微生物杀虫剂苏云金杆菌液体发酵技术的研究
农业环境保护1998,17(6):248 250
A gr o_environ mental P rotection
微生物杀虫剂苏云金杆菌液体发酵技术的研究
张俊亭
李治祥
张克强
黄士忠
(农业部环境保护科研监测所,天津300191)
摘
要采用不同固形物含量的发酵液,确定出苏云金杆菌发酵液的最佳碳氮比为
1:2.5。不同固形物含量发酵液的试验证明,采用高固形物含量(9%)的发酵液在生产上可有效降低生产费用。应用造价低、便于维修、抵御感染能力强、节能省电的气升式发酵罐对B.t 进行发酵,发酵液不用浓缩其效价就达到国家行业标准(H a 2275IU / L),很适宜在实际生产上采用。
关键词苏云金杆菌
液体发酵碳氮比
气升式发酵罐
收稿日期:1998-04-17
苏云金杆菌(Bacillus thrin g iensis ,B.t)是一种杀虫效果良好的微生物农药,
可以应用于多种害虫的防治[1、2]
。B.t 的液体发酵在生产上应用最多,它的杀虫毒力与其发酵水平有着密切的关系。M eg na
[3]
采用固形物在3% 4%左右的发酵液来培
养,最终发酵液含活孢子20 50亿/mL 。Drake 等
[4]
则采用了固形物含量6%
10%的发酵液,最终的活孢子数达到140亿/m L 。在配方的成本上来看,国外用料成本比较高;而国内由于产品售价低,只能采用一些比较便宜的原料。我们采用了廉价的农产品原料(豆饼粉等),来研究苏云金杆菌的液体发酵技术。研究表明,苏云金杆菌的活孢子数与杀虫毒力之间虽有一定关系,但用活孢子数来表示杀虫效价是不科学的。我们选用棉铃虫作供试害虫,来评价发酵液的杀虫效价。
1材料与方法
1.1菌种
Bacillus thr in g iensis H D-11.2斜面培养基
牛肉膏0.5%,蛋白胨1.0%,氯化钠
0.5%,琼脂2.0%,余量为水。
1.3发酵配方的筛选
发酵的基本配方为豆粉4%,玉米粉3%,酵母粉1%,鱼粉1%和碳酸钙0.2%。在此基础上,通过变换配方的碳氮比,通过摇瓶试验来确定发酵培养基各组分的最佳配比。将选定发酵配方的发酵液20m L 装入250m L 三角瓶,灭菌后,接活化后的斜面菌苔一大环。在30 下进行摇床振荡培养10 12h,作为种子。然后,以3%的量加入到灭菌处理过并含有20mL 培养液的250mL 三角瓶中。在30 恒温条件下摇床振荡培养28 32h 。发酵液均按稀释平板计数方法对菌体进行计数[5]。将发酵液在玻片上染色,在油镜下计数测定晶孢比。
1.4发酵促进剂的筛选
在选出最佳发酵培养基配方的基础上,分别向内添加1%玉米糖浆、微量元素(硫酸锰、硫酸锌、硫酸铜、硫酸亚铁,1%溶液)、1%氨基酸(18种氨基酸混合物)、1%螺旋藻粉等营养物质,期望它们能使发酵水平有所提高。上述发酵液经灭菌后,用摇
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17卷6期农业环境保护表1培养基不同固形物含量和碳氮比对
菌体生长的影响
瓶发酵的方法在30 恒温发酵。将终点发酵液用平板计数法测定各发酵液的菌数,以此来评价各种物质对苏云金杆菌生长是否有促进作用。1.5发酵罐试验
B.t 液体深层发酵是一典型的好氧生化过程,目前国内外普遍用的B.t 发酵反应器都为机械搅拌式发酵罐。尽管此种发酵罐也有不少改进,形式有多种,但存在着如下固有的并且难以克服的缺点:(1)内部结构复杂和轴封处有传动部件,使罐内有死角和难以实现密封,易感染杂菌和嗜菌体,造成发酵失败。(2)每台发酵罐必须配备一台相应的电动机和动态搅拌装置,电力消耗多,设备投资大。(3)受结构限制,罐体高径比小,不能较多地利用无菌空气中的氧气,因而无菌空气需要量大,增加了生产成本。(4)设备维修复杂,降低了安全运转的可靠性。(5)罐体不易大型化。
最近几年来新发明的气升式发酵罐无搅拌装置,它是利用通入的空气使罐内的不同区域形成密度差和宏观循环流,同时并形成局部湍流和微观混合流,以达到搅拌、混合和使空气中的氧气溶解在发酵液中的目的。它具有结构简单、无运动部件、无菌操作可靠性高、电耗少、操作维修方便和造价低等诸多优点。气升式发酵罐现在在单细胞蛋白和多糖好氧发酵中得到了一些应用,但在B.t 液体深层发酵中尚未见报道。我们分别用300L 气升式发酵反应器和30L 机械搅拌式发酵反应器进行扩大试验。并将所获得的发酵液进行生测,用所得结果来评价气升式发酵反应器的优劣。机械搅拌式发酵罐设置发酵温度30 ,搅拌转速350 450r /min,罐压2.94 104
4.90 104
Pa,通气量1:1 1.5(通气量缓加),培养时间根据芽孢的破裂程度来确定。气升式发酵罐除无搅拌和通气量略有增加外,其余的设置同机械式搅拌自控发酵罐。根据碳氮比为1:2.5,固形物9%发
酵培养基的配方,分别用机械搅拌式发酵罐和气升式发酵罐进行了3次发酵。把发酵液用各种助剂配制成液体剂型,分别进行毒力测定,并求得平均值。1.6生物测定
按照中华人民共和国农业行业标准NY 293-95所提供的方法进行测定,供试害虫为棉铃虫。
2结果与讨论
2.1摇瓶发酵的试验结果
摇瓶试验结果(表1)表明,固形物含量为9%的发酵液最终的菌数明显超过4%的发酵液,在同样含量的发酵液中,碳氮比对发酵水平有着很大的影响。各发酵液的晶孢比除一个处理外均超过80%,说明同步率较好。当采用固形物含量9%、碳氮比为1:2.5的发酵培养基发酵时,发酵液中的菌数最多。用初孵棉铃虫生测时,此发酵液的杀虫效价亦最高,可达1797IU / L 。虽然固形物含量提高一倍时,发酵液菌数没能增加一倍,但在实际生产上采用高浓度发酵却很有意义。这是因为提高固形物含量后发酵水平的提高,可使生产费用大幅下降,无形中就提高了生产效益。
2.2营养物质对发酵水平的影响
各种营养物质添加到培养液后,试验结果见表2。结果表明,除玉米糖浆使菌株H D-1的菌数略有降低外,其余的添加剂对B.t 发酵的影响不大,方差分析的结果表明
固形物含量
(%)
碳氮比菌数(亿/mL )晶孢比(%)最终p H 4.5
1:2.572.194.08.21:3.568.592.78.11:4.5
57.290.18.09.0
1:2.5116.488.38.01:3.590.387.07.91:4.5
79.6
78.2
7.8
(上接第247页)
参考文献
1Conaw ah J E.J A ssoc of f A nal Chem,1991;74(5): 715
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作者简介
李治祥,男,研究员,主要从事农药环境毒理学研究。在农药对农业生态环境影响研究、农药残毒速测技术、免疫分析技术、多残留测试技术以及农药检测用实物标准研制等项研究成果为国内领先,达到国际同类项目研究的先进水平。获奖13项,发表论文60多篇。
表2可能的发酵促剂对发酵的影响
发酵促进剂添加量
(%)
菌数
(亿/mL)
晶孢比
(%)
最终p H
玉米糖浆1108.585.17.8
微量元素0.5114.990.57.9
氨基酸1119.489.48.0
螺旋藻1116.790.78.1
对照116.488.38.0
差异不显著。由此可见,发酵的基础培养基的固形物含量和碳氮比对B.t发酵的影响比较大,即起主导作用的是碳氮比和固形物含量。另外,实验还表明如果配方中碳氮比例失调,会导致芽孢和总菌数比例失调,甚至无法正常形成芽孢和晶体,发酵液的p H值仍停留在酸性。因此,配方中的碳氮比是决定配方优劣的决定因素,而某些营养物质和微量元素对总菌数的影响不大。
2.3发酵方式对杀虫效价的影响
固形物含量9%、碳氮比为1: 2.5的发酵液经摇瓶、机械搅拌式和气升式发酵罐三种方式发酵后,各自的效价分别为1797IU/ m g、2126IU/mg和2275IU/m g。气升式反应器所得到的效价最高,这应该与它的良好供氧有关。机械搅拌式比摇瓶发酵好的原因也应该归于供氧能力的改善。由于气升式反应器具有设备造价低、安全运转期长、能耗少,再加上发酵液毒力效价不低于机械搅拌式,它也就成为一种优良的B.t发酵反应器。
通过研究证明,不同固形物含量和不同碳氮比的发酵液,对苏云金杆菌的液体发酵水平影响较大。采用固形物含量高的发酵液在生产上可有效降低生产费用。采用造价低、便于维修、抵御感染能力强、节能省电的气升式发酵罐对B.t进行发酵,发酵液不用浓缩就可达到国家行业标准,很适宜在实际生产上采用。
参考文献
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作者简介
张俊亭,副研究员。1987年浙江农业大学植保系农药残毒研究方向硕士研究生毕业。在农业部环境保护科研监测所的早期工作以农药和天然毒物的残留分析为主,后转向无公害农药和其它绿色技术的开发与研究,并有多项成果获国家专利,现已发表论文20余篇。
AGRO_ENVIRONMENT AL PROT ECT ION1998,Vol.17,No.6
ABSTRACTS
Enz y me Immunoassa y of Pesticides and Metabolites.L i Zhixian g et al.(A g ro-environment Protection Institute o f MOA,300191,T ianjin),A g ro_en viron men tal Pr otection,1998,17(6):245 247,250
Th is article briefly introduces th e technique of enzym e-immu noassay(E IA)on pesticides an d m etabolites in w ater, soil and g rain.Th e basic t yp es,p rinci p les and th e p ros p ect of fu ture a pp lication and furth er develo p m ent of E IA w ere discussed.
Key words:enzyme-imm unoassay,pesticides
