苗（genetically engineered vaccine）：使用重组DNA技术克隆并表达保护性抗原基因，利用表达的抗原产物或重组体本身制成的疫苗。

基因缺失活疫苗（gene deleted live vaccine）：采用分子生物学技术，去除与毒力或毒力相关基因片段，使病原微生物毒力减低或丧失，即用缺失突变毒株制成的疫苗。与自然突变株（多为点突变毒株）相比，基因缺失活疫苗具有突变性状明确、稳定、不易发生毒力返祖的优点。基因重组亚单位疫苗(genetic engineering subunit vaccine)：将病原体中能诱导保护性免疫应答的目的抗原编码基因克隆后，插入适当的原核或真核表达载体质粒；再将重组质粒导入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中高效表达目的基因；分离、提取、纯化目的蛋白而制成。

核酸疫苗（nucleotide vaccine）：又称DNA疫苗（DNA vaccine），是将一种或多种目的抗原的编码基因克隆到真核质粒表达载体上；再将重组质粒直接注入到体内，在宿主细胞内表达目的蛋白，诱发特异性免疫应答。

CpG回文序列：目的基因（含载体质粒）含有CpG基序，能激活较强的CTL效应，并能激活巨噬细胞与NK细胞，因此，CpG回文序列被称为免疫刺激DNA序列。

联合构建：在载体质粒中插入2个或2个以上目的抗原基因，既能激活CD8＋T细胞，又能激活CD4＋Th2细胞。

协同构建：将目的基因与细胞因子的基因构建成嵌合基因，以促进目的基因的免疫效果。植物疫苗（plant-based vaccine）：亦称转基因植物疫苗（transgenic plant vaccine），是指将抗原基因导入植物细胞并在其中表达，人食用已表达目的抗原的转基因植物后，可诱发特异性免疫应答的新型疫苗。

肿瘤生物治疗：用生物来源的制剂或调节生物反应的制剂治疗肿瘤的方法。

细胞治疗：是采集患者自体的免疫细胞进行制备，再回输至患者体内。

过继性免疫效应细胞治疗（ACI）：通过分离技术获取患者自身免疫细胞，在细胞因子的诱导下，体外大量扩增出具有高度抗肿瘤活性的免疫细胞，再回输到患者体内，达到增强肿瘤患者的免疫功能和抗肿瘤的目的。

细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine induced killer cells, CIK）：人外周血单个核细胞在体外用多种CK（如抗CD3-McAb, IL-2,IFN-γ,IL-1α等）共同培养一段时间后获得的一群异质细胞；兼具T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性、NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点；增殖速度快，杀瘤活性高，杀瘤谱广，对多种耐药肿瘤细胞同样敏感。

肿瘤浸润淋巴细胞（Tumor infiltration lymphocytes,TIL）浸润在肿瘤组织中具有抗肿瘤效应的淋巴细胞；TIL来自肿瘤组织区域，可特异识别自体肿瘤，具有特异的MHC限制性，溶解肿瘤活性。

生物反应调节剂（Biological response modifiers, BRM）一类具有广泛生物学活性和抗肿瘤活性的生物制剂。

血液成分制备（Blood component preparation）：在规定的时间和温度范围内，将采集出来的全血用物理方法分离成体积小、纯度高、临床疗效好、不良反应少的单一血液成分（如红细胞、血小板、血浆等）的技术。

血浆：指抗凝全血经离心去除细胞有形成分后的淡黄色液体，含有水、电解质和蛋白质，主要是白蛋白、免疫球蛋白和各种凝血因子。

生物技术药物biotech drug：又称基因工程药物。以DNA重组技术和蛋白质工程技术生产的蛋白质、多肽、酶、激素、疫苗、单克隆抗体和细胞因子类药物及上述产品的修饰物，以及应用生物技术研究开发的反义药物及用于基因治疗的基因药物和核酶等。

造血生长因子(Hematopoietic Growth Factor)是一组能够调节造血干/祖细胞活存、增殖、分

化和成熟血细胞功能的细胞因子。

洗涤红细胞washed red blood cells, WRBC：无菌条件下将保存期内的浓缩红细胞或悬浮红细胞等制品用生理盐水反复洗涤红细胞，去除大部分非红细胞成分，并将涤后的红细胞悬浮在生理盐水中即为洗涤红细胞。

