实验3 培养基的配制及消毒灭菌

实验3   培养基的配制及消毒灭菌
实验3   培养基的配制及消毒灭菌

实验3 培养基的配制及消毒灭菌

第一讲、培养基的配制

一、实验目的和内容

目的:学习和掌握配制培养基的一般方法和步骤。

内容:1.牛肉膏蛋白陈培养基的配制。

2.高氏1号培养基的配制。

3.马丁氏培养基的配制。

二、实验材料和用具

牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡萄糖、孟加拉红、链霉素、1mol/L NaOH、lmol/L HCl、KNO3、NaCl、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O。

试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、牛角匙、pH试纸、棉花、牛皮纸、记号笔、线绳、纱布、漏斗、漏斗架、胶管、止水夹等。

三、操作步骤

(一)牛肉膏蛋白胨培养基的配制

牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。其配方如下:

牛肉膏3g,蛋白胨10g,Nacl5g,琼脂15~20g,水1000mL,PH7.4~7.6

1.称药品按实际用量计算后,按配方称取各种药品放入大烧杯中。牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶解后倒入大烧杯;也可放在称量纸上称量,随后放入热水中,牛肉膏使与称量纸分离,立即取出纸片。蛋白胨极易吸潮,故称量时要迅速。

2.加热溶解在烧杯中加入少于所需要的水量,然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒搅拌,待药品完全溶解后再补充水分至所需量。若配制固体培养基,则将称好的琼脂放入己溶解的药品中,再加热融化,此过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,最后补足所失的水分。

3.调pH 检测培养基的pH,若pH偏酸,可滴加lmol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸检测,直至达到所需pH范围。若偏碱,则用lmol/L HCl进行调节。pH的调节通常放在加琼脂之前。应注意pH值不要调过头,以免回调而影响培养基内各离子的浓度。

4.过滤液体培养基可用滤纸过滤,固体培养基可用4层纱布趁热过滤,以利培养的观察。但是供一般使用的培养基,这步可省略。

5.分装按实验要求,可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内。分装时可用漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上而造成污染。

分装量:固体培养基约为试管高度的l/5,灭菌后制成斜面。分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜。半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。

6.加棉塞试管口和三角瓶口塞上用普通棉花(非脱脂棉)制作的棉塞。棉塞的形状、大小和松紧度要合适,四周紧贴管壁,不留缝隙,才能起到防止杂菌侵入和有利通气的作用。要使棉塞总长约3/5塞入试管口或瓶口内,以防棉塞脱落。有些微生物需要更好的通气,则可用8层纱布制成通气塞。有时也可用试管帽或塑料塞代替棉塞。

7.包扎加塞后,将三角瓶的棉塞外包一层牛皮纸或双层报纸,以防灭菌时冷凝水沾湿棉塞。若培养基分装于试管中,则应以5支或7支在一起,再于棉塞外包一层牛皮纸,用绳扎好。然后用记号笔注明、培养基名称、组别、日期。

8.灭菌将上述培养基于121.3℃湿热灭菌20min。如因特殊情况不能及时灭菌,则应故人冰箱内暂存。

9.摆斜面灭菌后,如制斜面,则需趁热将试管口端搁在一根长木条上,并调整斜度,便斜面的长度不超过试管总长的1/2。

10.无菌检查将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24~48h,无菌生长即可使用,或贮存于冰箱或清洁的橱内,备用。

(二)高氏l号培养基的配制

高氏1号培养基是用于分离和培养放线菌的合成培养基。其配方如下:

可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCl 0.5g,K2HPO4·3H2O 0.5g,MgSO4·7H2O 0.5g,FeSO4·7H2O 0.01g,琼脂15~20g,水1000mL,pH7.4~7.6。

l.称量和溶解先计算后称量,按用量先称取可溶性淀粉,放入小烧杯中,并用少量冷水将其调成糊状,再加至少于所需水量的水,继续加热,边加热边搅拌,至其完全溶解。再加入其他成分依次溶解。对微量成分FeSO4·7H2O可先配成高浓度的贮备液后再加入,方法是先在1000mL中加入1g的FeSO4·7H2O,配成浓度为0.01g/mL的贮备液,再在1000mL 培养基中加入以上贮备液1mL即可。待所有药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。如要配制固体培养基,其琼脂溶解过程同牛肉膏蛋白胨培养基配制。

2.pH调节、分装、包扎及无菌检查同牛肉膏蛋白胨培养基配制。

(三)马丁氏培养基的配制

马丁氏培养基是用于分离真菌的选择培养基。其配方如下:

K2HPO4 1g,MgSO4·7H2O 0.5g,蛋白胨5g,葡萄糖l0g,琼脂15~20g,水1000mL,自然pH。

1.称量和溶解先计算后称量,按用量称取各成分,并将其溶解在少于所需的水中。待各成分完全溶解后,补充水分到所需体积。再将孟加拉红配成1%的水溶液,在1000mL 培养液中加入以上孟加拉红溶液3.3mL,混匀后,加入琼脂加热融化,方法同牛肉膏蛋白胨培养基配制。

2.分装、包扎、灭菌及无菌检查同牛肉膏蛋白膝培养基配制。

3.链霉素的加入链霉素受热容易分解,所以临用时,将培养基融化后待温度降至45℃左右时才能加入。可先将链霉素配成1%的溶液(配好的链霉素溶液保存于-20℃),在100mL 培养基中加1%链霉素0.3mL ,使每毫升培养基中合链霉素30μg。

四、注意事项

称药品用的牛角匙不要混用,称完药品应及时盖紧瓶盖。调pH时要小心操作,避免回调。不同培养基各有配制特点,要注意具体操作。

五、实验报告

记录本实验配制培养基的名称、数量,并图解说明其配制过程,指明要点。

六、问题和思考

l.配制培养基有哪几个步骤?在操作过程中应注意些什么问题?为什么?

2.培养基配制完成后,为什么必须立即灭菌?若不能及时灭菌应如何处理?已灭菌的培养基如何进行无菌检查?

3.试设计实验对饮料进行无菌检查。

第二讲消毒与灭菌

一、干热灭菌

(一)目的要求

1.了解干热灭菌的原理和应用范围。

2.学习干热灭菌的操作技术。

(二)基本原理

干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关,在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白蛋凝固就越快,反之含水量越少,凝固缓慢。因此,与湿热灭菌相比,干热灭菌所需温度要高(160~170℃),时间要长(1~2h),但干热灭菌温度不能超过180℃,否则,包器皿的纸或棉塞就会烧焦,甚至引起燃烧。干热灭菌使用的电烘箱的结构如图3-1。

(三)器材

培养皿、试管、吸管、电烘箱等。

(四)操作步骤

1.装入待灭菌物品

将包好的待灭菌物品(培养皿、试管,吸管等)放入电烘箱内,关好箱门。

物品不要摆得太挤,以免妨碍空气流通,灭菌物品不要接触电烘箱内壁的铁板,以防包装纸烤焦起火。

2.升温

接通电源,拨动开关,打开电烘箱排气孔,旋动恒温调节器至绿灯亮,让温度逐渐上升。当温度升至100℃时,关闭排气孔。在升温过程中,如果红灯熄灭,绿灯亮,表示箱内停止加温,此时如果还未达到所需的160—170℃温度,则需转动调节器使红灯再亮,如此反复调节,直至达到所需温度。

3.恒温

当温度升达到160~170℃时,恒温调节器会自动控制调节温度,保持此温度2h。

干热火菌过程。严防恒温调节的自动控制失灵而造成安全事故。

4.降温

切断电源、自然降温。

5.开箱取物

待电烘箱内温度降到70℃以下后,打开箱门,取出灭菌物品。

电烘箱内温度末降到70℃,切勿自行打开箱门以免骤然降温导致玻璃器皿炸裂。

(五)实验报告

思考题

l.在干热灭菌操作过程中应注意哪些问题,为什么?

