常规病理切片制作中常见的问题及处理方法

组织病理学技术

组织病理学技术 组织病理学技术 一. 实验综述 组织病理学切片技术是融解剖学、组织胚胎学及技术、病理学及技术和临床于一体的综合性课程。是一门新兴的学科。在当今不断发展、变革的社会中，在学科相互融合，知识相互渗透，技术不断发展、概念不断更新的时代，在时代要求综合素质人才辈出的今天，组织病理学切片技术的兴起尤为必要和重要。主要任务是：使学生获得和掌握学会观察人体重要器官的解剖学特征、组织学结构、病理学变化并联系相关功能，从而在形态上观察、机能上分析、综合上判断和科学上研究疾病。同时联系病变器官的代谢和机能的改变，探讨疾病的病因、发病机制以及病理变化与临床表现的内在联系和相互的关系。为由基础走向临床打下坚实的基础。 二. 实验目的 1. 掌握病理组织切片的基本制作过程步骤 2. 掌握病变器官的代谢和机能的改变 3. 明白病理组织切片制作过程中的注意事项 4. 了解病理切片的制作程序及仪器的操作和注意事项 二.实验材料 1. 实验材料：手术盘、镊子、手术刀、石蜡、小鼠病理组织、纱布、烧杯、脱水机、塑料包埋盒、水浴锅、切片机、染色机、载玻片、盖玻片、铅笔、标签 2. 实验试剂：福尔马林、酒精（50% 55% 70% 75% 80% 85% 95% 无水浓度）、二甲苯、苏木素、盐酸酒精、伊红染液、树胶 四.实验步骤 （一）取材 从尸体解剖材料或临床手术切除的待检材料上选取供作切片标本的病理组织切块，称为取材。 1. 取材要全面具有代表性，能显示病变的发展过程。为此要选取病变显著的区域和可疑 灶，在统一组织块中最好包括病灶及其周围的健康组织，并应包含该器官的主要结构部分。较大而重要的病变可从病灶中心到外周的不同部位取材，以反映病变各阶段的形态学变化。

病理学切片诊断依据

组织切片 拿到切片后，首先就是肉眼观察，这一步很重要，往往可以作出比较明确的诊断，例如主动脉粥样硬化、淋巴结转移性癌、支气管鳞状上皮化生、胃消化性溃疡、急性蜂窝织炎性阑尾炎，即使不能作出诊断，也可以确定组织来源。镜下观察前，一定要调整好瞳间距、光亮度等，作好一切准备工作，然后从低倍镜开始，一步一步深入。往往可以在10倍镜时完全作出诊断，而40倍镜仅是作为补充诊断。 诊断依据需要写出能够判断为改种病症的相关变化，不要求全部写出，但应当尽量全面。所有癌的诊断中都必须有对于肿瘤细胞异型性的详细描述。 高血压所引起的原发性颗粒性固缩肾与慢性肾小球肾炎所引起的继发性颗粒性固缩肾，无论是在大体标本还是组织学观察都无法区分，故观察到相关变化可以诊断为两者中的任何一者。 NO.04肝脂肪变性 诊断依据： 1.部分肝细胞胞质内出现大小不等的圆形空泡； 2.某些空泡较大，将细胞核挤压变扁且位于细胞边缘，酷似脂肪细胞； 3.细胞核的结构仍属正常。 NO.09肾贫血性梗死 诊断依据： 1.梗死区的肾小球、肾小管轮廓隐约可辨，梗死区中心肾小球的细胞核均已溶解消失； 2.近梗死区边缘尚可见浓染、缩小的细胞核(核固缩)； 3.梗死部分呈楔形； 4.梗死区与非梗死区交界处，有大量白细胞浸润及充血现象。 NO.12肉芽组织 诊断依据： 1.镜下可见大量新生毛细血管，内皮细胞较大，细胞核着色较淡，管腔大小不一，常含有红细胞，血管多向表面呈垂直方向走行； 2.新生毛细血管周围有较多的成纤维细胞，呈星形或梭形，细胞核为椭圆形、淡染； 3.尚可见一些巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润； 4.表面覆盖少量的纤维素，其中混有少量中性粒细胞。 NO.13支气管鳞状上皮化生 诊断依据： 1.部分支气管粘膜被覆的假复层纤毛柱状上皮为复层鳞状上皮所取代，靠近基底膜有柱状多角形细胞，靠近腔面有鳞状上皮； 2.支气管壁有慢性炎性细胞浸润。 NO.14急性肺淤血水肿 诊断依据： 1.肺泡间隔的毛细血管以及肺间质内的小静脉均扩张和充盈血液； 2.部分肺泡腔内有均匀红染的水肿液及少量巨噬细胞；

组织病理切片以及HE染色

组织病理切片以及HE染色 （一）实验原理：苏木素-伊红染色（hematoxylin-eosin staining ，HE染色）能较好地显示组织结构和细胞形态，可 用于观察、描述正常和病变组织的形态学，而且HE切片可较长时间保存，被称为常规染色方法。 （二）实验步骤： 一、制作切片 1、取材、固定：取小鼠肾脏组织适当大小，并且放入盛有固定液的小瓶中保存。 2、组织的脱水、透明、浸蜡与包埋 组织固定后还需经过脱水、透明、浸蜡等过程才能制成蜡块，进行石蜡切片。脱水是指用某些溶媒置换组织内水分的过程。组织脱水后，必须经过一种既能与酒精相混合又能溶解石蜡的溶剂，通过这种溶剂的媒介作用，使石蜡浸入组织块。在此过程中，因组织块中的水分被溶剂所取代，组织块变得透亮，因此称之为透明。组织染色后也要进行透明。最常用的透明剂为二甲苯，处理时间为30min左右。 组织经透明后在溶化的石蜡内浸渍的过程称浸蜡。用其他浸

