7 液相芯片分子诊断新技术及其应用--汤郡 print 2014-08-15

芯片类检测：LuminexPLEXMAPBIOPLEX液相芯片检测

【嘉美实验】嘉美生物可提供Luminex、Mllipore的FLEXMAP和Bio-Rad的BioPlex液相芯片检测实验外包服务。Luminex的代表产品 Luminex 100/200以及新推出的Mllipore的FLEXMAP 3D TM 和Bio-Rad公司的BioPlex system都是基于xMAP技术原理，整合了荧光编码微球、激光检测、应用流体学、最新的高速数字信号和计算机运算法则等多项技术，真正实现了“高通量”检测，并荣获2005年度国际临床诊断技术革新奖。是唯一得到美国FDA批准的，也是唯一被纳入美国临床实验室质控网络的高通量诊断技术。被国际业界专家评价为临床诊断的趋势性技术之一。 Luminex\PLEXMAP\BIOPLEX的技术原理 Luminex\PLEXMAP\BIOPLEX的技术优势 高通量，高速度：每个微球作为单独的检测体，可同时进行大量的生物检测，只需要10~20 μl的样本量就可以一次检测多达100个指标（FLEXMAP 3D TM可多达500个指标），最快可达10000次测试/小时，真正实现了“高通量”与“高速度”。 多功能性：xMAP技术可以运用到多种生物检测中，包括免疫分析、基因分型、基因表达、酶分析等。既能检测蛋白，又能检测核酸。除了用于临床外，也能用于科研、CDC、血站、农业、生物及制药专业实验室等。 灵活性高：微球上可连接特异性的探针、抗原或抗体等来满足不同客户的需要。 灵敏度高：检测低限可达0.01pg/ml。 重复性好：类均相反应模式，每个指标有1000-5000个反应单元，分析100次取中位均值。 准确性高：检测范围达3.5-6个数量级，与ELISA和质谱分析具有很强的一致性。 成本低：流式荧光技术联检的试剂用量少，能有效降低临床应用的成本。

发动机故障诊断排除实例

第十章发动机故障分析排除 第一节发动机故障检查分析方法 1UZH FE发动机所产生的故障，在外部表现上与化油器式发动机的故障基本相同，其故障分析的基本思路也相似，每个系统的检查都是按以下三个要素进行：(1) 高气缸压缩压力；(2) 正确的点火正时和强大的火花；(3) 良好的空气—燃油混合气。 要特别记住，EFI( 电子控制汽油喷射)系统的故障率是比较低的，必须确定故障原因是否真正出在EFI 系统。首先要查明故障是否出在影响压缩压力的起动系统或发动机本身；或是出在影响正确点火正时和火花强度的点火装置(火花塞、高压线、点火线圈、分电器、点火器)上。然后对控制空气—燃油混合气的EFI 系统进行检查。 检查起动系统、发动机或点火系统的方法，与检查化油器式发动机基本相同。 而EFI 系统的检查方法，则不同于化油器的检查。 图10—1列出了ECU控制系统的故障分析排除的基本程序；图10—2是利用万用表和丰田电脑控制系统(TCCS)检测器进行故障分析排除的程序。 为了迅速地查找故障源，首先必须了解故障出现时的情形、条件、如何发生以及是否已检修过等与故障有关的情况和信息。为此，必须认真听取客户对故障现象的描述。尽管客户的描述可能有误或不全面，也可能是自相矛盾的，但它常常有可能把握住问题的关键。最好的做法是：在听取客户的初步意见之后，思索—下，进行初步诊断检查是否有故障代码，随后询问—些有关的问题，并根据以往的经验来帮助确定或否定初步诊断的结论，同时，认真填写“发动机控制系统

客户所述故障检查分析表” （如表10—1 所示），便于以后检查分析时参考。 在检查诊断代码时，如果不能确认故障代码，在基本检查中也不能确认故障 原因，则应按表10—2 中的数字顺序进行故障分析排除。表10—2 中标有*号的电路可用丰田电脑控制系统（TCCS）检测器进行检查。 *可用丰田手持式检测器或分接盒进行诊断 图10—1 ECU 控制系统故障诊断程序图 ?:可用TCCS佥测器进行诊断的步骤 图10—2用万用表和丰田电脑控制系统（TCCS）检测器进行故障诊断程序 表10—1 发动机控制系统客户所述故障检查分析表 检查员姓名: 第二节配线和连接器故障的检查方法 配线或连接器故障不外乎开路或短路。 开路:这可能是配线脱开、连接器接触不良、连接器端子拔出等造成的 图10—3 连接器故障示意图 备注:①导线在中间折断是很罕见的。大多在连接器处脱开。尤其应仔细 检查传感器和执行器的连接器。②连接器端子生锈、端子间夹有异物、连接器插头和插座之间接触压力下降等，都有可能造成接触不良。只需将连接器拔出后再插上—次，便可改变其连接状况，可能使其恢复正常接触。 所以在故障排除分析时，如果检查配线和连接器时未发现不正常，但故障却在检查后消失，则可认为故障原因在配线或连接器。

