公猪站顶岗实习报告

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公猪站顶岗实习

技术总结报告题目:公猪站的工作流程与精液制做

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指导老师(签字)—————————

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目录

实习目的 (1)

公司简介 (1)

公猪站的工作职责 ..................................... 错误!未定义书签。

一、公猪站公猪舍的工作内容 ................. 错误!未定义书签。公猪的饲养与管理 .................................................... 错误!未定义书签。采精公猪的调教 ........................................................ 错误!未定义书签。采精的流程................................................................. 错误!未定义书签。公猪的采精频率 ........................................................ 错误!未定义书签。

二、公猪站精检室的工作内容

1、精液品质的检查 .................................................. 错误!未定义书签。

2、精液稀释流程 ...................................................... 错误!未定义书签。

3、精液制作完后实验室整理 .................................. 错误!未定义书签。

三、实习总结与体会 ................................. 错误!未定义书签。实习目的

通过实习,从而把书本上的理论和现实中的技术结合起来,让我们对所学过的各种仪器设备有一个感性的直观认识;并从实习中提高我们的交流团结协作能力,用所学过的知识去分析解决现实中的问题。除此外,实习还是我们在大学期间的最后一次特殊的学习,是一门意义重大的必修课,给我们畜牧兽医工作打下扎实的基础,同时也为继续深造的同学一次实践的机会。

公司简介

公猪站的工作职责

1、采精员负责采精公猪的调教和采精工作。

2、实验室操作人员负责精液的生产、贮存、运输

(一)公猪站公猪舍的主要工作内容

1、公猪的饲养与管理

种公猪选用335料,日喂2次,6.5月龄前喂313料,6.5月龄开始分5天过渡到335料, 7.5月龄以前每头每天喂2.0-2.7kg,7.5月龄以上每头每天喂2.8-3.2kg。避免一刀切盲目饲喂,在保证基本料量的基础上根据种公猪体况、膘情作适当的调整,严防过肥过瘦,保证种公猪有良好的健康水平,较好的性欲。

同时要注意饲料的保管与使用,保证饲料的新鲜度,做到先进先出,防止霉变,注意每次喂料要检查饲料的外观及生产日期等。

经常饲喂青料:青饲料用来喂猪具有营养全面、适口性好、易于消化,来源广、成本低的特点。所以要保证公猪每周至少能吃到3至

4餐的青饲料,以提高种公猪性欲、射精量和精子活力,一般喂量应控制在占日粮构成的10%左右,以免形成草腹。(以3kg/头/天计算,青饲料为6两/头/天)。如黑麦草,胡萝卜,油麦菜等。

公猪精液绝大部分是由水和蛋白质成分组成的,因此要获得活力好、密度高的优质精液,必须要供应种公猪营养全价的日粮,有合理的能量、蛋白质和钙磷水平,同时能满足公猪对维生素A、D、E及矿物质锌、硒等的需求。如蛋白氨基酸类、维生素类、电解质类等。

当公猪体况和精液质量有波动时,可适当添加营养药或抗应激药:如①色氨酸的缺乏会导致睾丸萎缩;②锌能减少公猪肢蹄病,提高公猪的免疫力和减轻公猪的应激反应;③精液密度下降时,可以加蛋白质或氨基酸之类的营养药;④精液畸型有升高的趋势时,就应适当补充VE粉或VC粉或开食补盐等;⑤如少精或无精,可添加熟鸡蛋或鱼肝油等。

注意氨基酸类营养药添加过多,精液密度很大,死精增多、保存时间缩短。

公猪的保健:应根据本场的疾病状况和公猪群的实际情况,计划每三个月一次西药、每个月一次中药的保健方案,保健方案视猪群情况而定,保健后适当添加营养药对猪群进行调理。

公猪的免疫与消毒防疫:疫苗免疫对公猪的精检品质影响很大,特别是在夏季高温的环境下注射变异弱毒疫苗的时候对公猪的应激更大,从而在疫苗注射前后3天需做好猪群的抗应激工作,且疫苗注射后,需添加氨基酸之类的营养药进行调理。

