病理科开展免疫组化抗体作用使用范围

病理科开展免疫组化抗体目录

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病理科开展免疫组化抗体作用/使用范围

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免疫组化抗体手册

免疫组织化学抗体手册目录中间丝细胞角蛋白 AE1/AE3 Cam5.2 MNF-116 34βE12 CK5/6 常见肿瘤中的特殊角蛋白 CK1 CK7 CK8 CK13 CK14 CK18 CK19 CK20 TTF-1，CK7和CK20的表达有助于诊断原发性肺腺癌还是转移性腺癌Vimentin（波形蛋白） Desmin（结蛋白） GFAP（胶质纤维酸性蛋白） Neurofilament proteins（神经细丝蛋白） Acid phosphatase（酸性磷酸酶） Actins（肌动蛋白） Muscle-specific actin（HHF35）肌肉特异性肌动蛋白（MSA） Smooth muscle actin（SMA）平滑肌肌动蛋白 α-actinin（α-肌动蛋白） NPM/ALK（间变性淋巴瘤激酶） AAT、AACT （α1-抗胰蛋白酶、α1－抗糜蛋白酶） AFP （甲胎蛋白） α-lactalbumin （α-乳清蛋白） Angiotensin-converting enzyme（血管紧张素-转换酶） Anti- Mullerian hormone（AMH），Mullerian-抑制因子 Cyclin D1（PRAD-1，bcl-1,CCND1）细胞周期蛋白D1 bcl-2 Bcl-6 Ber-EP4 Ca15.3 B72.3 (BRST-3) BCA-225 CA125 CA19.9 CEA（CD66e） Cadherins Calcitonin h-Caldesmon S-100 Calponin Calretinin CD1 CD2 CD3 CD4 CD5 CD7 CD8 CD9（运动相关蛋白，MRP-1） CD10（CALLA，NEP） CD11 CD13 CD14 CD15（LeuM1） CD16 CD19 CD20 CD21

免疫组化超详细步骤

免疫组化一实验目的：分别用KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体检测肺癌组织中KRAS、NRAS、HRAS蛋白的表达情况二实验原理: 应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术. 三实验试剂及耗材:经病理医生确认的肺癌组织切片、KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体、DAB 显色试剂盒、抗原修复液、PBS、苏木素染料、1%盐酸酒精溶液、0.05%氨水、二甲苯、等四实验设备：切片机、4℃冰箱、显微镜、烤片机五主要试剂配置: 缓冲液应用液A NaH2PO4 38.4g配成1000毫升溶液应用液B Na2HPO4·12H2O 114.8g配成1000毫升溶液配制1000毫升PBS需要14毫升应用A液，36毫升应用B液，加8.5gNaCl。枸橼酸钠抗原修复液应用液A 枸橼酸 10.55g配成1000毫升溶液应用液B 柠檬酸三钠（三水合柠檬酸三钠） 29.01g 配成1000毫升溶液配制500毫升抗原修复液需要9毫升应用A液，41毫升应用B液。苏木素染液配方：苏木素2g,无水乙醇250毫升，硫酸铝17.6g蒸馏水750毫升，碘酸钠0.2g，冰醋酸20毫升。先将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝溶于蒸馏水水中。两液溶解后将其混合，加入碘酸钠，最后加入冰醋酸。抗体说明书建议的抗体稀释度 N-Ras 1:50-1:500 H-Ras 1:50-1:500 K-Ras 1:20-1:200 六实验步骤： 1组织常规石蜡切片厚度3-5um，防脱片捞片后晾干，放入72℃烤箱烤片2小时。 2 切片脱蜡水化程序

免疫组化常用标记物

免疫组化常用标记物免疫组化常用标记物一、常用标志物 1. CD15(LeuM1)---（阳性部位：细胞膜）。是一种由半乳糖、岩藻糖和N-乙酰葡萄糖组成的碳水化合物抗原，又称半抗原χ，是粒/单核细胞相关抗原。免疫组织化学表达：成熟粒细胞、激活的淋巴细胞（主要是T淋巴细胞）、R-S细胞、大多数腺癌等。 2. 癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）(CD66e)---（阳性部位：细胞膜/浆）。癌胚抗原是表达于胎儿上皮细胞的一种糖蛋白，分子量为180kDa。存于某些恶性肿瘤组织尤其是内胚层来源发肿瘤中，大多数胃肠道（包括胰腺）和肺腺癌均有表达，少量成人上皮细胞和良性肿瘤亦可表达。CEA主要用于标记上皮性肿瘤，尤其是腺上皮来源的腺癌。 3.嗜铬素A（chromogranin A，CgA）---（阳性部位：细胞浆）。嗜铬素是位于神经分泌颗粒内的酸性糖蛋白家族，是一组可溶性酸性蛋白，分子量为76～1 20 kDa，分布广泛。含量最丰富的是嗜铬素A，另两个是嗜铬素B和嗜铬素C。几乎所有的神经内分泌肿瘤中均可检测到嗜铬素。嗜铬素A不仅存在于神经内分泌细胞的分泌颗粒中，也广泛分布于所有含有颗粒的内分泌细胞和神经内分泌细胞来源的肿瘤细胞。此抗体可以识别嗜铬素A抗原羧基末端的片段，而不与氨基末端的片段反应，主要用于标记神经内分泌细胞及其来源的肿瘤。对小细胞癌进行抗原修复可提高检测的敏感性。 4.细胞角蛋白（cytokeratin pan，广谱CK）--- AE1/ AE3（阳性部位：细胞浆）。此抗体可以识别绝大部分酸性细胞角蛋白（Ⅰ型/低分子量）和碱性细胞角蛋白（Ⅱ型/高分子量）。用于标记上皮及上皮来源的肿瘤，特别是对鉴别和判断转移性肿瘤是否为上皮源性具有一定的意义。 5.细胞角蛋白5/6（cytokeratin 5/6，CK5/6）---（阳性部位：细胞浆）。在正常组织中，鳞状上皮和导管上皮的基底细胞以及部分的鳞状上皮生发层细胞、肌上皮细胞和间皮细胞阳性，腺上皮细胞阴性。因此，可用于鳞癌和腺癌、间皮瘤和腺癌的鉴别诊断。支气管上皮基底细胞、间皮；鳞癌、大细胞癌、移行细胞癌、间皮瘤阳性。大多数腺癌为阴性。 6. 细胞角蛋白7（cytokeratin 7，CK7）---（阳性部位：细胞浆）。CK7是分子量为54 kDa的一种碱性细胞角蛋白，存在于大多数正常组织的腺上皮和移行上皮细胞中，一般非上皮来源的细胞无表达。在卵巢、乳腺和肺的腺癌呈阳性反应，而胃肠道的腺癌阴性。 7. 细胞角蛋白20（cytokeratin 20，CK20）---（阳性部位：细胞浆）。CK20（46kDa）存在于正常的胃肠道上皮、移行上皮、Merkel细胞及其来源的肿瘤，而乳腺癌、肺癌和神经内分泌肿瘤不表达。CK7positive CK7 negative CK20 positive uninformative colorectum CK20 negative lunguninformative 8. 细胞角蛋白（高分子量）（cytokeratin，HMW）---（阳性部位：细胞浆）。高分子量细胞角蛋白抗体（34βE12）可以识别68kDa、58kDa、56.5kDa和50kD a的细胞角蛋白。 9.上皮膜抗原（epithelial membrane antigen，EMA）(MUC1)---（阳性部位：细胞浆）。上皮膜抗原是一种高分子量（400 kDa）跨膜糖蛋白，广泛分布于各

