γ-谷氨酰基转移酶测定试剂盒(GCANA底物法)产品技术要求zsbk
γ-谷氨酰基转移酶测定试剂盒（GCANA底物法）
适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。
1.1包装规格
干粉型
试剂1（R1）：10mL×10，试剂2（R2）：100mL×1；
试剂1（R1）：50mL×4，试剂2（R2）：100mL×2。
1.2主要组成成分
试剂1（R1）干粉：
L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺 2.9mmol/L
试剂2（R2）液体：
Tris缓冲液 100mmol/L
双苷肽 100mmol/L
2.1 外观
试剂盒中各组件的外观应满足：
2.1.1试剂1（R1）应为浅黄色干粉，外包装完整无破损。
2.1.2试剂2（R2）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
2.2 净含量
液体试剂净含量不少于标示值。
2.3 试剂空白吸光度
在波长405nm（400nm～420nm）处（光径1cm），试剂空白吸光度（A）应≤0.700。试剂空白吸光度变化率（△A/min）应≤0.005。
2.4准确度
测定GBW(E)090593，相对偏差应不超过±10％。
2.5分析灵敏度
对应于活性为50U/L的GGT所引起的吸光度变化率（△A/min）应在0.010～0.050范围内。
2.6批内瓶间差
）应≤5%。
批内瓶间差的变异系数（CV
瓶间
2.7批间差
测试同一样本，批间差（R）应≤6%。
2.8线性范围
在[3，450 ]U/L范围内，线性相关系数（r）应≥0.990；
在（30，450]U/L范围内，线性相对偏差应不超过±10％；
在[3，30] U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±3 U/L。
2.9稳定性
2.9.1效期稳定性
原包装的试剂盒在2℃～8℃避光贮存，有效期为36个月。试剂盒有效期满后3个月以内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
2.9.2 开盖稳定性
复溶后开盖，在2℃～8℃避光保存，可稳定28天。稳定期满后1天内，试剂性能符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
r-谷氨酰转移酶
r-谷氨酰转移酶 【原理】r－谷氨酰转移酶GGT，旧称r－谷氨酰转肽酶r－GT，它是催化谷胱甘肽上的r－谷i氨酰基转移到另一个肽或另一个氨基酸上的酶。GGT生要存在干细胞膜和微粒体上，参与谷胱甘肽的代谢。肾脏、肝脏和胰腺含量丰富，但血清中GGT主要来自肝胆系统。GGT在肝脏中广泛分布于肝细胞的毛细胆管一侧和整个胆管系统，因此当肝内合成亢进或胆汁排出受阻时，血清中GGT增高[1]。 【参考值】硝基苯酚速率法（37℃）：＜50U/L。 【临床意义】 （1）胆道阻塞性疾病：原发性胆汁性肝硬化、硬化性胆管炎等所致的慢性胆汁淤积，肝癌时由于肝内阻塞，诱使肝细胞产生多量GGT同时癌细胞也合成GGT均可使GGT明显升高，可达参考值上限的10倍以上。此时GGT、ALP、5－核苷酸酶（5－NT）、亮氨酸氨基肽酶（LAP）及血清胆红素呈平行增加。 （2）急、慢性病毒性肝炎、肝硬化：急性肝炎时，GGT呈中等度升高；慢性肝炎、肝硬化的非洁动期，酶活性正常，若GGT持续升高，提示病变洁动或病情恶化。 （3）急、慢性酒精性肝炎、药物性肝炎：GGT可呈明显或中度以上升高（300～1000U/L），ALT和AST仅轻度增高，甚至正常。酗酒者当其戒酒后GGT可随之下降。 （4）其他：脂肪肝、胰腺炎、胰腺肿瘤、前列腺肿瘤等GGT亦可轻度增高。 ★★★下面是参考： 谷草转氨酶在心肌细胞中含量最高，但肝脏损害时其血清浓度也可升高，临床一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。谷草转氨酶的正常值为0～40μ/L，当谷丙转氨酶（ALT）明显升高，谷丙/谷草比值＞1时，就提示有肝实质的损害。 γ-谷氨(酰转肽酶（γ-GT）广泛分布于人体组织中，肾内最多，其次为胰和肝，胚胎期则以肝内最多，在肝内主要分布于肝细胞浆和肝内胆管上皮中，正常人血清中γ-GT主要来自肝脏。正常值为3～50μ/L（γ-谷氨酰对硝基本胺法）。此酶在急性肝炎、慢性活动性肝炎及肝硬变失代偿时仅轻中度升高。但当阻塞性黄疸时，此酶因排泄障碍而逆流入血，原发性肝癌时，此酶在肝内合成亢进，均可引起血中转肽酶显著升高，甚至达正常的10倍以上。酒精中毒者ν-GT亦明显升高，有助于诊断酒精性肝病。在急性肝炎时，ν-GT下降至正常较转氨酶为迟，如ν-GT持续升高，提示转为慢性肝病。慢性肝病尤其是肝硬化时，ν-GT持续低值提示预后不良
腺苷脱氨酶测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求lepu