各单位应严格按照公司的免疫程序把需免疫的疫苗做好计划保质保量的免疫下去。

消毒防疫

a、猪舍内每周带猪消毒2次,消毒液每2月更换一次。

b、猪舍外脚踏池、洗手盘每周更换二次消毒液,坚决不能出现无消毒水的现象,消毒池内消毒液必须交替使用确保消毒效果。

c、猪舍内工具、饲料房及采精栏要定期进行严格的消毒。

d、要定期对公猪的免疫情况抽血进行血检,保证公猪站公猪健康状况良好。

2、采精公猪的调教

2.1.1后备公猪一般在7.5月龄,体重达130公斤,膘情良好即可开始调教。性欲很差的品种,体重达到120公斤,可以提前到6.5月龄调教。先调教性欲旺盛的公猪,下一头隔栏观察、学习。

2.1.2 挤出包皮积尿,清洗公猪的包皮部及后腹部,按摩公猪的包皮部。

2.1.3诱发爬跨:用发情母猪的尿或阴道分泌物涂在假母猪台上,同时模仿母猪叫声,也可以用其他公猪的精液、尿或口水涂在假母猪台上,目的都是诱发公2.2猪的爬跨欲。

2.2.1上述方法都不奏效时,可赶来一头发情母猪,让公猪空爬几次,在公猪很兴奋时赶走发情母猪,也可采取强制将公猪抬上假母猪台的方法。公猪爬上假母猪台后即可进行采精。

2.2.2对于难调教的公猪,可实行多次短暂训练,每周4~5次,每次15~20分钟,调教成功以后,每天采一次,连采3次;如果公猪的性欲很好,调教以后7天采一次;公猪性欲一般,则调教成功后2-3天采一次,连采3次。如果公猪表现任何厌烦、受挫或失去兴趣,应该立即停止调教训练。

2.2.3注意:调教公猪时,调教人员需保持足够的耐心和毅力,切记烦躁,在公猪很兴奋时,要注意公猪和自身的安全,采精栏必须设有安全角。同时假母猪台高度要适中,以45-50厘米为宜,可因猪不同而调节。为了确保公猪的注意力高度集中在假母猪台上,采精栏需干净简洁,只需地面铺防滑垫,以防公猪爬跨时滑倒,如果公猪在调教过程中受到伤害,将对采精产生恐惧心理,增加调教的难度。无论哪种调教方法,公猪爬跨后一定要进行采精,不然,公猪很容易对爬跨假母猪台失去兴趣。调教时,不能让两头或以上公猪同时在一起,以免引起公猪打架等,影响调教的进行和造成不必要的经济损失。

采精的流程

3、采精

3.1.1采精杯的制备:先在保温杯内衬一只一次性食品袋,再在杯口覆一层过滤纸,用橡皮筋固定,要松一些,使其能沉入2厘米左右。制好后放在37°C恒温箱备用。为了保证采精杯内的实际温度,采精杯盖与杯分开放在恒温箱内,采精杯需离加热管5厘米以上。为了确保恒温箱的保温效果,请注意爱护探头,同时恒温箱的气孔应打开。

3.1.2在采精之前先剪去公猪包皮上的被毛,防止干扰采精及细菌污染。将待采精公猪赶至采精栏,挤出包皮积尿。按摩公猪的包皮部,诱发公猪爬上假母猪台后,再一次挤干净包皮积尿,然后用0.1%高锰酸钾溶液清洗包皮部及后腹部,接着用清水洗净,抹干,最后用温暖清洁的手(有无手套皆可)握紧伸出的龟头,顺公猪前冲时将阴茎的"S"状弯曲拉直,握紧阴茎螺旋部的第一和第二摺,在公猪前冲时允许阴茎自然伸展,不必强拉。充分伸展后,阴茎将停止推进,达到强直、“锁定”状态,开始射精。公猪射精时阴茎头应紧贴采精杯过滤纸,使精液能立即流入采精杯,减缓精液温度的迅速下降。公猪射精过程中不要松手,否则压力减轻将导致射精中断。(注意在采精时不要碰阴茎体,否则阴茎将迅速缩回。)