透剂（如火棉胶、碳蜡和明胶等）渗入组织内部的过程 称为浸透或透入。为使石蜡充分渗入组织块中，常需经过3小时的浸渍，期间需更换3次石蜡。一般用于浸蜡的石蜡熔点为52- 56Co 组织块经过浸蜡或浸透，用包埋剂（石蜡、火棉胶、碳蜡和树脂等）包起的过程称包埋，包埋后便制成含组织的块。这种包埋块可使组织达到一定的硬度和韧度，有利于切成薄片。石蜡包埋是病理日常工作中最常用的包埋方法。用于包埋的石蜡熔点一般为60C左右。但在有些情况下，如某些酶染色时，则需采用低温石蜡包埋，以保存组织内酶的活性。 3、切片、制片 石蜡切片常用的切片机有轮转式切片机和平推式切片 机，以前者为多用。切片厚度一般为3-5卩m切片时先将组 织片平摊于一块玻璃上，迅速滴加30%的酒精水溶液使组织片完全展开，再移入40C恒温热水器中。也可直接将组织切片移入40C的恒温热水器中，待组织片完全展开后将其贴附于载玻片上，经56-60C烤片30-60min后即可进行染色。 二、HE染色 1. 二甲苯脱蜡2X 10 min ;

病理组织切片的制作过程

病理组织切片的制作过程 1．取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下： (1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm 即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。 (5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 (6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。 (7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。 2．固定 (1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。 (2)注射、灌注固定法：某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部，或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。 (3)蒸汽固定法：比较小而厚的标本，可采用锇酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，则应在血片未干燥前采用锇酸或甲醛蒸汽接触固定。 最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。

病理切片诊断依据

肝脂肪变性 诊断依据： 1.部分肝细胞胞质内出现大小不等的圆形空泡； 2.某些空泡较大，将细胞核挤压变扁且位于细胞边缘，酷似脂肪细胞； 3.细胞核的结构仍属正常。 肾贫血性梗死 诊断依据： 1.梗死区的肾小球、肾小管轮廓隐约可辨，梗死区中心肾小球的细胞核均已溶解消失； 2.近梗死区边缘尚可见浓染、缩小的细胞核(核固缩)； 3.梗死部分呈楔形； 4.梗死区与非梗死区交界处，有大量白细胞浸润及充血现象。 肉芽组织 诊断依据： 1.镜下可见大量新生毛细血管，内皮细胞较大，细胞核着色较淡，管腔大小不一，常含有红细胞，血管多向表面呈垂直方向走行； 2.新生毛细血管周围有较多的成纤维细胞，呈星形或梭形，细胞核为椭圆形、淡染； 3.尚可见一些巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润； 4.表面覆盖少量的纤维素，其中混有少量中性粒细胞。 支气管鳞状上皮化生 诊断依据： 1.部分支气管粘膜被覆的假复层纤毛柱状上皮为复层鳞状上皮所取代，靠近基底膜有柱状多角形细胞，靠近腔面有鳞状上皮； 2.支气管壁有慢性炎性细胞浸润。 急性肺淤血水肿 诊断依据： 1.肺泡间隔的毛细血管以及肺间质内的小静脉均扩张和充盈血液； 2.部分肺泡腔内有均匀红染的水肿液及少量巨噬细胞； 3.高倍镜下，肺泡间隔毛细血管横断面上可见数个并列的红细胞，肺泡间隔因而增宽。 慢性肺淤血 诊断依据： 1.肺泡间隔结缔组织增生，肺泡间隔明显增宽； 2.某些肺泡腔内有多少不等的“心衰竭细胞”，其胞质内含粗大的黄褐色含铁血黄素颗粒； 3.有少量炎性细胞浸润。 慢性肝淤血 诊断依据： 1.肝小叶中央有红色淤血区，淤血区内中央静脉及肝窦均显著扩张，充盈血液，在相邻肝小叶淤血区之间有互相连缀的淤血带； 2.肝细胞索离断，部分肝细胞萎缩乃至消失；

组织病理切片的制作过程

组织病理切片的制作过程 1．取材组织取材的法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下： (1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)规取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规化取材。 (5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 (6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。

(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。 2．固定 (1)小块组织固定法：这是最常用的法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。 (2)注射、灌注固定法：某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入部，或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。 (3)蒸汽固定法：比较小而厚的标本，可采用锇酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，则应在血片未干燥前采用锇酸或甲醛蒸汽接触固定。 最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。 3．脱水透明标本经过固定和冲洗后，组织中含有较多的水分，必须将组织块的水分置换出来，这一过程叫做脱水。无论是用蜡切片，还是用火棉胶切片，都必须除去组织中所含水分，因含水组织与蜡、火棉胶等包埋材料不相容，常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。 脱水的步骤是：80%、90%、95%、100%各种浓度乙醇2小时，此过程可用脱水机自控完成。 丙酮也是一种脱水能力很强的脱水剂，但因其脱水能力很强，对组织有剧烈收缩作用，在制作科研、教学切片时一般不用该试剂。因乙醇、丙酮等不溶于蜡，还要经过一个能溶于蜡的溶剂替代过程称为透明。常用的透明剂有二甲苯、三氯甲烷、水酸甲酯等。 4．浸蜡、包埋

