遗传学实验教案

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遗传学实验教案

遗传学实验教案

任课教师(一):李绍波

任课教师(二):官杰

2008年2月—7月

实验进程安排:

实验一:人体X-小体的观察

一、实验原理:

人类或其他哺乳动物胚胎发育早期,雌性体细胞中2条x染色体中的任意1条异染色质化,即x染色体失活,失活的x染色体称为巴氏小体。

二、实验目的:

1、对剂量补偿现象的进一步理解。

2、掌握制片与显微技术。

3、把观察到的好图像画下来。

三、实验材料:女性口腔两侧细胞

四、实验主要器具、药品:玻片,吸水纸,压片板,油镜瓶,擦镜

纸,醋酸乳酸地衣红,生理盐水

五、实验操作

1、在载玻片上滴一小滴生理盐水,用清洁牙签从女性口腔两侧

粘膜部刮2-3次,在生理盐水中涂布,待干后,滴加1-2滴

醋酸乳酸地红,室温下染色10-15min,勿使干燥,然后

加盖片复以吸水纸,用手指轻压后镜检。

2、在低位镜下,选取核膜完整,染色适度的细胞以轴镜观察。

3、X小体多位于核膜边缘或靠近内侧,形状有微凸形三角形卵

形、短棒形及双球形等。

六、作业:画出你所看到的具X小体的细胞。

实验二:人的染色体组型分析

一、实验目的:了解人类染色体形态大小和分类,掌握染色体组型

分析的基本方法

二、实验原理:

1、染色体的形态:长臂,短臂,着丝粒,次级缢痕,随体(SRT)

2、染色体的组型:是指染色体组在有丝分裂中期的表型,包括

这一组染色体的数目(即基数),大小、形态、着丝点的位

置以及副缢痕,随体的有无等。染色体组型分析就是对染色

体组中的染色体作上述各种形态特征的描述。

3、国际上通常用的染色体3个参数(测量指标):

臂率=长臂(q)着丝粒指数=短臂*100% 短臂(p)该染色体长度

相对长度:某条染色体长度占一套单倍体染色体长度总和的

百分比

4、根据臂率对染色体分类:

正中部着丝点染色体(M)臂率(长/短)1.0

中部着丝点染色体(m)臂率 1.0-1.7

近中部着丝点染色体(sm) 臂率 1.7-3.0

近端着丝点染色体(s t ) 臂率 3.0-7.0

端部着丝点染色体(t)臂率7.0以上

5、人类染色体的分组:

A组(1-3号)

1号:最大的中央着丝粒染色体,长臂靠近着丝粒外有次缢

痕。

2号:最大的亚中着丝粒染色体。

3号:中央着丝粒染色体,比1号小三分之一。

B组(4-5号):为较大的亚中央着丝粒染色体,二者不易区分。

C组(6-12号,X):中等近中央着丝粒染色体,彼此难区分。

6、7、9、11号:着丝粒略近中央。

8、10、12号:偏离中央。

9号:q有次缢痕。

X:位于6、7之间。

D组(13-15号):中等近端着丝点染色体,p常有随体。

E组(16-18号):

16号:中等中央着丝粒染色体,q上有次缢痕。

17号:较小,近中央着丝粒染色体。

18号:较小,近中央着丝粒染色体,p比17号更短。

F组(19-20号):小的中央着丝粒染色体,彼此不易区分。

G组(21-22号,Y):小的近端着丝粒染色体。

21、22号:p常有随体,q常呈分枝状彼此不易区分。

Y:p无随体,q通常平行靠近。

三、实验材料:人类处于有丝分裂中期的染色体图

四、器具:剪刀、尺子

五、实验步骤:

①对每条染色体编号,测量每条染色体的长臂(q)和短臂(p)长

度,算出臂率;

②按照臂率进行染色体配对;

③剪下染色体,按照臂率由小到大的顺序、分成七组、排成四行、

成对地粘贴在实验报告纸上,要求同一行的着丝粒要贴在一条直线上。

④在每对染色体下标注臂率及根据臂率确定的染色体类型。

六、作业:制作人类(雄性)染色体核型图,并将小图片附着于染

色体核型图上方。(注:将小图剪下贴在实验报告纸的前部。)

实验三:黄鳝红细胞微核观察

一、实验原理:重金属离子等环境因子与带负电的核酸结合,引起

核酸裂解,使正在进行细胞分裂的细胞染色体被阻断而产生微

核,属于细胞水平上的染色体畸变现象。

二、实验目的:

1、加深理解环境因子引起的染色体畸变现象。

2、掌握制片方法和显微镜操作。

3、把观察到的好图像画下来。

三、实验材料:黄鳝的新鲜血。

四、实验主要器材、溶液:剪刀、载玻片、甲醇、Giemsa染液、磷

酸缓冲液、显微镜。

五、实验步骤:

1、以剪刀剪去黄鳝尾巴,滴一小滴血于载玻片一端,以另一块

载玻片推片制成血涂片,自然晾干。

2、晾干后的血涂片在甲醇中固定5-10min,转入Giemsa染液

中染色5-10min后取出,以PH7.4磷酸缓冲液冲洗。

3、以滤纸擦干染片上水分,镜检。

4、微核的鉴定标准为:位于细胞质中,与主核完全分开,多为

圆形或椭圆形,染色与主核一致,大小为主核三分之一以下。

六、作业:

画出所看到的微核。

实验四:唾腺染色体

一、实验目的:

1、练习果蝇幼虫唾腺剖离技术和制作唾腺染色体压片的方法。

2、观察多线染色体的特征:如巨大性、横纹等。

二、实验原理:

摇蚊(Chironomns)和果蝇(Drosophila)等双翅目昆虫幼虫的唾腺细胞都很大,某染色体称唾腺染色体(Sa rary Chronosome)为普通染色体的100-150倍又称巨染色体,经多

次复制而不分开,所以它实际上是具有100-4000条染色丝的复

制品。故又称多线染色体,经染色后可见深浅,疏密有致的横

纹,横纹(或称带)的数目与位置恒定,具有种的特征,染色

体的畸变中的缺失、倒位、重复、易位等都可在唾腺染色上识

别出来。因此,是研究染色体畸变的好材料。

多线染色体具有以下几个特征:

1、唾腺染色体巨大,超过一般染色体。

2、唾腺细胞始终处于分裂前期状态,染色配对如粗线期,

故染色体为n。

3、在各染色体上,具异染色质的着丝粒部分,相互靠拢,

形成染色体中心。

4、有横纹处,DNA双链螺旋化程度稍高或稍低,故疏密

有致,深浅有别,对应排列,这意味着基因的排列。

三、实验准备

1、材料:黑腹果蝇的三龄幼虫

2、用具,实体显微镜,镊子,解剖针,载玻片,盖玻片

3、药品:1NHCL ,0.7%NaCL,蒸馏水,醋酸,洋红。

四、实验步骤

1、幼虫的培养:

在果蝇的培养瓶中,经常将羽化的新果蝇除去避免产卵过多,

培养瓶中幼虫过多。这样,幼虫就有较好的培养条件。培养

温度宜在较低温度下进行,约在19℃左右,在这样条件下培

养的三龄幼虫,色白、肥大、行动迟缓。三龄幼虫即将蛹化,

常离开饲料爬到培养瓶壁上,容易用解剖针挑出。不要选择

虽然肥大,但不行动,顔色转黄的正在化蛹的幼虫做实验材

料。

2、唾腺剖取:

A、辨认头部:将幼虫放在载玻片上滴加一小滴0.7%Nacl

如滴加太多,则影响解剖;如滴加太少,则容易使标本干燥,

然后将此载玻片置于实体镜下,因幼虫为乳白色半透明状,

故应取载物台板黑色的一面,便于观察。

辨认头部的方法有三:①有黑点(口器)者是头部②幼虫蠕

动方向一端是头部③与有二黄色突起相对的一端为头部。只

有正确地辨认头部,才能顺利拉出唾腺。

B、拉出腺体:双手各持一解剖针,解剖针宜尖锐,可事先

用砂纸打磨。用左手将所持的解剖针按在虫体头部稍前(约

在虫体前三分之一处),用右手将所持的解剖针按在头部口器

(黑色)稍后处,轻轻向前拨动,将头部与虫体扯开,腺体

随即拉出,漂在生理食盐水中,若头部扯开后,未找见唾腺,

可针解剖针在虫体前三分之一处轻轻向前挤压,唾体也可漂

出。

C、辨认腺体:果蝇唾腺成球棍状,由单层细胞构成,在实体

镜下边缘常附有一小泡沫状脂肪,腺体经确认后,应尽量将

脂肪剔去。

3、染色压片:腺体剖取后,将腺体留在载玻片上,然后将虫体

及0.7%的生理盐水用吸纸拭去。有腺体上加一滴1nNHcl,

2-3分钟后,吸去,再加蒸馏水,吸去(注意:不要将腺体

随Hcl或蒸馏水一同吸去),再加醋酸洋红一滴,染色10分

之后可在酒精灯上稍微加热(注意:不能将醋酸洋红烘干),

然后加盖玻片并以吸水纸盖住,用解剖针木柄垂直轻敲数下

后,再用拇指用力揿压,以唾腺细胞核已压破,染色体已伸

展开来,但又不支离破碎为度,因此用力应适度,用力过小,

则唾腺细胞核未压破,染色体未伸展;用力过大,则染色体

支离破碎,可反复多压几片,用力大小由自已体会掌握。

五、作业:

1、用显微镜观察所制作的唾腺压片。

2、绘制在显微镜所观察到的唾腺染色体图象。

实验五、果蝇的形态和生活史

一、实验目的:

1、掌握果蝇生活史中各阶段形态与特征

2、区别果蝇性别和几种常见突变型的主要性状

3、学习实验中果蝇的培养和繁殖技术

二、实验原理和方法

1、果蝇作为遗传学实验材料的优点:

①生活史短,②繁殖频率高,③饲养方便。

2、果蝇的生活史

①温度与生存周期:30℃以上,25℃,10℃

②生活史各阶段介结:卵→幼虫→蛹→成虫

3、果蝇的饲养

①饲料及培养基的配制

a.饲料

b.培养基

c.瓶及盖,纸灭菌

d.装瓶及装瓶的工作

②果蝇的麻醉

a.麻醉瓶的制作

b.转瓶方法

c. 麻醉度

③果蝇的饲养

a.保种饲养:10-15℃,1-2周换培养基

b.杂交实验:处女蝇的收集,7-8天去亲代,20天安全期

c.培养基被污染的处理:

三、主要材料:正常与突变的果蝇

四、主要用具:果蝇装片,实体镜、乙醚,麻醉瓶,笔,解剖针

五、观察内容:

1、果蝇的性别鉴定(见表一)

2、果蝇突变性状的观察(见表二)

六、作业:画出你所看到的具两个突变性状的果蝇。

表一雌雄果蝇的形态区别

雄性果蝇雌性果蝇

腹片数目4片6片

腹部条纹5条7条

腹尖形状腹尖饨圆腹尖稍大

腹尖顔色顔色较深顔色较浅

有无性梳第一对脚跗节前端有黑色鬃毛梳苏无性梳

二果蝇的突变性状

突变名称基因符号观察部位性状特征

野生型+眼,毛,翅长眼红色,毛正常,翅长超过体长1/3

残翅Vg翅长翅长仅为体长的1/2左右,不能飞行

黑檀体e体色体色为黝黑如黑檀木

棒眼B复眼形状复眼如棒状

焦刚毛Sn刚毛刚毛稀疏而短,末端卷曲如烧焦状

白眼W眼色眼为淡黄色

小翅m翅长翅长与身体等长或稍长

试验六:植物减数分裂的观察

一、实验目的:了解植物花粉形成中的减数分裂过程,通过实践掌

握压片,染色体制片技术,增加对三个遗传学基本

规律的认识。

二、实验原理:

1、花粉形成过程:小孢子母细胞→减数分裂→四分体之后花粉

的形成

2、实验材料的准备:采取小花穗→固定24h→70%乙醇保存

3、减数分裂图片的讲解(结合遗传学三大定律)

①细线:可见染色体,一团于核内

②偶线:开始配对,一团中飘出几根,交换定律

③粗线:可见着色粒

④双线:明显辨出染色体,可看见同源染色体的交叉

⑤终点:核膜开始消失,可见染色体交叉的端化

⑥中期:排列整齐,两个角度不同看到的景象

⑦后期:分离规律与自由组合规律

⑧末期:

⑨第二次分裂:两细胞同步

三、主要材料:植物的处于减数分裂的花

四、实验器具与溶液:实体镜,玻片,解剖针,吸水纸,压片板,

擦镜纸,油镜瓶,生理盐水,改良苯酚品红,固定液,90%、80%和70%的乙醇。

五、实验步骤

1、取干净载玻片,滴上一小滴生理盐水,尽量挑取小花穗,在

实体镜下挑出花药,在生理盐水中以解剖针剥开后,挤压几

次,让分裂中的花粉母细胞飘进生理盐水,除去花药。

2、待生理盐水干后,滴加1-2滴改良苯酚品红染液,染色

20-30min,勿使干燥。

取盖玻片覆以吸水纸压片后镜检。

六、作业

画出你所看到的两个处于不同分裂时期的小孢子母细胞

实验七根尖细胞有丝分裂的观察

一、实验目的

通过实验,学会以压片法观察植物染色体的操作,加深对细胞有丝分裂的理解。

二、实验原理

1、染色原理:苏木精素在进入了细胞内部的铁钒溶液的媒介作用

下,通过苏木精与铁的结合,使其能进入核内对DNA进行染色。

2、材料处理

①减去主根:减去主根有利于侧根的生长与分化,便于获得大量

材料

②以低浓度秋水仙素预处理:使根细胞能正常分裂,使分裂受到

一定抑制

③控制温度:温度与分裂高峰出现的时间有关

3、预处理

①秋水仙素:纺丝在细胞分裂的中期出现,秋水仙素可抑制纺

丝活动,打断纺丝,使细胞分裂停留于中期

②8 –羟基喹啉:能降低细胞质的粘滞度,使染色体更易于在细

胞质中散开

③秋水仙素的作用相对较平衡,而8 –羟基喹啉对染色体有一定

伤害作用,时间长了易造成染色体间交联,优点在于能较好的

显示缢痕与副缢痕

④预处理以8 –羟基喹啉(0.002m)以2h为宜,如学生不需

进行核型分析则可处理2个半小时,时间太长则缩短过于严重

⑤以低温预处理可降低细胞质粘度,有利于染色体散开

4、固定

①时间:以12-24h为宜,小根,嫩根时间较短,太长了则易引起

细胞变脆(冰乙酸)

②如不长久保存材料,可将材料自固定液中一步浸入70%乙醇,

但需洗得无冰乙醇味,如需长久保存则自固定液中从

90%-80%-70%乙醇中,并在保存瓶中加入2-3滴甘油冰箱保存

5、水解

①用孚尔根法与改良苯酚品红法以1NHd 60℃下水解,时

间以10-12min为宜,短则不易敲片(参见后)

6、分色

①45%冰乙酸:脱去细胞质内染色,并将细胞核内的染色变淡

②烤片:以不烫手为宜,太热则烤焦细胞

烤片作用:a.使分色更为容易,b.通过加热使细胞胀大,利于

压片时染色体更好的分散。

三、实验材料:植物根尖细胞

四、实验用具与溶液:

显微镜,玻片,镊子,青霉素瓶,长吸管,解剖针,刀片,水溶锅,(酒清灯),吸水纸,压片板,擦镜纸,油镜瓶、改良苯酚品红,45%乙酸、固定液、90%,80%,70%乙醇

五、实验步骤

1、取1-2条根,加入少量经预热的1NHd,于60℃下水溶水

解min(准确),小心吸出Hd,以蒸馏水小心洗三洗,

加入少量改良苯酚品红染液,染色20-30min,小心吸出染

液,加入蒸馏水小心洗3次。

2、取出根,在载玻片上小心切取根尖处0.1cm,以吸水纸吸

去水份,加入1滴染液,加上盖玻片,覆以吸水纸压片后,

以解剖针柄轻轻敲打,将细胞打散后镜检。

六、作业

画出你所看到的两个处于不同分裂时期的细胞。

实验八黄鳝肾细胞染色体观察

一、实验目的和原理:

本实验目的是通过黄鳝肾细胞染色体标本的制作过程,初步掌

握动物染色体制片技术。

由于气候转冷,黄鳝的活动能力低,新陈代谢不够旺盛,黄鳝

肾细胞中处于分裂期的细胞数目减少,不利于观察染色体,给

黄鳝注射适量鲤鱼脑垂体数素,增强其新陈代谢,使更多的细

胞进行分裂期,因PHA是人和其他动物有丝分裂刺激素,在只

有一定数目的分裂细胞的情况下,注射适量的秋水仙素,破坏

有丝分裂纺锤体的活动,可使较多的细胞停留在中期分裂相,

经制片可观察计数染色体。

二、材料:黄鳝

三、实验准备:

1、器材:注射器,大小剪刀各一把,镊子二把,培养皿,筛绢,

有刻度离心管,离心机,吸管,恒温水浴锅,烧杯,小玻棒,

显微镜,天平

2、药品

①鲤鱼脑垂体注射液:用鲤鱼0.7%NaCL配制

②0.5%的PHA注射液

③0.5%秋水仙素注射液:0.85 %NaCL配制

④0.85%的NaCL溶液

⑤0.075MKCL低溶液

⑥固定液:甲醇3份,冰醋酸1份(需用时临时配制)

⑦Giemsa原液

⑧磷酸缓冲液

⑨加拿大树胶

⑩二甲苯

四、实验步骤

1、于研钵中加少许0.7%NaCL将鲤鱼脑垂体磨成浆状,注射适

量于所选的黄鳝腹腔内(一粒鲤鱼脑垂体大约能处理20条

左右黄鳝)