免疫组化的原理和步骤

免疫组织化学的概念：免疫组化是利用抗原与特异性结合的原理，通过化学反应使标记的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。免疫组化实验所用的有哪些？免疫组化实验中常用的抗体为单抗体和多抗体。单抗体是一个B淋巴细胞分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。免疫组化实验所用的组织和细胞标本有哪些？实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理大片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组织抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中首选的组织标本制作方法。石蜡切片为什么要做抗原修复？有哪些方法？石蜡切片标本均用甲醛固定，使得细胞抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行IHC染色时，需要先进行抗原修复或暴露，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，而恢复抗原的原有空间形态。常用的抗原修复方法有微波修复法，高压加热法，酶消化法，水煮加热法等，常用的修复液是pH6.0的0.01 mol/L的柠檬酸盐缓冲液。免疫组化常用的染色方法有哪些？根据标记物的不同分为免疫荧光法，免疫酶标法，亲和组织化学法，后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高，有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位，其中生物素——抗生物素染色法最常用。抗体交叉反应的原因：指抗体除与其相应的抗原发生特异性反应外还与其它抗原发生反应。产生的原因有以下几个方面： 1. 抗原特异性指用于免疫动物的抗原性物质中含有多种抗原分子，它引起动物产生针对多种抗原分子特异性的相应抗体。任何其它物质只要含有一种或多种与上述物质相同的抗原分子，必将与上述多特异性的抗血清发生交叉反应。 2. 共同决定簇即两种抗原分子中都含有相同的抗原决定簇。 3. 决定簇相似，两种不同的抗原决定簇，如果结构大致相同，由于空间构象关系，某一决定簇的相应抗体可以与大致相同的决定簇发生交叉反应。当然抗原一抗体之间构象相似时的结合力小于吻合时的结合力。免疫细胞化学技术一、免疫细胞化学技术的概述 *免疫细胞化学(immunocytochemistry, ICC) -是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定细胞抗原的成分(主要是多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为～。

病理科免疫组化常用抗体

免疫组织化学常用抗体标记谱系第一节上皮细胞标志１.细胞角蛋白Cｙtokｅraｔin(ＣK) CＫ就是一种中间丝蛋白,就是上皮细胞及其肿瘤较特异标志物。CＫ分子量为4０~6０KD,根据其分子量不同分为２０余种,并粗略划分为高分子CK(HCK)与低分子CK(LＣK)。 2.广谱细胞角蛋白PCＫ PCK标记所有单层上皮、复层上皮、移行上皮细胞,各种上皮细胞来源得良恶性肿瘤、滑膜瘤与间皮瘤等少部分间叶源性肿瘤亦可阳性、 3。高分子角蛋白HCＫ HCK主要标记复层鳞状上皮及鳞状细胞癌,ＨCK(34βE１2)常用于标记前列腺基底细胞,观察基底细胞存在与否有助于前列腺癌得诊断。 4、低分子细胞角蛋白LＣK ＬCK主要存在于单层上皮及腺上皮细胞,因此,LＣK主要用于内脏腺上皮肿瘤得诊断与鉴别诊断。 5。细胞角蛋白7 CＫ 7 CK7分子量为54ＫD。主要标记腺上皮与移行上皮细胞,卵巢、肺与乳腺上皮为CK7阳性,而结肠、前列腺与胃肠道上皮为CD７阴性,因此可用于卵巢癌(CD7+)与结肠癌(CK７—)得鉴别。 6。细胞角蛋白8 CＫ8 ＣDK8分子量为５2、５KD,主要标记非鳞状上皮,因此主要用于腺癌与导管癌得诊断,鳞癌一般不表达CＫ8。有报道肝细胞癌主要表达CＫ8与CK１8、７、细胞角蛋白10 ＣK10 CK１0分子量为56。５ＫD、主要标记上皮得基底上层与颗粒细胞层,同时CK10表达与细胞得分化程度呈正比,高分化者常阳性,主要用于鳞癌得诊断。 8。细胞角蛋白１3 CK1３ CK１3分子量为５3ＫD。标记所有得复层上皮,包括角化与非角化上皮。主要用于高分化鳞状细胞癌得诊断、 9、细胞角蛋白18 CK18 CK1８分子量为4５KD,属低分子量Ａ型细胞角蛋白。主要标记各种单层上皮包括腺上皮,而复层鳞状上皮常为阴性。主要用于腺癌得诊断。 10、细胞角蛋白19 ＣK19 CK19分子量为40ＫD,分布于各种单层上皮包括腺上皮,主要用于腺癌得诊断。肝细胞不表达ＣK1９,因此可用于肝癌与转移性腺癌得鉴别。 1１。细胞角蛋白2０ CK２0 细胞角蛋白２0(CK20)分子量为46KD,主要标记胃肠道上皮、尿道上皮与Merkel细胞、主要用于胃肠道腺癌、卵巢粘液性肿瘤与Merkel细胞癌得诊断。鳞癌、乳腺癌、肺癌、子宫内膜癌与卵巢非粘液性肿瘤均不表达CK2０。 12。上皮膜抗原Epitheliａｌ mｅｍbrａnｅ anｔｉgen, EMＡ EMA就是一组糖蛋白,广泛分布在各种正常上皮细胞膜及其肿瘤细胞中,分布范围与细胞角蛋白相似,但对内脏腺上皮得表达优于细胞角蛋白。对上皮源性肿瘤,尤其就是低分化腺癌,最好与细胞角蛋白联合应用,可提高阳性率、

