氯氰菊酯的酶促降解
蛋白质的酶促降解和氨基酸代谢
第九章蛋白质的酶促降解和氨基酸代谢 一、填空题： 1、氨的同化途径有和。 2、尿素分子中的两个N原子，一个来自，另一个来自。 3、尿素循环中产生的两种氨基酸和不参与生物体内蛋白质的合成。 4、谷氨酸族氨基酸的共同碳架来源是途径的中间产物。 5、芳香族氨基酸生物合成途径叫途径，其碳架来源于糖酵解的中间产 物和磷酸戊糖途径的中间产物。 6、在尿素循环中，水解产生尿素和鸟氨酸，故此循环又称鸟氨酸循环。 7、氨基酸共有的代谢途径有和。 8、人类对氨基代谢的终产物是，鸟类对氨基代谢的终产物是。 9、由尿素合成过程中产生的两种氨基酸和不参与人体内蛋白质合成。 二、选择题(只有一个最佳答案)： 1、成人体内氨的最主要代谢去路为（） A、合成非必需氨基酸 B、合成必需氨基酸 C、合成NH4+随尿排出 D、合成尿素 2、鸟氨酸循环中，合成尿素的第二分子氨来源于（） A、游离氨 B、谷氨酰胺 C、天冬酰胺 D、天冬氨酸 3、下列哪一种氨基酸经过转氨作用可生成草酰乙酸？（） A、谷氨酸 B、丙氨酸 C、苏氨酸 D、天冬氨酸 4、能直接转变为α-酮戊二酸的氨基酸为（） A、天冬氨酸 B、丙氨酸 C、谷氨酸 D、谷氨酰胺 5、在尿素循环中，下列哪一项反应需要ATP（） A、精氨酸→鸟氨酸+ 尿素 B、鸟氨酸+ 氨甲酰磷酸→瓜氨酸 C、瓜氨酸+ 天冬氨酸→精氨酸+ 延胡索酸 D、延胡索酸→苹果酸 6、下列氨基酸经转氨作用可生成丙酮酸的（） A、Glu B、Ala C、Lys D、Ser 7、关于谷氨酸脱氢酶的表述哪项是正确的（） A、它是植物体内合成氨基酸的主要途径 B、它所需要的供氢体是NADH C、它可以催化由谷氨酸形成α-酮戊二酸反应 D、它和谷氨酰胺合成酶一样，需要ATP供能 8、经转氨作用可生成草酰乙酸的氨基酸是（） A、Ala B、Asp C、Glu D、Thr 9、除哪一种氨基酸外，其余氨基酸具有共同的碳架来源（） A、Asp B、Met C、Lys D、Arg 10、所有的转氨酶均含有共同的辅因子（）
蛋白质的降解知识讲解
蛋白质的降解
第六章蛋白质的降解及其生物学意义 ?第一节蛋白质降解的概述 ?第二节参与蛋白质降解的酶类 ?第三节蛋白酶体-泛素系统及其功能 ?第四节蛋白质降解的生物学意义 蛋白质降解是生命的重要过程 ?维持细胞的稳态。 ?清除因突变、热或氧化胁迫造成的错误折叠的蛋白质，防止形成细胞内凝集。 ?及时终止不同生命时期调节蛋白的生物活性。 ?蛋白质的过度降解也是有害的，蛋白质的降解必须受到空间和时间上 蛋白质降解的体系 ?蛋白质消化分解为被机体吸收的营养物质。 ?研究蛋白质结构时，用蛋白酶降解肽链。 ?蛋白质新生肽链生物合成以及新生肽链折叠的过程中，质量的控制都与“次品”的降解有关。 ?蛋白质在行使功能时，很多调节控制都与肽键的断裂有关，如前肽的切除、无活性的前体蛋白质的激活等。 第一节蛋白质降解的概述 蛋白质的寿命 ?细胞内绝大多数蛋白质的降解是服从一级反应动力学。半衰期介于几十秒到百余天，大多数是70～80d。 ?哺乳动物细胞内各种蛋白质的平均周转率为1 ～ 2d。代谢过程中的关键酶以及处于分支点的酶寿命仅几分钟，有利于体内稳态在情况改变后快速建立。 –大鼠肝脏的鸟氨酸脱羧酶半衰期仅11min，是大鼠肝脏中降解最快的蛋白质。 –肌肉肌动蛋白和肌球蛋白的寿命约l～2w。 –血红蛋白的寿命超过一个月。 ?蛋白质的半衰期并不恒定，与细胞的生理状态密切相关。 蛋白质寿命的N端规则 ?N端规则：细胞质中蛋白质的寿命与肽链的N端氨基酸残基的性质有一定的关系。 ?N端的氨基酸残基为D、R、L、K和F的蛋白质，其半衰期只有2~3min。 ?N端的氨基酸残基为A、G、M和V的蛋白质，它们在原核细胞中的半衰期可超过10h，而在真核细胞中甚至可超过20h。 酿酒酵母蛋白质代谢特点 ?酿酒酵母中不稳定蛋白的N端氨基酸残基有12个： Asn（B）、Asp（D）、Glu（E）、Phe （F）、His（H）、Ile（I）、Leu（L）、Lys（K）、Arg（R）、Trp（W）、Tyr（Y）和Gln （Z）。 ?酵母中存在切除N端甲硫氨酸的氨肽酶，它作用的蛋白质底物的N端第二个氨基酸一定是N端规则中的氨基酸残基。 PEST假设 ?PEST（Pro-Glu-Ser-Thr）假设：认为含有序列为PEST肽段的蛋白质，在细胞质中很快被降解，在这个亲水的区域附近常有碱性残基。 ?PEST肽段的缺失，可以延长此突变蛋白质的寿命。 ?在22个快速降解的蛋白质中有20个是含有PEST序列。
微生物降解有机磷农药酶促机制
1微生物降解有机磷农药 有机磷农药（organophosphorus pesticides，OPs）是农药中很重要的一类，具有高效的杀虫能力，为增加粮食生产、防治疾病传播作出了巨大贡献。但是，有机磷农药的生产、运输和大量使用对生态环境中其他非靶标生物乃至土壤、水、大气整个生态系统产生的负面影响日益严重，尤其是果蔬等农产品中的农药残留通过食物链在生物体内富集对人类造成严重危害更不容忽视。 有机磷农药污染降解技术可分为热降解、光降解、化学降解和生物降解。生物降解（biodegra-dation）是通过生物的作用将农药分解为无毒或低毒小分子化合物，并最终降解为水、CO2和矿物质的过程。相对于物理、化学降解技术，生物降解具有高效、彻底、无二次污染的优势，20世纪40年代后已经成为研究热点。作物本身、微生物都能够降解有机磷农药残留，但植物的降解很缓慢，周期很长，微生物由于其强大的代谢多样性，在有机磷农药残留降解中具有更大的优势。 2有机磷农药降解酶 微生物对于农药的降解可分为酶促和非酶促反应。所谓酶促反应是指微生物以胞内酶或分泌的胞外酶直接作用于农药，经过一系列生理生化反应，最终将农药完全降解或分解成分子量较小的无毒或毒性较小的化合物的过程。