微流控技术平台在IVD中的运用

一、微流控平台的定义和特点 微流控是一项融合了微电子学、材料科学、生物科学、制药以及临床医学等众多领域的综合性技术，需要跨领域跨学科的深入交流和合作。什么是微流控芯片?微型+集成+自动化。微流控芯片顺应分析仪器的发展趋势(微型化/集成化与便携化),很大程度缩短样本处理时间,并通过精密控制液体流动,实现试剂耗材的最大利用效率,把整个化验室的功能,包括采样、稀释、加试剂、反应、分离、检测等集成在微芯片上,且可以多次使用。 微流控芯片的发展正呈现三个基本特征：1）平台研究多学科交叉，2）应用研究多领域渗透，3）产业迅速崛起将成为新一代即时诊断（POCT）的主流技术；微流控反应筛选芯片在高通量药物筛选、材料合成、模拟和单细胞测序等领域显示了巨大潜力；而微流控细胞/器官芯片则有望应用于药物毒理和药理作用研究，部分替代医药研究试验动物，是细胞及微环境操控最重要的技术平台。 微流控芯片的最大特点是在一个芯片上可以形成多功能集成体系和数目众多的复合体系的微全分析系统。微流控芯片内部集成的单元部件越来越多，且集成的规模也归来越大，使着微流控芯片有着强大的集成性。同时可以大量平行处理样品，具有高通量的特点，分析速度快、耗低，物耗少，污染小，分析样品所需要的试剂量仅几微升至几十个微升，被分析的物质的体积甚至在纳升级或皮升级。 原则上，微流控芯片作为一种“微全分析技术平台可以应用于各个分析领域，如生化医疗诊断、食品和商品检验、环境监测、刑事科学、军事科学和航天科学等重要应用领域，其中生物医学分析是热点。目前来看，体外诊断是微流控技术的最大的应用场景，而在体外诊断中，微流控技术应用的重点在于化学发光（免疫诊断）和分子诊断中。 二、微流控的研究及产业化 微流控的理论研究兴起于20多年前，目前，理论研究准备已经非常成熟，在此，不再赘述。下面我们主要看看产业化之路 对比国内外商业化的微流控产品,国外在生化免疫、分子领域均有相对成熟的产品,其中不乏重磅级代表品种(雅培的i-STAT、Illumina的测序仪系列等);国内微流控产品的商业化相对落后,最早上市的微点生物mlabs系列等。 在产业化中，微流控一般分为以下几大类型：气压推动式微流控，离心力推动式微流控，液滴微流控，数字化微流控，纸质微流控等。 气压推动式微流控主要利用气压来推动流体在芯片中的运动，在微流控产业化中出现的最多，像生物梅里埃的filmarray, 罗氏诊断的cobas Liat PCR System，Atlas Genetics的io，博晖创新的HPV分子诊断全自动分析仪，华迈兴微的M2微型化学发光分析系统等等都是。 离心微流控是利用离心力来实现微流控芯片中的芯片的推动，在微流控产业中也占据着重要地位，比如美国爱贝斯（Abaxis）Piccolo Xpress?即时生化检测仪，天津微纳芯科技的pointcare M，杭州霆科生物的微流控芯片农残速测仪等等。

最新汽车发动机故障诊断与排除教案

发动机故障诊断与排除教案

常见车型故障码调取与清除 教案内容 一、日本丰田车系 1.调取故障码 普通方式调取故障码：打开点火开关，不起动发动机，用专用跨接线短接故障诊断座上的“ＴＥ１”与“Ｅ１”端子，仪表盘上的故障指示灯“CHECK ENGINE”即闪烁输出故障码。 2.清除故障码 故障排除后，将ECU中存储的故障码清除，方法有两种：一是关闭点火开关，从熔丝盒中拔下EFI熔丝（20A）10s以上；二是将蓄电池负极电缆拆开10s以上，但此种方法同时使时钟、音响等有用的存储信息丢失。 二、日本日产车系 随车型不同，故障码的调取与清除分三种不同方式： 1.如果在主电脑侧有一红一绿两个指示灯，另有一个“TEST”（检测）选择开关，调取故障码时，先打开点火开关，然后将“TEST”开关转至“ON”位置，两个指示灯即开始闪烁。根据红绿灯的闪烁次数读取故障码，红灯闪烁次数为故障码的十位数，绿灯闪烁的次数为故障码的个位。清除故障码时，将“TEST”开关转至“OFF”位置，再关闭点火开关即可清除故障码。主电脑位于仪表盘后或叶子板后。 2.如果在主电脑侧只有一个红色显示灯，另有一个可变电阻调节旋钮孔，调取故障码时，先打开点火开关，然后将可变电阻旋钮顺时针拧到底，等2 s后再将可变电阻旋钮逆时针拧到底，红色显示灯即开始闪烁输出故障码。每次操作只能输出一个故障码，有多个故障码时需重复上述操作。清除故障码时，将可变电阻旋钮顺时针拧到底，等15s 后再逆时针旋到底，再等 2 s后关闭点火开关即可清除故障码。 3.如果仪表盘上有故障指示灯“CHECK ENGINE”，则可通过短接诊断座上的相应端子调取故障码，日产车系故障诊断座位于发动机盖板支撑杆上方的熔丝盒内，有12端子和14端子两种，调取故障码时，先打开点火开关，然后取出12端子或14端子诊断座，并用跨接线短接诊断座上“6＃”和“7＃”端子（14端子诊断座）或“4＃”和“5＃”端子（12端子诊断座），等2s后拆开短接导线，仪表盘上的“CHECK ENGINE”灯即闪烁输出故障码（波形见下图）。每次操作只能输出一个故障码，有多个故障码时需重复上述操作。清除故障码时，将诊断座右上侧的两个端子短接15s以上，再关闭点火开关即可清除故障码。 日产车系故障码输出波形