腺苷脱氨酶测定试剂盒（过氧化物酶法） 适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中腺苷脱氨酶的活性。 1.1 规格 试剂盒是由试剂1和试剂2组成的液体双试剂，校准品和质控品均为冻干粉。规格及装量见表1。 表1 规格及装 量
1.2 主要组成成分试剂1主要组分: 试剂2主要组分： 校准品主要组分： 质控品主要组分：
2.1 净含量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.2 外观 试剂1：无色或淡黄色透明溶液；试剂2：无色或淡黄色透明溶液；校准品：白色至浅黄色冻干粉，复溶后为无色至浅黄色透明液体；质控品：白色至浅黄色冻干粉，复溶后为无色至浅黄色透明液体。外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。 2.3 试剂空白 2.3.1 试剂空白吸光度 在546nm（540nm-550nm）处测定试剂空白吸光度，应≤0.3； 2.3.2 试剂空白吸光度变化率 试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.1。 2.4 分析灵敏度 测试100U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.0065 。 2.5 准确度 使用国际参考品（BCR647）对试剂（盒）进行测试，相对偏差应不大于±15%。 2.6 重复性 变异系数（CV）应不超过10％。 2.7 线性 2.7.1在(0,150]U/L区间内，线性回归的相关系数r应不低于0.990；
2.7.2（0,40）U/L区间内绝对偏差不超过±6U/L；[40,150]U/L区间内相对偏差不超过±15%。 2.8 批间差 对同一份样品进行重复测定，相对极差＜15％。 2.9校准品批内瓶间差 变异系数（CV）应≤10%。 2.10 质控品批内瓶间差 变异系数（CV）应≤10%。 2.11溯源性 根据GB/T 21415-2008的规定，本试剂盒内校准品溯源至国际参考物质BCR647。 2.12质控品赋值有效性 质控品测值应在靶值范围内。 2.13 稳定性 2.1 3.1效期稳定性 原包装的试剂盒在2℃～8℃条件下贮存达到18个月后的试剂进行检测，应符合2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.12之规定。 2.1 3.2复溶稳定性 a)校准品复溶后在2℃～8℃密闭避光保存，稳定期为7天，稳定期满后1天内，性能应符合2.5之规定。 b)质控品复溶后在2℃～8℃密闭避光保存，稳定期为7天，稳定期满后1天内，性能应符合2.12之规定。
y谷氨酰转移酶偏高是怎么一回事
y谷氨酰转移酶偏高是怎么一回事 首先大家要知道y谷氨酰转移酶，是什么意思它是反映自己肝功能的重要指标。所以大家一定要保护肝脏这些器官，如果保护不当被病毒感染时就会使y谷氨酰转移酶偏高。所以大家一定要注意平时的一些小，当一些良好的小习惯养成的时候也是对自己身体的一种保护。那么现在就让我们来了解一下y谷氨酰转移酶偏高危害吧。 γ-谷氨酰转肽酶简称γ-GT或GGT。它存在于肾、胰、肝、脾、肠、脑、肺、骨骼肌和心肌等组织中，在肝内主要存在于肝细胞浆和肝内胆管上皮中。GGT对各种肝胆疾病均有一定的临床价值。在大多数肝胆疾病中，其活力均升高，但在不同的肝胆疾病中，其升高的程度与其他血清酶活性的相对比例不尽相同。γ-谷氨酰转肽酶(GGT) 是一种方便的、高敏感的、低花费、常用的检测酶类之一。它作为肝脏功能异常和酗酒的标志已广泛的被临床接受，主要用于诊断肝胆疾病。
γ-谷氨酰转肽酶(GGT)，临床意义，肝脏疾病，酒精肝 人体各组织均含有GGT，尤以分泌或吸收能力强的富含蛋白质的组织中最多，如胆管、肾脏、胰腺、附睾等。人体各器官中GGT含量按下列顺序排列：肾、前列腺、胰、肝、盲肠和脑。而在肾脏、胰腺和肝脏中，此酶的含量之比约为100：8：4(1)。肝脏含酶丰富,酶参与肝脏复杂的代谢功能,由于肝脏病理改变,使酶含量改变,故反映在血清中酶的浓度也有变化,根据血清酶活性的增高或降低,可判断肝脏病变的性质和程度。人血清中的γ谷氨酰转肽酶主要来自肝脏，因此具有较强的特异性。在肝功能检查中，经常会出现γ谷氨酰转肽酶偏高的现象，为探讨引起γ谷氨酰转肽酶偏高的原因，和对肝功能的影响。 现在大家都知道y谷氨酰转移酶偏高的危害了，所以大家一定要注意自己的一些小习惯。不要随便的暴饮暴食，这样的习惯只会一时爽后悔终身。可见平时的生活中许多的小习惯，看着是个小问题随时都会变成一个大问题。所以大家一定要养成一些良好的习惯，这样对做任何事都有好处。相信通过大家的努力，自己身体都会健康的!
腺苷脱氨酶ADA测定
腺苷脱氨酶ADA测定 1检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。 2原理 ADA 腺苷+H2O 肌苷+NH3 PNP 肌苷+Pi 次黄嘌呤+1-磷酸核糖 XOD 次黄嘌呤+2 H2O+2O2尿酸+2 H2O2 POD H2O2 +4-AAP+EHSPT 4H2O+苯醌类 3标本要求 3.1使用新鲜血清,不使用血浆. 3.2在采集血液后2h分离血清.