病理组织切片制作

实验四病理组织切片制作 一、实验目的 组织切片技术是病理学中不可缺少的一个组成部分。通过实验，能够使学生了解和掌握病理组织切片的基本方法之一，即石蜡包埋的组织切片法。 二、实验原理 根据病变及检查的要求，合理采集病料，经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋后进行切片，在进行染色得到结果。固定是用化学药品把组织原来的结构保存下来，以便观察。脱水是除去组织中的水分，以利于透明和浸蜡。组织的透明是便于透蜡包埋。包埋的是使石蜡透入组织内部，把软组织变为适当硬度的包埋块，以便切成薄片。最后使用切片机，将包埋块中组织切成薄片。 三、主要仪器及试材 已固定好病料，石蜡，手术刀，手术剪，镊子，脱水框，染色缸，梯度脱水酒精和透明剂一套，烘箱，切片机，毛笔，玻片，蛋白甘油，染色架，酒精灯，三角架，大烧杯，温度计，火柴，切片刀，记号笔或铅笔。 四、实验方法与步骤。 （一）固定 采取的病理材料必须立即放入10％福尔马林固定液中。 （二）脱水 组织经固定后，尚含有多量水分，而水与透明剂苯、石蜡根本不相融合。必须先把组织中的水分除去。但脱水剂必须是与水在任何比率下均能混合的液体，脱水剂常兼有硬化组织的作用。最常用的脱水剂为酒精、丙酮等。 1．酒精沸点78．4℃，为最常用的脱水剂。脱水能力强，并能使组织硬化，能较好地与二甲苯透明剂相混合。最终结果表明，只要脱水环节处理好，都会得到好的切片。脱水的程序为70％一80％一95％一100％。各级酒精2—4小时，视材料的大小、厚薄而定。100％酒精有硬化组织的作用，时间不宜太长，一般不超过3小时。脑组织、脂肪组织或疏松结缔组织，脱水时间要适当延长。 2．丙酮沸点为56℃。脱水作用比乙醇强，但对组织块的收缩较大，主要用于快速脱水或固定兼脱水。脱水时间l一3小时左右。 （三）透明 透明对组织有脱酒精及透明两种作用。当组织中全部为透明剂占有时， 光线可以透过，组织可呈现不同程度的透明状态，此种现象称为透明，具有这种作用的试剂称为透明剂。常用的透明剂有： 1．二甲苯是最常用的良好透明剂，不影响各种染色。二甲苯易溶于酒精，能溶解石蜡，也是封固剂，不吸收水，透明能力强，易使组织收缩、变脆，故组织块在二甲苯中不宜久留，特别对小动物组织材料必须严格控制好(各种器官的透明差异很大)，通常为半小时到1小时左右。 当二甲苯透明时必须持组织放在专用二甲苯皿器中，这样可减少透明时间，有利于组织透明彻底，在换组织块透明时候，所用的镊子等器具必须干燥，不得将水滴混入二甲苯中，因水滴易被组织吸收而影响透明程度，潮湿天气更应引起注意。2．冬青油（水杨酸甲酯）为无色油样液体，易溶于醇、醚及冰醋酸，难溶于水。透明速度较慢，数小时或数天。一般经无水乙醇脱水后再入冬青油。 （四）浸蜡（透蜡） 组织经脱水透明后要用石蜡等支持剂透入内部，并除去组织中的透明剂，把软组织变为适当硬度的蜡块，以便切成切片。

病理学实验考试切片诊断要点

1.肝淤血： （1）肝小叶中央静脉及附近肝窦高度扩张，充满红细胞。 （2）扩张的肝血窦间的肝细胞索萎缩甚至消失。 （3）有些相邻小叶的淤血部位互相沟通 （4）（肝小叶周边部细胞有脂肪变性） 2.脾梗死： （1）梗死区色淡红，细胞核均消失，但该组织的轮廓还存在 （2）梗死区边缘充血出血带不明显 3.新鲜血栓： （1）血栓与血管壁粘连，（血管壁可见玻璃样变） （2）有淡红色的血小板小梁，小梁之间是大量的红细胞，小梁边缘有中性粒细胞4.肝脂肪变 （1）细胞体积较大 （2）胞浆中含有大小不等的空泡 （3）细胞核被挤至一侧 5.肉芽组织 （1）结构疏松 （2）有新生毛细血管生成，方向与创面垂直，内皮细胞肿胀 （3）有许多呈梭形的成纤维细胞 （4）其中有较多的炎细胞浸润 6.肺脓肿 （1）病变处肺组织结构坏死 （2）大量中性粒细胞浸润，聚集成团 （3）边缘有少量肉芽组织生成 7.肺结核 8.纤维肉瘤 （1）癌细胞丰富，弥散排列，与间质无明显界限 （2）癌细胞似纤维母细胞，呈梭形，胞浆少，胞核大而核膜厚，可见核分裂象9.鳞状上皮癌 （1）可见癌巢和角化珠，细胞异型性明显，可见核分裂象 （2）有数量不等的细胞间桥 （3）间质炎细胞浸润 10.胃癌 （1）癌细胞形成大小不等、排列不规则的腺体或腺样结构 （2）细胞常排列成多层，核分裂象多见，与正常胃腺相比有明显异型性 （3）少数伴肠上皮化生，可见杯状细胞 （4）癌组织浸润至肌层 11.肝癌

