动物遗传学实验指导书

动物遗传学实验指导

动物遗传育种教研组

2006年5月

实验室守则

一、必须以严肃认真的科学态度从事各项实验，不得高声喧哗，更不得嘻笑打闹。

二、必须严格执行操作程序和按规定的步骤进行各项实验，不得随意取舍、变动。

三、必须按正规要求锻炼基本功，不断培养和提高实验室的动手能力，不得以任何借口拒绝教师的正确指导。

四、必须爱护仪器，节约原材料，保持试剂的纯净度，遇到损坏情况发生，要报告指导教师，如损坏仪器设备，除口头报告外，还应根据情况折价赔偿。

五、课前必须认真预习有关实习内容，课后要认真分析实验结果，按时交出实验报告。

六、进入实验室后，各组学生按规定位置入座，清点好每次所分配的仪器、用品、试剂，用完后须洗净(不能洗涤者例外)如数归还原处，如有短缺情况，应由该组同学共同负责。

2006年5月

动物遗传学实验课考核制度

一、总则：实验课考核成绩占该门课程总成绩的30％，若实验课考核成绩达不到60分，则不能参加该门课程的期终考试。

二、考核内容及成绩计分方法：

1.平时作业、测验、课堂表现考核(40分)

①平时作业：实验报告应独立、按时完成，缺交一次扣10分，抄袭他人作业者及被抄者一律记0分。

②平时测验：实验操作或回答提问抽查不符要求，每次扣10分。

③考勤：迟到或早退每次扣5分，旷课一次扣10分并交学工组老师处理。

④课堂纪律：参照实验室守则，违反纪律每次扣10分并交学工组老师处理。

⑤卫生：课堂乱涂画者，每次扣10分并清除之；课后卫生不符要求擅自离去者，每人每次扣10分。

2.期终考核(60分)：采取抽签、口试形式，考核内容包括：

①实验内容有关问题。

②实验操作。

动物遗传育种教研室

2006年5月

实验一果蝇的饲养和观察 (1)

实验二单因子试验(3：1分离试验) (4)

实验三两对因子的自由组合 (6)

实验四伴性遗传 (6)

实验五三点测交(基因定位) (7)

实验六粗糙链孢霉的分离与培养 (9)

实验七果蝇唾腺染色体的观察和制片 (11)

实验八骨髓细胞染色体涂片法 (13)

实验九外周血淋巴细胞培养和染色体标本制备 (15)

实验十染色体—显带标本的制备与识别 (17)

实验十一人群中P、T、C味盲基因频率的分析 (18)

实验十二遗传力和重复率的估算 (20)

实验十三遗传相关的估算 (23)

实验十四动物组织中总DNA的提取与纯度鉴定 (26)

实验十五 PCR扩增 (27)

图1 果蝇的生活史

实验一果蝇的饲养和观察

一、实验目的

了解实验材料果蝇，学会果蝇的饲料制备、果蝇的性别和突变性状鉴别，为以后实验打下基础。

二、经典的遗传实验材料——果蝇

果蝇(fruit fly)，属于节肢动物门有气管亚门昆虫纲双翅目果蝇属，果蝇属共有900多个品种，通常用作遗传实验材料的是黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)。

(一)生活史： 1. 果蝇的生活周期。卵→幼虫→蛹→成虫→卵

2. 生活周期长短与温度的关系（见表1-1）：一般温度在30℃以上能使果蝇不育或死亡，低温能使果蝇生活周期延长，生活力下降，饲养果蝇的最适温度20～25℃。

表1-1 生活周期长短与饲养温度的关系

温度 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 卵→幼虫 8天 5天幼虫→成虫

57天

18天

6天

4天

3. 果蝇的繁育

只要温度适宜又有充足的食物，果蝇就能进行正常繁育，果蝇以酵母菌为食，因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇饲料。常用的有玉米饲料、香蕉饲料、米粉饲料三种(见表l —2)，果蝇一般在恒温箱内培养，野生型果蝇生活力很强，突变型生活力较弱，在培养中要防止霉菌污染，须精心管理才行。

表1-2 三种果蝇饲料的配方配料水（ml ）琼脂（g ）蔗糖（g ）香蕉浆（g ）玉米粉（g ）米粉（g ）麸皮（g ）酵母粉（g ）丙酸（g ）玉米饲料 150 1.5 13 - 17 - - 1.4 1 米粉饲料

100

1.4

4. 果蝇性别及突变性状

果蝇的每一个体细胞染色体只有4对，三对为常染色体，一对为性染色体(♂XY，♀XX)。在幼虫期雌雄不易区别，在成虫期区别相当容易。雄果蝇个体一般较雌体为小。腹部环纹五条，腹尖颜色深(从背面看第三条环纹后呈黑色)，在第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流梳，称为性梳(Sex combs)；雌蝇个体较大，腹部环纹七条，前肢跗节无性梳。实验中选用的果蝇突变性状大多数肉眼可见，或用放大镜可见，如红眼、白眼；长翅、痕迹翅；灰体、黑檀体等。另有些性状则要在解剖镜下鉴定，如焦刚毛与直刚毛等。突变性状的基因符号及所在染色体上位座见表l—3。凡与野生型果蝇一致的性状都标以基因符号(+)。

从上叙各点可见，果蝇具有：饲养容易，世代间隔短，染色体数少，唾腺染色体制作容易，雌雄好鉴别，突变性状多，而且多数是形态突变，便于观察等特点，是理想的遗传实验材料。

表1-3 实验中使用的果蝇突变品系

三、实验用具和药品、用料

恒温箱、解剖镜、培养瓶、棉花、纱布、剪刀、麻醉瓶、干燥箱、灭菌锅、白瓷板、铝锅、电炉、玻璃棒、200毫升量筒、1000毫升和250毫升烧杯、酒精灯、镊子、角匙、毛笔、滤纸。

丙酸(或乳酸)、乙醚、煤油、75％酒精、琼脂、蔗糖、米粉、麸皮、酵母粉(片)

四、操作步骤

(一)米粉饲料制备(每组制取一份200毫升水样的米粉饲料)取100毫升水→加入剪碎的琼脂→加热溶解→加入用另100毫升水调成的米粉、麸皮、蔗糖糊、调匀→加热煮至熟透→加入酵母粉、丙酸充分调匀→分装培养瓶，盖上棉塞→冷却后用酒精棉擦干瓶内积水，插入滤纸片盖上棉塞即可。