2.为什么干热火菌比湿热灭菌所需要的温度要高,时间要长?请设计干热灭菌和湿热灭菌效果比较实验方案。

图3-1 电烘箱的外观和结构

A.外观

B.结构

1.温度计;

2.排气阀;

3.箱体;

4.控温器旋钮;

5.箱门;

6.指示灯;

7.加热开关;

8.温度控制阀; 9.控制室; 10.侧门; 11.工作室; 12. 保温室; 13.电热器;

14. 散热板; 15.搁板

二高压蒸气灭菌

(一)目的要求

1.了解高压蒸气灭菌的基本原理及应用范围。

2.学习高压蒸气灭菌的操作方法。

(二)基本原理

高压蒸气灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸气。待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸气不能溢出,而增加了灭菌锅内的压力,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。

在同一温度下,湿热的杀菌效力比干热大。其原因有三:一是湿热中细菌菌体吸收水分,蛋白质较易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低(表3-1),二是湿热的穿透力比干热大(表3-2),三是湿热的蒸气有潜热存在。1g水在100℃时,由气态变为液态时可放出2.26kJ(千焦)的热量。这种潜热,能迅速提高被灭菌物体的温度,从而增加灭菌效力。

在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压,所以,当水蒸气中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸气的温度低于饱和蒸气的温度。灭菌锅内留有不同分量空气时,压力与温度的关系见(表3-3)

现在法定压力单位己不用磅和kg/cm2表示,而是用Pa或bar表示,其换算关系为:1kg/cm2=98066.5Pa;1Ib/in2=6894.76Pa.

一般培养基用0.1Mpa(相当于15 Ib/in2或1.05kg/cm2),121.5℃,15~30min可达到彻底灭菌的目的。灭菌的温度及维持的时间随灭菌物品的性质和容量等具体情况而有所改变。例如含糖培养基用0.06Mpa(8Ib/in2或0.59kg/cm2)112.6℃灭菌,然后以无菌操作手续加入灭菌的糖溶液。又如盛于试管内的培养基以0.1Mpa,121.5℃灭菌20min即可,而盛于大瓶内的培养基最好以0.1Mpa,122℃灭菌30min。

实验中常用的非自控高压蒸气灭菌锅有卧式(图3-2,A)和手提式(图3-2,B)二种,其结构和工作原理相同,本实验以手提式高压蒸气灭菌锅为例,介绍其使用方法,有关自控高压蒸气灭菌锅(autoclave)的使用可参照厂家说明书。

(三)器材

牛肉膏蛋白胨培养基,培养皿(6套一包),手提式高压蒸气灭菌锅等。

(四)操作步骤

1.首先将内层锅取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。

切勿忘记加水,同时水量不可过少,以防灭菌锅烧干而引起炸裂事故。

2.放回内层锅,并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤,以免防碍蒸气流通而影响灭菌效果。三角烧瓶与试管口端均不要与锅壁接触,以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。

3.加盖,并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气。

4.用电炉或煤气加热,并同时打开排气阀,使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后,关上排气阀,让锅内的温度随蒸气压力增加到逐渐上升。当锅内压力升到所需

压力时,控制热源,维持压力至所需时间。本实验用0.1Mpa,121.5℃,20min灭菌。

灭菌的主要因素是温度而不是压力。因此锅内冷空气必须完全排尽后,才能关上排气阀,维持所需压力。

5.灭菌所需时间到后,切断电源或关闭煤气,让灭菌锅内温度自然下降,当压力表的压力降至“0”时,打开排气阀,旋松螺栓,打开盖子,取出灭菌物品。

压力一定要降到“0”时,才能打开排气阀,开盖取物。否则就会因锅内压力突然下降,使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口,造成棉塞沾染培养基而发生污染,甚至灼伤操作者。

6.将取出的灭菌培养基,需摆斜面的则摆成斜面,然后放入37℃温箱培养24h,经检查若无杂菌生长,即可待用。

图3-2A 卧式灭菌锅

图3-2B 手提式灭菌锅

1. 安全阀;

2.压力表;

3.放气阀;

4.软管;

5.紧固螺栓;

6.灭菌桶;

7. 筛架;

8.水

(五)实验报告

l.结果

检查培养基灭菌是否彻底。

2.思考题

(1)高压蒸气灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽?灭菌完毕后,为什么待压力降低“0”时才能打开排气阀,开盖取物?

(2)在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时,怎样杜绝一切不安全的因素?

(3)灭菌在微生物实验操作中有何重要意义?

(4)黑曲霉的孢子与芽孢杆菌的孢子对热的抗性哪个最强?为什么?

三、紫外线灭菌

(一)目的要求

了解紫外线灭菌的原理和方法

(二)基本原理

紫外线灭菌是用紫外线灯进行的。波长为200~300nm的紫外线都有杀菌能力,其中以260nm的杀菌力最强。在波长一定的条件下,紫外线的杀菌效率与强度和时间的乘积成正比。紫外线杀菌机理主要是因为它诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成和DNA链的交联,从而抑制了DNA的复制。另一方面,由于辐射能使空气中的氧电离成[O],再使O2氧化生成臭氧(O3)或使水(H2O)氧化生成过氧化氢(H2O2)。O3和H2O2均有杀菌作用。紫外线穿透力不大,所以,只适用于无菌室,接种箱,手术室内的空气及物体表面的灭菌。紫外线灯距照射物以不超过1.2m为宜。

此外,为了加强紫外线灭菌效果,在打开紫外灯以前;可在无菌室内(或接种箱内)喷洒3%~5%石炭酸溶液,一方面使空气中附着有微生物的尘埃降落,另一方面也可以杀死一部分细菌。无菌室内的桌面、凳子可用2%~3%的来苏尔擦洗,然后再开紫外灯照射,即可增强杀菌效果,达到灭菌目的。

(三)器材

1.培养基牛肉膏蛋白胨平板。

2.溶液或试剂3%~5%石炭酸或2%~3%来苏尔溶液。

3.仪器或其他用具紫外线灯。

(四)操作步骤

l.单用紫外线照射

(1)在无菌室内或在接种箱内打开紫外线灯开关,照射30min,将开关关闭。

(2)将牛肉膏蛋白胨平板盖打开15min,然后盖上皿盖。置37℃培养24h。共做三套。

(3)检查每个平板上生长的菌落数。如果不超过4个,说明灭菌效果良好,否则,需延长照射时间或同时加强其他措施。

2.化学消毒剂与紫外线照射结合使用

(1)在无菌室内,先喷洒3%~5%的石炭酸溶液,再用紫外线灯照射15imn。

(2)无菌室内的桌面,凳子用2%~3%来苏尔擦洗,再打开紫外线灯照射15min。

(3)检查灭菌效果[方法同“单用紫外线照射”(3)]。

因紫外线对眼结膜及视神经有损伤作用,对皮肤有刺激作用,故不能直视紫外线灯光下工作。

(五)实验报告

1.结果

2.思考题。

(1)细菌营养体细胞和细菌芽孢对紫外线和的抵抗力会一样吗,为什么?