2、24小时按体重每100克注射0.2ml 0.5%PHA,作肌肉的注

3、三天后用0.1%秋水仙素(用0.85%的NaCL配制),按体重

每100克注射0.2ml作肌肉注射。

4、4-5小时后剪断黄鳝的颈动脉放血,用小镊子取肾组织,放

入盛有0.85NaCL的培养皿中,洗净血污及附着的其他组织,

将条形肾脏剪成若干段,放掉血细胞。

5、将洗净肾组织转入5ml小烧杯中,用小剪刀将其尽量剪碎,

通过筛绢过滤于另一5ml小烧杯中,滤液倒放有刻度离心

管。

6、将离心管两端均衡后离心6分钟(800转/分)

7、去上清液,沿离心管滴加35℃预热的0.095MKCL心溶液理

理,从滴加低溶液始计算时间,低渗40分钟。

8、于低渗后的细胞悬液中加入等体积的固定液,加固定液时注

意用吸管沿壁加入,然后用吸管温和吹打,将低溶液造成的

细胞团块吹散开,静置15分钟。

9、同6

10、去上清液,沿壁加入1mS固定液,用吸管温和吹打后静置

固定20分钟。

11、同6

12、同10

13、同6

14、吸去大部分固定液,只留0.1-0.5ml固定液,用吸管吹打成

细胞悬液,吹打时注意不要将细胞吸到管上部,也不要接触

离心管上部,否则会丢失许多细胞。

15、滴片:用吸管吸取细胞悬液,距玻片5cm左右的距离滴片,

每张滴片滴1-3滴(根据细胞悬液的浓度)为了避免由于滴

片距离掌握不好造成染色的分散程度不佳,可在一张片子上

滴3滴采取不同的滴片距离。

16、Giemsa封片

17、镜检与封片

五、作业

绘典型的中期分裂细胞图,并计算染色体数。

实验九植物多倍体的诱导与观察

一、实验目的:

1、了解人工诱发多倍体植物的原理、方法及其在植物育种中的应用。

2.、观察多倍体植物,鉴别植物染色体数目的变化及其引起植物其它器官的变异。

二、实验原理:

自然界中各种生物的染色体数目是相当恒定不变的。但是,在自身或外界环境条件的作用下,生物染色体的数目也会发生改变。秋水仙素、异生长素、富民农等物质均可诱发植物的多倍体。多倍体的产生,属于一种染色体数目变异现象,这一变异可引起植物性状的改变,而这些改变既有有害的,也有有利的。

三、材料:

玉米、大麦或水稻种子

四、器具和药品:显微镜、载波片、盖玻片、培养皿、镊子、剪刀、

滴管、吸水纸、测微尺、0.1%和0.025%的秋水仙素、1mol/L的HCl溶液、改良石炭酸品红溶液、碘化钾。

五、实验步骤:

1. 把玉米种子浸泡在0.1%的秋水仙素溶液24小时;

2. 转移萌发种子(清洗)到含有0.025%的秋水仙素溶液的培养皿中,20℃培养发芽。

遗传学实验指导

遗传学实验指导 实验1 细胞有丝分裂与减数分裂 实验1.1 植物根尖细胞有丝分裂过程的制片与观察 目的要求 学习和掌握植物细胞有丝分裂制片技术;观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征及染色体的动态行为变化。 实验原理 有丝分裂是植物体细胞进行的一种主要分裂方式。有丝分裂的目的是增加细胞的数量而使植物有机体不断生长。在有丝分裂过程中,细胞核内的遗传物质能准确地进行复制,然后能有规律地均匀地分配到两个子细胞中去。植物有丝分裂主要在根尖、节间、茎的生长点、芽及其它分生组织里进行。将生长旺盛的植物分生组织经取材、固定、解离、染色、压片等处理即可以观察到细胞内的有丝分裂图象。如若需要进行染色体计数,则需进行前处理,即取材之后采用物理的或化学的方法,阻止细胞分裂过程中纺锤体的形成,使细胞分裂停止在中期。这时,染色体不排到赤道板上,而是散在整个细胞质中。这十分便于对染色体的形态、数目进行观察。 试剂和器材 1材料 均可以大蒜(Allium sativum 染色体数目2n=16)、玉米(Zea mays 染色体数目2n=20)、洋葱(Allium cepa染色体数目2n=16)或蚕豆(V icla faba染色体数目2n=12) 等根尖为实验材料。 2试剂 95%乙醇、冰乙酸、石炭酸品红、l mol/L HCl。 3器材 恒温培养箱、显微镜、水浴锅、载玻片、盖玻片、单面刀片、镊子、培养皿、量筒、吸水纸。 操作方法 1生根 植物根尖是植物的分生组织,取材容易,操作方便。植物根尖细胞分裂旺盛,因此,它是细胞有丝分裂相制备与观察的理想选取部位。大蒜、洋葱易于在水培、沙培、土培条件下生根。采用水培时要注意在暗处培养,以满足根生长条件,使根系生长旺盛。玉米和蚕豆种子可先用温水浸泡1天之后,再转入铺有多层吸水纸或纱布的培养皿中,上面盖双层湿纱布置于24~26℃温箱中培养,每天换水二次。 2取材 待根长至l.5~2.0 cm时,将根取下。若实验只需观察细胞有丝分裂的过程和各时期的特征,可将根尖直接放入Carnoy固定液(95%乙醇:冰乙酸=3:1)中固定;如果要观察染色体形态和数目,则必须对根尖进行前处理后才能固定。取材和固定必须要在细胞分裂高峰期进行,即分裂细胞占细胞总数最大值时进行,这样分裂细胞比例大,便于选择和观察。 不同的植物在不同的环境条件,其细胞分裂高峰的时间是不同的。大蒜和洋葱的细胞分裂高峰期通常