3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次. 3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定. 4试剂 4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司ADA试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1试剂组成 试剂1 60 ml,试剂主要成分如下: Tris—HCL缓冲液（PH8.0）50.0mmol/L XO 0.2u/ml 4-AAP 2.0mmol/L POD 0.6u/ml PNP 0.1u/ml NaN3 0.2g/L 试剂2 60 ml,试剂主要成分如下: Tris—HCL缓冲液（PH4.0） 50.0mmol/L EHSPT 2.0 mmol/L 腺苷 10.0mmol/L
4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 4.1.3 试剂稳定性与贮存：2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。试剂1 与试剂2 启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定20天。 4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 4.2 校准品： 4.2.1采用以检测用水为空白的方式进行校准。 4.2.2校准及校准频次的要求：正常情况下，应每周至少对测定进行一次校准。当发生下列情况时（如：使用的试剂批号发生改变时、使用的仪器进行维修、保养或关键部件进行更换后、质控品的测定结果发生漂移或超出规定的范围等），应重新对测定进行校准后再对患者的样本进行检测。 5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪
实验三预习报告硝酸还原酶和谷氨酰胺合成酶活性的测定
实验三预习报告硝酸还原酶和谷氨酰胺合成酶活性的测定实验三、硝酸还原酶和谷氨酰胺合成酶活性的测定一、硝酸还原酶的测定[原理]: 硝酸还原酶(NR)是植物氮素同化的关键酶，它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐，产生的亚硝酸盐与对-氨基苯磺酸(或对-氨基苯磺酰胺)及α-萘胺(或萘基乙烯胺)在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。 生成的红色偶氮化合物在540nm有最大吸收峰，可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以每克鲜重含氮量表示，即以-1-1ug.g.h为单位。NR的测定可分为活体法和离体法。活体法步骤简单，适合快速、多组测定。离体法复杂，但重复性较好。 [试剂] 1(亚硝酸钠标准溶液:准确称取分析纯NaNO0.9857g溶于去离子水后定容至1 2-1000ml，然后再吸取5ml定容至1000ml，即为含亚硝态氮1ug.ml的标准液; 2(0.1molpH7.5的磷酸缓冲液:NaHPO.12HO30.0905g与NaHPO.2HO 242242 2.4965g加去离子水溶解后定容至1 000ml; -13(1%(W/V)溶液:1.0g 对氨基苯磺酸溶于100ml 3 mol.LHCL中(25ml浓-1盐酸加水定容至100ml 即为 3 mol.LHCL); (0.02%(W/V)萘基乙烯胺溶液:0.020g萘基乙烯胺溶于100ml 去离子水中，4 贮于棕色瓶中; -1-15(0.1mol.LKNO溶液:2.5275g KNO溶于250Ml 0.1mol.LPh7.5的磷酸缓冲33 液中; -16(0.025mol.LPh 8.7 的磷酸缓冲液:8.864 0g NaHPO12HO，0.0570g 24.2
谷氨酰转移酶测定
谷氨酰转移酶测定 1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。 2 实验原理 L-γ-谷氨酰-3羧基-4硝基苯胺 + 甘氨酰甘氨酸GGT L-γ-谷氨酰甘氨酰甘氨酸 + 5-氨基-2-硝基苯甲酸盐 在上述反应中， 5氨基2硝基苯甲酸盐的生成速率与样本中γ谷氨酰基转移酶的活力成正比，通过在405 nm处监测吸光度的上升速率，即可测得样本中γ谷氨酰基转移酶的活性。 3 标本： 3.1 病人准备：无特殊。 3.2 类型：血清或EDTA血浆。 3.3 标本存放：室温可保存8小时；2～8℃可保存3天；-20℃保存至少可稳定1周。
3.4 标本运输：常温条件下保存运输。 3.5 标本拒收标准：细菌污染的标本。 4 实验材料 4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司GGT试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成 试剂1（R1）：Tris缓冲 液100mmol/ L 甘氨酰甘氨酸 125mmol/L 试剂2（R2）：Tris缓冲 液100mmol/ L L-γ-谷氨酰 -3羧基-4硝基 苯胺 14.5mmol/L 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 4.1.3 试剂稳定性与贮存:2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。 4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
4.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。 4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的GGT校准品对自动分析仪进行校准。 4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。 5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪 6 操作步骤 6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。 6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。 6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。