3.1.3最初射出的少量(5毫升左右)精液不收集,有浓份精液出现时开始收集,直至公猪射精完毕(阴茎变软,停止抽动)时才放手,注意在收集精液过程中防止包皮部液体或其他如雨水等进入采精杯。公猪射精完毕立即将采精杯递进实验室进行精液品质检查,下班之前彻底清洗采精栏。

4、公猪的采精频率

采精频率:后备公猪调教合格后,采精间隔天数为7天;后备公猪调教出来如果密度低于1亿/毫升,采精间隔可以安排为8-10天,直至密度达到1亿/毫升以上。然后每3个月,对供精份数每次在平均份数以上的公猪的采精间隔减少1天,采精频率最终不得大于2周3天;对于采精量少于150毫升、精液密度低于1亿/毫升的老年公猪的采精间隔需重新调整为8-10天。夏季因热应激会降低供精,所以夏季慎重调整采精间隔。

采精与喂料间隔:保持采精后间隔1个小时以上,下班前45-60分钟开始喂料。

(二)、公猪站精检室的工作内容

1、精液品质的检查

4.3.1检查项目与方法

整个检查过程要迅速、准确,一般在5~10分钟内完成,以免时间过长影响精子的活力。精液质量检查的主要指标有:精液量、颜色、气味、精子密度、精子活力、畸形精子率等。

4.3.1.1精液量

后备公猪的射精量一般为150~200毫升,成年公猪为200~600毫升,使用能精确到0.5克的电子称称重量算体积,1克计为1毫升计算公猪的精液量。

4.3.1.2颜色

正常精液的颜色为乳白色或灰白色。如果精液颜色有异常,则说明精液不纯或公猪有生殖道病变,凡发现颜色有异常的精液,均应弃去不用。同时,对公猪进行检查,然后对症处理、治疗。

4.3.1.3气味

正常的公猪精液具有其特有的微腥味,无腐败恶臭气味。有特殊臭味的精液一般混有尿液或其它异物,一旦发现,不应留用。并检查采精时是否有失误,以便下次纠正做法。

4.3.1.4 密度

指每毫升精液中含有的精子数,它是用来确定精液稀释倍数的重要依据。正常公猪的精子密度为2.0~3.0亿/毫升,有的高达5.0亿个精子/毫升。为了提高公猪精液稀释后的活力,精子密度需通过采精间隔的调整,控制在2.5-3.5亿/毫升之间。检查精子密度的方法常用以下两种:

A、用精子密度仪测量法:它极为方便,检查时间短,准确率高。若用国产分光光度计改装,也较为适用。该法有一缺点,就是精液中的异物或精液的颜色会影响其测量值,从而其测量值只能是一个大概的估计,应予以重视。

B、红细胞计数法:该法最准确,但速度慢,其具体操作步骤为:

用不同的微量取样器(如移液枪)分别取具有代表性的原精100微升和3%的氯化钾溶液900微升,在试管中轻轻上下缓慢的搅拌,使之混匀,搅拌时试管中不能出现气泡。然后在预热过的计数板的计

数室上放一预热好的盖玻片,用移液枪吸取试管中部搅匀的精液200微升,从盖玻片的下边缘滴入一小滴(不宜过多),让精液利用液体的表面张力充满计数室,同样计数室内也不能产生气泡。

然后放置一旁晾干(或放恒温板上烘1至2分钟),待精子全部沉降到计数室底部,可以清晰的看清精子的形状时,将计数板置于载物台上夹稳,先在10倍的低倍物镜下找到计数室后,再转换成40倍的高倍物镜下计数5个中方格内的精子总数,将该数乘以50万即得原精液的精子密度。也就是原精与氯化钾按1:10的倍数稀释,密度的计算公式为:密度=精子总数(n)*50万。但实际操作中,精液的密度较大,所以我们用移液枪取200微升的原精来做计数板计算密度,密度的计算公式相应的变化如下:

○1放一次氯化钾,即1800微升,原精与氯化钾按1:10倍稀释,即200/(200+1800),密度=0.005*n (n为数出来的精子总数,0.005为50万,下同);

○2放两次氯化钾,即3600微升,原精与氯化钾按1:19倍稀释,即200/(200+3600),密度=0.005*n*1.9

○3放三次氯化钾,即5400微升,原精与氯化钾按1:28倍稀释,即200/(200+5400),密度=0.005*n*2.8,以此类推。

4.3.1.4.1 50万的由来

在计数板上会标有“1/400mm2”和“0.10mm”的字样,这是表示计数室一个小方格的面积S=1/400 mm2;计数板的高度为H=0.1mm 从以上两项则得出:一个计数室的体积为:V=1/400 mm2×16(一个中方格有16个小方格)×25(一个计数室有25个中方格)×0.1mm=0.1mm3=10-4ml

单位换算:1ml=1cm3=10mm*10mm*10mm=103mm3

假定数5个中方格的总精子数为n个;则一个计数室的总精子数为5n

现在计算出1:10稀释后的密度C,C=一个计数室的总精子数/ 计数室的总体积=5n / 10-4 毫升=5n*104毫升

那么原精的密度=10C(原精通过1:10稀释做成计数板)=10*5n*104(个/毫升)=500000n(个/毫升)=50万*n(个/毫升)=0.005亿*n(个/毫升)

4.3.1.4.2 计数

计数时算计数板双横线左上、左下、右下、右上、中央的5个中方格,即80个小方格(即如下图标示的1、2、3、4、5的中方格)的精子总数。

若精子位于中方格线上,一般只计数中方格的上方和左方线上的精子,口诀为:“数上不数下,数左不数右”(如下图用红圈标出),以减少误差。计数时应不时调节细准焦螺旋,才能观察到不同深度的精子。

4.3.1.4.3 3%氯化钾的配制

用精密电子天平分别称量氯化钾9克,蒸馏水291克,将称好的氯化钾加入装好291克蒸馏水的可调定量加液器中,搅拌混匀即可。

4.3.1.4.4 氯化钾倍数的确定

根据公猪以往的精检记录及当天采集的精液的实际情况大概估计放多少倍的氯化钾做计数板,标准是:计数板上每个小方格内含有3-4个左右精子数目为氯化钾适宜的体积,即数出五个中方格精子总

数大概为300个左右。具体为○1当密度≤1.5亿/毫升时,放氯化钾1800微升;○2当1.5亿/毫升<密度<3亿/毫升时,放氯化钾3600微升;○3当3亿/毫升≤密度≤4.5亿/毫升时,放氯化钾5400微升,以此类推。

4.3.1.4.5 注意

计数板使用前需在显微镜下镜检确保其无杂质才能使用;可调定量加液器的刻度量程设定为1.8毫升,一般不随意更改设定值;一般使用原精做计数板算密度,不建议精液1:1稀释后做计数板算密度,因为操作麻烦误差也比较大。

4.3.1.5 精子活力

精子活力的高低与受配母猪的受胎率和产仔数有较大的关系。因此,每次采精后及使用精液前,都要进行活力的检查,检查精子活力前必须使用37℃左右的恒温板预热:一般先将载玻片放在37℃恒温板上预热2至3分钟,用玻璃棒轻轻搅匀精液然后用移液枪从精液杯中部取样100微升滴于预热好的载玻片上,盖上同样预热好的盖玻片,放置在显微镜(目镜16×,物镜10×)下查看精液活力。为了避免一次取样不均匀造成误差,一般要求按相同的方法取样两次查看活力,最后取两次平均值记录该头公猪的活力,并且做好记录。如果两次取样活力差异较大,则需进行第三次取样。精子活力一般采用10级制,即在显微镜下观察一个视野内作直线运动的精子数,若有90%的精子呈直线运动则其活力为0.9;有85%呈直线运动,则活力为0.85;依次类推。活力等级只需精确到0.05即可。新鲜精液的精

