胞外组蛋白表达纯化和细胞毒性机理研究

目录

摘要 (3)

Abstract (4)

目录 (6)

缩略词 (9)

第一章绪论 (11)

1.1 胞外组蛋白概述 (11)

1.2 中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular traps，NETs） (11)

1.3 胞外组蛋白在脓毒症中的作用及现有研究缺陷 (12)

1.4 组蛋白细胞毒性研究的局限性 (12)

第二章重组人组蛋白H3、H4和H3/H4复合物的表达纯化及理化性质分析 (17)

2.1 前言 (17)

2.1.1 脓毒症概述 (17)

2.1.2 胞外组蛋白概述 (18)

2.1.3 组蛋白与脓毒症的关系 (19)

2.1.4 现有胞外组蛋白定量方法的缺陷 (19)

2.1.5 组蛋白结构特征及分子筛凝胶层析电泳原理 (20)

2.2 材料和方法 (20)

2.2.1 试剂材料 (20)

2.2.2 设备 (21)

2.2.3 实验方法 (21)

2.3 结果 (25)

2.3.1 组蛋白纯化 (25)

2.3.2 组蛋白在37°C稳定性实验 (29)

2.3.3 临床标本组蛋白含量测定 (30)

2.4 讨论 (33)

2.4.1 本研究对组蛋白纯化手段的优化 (33)

2.4.2 稳定存在的组蛋白对精确定量和毒性机制研究的意义 (33)

2.4.3 组蛋白精确定量在临床治疗中的应用价值 (34)

2.4.4 细胞损伤检测方法的比较 (35)

2.5 参考文献 (35)

第三章重组组蛋白H3/H4复合物的细胞毒性及其机制研究 (38)

3.1 前言 (38)

3.1.1 组蛋白毒性研究概述 (38)

3.1.2 组蛋白序列特征及白蛋白拮抗作用 (39)

3.1.3 ITC等温滴定量热法 (40)

3.1.4 IP免疫沉淀和CO-IP免疫共沉淀技术 (40)

3.1.5 组蛋白毒性相关信号分子检测 (40)

3.2 材料和方法 (44)

3.2.1 试剂材料 (44)

3.2.2 设备 (45)

3.2.3 实验方法 (45)

3.3 结果 (48)

3.3.1 高剂量组蛋白短时间细胞毒性 (48)

3.3.2 低剂量组蛋白长时间细胞毒性 (53)

3.3.3 内毒素测定-凝胶法 (59)

3.3.4 白蛋白与组蛋白相互结合作用的测定 (59)

3.3.5 组蛋白结构域分析和小肽活性实验 (62)

3.3.6 组蛋白毒性相关信号分子检测结果 (63)

3.4 讨论 (67)

3.4.1 本研究对组蛋白毒性处理条件的改进 (67)

3.4.2 低剂量组蛋白长时间毒性机制研究的临床意义 (67)

3.4.3 组蛋白与白蛋白的相互作用 (68)

3.4.4 芯片检测结果 (69)

3.5 参考文献 (69)

第四章结论 (74)

致谢 (75)

攻读学位期间发表（或录用）的学术论文 (76)