附：制备前培养瓶、滤纸(用酒精浸湿)、100毫升烧杯干燥灭菌、棉花、纱布高压蒸汽消毒。培养瓶棉塞在饲料制成前做完。

(二)性别和突变性状的鉴别

在实验前用酒精棉将镊子、白瓷板擦净，毛笔尖用手指(酒精棉擦过)揉软，切记要保持毛笔和麻醉瓶干燥。

将原种瓶振动使果蝇震落瓶底，去棉塞套上麻醉瓶

或震落

利用果蝇趋光性

将果蝇转入麻醉瓶，盖

上棉塞→在麻醉瓶棉塞里端滴上2-3滴乙醚→将麻醉了的果蝇倒入白瓷板(或表玻璃)→在放大镜下或解剖镜下观察其眼睛颜色、翅形、体色、刚毛、腹部环纹及雄蝇的性梳，鉴别雌雄及各种突变性状→分别装入培养瓶贴上标签。

五、实验要求

(一)果蝇饲料干湿适宜不起块、煮熟透、不受污染，分装培养瓶后一周内不起霉不长杂菌。 (二)熟练地鉴别雌雄和各突变品系，接种时不混种，保持存活。

实验二单因子试验(3:1分离试验)

一、实验目的

通过果蝇单因子杂交试验验证分离规律。

二、实验材料及说明

果蝇灰体(+ +)×黑檀体(ee)

或长翅(+ +)×痕迹翅(VgVg)

三、实验仪器和用品

解剖镜、放大镜、米粉培养基用料、培养瓶、麻醉瓶、乙醚、恒温箱、白瓷板(或表玻璃）、毛笔、酒精棉、棉花塞、电炉、铝锅、250毫升烧杯、100毫升烧杯、标签、浆糊、死蝇收集瓶(装煤油)、镊子、200毫升量筒。

四、实验步骤

(一)确定杂交组合(用正反交比较) (二)选取处女蝇和雄蝇

为保证产生的后代均为杂交个体，雌绳必须是处女蝇，可将原种瓶中的果蝇全部倒人死蝇收集瓶内(一个也不留)，在此后8个小时内由蛹羽化的雌绳即是处女蝇。选用处女蝇和雄蝇各3—4对。

细胞生物学实验

1. 什么是细胞培养？细胞生物学实验指从动物活体体内取出组织，并将其分散为单个细胞（机械或酶消化），在体外模拟体内的生理环境，使其在人工培养条件下保持生长、分裂繁殖、细胞的接触性抑制以及细胞衰老过程等生命现象。最常见的细胞一般有两种，一种是原代细胞，另一种是传代细胞。原代细胞是指动物组织经过胰酶或胶原酶等酶类的消化，使其分散，从而获得单个细胞，再使这些单个细胞生长于培养容器中的过程。大多数组织可以制备原代细胞，但制备的方法略有不同，制备的细胞生长快慢及难易程度也不相同。不同的原代细胞，其形态也不尽相同。一般将10代以内的细胞称之为原代细胞。传代细胞一般指无限繁殖的细胞系，理论上这类细胞可以无限次的传代。做实验的时候也会经常使用这类细胞，如Hela、293、Vero 等细胞。 2. 细胞的生长周期游离期：细胞刚接种到新的培养容器中到贴壁前的一段时期，这个时期的长短由细胞类型决定，从几分钟到几个小时不等。贴壁期：细胞从游离状态变为贴附到培养器皿表面并展现出一定细胞形态的时期。潜伏期：细胞在完成贴壁后，并不会马上进行增殖，会进行增殖所必须的物质和能量的储备，这个时候称之为潜伏期。

对数生长期：细胞在完成物质和能量储备后，开始大量的增殖的时期。这个时期的细胞活力旺盛，且状态稳定，我们所做的绝大多数实验都是在这个时期开展的。停止期：随着细胞的生长，细胞密度越来越大，由于营养物质的消耗、细胞间的接触抑制等因素，细胞生长缓慢，甚至停止生长。这个时候，我们就要给细胞进行传代了，使细胞可以继续进行增殖，保持旺盛的活力。 3. 细胞生长所需要营养条件细胞的培养所需要的营养成份一般来自于基础培养基（比如DMEM培养基）和血清。基础培养基：主要是提供细胞生长所需要的氨基酸（组成蛋白质的基本单位）、维生素（细胞代谢中辅酶的组成成分）、无机离子（K+，Na+等）、碳水化合物（碳源和能量来源）和一些激素等营养物质。血清：主要是提供一些基础培养基不能提供的生长因子和低分子的营养物质，此外它还有促进细胞的贴壁、中和有害重金属离子等作用。如果只提供基础培养基而不提供血清，绝大多数细胞是无法生长的。血清对于我们实验的重要性就不言而喻了，那么什么样的血清才算是合格的血清呢？合格的血清需要通过各种检测，包括无细菌，无真菌，无支原体检测，无病毒污染。血清一般呈现为淡黄色，透明状液体，由于含有大量的蛋白质等成分，会略有黏稠。以全式金公司的TransSerum EQ Fetal Bovine Serum (FS201-02)为例，它通过了牛腹泻病毒、牛副

细胞生物学常用研究方法

Southern杂交: 是体外分析特异DNA序列的方法，操作时先用限制性内切酶将核DNA或线粒体DNA切成DNA片段，经凝胶电泳分离后，转移到醋酸纤维薄膜上，再用探针杂交，通过放射自显影，即可辨认出与探针互补的特殊核苷序列。将RNA转移到薄膜上，用探针杂交，则称为Northern杂交。 RNAi技术: 是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。可以利用siRNA或siRNA表达载体快速、经济、简便的以序列特异方式剔除目的基因表达，所以现在已经成为探索基因功能的重要研究手段。 Southern杂交一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量]。扫描电镜技术：是用一束极细的电子束扫描样品，在样品表面激发出次级电子，次级电子的多少与样品表面结构有关，次级电子由探测器收集，信号经放大用来调制荧光屏上电子束的强度，显示出与电子束同步的扫描图像。细胞显微分光光度计：用来描述薄膜、涂层厚度超过1微米的物件的光学性能的显微技术。免疫荧光技术：将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可对抗原进行细胞定位。电镜超薄切片技术：超薄切片是为电镜观察提供极薄的切片样品的专门技术。用当代较好的超薄切片机，大多数生物材料，如果固定、包埋处理得合适，可以切成50-100微米的超薄切片。 Northern印迹杂交（Northern blot）。这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。放射自显影技术：放射自显影技术是利用放射性同位素的电离辐射对乳胶（含AgBr或AgCl）的感光作用，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究的一种细胞化学技术。放射自显影技术（radioautography；autoradiography）用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。其原理是将放射性同位素（如14C和3H）标记的化合物导入生物体内，经过一段时间后，将标本制成切片或涂片，涂上卤化银乳胶，经一定时间的放射性曝光，组织中的放射性即可使乳胶感光。核磁共振技术：可以直接研究溶液和活细胞中相对分子质量较小(20，000 道尔顿以下)的蛋白质、核酸以及其它分子的结构，而不损伤细胞。 DNA序列分析：在获得一个基因序列后，需要对其进行生物信息学分析，从中尽量发掘信