国外主要分子诊断POCT概览

POCT设备携带方便，操作简单、检测时间短，使用成本低。在美国，70%的临床检测 均由POCT完成，以小于1%的检测费用影响了超过70%的临床决策，年产值超过百亿美元。而在中国，这一比例不到10%，发展潜力极为巨大。 分子诊断从基因层次进行检测，检测对象为核酸，灵敏度和准确性高，可在感染初期识别病毒或者提早确认基因突变，基于PCR的分子诊断往往是医院对传染病诊断的“金标准”。虽然目前市场份额较低，仅有5%,但分子诊断目前还处在行业技术的起步阶段，未来将有 巨大的发展空间。 应用分子诊断方法的POCT凭借其灵敏度和准确度高、携带方便、操作简单、检测时间 少、对环境无要求及成本低的优点，极有可能会成为未来体外诊断行业发展的主流。然而 POCT分子诊断系统技术门槛非常高，基本被Danaher、Roche、Biomerieux、Abbott等几大 巨头垄断，国内很多公司想尽办法去copy这些产品都没有成功。2013年生物梅里埃以 4.5 亿美元收购Filmarray，丹纳赫2016年更以40亿美元的天价收购Cepheid，而国内POCT的龙头企业万孚生物采用银行贷款的方式以 1.25亿元人民币投资了POCT分子诊断公司Atlas Gen etics，充分显示了POCT分子诊断平台技术的稀缺性。 1. Cephid GeneXpert 平台 该平台运用半巢式qPCR+微流控技术，组建了多机并联检测系统，满足不同通量的检测需求。已拥有17项FDA认证及23项欧盟认证的诊断项目，如：结核分枝杆菌、MRSA难 辨梭菌、碳氢霉烯耐药肠杆菌、甲流/乙流、B族链球菌、肠病毒脑膜炎、沙眼衣原体/淋病 奈瑟菌、HPV凝血二因子及五因子、BCR-ABL等，满足患者从常规传染病到癌症基因检测 的各个领域。包括取样、加样、检测三个步骤，手工操作时间不超过1分钟，但检测时间根 据检测项目不同最少需要20min，最高则需要120分钟。设备价格在5k-17k美元，17-35美 元/test。Cepheid的GeneXpert在欧美和中国已经建立起比较强的竞争优势，并且背靠丹纳赫这棵大树，不容小视。 2. Roche Cobas Liat 平台 该平台将qPCR和气压式微流控技术相融合，采用非传统的微流控芯片结构，通过温控进行PCR 扩增，全自动触摸屏导引操作。检测项目主要有甲流/乙流，甲流/乙流和呼吸道合 胞病毒，A组链球菌。需要加样、扫描和开始3步操作，20分钟出结果。设备价格大约20k 美元，约30美元/test。该平台原本由IQuum研发，2014年4月，IQuum被罗氏以4.5亿美元收购。 Samole Scan Start

POCT正在成为体外诊断行业新的发展趋势

POCT 正在成为体外诊断行业新的发展趋势 1)体外诊断行业规模 20 世纪80 年代以来，体外诊断产业已形成了一个价值数百亿美元的成熟产业。随着全球经济的发展、人们保健意识的提高和大部分国家医疗保障政策的完善，全球卫生医疗水平的进步推动体外诊断行业的持续发展。2012 年全球体外诊断产品市场规模达到大约436 亿美元，并将保持3%-6% 的年增长率。 目前全球体外诊断需求市场主要分布在北美、欧洲、日本等 中国、发达经济体国家，占70%以上的份额，需求相对稳 定；印度、巴西等新兴经济体国家占比较低，但由于人口基数大、经济增速高，近几年医疗保障投入和人均医疗消费支出持续增长，体外诊断作为新兴产业拥有良好的发展空间，正处于高速增长期。 2) POCT 行业规模 POCT (Point of Care Testing )，即时检测，也称床旁快速检测，是体外诊断( IVD in-Vitro Diagnostics )行业的子行业，指在患者身边进行现场采样检查并分析，快速得到检验结果，省去标本预处理、样本送检、设备检测、数据处理等步骤，使检测、诊断、治疗成为一个连续过程，对于疾病的干化学测定、免疫测定、生物传感技术、生物芯片技术等，其中微流控技术是目前该领域最前沿的技术，又称芯片实验室( Lab-on-a-Chip )，是一种以在微纳米尺度空间中对流体进行操控为主要特征的科学技术，具有将生物、化学等实验室的基本功能诸如样品制备、反应、分离和检测等微缩到个几平方厘米芯片上的能力。微流控芯片所具有的多 早期发现和治疗具有重要意义。POCT 常用的分析技术包括

种单元技术在微小可控平台上灵活组合和规模集成的特点已使其成为现代POCT 技术的首选。 POCT 产品的应用极为广泛。从检测项目来分，主要集中在血糖检测、血气和电解质分析、快速血凝检测、心脏标志物快 速诊断、药物滥用筛检、尿液分析、干式生化检测、怀孕测试、食品病原体筛查、血红蛋白检测、传染病检测、甘油 酯和胆固醇等血脂项目的检测等；从应用领域来分，POCT 主要应用于医院 (检验科、心内科、急诊科、麻醉科和 ICU )、社区门诊、个人家庭自检、疫情控制、军事医学与灾难救援、食品安全监管、现场监督执法等领域。 POCT 是近几年体外诊断行业重要的发展方向和增长最快的领域。2012 年全球POCT 市场规模约100 亿美元，并保持 8% 复合增速，其中心脏标志物检测是全球POCT 增速最快的领域，全球市场规模约20 亿美元，年增速约12% ；国内心脏标志物POCT 市场规模约10 亿人民币，增速约30% 。 目前国内心脏标志物POCT 市场份额主要被国际巨头占据，

最新 汽车发动机故障诊断考试题库

电控汽油发动机不能起动故障的诊断 故障原因 ●电动汽油泵或油压调节器不良、汽油滤清器堵塞，导致燃油压力太低。 ●喷油器、冷起动喷油器不工作。 ●点火系统故障导致的无高压火、高压火花太弱、点火提前角不正确等。 ●进气管有漏气、EGR阀错误打开、 ●水温传感器信号不良、空气流量计不良等导致的混合气浓度失调。 ●进气管压力传感器有故障或真空管脱落。 ●发动机气缸压缩压力过低。 ●排气管堵塞。 当发动机不能起动时，而安全指示灯闪烁，则故障可能在发动机停机系统（防盗系统） 当发动机不能起动时，而燃油压力脉动衰减器顶部的螺钉鼓凹下去了，说明无燃油压力，如果发动机不能起动且起动时转速表的指针不动，说明故障可能在点火系统，应进一步检查点火系有无高压火。 当检测到了水温信号不良的故障代码后，读取关于水温信号的数据，如果温度是－40摄氏度，故障可判断为水温传感器电路断路，140摄氏度，故障可判断为水温传感器电路短路。通过点火提前角和发动机的转速有关，转速越高，提前角越大。 发动机正常起动的三个要素 ●强且正时的高压火花； ●合适的空燃比； ●足够的气缸压力（当然排气要畅通）。 诊断思路 ●看有无喷油信号（可用发光二极管灯，使用示波器等） ●油泵能否建立一定油压（可倾听油泵运转声音、拆进、回油管查看、用油压表测量等方 法检查）， ●燃油泵在点火钥匙打开后，会工作3-5秒，作用是预置油压 ●大数发动机怠速时，其喷油脉宽大约为2～4ms。（这个数据我们用解码仪读取故障的时 候可以做为参考） ●暂不理混合气浓度。当怀疑无油供给，可在进气口喷化油器清洗剂，然后看能否起动， 如能起动，为燃油供给系统的故障。 发动机怠速不稳的诊断与排除 分析怠速不稳的可能原因 ●怠速时空燃比失调 ●点火正时不准 ●EGR阀卡在打开位置。 ●怠速控制阀（发达）出现故障。 ●配气正时不准

