普通光学显微镜结构及使用方法

普通光学生物显微镜的结构及使用

一、光学显微镜的构造

显普通生物学光学显微镜种类繁多，但基本构造相同，主要分为三部分：机械装置和光学系统（光源部分和光学部分）。如图1.1.1-1所示

（一）机械部分

镜体包括镜座，镜柱及镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台及推进器、粗细调节器等。

1.镜座：即显微镜的底座，用以支持稳定镜体；

2.镜柱及镜臂：连接镜座的直立部分，称镜柱，与镜柱相连接的曲部，另一端连于镜筒，称为镜臂，是取放显微镜时手握位置。

3.镜筒：连接在镜臂前方，镜筒上端装有双目镜（10倍固定），下端装有物镜转换

器。

4.物镜转换器：接于棱镜壳下方，圆盘状，盘上有4个圆孔，是安装物镜头部位，可自由转动，调换不同倍数的物镜。

5.载物台（镜台）：在镜筒物镜头下方，中央有一通光孔，用以放置玻片标本。镜台上装有玻片标本推进器，推进器有弹簧夹，用以夹持玻片标本，在其一侧，装有推进器调节轮，可使被观察标本作前后、左右方向移动。

6.粗细调节器：即装置在镜柱两侧上的大小两种螺旋钮，能使镜台作上下移动。分为：粗调节器（大螺旋）和细调节器（小螺旋）。粗调节器即大螺旋，移动时，可使镜台较大幅度的升降，迅速调节物镜和标本之间的距离，使物象呈现于视野中，通常在使用低倍镜，先用大螺旋找到物像。细调节器即小螺旋，可使镜台微幅缓慢升降，使得标本更清晰，并可观察到标本的不同层次和不同深度的结构，这个操作叫调焦。

（二）光源部分

光学显微镜的光源装置：主要包括反射镜，卤素灯电光源、聚光器，广义说也包括照明光源和滤光器等。

1.是使用反光镜，采集自然光或人工光源。

2.是由灯泡（卤素灯泡或led灯泡）发射的电光源，这里主要介绍电光源显微镜。聚光器，也叫集光器，位于载物台中孔下方，由聚光镜和可变光阑组成，其作用是把光线集中到所要观察的标本上。可变光阑聚光镜下方，也叫光圈，旋转光阑环，可以调节其开孔的大小，以调节光量，使聚光镜的镜口率适应于物镜的镜口率；光阑环上有刻有物镜倍率（4×倍，10×倍，40×倍，100×倍），观察时将与使用物镜相对应的倍率放到正面。电光源安装在载物台聚光镜下方，镜座中部，在镜座一侧，有主电源开关，亮度调整旋钮，在镜座背面有电源插口。

（三）光学部分

光学部分主要包括物镜、目镜

1.物镜：因它靠近被观察的物体（标本）故又称为接物镜。装在物镜转换器上，一般光学显微镜有3～5个物镜，根据放大倍数的不同，习惯上把刻有“4×”、“10×”符号的叫低倍镜，镜头以次较短，较长的刻有“40×”符号的叫高倍镜，刻有“100×”符号的最长，叫油镜。在镜头上常加有一圈不同颜色的线以示区别。在物镜的放大倍数

之后，刻有孔径数值，表示了该物镜分辨率的大小，分辨率越高，其数字越大。

2.目镜：因它靠近观察者眼睛，故又称接目镜，有单目、双目二种，目前常用双目。目镜相当于一个放大镜，起着把物镜放大的物体实像进一步放大的作用，其放大倍数通常为“10×”，但它并不增加显微镜的分辨率。显微镜的总放大倍数是物镜的放大倍数×目镜的放大倍数的乘积，如物镜为“40×”，目镜为“10×”，其总放大倍数为40×10=400倍。

二、普通光学生物显微镜的使用方法

取用显微镜时，以右手抓握镜臂，左手托住镜座，将显微镜放置在身体的前方的实验台上，镜座前端距桌边10CM左右为宜，便于观察操作。

1.打开光源（电源）放好显微镜，将电源线插头插接在电源插座上，打开插座开关。打开显微镜镜座侧面电源开关，按箭头方向或数字标识由小向大逐渐缓慢转动亮度调整旋钮，调整照明度。

2.放置玻片标本转动粗调旋钮，降下载物台，取玻片标本一张，盖玻片朝上，切勿放反，放置在镜台上推进器弹簧片夹中夹住，旋转推进器旋钮，使观察部分调到通光孔中央。

3.对光调整双目镜瞳距，调整屈光度，旋转物镜转换器（切忌手持物镜旋转），使10×倍物镜对准镜台的通光孔（当转动听到契合声时，说明物镜光轴已对准镜筒中心），物镜进入光路。调整光圈，置顶聚光器。

4.调整对观察标本焦距在确定低倍物镜归位在通光孔中央后，从显微镜侧面观察，左手逆时针方向缓慢转动粗调节旋钮，推升载物台，使玻片标本接近物镜，当载物台碰上粗调限位后，旋钮转动阻力增大时，请停止转动。这时用双眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗调旋钮，使载物台缓慢下降，直到视野中展现清晰的物像为止。用推进器移动玻片，可完整全面观察标本，同时注意用细调节旋钮，轻微转动，使观察物像更加清晰。

5.高倍镜（40×倍）的使用方法在底倍镜下选好需要在高倍镜观察的部位，将其推至视野中央，同时将物象用微调到最清晰的程度，旋转物镜转换器，将高倍镜头（400×倍）转换至通光孔中央，使镜头进入光路。转换好后，双眼在目镜上观察，同时缓慢转动细调节旋钮，至物象清晰为止（切勿用粗调节器），如果视野亮度不合适，可用镜

座侧亮度调节旋钮调节，将光圈调整到相适应物镜倍率的刻度标识位置。

6.油镜（100×倍）的使用方法在使用油镜（100×）之前，必须先经低、高倍镜观察，然后要观察的视野部分移至中央，将聚光镜升至最高位置，完全打开光圈，光源亮度增到最大，转动物镜转换器，使高倍镜离开通光孔，在观察部位中央的玻片上滴加浸油一滴，转动转换器，使油镜进入光路，镜头浸入油中。双眼在目镜上观察，同时缓慢转动细调节旋钮至物象清晰。如果没出现物象或者目标不理想，需要重新定位，在加油区之外重新定位时，应按：低倍→高倍→油镜的顺序；在加油区内重找时，应按：低倍→油镜顺序，不得经过高倍镜，以免镜油沾污镜头。观察结束后，将镜头转离中央，先用擦镜纸沾少许二甲苯，将附着在物镜镜头前端的浸油和玻片标本上的浸油擦去，然后再用干擦镜纸擦拭干净。

7.注意事项：（1）由于玻片标本使用的玻片厚度不同，焦距距离不同，在更换观察标本时，必须将物镜头归回到低倍镜状态，重新经过放置玻片标本低倍→高倍→油镜的顺序，否则，极易损坏标本和物镜头。（2）在旋转各个旋钮时，务必操作轻微，切忌粗暴旋转，以免造成损坏显微镜部件。