而非酶促形式指的是微生物通过代谢改变农药的环境离子浓度、pH等物理、化学性质，从而间接促使降解农药的过程。酶促反应是微生物降解农药的主要形式，微生物本身含降解农药的酶系基因，或本身虽无该酶系基因，但是经诱导或环境存在选择压，基因发生重组或改变产生了新的降解酶系。 20世纪80年代，Munnecke等发现有机磷农药降解酶比产生这类酶的微生物菌体更能忍受异常环境条件，如来源于假单胞菌的降解酶在10%的无机盐、1%的有机溶剂、50℃下都能保持高活性，而该酶的产生菌在同样的条件下却不能生长，而且，酶的降解效果远远胜于微生物本身，特别是对低浓度的农药更有效。因此，人们的思路从应用微生物菌体净化农药污染转向利用有机磷农药降解酶。因此，有机磷农药降解酶目前已被公认为是消除农药残留的最有潜力的新方法。常见的有机磷农药降解酶（Organophosphorus hydrolase）主要是水解酶类，包括磷酸酶、对硫磷水解酶、酯酶、硫基酰胺酶、裂解酶等，它们主要通过裂解P－O键、C－P 键、P－S键降解有机磷农药。由于各种有机磷农药都有类似的结构，只是取代基不同，所以一种有机磷农药降解酶往往可降解多种有机磷农药。 第1个有机磷农药降解酶是1974年Munneck 等［1］从假单胞杆菌中检测出磷酸酯酶的活性，发现其对对硫磷具有降解作用，同时对甲基对硫磷、二嗪农、毒死蜱等7种有机磷农药均能有效降解，在22℃时降解效率比化学降解快1000~ 2450倍，且该酶不为农药及农药制剂中溶剂所抑制，对环境条件有较宽的忍受范围。1979年，Brown等就对来源于黄杆菌(ATCC27551)的有机磷农药降解酶进行了部分纯化并对酶的性质进行了初步研究，发现酶反应的最适pH范围为8~10；酶的活性不受金属离子的影响，被非离子去污剂抑制。1989年，Mulbry等从3株革兰氏阴性菌中提取到3个对硫磷水解酶，分别测定了分子量，并对酶学性质做了研究。这3个酶分子量不同，对不同底物的作用也不同。同年，Dumas等纯化得到来源 微生物降解有机磷农药酶促机制 刘建利（北方民族大学生物科学与工程学院宁夏银川750021） 摘要有机磷农药污染严重，微生物有机磷农药是治理有机磷农药残留的新技术，综述有机磷农药降解酶的研究现状、酶促作用机理、基因工程等方面的研究现状。 关键词有机磷农药酶促机制 中国图书分类号：X172文献标识码：A *基金项目：宁夏自然科学基金（NZ0690）
高效氯氰菊酯在柑橘中的残留及降解动态研究.doc
高效氯氰菊酯在柑橘中的残留及降解动 态研究 高效氯氰菊酯，英文通用名：beta cypermethrin，化学名称：2,2-二甲基-3-（2 ,2-二氯乙烯基）环丙烷羧酸-α-氰基-（3-苯氧基）-苄酯，其结构式见图1。高效氯氰菊酯是一种广谱杀虫剂，对许多虫害，如蚜虫、甜菜夜蛾、棉铃虫、潜叶蛾、菜青虫、蚜虫等具有良好的防治效果 [1-6]。图1 高效氯氰菊酯化学结构式 fig.1 the chemical structure of beta cypermethrin 关于高效氯氰菊酯在蔬菜、水果等作物[7-12]上的残留研究国内外已有诸多报道，多采用gc、gc-ms、hplc、hplc-ms/ms等方法，本研究在参考文献的基础上进行方法优化，结合gc-ecd，测定了高效氯氰菊酯在柑橘和土壤中的残留量，并对其降解规律进行了研究，为高效氯氰菊酯在柑橘上的膳食风险评估及残留监测提供了科学依据。 1 材料与方法 1.1 试剂与仪器 1.1.1 药剂及试剂 99%高效氯氰菊酯标准品（dr.ehrenstorfer gmbh）；2%高效氯氰菊酯乳油（ec），本实验室研制。二氯甲烷、正己烷、乙腈、丙酮（美国天地公司）、无水硫酸钠、氯化钠（上海国药集团）。
1.1.2 仪器设备 2010气相色谱仪（ecd，岛津公司），ikat-25高速组织分散器（德国ika 公司），高速冷冻离心机h2050r-1（长沙湘仪有限公司），ab204-e型电子天平（瑞士梅特勒公司）。 1.2 田间试验设计 田间试验于2017和2018年在桂林市、长沙市和厦门市进行。按农药残留试验准则要求，设5个处理小区，重复3次，每小区2棵树，另设对照小区。2%高效氯氰菊酯ec防治柑橘虫害。 降解动态试验：柑橘一半大小时施药，剂量为20 mg/kg，施药后2 h、1 d、2d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d、30 d、35 d采样，处理重复3次，处理间设保护隔离区，另设空白对照。土壤样品：施药和采样方法参照植株样品。所有样品均装入样品袋中，贴好标签，保存于-20 ℃冰箱中待测。最终残留试验：按照20 mg/kg浓度药液施药2次、20 mg/kg浓度药液施药3 次、13.3 mg/kg浓度药液施药2 次、13.3 mg/kg浓度药液施药3次、空白对照五个处理顺序施药。按最后一次药后间隔14、21、30、45 d，采用随机方法在每株柑橘的不同方向、不同部位采集果实，四分法取250 g 装入聚乙烯塑料密封袋中，所有样品均装入样品袋（瓶）中，贴好标签，保存于-20 ℃冰箱中待测。 1.3 分析方法 1.3.1 样品前处理 称取20 g果皮（果肉、土壤）样品于广口瓶中，加入30 ml丙酮和30 ml 石油醚，震荡提取30 min，抽滤，用10 ml丙酮分别洗涤三角瓶和滤渣后，
蛋白质的酶促降解与氨基酸代谢