ADA 酶比色法
腺苷脱氨酶（ADA ）测定试剂盒 （酶比色法） 使用说明书 【产品用途】 本试剂用于测定血清、胸腹水、脑脊液中的腺苷脱氨酶活性。 【临床意义】 肝脏疾病时，本酶活性往往升高，有助于黄疸的鉴别诊断。在阻塞性黄疸时，此酶活性升高很少，而在肝实质性损伤时，此酶和转氨酶往往同时升高，特别在慢性活动性肝炎和肝硬变时，转氨酶阳性率较低，增高幅度也不明显，而ADA 活性的阳性率可达90%左右，增高程度也较明显。同时ADA 检测对白血病、伤寒、出血热也有辅助诊断作用。 测定胸腹水及脑脊液标本中的ADA 活性，有鉴别诊断价值。结核性胸腹水中ADA 活力显著高于癌症及炎症胸腹水中ADA 活力，对早期诊断结核性胸、腹膜炎有较高的敏感性和一定的特异性。此外，脑脊液ADA 检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标，结核性脑膜炎ADA 活性升高，病毒性脑膜炎不升高。 【适用范围】 液体双试剂，即开即用，自动化分析仪用。 【产品规格】 R 1 50ml ×2 R 2 50ml ×1 【试剂成份】 R 1 Tris-HCl pH8.0 50mM 4-AA 2mM PNP 0.1kU/mL XOD 0.2kU/mL POD 0.6kU/mL 稳定剂 R 2 Tris-HCl ph4.0 50mM 腺苷 10mM EHSPT 2mM 【检测原理】 腺苷在腺苷脱氨酶作用下脱氨基形成次黄苷，次黄苷在PNP 作用下生成次黄嘌呤，次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶（XOD ）作用下转化为尿酸和过氧化氢（H 2O 2），H 2O 2与EHSPT 和4-氨基安替比林（4-AA ）反应生成醌色物，显色强度与ADA 活性成正比。 腺苷?? ?→?ADA 次黄苷 + NH 3 次黄苷 + Pi ??→?PNP 次黄嘌呤 + 核酸-1-磷酸 次黄嘌呤 + 2H 2O + 2O 2???→?XOD 尿酸+ 2H 2O 2 2H 2O 2 + 4-AA + EHSPT ??→?POD 醌亚氨染料+ H 20 【样本采集】 新鲜非溶血血清或血浆，ADA 在4℃时可稳定1周。 【测定方法】 1.试剂1、2在使用前恢复到37℃。 2.180μl R 1与5μl 血清（浆）样品混合，在37℃孵育3min-5min 。 3.加入90μl R 2孵育3min ，在540nm 或546nm 处测2分钟，计算每分钟平均光度变化△A/min 。 【参考范围】 血 清：4~24U/L 胸腹水：0~35 U/L 脑脊液：0~6 U/L 各实验室应建立自己的参考范围; 【产品性能】 1.试剂空白吸光度：A 340nm(1cm) ≥0.800 2.本试剂线性范围：0-150 U/L 3.精密度：批内CV ≤5% 批间相对极差CV ≤8% 4.准确度：相对偏差≤±10% 【试剂保存】 R 1、R 2为液体试剂，直接使用。2-8℃避光稳定1年。 【注意事项】 1.本方法特异测定ADA ，其它核苷与本方法不发生反应。 2.血清胆红素达20mg/dL ，血红蛋白100mg/dL ，甘油750mg/dL ，抗坏血酸4mg/dL 对实验无干扰。 【单位意义】 在37℃条件下，每分钟用于产生1 umol 次黄苷的量定义为一个单位的ADA 。 【生产许可证】 【注册标准号】 【注册证号】
谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)试剂盒说明书
货号: QS1807 规格：50管/24样谷胺酰胺合成酶（Glutamine synthetase，GS）试剂盒说明书 可见分光光度法 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定 测定意义： GS（EC6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物体内氨同化的关键酶之一，催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺，不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性，而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。 测定原理： GS在ATP和Mg2+存在下，催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸，在酸性条件下与铁形成红色的络合物；该络合物在540nm处有最大吸收峰，可用分光光度计测定。 自备实验用品及仪器： 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 试剂的组成和配制： 提取液：30mL×1瓶，4℃保存。 试剂一：10mL×1瓶，-20℃保存。 试剂二：10mL×1瓶，-20℃保存。 试剂三：粉剂×2瓶，-20℃保存。用时每瓶加入5mL蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存。 试剂四：10mL×1瓶，4℃避光保存。 样本测定的准备： 1、细菌、细胞或组织样品的制备： 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 测定步骤： 1、分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。 第1页，共2页
血清腺苷脱氨酶
一、血清腺苷脱氨酶（ADA）临床意义： 血清ADA活性增高见于： ①肝脏疾病：急性黄疸性肝炎，肝细胞出现损伤，在黄疸尚未出现前，可见增高，因ADA分子量较ALT小，当肝细胞轻度受损时ADA比ALT先释入血内，慢性肝炎活动期，慢性迁延性肝炎升高明显；肝硬化，原发性肝癌时，ADA活性也升高。 ②肿瘤引起的阻塞性黄疸，前列腺癌和膀胱癌，网状细胞瘤，淋巴瘤，溶血性贫血，风湿热，伤寒，痛风，重症地中海贫血，骨髓性白血病，结核，自身免疫性疾病，传染性单核细胞增多症和心力衰竭等均可引起此酶升高。 ③结核性胸腹水ADA活性显著增高，癌性胸腹水不增高，而血清中ADA活性二者无明显差别，故测定胸腹水中ADA活性有助于将两者鉴别。 ④结核性脑膜炎ADA显著增高，而病毒性脑膜炎则不增高，颅内肿瘤及中枢神经系统白血病稍增高，所以脑脊液ADA检测可以作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标。 血清ADA活性降低见于：见于重度免疫缺陷症状。 二、血清单胺氧化酶（MAO）临床意义 血清中MAO和结缔组织中的MAO性质相似，能促进结缔组织的成熟，在胶原形成过程中，参与胶原成熟的最后阶段架桥形成，使胶原