（1）癌细胞呈条索状排列，细胞异型性大，核分裂象明显，有时可见癌巨细胞 （2）细胞间有丰富的血窦 （3）小部分癌细胞坏死 （4）间质血管内有癌栓 12.主动脉粥样硬化 （1）内膜增厚、隆起，呈玻璃样变 （2）可见纤维帽盖和粥样坏死灶，其中有胆固醇结晶溶解后留下的菱形空隙 （3）坏死灶周围有泡沫细胞 13.大叶性肺炎 （1）病变呈弥漫性 （2）肺泡壁毛细血管充血 （3）肺泡腔有大量纤维素和少量中性白细胞 （4）可见纤维素穿过肺泡间孔 14.小叶性肺炎 （1）病灶呈多发性，病变以细支气管为中心 （2）部分支气管粘膜脱落 （3）细支气管所属肺泡腔内有大量中性白细胞和浆液，周围肺泡腔有炎性渗出物 （4）间质及肺泡间隔血管扩张充血，病变间肺泡代偿性扩大 15.肺气肿 （1）肺间隔变窄，部分肺泡间隔断裂 （2）肺泡扩大成较大囊腔 （3）（少数间质血管内膜增厚，间隔及肺泡腔有尘细胞） 16.慢性胃溃疡 胃壁有缺损，凹陷处有四层结构 （1）渗出层：中性白细胞 （2）坏死层 （3）肉芽层：新生毛细血管、成纤维细胞、炎细胞 （4）瘢痕层：胶原纤维组织 17.急性阑尾炎 （1）出现大量中性粒细胞弥漫浸润于阑尾肌层，胞核呈分叶状 （2）可见双叶嗜酸性粒细胞和单核细胞 （3）阑尾壁肌层高度水肿 18.细结节性肝硬化 （1）可见大小不等的假小叶：多数肝细胞团取代正常结构，周围有狭窄的结缔组织包绕（2）假小叶内中央静脉缺如或偏位 （3）肝细胞排列紊乱，不呈放射状

病理切片的制作过程

1.7.1 修整组织 将手术切取的乳腺肿瘤切成一个平整面，各组织块不宜太大，以便固定剂穿透和组织脱水等操作，通常以10 mm×10 mm×3mm或5mm×5mm×3mm为宜。找到不同的部位切取2块，以备后用。 1.7.2 组织洗涤 组织经修整后，组织中的福尔马林等必须冲洗干净，尤其是含有重金属的物质存在。因为残留在组织中的福尔马林，有的不利于染色，有的产生沉淀或结晶影响观察，所以组织修整后应冲洗12h左右。 1.7.3 组织脱水 组织经洗涤后，组织中含有大量水分，由于水与石蜡不能互溶，所以必须将组织中的水分除去。 80%乙醇溶液：2h 95%乙醇溶液:1h 95%乙醇溶液:1h 100%乙醇溶液:30min 100%乙醇溶液:30min 1.7.4 组织透明 由于乙醇与石蜡不相溶，而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡，所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。当组织中全部被二甲苯占有时，光线可以透过，组织呈现出不同程度的透明状态。 二甲苯Ⅰ：30min 二甲苯Ⅱ：10min 1.7.5 组织浸蜡 浸蜡的目的是除去组织中的透明剂（如二甲苯等），使石蜡渗透到组织内部达到饱和程度以便组织包埋。浸蜡时间根据组织的透蜡时间较长，需3h左右。浸蜡应在恒温箱内进行，并保持箱内温度在55℃左右，注意温度不要过高，以免组织发脆。 石蜡Ⅰ：1h

石蜡Ⅱ：1h。 石蜡Ⅲ：1h 1.7.6 组织包埋 将经过透蜡的组织连同熔化的石蜡，一起倒入容器内，然后立即投入冷水中，使其立刻凝固成蜡块的过程。包埋时，将纸盒放在温箱旁边，用镊子夹取组织平放于纸盒底部，，再用温镊子轻轻拨动组织，从温箱中取出盛放纯石蜡的蜡杯，沿壁倒入包埋用的纸盒中，速度要慢。待石蜡凝固（约30min）后放入冰箱保鲜层内以备后用。包埋时应根据组织材料、切片厚度、气候条件等因素，选择不同熔点的石蜡，新的石蜡一般要熬顿几次，以免石蜡固定后有气泡，影响切片。用于包埋的石蜡的熔点在50~60℃之间。 1.7.7 组织切片 （1）从冰箱里拿出蜡块，进行修快 （2）将已固定和修好的石蜡块台木装在切片机的夹物台上。 （3）将切片刀固定在刀夹上，刀口向上。 （4）摇动推动螺旋，使石蜡块与刀口贴近，但不可超过刀口。 （5）调整石蜡块与刀口之间的角度与位置，刀片与石蜡切片约成15度左右。 （6）调整厚度调节器到所需的切片厚度，先调约为25um，待切平后改为5um。 （7）一切调整好后方可以开始切片。此时右手摇动转轮，让蜡块切成蜡带，左手持毛笔将蜡带提起，摇转速度不可太急，通常以40-60r/min。 （8）切成的蜡带到10-20cm长时，右手用另一支毛笔轻轻地将蜡带挑起，以免卷曲，并牵引成带，平放在蜡带盒上，靠刀面的一面较光滑，朝下，较皱的一面朝上。 （9）感觉效果较好的蜡片一小段，用单面刀片切取，再放入约43℃的水浴锅中展片，观察切片是否良好。 （10）切片工作结束后，应将切片刀取下用氯仿擦去刀上沾着的石蜡，把切片机擦拭干净妥为保存。 1.7.8 贴片