Fab抗体：包括完整的L，H链的V区和CH1功能区。IgG的1/3，排斥反应降低；稳定，组织穿透力强，常用于治疗和诊断。

Fv抗体：由VH、VL组成的具有完整抗原结合位点的最小Ab片段，表现出完整抗体的相似活性。

SvFv:是由一段弹性连接肽将VH、VL连接而成，是具有亲代Ab全部抗原结合特性的最小功能单位，大小为完整Ab的1/6。

原料血浆：是指由单采血浆站采集的专用于血液制品生产原料的血浆。

单采血浆站：是指根据地区血源资源，按照有关标准和要求并经严格审批设立，采集供应血液制品生产用原料血浆的单位。

供浆员：是指提供血液制品生产用原料血浆的人员。

营养缺陷型减毒活疫苗：牛型结核菌BCG营养缺陷型减毒活疫苗：甲硫氨酸或亮氨酸生物合成缺陷；人型结核菌BCG营养缺陷型减毒活疫苗：亮氨酸生物合成缺陷，有效，但毒力恢复频率高

BCG重组疫苗和DNA疫苗：人型结核杆菌基因（如一些分泌蛋白）在BCG中表达，其他保护性抗原基因也在进行尝试。Ag85ADNA疫苗在小鼠实验中有保护效果。

大题

一．为什么要去除白细胞？（用白细胞滤器过滤去除浓缩或悬浮红细胞制品中的白细胞。）1. 减免白细胞介导的同种免疫的发生。提高输血疗效，降低输血风险。临床常见的非溶血性发热输血反应、血小板输注无效等，55%~75%是因为输入异体血液中的白细胞所致。

2.降低白细胞携带病毒性传染病的输入传播。

一．去除白细胞的方法。1、离心法：又叫去白膜法。根据红细胞和白细胞比重不同，通过离心分层制备少白细胞的方法。残留白细胞多，现已多不采用。2、过滤法：经血液过滤器制备。高效去除白细胞可达99％的白细胞，红细胞回收率大于90％，血小板回收率大于85％。

二．单采血小板。1.单采血小板：使用血细胞分离机在全封闭的条件下自动将符合要求的献血者血液中的血小板分离并悬浮于一定量血浆内的单采成分血。含有的血小板数量≥2.5×1011每袋。每份单采血小板约相当于10袋常规浓缩血小板的总量。2.与浓缩血小板比较，单采血小板最大的优点是相对安全，受血者只需要接受一个献血者的血小板即可达到治疗量，可以降低发生HLA同种免疫反应和输血传染病的风险几率。

三．机器单采成份血。Apheresis: 单采。将单采者或患者的血液从体内抽出，用血液细胞分离机对离体的血液进行血液成分的分离，将分离的血液成份一种或多种保留，其它成份再回输给被采集者的过程。产品具有纯度高，容量相对少，输血不良反应率低等优点，是目前临床广为应用的血液制品之一。

四．机采成分血的条件。机采成分血需要专门的设备和场地，所以机采捐血一般都在条件较好的血液中心或血站进行；一般在临床需要时才采集，故捐献成份血的志愿者需要事先填写好《志愿捐献成份血登记表》，等候血液中心的预约通知。

五．单采血小板对献血者的要求。捐献者除符合规定捐献全血的检查标准外，还需符合以下要求：（1）血液要求：①红细胞比容（HCT）≥0.36②采前血小板（PLT）计数≥150×109/L

且＜450×109/L③预测采后血小板≥100×109/L（2）时间要求：单采血小板间隔时间为1个月。每次采集过程需要1.0小时～1.5小时。（3）献血量要求：每次可献1个至2个治疗单位，或者1个治疗单位及不超过200ml血浆。全年血小板和血浆采集总量不超过10L。（4）其它要求：①口服抑制或损害血小板功能药物（如含阿司匹林类药物）停药后超过5天者；②捐献者应肘静脉粗大，充盈良好；③采集前宜吃清淡食物（如稀饭、馒头），切忌空腹献血。

七．单采血小板的特点。1.品质优良，临床输注方便。浓度大于，纯度高，白细胞污染率低，红细胞含量极少。1位献血者的血小板给1位患者输注。减少了同种抗体的产生。

2. 节省献血者资源：1位献血者的血小板给1位患者输注。单采血小板间隔1个月，时间短，对健康献血者无害。

八．单采血小板对身体有什么影响吗？健康人体内血小板数量充裕，捐出的血小板在48小时内就可以恢复到采前水平，比捐献红细胞的恢复时间要短得多。因此，捐献者可以每间隔1个月捐献一次，但一年最多不超过12次。在捐献成分血的过程中，捐献者的血液都在经严格消毒的密闭管道套材中循环和分离，每位捐血者每次使用的都是一次性全新套材，绝对不会造成交叉污染。