和弹性硬蛋白结合。临床上测定血清MAO主要用于诊断肝硬变。肝硬变时，血清MAO活性常明显增高，阳性率可高达80%以上。 三、前白蛋白(PA) 临床意义 PA 降低： 1.诊断和监测营养不良：血清PA在无感染情况下，是儿童营养不良的灵敏指标，在蛋白质-热卡不足型营养不良（PCM）中随着营养状况的改善，多数病人血清PA水平显著升高而血清TP、Alb未见明显升高。 2.诊断肝病：肝脏疾病时血清PA变化较Alb早，有30％肝病患者血清Alb正常而PA降低。各型肝炎患者（病毒性肝炎、乙醇性肝炎和药物性肝炎）血清PA水平均有不同程度降低，以肝硬化和重症肝炎降低最著。对重型肝炎预后有较大的参考价值，PA明显上升，预后良好，ＰＡ持久降低者，预后险恶。 3.诊断急性时相反应，PA可作为癌症的筛选指标。 PA升高： 肾病综合征 >500 mg/L （此时ALB<30g/L），发作期 PA ↑ ALB ↓，恢复期 PA ↓ ALB ↑。 四、血清5’-核苷酸酶（5’-NT）临床意义 血清5’-NT活性升高主要见于肝胆胰系统疾病及某些恶性肿瘤，故有较特异的诊断价值。胆管结石或肿瘤所致之肝外胆管阻塞，以及氯
21、谷氨酰氨基转移酶标准操作规程(GGT)
前言 为使临床检验操作规范化，指导检验人员严格按规程进行正确的常规操作，保证检验质量，特制定本操作规程。本规程的编写遵循了ISO 15189《医学实验室——关于质量和能力的特殊要求》及WS/T 227-2002《临床检验操作规程编写要求》的有关规定并结合产品实际情况制订，作为本产品的标准操作程序。 本规程从2007年5月2日起实施，每2年复审1次。 本规程由浙江伊利康生物技术有限公司编制。 本规程起草单位：伊利康生物技术有限公司技术部。 本规程主要起草人：蒙凯、蔡其浩。 本规程首次起草。
目录 1 检验申请 (3) 2 标本采集与处理 (3) 3 试剂及成份 (4) 4方法原理 (4) 5 仪器 (4) 6 校准液及校准模式 (4) 7质控品与室内质控规则 (4) 8标本检测步骤 (5) 9 结果计算 (5) 10 操作性能 (5) 11试剂使用的注意事项 (5) 12参考范围及医学决定水平 (5) 13检验结果的报告及范围 (5) 14临床意义 (6) 15结果审核分析以及相关项目的联系 (6) 16威胁生命的“紧急值”及报告规定. (6) 17有关引用程序与文件 (6) 18参考文献 附录A XXX型全自动生化分析仪参数
γ-谷氨酰转移酶测定标准操作规程 1.检验申请 单独检验项目申请：血清γ-谷氨酰转移酶（γ-glutamyltransferase,缩写γ-GT）测定；组合项目申请：肝功能测定。临床医生根据需要提出检验申请。 2.标本采集与处理 2.1 受检者的准备： 病人空腹12h，不饮酒24h后。体检对象抽血前应有两周的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。 2.2标本采集 2.2.1除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的黄色盖子SST真空采血管，如为急诊标本，使用浅绿色盖子PST试管。 2.2.2检验申请单和血标本试管上统一且唯一的标识符。 2.2.3标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。 2.2.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 2.2.5下列标本为不合格标本 2.2.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。 2.2.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、黄疸和浑浊的标本。 2.2.5.3对无法确认标本与申请单对应关系的。 2.2.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。 2.3标本处理 2.3.1接收标本在30min内将标本离心分离出血清。 2.3.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定48h，普通冰箱中（2～8℃）稳定7d。-20℃保存稳定60d。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1d的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。 2.3.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置2～8℃冰箱内保存7d。 2.4标本的注意事项 2.4.1采血前使受检者保持平静、松弛，避免剧烈活动，12h以上禁食空腹状态。 2.4.2可以使用EDTA、枸橼酸盐、草酸盐抗凝的血液标本，但肝素抗凝可引起反应液混浊。
Hcy测定试剂盒设计方案
1 产品概述、处方及规格 1.1产品概述 本试剂通过测定人体液中同型半胱氨酸（Hcy）的浓度，主要是用于诊断心肌功能疾病。 产品测定原理： 同型半胱氨酸被转化为游离型后，通过与共价底物反应，循环放大，同时产生腺苷。腺苷立即水解成氨和次黄嘌呤，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下，使β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原性（NADH）转化为NAD+，样本中的同型半胱氨酸的浓度与NADH的变化成正比。 1.2产品处方 1.2.1 试剂为液体双试剂。校准品可使用朗道、罗氏等复合定标液。 1.2.2 产品所用主要原材料为S-腺苷甲硫氨酸（SAM）、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原性（NADH）、三（2羧乙基）磷氯化氢（TCEP）、α- 酮戊二酸、Hcy甲基转移酶（HMTase）、谷氨酸脱氢酶（GLDH）S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）水解酶及腺苷脱氨酶（ADA）等。根据文献资料选用适当的缓冲液和稳定剂。 