生物制品车间西林瓶无菌灌装验证方案

标题: 生物制品车间西林瓶无菌灌装验证方案设备/系统编号: 生物制品车间

方案编号: STP-QA-YZ019

版本号: 08

方案执行前批准

注：签名表示已对方案的准确性、完整性和GMP的符合性进行了审核并符合相关要求，同时承诺及时安排相应的人力物力资源执行该方案。同意批准方案用于执行。

目录

方法执行前批准 (2)

1 目的 (4)

2 范围 (4)

3 编订依据 (4)

4. 部门职责 (4)

5. 验证内容 (5)

5.1 概述 (5)

5.1.1生产所用主要设备 (5)

5.1.2生产工艺和品种情况 (5)

5.1.3参加无菌灌装验证人员情况 (6)

5.2验证方法 (6)

5.3 再验证周期 (8)

6. 附录 (9)

1 目的

此验证方案的设计有助于证明采用此无菌灌装工艺生产出的产品符合成品质量标准，尤其是无菌性的控制标准。无菌分装过程的验证是在人员进行相关培训及水系统、空调系统、消毒系统及清洗等验证合格基础上进行的。本次结合灌装生产技术指标和技术要求，确定无菌灌装工艺的再验证内容。通过培养基无菌灌装试验考察无菌灌装过程中环境是否达到要求，人员操作是否规范，灌装工艺是否合理，为灌装产品的无菌保证提供依据。

2006年10月西林瓶生产线完成改造后进行了首次验证，2007年生物制品车间空调系统改造后进行了西林瓶生产线无菌灌装的再验证，2008、2009年在设备连续正常运行一年后分别进行了再验证，此次验证为2011年冻干粉针投产前的再验证。

2 范围

适用于生物制品车间西林瓶无菌灌装工艺的再验证。

3 依据

3.1 《药品生产质量管理规范》（2010年修订）。

3.2 《药品生产验证指南》（2003年）。

4 责任人

4.1 验证委员会

4.1.1 负责验证方案的审批。

4.1.2 负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。

4.1.3负责验证数据及结果的审核。

4.1.4 验证报告的审批。

4.1.5 再验证周期的确认。

4.2 生产部

4.2.1 负责验证方案的起草。

4.2.2 负责验证方案的实施和设备的操作。

4.2.3 负责公用系统的操作及保养。

4.3设备部

4.3.1 负责验证所需仪器、仪表、量具的校验。 4.3.2 负责设备的维修保养。 4.3.3负责提供技术服务。 4.4 质管部

4.4.1 负责取样及对样品的检验，负责环境监测。 4.4.2 负责验证过程中的监控。

4.4.3 收集验证试验结果并对结果进行分析评价。 4.4.4 起草验证报告并报验证小组。 5 内容

生物制品车间目前生产品种有2个，重组人干扰素α2b 注射液和注射用重组人干扰素α2b ，共用一条生产线，生产灌装工艺参数如下：

从上表可以看出，灌装工艺有2种，一种为小容量注射剂（全压塞）

，转轧盖；一种为冻干粉针剂（半加塞），转冻干机冻干后压塞，转轧盖。此次验证工艺为冻干粉针剂，因其所有产品均为1ml ，所以选择灌装体积为1ml 。 5.1 概述

无菌分装过程的验证即培养基灌装实验，是在其它各系统如灭菌系统、公用系统、无菌环境保持系统及清洗等验证合格基础上进行的。

本方案实施时，其它配套系统均应正常运转。 此次验证的无菌灌装人员列表如下：

5.2 验证方法

5.2.1 概述：模拟生产无菌灌装过程，无菌灌装除菌过滤后的胰蛋白胨大豆肉汤培养基（TSB），半加塞，转冻干，轧盖。生产过程中应完全模拟真实生产过程，进行装量检查。连续灌装3次，每次正常灌装6000支，装量1ml/支，半加塞，灌装加塞后转移至冻干机中放置至少30小时压塞后轧盖。灌装完毕的培养基首先在20-25℃培养7天，然后在30-35℃培养7天，观察西林瓶内培养基长菌情况，并记录。

5.2.2 公用介质的准备

5.2.2.1 纯化水

A．评价方法：按《工艺用水管理制度》规定的频次和《水质检验标准操作规程》规定的检验方法对纯化水进行检测。

B．标准：

5.2.2.2 注射用水

A．评价方法：按《工艺用水管理制度》规定的频次和《水质检验标准操作规程》规定的检验方法对纯化水进行检测。

B．标准：

5.2.3 无菌环境控制与监测

5.2.3.1 洁净区沉降菌、浮游菌和悬浮粒子测试

A．评价方法：生产前按《洁净区沉降菌测试标准操作规程》、《洁净区浮游菌测试标准操作规程》和《洁净区悬浮粒子测试标准操作规程》对洁净区的沉降菌、浮游菌和悬浮粒子进行测定，在生产过程中，在关键操作的全过程，包括设备组装应对百级灌装区进行沉降菌的动态监测。在灌装前段、中段、后段对关键操作区分装设备上方、理瓶机上方、冻干机门前上方进行动态悬浮粒子的监测。动态取样应避免对洁净区造成不良影响。