九．悬浮红细胞.又称添加剂红细胞。通过离心以去除全血中尽可能多的血浆，并代以红细胞保存液所制成的红细胞成分血。红细胞悬液的红细胞比容为

0.50-0.65。该制品具有保存期长（可达35天）、输注顺畅的优点....SRBC的特点,①是目前国内外临床应用最为广泛的一种红细胞制品。②适用于大多数需要补充红细胞和提高血液携氧能力的患者。③含有全血中的全部红细胞、一定量白细胞、血小板、少量血浆和保存液的混悬液。

十．1.FFP制备方法.（1）原料血的要求①使用二联以上的采血袋采集血液。②采集的全血冷藏保存时间不超过18小时。③采血顺畅，200ml全血采集不超过7分钟，400ml全血采集不超过13分钟。（2）血浆的分离：按照“浓缩红细胞”或“悬浮红细胞”制备方法操作。（3）速冻①拟速冻的血袋逐袋平放，而不应重叠堆放。②将新鲜血浆快速冻结，在60分钟内血浆中心温度降至-30℃以下。

2. FFP保存.保存温度低于-18℃，保存期为自采血之日起1年，解冻后2～6℃保存，应24小时内输注。

抗体、疫苗、细胞因子

十一．抗体技术的发展史。1.整体水平抗体生成技术。【多克隆抗体（抗血清）】2.细胞工程抗体技术（单克隆抗体）3.基因工程抗体生成技术。（嵌合抗体、改形抗体、小型化抗体、组合抗体术、噬菌体抗体库技术、Ig转基因小鼠、抗体真核表达技术）

十二．各种人源化基因工程抗体的定义及特点。1.人-鼠嵌合抗体（human-mouse chimeric Ab）：将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒定区融合而得到的抗体。其制备过程为：将鼠源单抗的可变区基因克隆出来，连接到包含有人抗体的恒定区基因及其表达所需的其他元件（如启动子、增强子、选择标记等）的表达载体上，在哺乳动物细胞（如骨髓瘤细胞、CHO细胞）中表达。2.改型抗体：进一步减少鼠源成分，仅保留6个CDR区，骨架区全部或部分换成人Ab 部分，人源成分达到97%。。。。（1）小分子抗体：小分子抗体包括Fab、Fv或ScFv、单域抗体及最小识别单位等。小分子抗体有很多优点【可以用细菌发酵生产，成本低；分子小，穿透力强；不含Fc，没有其带来的效应；在体内循环的半衰期短，容易消除，利于解毒排出；易于与毒素或酶基因连接，便于直接获得免疫毒素或酶标抗体等】①Fab抗体：包括完整的L，H链的V区和CH1功能区。IgG的1/3，排斥反应降低稳定，组织穿透力强，常用于治疗和诊断。②Fv抗体：由VH、VL组成的具有完整抗原结合位点的最小Ab片段，表现出

完整抗体的相似活性。③SvFv:是由一段弹性连接肽将VH、VL连接而成，是具有亲代Ab 全部抗原结合特性的最小功能单位，大小为完整Ab的1/6。③＋1.单域抗体：只含有VH、VL的一个功能结构域。即为VH,约为完整分子的十二分之一，它只由一个结构域构成，亲和力有所降低，但仍然保持着原单抗的特异性。③＋2.最小识别单位：只含有一个CDR多肽的抗体。不稳定。约为完整分子的1/80~1/70,一般由一个CDR构成，也保持着抗体的特异性。（2）特殊的基因工程抗体——双特异抗体，双特异性抗体：能同时识别2种抗原的抗体，1种为对应肿瘤相关抗原，1种为对应效应成分，即能结合靶肿瘤细胞又能结合高细胞毒性的效应细胞，将效应细胞富集在肿瘤周围，而且可以模拟天然配体的作用，与细胞表面引发分子结合，激活效应细胞，实现对肿瘤细胞的杀伤和裂解。所以双特异性抗体与以往肿瘤免疫性治疗相比，除了能特异性识别肿瘤细胞外，还能将循环免疫中的免疫效应细胞再导向至肿瘤细胞处，从而使效应细胞的抗肿瘤活性增强，发挥棉衣导向作用，这是肿瘤治疗的新突破。