(2)你知道紫外线灯管是用什么玻璃制作的?为什么不用普通灯用玻璃?

(3)在紫外灯下观察实验结果时,为什么要隔一块普通玻璃?

四微孔滤膜过滤除菌

(一)目的要求

1.了解过滤除菌的原理。

2.掌握微孔滤膜过滤除菌的方法。

(二)基本原理

过滤除菌是通过机械作用滤去液体或气体中细菌的方法。根据不同的需要选用不同的滤器和滤板材料。微孔滤膜过滤器是由上下二个分别具有出口和入口连接装置的塑料盖盒组成,出口处可连接针头,人口处可连接针筒,使用时将滤膜装入两塑料盖盒之间,旋紧盖盒,当溶液从针筒注入滤器时,此滤器将各种微生物阻留在微孔滤膜上面,从而达到除菌的目的。根据待除菌溶液量的多少,可选用不同大小的滤器。此法除菌的最大优点是可以不破坏溶液中各种物质的化学成分,但由于滤量有限,所以一般只适用于实验室中小量溶液的过滤除菌。

(三)器材

1.培养基2%的葡萄糖溶液,肉汤蛋白胨平板。

2.仪器或其他用具注射器,微孔滤膜过滤器,0.22μm滤膜,无菌试管,镊子,玻璃刮棒。

(四)操作步骤

l.组装、灭菌

将0.22μm孔径的滤膜装入清洗干净的塑料滤器中,旋紧压平,包装灭菌后待用(0.lMPa,121.5℃灭菌20min)。

2.连接

将灭菌滤器的入口在无菌条件下,以无菌操作方式连接于装有待滤溶液(2%葡萄糖溶液)的注射器上,将针头与出口处连接并插入带橡皮塞的无菌试管中。见图2—3。

3.压滤

将注射器中的待滤溶液加压缓缓挤入过滤到无菌试管中,滤毕,将针头拨出。

压滤时,用力要适当,不可太猛太快,以免细菌被挤压通过淀胶.

4.无菌检查

无菌操作吸取除菌滤液0.1ml于肉汤蛋白胨平板上,涂布均匀,置37℃温室中培养24h,检查是否有菌生长。

5.清洗

弃去塑料滤器上的微孔滤膜,将塑料滤器清洗干净,并换上一张新的微孔滤膜,组装包扎,再经无菌后使用。

整个过程应在无菌条件下严格无菌操作,以防污染,过滤时应避免各连接处出现渗漏现象。

(五)实验报告

l.结果

记录无菌检查结果

2.思考题

(1)你做的过滤除菌实验效果如何?如果经培养检查有杂菌生长,你认为是什么原因造成的?

(2)如果你需要配制一种含有某抗生素的牛肉膏蛋白胨培养基,其抗生素的终浓度(或工作浓度)为50μg/ml,你将如何操作?

(3)过滤除菌应注意哪些问题?

WWW服务器配置实验报告

信息科学与技术学院实验报告 课程名称: 计算机网络应用技术教程实验项目: WWW服务器配置 实验地点:指导教师: 日期: 2013/10/29 实验类型:验证性实验(验证性实验综合性实验设计性实验)专业: 班级: 11级姓名: 学号: 一、实验目的及要求 1.实验目的: 1.正确理解WWW服务的运行机制,了解常用的wed服务器软件。 2.掌握IIS服务器的安装和管理,创建wed站点利用IIS在一台服务器上运行多个网站。 3.掌握虚拟机主机和虚拟目录的创建删除。 2.实验要求: 1.理解IIS服务的概念及其所具有的功能。 2.掌握IIS服务的安装方法。 3.掌握WWW服务的配置包括IP地址、端口号、默认文档、安全等设定,以及如何应用WWW服务的方法。 4.了解虚拟目录服务的作用。 二、实验仪器、设备或软件 1.实验仪器:电脑一台 三、实验内容及原理 1.实验内容: (1).学会安装IIS。 (2).掌握www服务器的配置和使用。 (3).创建虚拟目录。 2.实验原理: 万维网WWW(World Wide Web)服务,又称为Web服务,是目前TCP/IP互联网上最方便和最受欢迎的信息服务类型,是因特网上发展最快同时又使用最多的一项服务,目前已经进入广告、新闻、销售、电子商务与信息服务等诸多领域,它的出现是TCP/IP互联网发展中的一个里程碑。 WWW服务采用客户/服务器工作模式,客户机即浏览器(Browser),服务器即Web服务器,它以超文本标记语言(HTML)和超文本传输协议(HTTP)为基础,为用户提供界面一致的信息浏览系统。信息资源以页面(也称网页或Web页面)的形式存储在Web服务器上(通常称为Web站点),这些页面采用超文本方式对信息进行组织,页面之间通过超链接连接起来。这些通过超链接连接的页面信息既可以放

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法 Ampicillin (100 mg/ml) IPTG (24 mg/ml) X-Gal (20 mg/ml) LB培养基■组份浓度 100 mg/ml Ampicillin ■配制量 50 ml ■配制方法 1. 称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中。 2. 加入40 ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50 ml。 3. 用0.22 μm滤器过滤除菌。 4. 小份分装(1 ml/份)后,-20℃保存。 ■组份浓度 24 mg/ml IPTG ■配制量 50 ml ■配制方法 1. 称量1.2 g IPTG置于50 ml离心管中。 2. 加入40 ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50 ml。 3. 用0.22 μm滤器过滤除菌。 4. 小份分装(1 ml/份)后,-20℃保存。 ■组份浓度 20 mg/ml X-Gal ■配制量 50 ml ■配制方法 1. 称量1 g X-Gal置于50 ml离心管中。 2. 加入40 ml DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解后, 定容至50 ml。 3. 小份分装(1 ml/份)后,-20℃避光保存。 ■组份浓度 1%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)Yeast Extract, 1%(W/V)NaCl ■配制量 1 L ■配制方法 1. 称量下列试剂,置于1 L烧杯中。 Tryptone 10 g Yeast Extract 5 g NaCl 10 g 2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。 3. 滴加5 N NaOH(约0.2 ml),调节pH值至7.0。 4. 加去离子水将培养基定容至1 L。 5. 高温高压灭菌后,4℃保存。