ELISA,Western Blot,免疫组化的区别

免疫组化是融合了免疫学原理（抗原抗体特异性结合）和组织学技术（组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等），通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色，来对组织（细胞）内抗原进行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。样本是细胞或组织，要在显微镜下观察结果，可能出现膜阳性、质阳性和核阳性。 elisa（酶联免疫吸附试验）用到了免疫学原理和化学反应显色，待测的样品多是血清、血浆、尿液、细胞或组织培养上清液，因而没有用到组织包埋、切片等技术，这是与免疫组化的主要区别，操作上开始需要将抗原或抗体结合到固相载体表面，从而使后来形成的抗原-抗体-酶-底物复合物粘附在载体上，这就是“吸附”的含义。免疫组化和elisa所用到的原理大致相同，只是因为所检测的样品不同，从而在操作方法上有所不同。Elisa多用于定量分析，其灵敏度非常高。 western bolt 先要进行SDS-PAGE，然后将分离开的蛋白质样品用电转仪转移到固相载体上，而后利用抗原-抗体-标记物显色来检测样品，可以用于定性和半定量。免疫学三大工具，免疫组化、Western、ELISA，分别用于定位，定性和定量。以下western和Elisa的区别不是原创，是找的资料。 western blotting 可以看到特异性的条带，但是定量比较烦 elisa可以直接读出浓度，但是如果抗体有非特异性结合，那得到的数值就不可信。 WB只能半定量,但是可以检测细胞膜蛋白,这点ELISA做不到 ELISA可用定量方法检测蛋白,也就是说可以观察不同浓度刺激物对目的蛋白的影响 WB所检测的一般是抗原，而Elisa抗原抗体都可以检测。 WB所检测的抗原可以知道其分子量的大小，或是否是多聚体、降解产物等，一句话，WB可以确定所用抗体是与那种蛋白起作用的；而Elisa无能为力，一锅端了。 WB所适用的一抗一般是线性位点的，ELISA线性或构象型抗体都可以使用。从另一个意义上讲，WB可以做抗体是线性位点还是构象型位点的补充判定，而Elisa不行。 WB一次处理量就是一块胶版，10-20个样品最多了。Elisa一块96孔板一次可以处理96个样本，可以设置多个复孔、对照、梯度样等来提高检测的可信度。 WB操作常见的非特异性条带，膜本底差，显色不好等等缺点在Elisa上表现得要好得多。页脚内容1

免疫组化常用抗体标记物

免疫组化常用抗体标记物（一）上皮源性标记物 1、一般性标记物（1）（角蛋白）亚型：5/6、7、8、10/13、18、19、20 （2）（上皮膜抗原） 2、特异性和（或）相对特异性上皮标记物（1）（癌胚抗原，标记胃肠道癌、肺腺癌等）（2）242（肿瘤相关粘液抗原、标记胰腺癌、结、直肠癌等）（3）（甲状腺球蛋白，标记甲状腺癌）（4）（前列腺特异性抗原，主要用于前列腺癌和转移性前列腺癌的诊断）（5）（前列腺特异性酸性磷酸酶，主要用于前列腺癌和转移性前列腺癌的诊断）（6）34βE12（高分子量细胞角蛋白，标记前列腺基底细胞）（7）（甲胎蛋白，标记肝癌、内胚窦癌等）（8）（标记肝细胞癌）（9）β（β绒毛膜促性腺激素，标记胎盘滋养叶细胞肿瘤、生殖细胞肿瘤）（10）125（卵巢癌抗原）（二）间叶源性标记物肌源性标记物 1、（，结蛋白） 2、（肌动蛋白） 3、（平滑肌肌动蛋白） 4、（肌特异性肌动蛋白） 5、（肌球蛋白） 6、（，肌红蛋白） 7、（肌浆蛋白） 8、 1（肌调节蛋白）（三）血管源性标记物 1、Ⅷ（第8因子相关抗原） 2、 31 3、 34 4、 1 5、 9 （四）组织细胞源性标记物 1、 681 2、（溶菌酶） 3、α（α1-抗胰蛋白酶） 4、α1（α1-抗胰糜蛋白酶） 5、 387 （五）淋巴造血组织源性标记物 1、全淋巴细胞（1）45（白细胞共同抗原）（2）（末端脱氧核苷酸转移酶）（3）301 2、全B细胞（1）κ（2）λ（3） 2026 （4） 79α（5） 36（B淋巴细胞抗原）（6） 5（B细胞系特异性激活蛋白） 3、 B细胞亚型（1） 10 （2） 21（标记滤泡性树突状细胞）（3） 23 （4） 35（标记滤泡性树突状细胞）（5） 38 4、全T细胞（1） 3 （2） 5 （3） 43 （4） 451 5、 T细胞亚型（1） 1α（2） 4 （3） 8 6、细胞（1） 56 （2）577 （3） 1611 7、粒细胞和单核细胞（1） 115 （2） 155 （3）（溶菌酶）（4）α（α1-抗胰蛋白酶）（5）α1（α1-抗胰糜蛋白酶）（6） 68 （7） 100蛋白（8） 387 8、其他（1）（上皮细胞膜抗原）（2） 99（尤因肉瘤标记物）（3） 1（间变性淋巴瘤激酶）（4）（5） 2 （6） 6 （7） 10 （8） 67 （9） 1（周期素D1）（10） 25 （11） 34. 六）神经源性标记物 1、100 2、（神经原特异性烯醇化酶） 3、7 4、（，神经微细蛋白） 5、（胶质纤维酸性蛋白）（七）神经内分泌源性标记物 1、激素标记物（1）（儿茶酚胺）（2）5（5-羟色胺）（3）垂体激素（促生长素）（催乳素）（促肾上腺皮质激素）（促甲状腺素）（促滤泡素）（促黄体素）（4）甲状腺（甲状腺球蛋白）（降钙素）（5）甲状旁腺（甲状旁腺素）（6）胰岛（胰岛素）（胰高糖