汽车故障诊断与检测技术(发动机与底盘部分)习题

汽车故障诊断与检测技术（发动机与底盘部分）习题第一章电控汽油发动机常见故障的诊断与排除 一、判断 1．读取电控单元故障代码后，应立即更换相应的传感器。 2．各种车型的空燃比传感器输出电压都是一样的，混合气浓时输出的信号电压较小，而混合气浓时输出的信号电压较大。 3．空燃比传感器可以用示波器检查其信号电压波形来判断其性能好坏。 4．当发动机不能起动时，如果观察到燃油压力脉动衰减器顶部的螺钉已经鼓突出来了，就说明无燃油压力，应检查燃油系统。 5．一般来讲，当发动机不能起动时，如果观察到发动机转速表的指针已摆动的话，就说明发动机转速及曲轴位置传感器有信号输出。 6．卡罗拉1．8L 2ZR-FE发动机各缸点火线圈初级绕组的电阻值可用万用表进行测量。 7．进行故障诊断时，在顾客指出的症状没有发生时，使用再现方法再现它们。8．当检查ECU的数据发现冷却液温度是－40摄氏度，说明冷却液水温传感器电路短路。 9．有些车型当正时链轮或正时皮带错齿后曲轴位置传感器信号与凸轮轴位置传感器信号不同步，也会出现无高压火的故障。 10．磁电式曲轴或凸轮轴位置传感器的两信号线可以对调，因为其产生的是交流电压信号。 11．如果在汽车涉水时发动机突然熄火，此时应将车从水中推出或拖出，然后检查空气滤清器滤芯是否已经湿掉，如已湿说明水已进入气缸导致发动机熄火。12．当正时皮带断裂后，我们应检查气门间隙，如果气门间隙很大一般就说明气门被顶弯了，这时还需进一步拆下气缸盖检查。 13．一些车型的燃油泵电路中有一个惯性开关，它通常串联在燃油泵继电器的电磁线圈控制电路中。当汽车发生碰撞、翻车时，此安全惯性开关会断开，燃油泵停止工作。 14．EGR阀卡住常开，不能关闭会导致发动机起动困难、怠速不稳。

液相芯片

液相芯片技术及其临床应用 生物芯片主要包括基因芯片和蛋白芯片两大类，按寻址方式和最终检测载体又可分为固相芯片(flat microarrays)和液相芯片(1iquid chip or microsphere arrays)。近年来，液相芯片以其独特的优点及临床实用性，正受到越来越多的重视。现就液相芯片的技术原理、特点及临床应用前景作简要介绍。 【摘要】液相芯片技术是一种利用混悬在液相中的分类编码微球作为反应及信号检测载体的检测技术，它充分利用发展成熟的流式细胞术检测原理，对临床大多数生物分子（如核酸、蛋白质等）进行高通量分析。目前已在研究和临床检测中得到了广泛的应用，现就其技术原理、特点及临床应用作简要介绍。 【关键词】芯片分析技术流式细胞术 生物芯片主要包括基因芯片和蛋白芯片两大类，按寻址方式和最终检测载体又可分为固相芯片(flat microarrays)和液相芯片(1iquid chip or microsphere arrays)。近年来，液相芯片以其独特的优点及临床实用性，正受到越来越多的重视。现就液相芯片的技术原理、特点及临床应用前景作简要介绍。 液相芯片技术原理 1．微球编码与反应原理：固相芯片通过空间位置寻址来识别不同点阵元素(即区别不同的特异性反应)，液相芯片则通过反应载体——微球所具有的物理、光学信号(如大小或颜色)来识别点阵元素?。液相芯片技术是一种以经过特殊编码、可识别的微球(encoded microspheres or beads)作为生物分子(抗原、抗体、蛋白质、核酸等)反应及信号检测载体的阵列分析技术。液相芯片采用的分子杂交反应类型与固相芯片类似，只是所有的反应在混悬于液相中的微球表面上进行，故也称为悬浮式点阵技术(suspension array technology，SAT)。 SAT技术主要包括点阵信号识别和检测信号识别两部分，现以临床最常用的双位点夹心法来说明液相芯片的基本技术原理。SAT主要由微球、探针分子(A)、被检测物(B)、报告分子(c)4个部分构成。 微球的主要化学成分为聚苯乙烯，其表面修饰的羧基功能基团在一定条件下可以共价结合任何含有氨基的目标分子，对其表面进行不同的化学结构修饰，可使结合的目标分子更具选择性。将微球采用物理或化学方法进行编码分类，不同编码类别的微球即可区分不同的特异性反应。微球编码方式多种多样]，如微球大小、颜色、荧光金属纳米技术等，其中最常用的是荧光编码技术，即在制备过程中掺人两种或多种不同颜色分类荧光分子，根据加入比例不同将同种大小的微球进行独特编码。 探针分子是可以和微球表面的羧基等基团偶联并能与被检测物特异性结合的生物分子。报告分子的作用是为每种不同的特异性反应提供检测信号，其可以是一种能与被检测物特异性结合的荧光染料，也可以是标记有荧光的、能与被检测物结合的其他物质(如抗体、抗原、核酸等)。为了和微球分类荧光有明显区别，一般以绿色荧光作为报告分子的标记荧光，任何一种可以激发绿色荧光的荧光染料均可作为报告分子的荧光标记物。 将不同编码类别的微球分别与不同的探针分子反应结合后，混合在一起，再依次加入样品及报告分子，不同微球上的探针分子与样品中需要检测的各种目标分子进行特异性结合，报告分子与目标分子特异性结合，即构成了一个液相芯片系统。因此，可在同一混悬体系中对同一样品中的多种目标分子进行同时分析。 2．检测原理：微球编码技术不同，信号的检测方式也各不相同。流式细胞术是目前应用最广、技术最成熟的一种信号识别和检测技术。 微球单个逐一通过检测通道时受到双色激光(如红色和绿色)同时照射，第一束激光激发微球的分类荧光，根据荧光编码确定微球的类别，即微球内部的两种荧光物质受激发后可发射两种不同波长的荧光，不同类别微球内这两种荧光物质比例不同，则荧光强度比率也不同，从而将不同的特异性反应区分开来(定性、分类)；第二束激光激发报告分子