Production of Microbial Insecticides b y Fermentation of Bacillus Thrin g iensis.Zha n g Ju ntin g et al.(A g ro-en viron m en t Protection I nstitute of MOA,300191,T ianjin),A gr o_envir onmental P rotection,1998,17(6):248 250 T h e exp erim ent w ith differ en t solid contents o f ferm entation fluid indicated that the best C:N ratio of th e cultu re w as 1:2.5for Bacillus th rin g iensis.T he h i g h co ncentration of cultu re fluid(9%)could result in low er p roduction cost than th e low one(4.5%).A satisfactory resu lt(H a2275IU/ L)w as obtained usin g th e air-stirred ferm entation tank for Bacillus thrin g iensis p rod uction,w hich had advanta g es over th e mechan ical on e in cost,maintenance,anti-in fection and ener gy consum p tion.
Key words:Bacillus th ring ien sis,liq u id ferm en tation,C/N,A ir-stir red fermentation tank
Effect of Acid Rain o n Mercur y Release from Dustf a ll.Yan g X uech un et al.(S outhw est A g ricultural U niversit y, Ch ongqin g400716),A g ro_env ir onm ental P r otection,1998,17(6):251 254
Th e effect of spraying stimulated acid rain(p H4.0)and dustfall(33.5t/mon th!km2)of chon gqing on the yield and m ercur y distribution in tom ato(L y co p ersicum esculentum M ill)w as investi g ated b y p ot ex p erim ent.Acid rain increased th e y ield of tom ato g row n on acid pu rple soil by19.2%,w hile dustfall increased th e yield o f tomato grow n on acid purp le soil b y19.2%,and both treatments en hanced Hg accumu latio n in leaves or roots.With th e yield low er th an that of con trol,acid r ain s p ra y in g and du stfall s p ra y in g b y3.0% 16.1%, 3.8% 31.0%and15.8% 25.8%,r es p ectivel y,th e complex pollution of acid rain and du stfall w as m ore dang erious.T h e result sh ow th at acid rain can prom ot mercur y re lease from dustfall.It is related not only to the increase of m em branous permeab ility of plant leaf cell but also to soil fertilit y and cro p s'g row th.
Key words:acid rain,dustfall,com plex pollu tion,mercu ry,tomato
Stud y of Photol y sis Phenol Wastewater.Yan g G uod on g et al.(De p artment of E nvironm ental S cien ce,S hanx i U niver sit y,T ai y uan030006),A g r o_envir onmental P rotection,1998,17(6):255 257,267
T he r emoval rate of photolysis ox idizing ph enol w ater sam ples has been stud ied w ith O3an d H2O2as an ox ygen an t. T he results show ed Photol y sis oxidization could effectiv el y r emove p henol from w astew ater,in6h ours at suitable con dition and the ph en ol rem oval rate w ere79.2%.T he m ethod could be su itab le to treatin g low concen tration phenol w astew ater.
Ke y words:p hotol y sis ox idization,p h en ol w astew ater,removal rates,suitable con dition
Detection of Remo val Rate of the Deter g ent for Pesticide Residues on Ve g etables and Fruits.Zha ng Ju nting.(Agro-enviro nment Protection In stitute of MOA,300191,T ianjin),A gr o_envir onm ental P rotection,1998,17(6):258 259 M ethanol an d acetone ar e th e common ex tractin g solvents used in the determ ination of p esticide residu es and can result in very h igh recoveries.Assum ing that the m ixtur e of m eth anol an d acetone(1:1)can w ash off all th e pesticide residues on the su rfaces,th e removal rat es of the developed detergent for pesticide residues ar e obtained by calculatin g th e p esticide residu es before w ash,after w ash w ith th e deter g ent and after w ash w ith th e mixture.Th e experim en tal results ind icated that th e develop ed detergent w as effective in removin g th e surfacial pesticide resid ues on vegetables and fruits w ith an average removal rate more th an70%.
Ke y words:ve g etables,fruits,p esticide residues,deter g ent,removal rate
A Study on Wet Deto x ication of Chro mic Slag.G ao H uaiyou et al.(National En vironm en tal Mon itoring Center,M OA, T ian j in,300191),A g ro_en viron men tal Pr otection,1998,17(6):260 262
T his paper rep orted the new tech niqu e that chrom ic slag w as w et-d etoxified by using CO2and ion exchange resin. With th is method,Cr(?)w er e able to b e recovered from ch romic slag,96.7percent of th e pollutant load could be re mov ed.T he d etoxication p rocesses re q uired less investm ent and sim p lier facilities,th e o p eratio n an d m aintenance of th e equipm en t w ere convenient,the secondary pollu tion could b e avoided,th erefore,good en vironm ental,econ om ic and so cial ben efits w ould b e produced w h en th is techn ique w as utilized.