B．标准：

5.2.3.2 操作间压差测定

A.评价方法：生产前测定，将所有门关闭，观察安装在各个相应房间的压差计，记录，灌装间与相临房间有传输口的地方做气流流向测定以确保无菌状况。

B.标准：相邻不同级别空间的静压差绝对值＞5Pa；洁净区与室外的压差＞10Pa；灌装间应相对正压。

5.2.4 操作间、设备、操作人员表面微生物测定

5.2.4.1 操作人员

A.评价方法：对表面和操作人员的监测，应在关键操作完成后进行。对百级灌装区的操作人员的手套、胸前、手臂等部位的微生物进行监测，手套为接触平皿，其它部位采用棉签擦拭法进行，取出事先准备好的浸泡在5ml灭菌注射用水中的无菌棉签，从左到右擦拭面积25 cm2，然后将擦拭后的棉签放回原盛装容器中，振摇1min，吸取1ml浸出液于灭菌平皿中，将融化的营养琼脂培养基倒入培养皿中，混匀，水平放置，凝固后将培养皿倒置于30～35℃培养48小时，计算菌落数，每个棉签做两块平皿。

灌装间的每个人员包括现场QA均取样，详细标记和记录被取样人、取样时间、取样部位。

B.标准：手套全部检出菌数＜1个，操作者身上每个部位的两个平皿检出菌数之和＜1个。

5.2.4.2 操作间、设备表面

A.评价方法：取出事先准备好的浸泡在5ml灭菌注射用水中的无菌棉签，从左到右擦拭操作间及设备表面，擦拭面积为25 cm2，然后将擦拭后的棉签放回原盛装容器中，振摇1min，吸取1ml浸出液于灭菌平皿中，将融化的营养琼脂培养基倒入培养皿中，混匀，水平放置，凝固后将培养皿倒置于30～35℃培养48小时，计算菌落数，每个棉签做两块平皿。

操作间四面墙壁各取1个点，两台旋转理瓶机和灌装机轨道表面、冻干机板层上各取2个点。

B. 标准：百级区域表面微生物＜1个/25cm2，即2个平皿检出菌数之和＜1个。

5.2.5 原料和包装材料确认

5.2.5.1 西林瓶的灭菌效果检查

A.评价方法：任取灭菌后的西林瓶40支，分为两份，20支/份，分别接种至硫乙醇酸盐流体培养基

和改良马丁培养基中，分别置30—35℃和20—25℃培养14天。

B.标准：应无菌生长。

5.2.5.2 胶塞的灭菌效果检查

A．评价方法：任取灭菌后的胶塞40个，分为两份，20个/份，分别接种至硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基中，置30—35℃和20—25℃培养14天。

B. 标准：应无菌生长。

5.2.6 培养基灌装实验

5.2.

6.1 液体培养基说明

A.成份：胰蛋白胨大豆肉汤培养基。

培养基的配制：取脱水胰蛋白胨大豆肉汤培养基，按说明书上的配方配制，按正常生产过程无菌过滤。

5.2.

6.2 模拟灌装试验

按灌装标准操作规程进行灌装，模拟生产过程进行装量等检测。半加塞，装载入冻干机板层上，关闭冻干机前箱大门，放置至少30小时后在冻干机内压赛，取出轧盖。

5.2.

6.3 合格标准

将上述灌装后的培养基50％正放，50％倒放，先置20-25℃培养7天，接着在30-35℃培养7天，分别于第7天、第14天观察结果，灌装少于5000支时，不应检出污染品；灌装在5000至10000时：污染概率应为0％。有1支污染需进行调查，并考虑重复培养基灌装试验；2支污染需进行调查，并需要再验证。发生任何微生物污染时，均应进行调查。

5.2.7 阳性对照和阴性对照的制备

A.方法：灌装结束后，用灭菌后的试管从配制的除菌滤器后接取培养基，15ml/管，共装4支，分两组，每组两支，一组作为阳性，接种金黄葡萄球菌稀释菌液（100CFU/ml），接种量1.0ml，于30-35℃培养48小时，一组作为阴性，于30-35℃培养14天。

B.标准：24hr内阳性应有菌明显生长，阴性在14天内无菌生长。

5.3 再验证周期：

1）培养基模拟试验的初始验证每班次需要连续进行3次合格试验。

2）培养基模拟试验通常按生产工艺每班次半年进行1次，每次至少一批。停产半年后，再生产前，应进

行再验证。

3）设备、空调净化系统有重大变更后，应进行再验证。

4）当产品的分装工艺及人员或影响产品质量的主要因素有重大变更后，应进行再验证。6．验证结果记录及结果评价，见附件。

附件1 液体灌装工艺验证结果及记录（1）

附件2 液体灌装工艺验证结果及记录（2）

附件3 液体灌装工艺验证结果及记录（3）

附件4 液体灌装工艺验证结果及记录（4）

附件5 液体灌装工艺验证结果及记录（5）

附件6无菌灌装验证培养基配制生产记录

附件7 西林瓶无菌灌装验证生产记录

液体灌装工艺验证结果及记录（1）

液体灌装工艺验证结果及记录（2）

第次

液体灌装工艺验证结果及记录（3）

第次

液体灌装工艺验证结果及记录（4）

液体灌装工艺验证结果及记录（5）

附件6 液体灌装工艺验证结果及记录（6）

培养基污染情况统计

附件7