病理组织切片的制作

病理组织切片的制作 卢文丽吴中华方肇勤 （2007/01/04） 一、器材（按一小组，约4-6人） 眼科镊：直无勾10cm 、弯无勾10cm各5把； 组织镊；12.5cm 2把； 眼科剪：直尖10cm 4把； 解剖剪：cr/14，4把； 普通双面刀片：10片/盒×1盒； 染色架：5个； 染色缸：1000ml，14-15个； 切片盒：50片/盒×3盒或100片/盒×2盒； 37度、60度恒温箱：各1个； 磨砂载玻片：50片/盒×3盒； 盖玻片：100片/盒×2盒； 广口瓶：30ml或60ml×20个； 滴管及配套吸头：4个； 玻璃漏斗：φ90 3个；玻璃搅棒：2支 普通粗孔大张滤纸：20张； φ90mm玻璃培养皿：4个； 中号普通毛笔：2支； 烧杯：500ml 、1000ml 各1个； 量筒：100ml、500 ml、1000 ml各1个； 组织切片机及配套刀片：4台； 摊片用水浴锅：2台； 生物切片石蜡：5盒，熔点：56-58℃； 电子天平：1台； 酒精灯：150ml，4台； 脱水篮：1-2个； 打火机、标签纸、铅笔各一，卷筒纸、乳胶手套、口罩、医用纱布足量。 二．试剂 苦味酸（2.4.6-三硝基苯酚）：30g/瓶×1瓶； 37%~40%福尔马林液：500ml/瓶×1瓶； 冰醋酸：AR，500ml/瓶×1瓶； 无水乙醇：AR，500ml/瓶×10瓶； 二甲苯：AR，500ml/瓶×10瓶； hematoxylin苏木色素（苏木精）：10g/瓶×1瓶； 酸性品红（曙红丫水溶）：25g/瓶×1瓶； 碘酸钠：AR，500g/瓶×1瓶；柠檬酸：AR，500g/瓶×1瓶; 水合氯醛：AR，250g/瓶×1瓶;铵矾（ALNH4(SO4)2·12H2O）或钾矾（ALK(SO4)2·12H2O）：500g/瓶×1瓶 蛋白甘油（甘油/鸡蛋清=1/1）：50ml 中性树胶：100g/瓶×2瓶。若中性树胶过于粘稠，可与二甲苯按7/3的比例稀释。 蒸馏水：5000ml

病理科质控标准

病理科质控标准 常规 1、标本接收必须登记、签名、十三查十三对。 2、取材医生在取材时应与记录员对每一个标本进行查对，取材结束时还应该核对取材数 量。 3、包埋时取材医生与技术员应同时在场，确保包埋准确无误。 4、切片染色时每一批切片应进行镜下评价，并定期结合染色剂及染色时间进行分析、总结， 最终找出原因。 5、制片完成后应接受切片的医生应与制片技术员共同根据工作清单进行切片的核对并签 名。 6、诊断医生在诊断时应查对患者申请单与切片信息是否一致，如果遇到镜下诊断与临床 诊断不符的时候应再次核对申请单与切片信息是否一致，如果有必要应及时与临床送检医生联系。 7、诊断医生镜下判断需要免疫组化进一步诊断的病例，并告知技术员，诊断医生找出相应 的蜡块送达免疫组化室。 8、认真执行三级报告制度：初诊医生可对典型、常见病例做出诊断；疑难或初诊医生有疑 问的应由上级医生诊断；如果上级医生也无法做出的诊断应交由全科医生会诊（专家参与）。 9、报告发送时应做好登记及签收工作。 术中冰冻 1、手术室送达的标本及申请单应十三查、十三对。 2、收到标本后要及时做好登记及接收签名。 3、取材医生在取材时应与记录员对标本进行查对，查看送检标本与申请单注明的是否一 致。 4、技术员应该在15分钟内完成制片，送到诊断室。 5、诊断医生应查对申请单与切片是否一致。 6、15分钟内做出诊断并打印报告。 7、报告送达手术室时必须要有接收人签字。 制片质量 1、每天诊断医生应粗略的对制片质量进行简单的评价并记录。 2、每2个月科内医疗质量与安全管理委员会对两个月的切片进行抽查按照制片评判标准进 行评判（百分制）。 3、技术组应有人参加制片质量评价。 术中冰冻中遇到与临床不符时 1、检查申请单与切片是否一致，如果一致应看切片镜下形态与临床送检标本是否一致。 2、如果一致可请别的有资质的医生再次复查一遍。 3、如果还是一致，可发出病理报告并及时与临床沟通。

组织病理切片制作流程(完整版)

组织病理切片的制作流程 1．取材 组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下： (1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。 (5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 (6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。 (7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。 2．固定 (1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。

