基因工程试题及答案

《基因工程》

一、选择题（每小题1.5分，共15分）

1．基因工程的创始人是 ( )。

A A. Kornberg

B W. Gilbert

C P. Berg

D S. Cohen

2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。

A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成

B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶

C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰

D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统

3．在DNA的3’-5’链上，基因的起始密码子是 ()

A ATG（或GTG）

B AGT

C TAG

D TGA

4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别 ( )。

A 双链DNA的特定碱基对

B 双链DNA的特定碱基序列

C 特定的三联密码

D 以上都正确

5．末端转移酶是合成酶类，具有( )活性。

A 3’?5’DNA聚合酶

B 5’?3’DNA聚合酶

C 5’?3’DNA内切酶

D 5’?3’DNA外切酶

6．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，( )是不正确的。

A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。

B 可以在氯霉素作用下进行扩增。

C 通常带有抗药性标记。

D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。

7．关于cDNA的最正确的说法是( )。

A 同mRNA互补的单链DNA

B 同mRNA互补的双链DNA

C 以mRNA为模板合成的双链DNA

D 以上都正确

8．关于T4 DNA Ligase，下列说法中哪一项不正确?()

A 是最常用的DNA连接酶。

B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。

C 不但能连接粘性末端。

D 最适温度37 ℃。

9．下列关于建立cDNA文库的叙述中，( )是错误的?

A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNA

B 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA

C 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA

D 新合成的双链DNA克隆到载体上，并导入受体细胞

10．用下列方法进行重组体的筛选，只有( )说明外源基因进行了表达。

A Southem blot

B Northem blot

C Western印迹

D 原位菌落杂交

二、填空题（每空1分，共25分）

1．限制性内切核酸酶分为三类，基因工程中应用的是_____________。

2．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。

3．切口平移(nick translation)法标记DNA探针时应用的酶是__________。

4．基因工程中的3种主要类型的载体是_______________、_____________、__________。

5．野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是、和。

6．黏粒(cosmid)是杂合载体。

7．引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1)(2)、(3)(4)。

8．Northern印迹和Southern印迹有两点根本的区别：(1)___、，(2)________

9．PCR反应中常用的酶是_______。

10．感受态的大肠杆菌细胞在温度为_______时吸附DNA, _________时摄人外源DNA。

11.用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，是因为。

12. 除具有较低的分子量外，一个理想的质粒载体必需包括______、__________、_______三个部分。

13．转基因植物操作中常用的载体是。

14. pcDNA3.1用于。

三、名词解释（每小题4分，共20分）

1．目的基因：

2．基因工程：

3．载体：

4．Western印迹：

5．核酸分子杂交：

四、简答题（每小题10分，共20分）

1. 基因工程的基本操作程序?

2. 怎样制备目的基因?

《基因工程》评分标准与参考答案

一、选择题：每小题1.5分，共15分；多选不得分。

1d; 2b; 3a; 4b; 5b; 6c; 7c; 8c; 9a; 10c

二、填空题: 每空1分，共25分

1．II类酶。

2．碱性磷酸酶；5’端的磷酸基团

3．DNA聚合酶I。

4．质粒DNA；病毒DNA；质粒和病毒DNA杂合体

5．没有合适的限制性内切核酸酶识别位点；选择标记

6．质粒和l噬菌体

7．合成探针；合成cDNA；用于PCR反应；进行序列分析

8．印迹的对象不同：Northern是RNA，Southern是DNA；)电泳条件不同，前者是变性条件，后者是非变性电泳

9．Tag DNA 聚合酶

10．0°C；42°C

11．染色体变性后来不及复性

12．复制起点；选择标记；克隆位点

13．Ti质粒

14．外源基因导入哺乳动物细胞

三、名词解释（每小题4分，共20分）

1．在基因工程中被操作的DNA序列；又称外源基因（foreign gene/exogenous gene)，主要是指编码蛋白质的结构基因（structural

gene）；它们可以从自然界中已有的物种基因组(genome)中分离出来，也可以用人工的方法合成。

2．按照人们的意愿，进行严密的设计，通过体外DNA重组和转基因等技术，有目的地改造生物种性，生产生物活性物质，甚至创造新物种的技术。

3．携带外源基因进入受体细胞的DNA分子。

4．Western印迹是将蛋白质经电泳分离后从凝胶中转移到固相支持物上；然后用特异性的抗体进行检测；可说明基因是否进行了表达。

5．用标记的探针检测出DNA或RNA同源序列的技术；原理是碱基互补；常用的有Southern blot、Northern blot和原位杂交。

四、简答题（20分）

1．目的基因的制备；目的基因与载体连接；目的基因导入受体细胞；目的基因的表达与检测。或者：转、接、切、增、检（加以解释）。

2．直接分离法、构建基因文库分离法、PCR扩增法、人工合成法等。（加以解释）

五、实验与论述题（20分）

①由于基因已被测序，可通过RT-PCR方法克隆该基因；

②也或通过基因文库分离法获得该基因；

③基因可以在大肠杆菌中作为融合蛋白质或分泌蛋白质进行表达。

具体操作如下：

④制备目的基因；⑤连接到T-载体；⑥转化大肠杆菌，提质粒；⑦测序；⑧酶切，回收目的基因，连接到原核表达载体；⑨再转化大肠杆菌，大量培养；⑩分离、纯化和检测表达产物。

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