十四．1.肿瘤生物治疗：生物治疗是第四类癌症治疗方法，系利用和激发机体的免疫反应来对抗、抑制和杀灭癌细胞。肿瘤生物治疗是用生物来源的制剂或调节生物反应的制剂治疗肿瘤的方法。2.常见的方法和效应细胞：(1)细胞治疗是采集患者自体的免疫细胞进行制备，再回输至患者体内。无法规模化生产，这种治疗方法更适于在医疗机构开展，完成从采集、制备到回输的全过程。(2)非细胞治疗包括：抗体治疗，多肽疫苗，基因疫苗，靶向药物治疗，细胞因子治疗。（3）肿瘤生物治疗常见的方法和效应细胞：①免疫效应细胞治疗：过继性免疫效应细胞治疗【通过分离技术获取患者自身免疫细胞，在细胞因子的诱导下，体外大量扩增出具有高度抗肿瘤活性的免疫细胞，再回输到患者体内，达到增强肿瘤患者的免疫功能和抗肿瘤的目的。】【优点：抗瘤免疫细胞可随血液扩散到全身、可针对肿瘤细胞发挥特异杀伤作用、对正常细胞无毒性】。效应细胞：淋巴因子激活的杀伤细胞LAK、细胞因子诱导的杀伤细胞CIK、抗CD3单抗激活的杀伤细胞CD3AK、PHA激活的杀伤细胞PAK、细胞毒性T淋巴细胞CTL、自然杀伤细胞（NK）、树突状细胞（DC）、单核巨噬细胞（Mφ）。

②细胞因子的联合应用：IFN-γ, IL-2, anti-CD3 ；免疫效应细胞的联合应用：CIK、DC、DC-CIK、NK、DC-T③细胞因子诱导的杀伤细胞③生物反应调节剂BRM，一类具有广泛生物学活性和抗肿瘤活性的生物制剂。作用机制：干扰细胞生长、转化或转移的直接抗瘤作用，或激活免疫系统的效应细胞及其所分泌的因子。主要包括细胞或化学因子、细菌类生物反应调节剂、微生态型生物反应调节剂、真菌多糖类生物反应调节剂等。BRM临床应用举例：卡介苗（BCG）、短小棒状杆菌CP、多糖类：香菇多糖、云芝多糖等、免疫组织和细胞提取物：胸腺素、转移。?基因治疗。举例：a.今又生：重组人P53腺病毒b.安柯瑞：人5型腺病毒.

十五．疫苗的种类、举例、基本性质。1.、疫苗的种类及举例：传统疫苗：灭活疫苗：百日咳、伤寒、SARS；减毒活疫苗：卡介苗；亚单位疫苗：白喉、破伤风类毒素；新型疫苗：基因工程疫苗：基因工程亚单位疫苗、基因缺失活疫苗、核酸疫苗；遗传重组疫苗；合成肽疫苗；抗独特型抗体疫苗；微胶囊疫苗。2.疫苗的基本性质：安全：无致病性和接种后异常反应；有效：可诱导产生可靠的保护性免疫；实用：易于接种、保存和运输，价廉。3.核酸疫苗与传统疫苗的比较：传统免疫使用抗原是灭活病原体、减毒的活病原体或病原体的亚单位蛋白。核酸疫苗是病原体某种抗原的基因片段，与自然感染过程相似。核酸疫苗兼有重组亚单位疫苗的安全性和减毒活疫苗诱导全方位免疫应答的高效力。核酸疫苗兼有重组亚单位疫苗的安全性和减毒活疫苗诱导全方位免疫应答的高效力。核酸疫苗可在体内不断翻译表达，较长时间维持较高的蛋白水平，免疫具有连续性，一次接种可获得

长期或终身免疫力。灭活疫苗和亚单位疫苗在体内代谢较快，难以长时间维持较稳定的含量，需多次接种免疫原，加强免疫。

十六．灭活疫苗优缺点。1.优点：易于制备；免疫原性稳定性高；储存及运输方便；易于制备多价疫苗；疫苗安全性高。2.缺点：免疫力维持短，需要多次接种；主要诱发体液免疫，不能产生细胞免疫或黏膜免疫应答；接种剂量大，不良反应；需要严格灭活。举例——百日咳疫苗、伤寒疫苗、SARS疫苗。

十七．减毒活疫苗。1.定义。用人工诱变、从自然界筛选出的毒力高度降低、无毒的活的病原微生物制成的疫苗，可模拟自然发生隐性感染，诱发理想的免疫应答而又不产生临床症状。举例：结核病、脊髓灰质炎（Sabin）、麻疹、乙型脑炎、甲型肝炎、风疹疫苗、腮腺炎等疫苗。3.优缺点.优点：能诱发全面、稳定、持久的体液、细胞和粘膜免疫应答；一般只须接种一次；可采用口服、喷鼻或气雾途径免疫。缺点：有效期短和热稳定性差，运输、保存条件要求较高；回复突变危险；使用范围相对窄。举例——卡介苗,40亿人接种，是世界上最安全的疫苗之一，但对免疫缺陷者不安全。对感染艾滋病毒者接种卡介菌要慎重。