遗传学实验

实验一果蝇遗传性状的观察 背景知识 果蝇是在世界各地常见的昆虫,属于昆虫纲,双翅目,果蝇科,果蝇属(Drosophila)。果蝇属有3000多种,我国发现800多种,遗传学研究中通常用的是黑腹果蝇(D.melanogaster)。作为遗传学研究的材料,果蝇具有非常突出的优点。它形体小,生长迅速,繁殖率高,饲养方便;世代周期短(约12天即可繁殖一带);突变性状多;染色体数目少,基因组小;实验处理十分方便,容易重复实验,便于观察和分析。果蝇的遗传学研究广泛而深入,尤其在基因分离、连锁、互换等方面十分突出,为遗传学的发展做出了突出的贡献。目前果蝇仍然是遗传学、细胞生物学、分子生物学、发育生物学等研究中常用的模式生物。 一、实验目的 1.掌握果蝇的基本特征及鉴别雌、雄果蝇的方法,熟悉常见突变型。 2.了解果蝇生活周期特征及各阶段的形态变化。 二、实验材料 野生型和几种常见的突变型黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)。 三、仪器设备 双筒立体解剖镜,培养瓶(粗平底试管或牛奶瓶)及麻醉瓶(与培养瓶一致的空瓶),白瓷板,毛笔。 四、药品试剂 乙醚,玉米粉,酵母粉,蔗糖,丙酸。 五、实验内容和步骤 (一)生活周期的观察 果蝇是完全变态昆虫,其完整的生活周期可分为4个明显的时期,即卵、幼虫、蛹和成虫(图1-1)用放大镜从培养瓶外即可观察到这4个时期,也可取出用立体解剖镜仔细观察。 果蝇的生活周期长短与温度关系很密切,低温使生活周期延长,生活力减低,高于30℃使果蝇不育甚至死亡。果蝇培养的最适温度为20~25℃,25℃培养条件下果蝇从受精卵到成虫约10天,其中卵和幼虫期5天,蛹4天。成虫果蝇在25℃时约成活15天。 卵:受精卵白色,椭圆型,腹面稍扁平,长约0.5mm,在前端背面伸出一触丝,他能使卵附着在事物上。 幼虫:受精卵经24h就可孵化成幼虫,幼虫经2次蜕皮到第3龄期体长可达4~5mm。肉眼观察可见幼虫一端稍尖为头部,上有一黑色沟状口器。 蛹:幼虫4天左右即开始化蛹。化蛹前3龄幼虫停止摄食,爬到相对干燥的表面(如培养瓶壁),渐次形成一个菱形的蛹,起初颜色淡黄、柔软,以后逐渐硬化变成深褐色,此时即将羽化。 成虫:刚从蛹壳中羽化出来的果蝇,虫体较肥大,翅还未展开,体表也未完全几丁质化,所以成半透明的乳白色。透过腹部体壁还可以观察到消化道和性

遗传学实验指导

《遗传学实验》简介 课程名称:遗传学实验 课程性质:随课实验 课程属性:基础课 学时学分:学时16学分1 面向专业: 一、课程的任务和基本要求 遗传学实验是生物学所有专业的一门专业基础课程,是一门独立的实验课程,同时也是为了配合遗传学的教学而开设的一门实验课程,本课程由基础操作性、综合性和设计性等多层次实验内容构成,目的在于巩固和加深学生对遗传学知识的理解、验证遗传学理论、并初步掌握遗传学研究所必需的基本实验技术。在此基础上,进行一定比例的综合性、设计性实验,将实验理论和实验技能融为一体,从而培养学生的基本实验思想、实验方法、实验技能和综合应用能力。本课程的任务是从个体、细胞水平揭示遗传学的基本现象与规律,培养学生牢固掌握经典遗传学研究方法与技术,并初步掌握现代遗传学实验操作技能,熟悉遗传学分析方法,同时要求学生初步具备进行遗传学创新性研究的基本能力与素质。 二、实验项目 植物染色体核型分析 果蝇的培养及生活史和形态观察 小鼠骨髓染色体的制片及观察 人群中基因频率的调查 人类巴氏小体观察 三、有关说明 1、与其它课程和教学环节的联系 先修课程:动物学、植物学、生物化学、微生物学 后续课程:分子生物学、基因工程、人类遗传学 平行开设课程:细胞生物学 2、教材和主要参考书目 (1)教材:刘祖洞江绍慧遗传学实验高等教育出版社1987年第二版 (2)主要参考书目 ①张文霞等编遗传学实验指导高等教育出版社2005 年版 ②张贵友等编普通遗传学实验指导清华大学出版社2003 年 实验一1、洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察(3学时) 一、教学基本要求: 1. 掌握植物染色体压片法。 2. 掌握有丝分裂各时期的特征。 3. 掌握用秋水仙素诱发多倍体的一般方法 二、教学内容: 1、洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察 〖目的和要求〗 本次实验通过对植物根尖的制片和观察, 要求学生初步学会对植物组织、细胞的固定、离析和压片方法,了解有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化情况,掌握有丝分裂各时期的特征。〖实验原理〗 有丝分裂是细胞均等增殖的过程, 是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中.细胞内每条染色体都能复制一份, 然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目,形态和性质上均是相同的,在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。分生组织→固定→解离→染色→压片→观察(间期、早期、中期、后期、末期) 〖材料和方法〗 洋葱或大蒜或种子根尖 水浴锅、显微镜 卡诺氏固定液、石炭酸品红(或醋酸洋红)染色液,1N盐酸(或0.5%果胶酶+纤维素酶),秋水仙素(0.1%)1、取材:大蒜、洋葱根尖,恒温箱