病理实验诊断依据

[编号：IJ③]肝细胞坏死(necrosis of iver cells) ①标本取自四氯化碳中毒的小白鼠的肝脏，用于观察坏死的形态特片(如核浓缩、核碎裂、核溶解)及胞浆的变化等。 ②低倍镜下见肝脏基本结构保存，但在肝小叶内、中央静脉周围见到一块块大小不等的染色深红的区域，这就是坏死灶。 ③转换高倍镜仔细观察这些病灶，并与周边正常的肝细胞进行比较，可见坏死灶内肝细胞索结构消失，成为一些互相分离的、深红的、形态不规则的小碎块，这些就是坏死的肝细胞。 ④在高倍镜下仔细观察这些坏死的肝细胞，可见这些肝细胞多数染成深红色(嗜酸性)。有的肝细胞核体积缩小、深染、细微结构不清(核浓缩)；有的细胞核破碎，其碎片散布于红染的胞浆中、(核碎裂)：有的细胞核完全消失或仅见一隐约模糊的细胞核轮廓(核溶解)，有的细胞胞浆已崩解呈无定形的淡红色颗粒。 ［编号：IJ④］脾细动脉球璃样变(hyaline degeneration of spleenic arterioles) ①脾脏切片标本，取自临床送检病例，主要用于观察变性的一种类型——玻璃样变。 ②低倍镜下可见脾被膜、脾小梁、脾小体及脾窦等结构，．重点观察脾小体中央动脉。 ③高倍镜下见在中央动脉管壁呈明显的不对称性增厚，增厚的血管壁呈均质状、红染， 管腔狭窄，原来环形排列的平滑肌细胞木部或完全消失。 此种玻璃样变血管壁玻璃样变，属玻璃样变的一种类 [编号：IJ⑤]肝细胞水变性和气球样变(hydropic and ballooning degeneration of liverceils) ①标本取自四氯化碳中毒的小白鼠的肝脏。用以观察细胞水变性。 ②低倍镜下见肝脏的基本结构保存。 ③高倍镜下见部分肝细胞体积明显增大，胞浆淡染，其内可见—些界线不甚清楚的空泡，细胞核仍位于细胞中央，此为水变性肝细胞，有些肝细胞肿胀甚为显著，其体积相当于正常肝细胞的3～4倍，胞浆透明，状如气球，此为气球样变的肝细胞。 ④水肿之肝细胞散在或成堆出现，尤以中央静脉周围较为明显。 [编号：RP①]肉芽组织(granulation tissue) ①兔的皮肤及肌肉标本，取自实验性创伤修复的组织，用于观察肉芽组织的组织结构特点。 ②低倍镜下观察全部切片，可见大量的骨骼肌组织，其上方为创面，此处即可见到肉芽组织。 ③高倍镜下可见此处组织中有较多的毛细血管，管壁多为一层内皮细胞，管腔较大；少数毛细血管呈实性条索状，毛细血管有横切面和纵切面，纵切面毛细血管的长轴与肉芽组织表面垂直。血管间有较多的纤维母细胞，此种细胞呈胖梭形，核圆形或卵圆形，染色质较疏松，核膜清楚，有的可见红色的小核仁，组织中还可见到不等量的炎性细胞(嗜中性白细胞、淋巴细胞等)，毛细血管、纤维母细胞和炎性细胞，这三种成分构成肉芽组织。 ④肉芽组织表面有一些炎性细胞、纤维蛋白和少许坏死物。 ⑤肉芽组织深部可见致密的纤维组织(瘢痕组织)。 此切片由于肌肉组织较多，肉芽组织仅位于一处表面，因此需仔细寻找、观察。 [编号：HD①]慢性肺淤血(chronic congestion in the lung) ①肺组织切片，取自尸检病例，用于观察淤血的基本病理变化和肺淤血的形态特点。本切片有两种，分别为慢性肺淤血早期和晚期病变，两种切片的特点不完全一样，请注意观察。 ②若为慢性肺淤血的早期病变，低倍镜下见肺泡壁毛细血管扩张充血，使肺泡壁明显增厚，肺泡腔内充满了粉红色均匀物质，这是含蛋白质的水肿液。高倍镜下可见肺泡腔内有数量不等的红细胞，这是由于高度淤血造成的漏出性出血。另处，有的肺泡腔内可见一些脱落的肺泡上皮细胞。 ③若是慢性肺淤血的晚期病变，镜下可见肺泡壁毛细血管扩张，肺泡壁及肺间质有一定程度的纤维组织增生，但肺泡腔内的水肿不明显，在肺泡腔内可见到一些体积较大、胞浆内充满棕黄色颗粒(含铁血黄素)的巨噬细胞，这种吞噬有含铁血黄素的巨噬细胞称为心衰细胞。 典型的慢性肺淤血，镜下特点包括：①肺泡壁毛细血管扩张充血：②肺水种；③肺泡腔中有心衰细胞；④长期有慢性肺淤血，肺间质可出现纤维结缔组织增生，但是，由于取得的材料所处的病变阶段不一样，因此，

病理组织切片制作过程详解

病理组织切片制作过程详解 -森贝伽生物实验代做中心 公司中心实验室建设有病理学，分子生物学，细胞生物学，免疫学，蛋白质组学，实验动物模型构建，生物芯片，生物信息学等实验技术服务平台。此外，还提供技术咨询培训，课题合作设计与申报，论文翻译润色等实验技术服务。 1．取材 取材的好坏，直接影响切片的质量。取材时，首先要有一把锋利的取材刀，在切割组织时要避免取材刀来回拖拉，切取的组织块厚薄要均匀，一般厚度以0.2 ～0.3cm 为适，较容易发脆的组织如甲状腺、肝脏、血块、淋巴结、大块癌组织等可适当厚一点，而脂肪组织、肺组织、纤维性肿瘤、平滑肌瘤等致密的或试剂不易渗入的组织应取薄一些；淋巴结应修掉两侧球冠，并尽量剔除周围的脂肪组织。在取材中还应十分注意组织内是否有缝线或骨组织，如碰到不可避免的钙化组织，一定要非常小心。在切取纤维组织、肌肉组织、胃肠道时，应注意纤维及肌肉的走向，取材时尽可能按与纤维平行走向切取为佳。 (1）材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2）组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm ×2.0cm ×0.2cm ，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm 即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm ，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 （3）勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 （4）规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。 （5）选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 南京森贝伽生物科技有限公司 实验技术服务，代做实验