实验一 培养基的制备

实验一培养基的制备 一、目的与要求 (一)学习制备培养基的基本技术。 (二)制备牛肉膏蛋白琼脂培养基。 二、原理 牛肉膏蛋白培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌培养基,这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质,可供作繁殖之用,制作固体培养基时须加2%琼脂,培养细菌时,应用稀酸或稀碱将PH调至中性或微碱性。牛肉膏蛋白培养基的配方: 牛肉膏0.5%,蛋白胨1%,NaCl0.5%,pH7.4~7.6。 三、材料与仪器 (一)试剂牛肉膏,蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol/L NaOH、1mol/L HCl。 (二)其他试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,漏斗,乳胶管,弹簧夹,纱布,棉花,牛皮纸,线绳,pH试纸,电炉,台称。 四、操作步骤 (一)称量根据用量按比例依次称取成分,牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯,蛋白胨易吸湿,称量时要迅速。 (二)溶解在烧杯中加入少于所需要的水量,加热,ZHU一加入各成分,使其溶解,琼脂在溶液煮沸后加入,融化过程需不断搅拌。加热时应注意火力,勿使培养基烧焦或溢出。溶好后,补足所需水分。 (三)调PH 用1mol/L NaOH或1mol/L HCl把PH调至所需范围。 (四)过滤趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利于某些实验结果的观察,如无特殊要求时可省去此步骤。 (五)分装按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或三解瓶内,分装装置如实验图8所示;分装时注意,勿使培养基沾染在容器口上,以免沾染棉塞引起污染。 1.液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜,分装三角瓶的量则根据需要而定,一般以不超过三角瓶容积的1/2为宜。 2.固体分装分装试管,其装量不超过管高的1/5,灭菌后制成斜面,斜面长度不超过管长的1/2。分装三解瓶,以不超过容积的1/2为宜。 3.半固体分装装置以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。

培养基的配置和灭菌

培养基的制备与灭菌 一、目的要求 1.掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。 2.掌握培养基的配置原则和方法。 3.掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。 二、基本原理 牛肉膏蛋白胨培养基:是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供细菌生长繁殖之用。 高压蒸汽灭菌:主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽,关闭排气阀继续加热。此时蒸汽不溢出,压力增大,沸点升高,获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性,而达到灭菌的目的。 三、实验材料 1.药品:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol/L的NaOH和HCl溶液。 2.仪器及玻璃器皿:天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。 3.其他物品:药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等。 四、操作步骤 (一)玻璃器皿的洗涤和包装 1.玻璃器皿的洗涤 玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中.用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗。洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。 2.灭菌前玻璃器皿的包装 (1)培养皿的包扎:培养皿由一盖一底组成一套,可用报纸将几套培养皿包成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌。包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。 (2)移液管的包扎:在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉),它的作用是避免外界及口中杂菌进入管内,并防止菌液等吸入口中。塞入此小段棉花应距管口约0.5cm左右,棉花自身长度约1~1.5cm。塞棉花时.可用一外围拉直的曲别针、将少许棉花塞入管口内。棉花要塞得松紧适宜,吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。 先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条,然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端,约成45℃角,折叠纸条包住尖端,用左手握住移液管身,有手将移液管压紧.在桌面上向前搓转,以螺旋式包扎起来。上端剩余纸条,折叠打结,准备灭菌。 (二)液体及固体培养基的配制过程1.液体培养基配制 (1)称量(假定配制1000ml培养基) 按培养基配方比例依次准确地称取3.0g牛肉膏、10.0 g蛋白胨、5.0gNaCl放入烧杯(或1000ml刻度搪瓷杯)中.牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。 (2)溶化 在上述烧杯中先加入少于所需要的水量(如约700ml),用玻棒搅匀,然后,在石棉网上

FTP服务器配置实验报告

F T P服务器配置实验报告 Prepared on 22 November 2020

实验报告 课程:计算机网络实验 实验名称: FTP服务器配置与管理 系别 : 电子信息工程系 实验日期 : 专业班级 : 03通信师 组别 : 第10组 实验报告日期 : 姓名 : 学号 : (40) (41) 报告退发 : ( 订正、重做 ) 第1页共 12 页 FTP服务器配置与管理 一.题目: FTP服务器配置与管理 二.环境: Sever2000 三.试验目的 1.掌握FTP服务的基本概念与工作原理 2.懂得安装FTP服务器的过程 3.配置与管理FTP服务器 四.试验内容及步骤 1.的安装,具体步骤如下: (1)运行“控制面板”中的“添加或删除程序”,点击“添加/ 删除Windows组件”按钮。 第 2 页共 12页 (2)在出现组件安装向导中,选择“Internet信息服务 (IIS)”,单击“下一步”开始安装,单击“完成”结 束。 第 3 页共 12 页 系统自动安装组件,完成安装后,系统在“开始”/“程序”/“管理工具”程序组中会添加一项“Internet服务管理器”,此时服务器的WWW、FTP等服务会自动启动。 2.设置FTP站点 第 4 页共 12 页 (1)使用IIS默认站点

①将制作好的主页文件(html文件)复制到 \Inetpub\ftproot目录,该目录是安装程序为默认FTP站点 预设的发布目录。 ②将主页文件的名称改为。IIS默认要打开的主页文件是 或,而不是一般常用的。 完成这两个步骤后,打开本机或客户机浏览器,在地址栏 中输入FTP服务器的 IP地址()或主机的FQDN名字(前 提是DNS服务器中有该主机的记录),就会以匿名的方式 登录到FTP服务器,根据权限的设置就可以进行文件的上 传和下载了。 (2)添加新的FTP站点 ①打开“Internet信息服务窗口”,鼠标右键单击要创建 新站点的计算机,在弹出菜单中选择“新建”/“FTP站 点”,出现“FTP站点创建向导”,单击“下一步”继 续。 第 5 页共 12 页 ②输入FTP站点说明,单击下一步 第 6 页共 12 页 ③ 单击下一步 ④指定FTP输入主目录的路径(如选择新建文件夹),单击下一步 第 7 页共 12 页 ⑤设置访问权限为读取和写入,并单击下一步,完成FTP站点创建向导 第 8 页共 12 页 站点的管理 (1)本地管理 通过“开始”/“程序”/“管理工具”/“Internet服务管理 器”,打开如图9-1的“Internet信息服务”窗口,在要管 理的FTP站点上单击鼠标右键,选择“属性”命令,出现如下 图所示对话框。 第 9 页共 12 页 ①“FTP站点”属性页 IP地址:设置此站点的IP地址,即本服务器的IP地址。 如果服务器设置了两个以上的IP站点,可以任选一个。FTP 站点可以与Web站点共用IP地址以及DNS名称,但不能设置 使用相同的TCP端口。 TCP端口:FTP服务器默认使用TCP协议的21端口,(若端口号21以被配置,则需更改此端口,用户在连接到此站点时,