Ke y words:chrom ic sla g,CO2,L each,ion ex ch an g e,w et detoxication
Bt(苏云金杆菌)乳剂生产工艺规程
Bt（苏云金杆菌）乳剂生产工艺规程 衡阳市微生物厂 一九九二年三月
Bt 乳剂工业生产技术 一、概述 Bt 即苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis ）的简称，是一种寄生于昆虫体内引起昆虫发病死亡的能产生伴孢晶体的芽孢杆菌，其制剂广泛应用于农、要、果、蔬、城市园林方面的害虫防治。 二、生产工艺流程 砂土管菌种 斜面菌种 扁瓶 菌种扩大培养 发酵罐 过滤 浓缩 加助剂 检验 包装 三、生产工艺操作规程 （一）砂土管菌种的制备 1、砂的处理： 取建筑用砂或河砂经60－80目过筛后用工业Hc 浸泡48h 后用清水洗净，再用0.2NNao 中和，烘干后用磁铁除去其中带磁性之金属微粒，装入洁净容器内备用。 2、砂土管制备： 将以上已处理好之砂土分装于1.2×12公分之小试管中，每管约装2克，塞上棉塞，先用2.0kg/cm 2高压灭菌1.5小时，间歇灭菌三次，再以160℃干热灭菌2小时，经无菌试验，即抽取一点砂土置于斜面试管中 36℃培养24小时才检查无杂菌后备用。 27－29℃ 48－72h 27－29℃ 18－24h 27－29℃ 36－48h
3、砂土孢子的制作： 选择生长良好，经过生产能力考查合格的优良试管斜菌种一支加入无菌水5ml，用接种针刮下孢子制成高浓度的孢子悬液用无菌吸管吸取0.2－0.3ml接入砂土管中，而后置入真空干燥器内，用真空泵间歇抽干，用石蜡封口，以后置于0－5℃冰箱中，在干燥情况下保存。 （二）斜面菌种的制备 1、培养基：牛肉膏0.3%、蛋白胨1%、琼脂2%，调节7.5－8.0溶化后分装试管，加塞放入试管篓内包好灭菌。 2、灭菌：在消毒锅内 1.1kg/cm2下蒸气灭菌30分钟，等冷却到60－70℃时取出摆成斜面，空白培养2天观察无杂菌方可使用。 ３、接种培养：将菌种试管斜面放在接种室内或无菌操作箱中，打开紫外线灯灭菌30分钟后关闭。用接种环按操作规程刮取种子菌苔少许，转至新鲜斜面培养基上划线接种，然后放入30℃培养箱内3－4天，经检查正常，放入冰箱内备用。 （三）扁瓶扩大种子制备 1、培养基：同斜面培养组成，另加葡萄糖1%，溶化后装入扁瓶。 2、灭菌、接种、培养均与斜面菌种同。 （四）发酵 1、培养基棉籽饼粉 3.5% 玉米粉 2.0% 鱼粉 1.0% 酵母粉0.2%
工业微生物发酵技术汇总
发酵技术指标 沃蒙特发酵技术服务平台 NO 项目英文技术名称名称指标 1他克莫司Tacrolimus 发酵单位：大于 1.0g/L, 发酵周期： 240 小时 , 提取收 率： 60-70% 2西罗莫司Sirolimus\Rapamyci 发酵单位： 1000±200 mg/L，发酵周期： 192hrs ，收率：35- 40% n产品含量：≥ 98% 3乳酸链球菌素Nisin 发酵水平 : 12-15g /L ，发酵时间：16-20小时，收率 :65% 以上。 4霉酚酸mycophenolate 发酵单位： 12g/L 以上，发酵时 间：160 小时，提取得率：mofetil, MMF 75% 5去甲金霉素DMCT,Demethylchlor 发酵单位： 10± 2g/L ，发酵时间： 200 小时，产品收率： 75％ tetracycline 6雄烯二酮Androstenedione 发酵时间 96 ± 24 hrs ，每 3- 3.3 公斤植物甾醇可获 得 1 公斤雄烯二酮。 7利福霉素Rifamycin 发酵周期 220 小时，发酵单位大于 20g/L ，收率 65% 86- 羟基烟酸6-Hydroxynicotinic 纯度：≥ 98%，用途说明：用于合成维 生素 A Acid 9L- 缬氨酸Valine 发酵产酸： 60±5 克 /L ，发酵周 期： 60 ± 5 小时，提取 收 率： 65%（医药级） 10 L- 异亮氨酸Isoleucine 发酵产酸： 25-30 克 / 升，发酵周期 : 60-72 小时， 提取收 率： 80% 发酵单位 :35 ± 3g/L ，发酵时间 :33-35 小时，产品 得率 : 饲 11 L- 色氨酸Tryptophan 料级≥ 85%，药品级 ≥ 70%，产品质量 :>98.0%( 纯度 ) ， 糖转化率： 18% 12 糖化酶Glucoamylase 发酵周期： 6～7 天，酶 活： 8 万- 10 万 U 13 耐高温淀粉酶Amylase 发酵周期： 140h，酶活： 17 万单位 14 纤维素酶Cellulase 发酵周期： 6～7 天，酶活： 80-100IU 15 超级泰乐菌素Super tylosin 发酵单位： 14000- 16000U/ml 发酵时间： 130-150 小时提 取 收率： 70-75%
苏云金杆菌的使用方法
苏云金杆菌的使用方法 尽管苏云金杆菌是杀虫剂中使用比较广泛的杀虫剂之一。但还是有不少农民用户对苏云金杆菌的使用方法不是很了解的。今天小编详细给大家介绍苏云金杆菌的使用方法。 苏云金杆菌的使用方法： 十字花科蔬菜菜青虫、小菜蛾 幼虫3龄前，每667平方米使用8000IU/毫克可湿性粉剂100～300克，或16000IU/毫克可湿性粉剂100～150克，或32000IU/毫克可湿性粉剂50-80克，或2000IU/微升悬浮剂200～300毫升，或4000IU/微升悬浮剂100～150毫升，或8000IU/微升悬浮剂50～75毫升，或100亿活芽孢/克可湿性粉剂ioo～iso克，兑水30～45丁-克均匀喷雾。 水稻稻纵卷叶螟、稻苞虫 幼虫孵化高峰至3龄前，每667平方米使用8000IU/毫克可湿性粉剂300～400克，或16000IU/毫克可湿性粉剂150r-_J200克，或32000iu/毫克可湿性粉剂80～100克，或2000IU/微升悬浮剂400～500毫升，或4000IU/微升悬浮剂200～250毫升，或8000IU/微升悬浮剂100-120毫升，兑水30～45千克均匀喷雾。 棉花棉铃虫、造桥虫 幼虫孵化高峰至钻铃前，每667平方米使用8000IU/毫克可湿性粉剂400～500克，或16000克可湿性粉剂200～250克，或32000IU/毫克可湿性粉剂120克，或2000IU/微升悬浮剂400---500毫升，或4000升悬浮剂200～250毫升，或8000IU/微升悬浮剂100-120毫升，
或100亿活芽孢/克可湿性粉剂250～400克，兑水45-75千克均匀喷雾。 玉米、高梁玉米螟 每667平方米使用8000IU/毫克可湿性粉剂250-300克，或4000IU/微升悬浮剂150-200毫升，在玉米或高粱大喇叭口时期喷雾或混细沙制成毒土灌心叶。 大豆天蛾、甘薯天蛾 幼虫孵化盛期，每667平方米使用8000IU/毫克可湿性粉剂200～300克，或16000iu/毫克可湿性粉剂100～150克，或32000iu/毫克可湿性粉剂50～80克，或2000iu/微升悬浮剂200-300毫升，或4000IU/微升悬浮剂100~150毫升，或8000IU/微升悬浮剂50-75毫升，兑水30～45千克均匀喷雾。 烟草烟青虫 幼虫3龄前喷药，每667平方米使用8000IU/毫克可湿性粉剂400-500克，或16000IU/毫克可湿性粉剂200～250克，或32000IU/毫克可湿性粉剂100～120克，或2000IU/微升悬浮剂400～500毫升，或4000IU/微升悬浮剂200--250毫升，或8000IU/微升悬浮剂100～120毫升，兑水30～45千克均匀喷雾。 茶树茶毛虫 幼虫孵化高峰至3龄前喷药，使用8000IU/毫克可湿性粉剂100～150倍液，或16000iu/毫克可湿性粉剂200～300倍液，或32000iu/毫克可湿性粉剂400-500倍液，或2000IU/微升悬浮剂80～100倍液