病理切片诊断依据

肝脂肪变性 诊断依据： 1、部分肝细胞胞质内出现大小不等得圆形空泡； 2、某些空泡较大，将细胞核挤压变扁且位于细胞边缘，酷似脂肪细胞； 3、细胞核得结构仍属正常。 肾贫血性梗死 诊断依据： 1、梗死区得肾小球、肾小管轮廓隐约可辨，梗死区中心肾小球得细胞核均已溶解消失； 2、近梗死区边缘尚可见浓染、缩小得细胞核(核固缩)； 3、梗死部分呈楔形； 4、梗死区与非梗死区交界处，有大量白细胞浸润及充血现象。 肉芽组织 诊断依据： 1、镜下可见大量新生毛细血管，内皮细胞较大，细胞核着色较淡，管腔大小不一，常含有红细胞，血管多向表面呈垂直方向走行； 2、新生毛细血管周围有较多得成纤维细胞，呈星形或梭形，细胞核为椭圆形、淡染； 3、尚可见一些巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞与浆细胞浸润； 4、表面覆盖少量得纤维素，其中混有少量中性粒细胞。 支气管鳞状上皮化生 诊断依据： 1、部分支气管粘膜被覆得假复层纤毛柱状上皮为复层鳞状上皮所取代，靠近基底膜有柱状多角形细胞，靠近腔面有鳞状上皮； 2、支气管壁有慢性炎性细胞浸润。 急性肺淤血水肿 诊断依据： 1、肺泡间隔得毛细血管以及肺间质内得小静脉均扩张与充盈血液； 2、部分肺泡腔内有均匀红染得水肿液及少量巨噬细胞； 3、高倍镜下，肺泡间隔毛细血管横断面上可见数个并列得红细胞，肺泡间隔因而增宽。 慢性肺淤血 诊断依据： 1、肺泡间隔结缔组织增生，肺泡间隔明显增宽； 2、某些肺泡腔内有多少不等得“心衰竭细胞”，其胞质内含粗大得黄褐色含铁血黄素颗粒； 3、有少量炎性细胞浸润。 慢性肝淤血 诊断依据： 1、肝小叶中央有红色淤血区，淤血区内中央静脉及肝窦均显著扩张，充盈血液，在相邻肝小叶淤血区之间有互相连缀得淤血带； 2、肝细胞索离断，部分肝细胞萎缩乃至消失； 3、淤血区及其附近得部分肝细胞胞质内出现空泡，为脂肪变性。 急性蜂窝织炎性阑尾炎 诊断依据： 1、阑尾组织管壁增厚，管腔变窄； 2、阑尾粘膜部分变性坏死并脱落形成溃疡，粘膜下层充血水肿； 3、肌层平滑肌纤维仍然存在，浆膜下充血水肿，系膜充血；

病理切片诊断性描述重点

1，大叶性肺炎：肺泡比毛细血管扩张充血；肺泡腔内充满大量中性粒细胞，红细胞，巨噬细胞；肺泡内纤维素渗出及穿过肺泡间孔的现象明显； 2，小叶性肺炎：病变以细支气管为中心，为累计肺小叶的化脓性炎症；细支气管壁有炎性病变，管腔内充满脓性渗出物；有的病灶见毛细血管扩张充血，肺泡腔有浆液，纤维素渗出或伴有中性粒细胞浸润； 3，急性肺粟粒性结核：肺组织内有许多以增生为改变的结核结节，肺组织结构被破坏；有的结节可见红染无结构颗粒的干酪样坏死物，周围绕以许多类上皮细胞喝一些朗汉斯巨细胞，外围有许多淋巴细胞和成纤维细胞；有的结节无坏死组织； 4，慢性肺淤血：肺泡壁毛细血管扩张充血，致肺泡间隔变宽；肺泡腔内可见粉染水肿液，红细胞，心力衰竭细胞；心力衰竭细胞体积大褒奖中有多数棕黄色的含铁血黄素颗粒5，主动脉粥样硬化：动脉内膜局限增厚形成粥样斑块，斑块深部为红染无定形坏死物，内含有胆酷醇结晶，斑块浅表部由纤维结缔组织覆盖形成纤维帽；斑块底部及边缘为含泡沫细胞的肉芽组织；中膜平滑肌不同程度萎缩变薄 6，风湿性心脏病：aschoff小体散在分布在心肌间质；低倍镜下为境界清楚的梭形细胞团，内有aschoff细胞，体积大，呈圆形或类圆形，胞浆丰富，核大，膜清，核呈空泡状，核横切面似枭眼状，纵切面为毛虫状，小体周围有淋巴细胞浸润； 7，霍奇金淋巴瘤：淋巴结构被瘤组织取代；瘤组织以多种反应性炎细胞浸润为背景；单核或诊断性R-S细胞均多见； 8，胃溃疡：由内向外有四层结构，表浅渗出层有中性粒细胞和纤维素渗出，其下红染无结构的坏死组织层，再下为新生肉芽组织层，最下层由肉芽组织和瘢痕组织的过渡层；溃疡底小动脉可见增殖性动脉内膜炎，神经节细胞结节状增生 9，慢性肾小球肾炎：大量肾小球纤维化玻变；周围肾小管萎缩消失，残存肾小球代偿性肥大；间质增生；间质有淋巴细胞浆细胞浸润；肾细小动脉硬化，管壁增厚，管腔狭窄10．弥漫性毒性甲状腺肿：甲状腺有许多新生小滤泡，滤泡腔内可见吸收空泡，上皮细胞呈立方状或柱状，少数滤泡上皮呈乳头状增生突入腔内；间质内血管丰富，淋巴细胞弥漫增生，并可见淋巴滤泡形成； 11，肾小管上皮细胞水肿：区别髓质和皮质，着重看皮质的近曲小管，上皮细胞体积增大或界限不清，胞浆内有许多匀细粉然颗粒，近曲小管腔缘参差不齐呈星芒状，管腔内有淡粉色絮状蛋白物 12，葡萄胎：绒毛明显增大，间质高度水肿及粘液性变；间质内血管消失或异常稀少；细胞滋养层和合体滋养层细胞混合存在，细胞滋养层细胞境界清楚，胞浆淡染，核呈空泡状；合体滋养层细胞胞浆红，核多染色深 13，乳头状瘤：瘤组织由皮肤表面而呈外生性生长，形成手指样结构，表面为肿瘤实质，即层次较多，排列规则的鳞状上皮；深部为纤维结缔组织和血管组成的纤维脉管束为轴心14，高分化鳞癌：癌细胞突破基底膜向下呈浸润性生长，形成大小不一的细胞团，称为癌巢；中心见层状红染的角化珠，周边为基底样癌细胞，棘细胞样癌细胞位于两者之间，细胞之间可见细胞间桥，实质间质分界清楚，间质内有较多以淋巴细胞为主的炎细胞浸润 15，低分化鳞癌：癌细胞大小不等，有巨核瘤细胞，异型性明显，有粗大的核仁及核分裂象，不见细胞间桥和角化珠的形成 16，结肠腺癌：低倍镜下，可见大量密集腺管样结构，浸润于肠壁内，腺管大小不等，形状不一，有的腺管不完整，有的可见背靠背现象；排列多层极性紊乱或消失；癌细胞体积增大，核分裂像易见 17，肺门淋巴结转移癌：淋巴结原有结构破坏代之以转移性的腺癌组织，癌细胞排列呈许多不规则的腺管，有的呈实性细胞条索，癌细胞异型性明显，可见病理性核分裂象