常见肿瘤病理诊断中免疫组化抗体选择

泌尿与男性生殖系统肿瘤 1.前列腺癌：CK、P63、34?E12、PSA、P504S(9AMAC)、AR 2.前列腺增生/腺瘤：CK、P63、34BE12、P504S 3.肾癌：CK、EMA、Inhibin、Melan-A、CK7、Vimentin、PAX2、CD10 4.肾母细胞瘤：WT-1、CK、P53、Ki-67 5.膀胱尿路上皮癌：CK7、CK20、P53、Ki-67、P63 6.精原细胞瘤：CK、PLAP、CD117、LCA、OCT3/4 淋巴造血系统肿瘤 7.胸腺肿瘤：CK、CD3、CD5、CD20、TdT、EBV* 8.霍奇金淋巴瘤：CD30、CD15、ALK-1、EMA、CD3、CD20、EBV*、PAX-5 9.非霍奇金淋巴瘤：CD3、CD20、CD45RO、CD79α、TdT、CD43 10.间变大细胞淋巴瘤：CD30、CD15、ALK-1、EMA、CD3、CD20、EBV* 11.弥漫性大B细胞淋巴瘤：CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD30、Ki-67 12.小B细胞淋巴瘤：CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD79α、CyclinD1、TdT 13.T细胞淋巴瘤：CD3、CD20、CD43、CD45RO、CD79α、TdT、TiA-1、Perforin 14.套细胞淋巴瘤：CD3、CD5、CD20、CD79α、CyclinD1、TdT、Bcl-2、Ki-67 15.T/NK细胞淋巴瘤：CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD56、TiA-1、Perforin、粒酶B 16.淋巴上皮病变/癌：CK、EMA、S-100、Ki-67、P53、EBV*、P63、CD30、CD20 17.Burkitt淋巴瘤：CD3、CD20、CD79α、CD10、Bcl-2、Bcl-6、Ki-67、EBV*、TdT 18滤泡性淋巴瘤：CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD10、Bcl-2、Bcl-6、Ki67 19.脂膜炎样T细胞淋巴瘤:CD2、CD3、CD7、CD20、CD43、Perforin、TiA-1、EBV* 20.浆细胞瘤：CD3、CD20、CD38、CD138、CD79α、EMA、κ*、λ* 21.坏死性淋巴结炎：CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD68、Mac387、CD163 22.粘膜相关淋巴瘤：CK、CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD43、CD79a、CyclinD1 23.血管免疫母细胞性淋巴瘤：CD3、CD20、CD45RO、CD43、CD79α 24.组织细胞肉瘤：S100、CD10、CD21、CD35、CD68、Lysozyme、MPO、CD33、CD34、CD11c、CD14、CD45R O 25.朗格罕氏细胞增生症/肉瘤：S100、CD1α、CD68、CD35、HMB45、CK、EMA、Ki67、CD45 26.指状突树突细胞肉瘤/肿瘤：S100、CD1α、CD68、CD21、CD35、CD3、CD20、CD30、CK、EMA、Ki67、C D45 27.滤泡树突细胞肉瘤/肿瘤：CD21、CD35、S100、CD1α、CD68、CD3、CD23、EMA、VIM、MPO、CD34、CD7 9α、CK、HMB45 28.肥大细胞肿瘤：CD117、CD45、CD33、CD68、CD15、CD3、CD20 消化系统肿瘤 29.胃癌：CK7、CK20、Villin、CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、AB/PAS** 30.肠癌：CK7、CK20、Villin、CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、AB/PAS** 31.肝细胞癌：AFP、CD34、CEA、CK8/18、CK19、Ki-67、P53、HbsAg、Hepatocyte 32.肝胆管细胞癌：CK7、CK20、Villin、AFP、CD34、CEA、CK8/18、CK19、Ki-67、Hepatocyte、HbsAg 33.食道癌：P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、P63 34.胰腺癌：CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、Villin、CK7、CK20、 35.胰岛细胞瘤：CD56、Syn、CgA、Ki-67、Insulin、CK8/18、CK19 39.肝炎病毒：HbsAg、HbcAg、HCV 涎腺肿瘤 37.涎腺粘液性囊腺癌：CK、P63、SMA、Vimentin、Myosin-heavy chain