第十章蛋白质的酶促降解和氨基酸代谢 第一节蛋白质的酶促降解 生物体内的蛋白质是经常处于动态的变化之中，一方面在不断地合成，另一方面又在不断地分解。例如，当种子萌发时，蛋白质发生强烈的水解，将胚乳或子叶中的储藏蛋白质分解，形成氨基酸和其他简单含氮化合物，供幼苗形成组织时用。在植物衰老时，蛋白质的分解亦很强烈，将营养器官的蛋白质分解成含氮化合物，转移到繁殖器官中，供幼胚及种子的形成之所需。 蛋白质的分解对机体生命代谢的意义并不亚于蛋白质的合成。植物体为了进行正常的生长和发育，为了适应外界条件的变化，必须经常不断地形成具有不同结构与功能的各种蛋白质。因此，早期合成的蛋白质在完成其功能之后不可避免地要分解，其分解产物将作为合成新性质蛋白质的原料。 蛋白质的分解是在蛋白（水解）酶催化下进行的，蛋白水解酶存在于植物所有的细胞与组织中。大量蛋白酶已被人们从植物种子、果实的生长器官中分离出来并进行了研究，如番木瓜汁液中的木瓜蛋白酶，菠萝茎和果实中的菠萝蛋白酶，花生种子中的花生仁蛋白酶，豌豆种子中的豌豆蛋白酶，小麦、大麦、燕麦籽粒中的相应蛋白酶。其中许多酶已制成结晶。 蛋白水解酶可分为内肽酶（肽链内切酶）和端肽酶（肽链端解酶）两大类。 （１）蛋白酶的种类和专一性蛋白酶即内肽酶（endopeptidase），水解蛋白质和多肽链内部的肽键，形成各种短肽。蛋白酶具有底物专一性，不能水解所有肽键，只能对特定 图9-1 几种蛋白酶的专一性 的肽键发生作用。如木瓜蛋白酶只能作用于由碱性氨基酸以及含脂肪侧链和芳香侧链的氨基酸所形成的肽键。几种蛋白水解酶的专一性见图9-1、表9-1。
蛋白酶按基催化机理又可分为四类见表9-2。 表9-2中所列的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶及无花果蛋白酶的活性中心均含有半胱氨酸，因此能被HCN ，H 2S 、半胱氨酸等还原剂所活化，而被H 2O 2等氧化剂及重金属离子所抑制。其余蛋白酶存在于大豆、菜豆、大麻、玉米、高粱的种子中。这些酶的性质与广泛分布的动物蛋白酶——胰蛋白酶和胃蛋白酶等有很多共同之处。 （２）肽酶的种类和专一性 端肽酶又称为肽酶（exopeptidase ），从肽链的一端开始水解，将氨基酸一个一个地从多肽链上切下来。肽酶根据其作用性质不同可分为氨肽酶、羧肽酶和二肽酶。氨肽酶从肽链的氨基末端开始水解肽链；羧肽酶从肽链的羧基末端开始水解肽链（见表9-1、图9-1）；二肽酶的底物为二肽，将二肽水解成单个氨基酸。肽酶又可分为六类，见表9-3。 ３．蛋白质的酶促降解 在内肽酶、羧肽酶、氨肽酶与二肽酶的共同作用下，蛋白质水解成蛋白眎、胨、多肽，最后完全分解成氨基酸，即 蛋白质??→?内肽酶眎、胨、??→?内肽酶多肽??→?端肽酶 氨基酸 这些氨基酸可以转移到蛋白质合成的地方用作合成新蛋白质的原料，也可以经脱氨作用形成氨和有机酸，或参加其他反应。
常见杀虫剂中英文对照
杀虫剂 苏云金杆菌（bacillus thuringiensis） 机油（petroleum oils） 莰酮（camphor） 藜芦碱（vertrine） 血根碱（sanguinarine） 烟碱（nicotine） 鱼藤酮（rotenone） 阿维菌素（abamectin） 甲氨基阿维菌素（emamectin benzoate）浏阳霉素（1iuyangmycin） 多杀霉素（spinosyns） 红铃虫性诱素（PB-Rope） 楝素（toosedarin） 茴蒿素（santonin） 百部碱（tuberostemonine） 蓖麻油酸（ricinoleic acid） 松脂酸（pimaric acid） 硼酸（boric acid） 林丹（1indane） 硫丹（endosulfan） 三氯杀虫酯（plifenate） 敌敌畏（dichlorvos） 久效磷（monocrotophos） 敌百虫（trichlorfon） 氯唑磷（isazofos） 洽螟磷（sulfotep） 对硫磷（parathion） 甲基对硫磷（parathion-methyl） 速杀硫磷（Heterophos） 杀螟硫磷（fenitrothion） 倍硫磷（fenthion） 杀螟腈（cyanophos） 三唑磷（triazophos） 毒死蜱（chlorpyrifos） 甲基毒死蜱（chlorpyrifos—methyl） 嘧啶磷（pirimiphos—ethyl） 甲基嘧啶磷（pirimiphos—methyl） 二嗪磷（diazinon） 蝇毒磷（coumaphos） 喹硫磷（quinalphos） 辛硫磷（phoxim） 甲基辛硫磷（phoxim—methyl） 哒嗪硫磷（pyridaphenthione）甲基吡恶磷（azamethiphos） 乐果（dimethoate） 氧乐果（omethoate） 蚜灭磷（vamidothion） 灭线磷（ethoprophos） 硫线磷（cadusafos） 丙溴磷（profenofos） 特丁硫磷（terbufos） 地虫硫磷（fonofos） 甲拌磷（phorate） 马拉硫磷（malathion） 稻丰散（phenthoate） 亚胺硫磷（phosmet） 伏杀硫磷（phosalone） 杀扑磷（methidathion） 二溴磷（naled） 双硫磷（temephos） 苯线磷（fenamiphos） 硫环磷（phosfolan） 甲基硫环磷（phosfolan-methyl）甲胺磷（methamidophos） 乙酰甲胺磷（acephate） 硝虫硫磷” 甲基异柳磷（isofenphos—methyl）水胺硫磷（isocarbophos） 氯胺磷（chloramine phosphorus）灭多威（methomyl） 速灭威（metolcarb） 混灭威（dimethacarb） 异丙威（isoprocarb） 残杀威（propoxur） 仲丁威（fenobucarb） 恶虫威（bendiocarb） 克百威（carbofuran） 甲萘威（carbaryl） 抗蚜威（pirimicarb） 杀螟丹（cartap） 丁硫克百威（earbosulfan） 丙硫克百威（benfuracarb） 猛杀威（promecarb） 苯氧威（fenoxyearb） 硫双威（thiodicarb） 涕灭威（aldicarb）