子活力以高于0.7为正常,稀释后的精液;当活力低于0.65时,则弃去不用。

精子活力10级制评判标准

0.6级以下0.6—0.7级0.7—0.8级0.8级以上

在一个视野中有60%以下的精子有微弱直线运动,运动速度缓慢或较多精子粘连在一起,运动轨迹不规则。

在一个视野中有60%—70%的精子有明显的直线运动轨迹或有少部分精子粘在一起。

在一个视野中有70%—80%的精子有很明显涡式流动,运动速度很快,呈较明显的直线运动轨迹。

在一个视野中有80%以上的精子有翻腾急流涡式流动,尾部呈鞭状快速摆动,呈很明显的直线运动轨迹。

4.3.1.6 畸形精子率

畸形精子包括巨型、短小、断尾、断头、大头、小头、双头、双尾、折尾、卷尾、顶体脱落、原生质滴等精子。它们一般不能作直线运动,受精能力差,但不影响精子的密度。公猪的畸形精子率一般不能超过18%,否则应弃去。

每份经过检查的公猪精液,都要登记《公猪精液品质检查记录》,以备对比和总结。

4.3.1.7不合格精液或公猪的处理办法

不合格精液的处理:公猪站发现不合格的精液一律作废,不得用于生产,保存期低于半天的精液尽量不用于配种。

不合格公猪的处理:按《五周四次精检法》进行复检,五周四次精检法首次精检不合格的公猪,7天后复检。复检不合格的公猪,10天后采精,作废,再隔4天后采精检查。仍不合格者,10天后再采精,作废,再隔4 天后作第四次检查。经过连续五周四次精检,一直不好转的公猪建议作淘汰处理,若中途检查合格,视精液品质状况酌情使用。

精液稀释

精液稀释液的配制

常用稀释剂配方:

配制稀释剂要用精密电子天平,不得更改稀释液的配方或将不同的稀释液随意混合。刚配制的稀释液PH值不稳定,对精子活力的影响较大,配制好后应先放置1小时以上才用于稀释精液。液态稀释液在4℃冰箱中保存不超过24小时,超过贮存期的稀释液应废弃。抗生素的添加,应在稀释精液前加入到稀释液里,太早易失去效果。

4.4.2 稀释液的配制的具体操作步骤

所用药品要求选用分析纯,对含有结晶水的试剂按摩尔浓度进行换算,如有杂质需要用滤纸过滤。按稀释液配方,用称量纸和电子天平按1000ml和2000ml剂量准确称取所需药品,称好后装于密闭袋中。使用1小时前将称好的稀释剂溶于定量的双蒸水中,用磁力搅拌器加速其溶解(搅拌器的转速调到5—7级,搅拌5—10分钟即可)。稀释

液配好后及时贴上标签,标明品名、配制时间和经手人等,认真检查配好的稀释液,发现问题及时纠正。使用时放在水浴锅内进行预热,水浴锅温度设置不能超过39度。

4.4.3 电子天平秤的校正

配制稀释剂(即药品)要用精密电子天平,电子天平应使用砝码或已知重量的电子天平盖校正,校正方法:在开机状态下,按一下白色的校正键,显示数字“〔500”,往称盖上放500克的砝码,等待2秒钟,听到“滴”的一声响,数字显示为“+500”,即电子称已校正完成。(一般猪场里面一盒砝码的规格为205克而不是500克,此时需连续按2下白色的校正键,显示数为“〔200”,往称盖上放200克的砝码,等待2秒钟,听到“滴”的一声响,数字显示为“+200”,此时电子同样已校正好〕