基于人机工程学的产品改良设计课程实验研究_0

基于人机工程学的产品改良设计课程实验研究 [摘要]本文为《工业产品再设计》课程设计了一套基于人机工程学原理的产品改良设计实验方案。实验原理是运用人体生理结构反形与目标产品形态进行合成，得出新的产品造型。实验运用逆向工程技术与Morphing设计方法得出产品形态设计结果。本实验已应用于教学实践中，教学反馈证明学生容易掌握实验方法，且结论与设计效果良好。 [关键词]逆向工程；人机工程学；改良设计；实验 [DOI]10.13939/https://www.360docs.net/doc/fe8079023.html,ki.zgsc.2015.20.251 为了能够在市场竞争中取得优势，很多企业不断改良产品设计，推出新产品。因此，产品改良设计的原理与方法是工业设计专业学生所必须掌握的。《工业产品再设计》课程即是针对如何改进现有产品的工业设计专业课程。[1]人机工程学是工业设计中重要的辅助手段。[2]在工业设计领域，人机工程学为衡量产品使用舒适度提供了参考和评价标准。而在人机工程学应用于工业设计实践方面，Shenchang Eric Chen提出形态混合迁变的方法，即可以运用人体尺度数据与产品数据合成新产品造型。本文所介绍的实验方案，运用逆向工程[1][3]的方法：首先用油泥、发泡泡沫等材料

制作人体生理构造反形，再利用shape averaging[3]（Morphing）法对人体反形与产品形态进行混合迁变，得出新的产品形态。本文列举两例自行车把改良设计实验。 1 实验1 本实验运用手掌持握反形（有手指凹陷）与目标车把合成新的车把造型，目的在于改良和优化现有车把与手掌生理结构的吻合度。使用带有手指凹陷构造的手掌持握反形，可以得出持握稳定的车把设计结果。（1）利用油泥手工制作手掌持握反形（有手指凹陷），并利用数字化三维扫描仪和Stereo 3D获取其三维数据（图1）。（2）利用数字化三维扫描仪获取目标车把（图2）三维数据。（3）分别抽离等量的手掌持握反形（有手指凹陷）与目标车把的截面轮廓线。（4）将两组截面轮廓线置于同一坐标系，并缩放调整位置与尺度。（5）将两组轮廓线进行混合运算，并采取不同的Morphing比例，选择最佳混合迁变结果，其加权比例为3∶7；图4左侧为目标车把局部截面轮廓线，右侧为油泥手掌持握反形（有手指凹陷）局部截面轮廓线，红色为所选最佳结果。（6）以步骤（5）中的结果，创建新曲面，生成最终

细胞生物学实验指导

细胞生物学实验指导目录一．显微镜的使用实验一、几种光学显微镜的使用实验二、参观电子显微镜及生物超薄切片标本制备二．细胞形态结构实验三、细胞大小的形态观察——测微尺的使用实验四、细胞活体染色技术实验五、植物细胞骨架光学显微观察实验六、胞间连丝观察三．细胞化学实验七、鉴定RNA的细胞化学方法——Branchet反应实验八、DNA显色的观察——Feulgen反应实验九、固绿染色法鉴定细胞内酸性蛋白与碱性蛋白实验十、多糖及过氧化酶的显示实验十一、核仁组成区的银染显示与观察四．细胞生理实验十二、细胞膜的通透性实验十三、细胞电泳五．细胞和组织培养技术实验十四、植物原生质体的分离和融合实验十五、植物细胞的培养与观察实验十六、动物细胞融合实验十七、动物细胞的培养与观察六．细胞化学成分的分离实验十八、细胞器的分离、纯化——细胞分级分离实验十九、荧光的细胞化学测定实验二十、细胞活力的鉴别实验一几种光学显微镜的使用

一、实验目的了解几种光学显微镜的结构、工作原理、主要用途和使用方法；掌握使用普通显微镜提高分辨力的方法。二、实验原理 (一)基本原理一般实验室经常使用的光学显微镜都是由物镜、目镜、聚光器和光阑组成，普通显微镜它们的放大原理及光路图如下： AB物体．A1B l第一次成像，A2B2第二次成像，O l目镜．O2物镜， F1为O l的前焦点，F2为O2的前焦点各种光学显微镜的光学放大原理基本相同，各种特殊用途的光镜不过只是在光源、物镜、聚光器等方面作了改动，或在其它方面增设了某些特殊的设备。 (二)几种光学显微镜 l、普通光学显微镜：普通光学显微镜也叫复式显微镜，是最常见，最简单的显微镜。它适于观察一般固定的，有色的透明度较高的标本。其最大分辨力一般为0.2微米，从构造上可分光学、机械和电子三大系统。 2、暗视野显微镜：暗视野显微镜是以丁达尔现象(Tyndall phenomenon)(即光的微粒散射现象)为基础设计的,它使用了特殊的聚光器进行斜射照明,因光源中心束不直入物镜，所以视野黑暗，而被检细胞器因斜射照明发生衍射和反射，所以发亮可见。暗视野显微镜可用增加光照方法增加物体与背景的反差，因而可观察到0．2—0．004微米直径的微小粒子，但它分不清被检物的细微构造，它常用于观察物体的存在与运动。而暗视野显微镜与普通光学显微镜的区别，主要在于聚光器的不同，致使照明方法有别。确切地说，称暗视野显微镜为暗视野照明更为贴切。它是照明光线仅照亮被检样品而不进入物镜。使视野背景暗黑，样品明亮的照明方法。 3、相差显微镜：相差是指同一光线经过折射率不同的介质其相位发生变化并产生的差异。相位是指在某一时间上，光的波动所达到的位置。

安全人机工程学实验指导书

安全人机工程学实验指导书安全人机工程学验指导湖南工学院20XX年3月实验六深度知觉测定实验八记忆广度测量实验实验九动作速度测定实验实验七手指灵活性、手腕动觉方位能力测定实验六深度知觉测定实验目的深度知觉测试是测试人的视觉在深度上的视锐程度，通过测试可以了解双眼对距离或深度的视觉误差，也可以比较双眼和单眼在辨别深度中的差异。实验仪器简介采用EP503A深度知觉测试仪。主要技术指标: 1比较刺激移动速度分快慢二档: 快档50mm/s慢档25mm/s 2比较刺激移动方向可逆。±200mm 3比较刺激移动范围：400mm 4比较刺激与标准刺激的横向距离为55mm 5工作电压