组织培养实验报告

植物组织培养实验报告 一、实验目的 1.掌握无菌操作的植物组织培养方法; 2.通过配置ms培养基母液,掌握母液的配置和保存方法; 3.通过诱导豌豆根、茎、 叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法; 4.通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法; 5.了解植物细胞通 过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理 解。 二、实验原理(一)植物组织培养 植物组织培养是把植物的器官,组织以至单个细胞,应用无菌操作使其在人工条件下, 能够继续生长,甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下,原来已经分 化停止生长的细胞,又能重新分裂,形成没有组织结构的细胞团,即愈伤组织。这一过程称 为“脱分化作用”,已经“脱分化”的愈伤组织,在一定条件下,又能重新分化形成输导系统 以及根和芽等组织和器官,这一过程称“再分化作用”。(二)植物细胞的全能性 植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因,在一 定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。(三)组织的分化与器官建 成 外植体诱导出愈伤组织后,经过继代培养,可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具 有分生能力的小细胞团,然后,再分化成不同的器官原基。有些情况下,外植体不经愈伤组 织而直接诱导出芽、根。 (四)培养基的组成 培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近,似成 功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维 生素、植物激素(生长调节剂)和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。 三、实验器材 高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻 璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。 四、实验材料 豌豆种子 五、实验药品 药品、70% 酒精、 0.1% 升汞、ms培养基、蒸馏水、naoh、 84消毒液、蔗糖、琼脂 等。 六、实验步骤 (一)培养基母液的配制 表1.ms培养基个成分的含量(单位:mg/l) 表2.ms培养基所需母液以及扩大倍数 名称大量元素微量元素 ca盐 mg盐 fe盐有机肌醇激素 扩大倍数 50 50 50 50 50 100 100 100 定容体积(ml) 500 500 500 500 500 200 200 50 吸取毫升数/l 20 20 20 20 20 10 10 5 (注:吸取毫升数为每升培养基所吸取的母液的体积) 表3.配制母液所需的药品及称取量

Apache服务器配置实验报告

在Linux下配置Apache服务器 一、实验目的 完成本次实训,将能够: ●配置基本的Apache服务器 ●配置个人用户Web站点。 ●配置虚拟目录别名功能。 ●配置主机访问控制。 ●配置用户身份验证功能.。 ●配置基于IP地址的虚拟主机. 二、实验环境 1、RedHat Linux4AS. 2、Apache 2.0 三、实验内容 1.配置基本的Apache服务器 2.配置个人用户Web站点。 3.配置虚拟目录别名功能。 4.配置主机访问控制。 5.配置用户身份验证功能.。 6.配置基于IP地址的虚拟主机。 四、实验要求 在Linux操作系统下配置Apache服务器。 五、注意事项 1.在修配置文件下注意区分大小写、空格。 2.在每次重新开机后都必须启动Apachec服务器。 3.在每次修改完主配置文件后保存起来,必须重启Apachec服务器,如果不重启会 导致配置无效,最终导致实验失败。 六、实验步骤 1、检测是否安装了Apache软件包: A、首先为服务器网卡添加一个固定的IP地址。 B、在Web浏览器的地址栏中输入本机的IP地址,若出现Test Page测试页面(该 网页文件的默认路径为var/www/html/index.html)如下图1所示就说明Apache 已安装并已启动。

另一种方法是使用如下命令查看系统是否已经安装了Apache软件包: [root@rhe14~]# rpm –aq | grep httpd Httpd-suexec-2.0.52-9.ent Httpd-manual-2.0.52-9.ent System-config-httpd-1.3.1-1 Httpd-devel-2.0.52-9.ent 出现以上内容表明了系统已安装Apache软件包。 2、安装Apache软件包 超级用户(root)在图形界面下选择“应用程序”|“系统设置”|“添加/删除应用程序”命令,选择“万维网服务器”软件包组,在单击“更新”按钮就可以安装与Apache相关的软件包。 3、Apache的基本配置 (1)打开终端输入[root@rhe14~]# /etc/rc.d/init.d/httpd start //启动Apache 或者 [root@rhe14~]# apachectl start //启动Apache [root@rhe14~]# apachectl stop //停止Apache服务 [root@rhe14~]# apachectl restart //重启Apache服务 [root@rhe14~]# apachectl configtest //测试Apache服务器配置语法(2)在httpd.conf将Apache的基本配置参数修改、将一些注释的语句取消注释,或将某些不需要的参数注释掉。 (3)将包括index.html在内的相关网页文件复制到指定的Web站点根目下(var/www/html/index.html) (4)重启httpd进程 (5) 在Web浏览器下输入配置的ip地址出现如下图2,那表明基本配置成功了:

常用细菌培养基配方

常用抗生素 氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml) 溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml) 溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 甲氧西林(methicillin)(100mg/ml) 溶解1g甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。 卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml) 溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml) 溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml~25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 链霉素(streptomycin)(50mg/ml) 溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml) 溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 四环素(tetracyyline)(10mg/ml) 溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中,或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 常用培养基 LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中: 蛋白胨10g 酵母提取物5g 氯化钠10g 如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。(实验室一般都不调PH) SOB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中: 蛋白胨20g 酵母提取物5g 氯化钠0.5g 1 mol/L 氯化钾2.5ml

植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告 学院:生命科学技术学院 班级:11生物技术(制品) 学号:2011192017 姓名:李鹏

植物组织培养实验报告 实验一植物组织培养母液的配制 一、实验目的 1.了解植物组织培养基本培养基的组分及其作用。 2.学习掌握植物组织培养MS培养基的配制方法。 二、实验原理 培养基是植物组织培养中离体组织赖以生存和发育的条件。大多数培养基的成分是有无机盐、有机化合物(碳源、维生素、肌醇、氨基酸等)、生长调节物质、水分和其他附加物等五大类物质组成。 无机盐类由大量元素和微量元素组成。大量元素中,氮类化合物主要以硝酸类和铵类化合物的形式存在,但在培养基中多用硝酸类,也可以将硝酸类和铵类混合使用;磷和硫常用磷酸盐和硫酸盐来提供;钾是培养基中主要的阳离子;钙、钠、镁的需要量较少。微量元素包括碘、锰、铜、锌、钴、铁。培养基中的铁离子,大多数以螯合物的形式存在,即硫酸亚铁与乙二胺四乙酸二钠的混合。 有机化合物包括碳源、维生素、肌醇、氨基酸等。培养中的植物组织和细胞的光合作用较弱,因此,需要在培养基中附加一些碳水化合物物来提供营养需要。培养基中的碳水化合物通常为蔗糖。蔗糖除了作为培养基的碳源和能源外,对维持培养基的渗透压也起着重要的作用。在培养基中加入维生素有助于细胞的分裂和增长。一般包括VB1、B6、烟酸、生物素、叶酸、泛酸钙、VC。肌醇在糖类的相互转化、维生素和激素的利用等方面具有重要的催进作用。 常用的植物生长调节物质包括以下三类:①生长素类:吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、二氯苯氧乙酸(2,4-D)②细胞分裂素:玉米素(ZT)6-苄基嘌呤(6-BA)和激动素(KT)。③赤霉素:组织培养中使用的赤霉素只有一种,即赤霉酸(GA3)。 培养基中的其他附加物包括人工合成和天然的有机物附加物。其中最为常见的为酵母提取物。琼脂作为培养基的支持物,也是最常用的邮寄附加物,他可以是培养基呈固体状态,以利于组织和细胞的培养。 植物组织培养是否成功,在很大的程度上取决于培养基的选择之上。目前普遍使用的是MS培养基。MS固体培养基可用于诱导愈伤组织,或用于胚胎、茎段、茎尖及花药的培养等。MS培养基的硝酸盐、钾和铵的含量略高于其他的培养基,也是它被普遍使用的原因之一。 三、实验材料、试剂、配方和仪器设备 1.试剂 NH 4NO 3 ,KNO 3 ,KH 2 PO 4 ,CaCl 2 ·2H 2 O ,MgSO 4 ·7H 2 O,FeSO 4 ·7H 2 O Na 2-EDTA,MnSO 4 ·4H 2 O,ZnSO 4 ·7H 2 O,H 3 BO 3 ,KI,Na 2 MoO 4 ·2H 2 O CuSO 4 ·5H 2 O,CoCl 2 ·6H 2 O,肌醇,甘氨酸,盐酸硫胺素,盐酸吡哆醇,烟酸, 蒸馏水。 2.仪器设备 电子天平,烧杯(50ml、100ml、500ml)量筒(1000ml、100ml、25ml),容量瓶(1000ml、500ml、100ml),移液管(10ml,5ml,1ml)试剂瓶,玻璃棒数支,药匙,称量纸等。