1.3 产品规格 产品包装规格制定要考虑不同适用机型和不同客户需求，根据以往经验，拟制定规格： R1-8 ml、R2-2 ml；R1-16 ml、R2-4ml；R1-20 ml、R2-5ml；R1-32 ml、R2-8ml；R1-40 ml、R2-10 ml； R1-2×40 ml、R2-2×10 ml；R1-4×40 ml、R2-4×10 ml；R1-2×40 ml、R2-20 ml；R1-4×40 ml、R2-2×20 ml；R1-8×40 ml、R2-8×10 ml；R1-80 ml、R2-20 ml；R1-2×80 ml、R2-2×20 ml； R1-4×80 ml、R2-4×20 ml；R1-8×80 ml、R2-8×20 ml ；R1-60 ml、R2-15 ml；R1-2×60 ml、R2-2×15 ml；R1-3×60 ml、R2-3×15ml；R1-8×50 ml、R2-2×50ml；R1-6×70 ml、R2-3×35ml； R1-5×40 ml、R2-50ml；R1-4×50 ml、R2-50ml；R1-3×60 ml、R2-45ml；R1-8×20 ml、R2-8×5 ml。 2 产品质量标准 根据《临床化学体外诊断试剂（盒）通用技术要求》，应对试剂外观、净含量、试剂空白、灵敏度、准确度、批内精密性、批间精密性、线性范围和稳定性等做出要求和规定。 应参考已上市产品并满足临床使用要求。 2.1外观 R1、R2均为无色至浅黄色透明液体。 2.2净含量 不少于标示值。 2.3试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度变化率 以蒸馏水为检测样本时，每分钟吸光度变化值(△A/min)的绝对值应不大于0.100A。
γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)测定试剂盒(GCANA底物法)产品技术要求百奥泰康
γ-谷氨酰基转移酶（γ-GT）测定试剂盒（GCANA底物法） 适用范围：该试剂盒用于体外定量测定人血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。 1.1 产品规格 试剂1:60mL×5，试剂2:12mL×5； 试剂1:60mL×5，试剂2:60mL×1； 试剂1:60mL×2，试剂2:12mL×2； 试剂1:60mL×2，试剂2:24mL×1； 试剂1:80mL×4，试剂2:16mL×4； 试剂1:80mL×4，试剂2:64mL×1； 试剂1:80mL×2，试剂2:16mL×2； 试剂1:80mL×2，试剂2:32mL×1； 试剂1:50mL×3，试剂2:10mL×3； 试剂1:50mL×3，试剂2:30mL×1； 试剂1:40mL×3，试剂2:24mL×1； 试剂1:50mL×4，试剂2:20mL×2； 试剂1:50mL×4，试剂2:40mL×1； 试剂1:60mL×1，试剂2:12mL×1； 试剂1:50mL×1，试剂2:10mL×1； 试剂1:40mL×1，试剂2:；8mL×1； 试剂1:500mL×1，试剂2:100mL×1； 试剂1:5000mL×1，试剂2:1000mL×1； 1.2 组成成分
该试剂盒由试剂1（R1）和试剂2（R2）组成。 1.2.1试剂组成 试剂1: Tris缓冲溶液≥50.0mmol/L 双甘肽≥100.0mmol/L 试剂2：L-g-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺≥3.0mmol/L 2.1 外观 a) R1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。 b) R2应为淡黄色溶液，无混浊，无未溶解物。 2.2 净含量 液体组分不少于标示值。 2.3 试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度 应不大于1.200。 2.3.2试剂空白吸光度变化率 应不大于0.005/min。 2.4 分析灵敏度 γ-GT试剂盒测定活性50U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.015。 2.5 准确度 测试参考物质，相对偏差应不超过±10%。 2.6 精密度 2.6.1重复性
胸腔积液中腺苷脱氨酶的临床检测意义分析
胸腔积液中腺苷脱氨酶的临床检测意义分析 目的探讨胸腔积液中腺苷脱氨酶的临床检测意义。方法选择本院结核性胸腔积液患者共35例，作为结核组；同时选择本院肿瘤性胸腔积液患者共30例，作为肿瘤组。取两组患者胸腔积液，测定腺苷脱氨酶活性。结果结核组胸腔积液中腺苷脱氨酶活性显著高于肿瘤组，差异有统计学意义（P ＜0.05）；结核组胸腔积液中腺苷脱氨酶阳性检出率显著高于肿瘤组，差异有统计学意义（P ＜0.05）。结论胸腔积液患者中行胸腔积液腺苷脱氨酶活性检测有助于结核性胸腔积液和肿瘤性胸腔积液鉴别诊断，检测意义重要，值得借鉴。 标签：胸腔积液；肿瘤；结核；鉴别诊断；检测意义 胸腔积液在临床症状中很常见，导致胸腔积液的病因较多，在临床上主要有肿瘤性胸腔积液及结核性胸腔积液。对于胸腔积液来说，明确病因对正确诊断和治疗至关重要。但胸腔积液的早期诊断较为困难。部分患者采用常规的方法不能明确胸腔积液的性质。本文探讨腺苷脱氨酶在胸腔积液中的检测意义。现报道如下： 1 资料与方法 1.1 一般资料 选择本院2009年10月～2011年10月结核性胸腔积液患者共35例，作为结核组，男19例，女16例，年龄最小为18岁，最大为63岁，平均（38.1±4.6）岁。结核性胸腔积液诊断条件：所选患者有结核中毒症状表现；合并有肺结核，痰涂片检测到抗酸杆菌；胸腔积液为渗出性改变；结核菌素试验阳性；血沉加快；抗结核药物治疗有效。上述5条中具备3条即可诊断为结核性胸腔积液。同时选择本院肿瘤性胸腔积液患者共30例，作为肿瘤组，男21例，女9例，年龄最小为18岁，最大为67岁，平均（40.1±6.1）岁。肿瘤组患者中，14例纤维支气管镜取组织行病理检查，6例患者经肺活检确诊，10患者胸腔积液中发现癌细胞。 1.2 方法 取两组患者胸腔积液，操作步骤如下：患者坐位，面向椅背，两前臂置于椅背上，前额伏于手臂上；选择肩胛下角线或腋后线7～8肋间作为穿刺点；常规消毒；2%利多卡因局部逐层浸润麻醉；左手固定穿刺部位皮肤，右手持穿刺针沿麻醉部位经肋骨上缘垂直缓慢刺入，当有突破感时停止；接上注射器后；注射器抽满后再次用血管钳夹闭胶管才能取下注射器；抽完液后拔出穿刺针，再次消毒皮肤，覆盖无菌纱布；用胶布固定。胸腔积液均为患者入院后第一次抽取的，离心后取上清液2 mL置于管中待测。腺苷脱氨酶检测采用酶法，检测步骤严格根据说明书提供的步骤进行。当腺苷脱氨酶活性大于19.6 U/L为诊断结核阳性界值。 1.3 统计学处理 采用统计学软件SPSS 14.0进行统计学分析，均数比较采用t检验，率的比较采用卡方检验，P ＜0.05，显示差异有统计学意义。 2 结果 结核组和肿瘤组胸腔积液中腺苷脱氨酶活性检测结果显示，结核组胸腔积液中腺苷脱氨酶活性显著高于肿瘤组，差异有统计学意义（P ＜0.05）；结核组胸腔积液中腺苷脱氨酶阳性检出率显著高于肿瘤组，差异有统计学意义（P ＜0.05）。