大鼠肝脏组织病理切片的制作和HE染色

大鼠肝脏组织病理切片的制作和HE染色 步骤如下： （一）固定与修块 取组织块放入Bouin氏液中，组织块的直径应小于7mm。6小时左右后用双面 刀片将组织块修剪成3-5mm3大小。 （二）脱水与透明 1. 75%乙醇50分钟 2. 85%乙醇50分钟 3. 95%乙醇(I) 30分钟 4. 95%乙醇(II) 30分钟 5. 100%乙醇(I) 30分钟 6. 100%乙醇(II) 30分钟 7 1/2二甲苯（乙醇与二甲苯等体积）20分钟 &二甲苯（I）20分钟 9 .二甲苯（II）10分钟（可依据透明效果而定） 若脱水不好，二甲苯溶液颜色会变混浊。在每一步骤之后，要充分滤干组织块，一般用筒纸吸干组织块上的液体，以免影响其他液体的浓度，但也要防止组织块干燥。全过程约需要5h。（三）浸蜡、包埋与修蜡块 1.浸蜡：将60C恒温箱打开，使石蜡充分溶解，待脱水与透明结束后，将组织块转入石蜡里，放置于60 C恒温箱120分钟。 2 .包埋：将60 C的石蜡倒入纸盒内，然后用小镊子将各组织块按一定的顺序排列好，使切面朝下。不同组别的同一组织包埋于一个蜡块中，以保证切片和染色条件相同。为防止倒入纸盒内的石蜡底部立刻凝固，可将纸盒置于一玻璃板 上（或大培养皿内），然后将玻璃板置于80-90 C左右热水上，包埋时蜡盒底部要放平，做蜡块的蜡要反复冻融较好。 3 .修蜡块：待纸盒内蜡凝固后，用刀片将其修成梯形，组织块与蜡块边缘之间的距离不得小于2mm。 （四）切片 在载玻片上擦少量甘油蛋白。可滴半滴甘油蛋白于载玻片上，用手指充分抹 匀，呈半干状为佳。切片厚约4-8卩m，将切片在55C左右水浴中展开，展开程度 以带黄颜色的组织完全摊平为准。用涂有甘油蛋白的载玻片从水浴中捞取切片，放入37C烘箱中过夜。每个组织块捞片2张。过夜后，将载玻片置于玻片架上， 进行下面的实验。 （五）脱蜡、染色与脱水 倾斜玻片架，将玻片架和载玻片下缘的试剂用筒纸吸干，减轻对其他试剂浓 度的影响。全过程约需要60分钟。 1.脱蜡 （1）二甲苯（I）15分钟 （2）二甲苯（II）15分钟 （3）100%乙醇2分钟 （4）95%乙醇（I）1分钟 （5）95%乙醇（II）1分钟 （6）蒸馏水浸洗1分钟 2 .染色

病理切片考试 诊断依据

病理切片考试诊断依据 扁桃体白喉标本来源于扁桃体。镜下见部分鳞状上皮消失，由厚层红染膜状物代替。假膜中可见大量红染的纤维素，中性粒细胞及坏死上皮，假膜底部淋巴组织中毛细血管高度扩张、充血。病毒性肝炎标本来源于肝脏。镜下肝细胞普遍肿胀，肝窦受挤压而消失。肝细胞体积增大呈多边形，胞浆疏松呈网状。个边肝细胞出现气球样变，有的在肝细胞胞浆内和肝窦内可见嗜酸性小体。无明显炎症反应，也无点状坏死。肠伤寒标本取自回肠。中央有一淋巴小结，镜下淋巴组织中有大量增生的巨噬细胞，部分细胞浆内吞噬有淋巴细胞，红细胞、组织碎片及伤寒碎片。这种胞浆内含有吞噬物得细胞称为伤寒细胞。这些细胞聚集在一起形成境界不清楚的结节状病灶，称为伤寒肉芽肿或伤寒小结。肺脓肿标本来源于肺。肉眼可见肺组织内有空腔，腔内有淡红色物质。镜下见腔内大量中性粒细胞和红染无结构物质，空腔边缘可见毛细血管扩张充血。肺淤血标本来源于肺。低倍镜可见肺泡壁增宽，毛细血管扩张，腔内充满红细胞，少数肺泡腔正常，多数含有红细胞及淡红色均质水肿液，有的肺泡腔内可见棕黄色的巨噬细胞，也称心衰细胞。风湿性心肌炎标本来源于左心室壁。镜下可见心膜、心肌、心内膜。在心肌间质和心内膜下可见结节状病灶，为风湿小体。病灶主要由风湿细胞、淋巴细胞和单核细胞构成。其间可见红染无结构碎片状或颗粒状的纤维素样坏死。风湿细胞体积大，圆形或卵圆形。胞浆丰富略嗜碱性。多为单核、核大，染色质集中于和中心并呈细丝状向外延伸，因此核横切面呈枭眼状，纵切面呈蜈蚣状。肝细胞坏死标本来源于肝脏。低倍镜可见肝组织内有散在的大小不等的病灶，正常结构丧失呈一片粉红色，内含大小不等形态不一的细胞核及核碎片。高倍镜可见核固缩、核碎裂、核溶解，坏死细胞嗜酸性增强。肝淤血标本来源于肝脏。可见中央静脉扩张充血，其周围肝窦明显扩张，其内充满红细胞，该处肝细胞有的体积变小