遗传学实验课程教学大纲

遗传学实验课程教学大纲 课程名称:遗传学实验Experiment of genetics 课程编号:1313013224 课程类别:专业课 总学时数:33 实验时数:33 学分:1 开课单位:生命科学学院生物综合教研室 适用专业:生物科学 适用对象:本科(四年) 一、课程的性质、类型、目的和任务 遗传学实验课是为加深学生对所学的遗传理论课内容的理解开设的专业必修课,目的是使学生系统学习和掌握现代遗传学实验理论和实验技术,巩固和验证课堂教学内容,培养学生严肃、认真、客观的态度,提高学生的动手能力、综合分析问题、解决问题的能力和理论联系实际的能力,为培养21世纪教学和科研人员奠定基础。 二、本课程与其它课程的联系与分工 本课程与生物化学、微生物学、植物生理学,以及动、植物学,细胞生物学课程均有联系,所以在上述课开出后有利于该课的顺利开出。 三、课程内容及教学基本要求 [1]表示“了解”;[2]表示“理解”或“熟悉”;[3]表示“掌握”; 实验一、大蒜根尖的有丝分裂 有丝分裂各时期动态变化[1];细胞的固定、解离、压片方法[3]; 实验二、细胞的减数分裂 植物花粉形成中的减数分裂过程[1];染色体的动态变化[2];制备减数分裂玻片标本的方法和技术[3]; 实验三、染色体核型分析 染色体核型分析的基本方法[3];显微摄影技术[1]; 实验四、果蝇生活史及形态观察 果蝇的生活史[1];果蝇几个突变型的形态特征[3]; 实验五、小白鼠骨髓染色体制片技术 小白鼠骨髓细胞制作染色体标片[3];空气干燥法基本技术[1]; 实验六、果蝇唾腺染色体的观察 剖取果蝇唾腺技术[3];制作唾腺染色体标本的方法[3];多线染色体的特征[2]; 实验七、果蝇的单、双因子杂交、伴性遗传、三点测交实验 果蝇的杂交技术[3];统计处理方法[3];伴性遗传和非伴性遗传区别[1];绘制遗传学图的原理和方法[3]; 实验八、人工诱发多倍体植物

遗传学实验常考题

遗传学实验考题 1、固定植物材料的卡诺氏(Carnoy)固定液配方是什么? 配方:无水酒精3份:冰醋酸1份或无水乙醇6份,氯仿3份,冰醋酸1份 2、固定动物材料的卡诺氏(Carnoy)固定液配方是什么? 3、有丝分裂实验的原理是什么? 实验原理:有丝分裂是真核细胞分裂的一种常见方式,存在于所有的细胞当中。这一过程的特点是:染色体复制一次,分裂一次,结果形成两个核,分裂为两个细胞,每个核中含有二倍体的染色体,染色体数目不减半。 4、有丝分裂实验的目的是什么? 实验目的:①了解动植物细胞有丝分裂全过程。 ②掌握植物有丝分裂样品的制备方法,学会观察各 种有丝分裂的细胞 5、制作植物有丝分裂染色体标本的基本步骤有哪些? 自来水浸泡蚕豆(1 至2天)——萌发3~4天——取根尖

(1~1.5cm)秋水仙素处理——卡诺氏固定液固定24小时,70%的酒精保存(4°C)(水洗)——0.1mol/L HCl 水解(60。C8至10分钟)——洗后用改良苯酚品红染色(20分钟)——压片法制片,观察(低倍到高倍) 6、制作植物有丝分裂染色体标本时需用哪些工具、器皿?用具:镊子,培养皿,温度计,温浴锅,刀片,载玻片,盖玻片,吸水纸,显微镜等。 7、制作植物有丝分裂染色体标本时需用哪些药品和染液?盐酸,碱性品红,改良苯酚品红染色酒精,秋水仙素,卡诺氏固定液 8、减数分裂实验的原理是什么? 实验原理:在动、植物有性生殖过程中,由一个二倍体到单倍体的减数分裂过程:动物的精巢分化出精母细胞,精母细胞减数分裂,形成单倍染色体的精子。对精母细胞分裂过程的观察,可用来了解动物生殖细胞的形成过程。

遗传学实验-英文

Genetic Experiment Course code:81070100 Course Title:Genetic experiment Credit: 1.5 Semester classes:5 Teaching object: Profession of all undergraduate students in biology Pre-course: Biochemistry Microbiology Cell Biology Course Director: Zhang Jianmin . Title: Professor. Course Description: The object chiefly include experiments testing basic theory (the meiosis, three basic laws of the Genetics) and branching object (basic experiments of the inheritance of microorganism, the inheritance of quantitative character, the inheritance of population, the inheritance of human, the molecular inheritance and so on). As the students do the genetic experiments and study basic theory so that their ability to analyse and to solve a problem can heighten. Courses assessment: Course final results= Usually results multiplied by 70% + Examination results at the end multiplied by 30%. Designated teaching: Liu Zudong Jiang Shaohui. “Genetic Experiment” 1992. Beijing. Higher Education Press. A list of reference books: Yang Daxiang. “Genetic Experiment”.2004, Beijing. Science Press.

遗传学实验指导

遗传学实验指导

实验须知 一、实验课的目的 1.培养锻炼科学的思维方法,实事求是的科学态度和严格的科学作风,提高分析问题解决问题的能力。 2.通过实验加深对理论知识的理解,学习掌握基本的实验技术和实验技能,为今后学习和研究打下一定的基础。。 3.培养学生爱好公物,爱护集体,团结互助的优良道德品质。 二、实验课要求 1.课前必须预习,了解基本原理和主要步骤及意义,写出预习报告。 2.上课必须穿白大褂,带实验讲义和实验报告纸。 3.遵守实验室制度,注意安全(水、电、暖、强酸、强碱、有毒物质等)。 4.实验中要正规操作,动手动脑主动进行实验;掌握关键,力求得出准确结果;仔细观察,认真思考,及时做好记录;综合分析得出正确的结果。 5.在实验过程中不诉大声喧哗,有问题及时请教老师或同学。 6.器材、药品等按规定使用,严禁乱用乱放。 7.爱护仪器,在实验过程中因个人未能安实验要求操作而导致的器材损坏,按规章制度进行赔偿。 8.实验结束后,相关器材要彻底清洗干净,放到指定原位。 9.废弃物按要求分类收集、处理。 10.值日生要打扫干净实验台、地面,并负责关好门窗、检查水、电等。 11.因故不能上实验者应有请假手续。