苏云金杆菌&阿维菌素简介
苏云金杆菌 苏云金杆菌又称苏云金芽胞杆菌，英文名称：Bacillus thuringiensis（B.t.）为了方便都将B.T.写成BT或Bt，故Bt即苏云金杆菌的简称。苏云金杆菌杀虫剂是利用苏云金杆菌杀虫菌经发酵培养生产的一种微生物制剂。苏云金杆菌在自然状态下以一种生物细菌的形式生存于土壤及水中。这种杀虫菌在生长发育过程中产生芽胞并形成一种蛋白质毒素，在显微镜下观察，通常是不规则的菱形结晶，叫做伴孢晶体。 当害虫蚕食了伴孢晶体和芽孢之后，在害虫的肠内碱性环境中，伴孢晶体溶解，释放出对鳞翅目幼虫有较强毒杀作用的毒素。这种毒素使幼虫的中肠麻痹，呈现中毒症状，食欲减退，对接触刺激反应失灵，厌食，呕吐，腹泻，行动退缓，身体萎缩或卷曲。一般对作物不再造成危害，经一段发病过程，害虫肠壁破损，毒素进入血液，引起败血症，同时芽孢在消化道内迅速繁殖，加速了害虫的死亡。死亡幼虫身体瘫软，呈黑色。所以，害虫只有把Bt细菌吃到肚子里，再经过一个发病过程，才能死掉，大约48小时方能达到杀灭害虫的目的。 Bt杀虫剂与化学农药相比有许多优点 第一，对人畜无毒，使用安全。Bt细菌的蛋白质毒素在人和家畜、家禽的胃肠中不起作用。
第二，选择性强，不伤害天敌。Bt细菌只特异性地感染一定种类的昆虫，对天敌起到保护作用。 第三，不污染环境，不影响土壤微生物的活动，是一种干净的农药。 第四，连续使用，会形成害虫的疫病流行区，造成害虫病原苗的广泛传播，达到自然控制虫口密度的目的。 第五，没有残毒，生产的产品可安全食用，同时，也不改变蔬菜和果实的色泽和风味。 第六，不易产生抗药性，这只是相对而言。最近已经发现了抗药性的报道，但不象化学农药产生的那么快。 毒性： 鼠经口按2*10^22活芽孢/Kg体重给药无死亡，也无中毒症状。18名志愿者每人每天吞服30亿芽孢，连服5天，1个月后检查，一切化验正常，无毒性反应。亚急性和毒性试验未见异常，对猪、禽、鸟、鱼、蜂的急性和慢性饲喂养试验未见不正常现象，对家蚕敏感。无致癌、致畸、致突变作用。注意事项： [1]本品对家蚕有毒，蚕室和桑园附近禁用； [2]不能与内吸性有机磷杀虫剂或杀菌剂混合使用(如乐果、甲基内吸磷、稻丰散、伏杀硫磷、杀虫畏)及碱性农药等物质混合使用。
苏云金杆菌使用注意事项及作用机理
苏云金杆菌 苏云金杆菌（简称Bt）是目前商业开发最为成功的微生物杀虫剂。当前全世界每年生 产的Bt制剂约有7000～10000吨，年销售额已达1.5亿美元，其中欧洲国家产量在2000 吨左右，占欧洲国家生物农药总量的90%。 Bt制剂的研究与利用始于20世纪30年代，因其生产设备较为简单，使用比较方便， 尤其是它可有效地防治150多种鳞翅目幼虫（其中有些是重要的经济害虫），因此，70年代以后，Bt制剂便成为防治农田和仓库害虫的重要生物杀虫剂之一。美国环保局已将其指定 为用于大田作物、果树、蔬菜和观赏植物的主要生物农药，并将它用于仓库害虫的防治。 晶体或孢子的混合物进入敏感幼虫体内后，这种没有杀虫活性的原毒素被碱性肠液活化，并在中肠蛋白酶作用下进一步转化为有杀虫活性的δ-内毒素。δ-内毒素能破坏幼虫肠壁 的上皮细胞，使幼虫停止取食，从而中毒死亡。幼虫致死的时间取决于昆虫种类和剂量。 使用苏云金杆菌杀虫剂注意事项 温度：细菌生物农药杀虫剂的活性成分是蛋白质晶体和有生命的芽孢。在低温条件下（15℃以下），蛋白晶体不易发生作用。15℃以下或30℃以上使用Bt都基本无效，但在相对高温下更能发挥作用，一般在30℃左右时最好，害虫死亡速度较快。 湿度：细菌生物农药杀虫剂中细菌的芽孢喜欢潮湿环境，因此，在田间湿度越大药效越高。阳光：阳光中的紫外线对芽孢有杀伤作用。所以，喷施细菌生物农药最好再傍晚或阴天进行。雨水：喷施细菌生物农药后短期内，如遇大雨，会降低药效。 本品对蜜蜂有毒，对家蚕高毒；对鱼类等水生生物有毒。 不能与内吸性有机磷杀虫剂或杀菌剂混合使用。 对人、畜无毒，使用安全。选择性强，不伤害天敌。不污染环境，不影响土壤微生物的活动，连续使用，无残毒，不易产生抗性。
2017人教版高中生物选修二3.1微生物发酵及其应用
《微生物发酵及其应用》教学设计与案例 目标的确定 与本节对应的课程标准具体内容是“举例说出发酵与食品生产”，而本节标题定为《微生物发酵及其应用》。事实上，微生物发酵在现实生活中远远超出了食品工业的范畴。因此，本节内容一开始时并没有局限于食品生产，而是从比较大的视角──发酵工程史话引入，然后探秘发酵过程，再举例说出发酵与食品生产的关系。为此，本节主要教学目标确定为：通过了解发酵工程发展的历史，体验科学、技术、社会三者间的关系；说出微生物发酵生产的基本过程；举例说出微生物发酵与食品生产的关系；关注与微生物发酵有关的社会问题等。教学设计思路 教学实施的程序 教学 内容 教学活动教学手段和方法预期目标 1.复习提问，引入新课。 师：同学们在初中时学习过微生物发酵与食品， 我们的日常生活中也接触到许多发酵食品，请同学们思 考这样一个问题：哪些食品是由微生物发酵生产的？相 应的发酵种类是什么？ 生：酸奶、泡菜，它们都是乳酸发酵。 学生很可能 回答不全，教师可提 示。 投影或板书： 第一节微生物发酵 联系日常生活 的实例，在回忆旧知识 的基础上，引入新课， 以激发学生的学习兴 趣，强化从社会中来的 意识。
师：很好！还有其他食品吗？想一想，我们每天 吃的主食有通过发酵制作的吗？ 生：馒头、面包。 师：对，实际上，我们经常食用的许多食品，以 及使用的一些药品，它们的生产过程都离不开微生物发 酵。那么，微生物发酵是如何发展起来的？其生产过程 怎样？它还可应用在哪些方面？现在我们就一起来解 答这些问题。 及其应用 2.新课──发酵工程史话的学习。 师：现在人们能够利用微生物发酵来大规模地生 产食品、药品等许多产品，那么，人们今天的成绩是如 何一步步取得的呢？下面我们先来学习第一个问题：发 酵工程史话。 首先，请大家阅读教材发酵工程史话标题下的第 一自然段。 从这段文字的叙述中，能够看出，人类的祖先很 早就会在不知微生物发酵原理的情况下，利用微生物发 酵技术来生产多种产品，这个方面还有我们中华民族的 贡献。由此可见，发酵技术是从生产实践中一步步产生 的。 师：下面请同学们继续阅读第二自然段。 第二自然段的核心内容是，随着两位科学家研究 出发酵现象的本质和人们对微生物的认识不断深入后， 诞生了传统的发酵工业。这充分说明了发酵技术需要基 础科学研究的指导，即科学研究促进了技术的发展。 师：好，请大家继续阅读后四个自然段的内容。 从中能够看出，发酵技术随着时代的发展而不断向前 发展，从传统的发酵工业到现代发酵工业，再到微生 物工程，它不仅成为生物技术产业的重要支柱，而且 和基因工程技术的结合使它如虎添翼。由此看来，生 物技术产业的核心是技术，同时科学技术又是一个不断 发展的过程。 投影或板书： 一、发酵工程 史话 学生先阅读教 材相应的段落，教师 就此段落提炼出有 关科学价值观的教 育素材 自然过渡到发酵 工程史话。 让学生体验科学 技术是从生产实践中 产生的。 让学生体验技术 需要以基础科学研究 作指导，科学、技术间 存在相互作用。 让学生认同生物 技术产业的核心是技 术，以及科学技术是 一个不断发展的过程。 3.新课──发酵生产过程探秘。 师：在很多家庭的日常生活中，味精是不可缺少 的调味品，那么，你知道它的化学成分是什么吗？ 生：谷氨酸钠。 师：对！有人认为食用味精对人体有毒害作用， 投影或板书： 二、发酵生产 过程探秘──以味 精生产为例 让学生了解发 酵生产的基本过程。