免疫组化常见问题的处理

免疫组化常见问题的处理当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色 ①确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。 ②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否孵育了足够的时间。 ③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体，以及所用的检测系统是否和一抗匹配，这一点是非常重要的。比如，如果一抗是兔来源的抗体，二抗一定要用抗兔的二抗来匹配；或一抗是小鼠的IgM一抗，二抗必须是山羊/兔抗小鼠的IgM（不是IgG）二抗。 ④检查抗体所使用的稀释度及稀释溶液。 ⑤检查抗体的有效期和保存条件，尤其是标记了酶或荧光素的抗体，现在大多数试剂公司的抗体均要求在4~8℃条件下保存，应避免反复冻融，试剂保存时一定要避免与挥发性有机溶剂同放一室，以免降低抗体的效价。 ⑥检查标本的储存条件，最好用已知阳性的标本来同时做阳性对照。 ⑦检查色原/底物溶液，最简单的检测方法是将一滴标记有酶的抗体加入到制备好的底物溶液中，如果底物发生预期的颜色变化，则可排除底物的因素。需要注意的是，有些底物在制成工作液后应在一定时间内用完，否则会失效。 ⑧检查冲洗液是否和反应试剂匹配，溶液的pH值很重要，与过氧化物酶底物匹配的溶液中不应含有叠氮钠。 ⑨检查复染剂和封片剂是否和所使用的色原匹配。弱阳性如果阴性对照没有染色而阳性对照标本弱阳性，除了考虑上述因素外，还应考虑： ①标本的固定方式，不当的固定方式或固定时温度过高，都会影响到所检测的抗原的数量和质量。 ②不适当的抗原修复方式，由于石蜡切片在制作的过程中固定剂对抗原的封闭作用，必须用抗原热修复或酶消化或两种同时使用的抗原双暴露法，至于使用哪一种方法，应参照生产厂家的说明，同时结合标本的具体情况而定。 ③抗体的稀释度是否过高或者孵育的温度/时间是否正确。一般试剂生产厂家都会对试剂给出一定的使用范围，但是由于使用者的标本来自各种组织，处理过程也不尽相同，所以应参照使用范围，对所使用的一抗进行梯度测试，找出最佳的使用浓度。 ④切片上遗留了过多的冲洗液，当抗体加至切片上时，等于人为地对抗体进行了进一步的稀释。 ⑤孵育时切片是否放置水平，否则会导致抗体流失。如果阴性对照没有反应，阳性对照反应良好，而标本弱阳性，则可能是由于阳性对照不是同一种组织、或固定方式不同等原因所致。非特异性染色 ①是否有效地去除了内源性酶和生物素。应注意的是，并不是每一种组织均需要进行此步骤，但对于内源性酶或生物素丰富的组织，如肝脏、肾脏等，需考虑此原因。处理的方法为：

免疫组化原理和步骤(精)

免疫组化原理及步骤免疫组化操作规程一、实验原理与意义免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜 (包括荧光显微镜、电子显微镜的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质 (如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等。二、实验器材微波炉、吹风机、组化笔、湿盒、烤箱、振荡器、染缸、光学显微镜、纯木浆卫生纸、计时器和通风橱等。三、试剂配制 1. 0.01 M PBS(pH 7.34 :9.0 g NaCl + 50 ml 0.2 M PB 加双蒸水至 1000 ml; 1000 ml 0.2M PB (pH 7.4=5.93 g NaH 2 PO 4 ·2H 2 O+58.02 g Na 2 HPO 4 ·12H 2 O in 1000 ml 双蒸水或=190 ml A + 810 ml B(A. 0.2 M NaH 2 PO 4 ·2H 2 O:15.6 g in 500 ml ddH 2 O; B. 0.2 M Na 2 HPO 4 ·12H 2 O:71.632 g in 1000 ml dH 2 O。 2. Citrate Buffered Saline(0.01 M 柠檬酸缓冲液, PH6.0:28 ml A + 72 ml B + 200 ml ddH 2 O(A.Citrate acid (柠檬酸 :10.5 g 加双蒸水至 1000 ml ; B.Citrate sodium(柠檬酸钠: 29.41 g 加双蒸水至 1000 ml。