实验1 植物染色体压片技术 一、实验原理 植物根尖的分生细胞的有丝分裂,每天都有分裂高峰时间,此时把根尖固定,经过染色和压片,再置放在显微镜下观察,可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。 二、实验目的 学习植物材料的固定方法和常规压片技术;观察染色体的动态变化。 三、实验材料 洋葱(Aillum cepa)根尖 四、实验器具和药品 1.用具:染色板,载玻片,盖玻片,指管,温度计,试剂瓶,滴瓶,镊子,解剖针,毛边纸。 2.药品:无水酒精,70%酒精,冰醋酸,对二氯苯或秋水仙素,醋酸钠,碱性品红,石炭酸,甲醛,山梨醇,二甲苯。 a卡诺固定液的配制:用3份无水酒精,加入1份冰醋酸(现配现用)。 b染色液的配制: 配方Ⅰ.石炭酸品红(Carbol.fuchsin),先配母液A和B。 母液A:称取3g碱性品红,溶解于100mL的70%酒精中(此液可长期保存)。 母液B:取母液A 10mL,加入90mL的5%石炭酸水溶液(2周内使用)。 石炭酸品红染色液:取母液B 45mL,加入6mL冰醋酸和6mL 37%的甲醛。此染色液含有较多的甲醛,在植物原生质体培养过程中,观察核分裂比较适宜,后来在此基础上,加以改良的配方Ⅱ,称改良石炭酸品红,可以普遍应用于植物染色体的压片技术。 配方Ⅱ:改良石炭酸品红。取配方Ⅰ石炭酸品红染色液2-10ml,加入 90-98ml45%的醋酸和1.8g山梨醇(sorbitol)。此染色液初配好时颜色较浅,放置二周后,染色能力显著增强,在室温下不产生沉淀而较稳定。 1N Hcl :浓HCl82.5ml→1000ml 五、实验说明 1.有丝分裂主要发生在根尖、茎生长点及幼叶等部位的分生组织,根尖取材容易,操作和鉴定方便。根尖由于取材方便,是观察植物染色体最常用的材料,有些植物种子难以发芽,或仅有植株而无种子,也可以用茎尖作为材料; 2.植物细胞分裂周期的长短不尽相同,通常在十到几十小时之间,温度明显地影响分裂周期,对于一个不太熟悉的实验材料,最好在特定温度下长根,掌握有丝分裂高峰期,以便得到更多的有丝分裂的细胞。 3.预处理是降低细胞质的粘度,使染色体缩短分散,防止纺锤体形成,让更多的细胞处于分裂中期。预处理的方法有低温预处理和药物预处理。(1)低温预处理将材料浸在蒸馏水中,放在1-4℃冰箱内离体处理24h。此法效果很好,对染色体无破坏作用,染色体缩短均匀,简便易行,各种作物都适用。(2)药物预处理:①0.05-0.2%秋水仙素溶液与室温下处理2-4h,对抑制纺锤体活动效果明显,易获得较多的中期分裂相,且染色体收缩较直,有利于染色体结构的研究。②饱和对二氯苯溶液室温下处理3-5h,对阻止纺锤体活动和缩短染色体效果也较好,但对染色体小而多的植物来说不利于染色体的计数。③0.002-0.00mol/L8-羟基喹啉18℃条件下处理5-6h,可以引起细胞粘度的改变,导致纺锤体活动受阻,使中期染色体在赤道面上保持相应的排列位置。缢痕区也较为清晰。一般认为对中等或长染色体的植物较合适。④70ppm放线菌酮和250ppm8-羟基喹啉的混合液于25℃条件

遗传学实验 减数分裂的制片与观察

实验二减数分裂的制片与观察 PB12210261 徐导 中国科学技术大学生命科学学院 【摘要】 本实验选取玉米雄花作为实验材料,首先将已固定好雄花的花药剥离出来,然后通过对花粉母细胞进行解离、染色、压片来观察细胞减数分裂的全过程。【关键词】 减数分裂细线期偶线期粗线期双线期终变期 【Abstract】 In this experiment, we chose Zea mays as the material. We got a lot of cells in meiosis. Then we disposed the cells in order to observe the whole processes of the meiosis. 【Key words】 Meiosis leptonema zygonema pachynema diplonema diakineses 【实验部分】 一、实验目的 1、了解植物生殖细胞的形成过程; 2、熟悉减数分裂各时期的特点,加深对减数分裂的认识; 3、掌握植物花粉母细胞的压片技术和方法。 二、基本原理 减数分裂(meiosis),又称成熟分裂(maturation division)是在性母细胞成熟时,配子形成过程中所发生的一种特殊方式的有丝分裂。性母细胞(2n)连续进行两次核分裂(第一次分裂和第二次分裂),形成四个染色体数目减半的配子(n)。经过受精,雌雄配子(n)融合为合子,又恢复了体细胞染色体数目(2n)。确保了亲代与子代间染色体数目的恒定性,从而保证了物种相对的遗传稳定性。在适当的时候采集植物的花蕾制备染色体标本就可在显微镜下观察到植物细胞的减数分裂。整个减数分裂可分为下列各个时期: 第一次分裂 前期Ⅰ减数分裂的特点之一就是前期Ⅰ特别长,而且又较复杂。通常根据细胞核内结构变化特征又将这一期分成五个时期,即细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。 细线期(leptotene):这是减数分裂的开始时期,染色质开始浓缩为细而长的丝状,首尾不分,且细线局部可见到念珠状颗粒,即染色粒。此时,虽然染色体已经复制为二个染色单体,但在显微镜下还看不出结构上的双重性。 偶线期(zygotene):各同源染色体开始配对(pairing),出现联会现象。2n个染色体联会为n对染色体。染色体形态与细线期差别不大。在显微镜下不易与细线期分开,但可根据染色体分散状态及粗细变化判断其是靠近细线期还是趋于偶线期。 粗线期(pachytene):二价体逐渐缩短变粗,同源染色体配对完毕,这种二价体包含了四条染色单体,又称四合体(tetrad)。此时,非姊妹染色单体间出现交换(crossing over),造成遗传物质的重组。 双线期(diplotene):配对的同源染色体进一步缩短变粗,由于同源染色体间发生过互换,开始分离而出现交叉(chiasmata)现象。此时染色体呈现扭花状。