220V 50HE 工作原理: 1 EP503A深度知觉测试仪结构如图2所示: 图 2 EP503A深度知觉测试仪结构移动比较刺激，使之与标准刺激三点成一直线，在实验过程中，可测出被试者视觉在深度上的差异性。 2遥控键如图3所示: 图3 EP503A深度知觉测试遥控器面板示意 3面板布置如图4所示: 图4 EP503A深度知觉测试面板示意三实验步骤 1、被试在仪器前，视线与观察窗保持水平，固定头部，能看到仪器内两根立柱中部。2、以仪器内其中根立柱为标准刺激，距离被试2米，位置固定。另一根可移动的立柱为变异刺激，被试可以操纵电键前后移动。 3、正式实验时，先主试将变异刺激调至任意位置，然后要求被试仔细观察仪器内两根立柱，自调整，直至被试认为两根立柱在同一水平线上，离眼睛的距离相等为止。被试调整后，主试记录两根立柱的实际误差值，填入下表中 4、正式实验时，先进行双眼观察20次，其中:有10吃是变异刺激在前，近到远调整; 有10次是变异刺激在后，远到近调整。顺序和距离随机安排。

细胞生物学实验

实验室规则和要求一般规定 1.上课第一天请先熟悉环境，牢记“安全”是进行任何实验最重要的事项。 2.在实验室内请穿著实验衣（最好长及膝盖下），避免穿著凉鞋、拖鞋（脚趾不要裸露）。留有长发者，需以橡皮圈束于后，以防止引火危险或污染实验。 3.在实验室内禁止吸烟、吃东西、饮食、化妆、嚼口香糖、嬉戏奔跑，食物饮料勿存放于实验室的冰箱中，实验桌上勿堆放书包、书籍、衣服外套及杂物等。 4.所有实验仪器、耗材、药品等均属实验室所有，不得携出实验室外。每组分配之仪器、耗材请在课程开始前确定清点与保管，课程结束后如数清点缴回。公用仪器请善加爱惜使用。实验前后，请把工作区域清理擦拭，并随时保持环境清洁。 5.实验前详阅实验内容，了解实验细节的原理及操作，注意上课所告知的注意事项。实验进行中有任何状况或疑问，随时发问，切勿私自变更实验程序。打翻任何药品试剂及器皿时，请随即清理。实验后，适切记下自己的结果，严禁抄袭，确实关闭不用之电源、水、酒精灯及瓦斯等。 6.身体不适、睡眠不足、精神不济或注意力无法集中，请立即停止实验。实验时间若延长，请注意时间的管制及自身的安全，不可自行逗留实验室。 7.实验完毕，请清理实验室、倒垃圾、灭菌、关闭灯光及冷气，离开实验室前记得洗手。 8.任何意外事件应立即报告教师或实验室管理人员，并应熟知相关之应变措施。

药品 1.使用任何药品，请先看清楚标示说明、注意事项，翻阅物质安全资料，查明是否对人体造成伤害，使用完毕请放回原位。 2.新配制的试剂请清楚注明内容物、浓度、注意事项及配制日期，为避免污染，勿将未用完的药剂倒回容器内。 3.挥发性、腐蚀性、有毒溶剂（如甲醇、丙酮、醋酸、氯仿、盐酸、硫酸、 -巯基乙醇、甲醛、酚等）要在排烟柜中戴手套量取配制，取用完应随即盖好盖子，若不小心打翻试剂，马上处理。 4.有毒、致癌药剂例如丙稀酰胺（神经毒）、溴化乙啶（突变剂）、SDS（粉尘）请戴手套及口罩取用，并勿到处污染，脱下手套后，养成洗手的好习惯。 5.使用后的实验试剂和材料，应放在专用的收集桶内。固体培养基、琼脂糖或有毒物品不得倒入水槽或下水道中。 6.使用刻度吸管取物时，切勿用嘴吸取，请用自动吸管或吸耳球。仪器 1.使用仪器前先了解其性能、配备及正确操作方法，零件及附件严禁拆卸，勿私自调整，并注意插座电压（110V或220V）之类别。 2.使用离心机时，离心管要两两对称、重量平衡，离心机未停下不得打开盖子。冷冻离心机于开机状态时，务必盖紧盖子，以保持离心槽之低温并避免结霜。 3.电源供应器有高电压，切勿触摸电极或电泳槽内溶液，手湿切勿开启电源。

人机交互技术实验二熟悉认知心理学和人机工程学

重庆邮电大学移通学院学生实验报告实验名称：熟悉认知心理学和人机工程学专业班级：数字媒体技术 02141401 姓名：罗钧学号： 2014210xxx 实验日期：

实验二：熟悉认知心理学和人机工程学一、实验目的（1）了解人机交互技术的研究内容；（2）熟悉认知心理学的基本概念和主要内容；（3）熟悉人机工程学的基本概念和主要内容。二、工具/准备工作需要准备一台带有浏览器，能够访问因特网的计算机。三、实验内容与步骤 1.认知学的概念（1）分析“人机界面学”的主要研究内容。人机界面（Human Machine Interaction，简称HMI），又称用户界面或使用者界面，是人与计算机之间传递、交换信息的媒介和对话接口，是计算机系统的重要组成部分。是系统和用户之间进行交互和信息交换的媒介，它实现信息的内部形式与人类可以接受形式之间的转换。凡参与人机信息交流的领域都存在着人机界面。（2）给出“认知心理学”的定义。认知心理学是二十世纪50年代中期在西方兴起的一种心理学思潮，是作为人类行为基础的心理机制，其核心是输入和输出之间发生的内部心理过程。它与西方传统哲学也有一定联系，其主要特点是强调知识的作用，认为知识是决定人类行为的主要因素。认知心理学是最新的心理学分支之一，从1950至1960年代间才发展出来的，到70年代成为西方心理学的主要流派。1956年被认为是认知心理学史上的重要年份。这一年几项心理学研究都体现了心理学的信息加工观点。如Chomsky的语言理论和纽厄尔（Alan Newell）和西蒙（Herbert Alexander simon）的“通用问题解决者”模型。“认知心理学”第一次在出版物出现是在1967年Ulrich Neisser的新书。而唐纳德·布罗德本特于1958年出版的《知觉与传播》一书则为认知心理学取向立下了重要基础。此后，认知心理取向的重点便在唐纳德·布罗德本特所指出的认知的讯息处理模式--一种以心智处理来思考与推理的模式。因此，思考与推理在人类大脑中的运作便像电脑软件在电脑里运作相似。认知心理学理论时常谈到输入、表征、计算或处理，以及输出等概念。（3）给出“软件心理学”的定义。软件心理学（software psychology）用实验心理学的技术和认知心理学的概念来进行软件生产的方法，即将心理学和计算机系统相结合而产生的新学科。 (4)为什么说“了解并遵循认知心理学的原理是进行人机交互界面设计的基础”？请简单阐述之。人机界面设计，主要用理论来指导设计，了解认知心理学，一方面防止出错，另一方面用以提高工作效率。了解认知心理学，可以使设计者对用户，即使用计算机的人，有一个较为清晰的认识，也就是说对人的心理基础要有所了解，以提高人机界面设计的水平，