苏云金杆菌(2014551355)
品名：苏云金杆菌（无添加任何化学杀虫成分） 有效含量：16000iu/mg 剂型：可湿性粉剂 净含量：100克 一、作用方式及特点 苏云金杆菌又称苏云金芽胞杆菌是一种革兰氏阳性细菌，英文名称：Bacillus thuringiensis （B.t.）即苏云金杆菌的简称。苏云金杆菌（Bt菌）杀虫剂是利用苏云金杆菌杀虫菌经发酵培养生产的一种微生物制剂。Bt的杀虫活性物质,主要有二种,即晶体和孢子.晶体又叫原毒素,它是一种蛋白质。当害虫蚕食了伴孢晶体和芽孢之后，在害虫的肠内碱性环境中，伴孢晶体溶解，释放出对鳞翅目幼虫有较强毒杀作用的毒素—毒性肽。这种毒素使幼虫的中肠麻痹，肠道内碱性内含物漏入血腔，孢子和菌体通过被破坏的肠壁进入体腔。使其呈现中毒症状，食欲减退，对接触刺激反应失灵，厌食，呕吐，腹泻，行动退缓，身体萎缩或卷曲。一般对作物不再造成危害，经一段发病过程，害虫肠壁破损，毒素进入血液，引起败血症，同时芽孢在消化道内迅速繁殖，加速了害虫的死亡。死亡幼虫身体瘫软，呈黑色。所以，害虫只有把Bt细菌吃到肚子里，再经过一个发病过程，才能死掉，大约48小时方能达到杀灭害虫的目的，不象化学农药作用那么快，但染病后的害虫，上吐下泻，不吃不动，不再危害作物。 毒性：对人、畜低毒，大鼠口服急性LD50 852.7-856.7毫克/公斤，对家禽、鸟类、鱼、畜等低毒,对害虫天敌无伤害。 中毒症状: 吞服了制剂可能引起胃肠炎。 中毒急救：溅到皮肤或眼内立即用清水冲洗15分钟后就医。吸入，应将病人移到通风处，就医。误服，立即催吐，并送医院对症治疗。 二、杀虫原理 苏云金杆菌长得像根棍棒，矮矮胖胖,身高不到5‰毫米。当它长到一定阶段，身体一端会形成一个卵圆形的芽孢，用来繁殖后代；另一端便产生一个菱形或近似正方形的结晶体，因为它与芽孢相伴而生，我们叫它伴孢晶体，有很强的毒性。昆虫取食后，晶体蛋白在昆虫碱性肠道内溶解，经过中肠蛋白酶的酶解作用，将前毒素降解为活性蛋白。活性蛋白插入昆虫中肠细胞膜，形成跨膜离子通道或孔，破坏钾离子平衡，最终使昆虫中毒，麻痹而死。三、防治对象 Bt对鳞翅目、双翅目、鞘翅目等100多种害虫和动植物线虫有很好的毒杀作用。国内外应用统计，Bt对64种森林害虫，34种果树害虫，12种茶树害虫都显示高毒力。最常用具特效的防治对象有：菜青虫、小菜蛾、斜纹夜蛾、玉米螟、稻苞虫、稻纵卷叶螟、二化螟、三化螟、棉铃虫、棉小造桥虫、茶毛虫、茶尺蠖、松毛虫、天幕毛虫、毒蛾、刺蛾等鳞翅目、膜翅目、双翅目、鞘翅目等害虫有很好的防治效果，且有杀卵作用。此外对大豆拌种防治地下线虫也有特效。 四、使用方法 1.一包100克可兑水100斤 2.可放农用喷雾器里（一喷雾30斤水），也可放园艺喷雾（800ml约可配18桶/1500ml 可配10桶。记得喷撒之前先过滤沉淀物哦，以免塞住喷壶嘴) 3.杀虫剂苏云金杆菌制剂可用于喷雾、喷粉、灌心、制成颗粒剂或毒饵等，也可进行 大面积飞机喷洒，也可与低剂量的化学杀虫剂混用以提高防治效果。草坪害虫的防 治用100亿孢子/g的菌粉750g／hm2对水稀释2000倍喷洒，或用乳剂1500～ 3000g/hm2与52.5～75kg的细沙充分拌匀，制成颗粒剂撒人草坪草根部，防治危 害根部的害虫。也可将苏云金杆菌致死的发黑变烂的虫体收集起来，用纱布袋包好，在水中揉搓，每50g虫尸洗液加水50～l00kg 喷雾（病毒重复利用！）。(2)防治蔬
苏云金杆菌
苏云金杆菌杀虫剂 苏云金杆菌简称Bt，是包括许多变种的一类产晶体芽孢杆菌。可用于防治直翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目，特别是鳞翅目的多种害虫。目前世界上研究最深入, 应用最广泛的微生物杀虫剂, 对人畜安全, 不伤害控制害虫群体的天敌, 不污染环境, 是生物防治害虫的重要组成部分, 更适合农作物虫害的综合防治。 苏云金杆菌是一种微生物源低毒杀虫剂，以胃毒作用为主。该菌可产生两大类毒素，即内毒素（伴胞晶体）和外毒素，使害虫停止取食，最后害虫因饥饿和死亡而外毒素作用缓慢，在蜕皮和变态时作用明显，这两个时期是RNA合成的高峰期，外毒素能抑制依赖于DNA的RNA 聚合酶。该药作用缓慢，害虫取食后2天左右才能见效，持效期约1天，因此使用时应比常规化学药剂提前2～3天，且在害虫低龄期使用效果较好。由于苏云金杆菌制剂的杀虫活性物质是一种毒性晶体蛋白与活菌的混合物, 其防效易受强光、温度和雨水的影响。最适宜使用苏云金杆菌的温度是24～32℃, 不适宜温度为13～17℃, 雨水主要影响施药的残效期。使用苏云金杆菌杀虫剂一定要在阴天或晴天下午4点以后施药于害虫危害部位。对鱼类、蜜蜂安全，但对家蚕高毒。 苏云金杆菌一般对暴食叶片的鳞翅目害虫防效好, 对结苞、卷叶、钻蛀性害虫防治技术性强。如: 2 代棉铃虫发育世代较整齐, 前代成虫产卵主要在棉株嫩尖上, 且初孵幼虫有食卵壳的习性, 防治2代棉铃虫, 主要喷在棉株顶部嫩叶正反面, 即可达到防治效果。稻纵卷叶螟幼虫两龄前结苞较松, 傍晚转苞危害, 防治它应在其幼虫2 龄前, 傍晚施药。玉米螟幼虫在玉米心叶末期, 有群聚喇叭口内危害习性,只要用苏云金杆菌对着喇叭口喷雾或拌毒土撒施入喇叭口内即可。小菜蛾( 吊丝虫) 幼虫2 龄前, 喜在十字花科作物叶背群聚食叶肉, 这是防治的最适期。豆荚螟, 本着治花不治荚的原则, 在日出前重点喷在蕾、花、嫩荚和落地花上。第2 代茶毛虫的初孵幼虫,有群聚叶背取食叶肉习性, 用苏云金杆菌防治应掌握这一时机。苏云金杆菌杀虫剂混用性能好，苏云金杆菌杀虫剂与化学农药交替使用可克服害虫的抗化学农药性。Bt杀虫剂可与多种其它生物制剂、昆虫生长调节剂、菊酯类沙蚕毒素类、氨基甲酸酯类、有机磷类农药及部分杀菌剂和化学肥料现混现用。
高三生物选修2微生物发酵及其应用同步测试题-教育文档
高三生物选修2微生物发酵及其应用同步测试 题2019 生物学科因初中结业考试的形式与高考的差异而形成了一系列衔接问题。以下是查字典生物网为大家整理的高三生物选修2微生物发酵及其应用同步测试题，希望可以解决您所遇到的相关问题，加油，查字典生物网一直陪伴您。 一、填空题 1、生物发酵工艺多种多样，但基本上包括、、和等下游处理几个过程。 2、根据过滤介质截留的物质颗粒大小的不同，过滤可分为、、和四大类。 3、微生物的育种方法主要有三类：，，。 4、发酵培养基主要由，，，，，组成。 5、青霉素发酵生产中，发酵后的处理包括：、，，。 6、利用专门的灭菌设备进行连续灭菌称为，用高压蒸汽进行空罐灭菌称为。 7、可用于生产酶的微生物有、、。 常用的发酵液的预处理方法有、、。 8、根据搅拌方式的不同，好氧发酵设备可分为和两种。 9、依据培养基在生产中的用途，可将其分成、、三种。 10、现代发酵工程不仅包括和，还包括。 11、发酵工程的主要内容包括、、。