高效氯氰菊酯乳油说明书
化学品安全技术说明书 第一部分化学品及企业标识 化学品中文名称： 4.5%高效氯氰菊酯乳油 化学品英文名称： 4.5% beta-cypermethrin EC 企业名称： 地址： 电子邮件地址： 联系电话： 传真号码： 企业应急电话： 产品代码： 002 产品推荐用途：农业用杀虫剂 产品限制用途：无 第二部分危险性概述 物理化学危险：遇明火、高热易燃。其挥发液与空气可形成爆炸性混合 物, 当达到一定浓度时, 遇火星会发生爆炸。与氧化剂能发生强烈反应。 其挥发物比空气重，能在较低处扩散到相当远的地方。遇高热后容器内 压增大，有开裂和爆炸的危险。流速过快，容易产生和积聚静电。燃烧 分解放出有毒的气体。 健康危害：本品对眼睛有轻度刺激性，可能损害生育能力和胎儿，误 服会引起中毒，甚至死亡。口服中毒的症状有：头痛、头晕、恶心、呕
吐、腹痛、胸闷，重者可出现意识模糊和肺水肿。 环境危害：对水生生物有害，对水体可造成严重污染。对蜜蜂、蚕、鱼、鸟有毒，使用应注意。 GHS危险性类别：根据《化学品分类和危险性公示通则》（GB 13690-2009）及化学品分类、警示标签和警示性说明规范系列标准，该产品属于易燃液体-3；急性毒性-经口-5；急性毒性-经皮-5；严重眼睛损伤/眼睛刺激性-2B；生殖毒性-1B；对水环境的危害-急性-1。 标签要素： 象形图： 警示词：危险 危险信息：易燃液体和蒸气；吞咽可能有害（经口），皮肤接触可能有害（经皮肤）；引起眼睛刺激；可能损害生育能力和胎儿；对水生生物毒性非常大。 防范说明： 预防措施：1、使用本品应穿长袖衣、长裤、靴子、戴手套、面罩，上风向施药，避免吸入药液；不能在施药现场吸烟和饮 食，施用后，及时清洗裸漏的身体部位、更换并彻底清 洗工作服。2、避免接触火花、明火、热源及热表面，使
蛋白质的酶促降解
第八章蛋白质的酶促降解 生物体内的各种蛋白质经常处于动态更新之中，蛋白质的更新包括蛋白质的分解代谢和蛋白质的合成代谢；前者是指蛋白质分解为氨基酸及氨基酸继续分解为含氮的代谢产物、二氧化碳和水并释放出能量的过程。构成蛋白质的氨基酸共有20种，其共同点是均含氨基和羧基，不同点是它们的碳骨架各不相同，因此，脱去氨基后各个氨基酸的碳骨架的分解途径有所不同，这就是个别氨基酸的代谢，也可称之为氨基酸的特殊代谢。以上这些内容均属蛋白质分解代谢的范畴，并且由于这一过程是以氨基酸代谢为中心，故称为蛋白质分解和氨基酸代谢。这是本章的中心内容。此外，蛋白质的营养问题与饮食卫生和临床实践关系密切，亦在本章讨论。 第一节蛋白质的生理功能和营养作用 一、蛋白质和氨基酸的主要生理功能 维持组织的生长、更新和修补，此功能为蛋白质所特有，不能由糖或脂类代替。产生一些生理活性物质，包括胺类、神经递质、激素、嘌呤、嘧啶等。某些蛋白质具有特殊的生理功能，如血红蛋白运输氧，血浆中多种凝血因子参加血液凝固，肌肉中的肌动球蛋白与肌肉收缩有关。此外，酶、抗体、受体都是蛋白质。供给能量，每克蛋白质在体内氧化分解产生17．19kJ(4．1千卡)的能量，蛋白质的这种生理功能可由糖及脂类代替。一般情况下，蛋白质供给的能量占食物总供热量的10％～15％。 二、氮平衡（nitrogen balance）和蛋白质的需要量 体内蛋白质的代谢情况可以根据该实验来评价。蛋白质中氮的平均含量为16%, 食物中的含氮物质主要是蛋白质。故通过测定食物中氮的含量可以推算出其中的蛋白质含量。蛋白质在体内代谢后产生的含氮物质主要经尿、粪、汗排出。因此，测定每天从食物摄入的氮含量和每天排泄物(包括尿、粪、汗等)中的氮含量，可评价蛋白质在体内的代谢情况。 氮的总平衡：摄入氮 = 排出氮，见于正常成人。 氮的正平衡：摄入氮 > 排出氮，表示体内蛋白质的合成大于蛋白质的分解，见于儿童、孕妇及病后恢复期。
蛋白质的降解
第六章蛋白质的降解及其生物学意义 ?第一节蛋白质降解的概述 ?第二节参与蛋白质降解的酶类 ?第三节蛋白酶体-泛素系统及其功能 ?第四节蛋白质降解的生物学意义 蛋白质降解是生命的重要过程 ?维持细胞的稳态。 ?清除因突变、热或氧化胁迫造成的错误折叠的蛋白质，防止形成细胞内凝集。 ?及时终止不同生命时期调节蛋白的生物活性。 ?蛋白质的过度降解也是有害的，蛋白质的降解必须受到空间和时间上 蛋白质降解的体系 ?蛋白质消化分解为被机体吸收的营养物质。 ?研究蛋白质结构时，用蛋白酶降解肽链。 ?蛋白质新生肽链生物合成以及新生肽链折叠的过程中，质量的控制都与“次品”的降解有关。 ?蛋白质在行使功能时，很多调节控制都与肽键的断裂有关，如前肽的切除、无活性的前体蛋白质的激活等。 第一节蛋白质降解的概述 蛋白质的寿命 ?细胞内绝大多数蛋白质的降解是服从一级反应动力学。半衰期介于几十秒到百余天，大多数是70～80d。 ?哺乳动物细胞内各种蛋白质的平均周转率为1 ～2d。代谢过程中的关键酶以及处于分支点的酶寿命仅几分钟，有利于体内稳态在情况改变后快速建立。 –大鼠肝脏的鸟氨酸脱羧酶半衰期仅11min，是大鼠肝脏中降解最快的蛋白质。 –肌肉肌动蛋白和肌球蛋白的寿命约l～2w。 –血红蛋白的寿命超过一个月。 ?蛋白质的半衰期并不恒定，与细胞的生理状态密切相关。 蛋白质寿命的N端规则 ?N端规则：细胞质中蛋白质的寿命与肽链的N端氨基酸残基的性质有一定的关系。 ?N端的氨基酸残基为D、R、L、K和F的蛋白质，其半衰期只有2~3min。 ?N端的氨基酸残基为A、G、M和V的蛋白质，它们在原核细胞中的半衰期可超过10h，而在真核细胞中甚至可超过20h。 