免疫组化&抗体DOC版

免疫组化&抗体手册.极品灵儿 1 AT(ɑ-1-Antitrypsin) 胞浆可以标记组织细胞与网状组织细胞。临床诊断中作为诊断恶性纤维组织细胞瘤的标记物，甲状腺乳头状癌中AAT 表达阳性，而正常甲状腺组织AAT 表达阴性。 Actin 肌动蛋白（光谱）胞浆肌动蛋白是一种具有收缩能力的微丝蛋白，广泛分布于几乎所有的肌型细胞中。Actin （HHF35）是一种光谱的肌动蛋白，主要用于检测骨骼肌、平滑肌、血管平滑肌、心肌何肌源性肿瘤包括平滑肌瘤，平滑肌肉瘤和横纹肌肉瘤以及肌上皮细胞和肌上皮瘤等。 Actin （Sarcomeric ）肌动蛋白（肌原节）肌动蛋白是一种具有收缩能力的微丝蛋白，广泛分布于几乎所有的肌型细胞中。Actin （Sarcomeric ）是一种标记横纹肌的肌动蛋白，主要用于横纹肌肉瘤的诊断，但必须与其它横纹肌标记物如myosin 、myoglobin 、MyoD1等同时检测，以提高其诊断准确率。 Actin （Smooth Muscle ）肌动蛋白（平滑肌）胞浆 Actin （Smooth Muscle ）是一种标记平滑肌的肌动蛋白，可以与平滑肌肌动蛋白ɑ异构体反应，但与骨骼肌、心肌的肌动蛋白无交叉反应。用于标记平滑肌及其来源的肿瘤。也可以标记肌上皮及其来源的肿瘤。在判断乳腺、唾液腺、汗腺恶性病变时观察肌上皮的分布和存在与否，可作为以上疾病诊断的重要参考。 Adrenocorticotropin （ACTH ）促肾上腺皮质激素胞浆主要用于垂体肿瘤的功能性分类以及原发性和转移性垂体肿瘤的鉴别诊断。亦可用于检测部分神经内分泌肿瘤（如嗜铬细胞瘤和类癌等）的激素细胞的分布。 AFP （ɑ－Fetoprofein ）甲胎蛋白胞浆 AFP 是由胚胎卵黄囊细胞，胚胎肝细胞和胎儿肠道细胞合成的一种糖蛋白。主要用于原发性或转移性肝细胞癌、肝样胃癌和性腺或性腺外某些生殖细胞肿瘤（如内胚窦癌）的诊断和鉴别诊断。AFP 敏感度较低，特异性强，大约60%左右的肝细胞肝癌阳性，在低分化肿瘤中常呈阳性表达。有表达。 AMACR/p504s 胞浆该抗原在前列腺癌而不是良性前列腺组织中高度表达，在两种前列腺恶性病变如高度增生性前列腺上皮细胞内新生物（PIN ）和不典型腺样增生中也 Anaplastic Lymphoma Kinase （ALK p80）胞浆/胞核主要用于间变性大细胞淋巴瘤与何杰金氏淋巴瘤的鉴别诊断，间变性大细胞淋巴瘤中阳性率大约为70%左右，还可以用于骨骼中间变性大细胞淋巴瘤的诊断。 Androgen Receptor （AR ）雄激素受体胞核阳性者对抗激素治疗效果显著。主要用于前列腺癌的检测，指导临床治疗。 Bax 胞浆是细胞凋亡的促进因子，可能具有肿瘤抑制作用。 B cell B 细胞可以识别除浆细胞以外的所有B 细胞胞浆抗原，是B 细胞的一种通用型标记物，可以用于B 细胞和B 细胞发生的肿瘤的标记。此外，它还与部分T 细胞和非淋巴细胞发生的肿瘤有交叉反应，诊断中需要联合应用。 Bcl-2 胞膜或胞浆 Bcl-2是B 细胞淋巴瘤-2的缩写，是一种抑制凋亡的线粒体内膜蛋白。在正常的套区和边缘带中小B 淋巴细胞和一些T 细胞中有表达。在Bcl-2在伴有t （14；18）（q32；q21）染色体易位的滤泡性淋巴瘤中出现过度表达。研究发现85%的滤泡性淋巴瘤和20%弥漫性大细胞淋巴瘤t （14；18）染色体易位，85%的滤泡性淋巴瘤中呈现胞浆阳性。主要用于滤泡性淋巴瘤的诊断以及与反应性淋巴滤泡增生的鉴别，肿瘤性滤泡多为阳性，正常和增生的滤泡多为阴性。目前研究认为Bcl-2也是细胞凋亡的一种抑制因子，参与细胞凋亡的调控，亦可用于各种恶性肿瘤细胞凋亡的研究。 Bcl-6 胞核 Bcl-6是一种原癌基因，具有诱导细胞凋亡的功能。在正常淋巴结中，Bcl-6表达于生发中心的B 细胞和少数的CD3/CD4阳性的T 细胞，主要用于反应性滤泡增生、滤泡性淋巴瘤和恶性肿瘤细胞凋亡的研究。Bcl-6在滤泡性淋巴瘤，纵隔B 细胞淋巴瘤。20%-40%的弥漫性大B 细胞淋巴瘤，结节性淋巴细胞为主型Hodgkin 病中有表达，并用于恶性肿瘤细胞凋亡的研究。 A

免疫组化超详细步骤

免疫组化一实验目的：分别用 KRAS NRAS HRAS蛋白抗体检测肺癌组织中 KRAS NRAS HRAS蛋白的表达情况二实验原理 : 应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素酶金属离子同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术 . 实验试剂及耗材：经病理医生确认的肺癌组织切片、KRAS NRAS HRAS蛋白抗体、DAB 四实验设备：切片机、4C冰箱、显微镜、烤片机显色试剂盒抗原修复液 PBS 苏木素染料 1%盐酸酒精溶液 0.05%氨水二甲苯等五主要试剂配置：应用液 A NaH2PO4 38.4g 配成1000 毫升溶液应用液 B Na2HPO4 12H2O 114.8g 配成1000 毫升溶液配制1000毫升PBS需要14毫升应用A液, 36毫升应用B液，力口8.5gNaCI 。缓冲液应用液A枸橼酸10.55g 配成1000 毫升溶液枸橼酸钠抗原修复液应用液 B 柠檬酸三钠（三水合柠檬酸三钠） 29.01g 配成 1000 毫升溶液配制500毫升抗原修复液需要9毫升应用A液，41毫升应用B液。苏木素染液配方：苏木素 2g, 无水乙醇 250 毫升，硫酸铝 17.6g 蒸馏水 750 毫升，碘酸钠 0.2g ，冰醋酸 20 毫升。先将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝溶于蒸馏水水中。两液溶解后将其混合，加入碘酸钠，最后加入冰醋酸。抗体说明书建议的抗体稀释度 N-Ras 1：50-1：500 H-Ras 1：50-1：500 K-Ras 1：20-1：200 六实验步骤： 1组织常规石蜡切片厚度 3-5um，防脱片捞片后晾干，放入72C烤箱烤片2小时。 2 切片脱蜡水化程序