web服务器的配置实验报告doc

web服务器的配置实验报告 篇一:计算机网络实验报告——Web服务器的配置 实验2 web服务器配置 一、实验目的: 掌握如何使用windows XX server的IIS5.0配置出web 服务器 二、实验内容: 1、创建一个web站点,并且可以实现在别人的计算机上访问该站点 2、使用不同的ip建立多个站点 3、在一个站点下建立多个子站点(使用虚拟目录实现) 4、在同一个套接字(即ip地址+端口)上建立多个站点(使用加主机头名方法实现) 5、对站点进行安全管理(如浏览权限、帐号的使用、ip地址的设定) 三、实验要求: 一定要保证让别人正常的访问你建立的站点,并使实验结果达到预期的目的! 四、实验步骤: 1. 使用当地IP地址建立web站点 (1)准备工作: ①关闭Windows 防火墙

实验中,为了我们所建的站点能够被成功访问,先将Windows 防火墙关闭。如图: ②IIS功能设置 控制面板\所有控制面板项\程序和功能---“打开或关闭windows所有功能”: 出现了安装Windows功能的选项菜单,在“Internet信息服务”中手动选择需要的功能,如下图: ③下载“花生壳软件”到本地,申请免费域名mqqfhg。 这样,完成了前期的所有准备工作,开始进行web服务器的建设。 (2)开始建立web站点 ①创建web站点“酒窝” 打开“控制面板”——“管理工具”—“ Internet 信息服务(IIS)管理(本文来自:小草范文网:web服务器的配置实验报告)器”——右击“网站——“添加网站——选择“IP地址”及“物理路径”: 篇二:实验六web服务器配置实验报告 XX-XX学年第一学期课程实验报告课程名称:计算机网络 实验名称: 篇三:Web服务器的配置实验报告 实验5 Web服务器的配置

实验室常用培养基的配制方法

五、实验室常用培养基的配制方法 Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml) 组份浓度100 mg/ml Ampicillin 配制量50 ml 配制方法 1.称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中。 2.加入40 ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50 ml。 3.用0.22 μm过滤膜过滤除菌。 4.小份分装(1 ml/份)后,-20℃保存。 IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml) 组份浓度24 mg/mL IPTG 配制量50 mL 配制方法 1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中。 2.加入40 ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50 ml。 3.用0 22 μm过滤膜过滤除菌。 4小份分装(1 ml,份)后,-20℃保存。 X-Gal (20 mg/ml) 组份浓度20 mg/ml X-Gal 配制量50 ml 配制方法 1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中。 2.加入40 ml DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解后,定容至50 ml。 3.小份分装(1 ml/份)后,-20℃避光保存。 LB培养基 组份浓度1%(W/V)Tryptone(胰蛋白胨),0.5%(W/V)Yeast Extract(酵母提取物),1%(W/V)NaCl 配制量 1 L 配制方法 1.称取下列试剂,置于l L烧杯中。 Tryptone 10 g Yeast Extract 5 g NaCl 10 g 2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。 3.滴加5 N NaOH(约0.2 m1),调节pH值至7.0。 4.加去离子水将培养基定容至1 L。 5高温高压灭菌后,4。C保存。 LB/Amp培养基 组份浓度 1%(W/V) Tryptone 0.5%(W/V) Yeast Extract 1%(W/V) NaCl 0.1 mg/ml Ampicillin

(完整版)《ftp服务器的配置》实验报告

实验报告 课程名称计算机网络基础实验项目 FTP服务器的配置 专业班级 0906603 姓名学号 27 指导教师陈伟宏老师成绩日期2011.11.12 一、实验目的 掌握如何在局域网内配置FTP服务器。 二、实验设备和环境 局域网内多台个人计算机、Windows 2003操作系统。 三、实验内容 1、安装IIS或Serv-U; 2、配置及管理FTP服务器; 3、使用FTP服务。 四、实验过程 1、安装IIS V5.1 for 2003 截图如下: 点“详细信息”

选择Internet 信息服务(IIS),点详细信息.再选择“文件传输协议(FTP)服务” 2、FTP服务器的配置 启动IIS信息管理:控制面板——管理工具——IIS信息管理,选择FTP站点。右键新建FTP站点。

3.右击FTP站点的默认FTP站点的属性设置主目录F:\学习资料 4、设置安全账户为只允许匿名连接

5、测试本地ftp站点:在浏览器中输入ftp://192.168.137.3访问结果如下:

五、实验心得 这次试验为FTP服务器的配置。总的来说,由于上次已经做过web服务器的配置,而ftp的配置跟它大致相同,所以过程相对来说还是比较顺利,出现的问题也不多。 不过在实验过程中,自己只是按照老师的《FTP服务器的配置示例》一步步去做,实验虽然很成功地完成了,但在实验过程中我感觉自己并没有完全的、真正的“消化”理解好其中的含义,于是又反复地理解了一下各个步骤的原理。 通过这次实验理解了FTP服务器的工作基本原理,以及匿名访问和非匿名访问的一些相关设置,文件具有长传和下载的权限,对文件安全性的控制等等。 同时,也让我又学会了一种传送文件的新方法:只需要通过构建局域网,然后通过FTP就可以实现资源共享啦。感觉非常有用。 能把知识用到实处才是真正的学好了知识,这也是我们做实验的真正目的。以后我会继续努力提高自己的动手操作能力,把知识付诸于实践,同时在实践中更加深刻地理解知识。