12、发酵类型有、、、、。 13、发酵工业生产上常用的微生物主要有、、、。 14、当前发酵工业所用的菌种总趋势是从野生菌转向，从自然选育转向，从诱发基因突变转向。 15、根据操作方式的不同，液体深层发酵主要有、、。 16、分批发酵全过程包括、、、、，所需的时间总和为一个。 17、分批发酵中微生物处于限制性的条件下生长，其生长周期分为，、。 18、根据搅拌的方式不同，好氧发酵设备又可分为、 19、下流加工过程由许多化工单元操作组成，通常可以分为和、四个阶段。 20、当前发酵工业所用的菌种总趋势是从野生菌转向，从自然选育转向，从诱发基因突变转向。 21、微生物发酵产酶步骤为、、、、。 二、判断 1、微生物发酵的最适氧浓度与临界氧浓度的概念是完全一样的( ) 2、从微生物中发现的抗生素，有约90%是由放线菌产生的。( ) 3、在微生物杀虫剂中，引用最广泛的是苏云金芽孢杆菌，他用来毒杀鳞翅目和双翅目的害虫。( )
(完整版)微生物与制药综述
微生物制药的研究进展 姓名：李青嵘 班级：生工102 学号：1014200044
摘要 本文通过对历史文献的检索，从微生物生产维生素，微生物生产多价不饱和脂肪酸，微生物生产抗生素，微生物生产抗癌物质，微生物生产医用酶制剂等五个方面综述了微生物制药的研究进展。 关键词：微生物，制药，发酵工程 1.前言 随着生物技术的迅猛发展，在医药领域的许多方面取得了巨大的进展.，其中采用微生物制药，具有生产工艺简单，生产成本低廉，产品产量高，产品纯度高，可大规模工业化生产等优势，同样得到了巨大的发展。从传统工艺，如利用发酵工程生产抗生素、酶制剂以及B-胡萝卜素等；到现今的利用转基因技术生产干扰素、胰岛素、生长因子等几十种新药和疫苗。本文着重综述了微生物的发酵工程在医药研究和生产中应用的最近进展，主要包括生产维生素、多价不饱和脂肪酸、抗生素、抗癌物质医用酶制剂等五个方面。 2.研究内容 2.1.微生物生产维生素 维生素是六大生命要素之一, 为整个生命活动所必需。β-胡萝卜素、VC、VE是目前应用最为广泛，效果最为显著的三种维生素，它们的作用分别是：β-胡萝卜素是强力抗氧化剂, 有抑制癌细胞增殖和提高机体免疫力等作用。V C 和V E 均是抗氧化剂, 前者可阻止、破坏自由基形成，还具有激活免疫系统细胞的活力，刺激机体产生干扰素以抵御外来侵染因子。至于VE可产生抗体，增强机体免疫力。目前，上述的“三素”以实现了微生物工业化生产。 目前，β-胡萝卜素主要是由三孢布拉霉菌生产，在1998年，陈涛等[1]已经针对三孢布拉霉菌的特点，优化发酵工艺，在3M3的发酵罐中发酵120h，生产的β-胡萝卜素产量已达到1146.5mg/L。虽然，传统的工艺生产β-胡萝卜素的产量高，生产周期比较短，但是传统的工艺复杂，成本过高，不利于大规模工业化生产。故,目前许多课题组专注于开发新的生产β-胡萝卜素的菌种或改进传统工艺。据近年所发表的期刊文献，目前，采用红酵母发酵生产β-胡萝卜素是一种工艺简单，成本低廉的方法，虽然在产量方面较传统方法的低很多，但是该方法仍具有很大的发展潜力。何海燕等[2]采用粘红酵母R3-35摇瓶发酵84h，生产的β-胡萝
2018年高三生物微生物发酵及其应用知识点汇总-优秀word范文 (3页)
本文部分内容来自网络整理，本司不为其真实性负责，如有异议或侵权请及时联系，本司将立即删除！ == 本文为word格式，下载后可方便编辑和修改！ == 高三生物微生物发酵及其应用知识点汇总 发酵工程的概念和内容 发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 (1)“发酵”有“微生物生理学严格定义的发酵”和“工业发酵”，词条“发酵工程”中的“发酵”应该是“工业发酵”。 (2)工业生产上通过“工业发酵”来加工或制作产品，其对应的加工或制作工艺被称为“发酵工艺”。为实现工业化生产，就必须解决实现这些工艺(发酵工艺)的工业生产环境、设备和过程控制的工程学的问题，因此，就有了“发酵工程”。 (3)发酵工程是用来解决按发酵工艺进行工业化生产的工程学问题的学科。发酵工程从工程学的角度把实现发酵工艺的发酵工业过程分为菌种、发酵和提炼(包括废水处理)等三个阶段，这三个阶段都有各自的工程学问题，一般分别把它们称为发酵工程的上游、中游和下游工程。 (4)微生物是发酵工程的灵魂。近年来，对于发酵工程的生物学属性的认识愈益明朗化，发酵工程正在走近科学。 (5)发酵工程最基本的原理是发酵工程的生物学原理。 (6)发酵工程有三个发展阶段。 现代意义上的发酵工程是一个由多学科交叉、融合而形成的技术性和应用性较强的开放性的学科。发酵工程经历了“农产手工加工——近代发酵工程——现代发酵工程”三个发展阶段。 发酵工程发源于家庭或作坊式的发酵制作(农产手工加工)，后来借鉴于化学工程实现了工业化生产(近代发酵工程)，最后返璞归真以微生物生命活动为中心研究、设计和指导工业发酵生产(现代发酵工程)，跨入生物工程的行列。
苏云金杆菌说明书
苏云金杆菌说明书 篇一：常用农药安全技术说明书 常用农药安全技术说明书 目录 百菌清......................................................................................................... 1 甲基托布津................................................................................................... 2 甲霜灵......................................................................................................... 3 福美双......................................................................................................... 4 多菌灵......................................................................................................... 5 井冈霉素...................................................................................................... 6 辛硫磷.........................................................................................................7 苏云金杆菌 (8) 1. 百菌清
枯草芽孢杆菌发酵探讨