免疫组化技术常见问题及其解答集锦

免疫组化技术常见问题及其解答集锦 1、石蜡切片和冰冻切片的比较？（1）要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片，这是今天我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片，可能会破坏组织的抗原性，如果组织的抗原性较稳定，则可作石蜡切片；但是要求做石蜡切片的，可作冰冻切片。（2）冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性，做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构，可能会使抗原弥散；切片厚度较石蜡的厚，做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时，目录上都写着做什么样的切片，如果它写着只能做冰冻，就不能做石蜡，如写着两者都可，那就都能做。（3）石蜡切片的优点可以保持组织细胞的形态结构，且容易存放在室温，而冰冻切片比较麻烦，一定要存在-80度的低温冰箱中，尤其是用来做原位杂交的的切片，为了防止RNA降解，保存一贯很重要。由于石蜡切片可以切到4微米左右，所以原位杂交探针容易渗透到组织中去，容易成功，而且得到的颜色/形态都较冰冻切片好。 2、一抗的选择要点和技巧是什么？（1）单克隆和多克隆抗体的选择。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合，就像导弹精确地命中目标一样。另一方面，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中，一般单克隆抗体特异性强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多克隆抗体特异性稍弱，但抗体的亲和力强，灵敏度高，但易出现非特异性染色（可以通过封闭等避免）。（2）应用范围的选择。有的一抗只能用于Western blotting，或免疫组化、免疫荧光、免疫沉淀等；甚至表明石蜡切片或冰冻切片。（3）种属反应性的选择（species reactivity）。这一点很重要，表明这种抗体可能存在种属差异，且这种抗体适合检测哪种种属动物体内的抗原。（4）种属来源，一般兔来源的多是多克隆；而小鼠来源的多是单克隆，但也有另外。根据此来源来选择相应的二抗。（5）生产厂家的选择。如santa Cruz公司抗体一般1ml，价格2100元左右；而BIOAY公司一抗一般100ul，价格1600元左右。这两个厂家的同一种抗体它的实际效价稳定是不同的，我一般用后者抗体做免疫组化效果较好，而前者做Western blotting效果还可以。 3、在什么情况下使用Triton-X100 （1）Triton X-100化学名称为聚乙二醇辛基苯基醚，是一种去污剂。在免疫组织化学（>10um 厚切片）和免疫细胞化学中一般用Triton X-100 作为细胞通透剂，在膜上打孔。（2）其作用原理：Triton X-100 可以溶解细胞膜、细胞核膜、细胞器膜上的脂质而使抗体及大分子结构的物质进入胞浆和胞核内，故在细胞免疫组化时尤为推荐使用，这样抗体就能顺利进入胞内与相应抗原结合。（3）Triton X-100既是一种表面活性剂，也有抗氧化作用。

免疫组化抗体管理守则完整版

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免疫组织化学抗体手册目录中间丝细胞角蛋白 AE1/AE3 Cam5.2 MNF-116 34βE12 CK5/6 常见肿瘤中的特殊角蛋白 CK1 CK7 CK8 CK13 CK14 CK18 CK19 CK20 TTF-1，CK7和CK20的表达有助于诊断原发性肺腺癌还是转移性腺癌 Vimentin（波形蛋白） Desmin（结蛋白） GFAP（胶质纤维酸性蛋白） Neurofilamentproteins（神经细丝蛋白） Acidphosphatase（酸性磷酸酶） Actins（肌动蛋白） Muscle-specificactin（HHF35）肌肉特异性肌动蛋白（MSA）Smoothmuscleactin（SMA）平滑肌肌动蛋白 α-actinin（α-肌动蛋白） NPM/ALK（间变性淋巴瘤激酶） AAT、AACT（α1-抗胰蛋白酶、α1－抗糜蛋白酶） AFP（甲胎蛋白） α-lactalbumin（α-乳清蛋白） Angiotensin-convertingenzyme（血管紧张素-转换酶） Anti-Mullerianhormone（AMH），Mullerian-抑制因子 CyclinD1（PRAD-1，bcl-1,CCND1）细胞周期蛋白D1 bcl-2 Bcl-6 Ber-EP4 Ca15.3 B72.3(BRST-3) BCA-225 CA125 CA19.9 CEA（CD66e） Cadherins Calcitonin h-Caldesmon S-100 Calponin Calretinin CD1 CD2 CD3 CD4 CD5 CD7 CD8 CD9（运动相关蛋白，MRP-1） CD10（CALLA，NEP） CD11 CD13 CD14 CD15（LeuM1） CD16 CD19 CD20 CD21 CD22 CD23 CD25 CD30（Ki-1）

免疫组化教程

第一章免疫细胞化学基本概念及发展简史一．免疫细胞化学的基本概念免疫细胞化学( immuｎoｃyｔｏchemisｔry）是利用特异性抗原抗体反应,观察和研究组织细胞特定抗原（或抗体）的定位和定量的技术。应用免疫细胞化学技术可以在光镜和电镜水平观察细胞膜及细胞内某种抗原物质的存在。从而为生物医学研究生命大分子,特别是那些对细胞化学方法来说尚无作用物或作用物特异性不强的酶、蛋白质、激素及受体蛋白等在组织内分布、细胞内定位以及代谢状态等，提供了特异性强、灵敏度高而又直观化的原位分析细胞组成物质的细胞化学手段。二.免疫细胞化学的发展简史１9４1年， Coｏnｓ等创立了荧光抗体法 195９年， Siｎｇeｒ创立了铁蛋白法１966年， Nakａｎe等创立了免疫酶技术 1971年, Ｆaulｋ和Tａylｏr 创立了免疫胶体金法 1９７6年， Bayeｒ等提出了亲合组织化学法第二章免疫细胞化学相关的组织学和细胞学技术一. 取材（一）组织标本的取材 1.活检钳的刃口锋利，以免组织受挤压。