培养基的制备实验报告

培养基的制备实验报告 《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告 实验目的 1.学习和掌握配制培养基(以牛肉膏蛋白胨培养基的配制为例)的一般方法和原理。 2.了解消毒和灭菌的原理,掌握常用灭菌方法的操作步骤。 实验原理 培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。在自然界中.微生物种类繁多,营养类型多样,加之实验和研究的目的不同,所以培养基的种类很多。但是,不同种类的培养基中,一般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。不同微生物对PH要求不一样.雷菌和酵母的培养基的pH一般是偏酸性的,而细菌和放线菌的培养基的pH一般为中性或微碱性的(嗜碱细菌和嗜酸细菌例外)。所以配制培养基时,都要根据不同微生物的要求将培养基的pH调到合适的范围。此外,由于配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物,因此,已配制好的培养基必须立即灭菌.如果来

不及灭菌,应暂存冰箱内,以防止其中的微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养的酸碱度所带来不利的影响。 高压蒸气灭菌是将持灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅套间的水沸腾而产生蒸气。待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀.继续加热,此时由于蒸气不能道出,而增加了灭菌器内的压力,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供作微生物生长繁殖之用。基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素,而NaCl 提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂,琼脂在常用浓度下96℃时溶化,实际应用时,一般在沸水浴中或下而垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。 由于这种培养基多用于培养细菌,因此要用稀酸或稀碱将其PH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。

第五章 微生物的营养和培养基习题整理

第五章微生物的营养和培养基 一、选择题 1. 大多数微生物的营养类型属于:() A. 光能自养 B. 光能异养 C. 化能自养 D. 化能异养 2. 蓝细菌的营养类型属于:() A.光能自养 B. 光能异养C.化能自养 D. 化能异养 3. 碳素营养物质的主要功能是:() A. 构成细胞物质 B. 提供能量 C. A,B 两者 4. 占微生物细胞总重量70%-90% 以上的细胞组分是:() A. 碳素物质 B. 氮素物质 C. 水 5. 能用分子氮作氮源的微生物有:() A. 酵母菌 B. 蓝细菌 C. 苏云金杆菌 6. 大肠杆菌属于()型的微生物。 A. 光能无机自养 B. 光能有机异养 C. 化能无机自养 D. 化能有机异养 7. 自养型微生物和异养型微生物的主要差别是:() A. 所需能源物质不同 B. 所需碳源不同 C. 所需氮源不同 8. 基团转位和主动运输的主要差别是:() A. 运输中需要各种载体参与 B. 需要消耗能量 C. 改变了被运输物质的化学结构 9. 单纯扩散和促进扩散的主要区别是:() A. 物质运输的浓度梯度不同 B. 前者不需能量,后者需要能量 C. 前者不需要载体,后者需要载体 10. 微生物生长所需要的生长因子(生长因素)是:() A. 微量元素 B. 氨基酸和碱基 C. 维生素 D. B,C二者 11. 培养基中使用酵母膏主要为微生物提供:() A. 生长因素 B. C 源 C. N 源 12. 细菌中存在的一种主要运输方式为:() A. 单纯扩散 B. 促进扩散 C. 主动运输 D. 基团转位 13. 微生物细胞中的C素含量大约占细胞干重的:() A. 10% B. 30% C. 50% D.70%

FTP服务器配置实验报告

F T P服务器配置实验报 告 Company Document number:WUUT-WUUY-WBBGB-BWYTT-1982GT

实验报告 课程:计算机网络实验 实验名称: FTP服务器配置与管理 系别 : 电子信息工程系 实验日期 : 专业班级 : 03通信师 组别 : 第10组 实验报告日期 : 姓名 : 学号 : (40) (41) 报告退发 : ( 订正、重做 ) 第1页共 12 页 FTP服务器配置与管理 一.题目: FTP服务器配置与管理 二.环境: Sever2000 三.试验目的 1.掌握FTP服务的基本概念与工作原理 2.懂得安装FTP服务器的过程 3.配置与管理FTP服务器 四.试验内容及步骤 1.的安装,具体步骤如下: (1)运行“控制面板”中的“添加或删除程序”,点击“添加/ 删除Windows组件”按钮。 第 2 页共 12页 (2)在出现组件安装向导中,选择“Internet信息服务 (IIS)”,单击“下一步”开始安装,单击“完成”结 束。 第 3 页共 12 页 系统自动安装组件,完成安装后,系统在“开始”/“程序”/“管理工具”程序组中会添加一项“Internet服务管理器”,此时服务器的WWW、FTP等服务会自动启动。 2.设置FTP站点 第 4 页共 12 页 (1)使用IIS默认站点

①将制作好的主页文件(html文件)复制到 \Inetpub\ftproot目录,该目录是安装程序为默认FTP站点 预设的发布目录。 ②将主页文件的名称改为。IIS默认要打开的主页文件是 或,而不是一般常用的。 完成这两个步骤后,打开本机或客户机浏览器,在地址栏 中输入FTP服务器的 IP地址()或主机的FQDN名字(前 提是DNS服务器中有该主机的记录),就会以匿名的方式 登录到FTP服务器,根据权限的设置就可以进行文件的上 传和下载了。 (2)添加新的FTP站点 ①打开“Internet信息服务窗口”,鼠标右键单击要创建 新站点的计算机,在弹出菜单中选择“新建”/“FTP站 点”,出现“FTP站点创建向导”,单击“下一步”继 续。 第 5 页共 12 页 ②输入FTP站点说明,单击下一步 第 6 页共 12 页 ③ 单击下一步 ④指定FTP输入主目录的路径(如选择新建文件夹),单击下一步 第 7 页共 12 页 ⑤设置访问权限为读取和写入,并单击下一步,完成FTP站点创建向导 第 8 页共 12 页 站点的管理 (1)本地管理 通过“开始”/“程序”/“管理工具”/“Internet服务管理 器”,打开如图9-1的“Internet信息服务”窗口,在要管 理的FTP站点上单击鼠标右键,选择“属性”命令,出现如下 图所示对话框。 第 9 页共 12 页 ①“FTP站点”属性页 IP地址:设置此站点的IP地址,即本服务器的IP地址。 如果服务器设置了两个以上的IP站点,可以任选一个。FTP 站点可以与Web站点共用IP地址以及DNS名称,但不能设置 使用相同的TCP端口。 TCP端口:FTP服务器默认使用TCP协议的21端口,(若端口号21以被配置,则需更改此端口,用户在连接到此站点时,

培养基的配制及灭菌实验报告

竭诚为您提供优质文档/双击可除培养基的配制及灭菌实验报告 篇一:培养基的制备与灭菌实验报告(详细) 一、实验题目:培养基的制备与灭菌 二、实验目的: 1、明确培养基的配置原则,掌握配置方法。 2、了解灭菌的原理,学习掌握灭菌器的使用方法。 三、实验器材: 1、药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。 2、仪器:三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。 四、实验原理: 1、培养基的制备 包括一下几种成分: (1)水分:主要成分。 (2)n源:包括无机氮和有机氮。 (3)c源:主要是含碳有机物、碳氢化合物等。 (4)无机盐:如nacl、Kh2po4等。