精液的稀释处理

处理精液必须在恒温环境中进行,处理时,严禁太阳光直射精液,阳光对精子有极强的杀伤力。稀释液应在采精前准备好,并预热好。精液采集后要尽快稀释,避免精液温度每5分钟下降一度,短时间内精液温差相差太大将对精子造成严重的打击。未经精液品质检查或活力在0.7以下的精液不用于稀释。

精液稀释头份的确定

计算方法:人工授精的正常剂量一般为40亿个精子/头份,体积为80ml,假如有一份公猪的原精液,密度为2亿/ml,采精量为150ml,

稀释后密度要求为40亿/80ml头份。则此公猪精液可稀释150×2/40=7.5头份,需加稀释液量为(80×7.50-150)ml=450ml。

将稀释液加热至32~38℃,用干净的温度计(稀释时用两根温度计,一根用于测定精液温度,一根用于测定稀释液温度)测量原精液温度并调节稀释液的温度和原精液的温度一致(两者相差1℃以内),注意:必须以精液的温度为标准来调节稀释液的温度,不可逆操作。将精液移至2000ml大塑料杯中,稀释时左手拿着精液杯,精液杯倾斜45度角左右,右手将调温好的稀释液根据原精体积的多少按1:1的稀释量沿杯壁缓缓加入精液中,然后用玻璃棒轻轻搅拌,稀释过程中最好停顿2次对所稀释的精液进行搅拌,使之混合均匀。(也可用玻璃棒导流,玻璃棒下部伸入精液中)。稀释过程中尽量减少精液的震荡,稀释后静置片刻再作精子活力检查,查看活力有无下降,活力下降必须查明原因并加以改。如需高倍稀释,进行完1:1低倍稀释1分钟以后再将余下的稀释液缓慢分步加入其中。因精子需要一段缓冲时间,让精子与稀释液充分相互渗透均匀,不能将稀释液完全一次性倒入精液中。

4.4.6 混精的制作

两头或两头以上公猪的精液1:1稀释或完全稀释以后可以做混精。做混精之前需各倒一小部分混合起来,检查活力是否有下降,如有下降则不能做混精。把温度较高的精液倒入温度较低的精液内,每一步都需检查活力。精液分等级使用后,做混精的原则为:一级精液同一级精液混;二级精液同二级精液混;三级精液尽量不用。

用具的洗涤

精液稀释的成败,与所用仪器的清洁卫生有很大关系。所有使用过的烧杯、玻璃棒及温度计,都要及时用蒸馏水洗涤,并进行高温消毒,以保证稀释后的精液能适期保存和利用。

精液的分装

以前没使用过的精液瓶和输精管(包括与精液直接接触的所有物资,如稀释液粉,过滤纸,一次性食品袋,蒸馏水等),应先检查其对精子的毒害作用。检查无害才能使用在生产中。稀释好精液后,先检查精子的活力,活力无明显(0.05之内)下降则可进行分装。按每头份60-80毫升进行分装,在用瓶子分装时,尽量减少精液与空气的接触,应排掉瓶子里的空气(将输精瓶捏扁后加盖密封),以减少运输中震荡对精子的应激。分装后的精液贴上标签,清楚标明公猪站号、公猪品种、采精日期及精液编号。

4.6 精液的保存

精液生产出来以后,需保存1-2份精液,持续1-2天的活力检查,并做好记录,定期总结。需保存的精液先横放在铺有毛巾的托盘里,上面盖好毛巾,不要急于放到恒温冰箱内,让其在22℃左右室温下放置1-2小时后放入17℃(变动范围16-18℃)冰箱中。冰箱中必须放有灵敏温度计,随时检查其温度。分装精液放入冰箱时,不同品种精液应分开放置,以免拿错精液。精液应平放,可叠放。精液从放入冰箱开始,每隔12小时,要小心摇匀精液一次(上下颠倒),防止精子沉淀聚集造成精子死亡。一般可在早上上班、下午下班时各摇匀一

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