[转载]枯草芽孢杆菌发酵探讨 枯草芽孢杆菌是我国农业部允许作为饲料添加剂的两 种芽孢杆菌之一，已被越来越多地研制成饲用微生态制剂。因其制剂是无毒、无残留、无污染的“绿色”添加剂，故具有 广阔的发展前景，并已在畜牧业、饲料业广泛应用，显示巨大的社会效益和生态效益。枯草芽孢杆菌具有很强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等活性，能产生抗菌素，在动物肠道内具有较强生物夺氧能力。这些特性对促进动物营养的消化吸收、提高动物的饲料转化率、防病和促进生长起到重要作用。鉴于此，国内外专家学者对研究开发枯草芽孢杆菌制剂用于畜禽养殖日趋关注，从而也促进了这一产业的迅猛发展，但在现阶段的工业化生产中，存在着制约枯草芽孢杆菌发酵的诸多因素。 1、枯草芽孢杆菌的生物学特点 杆菌：一般（0.7～0.8）×（2.0～3.0）μm，电子显微镜测 量为（0.5～0.6）×（1.1～3.5）μm，革兰氏阳性，运动， 有长而又丰富的周生鞭毛。 芽孢：椭圆形，中生或偏中生，即使孢囊膨大也不显著。 生长温度：最高温度45～55℃；最低温度5～20℃。 阳性反应：接触酶；V-P反应；在7％的氯化钠中生长；pH5.7生长；分解葡萄糖、阿拉伯糖、木糖和甘露醇产酸；水解淀
粉；利用柠檬酸作为碳源；还原硝酸盐为亚硝酸盐；分解酪素；石蕊牛奶产碱胨化。 阴性反应：厌氧生长； 卵黄反应：在葡萄糖洋菜上或酪氨酸洋菜上形成可溶性黑色素；28℃4星期水解马尿酸盐；利用丙酸盐并分解酪氨酸。在55℃生长的菌株被0.02％的叠氮化合物抑制。 变化的性质：在V-P液中产酸(pH5.0～8.0)；对溶菌酶的抗性；在10％的氯化钠中生长。2、芽孢杆菌制剂的作用机理2.1可产生酶类和营养物质 研究表明芽孢杆菌能够分泌大量的胞外酶，如蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等，有助动物对饲料的降解、消化，提高饲料利用率。饲料中未被消化的蛋白质和一些含氮物质在肠道中被大肠杆菌和其他细菌脱梭生成具有潜在的毒性的腐胺、吲哚、酚类等物质。一些芽孢杆菌可产生氨基氧化、SOD酶、分解硫化氢的酶以及其他抗菌物质如过氧化氢，起到杀菌作用，从而减少动物体内有害物质的产生。研究表明一些芽孢杆菌产生SOD酶，SOD可以清除生物体内活性氧自由基，减少其对细胞的毒害作用，使生物体免受伤害。芽孢杆菌在 生长繁殖过程中可以产生挥发性脂肪酸，如乙酸、丙酸、丁酸等，一些脂肪酸可降低动物肠道的pH，从而为乳酸菌的 生长创造条件，并且抑制病菌的生长。其中丙酸还可以参与三梭酸循环，为动物的新陈代谢提供能量。同时，能够产生
苏云金杆菌对环境生物的安全性评价
Open Journal of Nature Science 自然科学, 2018, 6(1), 63-70 Published Online January 2018 in Hans. https://www.360docs.net/doc/f212753809.html,/journal/ojns https://https://www.360docs.net/doc/f212753809.html,/10.12677/ojns.2018.61010 Safety Evaluation of Bacillus thuringiensis to Environmental Organisms Zeqing Wang1,2, Fanmin Huang1,3, Jianhua Chen1,3 1Guangdong Engineering Research Center of Microbe Pesticides, Yangjiang Guangdong 2Guangzhou Harit Bioscience CO. LTD, Guangzhou Guangdong 3Guangdong New Scene Biological Engineering CO. Ltd., Yangjiang Guangdong Received: Jan. 1st, 2018; accepted: Jan. 12th, 2018; published: Jan. 19th, 2018 Abstract This study evaluates the safety of Bacillus thuringiensis GDX026 to environmental organisms based on degrees of toxicity and division standards. The results showed that the toxic degree of Bacillus thuringiensis8000 IU/μL SC to birds, bees, zebrafish, Daphnia, Trichogramma and silk-worm was Ib. The toxic degrees of Bacillus thuringiensis·Indoxacarb 5% SC to bees, silkworm and Daphnia magna was I b, to zebrafish and Trichogramma was II and low toxicity to birds. The toxic degrees of Emamectinbenzoate·Bacillus thuringiensis2.4% SC of silkworm and Daphnia magna was Ia, Ib to bees and zebrafish, II to Trichogramma and no risk to birds. Mixture of Bacillus thu-ringiesis GDX026 and chemical pesticides showed higher risk levels to environmental organisms compared with Bacillus thuringiesis GDX026. Keywords Bacillus thuringiensis, Environmental Organisms, Safety Evaluation 苏云金杆菌对环境生物的安全性 评价 王泽清1,2，黄番敏1,3，陈建华1,3 1广东省微生物农药工程技术研究中心，广东阳江 2广州禾立田生物科技有限公司，广东广州 3广东新景象生物工程有限公司，广东阳江 收稿日期：2018年1月1日；录用日期：2018年1月12日；发布日期：2018年1月19日
微生物杀虫剂苏云金杆菌液体发酵技术的研究