酿酒酵母蛋白质代谢特点 ?酿酒酵母中不稳定蛋白的N端氨基酸残基有12个：Asn（B）、Asp（D）、Glu（E）、Phe（F）、His（H）、Ile（I）、Leu（L）、Lys（K）、Arg（R）、Trp（W）、Tyr（Y）和Gln（Z）。 ?酵母中存在切除N端甲硫氨酸的氨肽酶，它作用的蛋白质底物的N端第二个氨基酸一定是N端规则中的氨基酸残基。 PEST假设 ?PEST（Pro-Glu-Ser-Thr）假设：认为含有序列为PEST肽段的蛋白质，在细胞质中很快被降解，在这个亲水的区域附近常有碱性残基。 ?PEST肽段的缺失，可以延长此突变蛋白质的寿命。 ?在22个快速降解的蛋白质中有20个是含有PEST序列。 ?在35个慢速降解的蛋白质中有32个不含PEST序列。 分泌到细胞外蛋白质的寿命 ?分泌到细胞外的蛋白质，它们的寿命都比较长，如胶原蛋白、眼睛中的晶体蛋白。
北京化工大学硕士研究生入学考试
北京化工大学硕士研究生入学考试 《药学综合二》考试大纲 注意事项：本考试大纲针对《药学综合二》的有机化学和生物化学组合. 一、适用的招生专业 药学。 二、考试方法和考试时间 考试为闭卷考试，考试时间为3小时。 第一部分有机化学 一、考试的主要内容与要求 第一章绪论 有机化合物和有机化学，有机化合物的特点，有机化合物的结构特征，价键理论，有机化学中的酸碱理论，有机化学反应类型，共价键的断裂方式。 第二章有机化合物的分类及命名 有机化合物的分类，普通命名法，衍生命名法，系统命名法，顺序规则。 第三章有机化合物的同分异构现象 构造异构，碳链异构，官能团异构，顺反异构，光学异构，旋光性，手性和对称性，手性分子构型表示法，手性分子构型的标记，对映异构及非对映异构，不含手性碳原子的化合物的对映异构，不对称合成和外消旋体的拆分. 第四章饱和烃 脂肪链烃，烷烷的构象，乙烷的构象，扭转张力，丁烷的构象 烷烃的物理性质. 烷烃的化学性质，自由基取代反应，卤代反应机理，脂肪环烃，环烷烃的结构，角张力，环己烷的构象，取代环己烷的稳定构象，环烷烃的化学性质，开环反应。 第五章不饱和烃 烯烃: 烯烃的物理性质，烯烃的化学性质，烯烃的催化加氢反应，烯烃的亲电加成反应及反应机理，烯烃的硼氢化－氧化反应，烯烃的氧化反应，烯烃α－氢的反应，烯烃的聚合反应炔烃: 炔烃的化学性质，炔氢的酸性，炔烃的催化加氢反应，顺式加氢，反式加氢，炔烃的氧化反应，炔烃的聚合反应 二烯烃，共轭效应，分子轨道理论，共振论简介，二烯烃的化学性质。 Diels-Alder反应 第六章芳香烃 芳香烃的物理性质
单环芳烃:单环芳烃的结构，单环芳烃的化学性质，亲电取代反应及历程，定位效应 α－氢的取代，侧链氧化反应 多环芳烃，联苯 稠环化合物，萘蒽 非苯芳烃 休克尔规则 第七章卤代烃 卤代烃的物理性质， 卤代烃的化学性质，亲核取代反应，SN1历程，碳正离子的重排 SN2历程，瓦尔登翻转，消除反应 E1历程，E2历程 取代和消除的竞争 第八章醇、酚、醚 醇的物理性质：氢键。醇的化学性质，酸性和碱性，羟基的取代反应，脱水反应，氧化和脱氢 酚:酚的化学性质，羟基上的反应，芳环上的亲电取代，氧化及还原反应 醚:醚的化学性质，，醚键的断裂 环氧乙烷的反应 第九章醛、酮、醌 醛、酮的化学性质，亲核加成反应及历程，α－氢的取代，氧化和还原 醌，醌的化学性质 第十章羧酸及其衍生物 羧酸，羧酸的化学性质，酸性，羧酸衍生物的生成—加成-消除反应，还原反应 α－氢的卤代反应，脱羧反应 羧酸衍生物：羧酸衍生物的化学性质，酰氯的化学性质，酸酐的化学性质，酯的化学性质酰胺的化学性质，羧酸衍生物的还原，Claisen酯缩合反应，Hofmann酰胺降级反应，Rosenmund还原 β-二羰基化合物：β-二羰基化合物的构造特点和分类，乙酰乙酸乙酯及其在有机合成中的应用，乙酰乙酸乙酯的合成，乙酰乙酸乙酯在有机合成中的应用，丙二酸二乙酯及其在有机合成中的应用，丙二酸二乙酯的合成，丙二酸二乙酯在有机合成中的应用，Knoevenagel缩合反应，Michael加成反应 第十一章有机含氮化合物 硝基化合物：硝基化合物的化学性质，还原反应 胺：胺的化学性质，碱性，氮上的烷基化反应，氮上的酰基化反应，与亚硝酸反应，芳环上的亲电取代，氧化反应，季铵盐及季铵，季铵碱的热分解反应 腈：腈的化学性质
高效氯氰菊酯在柑橘中的残留及降解动态研究
2019年第14期广东化工第46卷总第400期https://www.360docs.net/doc/f510129500.html, ·63· 高效氯氰菊酯在柑橘中的残留及降解动态研究 何欢，李素平，熊兴明，刘一平 (湖南省农药检定所，湖南长沙410005) Residues and Dissipation Dynamics of Beta Cypermethrin in Citrus He Huan,Li Suping,Xiong Xingming,Liu Yiping (Hu’nan Institute for the Control of Agrochemicals,Changsha 410005,China) Abstract:The residual dynamics and final residues of beta cypermethrin in citrus and soils samples in supervised field residue trials were determined by GC-ECD.Citrus and soils samples were extract,cleaned up and determined by GC-ECD.Under the fortified level from 0.01to 