POCT介绍之四(微流控技术与免疫层析)1

前言：POCT不仅仅是试纸条加上配套仪器，更是患者身边或所在地使用的基于物理量、化 学量和生物量技术体内外检测试剂、仪器和设备，是生物、纳米、计算机等多技术融合的产物。作为技术驱动型产物，目前，POCT产品正向着自动化、信息化、智能化技术平台发展。那么POCT方法具体有哪些呢？稍后的一些章节将带着大家来具体了解下POCT的发展历程 及相关产业的介绍。 六、微流控技术与免疫层析 1、微流控技术简介 微流控（Microfluidics）技术指的是使用微管道（尺寸为数十到数百微米）处理或操纵微小流体（体积为纳升到阿升10-9~10-18L）的系统所涉及的科学和技术，是一门涉及化学、流体 物理、微电子、新材料、生物学和生物医学工程的新兴交叉学科。因为具有微型化、集成化 等特征，微流控装置通常被称为微流控芯片，也被称为芯片实验室（Lab on a Chip）和微全 分析系统（micro-Total Analytical System）。 微流控的早期概念可以追溯到19世纪70年代采用光刻技术在硅片上制作的气相色谱仪，而 后又发展为微流控毛细管电泳仪和微反应器等。微流控的重要特征之一是微尺度环境下具有

独特的流体性质，如层流和液滴等。借助这些独特的流体现象，微流控可以实现一系列常规 方法所难以完成的微加工和微操作。目前，微流控被认为在生物医学研究中具有巨大的发展 潜力和广泛的应用前景。在实际应用过程中，微流控可以把生物、化学、医学分析过程的样 品制备、反应、分离、检测等基本操作单元集成到一个几平方厘米的芯片上，自动完成分析 全过程，其基本特征和最大优势是多种单元技术在整体可控的微小平台上灵活组合、规模集成。由于微米级的结构，流体在微流控芯片中显示和产生了与宏观尺度不同的特殊性能，因 此发展出独特的分析产生的性能。同时还有着体积轻巧、使用样品及试剂量少、能耗低，且 反应速度快、可大量平行处理及可即用即弃等优点。 2、微流控技术的发展历程 1. 20世纪90年代 Manz、Harison等人开展早期的芯片电泳研究，并提出了微-全分析系统（μ-TAS）的概念。2. 1994 Ramsy等在Manz的研究基础上，改进了芯片毛细管电泳进样方法，提高了其性能，同年， 首届μ-TAS会议在荷兰召开。 3. 1995 首家从事微流控技术的Caliper公司成立，相关企业微流控技术研发也在紧密进行。 4. 1998 Whiteside提出用PDMS制作芯片的快速模板复制法 5. 1999 HP（Agilent）和Caliper公司联合推出首台微流控芯片商品化仪器，最早应用于生物分析和 临床分析领域。 6. 2000 软光刻实现芯片上微阀、微泵。 7. 2001 创办期刊Lab on a Chip，专门用于收录微流控技术研究类文章。 8. 2002 微流控芯片大规模集成实现。 9. 2003 微流控技术被Forbes杂志列为“未来15年内影响人类最深“的发明之一。 10. 2004 微流控技术被Bussiness2.0杂志称作“改变未来的7种技术”之一。 11.2006 “器官芯片”这一技术在2016年的达沃斯论坛上入选了年度十大新兴技术之一，被誉为与新燃 料电池和无人驾驶汽车齐名的新兴技术。 Nature杂志发表了一期题为“芯片实验室”专辑，从不同角度阐述了芯片实验室的研究历史、 现状和应用前景，并在编辑部的社评中指出：芯片实验室可能成为“这一世纪的技术”。至此，芯片实验室所显示的战略性意义，已在更高层面和更大范围内被学术和产业界所认同。 国家国务院印发的《“十三五”国家科技创新规划》中明确提出“体外诊断产品要突破微流控芯片、单分子检测等关键技术，开发全自动核酸检测系统等重大产品，研发一批重大疾病早期 诊断和精确治疗诊断试剂以及适合基层医疗机构的高精度诊断产品”。 12.2008

毕业论文之汽车发动机常见故障诊断与排除

河北机电职业技术学院毕业设计论文 发动机常见故障诊断与排除 目录 摘要 (5) 关键词 (5) 前言………………………………………………………………………５一发动机的总体构造和作用……………………………………………５１发动机组成…………………………………………………………５ 2 发动机的作用 (5) 二曲柄连杆机构的常见故障诊断与排除 (6) 1 曲轴主轴承响 (6) 2 连杆轴承响..................................................................７三配气机构的检查与调整 (7) 1 配气相位检查 (7) 2 气门脚响 (8) 3 气门漏气……………………………………………………………８ 4 凸轮轴响 (9) 四燃料供给系常见故障与排除…………………………………………９ 1 不来油或来油不畅 (9)