农业环境保护1998,17(6):248 250 A gr o_environ mental P rotection 微生物杀虫剂苏云金杆菌液体发酵技术的研究 张俊亭 李治祥 张克强 黄士忠 (农业部环境保护科研监测所,天津300191) 摘 要采用不同固形物含量的发酵液,确定出苏云金杆菌发酵液的最佳碳氮比为 1:2.5。不同固形物含量发酵液的试验证明,采用高固形物含量(9%)的发酵液在生产上可有效降低生产费用。应用造价低、便于维修、抵御感染能力强、节能省电的气升式发酵罐对B.t 进行发酵,发酵液不用浓缩其效价就达到国家行业标准(H a 2275IU / L),很适宜在实际生产上采用。 关键词苏云金杆菌 液体发酵碳氮比 气升式发酵罐 收稿日期:1998-04-17 苏云金杆菌(Bacillus thrin g iensis ,B.t)是一种杀虫效果良好的微生物农药, 可以应用于多种害虫的防治[1、2] 。B.t 的液体发酵在生产上应用最多,它的杀虫毒力与其发酵水平有着密切的关系。M eg na [3] 采用固形物在3% 4%左右的发酵液来培 养,最终发酵液含活孢子20 50亿/mL 。Drake 等 [4] 则采用了固形物含量6% 10%的发酵液,最终的活孢子数达到140亿/m L 。在配方的成本上来看,国外用料成本比较高;而国内由于产品售价低,只能采用一些比较便宜的原料。我们采用了廉价的农产品原料(豆饼粉等),来研究苏云金杆菌的液体发酵技术。研究表明,苏云金杆菌的活孢子数与杀虫毒力之间虽有一定关系,但用活孢子数来表示杀虫效价是不科学的。我们选用棉铃虫作供试害虫,来评价发酵液的杀虫效价。 1材料与方法 1.1菌种 Bacillus thr in g iensis H D-11.2斜面培养基 牛肉膏0.5%,蛋白胨1.0%,氯化钠 0.5%,琼脂2.0%,余量为水。 1.3发酵配方的筛选 发酵的基本配方为豆粉4%,玉米粉3%,酵母粉1%,鱼粉1%和碳酸钙0.2%。在此基础上,通过变换配方的碳氮比,通过摇瓶试验来确定发酵培养基各组分的最佳配比。将选定发酵配方的发酵液20m L 装入250m L 三角瓶,灭菌后,接活化后的斜面菌苔一大环。在30 下进行摇床振荡培养10 12h,作为种子。然后,以3%的量加入到灭菌处理过并含有20mL 培养液的250mL 三角瓶中。在30 恒温条件下摇床振荡培养28 32h 。发酵液均按稀释平板计数方法对菌体进行计数[5]。将发酵液在玻片上染色,在油镜下计数测定晶孢比。 1.4发酵促进剂的筛选 在选出最佳发酵培养基配方的基础上,分别向内添加1%玉米糖浆、微量元素(硫酸锰、硫酸锌、硫酸铜、硫酸亚铁,1%溶液)、1%氨基酸(18种氨基酸混合物)、1%螺旋藻粉等营养物质,期望它们能使发酵水平有所提高。上述发酵液经灭菌后,用摇
核心技术团队及研发简介
一、研发核心团队架构 （一）、管理团队 由一批职业经理人管理。他们都是具有多年社会经历、工作经验的各类复合型人才，从事过企业管理、营销策划及培训、市场销售、国际贸易、生产经营、产品研制、工程施工管理等专业，熟悉各种经济体制的管理模式，既具有相关的专业知识同时又具备多种行业技能，将为公司制定切实可行的决策，执行最有效率的任务。 管理团队人员共同特点： 学历背景：大专以上学历，具有强烈的事业心、求知欲和进取心。 工作经历：有多年社会经历、工作经验，在所从事的本专业工作领域里有不凡的业绩，具有非凡的创新能力。 人际关系：有较强的人际亲和力，热情而且沉稳。 职业素质：信守承诺；注重规；遵循公司宗旨理念；遵守国家法律社会公德。 （二）团队核心 周东坡：公司技术总监微生物专业 国务院学位委员会学科组评审专家 中国微生物学会高师教研会理事 大学生命科学学院教授博士导师 负责研发中心技术团队组建，产品开发，产品系列架构等工作总体规划。
伞野：负责公司技术团队,产品开发,产品系列架构等工作 智博：生物化学博士 负责研发中心产品开发,产品系列架构等工作 柳劲松：生态学博士。 胡安斌：工业控制博士 王峰：微生物硕士项目负责人 徐卓慧：工业自动化硕士项目联系人 臻梁：工业设计本科 顾涛：精细化工本科 目前负责公司技术团队,产品开发,产品系列架构等工作，研发中心在运营的同时吸纳社会各界杰出人士进入相应的团队。 二、研发中心技术创新 （一）、微生物发酵新技术和新产品 1、微生物发酵生产的新产品； 2、微生物发酵新技术和新型反应器； 3、新功能微生物的选育方法和发酵过程的优化、控制新方法以及采用代工程手段提高发酵水平的新方法； （二）、研究与应用中的意义及优势 近年来有机废弃物污染会对人体及环境产生不容忽视的危害，以及各国对有机废弃物造成的环境污染的关注,对有机废弃物处理的研究也日益活跃。虽然微生物降分法的历史尚短、部分工作还停留在实验阶段，但由于其具有传统方法不可比拟的优势性和安全性，发展潜力和应用前景相当广阔。微生物分解有机废弃物技术及微生物分解
微生物发酵技术
微生物发酵技术 微生物发酵技术以现代发酵技术为核心，利用微生物的代谢活动过程，经生物转化而大规模地制造各种工业发酵产品，已经形成了一个品种繁多、门类齐全的独立工业体系，在国民经济中占有重要地位。 工业发酵是指靠微生物的生命活动而实现的工业生产。 工业生产上笼统地把一切依靠微生物的生命活动而实现的工业生产均称为发酵。这样定义的发酵就是“工业发酵”。微生物是工业发酵的灵魂，没有微生物就没有工业发酵。 工业发酵就是通过微生物的生命活动，把发酵原料转化为人类所需要的微生物产品的过程。 工业发酵要依靠微生物的生命活动，生命活动依靠生物氧化提供的代谢能（metabolic energy）来支撑，因此工业发酵应该覆盖微生物学中生物氧化的所有方式：有氧呼吸、无氧呼吸和发酵。 近百年来，随着科学技术的进步，工业发酵发生了划时代的变革，已经从利用自然界中原有的微生物进行发酵生产的阶段进入到按照人的意愿改造成具有特殊X能的微生物以生产人类所需要的发酵产品的新阶段。 生产型不锈钢发酵罐 （1）工业发酵的研究从典型的工业发酵开始
比较常见的工业发酵一般符合以下三个条件： ① 使用的菌种属于化能异养型微生物， ② 目的产物属于初级代谢产物或能量代谢副产物， ③ 目的产物在细胞内生成后被分泌到细胞外。 符合以上条件的工业发酵叫做典型的工业发酵。 对工业发酵理论的研究从典型的工业发酵开始。 个台阶，系统地研究化能异养型微生物的工业发酵的理论； 第二个台阶，系统地研究其他营养类型微生物的工业发酵的理论； 第三个台阶，系统地研究微生物利用碳以外元素工业发酵的理论。 （2）工业发酵理论 个台阶的研究建立了微生物生命活动的三个基本假设（发酵学三假说）。它们是改造和利用微生物的理论基础。用这三个基本假设来分析典型的工业发酵，出现了： ① 工业发酵的微生物生物机器的新思路， ② 为工业生产服务的工业发酵若干推理， ③ 工业微生物育种和发酵工艺控制的“五字策略”。 （3）研究工业发酵的思路 工业发酵→【从一般到特殊】→典型的工业发酵→【从特殊到一般】→生物机器、细胞机器的概念模式→【深入研究以发现自然规律】→自然规律（微生物生命活动的三个基本假说）→【从一般到特殊：将自然规律运用到典型的工业发酵】→细胞机器亚稳态物流模式→载流路径→五段式→五字策略→【从特殊到一般】→对未来发酵工业生产的预测 涉及微生物细胞的生长和繁殖的每一个“动作”，包括细胞内的有机物降解的启动，生物合成的启动和持续，主动运输，pH自动动态平衡等都需要代谢能支持，维持细胞的生命也需要代谢能的支撑。 而微生物细胞的物质代谢和能量代谢是依靠代谢网络来实现的。化合物在代谢网络中流动，形成代谢流。工业发酵中，原料代谢流在细胞机器中经过一系列途径转化成为目的产物。在这个基础上，发酵学的第二假说提出了，代谢途径和输送系统在代谢物分子水平上整合，在辅因子水平上协调，形成横跨微生物活细胞内外的代谢网络。这个代谢网络不是生化途径和跨膜输送过程简单连接，而是要将生物化学概念纳入细胞代谢的总体框架。书里研究的主要是有机物（碳元素）在酶和蛋白质层面上的代谢网络。研究发现，对于兼X厌氧微生物来说，不但需氧与缺氧时代谢网络有明显差异，而且在不同的培养条件下生存时，其代谢网络也是有差异的。例如：有氧生长的代谢是在以TCA环为骨架的中心板块