r谷氨酰基转移酶偏高是由什么引起的
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 r谷氨酰基转移酶偏高是由什么引起的 导语：大家都知道，酶的作用之一就是催化，r谷氨酰基转移酶与肝胆有着非常密切的关系，主要来衡量肝胆的情况。r谷氨酰基转移酶偏高，最有可能的原 大家都知道，酶的作用之一就是催化，r谷氨酰基转移酶与肝胆有着非常密切的关系，主要来衡量肝胆的情况。r谷氨酰基转移酶偏高，最有可能的原因是你胆管受阻或是患了慢性肝炎。要想快速使这种酶降低，饮食上要忌烟酒，不要熬夜加班。酶的本质是蛋白质，因此不要过多摄入高蛋白的食物。 r谷氨酰转移酶偏高的原因是什么？哪些原因会引起谷氨酰基转移酶偏高呢？常见的病理性因素：谷氨酰转移酶偏高的原因一：原发性肝硬化、肝癌时由于肝内阻塞，肝脏损伤，从而导致谷氨酰转移酶升高，肝癌时期谷氨酰转移酶升高达到高峰。谷氨酰转移酶偏高的原因二：急、慢性病毒性肝炎、肝硬化时，谷氨酰转移酶都会升高。如果慢性肝炎、肝硬化患者属于非活动期，若谷氨酰转移酶升高，则表明病情恶化。 非病理性因素：谷氨酰转移酶偏高的原因一：对于长期饮酒，造成脂肪肝，肝脏受损，肝功能下降，从而导致谷氨酰转移酶会有明显的升高现象。谷氨酰转移酶偏高的原因二：由于饮食不当形成的脂肪肝、胰腺炎、胰腺肿瘤等也同样会引起谷氨酰转移酶升高。谷氨酰转移酶偏高的原因三：20～30岁超负荷的男性谷氨酰氨基转移酶升高约58%。50～60岁男、女性谷氨酰氨基转移均约升高30%。慢性酒精中毒者谷氨酰氨基转移酶约升高20%～400%。90kg～40kg的女性谷氨酰氨基转移酶可升高42%。4～10岁的儿童谷氨酰氨基转移酶约降低10%。 谷氨酰转移酶偏高的原因四：对于女性安眠药可导致谷氨酰氨基转 生活常识分享
腺苷脱氨酶测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求首医
腺苷脱氨酶测定试剂盒(过氧化物酶法) 适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中腺苷脱氨酶的活性浓度。 1.1产品规格 1.2产品组成 试剂1：PNP 1.5U/mL，XOD 1.0U/mL。 试剂2：腺苷10mmol/L，TOOS 2mmol/L。 2.1 外观 试剂1、2为无色或略带黄色透明溶液；试剂盒各组分齐全、完整，液体无渗漏，包装标签文字符号清晰牢固不易脱落，外包装完整无破损。 2.2 装量 液体试剂的净含量应不少于标示量。 2.3 试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度 在37℃、540nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.20。2.3.2 试剂空白吸光度变化率 在37℃、540nm波长、1cm光径条件下，用生理盐水作为样品加入试剂测试时，试剂空白波光度变化率（ΔA/min）应不大于 0.005/min。 2.4分析灵敏度 测定80U/L腺苷脱氨酶时，吸光度变化率在（0.04±0.02）/min范围内。 2.5 准确度
采用比对试验，相关系数r≥0.98；[1.0，30]U/L区间内，线性绝对偏差不超过±3U/L；(30，200]U/L区间内，线性相对偏差不超过±10% 。 2.6 精密度 2.6.1 重复性 用血清样品或质控样品重复测试所得的变异系数（CV）应不大于5.0%。 2.6.2 批间差 试剂（盒）批间相对极差应不大于7.0%。 2.7 线性区间 试剂线性在[1.0，200]U/L（37℃）区间内： a) 线性相关系数|r|应不小于0.990； b) [1.0，30]U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±3U/L；（30，200]U/L 区间内，线性相对偏差应不超过±10%。 2.8稳定性 原包装试剂2～8℃避光保存有效期12个月，到效期后的样品检测试剂空白、分析灵敏度、准确度、重复性、线性区间应符合2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7 的要求。
谷氨酸合成酶(Glutamate synthase,GOGAT)试剂盒说明书
货号：MS1801 规格：100管/96样谷氨酸合成酶（Glutamate synthase，GOGAT）试剂盒说明书 微量法 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定 测定意义： GOGAT广泛分布于植物中，和谷氨酰胺合成酶共同构成GS/GOGAT循环，参与氨同化的调控。 测定原理： GOGAT催化谷氨酰胺的氨基转移到α-酮戊二酸，形成两分子的谷氨酸；同时NADH氧化生成NAD+，340nm吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小。 自备实验用品及仪器： 紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 试剂组成和配制： 提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存； 试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存； 试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存； 粗酶液提取： 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 测定步骤： 1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。 2、样本测定 （1）在试剂二中加入9mL试剂一充分溶解混匀，置于37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴5min；现配现用（配好后3h内用完）； （2）在微量石英比色皿或96孔板中加入20μL样本和180μL试剂二，混匀，立即记录340nm 处20s时的吸光值A1和 5min20s后的吸光值A2，计算ΔA=A1-A2。 GOGAT活性计算： a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下 （1）按样本蛋白浓度计算： 单位的定义：每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。 GOGAT（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321×ΔA÷Cpr （2）按样本鲜重计算： 单位的定义：每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。 第1页，共2页