２加速不良 (10) 五润滑系作用、组成及常见故障………………………………………１0 1 作用…………………………………………………………………１0 2 组成 (11) 3 润滑系常见故障与排除 (11) ４机油消耗过多………………………………………………………１２ 六冷却系的常见故障与排除 (13) 1 冷却液充足但发动机过热…………………………………………1３ ２冷却系不足引起发动机过热………………………………………１4 七结论……………………………………………………………………１４ 八致谢 (15) 九参考文献 (15) 摘要 本文阐述了汽油发动机的常见故障与排除方法，如曲柄连杆机构、配气机构、燃料供给系、润滑系、冷却系的故障诊断与排除。主要对润滑系作了详细的讲解。 关键词：配气机构、点火系、润滑。 前言 在当今生活中汽车已经变成人们必不可少的交通工具，它的快捷、方便已深入人心，但随之而来的它也有缺点,时常出现故障。而故障出现最多的就是汽车发动机,发动机是汽车的心脏，它的好坏直接影响着汽车的行驶里程。由于汽车发动机的结构类型繁多,本文在讲述一般结构的基础上，突出了对国内普遍汽车发动机的常见故障进行了讲解。全文内容包括:发动机构造及作用、曲柄连杆机构、配气机构、燃料供给系、润滑系、冷却系、的综合故障诊断。

Merck Millipore-液相芯片技术在肿瘤检测和研究中的应用

Milliplex/Luminex液相芯片技术在肿瘤检测和研究的应用 前言 目前，肿瘤标志物的研究与应用已成为肿瘤防治的重点和热点。但当前肿瘤标志物检测能否达到早期诊断的效果？有无在人群中进行普查或筛查的价值？其临床意义如何解释？怎样规范与合理应用？尚存在诸多争议。为此，中华医学会检验医学分会肿瘤标志物专家委员会，在2002年至2004年分别召开3次专家研讨会，起草制订了“肿瘤标志物临床检测的基本原则(建议稿) ”对以上问题进行了解释。本文主要从以下几个方面进行介绍： ●肿瘤标志物临床检测的基本原则 ●肿瘤标志物的检测指标 ●肿瘤标志物的高危人群检测项目 ●肿瘤血管的形成 ●慢性炎症与肿瘤微环境 ●趋化因子与肿瘤微环境 ●液相芯片技术原理 ●Milliplex肿瘤微环境相关试剂盒介绍 ●肿瘤微环境与肿瘤标记应用的相关文献 一、肿瘤标志物临床检测的基本原则 肿瘤标志物( TM) 是指在恶性肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞的基因表达而合成分泌的或是由机体对肿瘤反应而异常产生和/ 或升高的，反映肿瘤存在和生长的一类物质，包括蛋白质、激素、酶(同工酶) 、多胺及癌基因产物等。TM 存在于病人的血液、体液、细胞或组织中,可用生物化学、免疫学及分子生物学等方法测定，且对肿瘤的辅助诊断、鉴别诊断、观察疗效、监测复发以及预后评价具有一定的价值。 TM在肿瘤监测中的价值：TM的主要临床应用价值是判断治疗肿瘤治疗疗效和复发监测。临床可通过对肿瘤患者治疗前后及随访中TM浓度变化的监测，了解肿瘤治疗是否有效，并判断其预后，为进一步治疗提供参考依据。为确定何种TM适用于对肿瘤患者进行治疗监测，在患者治疗前应做相关TM检测。 TM浓度变化对肿瘤的疗效判断价值：恶性肿瘤治疗后TM浓度的变化与疗效之间有一定的相关性。治疗前TM浓度变化,常有三种类型：①TM浓度下降到参考范围，提示肿瘤治疗有效。②TM浓度下降但仍持续在参考范围以上，提示有肿瘤残留和/ 或肿瘤转移。 ③TM浓度下降到参考范围一段时间后，又重新升高，提示肿瘤复发或转移。 TM的定期随访原则：恶性肿瘤治疗结束后，应根据病情对治疗前升高的TM作定期随访监测。不同的TM半衰期不同，所以监测的时间和周期也不同。大部分国内外专家建议，治疗后6 W做首次测定，3年内每3月测定一次；3～5 年每半年一次，5～7 年每年一次。随访中如发现有明显升高，应1 月后复测一次，连续2次升高，可预示复发或转移。此预示常早于临床症状和体征，而有助于临床及时处理。 TM 的联合检测原则：同一种肿瘤或不同类型的肿瘤可有一种或几种TM异常；同一种TM可在不同的肿瘤中出现。为提高TM 的辅助诊断价值和确定何种TM可作为治疗后的随访监测指标，可进行联合检测，但联合检测的指标须经科学分析、严格筛选。在上述前提下，合理选择几项灵敏度、特异性能互补的TM 构成最佳组合，进行联合检测。经过临床应用，以循证医学的观点来评价和修改联合检测的TM 组合。 二、肿瘤标志物的检测指标 每年全球癌症死亡人数约为700万人，其中24%发生在中国。中国癌症患者的生存患者和治愈患者仅为13%，肿瘤防治水平远低于世界平均水平。世界卫生组织作出最新权威