细胞生物学实验指导书09年

实验一普通光学显微镜的构造和使用一、目的要求 1了解显微镜的基本构造和使用方法 2 掌握油镜的原理和使用方法二、显微镜的基本结构及油镜的工作原理 1．显微镜的基本构造光学部分：接目镜、接物镜、照明装置（聚光镜、虹彩光圈、反光镜等）。机械部分：镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等部件。 2．显微镜的放大倍数和分辨率放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数显微镜的分辨率：表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能力3．油镜的使用原理当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。三、器材 1．永久切片 2. 溶液或试剂：香柏油、二甲苯。 3. 仪器或其他用具：显微镜、擦镜纸等。四、操作步骤 1．观察前的准备（1）显微镜的安置，检查零件是否齐全，镜头是否清洁。（2）调节光源 2．显微镜观察

（1）低倍镜观察（2）高倍镜观察（3）油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，提升聚光镜，在标本中央滴一滴香柏油，使油镜镜头浸入香柏油中，细调至看清物象为止。3．显微镜用毕后的处理观察完毕，上升镜筒，用擦镜纸和二甲苯清洗镜头，后将镜体全部复原。五、思考题 1．用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间滴加什么油？起什么作用？ 2．为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作？实验二胞间连丝的观察一、实验目的观察植物细胞的胞间连丝，加深对胞间连丝功能的认识．二、实验原理植物细胞的细胞壁上有许多原生质的细丝，称胞间连丝。相邻细胞的胞间连丝相互联接，在细胞间的物质运输与信息传递中起桥粱作用，并使细胞的各种生理活动协调一致，使植物体成为统一的有机体。用合适的植物细胞为材料，经简单处理，即能方便地看到胞间连丝。三、实验材料红辣椒表皮细胞临时装片、柿胚乳细胞间胞间连丝切片四、实验步骤

(完整word版)实验二人体上肢动作特性实验.doc=安全人机工程学=湖南工学院

实验二人体上肢动作特性实验人体上肢动作特性涉及到灵活性、稳定性及准确性。人体动作的灵活性是指操作时的动作速度与频率。动作速度是指肢体在单位时间内移动的路程；动作频率是指每秒钟或每分钟动作重复的次数。人体动作的准确性可从动作形式（方向和动作量）、速度和力量三个方面考察。这三个方面配合恰当，动作才能与客观要求相符合，才能准确。通过以下实验可了解人体上肢动作的特性以及影响动作灵活性、准确性、稳定性的因素。实验二-1 手指的灵活性测定一、实验目的人体动作的灵活性是指操作时的动作速度与频率。手指灵活性测试可用于测定手指、手、手腕的灵活性，也可测定手和眼的协调能力。二、实验原理通过将金属细棒插入实验板的圆孔中所需时间，测试手指动作灵活性以及手眼协调能力。比较手指插棒的运动顺序不同的所需时间验证人体上肢运动特性受影响的因素。三、实验装置与测试仪器采用BD-II-601型手指灵活性测试仪（见图2-1），该仪器的主要技术参数如下： 1．实验板圆孔：直径1.6mm，100个，各孔中心距20mm； 2．金属插棒：直径1.5mm，长度20mm，110个； 3．记时：1ms～9 999s，4位数字显示，内藏式整体结构； 4．记时开始与结束可按键，也可以由金属棒插入左上角第1个孔与右上角后1个孔自动进行； 5.实验用镊子：1把。图2-1 手指灵活性测试仪

图2-2 手指灵活性测试仪面板示意图四、实验内容 1.金属插棒放入左侧槽中，优势手拿起右侧槽中的镊子； 2.被试用镊子将左侧槽中的金属棒插入实验板的圆孔中，插入顺序分以下四种： ①先插开始位，从上至下，再从下至上，……依次逐列插入，最后插终止位； ②先插开始位，从上至下，再从第2列开始由上至下，……依次逐列插入，最后插终止位； ③先插开始位，从左至右，再从第2行由右边第一个开始至左，……依次逐行插入，最后插终止位； ④先插开始位，从左至右，再从第二行开始由左至右，……依次逐行插入，最后插终止位；记时会自动开始，到插终止位时结束，并记录插入100个棒所需时间于表2-2； 3.每次重新开始需按“复位”键清零五、数据整理与分析 1.测量数据表2-2 手指的灵活性测定数据顺序 ①②③④ 次数 1 2 3 4 平均时间

细胞生物学实验指导

实验一显微镜的结构及使用 [实验目的] （一）熟悉显微镜的结构及各部件性能。（二）掌握显微镜的使用方法。（三）了解显微镜的维护方法。 [实验原理] 虽然显微镜的目镜和物镜的结构很复杂，但它的作用相当于一个凸透镜，其成像原理和光路图如图1所示，被检物体AB放在物镜（O1）下方的1—2倍焦距之间，则在物镜（O1）后形成一个倒立的放大实像A1B1，这个实像正好位于目镜（O2）的下焦点之内，通过目镜后形成一个放大的虚像A2B2，这个虚像通过调焦装置使其落在眼睛的明视距离处，即25cm,使所看到的物体最清晰，也就是说虚像A2B2是在眼球晶状体的两倍焦距之外，通过眼球后在视网膜形成一个倒立的A2B2缩小像A3B3。 [实验器材]擦镜纸字母装片羊毛交叉擦片普通光学显微镜二甲苯香柏油三内容与方法：普通光学显微镜(Microscope)的外形和结构因类型不同略有差异，但基本结构和功能是相似的。（图2）（一）微镜的基本结构及功能：光学显微镜由机械部分、照明部分和光学部分构成。1.机械部分：（1）镜座：位于底部的金属座。一般为马蹄形，用以支持和稳定整个镜体。（2）镜柱：镜座与镜臂相连的短柱。（3）镜臂：镜柱上方弯曲部分，是取用显微镜时握拿的部位。（4）镜筒：在镜臂的上方倾斜的金属园筒，上端装有目镜、下端转折处装有棱镜，使光线转折450。其上有一固定螺钉将镜筒连接于镜臂上方。（5）调节器：在镜柱两侧有大小两个螺旋，大螺旋为粗调节器，转动时能使载物台快速升降。调节范围较大，适于低倍镜调焦用。小螺旋为细调节器，转动是载物台仅缓慢升降，调节范围较小，适于调节物象的清晰度。此外，在右侧粗调节器内侧有一窄环，称粗调松紧调节轮，用以调节粗调节器的松紧度。向外转时偏紧，向内转时偏松。左侧粗调节器内侧有一粗调限位调节环凸柄，向上推紧时，镜台上的最高点被固定（这两个环一般不需调节）。（6）旋转盘：又称物镜转换器，安装在镜筒下端，为一可旋转的圆盘，上有4个圆孔，