腺苷脱氨酶(ADA)
腺苷脱氨酶（ADA） 参考值：0-15U/L 海丰参考区间4~24U/L 介绍：腺苷脱氨酶(ADA)为一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶，其作用是催化水解腺苷生成肌苷和氨。ADA广泛存在于各组织中，以盲肠、小肠黏膜、脾脏、胸腺中含量最高，肝脏、肺、肾、心脏、骨骼肌、神经组织等处含量较低，肝脏含量约为小肠的7%~10％。肝内ADA90％存在与细胞浆水溶性部分，其余在细胞核内。此外，血细胞(红细胞、粒细胞、淋巴细胞)内ADA活性约为血液中40倍~70倍，因此测定ADA时应避免溶血。血清中的ADA主要来自肝脏，所以肝细胞损伤或膜通透性增强，均可使血中酶活性增高，故可依据该酶活性增高或降低反映肝细胞损伤和恢复程度。 血清腺苷脱氨酶（ADA）正常值： (1)酶速率法(37℃)：健康成年人：7.7-19.3 U/L (2)分光光度法：<25 U/L (3)比色法：健康成年人为：5～25 U/L 诊断参考： 肝脏疾病： ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。 一．ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与AIT或GGT等组成肝酶谱。 （1）用于判断急性肝损伤及残留病变急性肝炎时ALT明显升高。ADA仅低度，中度升高。但重症肝炎发生酶胆分离时，尽管ALT不高，而ADA常明显升高。 而ALT恢复正常，ADA持续升高者，常易复发或易迁延为慢性肝炎。 （2）协助诊断慢性肝病在反映慢性肝损伤时ADA较ALT为优。慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌患者血清ADA活性显著升高，因而可判断慢性肝病的程度。另外， 慢性活动性肝炎活性明显高于慢性迁延性肝炎。故可用于二者的鉴别诊断。 （3）有助于肝纤维化的诊断ADA活性差异与肝细胞损害关系不大，与肝纤维化程度相关。肝纤维化程度增加，ADA活性增加。 （4）有助于黄疸的鉴别据文献报道，阻塞性黄疸血清ADA活性明显低于肝细胞性黄疸及肝硬化伴黄疸。 二.肿瘤引起的阻塞性黄疸，前列腺癌和膀胱癌，网状细胞瘤，淋巴瘤，溶血性贫血， 风湿热，伤寒，痛风，重症地中海贫血，骨髓性白血病，结核，自身免疫性疾病，传染性单核细胞增多症和心力衰竭等均可引起此酶升高。 3.结核性胸腹水ADA活性显著增高，癌性胸腹水不增高，而血清中ADA活性二者无 明显差别，故测定胸腹水中ADA活性有助于将两者鉴别。 4.结核性脑膜炎ADA显著增高，而病毒性脑膜炎则不增高，颅内肿瘤及中枢神经系统
植物体内谷氨酰胺合成酶活力的测定
实验27 植物体内GS 谷氨酰胺合成酶活力的测定 【原理】 谷氨酰胺合成酶（GS ）是植物体内氨同化的关键酶之一，在A TP 和Mg 2+存在下，它催化植物体内谷氨酸形成谷氨酰胺。在反应体系中，谷氨酰胺转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸，进而在酸性条件下与铁形成红色的络合物，该络合物在540nm 处有最大吸收峰，可用分光光度计测定。谷氨酰胺合成酶活性可用产生的γ─谷氨酰基异羟肟酸与铁络合物的生成量来表示，单位μmol ·mg ﹣1protein ·h ﹣1。也可间接用540nm 处吸光值的大小来表示，单位A ·mg ﹣1 protein ·h ﹣1。 【仪器与用具】 冷冻离心机；分光光度计；天平；研钵；恒温水浴；剪刀；移液管（2ml 、1ml ）。 【试剂】 提取缓冲液： 0.05mol/L Tris-HCl ，pH8.0，内含2mmol/L Mg 2+ ，2mmol/L DTT ，0.4mol/L 蔗糖。称取Tris （三羟甲基氨基甲烷）1.5295g ，0.1245g MgSO 4·7H 2O ，0.1543g DTT （二硫苏糖醇）和34.25g 蔗糖，去离子水溶解后，用0.05 mol/L HCl 调至pH8.0，最后定容至250ml ； 反应混合液A （0.1mol/L Tris-HCl 缓冲，pH7.4）： 内含80mmol/L Mg 2+ ，20mmol/L 谷氨酸钠盐，20mmol/L 半胱氨酸和2mmol/L EGTA ，称取 3.0590g Tris ，4.9795 gMgSO 4·7H 2O, 0.8628g 谷氨酸钠盐，0.6057g 半胱氨酸，0.1920gEGTA ，去离子水溶解后，用0.1mol/L HCl 调至pH7.4，定容至250ml ； 反应混合液B （含盐酸羟胺，pH7.4）： 反应混合液A 的成分再加入80mol/L 盐酸羟胺，pH7.4； 显色剂（0.2mol/L TCA, 0.37mol/L FeCl 3和0.6mol/L HCl 混合液）： 3.3176g TCA （三氯乙酸），10.1021g FeCl 3·6H 2O ，去离子水溶解后，加5ml 浓盐酸，定容至100ml ； 40mmol/L A TP 溶液：0.1210g A TP 溶于5ml 去离子水中（临用前配制）。 【方法】 1.粗酶液提取 称取植物材料1g 于研钵中，加3ml 提取缓冲液，置冰浴上研磨匀浆，转移于离心管中，4℃下15,000g 离心20min ，上清液即为粗酶液。 2.反应 1.6ml 反应混合液B ，加入0.7ml 粗酶液和0.7ml A TP 溶液，混匀，于37℃下保温半小时，加入显色剂1ml ，摇匀并放置片刻后，于5,000g 下离心10min ，取上清液测定540nm 处的吸光值，以加入1.6ml 反应混合液A 的为对照。 3.粗酶液中可溶性蛋白质测定 取粗酶液0.5ml ，用水定容至100ml ，取2ml 用考马斯亮蓝G-250测定可溶性蛋白质（见实验28）。 4.原始数据记载 5.结果计算： GS 活力(A ·mg ﹣1 protein ·h ﹣1)＝t V P A ?? 式中 A —540nm 处的吸光值； P —粗酶液中可溶性蛋白含量（mg/ml ）； V —反应体系中加入的粗酶液体积（ml ）； T —反应时间（h ）。