电喷柴油发动机常见故障诊断

国三电喷柴油发动机常见故障诊断 国三柴油机故障诊断 一、发动机起动困难。 案例 1 故障症状：起动机和发动机均有正常起动转速，但不着火；或者有时经过多次长时间的起动方可着火。 故障原因：燃油管路有空气。 故障性质：机械故障。处理方法：燃油管路排空气。 故障分析：国 III 车采用共轨系统，油路排空气相对困难一些，往往操作人员感觉到空气排除干净的，实际还是没有彻底排干净。根据实际使用情况来看，应该松开油泵回油螺栓来排空气，必要时可松开高压油管，利用起动机带动发动机空转来排空气；如果仅仅是松开燃油滤清器的放气螺钉来排空气，可能不容易彻底排除燃油管路的空气，比较费力。 案例 2 故障症状：起动机和发动机均有正常起动转速，但不着火。 故障原因：柴油管路或油水分离器堵塞。 故障性质：机械故障。 处理方法：清理柴油管路或油水分离器、对有水分离器进行放水，必要时更换，最后要对油路进行彻底排空气。 故障分析：目前，我国的柴油品质还不能完全满足国 III 系统的柴油机对于柴油品质的要求，因此，国 III 发动机的柴油滤清器或油水分离器要经常保养，其保养周期要比以前的发动机大大缩短。（还有一种情况，如果进油软管或回油软管内径太细太长导致进回油进回油不畅，比较严重的也会使发动机启动困难或无法起动。此时，需要更换符合要求的进回油管，内径最好 12 毫米以上）。 案例 3 故障症状：起动机和发动机均有正常起动转速，但不着火。 故障原因：ECU存在故障码。 故障性质：电器故障。处理方法：清除故障码。 故障分析：此车从机械方面检查均正常，用诊断仪诊断发现有“水温传感器”、“轨压传感器”、“油门踏板”等一些故障显示，清除故障码后，发动机顺利起动。这种情况估计是维修或操作人员对电控系统的接插件进行了带电插拔的操作，这样系统会产生故障码储存在 ECU 中，系统起保护作用会限制一些功能甚至无法起动。 案例 4 故障症状：起动机和发动机均有正常起动转速，但不着火。 故障原因：发动机线束损坏或接插件接触不良。 故障性质：电器故障。 处理方法：更换发动机线束或重新拔插各接插件（注意：此时一定要先关闭电源）。 故障分析：发动机线束损坏的几率不大，接触不良的情况比较多。在各接插件接触不良 的原因没有排除之前，不要轻易更换发动机线束。此时，可借助诊断仪诊断出故障发生的大概区域，再进行排除。

汽车故障诊断考试试题

一、填空题（每空25分） 1、汽车工作能力是指汽车动力性、经济型、工作可靠性、安全环保等性能的总称。 2、汽车发动机曲柄连杆、配气机构，燃料供给系，起动系，冷却系，润滑系，点火系 系统组成。 3、电控汽油发动机汽油喷射系统的主要信号有空气流量信号、发动机转速信号。 4、目前汽车使用的点火系主要有传统点火系统、电子点火系统、微机控制点火系统三类。 5、现代汽车变速箱按操控方式可分为手动、自动、手自一体。 6、别克轿车电控汽油发动机CKP传感器有转速、曲轴位置。 7、现代柴油机喷射技术发展位置控制、时间控制、时间—压力控制三个历程。 8普通柴油机发动机进行定期保养需要更换空滤、机滤、柴滤。 9、汽车传动系的作用实现汽车变速变矩、实现汽车倒车、车轮具有差速功能、必要时中断传动系的动力。 10、普通液压转向系统由液压阀,油泵,油缸、等组成。 11、汽车电器系统由电源系统、起动系统、点火系统、灯光仪表及辅助装置等组成。 12、现代汽车空调分为手动控制的汽车空调、电脑控制的汽车空调。 13、汽车现在常用制动器盘式、鼓式两种。 14、普通汽车一般有蓄电池和发电机两个电源。 15、普通手动变速箱工作原理：由齿轮和轴组成，通过不同的齿轮组合产生变速变矩；而自动变速箱AT是由液力变扭器、行星齿轮和液压操纵系统组成，通过液力传递和齿轮组合的方式来达到变速变矩 16、中高档汽车装备的电子巡航控制系统由主控开关、车速传感器、电子控制器、执行元件 四部分组成。 二、选择题（每题2分） 1、汽车故障按发生故障后产生的后果可分为（D ） A、 一般故障B、严重故障C、致命故障D、完全故障 2、电控汽油发动机空气传感器或进气歧官压力传感器信号作为（A ）和燃油喷射的主控信号。 A、 点火控制B、怠速控制C、起动控制D、水温控制 3、发动机电控系统主要由（ C ）电控ECU、执行器等组成。 A、 输出回路B、输入回路C、各类传感器D、输入信号 4、发动机启动时能转动但不能着火不可能的原因是（D ） A、点火系统故障 B、燃油供给系统故障 C、 启动系统故障D、传动系故障 5、装配有自动变速器的普通汽车每行驶（B ）公里更换一次变速箱油。 A、5万 B、10万 C、25万 D、50万 6、下列（D ）不是汽车四轮定位所能检查的项目。 A、前束 B、主销后倾 C、车轮外倾 D、车轮动平衡 7、大众中高档汽车普遍使用的电子控制动力转向系统称为（A ）

1、液相芯片的概念

1、液相芯片的概念 液相芯片，又称悬浮阵列、流式荧光技术，是基于美国Luminex 公司研制的多功能流式点阵仪（Luminex 100TM）开发的多功能生物芯片平台，通常用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究。也是目前唯一得到权威机构和医学界共同认可用于临床诊断的生物芯片平台。液态芯片是一种全新概念的生物芯片。该技术的核心是把微小的聚苯乙烯小球（5.6um）用荧光染色的方法进行编码，然后将每种颜色的微球（或称为荧光编码微球）共价交联上针对特定检测物的探针、抗原或抗体。应用时，先把针对不同检测物的编码微球混合，再加入微量待检样本，在悬液中靶分子与微球表面交联的分子进行特异性地结合，在一个反应孔内可以同时完成多达100种不同的生物学反应。最后用LuminexTM分析软件进行分析，仪器通过两束激光分别识别编码微球和检测微球上报告分子的荧光强度。因为分子杂交或免疫反应是在悬浮溶液中进行，检测速度极快，而且可以在一个微量液态反应体系中同时检测多达100个指标。 2、液相芯片的优势 （1）一次检测，100个指标； （2）既能检测蛋白，又能检测核酸； （3）既能用于临床，又能用于科研。 3、液相芯片的应用 （1）DNA杂交分析 SNP检测 基因表达谱分析 （2）免疫学分析 免疫分析 受体－配体分析