人机工程学实验报告资料

人机工程学实验报告Hust工业设计专业，人机工程课程实验报告

必做实验（7个）：一、镜画仪：是一项目动作技能迁移的实验。因通过镜子反射，和原图形相比镜中图像是上下倒置而左右不变。实验一实验二自变量：试验次数因变量：出错次数、使用时间实验数据分析结果：1.随着实验次数的增加，实验者不变，但是其所用时间及错误次数都在变少，熟练程度明显增加。 2.在同样的情况和同样的图案上，实验的后一次测验比前一次的测验有所进步，就为正迁移效果。

二、光亮度辨别仪光亮度辨别仪的作用：心理学中常用的一种视觉实验仪器。它可以测定明度差别阈限，也可以制作明度量表。自变量：光亮度真实值因变量：实际测量值、差值实验数据分析结果：随着光亮度的增加，实验者对于光的敏感度下降，误差变大。应用范围：可调节亮度的台灯，它的优点在于调节亮度的装置消耗的电能极少，节约了电能，减少了不必要的损耗，灯的亮度可根据不同的天气，不同的时间，人们不同的需求，调节不同的亮度，方便人们的生活。

三、瞬时记忆实验仪仪器同时呈现一组随机数字或字母，在部分报告法实验中，要求被试再现当时指定的一部分，然后在指定的时间内通过大脑记录下来。自变量：瞬时刺激时间因变量：记忆保存量实验数据分析结果：人的大脑在瞬时记忆中，记忆的时间越长，准确率越高。

四、记忆广度测试仪适用于心理特点测定中的数字记忆广度实验和提高记忆力的训练。并具有同时测量被试视觉、记忆、反应速度三者结合能力的功能，是一种常用的心理学测量仪器。自变量：不同的实验者因变量：记忆广度分数、出错位数实验数据分析结果：因为人与人的不同，其记忆能力不同，有记忆广度大的，也有记忆广度小的。应用范围：用在小孩子的智力玩具上，刺激小孩子对数字的认识和敏感性，提高记忆力和反映能力，同时可以很好的帮助小孩子注意力的集中。

细胞生物学实验

细胞培养基本理论一细胞培养概述细胞培养（cell culture）模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。群体培养（mass culture）将大量细胞置于培养瓶中，让其贴壁或悬浮生长，形成均匀的单层细胞或单细胞悬液。克隆培养（clone culture）即将少数的细胞加入培养瓶中，贴壁后彼此间隔距离较远，经过繁殖每一个细胞形成一个集落，称为克隆。组织培养（tissue culture）指把活体的组织取出，分成小块，直接置于培养瓶底或通过胶原纤维血浆支持物的培养瓶底来进行培养。特点：1.，组织不失散，细胞保持原有的组织关系。2，形成生长(cut growth)或形成由扁薄细胞构成的单层细胞培养物。3，在体外生长时，细胞间呈相互依存、互相影响的关系。器官培养（organ culture）将活体中器官或器官一部分取出，在体外生长、生存，并使其保持器官原有的结构和功能特征的培养。特点：1，培养的器官在合适的条件下能生长和分化，存活数周或1 年。2，观察受限，只能用组织切片的方法观察或用透射电镜、扫描电镜观察。细胞培养优点：.1．活细胞：同时、大量、均一性、重复性；2．可控制：各种物理、化学、生物等因素可调控；3．研究方法多样：倒置、荧光、电子、激光共焦显微镜、流式细胞术、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记；4．应用广：不同物种、年龄、组织，正常或异常缺点：人工所模拟的条件与体内实际情况仍不完全相同；当细胞被置于体外培养后，生活在缺乏动态平衡的环境中，时间久了，必然发生变化。三细胞的形态和类型由不同生长方式造成的差异呈悬浮生长时，因生长在液体环境中，胞内渗透压高于周围液体环境，因此胞体基本呈圆形。呈贴附于支持物上生长的细胞，开始为圆形，很快过渡成扁平形，并逐渐恢复至原先的细胞形态. 细胞来源：成纤维型细胞；上皮型细胞；其它，不定型细胞按生长方式：贴壁型细胞（Monolayer cells）；悬浮型细胞（Suspension cells）绝大多数有机体细胞属贴壁型细胞，只有少数细胞类型如某些肿瘤细胞和白细胞可在悬浮状态下生长。按细胞形态(贴壁细胞）：成纤维型细胞；上皮型细胞；其它，不定型贴壁型生长细胞或锚着依存性细胞处于体外培养状态下的贴附生长型细胞在形态上表现单一而失去了在体内原有的某些特征。形态各异反映其胚层起源。如来源于内外胚层的细胞多呈上皮型；来自中胚层的则易呈成纤维细胞型。分为成纤维型细胞；皮型细胞；游走型细胞；多形型细胞贴壁型细胞形态比较成纤维型细胞：梭形或不规则三角形；中央有卵圆形核；胞质向外伸出长短不同的突起；中胚层间质起源上皮型细胞：扁平不规则多角形；细胞中央有圆形核；紧密相连单层膜样生长；内、外胚层细胞如皮肤、表皮衍生物、消化管上皮等游走型细胞：散在生长，一般不连成片；细胞质经常伸出伪足或突起；活跃的游走或变形运动；羊水细胞培养的早期多形细胞型：难以确定规律和稳定的形态；如神经组织的细胞等

人机工程学实验

实验一：双手调节器 1.实验目的 2.实验介绍和实验思路：双手调节器是一种典型的动作技能操作仪器。它是通过双手的操作合作完成设定的曲线轨迹的运动，即是右手完成目标的上下移动，左手完成目标的左右移动。以被试完成任务所用的时间及偏离轨迹的次数，作为衡量其多次练习后的进步水平。 3.实验过程：分两项实验第一种：自变量：同一个人的被实验次数即练习遍数。（每人四次，左右单程各两次）因变量：走完单程过程中个出错次数和时间双手协调能力测试实验中的被试者完成实验的时间及错误次数数据统计分析如下：