1.0mg/kg for citrus and soils,the recoveries ranged from 86.52%to 91.52%with the relative standard deviations of 6.2%~15.6%.The LOD was 0.1×10-12g,and the LOQ of the method was 0.01mg/kg for all samples.The results of dissipation dynamic test showed that the rules consistent with first order kinetics equation,and the half-life of beta cypermethrin was 1.6~6.0days.The final residues of citrus were lower than 0.01mg/kg,and the maximum residue limit was recommended as 0.02mg/kg. Keywords:beta cypermethrin ；citrus ；residue ；dissipation dynamics ；final residues 高效氯氰菊酯，英文通用名：beta cypermethrin ，化学名称：2,2-二甲基-3-(2,2-二氯乙烯基)环丙烷羧酸-α-氰基-(3-苯氧基)-苄酯，其结构式见图1。高效氯氰菊酯是一种广谱杀虫剂，对许多虫害，如蚜虫、甜菜夜蛾、棉铃虫、潜叶蛾、菜青虫、蚜虫等具有良好的防治效果[1-6]。 图1高效氯氰菊酯化学结构式 Fig.1The chemical structure of beta cypermethrin 关于高效氯氰菊酯在蔬菜、水果等作物[7-12]上的残留研究国内外已有诸多报道，多采用GC 、GC-MS 、HPLC 、HPLC-MS/MS 等方法，本研究在参考文献的基础上进行方法优化，结合GC-ECD ，测定了高效氯氰菊酯在柑橘和土壤中的残留量，并对其降解规律进行了研究，为高效氯氰菊酯在柑橘上的膳食风险评估及残留监测提供了科学依据。 1材料与方法 1.1试剂与仪器1.1.1药剂及试剂 99%高效氯氰菊酯标准品(Dr.Ehrenstorfer GmbH)；2%高效氯氰菊酯乳油(EC)，本实验室研制。二氯甲烷、正己烷、乙腈、丙酮(美国天地公司)、无水硫酸钠、氯化钠(上海国药集团)。1.1.2仪器设备 2010气相色谱仪(ECD ，岛津公司)，IKAT-25高速组织分散器(德国IKA 公司)，高速冷冻离心机H2050R-1(长沙湘仪有限公司)，AB204-E 型电子天平(瑞士梅特勒公司)。1.2田间试验设计 田间试验于2017和2018年在桂林市、长沙市和厦门市进行。按农药残留试验准则要求，设5个处理小区，重复3次，每小区2棵树，另设对照小区。2%高效氯氰菊酯EC 防治柑橘虫害。 降解动态试验：柑橘一半大小时施药，剂量为20mg/kg ，施药后2h 、1d 、2d 、3d 、5d 、7d 、14d 、21d 、30d 、35d 采样， 处理重复3次，处理间设保护隔离区，另设空白对照。土壤样品：施药和采样方法参照植株样品。所有样品均装入样品袋中，贴好标签，保存于-20℃冰箱中待测。 最终残留试验：按照20mg/kg 浓度药液施药2次、20mg/kg 浓度药液施药3次、13.3mg/kg 浓度药液施药2次、13.3mg/kg 浓度药液施药3次、空白对照五个处理顺序施药。按最后一次药后间隔14、21、30、45d ，采用随机方法在每株柑橘的不同方向、不同部位采集果实，四分法取250g 装入聚乙烯塑料密封袋中，所有样品均装入样品袋(瓶)中，贴好标签，保存于-20℃冰箱中待测。 1.3分析方法1.3.1样品前处理 称取20g 果皮(果肉、土壤)样品于广口瓶中，加入30mL 丙酮和30mL 石油醚，震荡提取30min ，抽滤，用10mL 丙酮分别洗涤三角瓶和滤渣后，转移到250mL 的容量瓶中，加入100mL 3%氯化钠溶液，充分摇匀静置分层，将下层转移至另一250mL 的分液漏斗中，用2×20mL 的石油醚萃取，合并三次萃取的石油醚层，过无水硫酸钠，经旋转蒸发仪减压浓缩10mL 左右，待净化。 玻璃层析柱中先加入1cm 高的无水硫酸钠，再加入5g 5%水脱活的弗罗里硅土，上层加少量的无水硫酸钠，轻轻敲实，用20mL 石油醚淋洗柱子，弃去淋洗液，柱面要有少量液体，小柱中依次加入5mL 丙酮和正己烷(1∶9，v ∶v)的混合溶液，5mL 的正己烷活化，当液面到达吸附层表面时立即加入待净化溶液，用15mL 的离心管收集洗脱液，用5mL 丙酮和正己烷(1∶9，v ∶v)冲洗烧杯后淋洗弗罗里硅土小柱，再重复一次。将盛有淋洗液的离心管放在氮吹仪上，在50℃的水浴条件下，浓缩小于5mL ，用正己烷定容至5mL ，装入样品瓶待测。1.3.2气相色谱条件 仪器：岛津2010；色谱柱：RTX-170130m*0.25mm*0.25μm ；检测器：ECD ；载气：高纯氮，2.5mL/min ；检测温度：进样口250℃；检测器280℃；柱温：15℃6℃/min 270℃，保持8min ；进样方式：不分流；进样体积：1μL ；保留时间：27.73/28.08min 。1.3.3添加回收率 在空白柑橘和土壤中添加浓度范围为0.01~1.0mg/kg 的高效氯氰菊酯标准溶液，每个浓度设5个平行，同时设空白对照。按上述前处理方法进行操作和分析，计算添加回收率和相对标准偏差。 [收稿日期]2019-06-11 [基金项目]国家重点研发计划：化肥农药减施增效的环境效应评价(2016YFD0201200)；湖南省研究生科研创新项目(CX2017B351)[作者简介] 何欢(1993-)，女，本科，主要从事农药残留检测技术研究。 *为通讯作者：刘一平(1984-)，男，湖南省张家界人，博士，农艺师，主要从事农药残留及环境风险评估研究。
