实验___粮食中淀粉含量的测定

实验粮食中淀粉含量的测定

一、实验目的

掌握粮食中淀粉含量测定的原理、试剂、仪器设备及操作要点。

二、实验原理

试样经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成二糖，再用盐酸水解成具有还原性的单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉含量。

三、实验试剂

1.淀粉酶溶液：称取α-淀粉酶0.5g，加100mL水溶解，加入数滴甲苯或

三氯甲烷，防止长霉。

2.碘溶液：称取

3.6g碘化钾溶于20mL水中，加入1.3g碘，溶解后加水

稀释至100mL。

3.85%乙醇。

4.6mol/L盐酸：取盐酸50mL加水至100mL。

5.200g/L氢氧化钠溶液。

6.甲基红指示液：称取0.1g甲基红用95%乙醇溶液定容至100mL。

7.乙醚。

8.蒸馏水。

四、仪器设备

1、粉碎磨：40目筛。

2、天平：分度值0.01g。

3、锥形瓶：250mL。

4、回流冷凝装置：与250mL锥形瓶匹配。

5、容量瓶：250mL。

6、抽滤装置。

7、恒温水浴锅。

五、操作步骤

待测样品，用粉碎磨粉碎至全部通过40目筛，充分混合，保存备用。

试样水分含量的测定：105℃烘干至恒重，计算。

1、称取试样约2~5g（精确至0.01g），置于放有滤纸的漏斗内，先用50mL 乙醚分5次洗涤去除脂肪，再用约100mL乙醇洗涤除去可溶性糖类，将残留物移入250mL烧杯，并用50mL水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内。

2、将烧杯置于沸水浴加热15min，使淀粉糊化。

3、将糊化的试样，放置冷却至60℃以下，加20mL α-淀粉酶溶液，在恒温水浴锅中55~60℃保温水解1h，并经常搅拌。

4、取酶解液1滴加1滴碘溶液，应不显蓝色，否则再加热糊化并加适量酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为止。

5、将酶解液加热至沸，冷却后移入250mL容量瓶加水定容至刻度，混匀，过滤，弃去初滤液。

6、取50mL滤液，置于250mL锥形瓶中，加5mL盐酸，装上回流冷凝管，在沸水浴中回流1h。冷却后加2滴甲基红指示液，用氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入100mL容量瓶，洗涤锥形瓶，洗液并入100mL容量瓶中，加水定容至刻度，混匀备用。

用处理好的试样按实验一的方法操作，测定还原糖含量。同时量取50mL水

及与试样处理时相同量的α-淀粉酶溶液，按同一方法作试剂空白试验。

六、结果计算

试样中淀粉的干基含量（X ）以质量分数表示，按下式计算：

1001000

)1()m -(m 0.9500021??-????=w V m X 式中：

X —试样中淀粉的干基含量，%；

m 1—转化后测得的还原糖质量（以葡萄糖计），mg ；

m 2—试剂空白相当于还原糖质量（以葡萄糖计），mg ；

m 0—试样质量，g ；

V —转化后稀释为100mL ，测定还原糖的体积，mL ；

w —试样水分，%；

0.9—还原糖（以葡萄糖计）换算成淀粉的换算系数。

每份样品应平行测定2次，平行试样测定的结果符合重复性要求时，取其算术平均值作为结果，测定结果保留到小数点后2位。对同一被测对象，相互独立进行测定获得的两次独立测定结果差得绝对值不大于这两个测定值的算术平均值的5%。

七、思考题

实验过程中有哪些因素最容易影响最终检测结果？