酶分析 蛋白质－蛋白质相互作用分析 蛋白质－DNA相互作用分析 4、应用实例 Liquichip液相系统是一个高度灵活的多元分析平台，可以适用于学研究，临床研究和药物研究中的各种蛋白质分析。 美国圣祖德儿童研究医院的Dr. Richard等人,使用液相对100μL样本中的15种不同的细胞因子同时进行了精确的定量测定。结果说明在T辅助细胞1型与2型中，某些细胞因子的表达量有显著差异。在测定过程中，Dr. Richard将15种不同的细胞因子的抗体分别标记在15种不同的球形基质上，混合后加入到一个反应体系中，对同一样本中的15种细胞因子进行测定。同时用ELISA的方法，分别对15种细胞因子进行检测。将两组结果进行对比后发现，趋势基本上一致，但是液相可同时对多个分子进行检测，同时灵敏度和可靠性更好，操作更为简单。这样只需要使用微量的样品，在较短的时间内，就可以得到所需的数据。 Luminex 是多功能的液相芯片分析平台，适用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究。Luminex有机地整合了有色微球（color-coded microphere or beads）、激光技术、应用流体学、最新的高速数字信号处理器和计算机运算法则，造就了Luminex液相芯片系统无与伦比的检测特异性和灵敏度。Luminex液相芯片分析平台其卓越的产品性能与广阔的应用前景使得它成为众多生命科学研究单位的首选！ Luminex?200TM是在己有的数千台Luminex?100TM的基础之上,为满足临床与科研工作中的多种高通量检测而开发的新一代系统。和以往的Luminex?100TM相比, Luminex?200TM操作更简单方便，检测运行更稳定可靠。做出的改进包括更为方便的样品针调节旋钮，更精密的XYP机械校准功能以及高性能的空气压缩机等等。 整个系统包括：

汽车发动机故障诊断技术教案第七章第二十二～二十三讲.doc

第二十二讲 第七章电控发动机的合理使用与维护(1/2) 【课题】§7-1电控发动机使用、维修的注意事项 §7-2 电控发动机维护 【课程性质】理论课 【授课对象】汽车检测与维修专业 【巩固上讲内容】典型柴油机电控系统的结构及工作原理 【教学目的与要求】掌握电控发动机使用、维修的注意事项 掌握电控发动机维护 【教学重点】电控发动机使用、维修的注意事项 【教学难点】电控发动机维护 【授课方法】讲授法、现场教学法 【课时分布】巩固上讲内容 5分钟 电控发动机使用、维修的注意事项 40分钟 电控发动机维护 40分钟 小结与答疑 5分钟 【作业】维修电控发动机时应该注意哪些事项？ 【教学内容】 §7-1电控发动机使用、维修的注意事项 一、电控发动机使用注意事项 1）在起动发动机（包括冷车的）时，一般无需踩下油门踏板。因为电控发动机都具有冷起动混合气加浓、自动冷车快炱速等功能，能保证发动机不论在冷车或热车正当时都能顺利起动。若在起动时油门开度太大，控制系统将会进入断油控制状态，反而使发动机无法起动。 2）在起动发动机之前和起动过程中，用反复快速踩油门踏板的方法来增加喷油量的做法是无效的。 3）若热车不能起动，要考虑是否出现溢油故障。这时可将油门踏板完全踩下，然后转动马达，利用断油控制将气缸中的燃油排出，再试着起动发动机。 4）不可在缺油的状态下，强行运转发动机。

5）不可在发动机运转时拔下任何传感器的插头，这样会使ECU中出现人为造成的不实故障，影响维修人员正确地判断、排除真实的故障。 6）当仪表盘上的红色故障警告灯点亮时，说明发动机控制系统出现故障。 7）为使ECU不受干扰，不要在汽车上装用大功率的移动式无线电话系统。 8）电控燃油喷射装置对燃油的清洁度要求很高，使用中应注意定期更换过滤器。 9）当发动机出现故障，“检查发动机“警示灯（CHECK ENGINE）点亮时，不能将蓄电池从电路中断开，以防止ECU中存储的故障码及有关资料信息被清除。只有通过自诊断系统将故障码及有关信息资料调出并诊断出故障原因后，方可将蓄电池从电路中断开。 10）必须使用规定的机油、优质冷却液和规定容量的蓄电池。 二、电控发动机维修注意事项 1、电控系统检修注意事项 1）注意检查接铁线的状况，其电阻值就<10 。 2）除在测试过程中特殊指明外，不能用指针式万用表测试ECU及传感器，应使用高阻抗数字式万用表进行测试。禁止用“试火法”检查晶体管电路的通、断。不要用试灯去测试任何和ECU相连接的电气装置，以防止晶体管损坏，脉冲电路应用LED灯或示波器检查。 3）传感器电路应用LED灯或高阻抗电表（如数字式万用表）检查。在拆卸或安装电感性器前应将点火开关断开（OFF），以防止其自感电动势损伤ECU和产生新的故障。 4）由于工作环境恶劣或磨损等原因，在电控系统中，电动燃油泵、怠速空气控制（LAC）阀、节气门位置传感器、氧传感器和水温传感器的损坏率较高。 5）电控系统中，故障多的不是ECU、传感器和执行部件，而是连接器。连接器常会因松旷、脱焊、烧蚀、锈蚀和脏污而接触不良或瞬时短路。 6）电控发动机检验的基本内容仍是油路、电路和密封性（特别是进气系统的密封性）的检验，故障码反映的是电控系统的故障及对其工作有影响的部件的故障，所以机理分析和有关的实际参数是判断故障的依据。 7）出现氧传感器故障码的原因较多，通常有：电动燃油泵油压异常，喷油器、过滤器和空气过滤器脏堵，燃油品质差，碳化物和铅化物覆盖了氧传感器表面，排气管漏气，点火异常（缺火、断火、交叉点火）等。 8）ECU有学习功能，但ECU的电源电路一旦被切断（如拆下蓄电池）后，它在发动机运行过程中储存的数据会消失，因此，蓄电池断开后装复，如果出现发动机工作状况不如以前时，先不要随便更换零部件，因为这种情况可能是蓄电池断开后ECU中的学习修正记忆消除的缘故。因为ECU 根据系统实际情况进行了学习修正与根据厂家储存在只读存储器（ROM）中的数据进行控制，相比