根据实验结果绘制的练习曲线如下，用练习遍数作横坐标，用完成任务所用时间及出错次数为纵坐标，做出示意图为： 4.实验结论：完成任务所用的时间及每遍练习中的错误次数随着练习遍数的增加总体趋势偶尔也会错误次数和时间略有增加。实验二：瞬时记忆 1.实验目的：证实瞬时记忆的现象及其性质。 2.实验（方案一）思路：恒定变量设为1，自变量为设定秒数，因变量为报对码数目。方案一数据：

根据图表可知，在设定时间不断减少的情况下，学生答对的图码数目不断减少。（方案二）实验思路：恒定变量为时间（0.4秒），自变量为图码行数不同，因变量为记忆图码正确数量。方案二数据：

根据图表可知，当被测试者接收一行图码信息时，思路清晰，记忆较快，当被测试者接收两行图码信息时，记忆速度不如一行图码快。 3.实验总结：1. 在设定时间不断减少的情况下，学生答对的图码数目不断减少。 2. 瞬间记忆在0.4秒情况下，记忆的合理码数在 3.2—3.5之间。实验三：记忆广度 1.实验目的：学习测定光简单反应时的程序，比较光简单反应时的个体差异，通过测定闪光融合领率．学习使用阶梯法测定感觉阈限 2. 实验介绍和实验思路：影响短时记忆广度的因素很多，组块的大小，熟悉性，复杂性等都会影响短时记忆的容量设自变量为计位数，因变量为正确个数，测试正确率： 3.根据数据分析结果：随着计位数的不断增加，实验者按对的个数不断减少，正确率越来越低，这说明人的记忆广度有限，所以在适当的记忆时间内，应设计相应的可记忆的内容，严防记忆过载。从另一方面讲了解短时记忆的特点，选择正确的方法加以训练，有助于个人记忆的

(完整版)细胞生物学学习心得

细胞生物学学习体会通过网络课程学习,有幸聆听到王金发教授对《细胞生物学》课程的讲授，使我不仅学到了细胞生物学专业新的知识与研究技术、方法,而且在教学方面也受益非浅。下面就我的学习谈一些体会。一、全面学习了细胞生物学的专业知识《细胞生物学》是一门包容量大、发展迅速的学科。内容涉及生物膜的结构与功能；内膜系统区室化形成及各种细胞器的结构与功能；细胞信号转导；细胞核、染色体以及基因表达；细胞骨架体系；细胞增殖及其调控；细胞分化、癌变及其调控；细胞的衰老与程序性死亡；细胞的起源与进化；细胞工程技术等多个方面。 (一)对细胞生物学的专业知识有了更深的认识。 1、细胞通讯方面记得第一次听王老师的课就是讲授细胞的通讯，在多细胞生物中，细胞不是孤立存在的，而是生活在细胞社会中，它们必须协调一致，才能维持机体的正常生理机能，它们的协调是通过细胞通讯来完成的。细胞通讯是通过信号分子与受体的识别，从而在靶细胞内产生一系列反应的过程。信号分子有第一信使和第二信使之分，第二信使位于细胞内，由第一信使与受体识别后最先在胞内产生的，它主要与细胞内受体作用，所以受体也可分为表面受体和胞内受体。信号分子与受体的识别作用具有特异性。细胞信号传递所发生的反应有快速反应和慢速反应。快速反应是信号分子与受体作用后直接引起细胞内的一系列代谢反应；慢速反应则需要引起基因表达，再表现出各种代谢反应。细胞通讯过程是个复杂的过程，一个细胞的周围有上百种不同的信号分子，细胞要对这些信号分子进行分析，做出正确的反应。信号转换的研究在近年很热门，但进展缓慢，主要是因为信号转换的复杂性，不同信号的组合产生的效应是不一样的。 2、蛋白质的合成和分选机理蛋白质的合成是在核糖体上，有两种合成体系，一种是在细胞质中游离的核糖体上，另一种是在膜旁核糖体上合成，它们合成的蛋白质将分布到不同的部

动物遗传学试题库与答案

动物遗传学试题库一、名词解释联会核型随机交配数量性状遗传相关剂量效应等位基因 DNA的复性基因突变核小体 GT-AG法则复等位基因孟德尔群体遗传标记母体效应 PCR 同源染色体基因家族

卫星DNA 基因定位基因遗传力基因组印记遗传多样性图距单位基因频率基因型频率遗传漂变密码的简并性移码突变冈崎片段不对称转录基因工程启动子信号肽帽子结构RNA剪接

缺失假显性单倍体嵌合体主效基因二、填空 1．在动物细胞的细胞器中，含有遗传物质的细胞器是（）。 2．根据着丝点位置的不同，染色体可分为（）、（）、（）和（）四种类型。 3．基因的相互作用包括（）、（）、（）和（）。4．在性别控制中，精子分离法包括（）、（）、（）、（）、（）和激光细胞分离器法。 5．证明核酸是遗传物质的实验有（）、（）、（）。6．DNA二级结构的类型主要有（）、（）、（）、（）和（）。 7．断裂基因由（）和（）间隔组成。 8．根据对遗传信息的改变，基因突变可分为（）、（）（）和（）。 9．影响群体基因频率的因素有（）、（）（）和（）。10．解释杂种优势产生的学说有（）和（）。 11. 染色体要确保在细胞世代中的复制和遗传，起码应具备三种功能元件，一个是（），确保染色体在细胞周期中能够自我复制；二是（），使细胞分裂时完成复制的染色体能平均分配到子细胞中；三是（），以保持染色体的独立性和稳定性。 12. 转录时只有一条链为模板，其中将作为模板的DNA单链称为（），而另一条不作为模板的DNA单链称为（）。 13. 染色体结构畸变可分为四种类型，分别为缺失、（）、（）和易位。 14. 在人类中，大约12个男人中有一个色盲患者（色盲是由于性连锁隐性基因引起的）。则女人中色盲患者的概率为（）。 15．数量性状的表型值是由基因型值和环境值共同作用的结果，其中基因型值又可剖分为（）、（）和（），用公式表示为（）。 16．大肠杆菌DNA复制时，DNA的解链需要几种酶和蛋白质的参与，它们分别为