泛素-蛋白酶体通路和癌症关系的研究进展
泛素-蛋白酶体通路与癌症关系的研究进展 张海满 （山东农业大学生命科学学院山东泰安201018） 摘要：泛素化过程是真核细胞内重要的蛋白质质控系统，参与细胞的多种生理活动过程，对维持细胞正常的生理功能具有十分重要的意义。泛素-蛋白酶体途径（UPP）的异常改变不仅与癌症的病因学有着直接关素，并且与癌症的发展和预后有着密切的关系。本文综述了泛素的构成、泛素链的形成过程、UPP的生理和病理功能及UPP与癌症的关系的研究进展。 关键词：泛素-蛋白酶体通路；UPP；癌症；研究 细胞内蛋白质的产生和降解必须保持着动态平衡，才能维持细胞的稳态和正常功能。泛素-蛋白酶体途径( ubiquitin-pro-teasome pathway, UPP)是细胞内蛋白质选择性降解的重要途径，泛素分子主要通过泛素活化酶、泛素结合酶和泛素-蛋白连接酶与靶蛋白结合形成一条多泛素链，将底物蛋白泛素化，使靶蛋白被26S蛋白酶体所识别和降解。UPP可高效并高选择性地降解细胞内蛋白质，尤其是一些短寿命的细胞周期调节蛋白、癌基因和抑癌基因产物以及变性变构蛋白等。 1.泛素-蛋白酶体途径（UPP）的构成 UPP成分十分复杂，主要包括泛素( ubiquitin, Ub)、泛素活化酶( ubiquitin-activatingenzyme, E1)、泛素连接酶( ubiquitin-conjugatingenzyme, E2)、泛素蛋白连接酶( ubiquitin-protein ligating enzyme, E3)、26S蛋白酶体及去泛素化酶( deubiquitinating enzyme, DUBs)等。UPP存在于所有真核生物的细胞内，是蛋白质选择性降解的主要方式。 1.1泛素( ubiquitin, Ub) 泛素是一种广泛分布在真核细胞中的高度保守的小分子球状蛋白质。1975年由Goldstein首次提出，此后不断出现有关报道[1]。单个泛素分子由76个氨基酸残基组成，相对分子质量约8.5×103，有一个明显的疏水核心和大量的氢键，表现出特殊的稳定性，能够防止其自身在结合和靶向性降解循环中变性失活，从而保证泛素循环的进行。依赖于ATP的酶促反应，E1通过在Ub的羧基末端和E1自身激活位点半胱氨酸之间形成一个硫酯键而激活Ub，激活的Ub被转到E2结合酶上，然后E2在E3作用下共价结合到需要降解的胞质或胞核的蛋白上，使底物蛋白发生泛素化，形成Ub单体，多个Ub单体通过异肽键连接形成多聚Ub链，每个多聚Ub链至少含有4个Ub单体。 1.2泛素活化酶( ubiquitin-activating enzymes, E1) 泛素活化酶是单基因编码的相对分子质量分别为110×103和117×103的2个亚基，存在于细胞核
甲基对硫磷水解酶酶促反应体系建立及特性研究
甲基对硫磷水解酶酶促反应体系建立及特性研究 刘智,马爱芝,张晓舟,张小华,李顺鹏 (南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室,江苏南京210095) 摘要:从甲基对硫磷降解菌DLL 2E 4(Pseudomonas putida )中提取水解酶,对其酶促反应进行研究,建立了反应体系:474μL N a 2HPO 42柠檬酸缓冲液,1215μL 甲基对硫磷,115μg 粗蛋白,35℃水浴5min 。水解酶保持稳定的pH 值范围为510～1010,最适pH 为710。该酶热不稳定,45℃30min 处理,酶活下降50%;100℃10min 处理可完全灭活。测定了11种金属离子、TWEEN 280、T riton X 2100及E DTA 对水解酶的作用,发现20mmol ?L - 1CoCl 2对酶活有明显的抑制作用,而20～0102mmol ?L -1的LiCl 对酶活有促进作用,2mmol ?L -1的TWEEN 280和T riton X 2100可降低80%的酶 活。 关键词:甲基对硫磷水解酶;酶促反应体系;特性 中图分类号:Q 93 文献标识码:A 文章编号:10002030(2003)04006004Study on reaction system and characteristics of methyl parathion hydrolase L IU Zhi ,MA Ai 2zhi ,ZHANG Xiao 2zhou ,ZHANG Xiao 2hua ,L I Shun 2peng (K ey Laboratory of Microbiological E ngineering of Agricultural E nvironment , Ministry of Agriculture ,N anjing Agric U niv ,N anjing 210095,China) Abstract :Methyl parathion (MP)hydrolase w as extracted from MP degrading strain DLL 2E 4(Pseudomonas putida ).The enzym atic reaction system w as founded as follow s :N a 2HPO 42citric acid buffer 474μL ,MP 1215μL ,crude enzyme (about 115μg crude protein),35℃w ater b athing 5min.The characteristics