2.取所需组织:主要病变区、病灶与正常组织交界区。必要时取远离病变区的正常组织作为对照。 3.为充分保存组织的抗原性, 取材要快，尽量保持组织新鲜。（二）细胞标本的取材 1．印片法应用：活检标本、手术切除的标本。方法:新鲜标本以最大面剖开暴露病区,载玻片轻压病区,脱落细胞黏附于载玻片上,立即浸入固定液中５－１０分钟,取出自然干燥，低温保存。优点：简便省时,细胞抗原保存较好。缺点:细胞分布不均重叠,影响标记效果。 2．穿刺吸取涂片法应用：实质器官的病变区。方法: ①穿刺液较少时直接涂片，力求均匀。 ②穿刺液较多时，穿刺液滴入１－2毫升Hanks液(ＲＰ MI 1６40液）内,轻搅，5０0rpm离心5-1０分钟，弃上清, 制成细胞悬液(2x106细胞/ml）,吸一滴于载玻片上,轻涂, 干后固定。优点:细胞均匀。缺点:细胞易变形。 3．体液沉淀涂片法 ①细胞数多,取一滴直接涂片。

免疫组化这样做

做免疫组化的来看看做过病理实验的人都知道，实验看似容易，但真想把它做好，还是需要花上很长一段时间去积累和摸索经验。我从事病理实验已有6年多了，在这段时间里，我做过许许多多病理相关实验，刚开始啥也不懂，一味按照网上操作流程来做，但做的结果往往并不是十分理想，最终结果未能达到预期的效果。经过一段时间的浏览和学习，从一些在论坛内学习、请教，并结合实践操作，我经历了初级——查找资料和摸索方法；中级——问题求助和不断总结；高级——难题解答和经验分享这三个阶段，也学到了不少知识，积累了很多宝贵经验，与大家一起分享下。以免疫组化实验为例从我接触的很多本科生和研究生中发现，他们的确是免疫组化“新手”，他们只注重如何做和最终的结果，但对为什么这样做不太感兴趣。他们常按照网上所说的方法，摸索好的抗体浓度和条件后做出很漂亮的染色结果后，他们就认为自己已经掌握了免疫组化方法了，结果不求上进，更换一种新抗体后或实验出现异常结果后就很难做出来了。当然，免疫组化对于我来说，做过很多，但也不能说什么都会，只不过我做的多了，失败多了和思考多了，可能比新手多了解一些其中的诀窍，拿来与大家进行分享。此外，我个人经验不可能面面俱到，还需要更多有经验的高手一起分享、纠正和补充。在这里，我需要感谢中华病理网、丁香通、小木虫论坛给我很大的帮助，还有上海舜田生物技术人员老师给我实验很多指导和帮助，让我受益匪浅。免疫组化个人感悟 1、其实免疫组化，我个人感觉方法和操作都不是很难，关键是结果出现异常时该如何去解决？我认为首先需要掌握好免疫组化实验的原理，知道每一个操作步骤的目的，这样你才能大胆地去改革和纠正一些错误的步骤，如抗体孵育条件主要是抗体浓度、温度、时间，这三者一般是相互成反比的（相对），其中浓度是最重要的先决条件，温度决定反应的速度、时间决定反应的量。比如温度有4℃、室温、37℃。我推荐4℃最佳，反应最温和，背景较浅；而37℃反应速度较快，时间较短；室温我不太提倡，除非你每次都把环境温度控制在一定的范围，否则，尽量选择前两者。 2、定位和定性是免疫组化最大的优势。相比于其他蛋白检测方法，免疫组化具有定位较直接准确、定性灵敏度高，是定位检测分析首选方法。尤其对于有些因子的转位研究十分有用。

临床免疫组化实用大全汇总

免疫组化定义：免疫组化，是应用免疫学基本原理一一抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(im muno cytochemistry)。临床常用免疫组化指标的意义临床病理工作中，我们常用到“肿瘤细胞免疫组化耐药预后标记”，但是许多单位只写阳性结果，不写临床意义，其结果对临床帮助不大，因为许多医生不懂得这些结果的意义，因此建议大家在出此类报告时，把“肿瘤细胞免疫组化耐药预后标记”的意义打印在报告中，以增加病理报告的使用价值。 1、恶性肿瘤免疫组化耐药预后标记，全套4项：P-gP, GST n TOPO U, Ki-67。 2、乳癌免疫组化耐药预后标记，全套7项：P-gp, GSTt，TOPO U, Ki-67，ER PR, C-erbB-2 3、意义：标记物--作用--阳性部位--临床意义多药耐药基因蛋白(P-Gp --药泵作用--胞膜/胞浆--阳性率越高，对下列药物耐药性越强：阿霉素、柔红霉素、表阿霉素、米托蒽醌、长春花碱、长春新碱、紫彬醇、泰素帝。谷光甘肽S转移酶(GST n)--解毒作用--胞浆--阳性率越高，对下列药物耐药性越强：阿霉素、顺铂、氮芥、环磷酰胺、瘤可宁。拓扑异构酶U( TOPO U)--靶点作用--胞核--阳性率越高，对下列药物越有效：蒽环类抗生素和鬼臼毒素类，如VP16替尼泊苷、玫瑰树碱、新霉素、柔红霉素、表阿霉素、阿霉素、VM26。阳性率高者对VP16尤其有效。雌激素受体(ER --性激素作用--胞核--阳性率越高，肿瘤对内分泌治疗越有效, 预后越好。孕激素受体(PR)-性激素作用--胞核--阳性率越高，肿瘤对内分泌治疗越有效，预后越好。 C-erbB-2-癌基因产物--胞浆--阳性率越高，肿瘤恶性程度越高。ER PR阳性而 C-erbB-2也阳性者，用三苯氧胺治疗效果不好。 Ki-67--细胞增殖标志--胞核--阳性率越高，肿瘤增殖越快，恶性程度越高。 Ki-67为细胞增值的一种标记，在细胞周期G1、S、G2、M期均有表达，GO期缺如，其和许多肿瘤分化程度、浸润、转移、预后密切相关。PCNA增埴细胞核抗