细胞生物学实验步骤

冻存细胞的复苏 1、于液氮罐中取出冻存管。 2、37℃水浴锅中摇动，使之快速融化。 3、超净台内酒精棉球擦拭，打开冻存管，吸出细胞悬液，注入离心管中，再滴加2倍培养液，混匀。 4、离心：1500转/分，3分钟，弃上清。 5、吸取2-3ml培养液加入到离心管中，吹打制悬，接种到培养瓶中，37℃培养。组织块法培养骨骼肌细胞 1、将新生大鼠处死，再用酒精棉球擦拭其全身消毒，带入超净台内于肩关节和髋关节处剪取四肢（去爪），置培养皿中。 2、PBS液中，清理血污，剥去皮肤。 3、用PBS液洗涤两次，并剔除脂肪，结缔组织，血液等杂物。 4、用将肌组织从骨骼上剪切下来，PBS液清洗后转移至干净培养皿中。 5、加少量培养液，将组织剪成1mm3小块，用吸管将其转移到培养瓶，贴附与瓶底面。翻转瓶底朝上，将培养液加至瓶中，培养液勿接触组织块。入37℃培养箱静置0.5-1小时，轻轻翻转培养瓶，使组织浸入培养液中（勿使组织漂起），37℃继续培养。贴壁细胞的传代和冻存 1、超净台中打开细胞培养瓶，用吸管将培养液吸出。 2、加入PBS液，使其覆盖培养瓶底部，轻轻摇动后倒掉。 3、加入消化液，以覆盖整个培养瓶底部，盖好瓶盖，于倒置显微镜下观察，待见到细胞质回缩、细胞间隙增大后于超净台内倒掉消化液。 4、加培养液终止消化。 5、用吸管吸取培养瓶中的培养液，反复吹打瓶壁，制备细胞悬液。 6、将细胞悬液吸入离心管中，离心1500转/分，3分钟，倒掉上清。 7、加入3ml培养液于离心管中，吹打制悬。 8、取2ml细胞悬液进行接种后，剩余细胞悬液继续离心1500转/分，3分钟。 9、去上清，加入1ml冻存液，制悬，转移到冻存管，再按照-4℃1小时→-20℃ 2小时→-80℃2小时→液氮的顺序进行冻存。细胞计数

(完整word版)安全人机工程学综合实验指导书20131

《安全人机工程学》实验指导书杨轶芙编实验学时：6学时

目录实验一手指灵活性测试 ................................................................... - 1 -实验二动觉方位辨别能力的测定 ..................................................... - 3 -实验三暗适应测试实验 ..................................................................... - 5 -实验四明度适应测试 ......................................................................... - 8 -实验五选择、简单反应时测定实验............................................... - 10 -实验六听觉实验 ............................................................................... - 15 -实验七动作稳定性测试 ................................................................... - 22 -

实验一手指灵活性测试『实验目的』测定手指、手、手腕灵活性以及手眼协调能力。『实验仪器』采用EP707A型手指灵活性测试仪。该仪器的主要技术参数如下： 1、手指灵活性测试100孔 2、指尖灵活性测试M6、M5、M4、 M3螺栓各25个 3、计时范围0～9999.99秒 4、电源电压220V 50HZ 5、消耗功率10W 6、外形尺寸505×310×48 7、重量3.5千克（净重）『实验内容』（一）手指灵活性测试（插孔插板） 1、使用者接上电源打开电源开关，此时计时器即全部显示为0000. 00。然后插上手指灵活性插板（有100个φ 1.6mm 孔），按复位按键被试即可进行测试。 2、被试用优势手拿住镊子钳住φ1.5针，插入开始位，计时器开始计时 3、依次用镊子（从左至右，从上至下）钳住φ1.5针插满100个孔，最后插终止位，计时会自动结束，记录下插入100个棒所需要的时间； 4、每次重新开始需按“复位”键清零。（二）指尖灵活性测试 1、使用者接上电源打开电源开关，此时计时器即全部显示为0000. 00。然后插上指尖灵活性插板（M6、M5、M4、M3螺栓各25个），按复位按键被试即可进行测试。 2、当被试用优势手放入起始点第一个M6垫圈起，计时器开始计时，然后

细胞生物学实验及研究方法 (2)

研究生课程考核试卷（适用于课程论文、提交报告）科目：细胞生物学实验及研究方法教师：宋关斌姓名：学号：专业：生物学类别：学硕上课时间：年月至年月考生成绩：卷面成绩平时成绩课程综合成绩阅卷评语：阅卷教师(签名) 重庆大学研究生院制

重庆大学生物工程学院2014级硕士生《细胞生物学实验及研究方法》课程考核 1.试结合你感兴趣的领域，以某种细胞为研究对象，依据本学院的实验条件设计一个1年期的小课题。请简述立题依据和拟选取的研究内容和研究方法。（20分）答：目前癌症的发病率越来越高，其中肺癌的发病率更是居高不下，因而以人肺癌细胞A549为研究对象。立题依据：核因子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）是一种作用十分广泛的真核细胞转录因子。近年来的研究显示核因子-κB （nuclear factor-κB，NF-κB）的活化能够调节肿瘤细胞的侵袭和转移。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）由肿瘤细胞分泌，能够分解细胞外基质中的Ⅳ型胶原。肿瘤细胞在侵袭的过程中必须穿过富含Ⅳ型胶原的细胞外基质，才能扩散到身体其他部位，因此MMPs 在肿瘤细胞的侵袭和转移中发挥重要的作用。但是对于NF-κ B 活性的改变对肺癌细胞株A549 细胞侵袭能力是否也有影响，目前尚无相关研究报道。研究内容：用表达IκBα的真核表达质粒pcDNA3.1（+）/IκBα转染体外培养的A549 细胞，以抑制A549 细胞的NF-κ B 活性，观察NF-κB活性降低A549 细胞侵袭能力以及对MMPs 表达的影响。研究方法：①构建表达NF-κ B 抑制物α同分异构体（inhibitor of NF-κB，αisoform，IκBα）的真核表达重组质粒pcDNA3.1（+）/IκB α。②体外培养A549 细胞，分为未转染组（不转染质粒）、转染pcDNA3.1（+）组、转染pcDNA3.1（+）/IκBα组，分别转染相应的质粒。③应用RT-PCR、Western blot检测各组细胞IκBα的表达情况，应用凝胶电泳迁移率改变实验（electrophoreticmobility shift assay，EMSA）检测各组细胞NF-κ B 的活性，应用Transwell 侵袭小室检测各组细胞的侵袭能力，应用RT-PCR 方法检测各组细胞MMP-2、MMP-9 的mRNA 水平，应用明胶酶谱法检测各组细胞基质金属蛋白酶-2 （matrixmetalloproteinase-2，MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）的活性。