of MP hydrolase w as determined.The pH area for keeping of enzyme is 5101010,with the optimum pH 710.The activity of enzyme is dow n to 50%and zero when treated with 45℃30min.and 100℃10min ,respectively.11metal ions ,TWEEN 280,T riton X 2100and E DTA w ere chose to study their effects on MP hydrolase activity.Data show ed that 20mmol ?L -1CoCl 2,2mmol ?L - 1TWEEN 280and T riton X 2100can greatly inhibit hydrolase activity ,while 200102mmol ?L -1LiCl can enhance it. K ey w ords :methyl parathion hydrolase ;enzym atic reaction system;characteristics 随着微生物学和生物化学研究的日益深入,人们越来越意识到使用微生物酶制剂消除环境中的农药污染是目前极具前景的一项工作[1,2]。磷酸酯酶在有机磷杀虫剂的去毒过程中起着重要的作用,用从兔血清中纯化出的对氧磷酶处理小鼠,可以在24h 以上保护小鼠不受毒死稗的毒害[3,4]。对硫磷农药经过对硫磷水解酶作用后,其毒性下降100～120倍[5],表明人们可以利用有机磷水解酶来防止有机磷农药的中毒及消除有机磷农药的污染。本研究以甲基对硫磷(methyl parathion ,MP)为底物,对来源于恶臭假单胞菌DLL 2E 4(Pseudomonas putida )[6]的MP 水解酶进行了研究,旨在探索该菌株中甲基对硫磷降解酶的活力及定域,为进一步研究该酶的降解机理和基因定位奠定基础。 1 材料与方法 111 菌种和培养基 菌种为恶臭假单胞菌DLL 2E 4(Pseudomonas putida )。液体培养基为L B 培养基[7],固体培养基为收稿日期:20021220 基金项目:国家863项目(2001AA 214121,2002AA 246081);农业科技跨越计划(M 200011);国家攻关项目(2002BA 516A 01)作者简介:刘智(1975),博士研究生。导师:李顺鹏(1942),教授,从事环境微生物研究,E 2m ail :lsp @njau 1edu 1cn 南京农业大学学报 2003,26(4):60～63Journal of N anjing A gricultural U niversity
高效氯氰菊酯安全技术说明书
高效氯氰菊酯安全技术说明书（MSDS） 第一部分：化学品名称 化学品中文名称：高效氯氰菊酯 化学品俗名：无资料 化学品英文名称： Beta cypermethrin 化学名称： 2,2-二甲基-3-（2 ,2-二氯乙烯基）环丙烷羧酸-α-氰基-（3-苯氧基）-苄酯技术说明书编码：无资料 CAS No.：无资料 有害物成分无资料 成分/组成信息 :高效氯氰菊酯 第二部分：危险性概述 危险性类别：中毒 侵入途径：无资料 健康危害：无资料 环境危害：无资料 燃爆危险：无资料 第三部分：急救措施 皮肤接触：无资料 眼睛接触：无资料 吸入：无资料 食入：无特效解毒剂，请对症治疗 第四部分：消防措施 危险特性：无资料 有害燃烧产物：无资料 灭火方法：无资料 第五部分：泄漏应急处理 应急处理：无资料 第六部分：操作处置与储存 操作注意事项：无资料 第七部分：接触控制/个体防护 中国 MAC(mg/m3)：未制定标准 前苏联MAC(mg/m3)：未制定标准 TLVTN：未制定标准 TLVWN：未制定标准 监测方法：无资料 工程控制：未制定标准 呼吸系统防护：无资料 眼睛防护：无资料
身体防护：无资料 手防护：无资料 其他防护：无资料 第八部分：理化特性 外观与性状：两对外消旋体混合物，其顺反比约为 2：3。外观为白色至奶油色结晶体， 易溶于芳烃、酮类和醇类。pH：无资料熔点(℃)：64~71℃（峰值67℃）。 沸点(℃)：无资料 分子式：无资料 主要成分：45%乳油 饱和蒸气压(kPa)：180mPa(20℃) 临界温度(℃)：无资料 辛醇/水分配系数的对数值：无资料 闪点(℃)：无资料 引燃温度(℃)：无资料 溶解性：在pH=7的水中，51.5(5℃)、93.4 (25℃)、276.0 (35℃)μg/l(理论值)，异丙醇11.5，二甲苯749.8，二氯甲烷3878，丙酮2102，乙酸乙酯1427，石油醚13.1（均为 mg/ml, 20℃) 主要用途：杀虫剂 可用作工程塑料,无资料 第九部分：稳定性和反应活性 稳定性：150℃, 空气及阳光下及在中性及微酸性介质中稳定。碱存在下差向异构，强碱中水解。 禁配物：无资料 避免接触的条件：无资料 聚合危害：无资料 分解产物： 无资料 第十部分：毒理学资料 急性毒性：无资料。 LD50：大鼠急性经口 LD50 649mg/kg, 急性经皮 LD50>5000mg /kg，对兔有轻微皮肤和眼刺激。对豚鼠不致敏。 LC50：大鼠的急性吸入LC50 >1.97mg/l(小时)。4.5%乳油：大鼠急性经LD50853mg/kg, 急 性经皮LD501830mk/kg。5%可湿粉：小鼠急性经口LD50 2549mg/kg，急性经皮 LD50>3000mg /kg。 亚急性和慢性毒性：无资料 刺激性：无资料 致敏性：无 致突变性：无 致畸性：无