微量元素:cu、K、mg、s、p、Zn。 有些还需要添加“生长因子”,通常是维生素类、某些 氨基酸或核酸等。 2、培养基配置的原则 根据不同的培养对象及培养目的,选用不同的培养基,但有机物总量不得超过15%,盐类一般不超过1%。 培养基有以下分类: 按成分:天然培养基、合成培养基、半合成培养基 按状态:固体培养基、半固体培养基、液体培养基 按用途:基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基 培养基配好后应立即灭菌,防止营养物质中的微生物富集。 3、灭菌: 用理化手段杀灭一切微生物的营养体,包括芽孢和孢子,在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。 (1)高压蒸汽灭菌:将物品放入封闭的加压灭菌器, 加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽,将冷空气排尽,压力上升,使水沸点变高,导致菌体蛋白质变性,一般0.1mpa、121℃、15~30min可以彻底灭菌,本次实验灭菌20min。若 是含糖培养基,110℃、30min。

实验室常用培养基大全

表皮葡萄球菌 产气肠杆菌 鼠伤寒沙门氏菌 单核增生李斯特氏菌 大肠埃希氏菌 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 表面接触碟/表面接触皿 https://www.360docs.net/doc/f317396496.html, 金黄色葡萄球菌 酿酒酵母菌 脑心浸出液肉汤(BHI) 品红亚硫酸钠液体培养基 MFC肉汤 CFU培养基基础 4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基蛋白胨 胰蛋白胨 胰酪蛋白胨 酵母浸粉 大豆蛋白胨 酸水解酪蛋白 明胶蛋白胨 马铃薯浸粉 琼脂粉 琼脂粉 动物组织胃蛋白酶消化物 肉胃酶消化物 牛肉浸粉 牛肝浸粉 牛肝浸粉 牛心浸粉 多价蛋白胨(多聚蛋白胨) 月示蛋白胨 玉米浸出粉 一次性培养皿 表面接触碟 一次性培养皿(密理博浮游菌采样)表面接触碟/表面接触皿 https://www.360docs.net/doc/f317396496.html, 金属玻璃培养皿(可重复使用) 金属玻璃表面接触碟

嗜热脂肪肝菌芽孢菌片(ATCC7953 枯草杆菌黑色变种芽孢菌片(ATCC9372)121度高压灭菌化学指示卡 132℃压力蒸汽灭菌指示卡 葡萄糖 氯化钠 L-半胱氨酸盐酸盐 氧化酶试剂 三磷酸腺苷二钠盐(ATP) 费尔休林(无吡啶) SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 SDS-PAGE电泳液 SDS-PAGE上样缓冲液5倍 考马斯亮蓝R-250染色套装 铜绿假单胞菌 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 大肠埃希氏菌 大肠埃希氏菌 产气肠杆菌 乙型副伤寒沙门氏菌 枯草芽孢杆菌 白色念珠菌 表面接触碟/表面接触皿 https://www.360docs.net/doc/f317396496.html, 黑曲霉 生孢梭菌 大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉汤) 大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉汤) 无菌大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉? 大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉汤) 大豆酪蛋白消化液培养基 大豆酪蛋白琼脂培养基 大豆酪蛋白琼脂培养基 无菌大豆酪蛋白琼脂培养基 卵磷脂-吐温80营养琼脂培养基基础 胰化大豆坚固绿琼脂(TSFA) 营养肉汤(NB) 营养琼脂(NA) 0.5%葡萄糖肉汤培养基 pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液 三糖铁琼脂培养基(TSI) 三糖铁琼脂培养基 R2A琼脂

FT服务器配置实验报告

计算机科学与技术系 实验报告 课程名称:计算机网络 实验名称: FTP服务器配置 姓名:学号: 日期:地点:网络实验室 成绩:教师: 一、实验目的 1.创建一个ftp服务器,提供文件下载和上传功能。? 2.提供匿名登录功能,用于下载公共文件,但不能匿名上传? 3.同时也提供用户登录,用户只能限制在自己的目录下,这是可以 上载也可以下载 二、实验内容 1.搭建FTP服务器 三、实验原理 1.使用FTP软件搭建FTP服务器 四、实验设备 已经安装好windows操作系统的计算机一台。

五、实验过程及分析 1、打开FTP软件,进行软件的安装。 点击确认 点 击下 一步 选 择安 装的 路径点击下一步 下一步 点击下一步 点击安装 点击下一步 完成 然后给软件安装破解补丁,点击Patch就行了 2、配置用户登录 单击桌面图标,打开软件 点击是,输入一个名称 下一步,除第一个勾选外其它都不勾选 下一步,在IPv4地址栏中选择自己电脑上的IP地址 点击下一步

单击完成 选择是 选择是,创建登录ID 点击下一步,设置登录密码 点击下一步,设置要被访问的路径。设置访问权限

到此为止就已经创建了一个用户。 输入已设置的用户名和密码。 3、配置匿名用户登录 在主页中点击新建域 点击新建域,在名称中输入anonymous 这一步是要注意的了,设置成无加密 这里密码就不用设置了 全部设置完成之后,就可以进行匿名登录了 FTP服务器的配置就完成了,就可以通过登录FTP服务器进行文件的上传与下载 六、实验小结 在本次实验中,通过FTP服务器的配置过后,让我学会了怎么在一台电脑上用FTP软件安装FTP服务器。并且怎么去使用FTP

细菌培养实验报告(新)

篇一:培养基的制备与灭菌实验报告 陕西师范大学远程教育学院 生物学实验报告 报告题目培养基的制备与灭菌 姓名刘伟 学号 专业生物科学 批次/层次 指导教师 学习中心培养基的制备与灭菌 一、目的要求 1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。 2. 掌握培养基的配置原则和方法。 3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。 二、基本原理 牛肉膏蛋白胨培养基: 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供细菌生长繁殖之用。 高压蒸汽灭菌: 主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽,关闭排气阀继续加热。此时蒸汽不溢出,压力增大,沸点升高,获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性,而达到灭菌的目的。 三、实验材料 1. 药品:牛肉膏、蛋白胨、nacl、琼脂、1mol/l的naoh和hcl溶液。 2. 仪器及玻璃器皿:天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三 角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。 3. 其他物品:药匙、称量纸、ph试纸、记号笔、棉花等。 四、操作步骤 (一)玻璃器皿的洗涤和包装 1.玻璃器皿的洗涤 玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中.用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗。洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。 2.灭菌前玻璃器皿的包装 (1)培养皿的包扎:培养皿由一盖一底组成一套,可用报纸将几套培养皿包 成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌。包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。 (2)移液管的包扎:在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉),它的作 用是避免外界及口中杂菌进入管内,并防止菌液等吸入口中。塞入此小段棉花应距管口约0.5cm 左右,棉花自身长度约1~1.5cm。塞棉花时.可用一外围拉直的曲别针、将少许棉花塞入管口内。棉花要塞得松紧适宜,吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。 先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条,然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端,约成45℃角,折叠纸条包住尖端,用左手握住移液管身,有手将移液管压紧.在桌面上向前搓转,以螺旋式包扎起来。上端剩余纸条,折叠打结,准备灭菌。 (二)液体及固体培养基的配制过程 1.液体培养基配制

相关文档
最新文档