遗传学实验设计

④红:绿=1∶0 (2分)厚:薄=3∶1 (2分)(注:只有比例,没有性状不得分) 例题2:果蝇的灰身、黑身由常染色体上一对基因控制,但不清楚其显隐性关系。现提供一自然果蝇种群,假设其中灰身、黑身性状个体各占一半,且雌雄各半。要求用一代交配试验(即P→F1)来确定其显隐性关系。(写出亲本的交配组合,并预测实验结果) 答案:方案一P:多对灰身×灰身 实验结果预测:①若F1中出现灰身与黑身,则灰身为显性 ②若F1中只有灰身,则黑身为显性 方案二P:多对黑身×黑身 实验结果预测:①若F1中出现灰身与黑身,则黑身为显性 ②若F1中只有黑身,则灰身为显性 方案三P:多对灰身×黑身 实验结果预测:①若F1中灰身数量大于黑身,则灰身为显性 ②若F1中黑身数量大于灰身,则黑身为显性 3、确定两对基因在染色体上的位置(是否符合自由组合定律、位于一对还是两对同源染色体上) 基本思路:是否符合测交与自交的特殊比例、单倍体育种、花粉鉴定

结果结论:若符合,则在两对同源染色体上 若不符合,则在一对同源染色体上 例题:果蝇的长翅对残翅、正常肢对短肢、后胸正常对后胸变形、红眼对白眼分别为显性,控制这些性状的基因可能位于X、Ⅱ、Ⅲ这3对同源染色体上,请回答下列问题: (1)基因与染色体的关系为:基因在染色体上呈排列。 (2)果蝇性状中的残翅、短肢、后胸变形、白眼是由于导致的。 (3)已知控制果蝇眼色的基因位于X染色体上。请写出能根据后代眼色就识别出性别的亲本组合(基因型和表现型)。 (4)实验室内有各种已知基因性和表现性的雌雄果蝇若干,请任意选取两对性状的表现型和符合要求的基因型,用一次杂交确定控制这两对性状的基因是否位于两对同源染色体上(用遗传图解表示推理过程) 答案: 4、确定显性性状个体是纯合子还是杂合子(某一个体的基因型) 基本思路:6种杂交组合(如甲、乙为一对相对性状) 测交:甲×乙→全甲(纯合)甲×乙→有乙(杂合) 自交:甲→全甲(纯合)甲→有乙(杂合) 例题1:家兔的褐毛与黑毛是一对相对性状。现有四只家兔:甲和乙为雌兔,丙和丁为雄兔:甲、乙、丙兔为黑毛,丁兔为褐毛。已知,甲和丁的杂交后代全部为黑毛幼兔;乙和丁的杂交后代中有褐毛幼兔。 (1)用B-b表示控制毛色性状的等位基因,依次写出甲、乙、丁三只兔的基因型______。 (2)用上述四只兔通过一次交配实验来鉴别丙兔的基因型,应选用______兔与丙兔交配。若后代表型______,证实丙为纯合体;若后代表型______,则证实丙兔为杂合体。 答案:(1)BB、Bb、bb (2)乙全黑色有褐色 例题2:猫的长尾和短尾是受常染色体一对等位基因(D-d)控制的。一只短尾雌猫的父本也是短尾型,但它的母本和同胞中的雌雄个体却是长尾型。 (1)这只猫的父本基因型为______;母本基因型为______。 (2)这只短尾雌猫的基因型与其父本基因型______。 (3)若用回交法判断出尾型性状的显隐性关系,你采用的交配组合为______。如果回交后代有性状分离,______为显性;如果回交后代无性状分离,则______为显性。 答案:(1)dd或Dd Dd或dd (2)相同 (3)该短尾雌猫与父本回交短尾长尾 5、确定某变异性状是否为可遗传变异 基本思路:利用该性状的(多个)个体多次交配(自交或杂交) 结果结论:若后代仍有该变异性状,则为遗传物质改变引起的可遗传变异 若后代无该变异性状,则为环境引起的不可遗传变异

园艺植物遗传学部分实验指导

植物基因组DNA的提取(CTAB法) 一、原理 植物组织中绝大部分是核DNA,它和组蛋白、非组蛋白结合在一起,以核蛋白(即染色质或染色体)的形式存在于细胞核内。CTAB是一种阳离子去污剂,可溶解细胞膜,它能与核酸形成复合物,在高盐溶液中(0.7mol/L NaCl)是可溶的,当降低溶液盐的浓度到一定程度(0.3mol/L NaCl)时从溶液中沉淀,通过离心就可将CTAB与核酸的复合物同蛋白、多糖类物质分开,然后将CTAB与核酸的复合物沉淀溶解于高盐溶液中,再加入乙醇使核酸沉淀,CTAB能溶解于乙醇中。 二、实验材料、仪器及试剂 1、仪器 水浴锅;混匀器;高速冷冻离心机;移液器;754紫外分光光度计;液氮罐;水平电泳槽;电泳仪;一次性手套;吸头;1.5 mL离心管。 2、材料与药品 植物材料,以幼苗、嫩叶含DNA高。 液氮;氢氧化钠;CTAB;Tris;氯仿;乙醇;RNA酶;硼酸;溴酚蓝;异戊醇;β-巯基乙醇;盐酸;异丙醇;EDTA;GoldView核酸染料;琼脂糖;甘油;DNA分子量标记(DNA marker)。 三、操作方法 (1)按1 g样品3 ml DNA提取液的比例,取相应的园艺植物叶片,加入DNA提取液后,在研钵中充分磨碎;取3ml左右研磨后的液样于5 mL离心管中,65℃水浴35分钟以上,其间颠倒混匀一次。 (2)加等体积的氯仿:异戊醇(24:1)溶液,上下颠倒摇匀后,10000 rpm下离心10分钟,取吸上清液于一新的离心管中。 (3)再加两倍体积的预冷异丙醇,上下颠倒混匀后,10000 rpm下离心10分钟,弃上清。 (4)用3 mL 70%乙醇洗涤沉淀,重复一次,在室温下倒置晾干。 (5)沉淀用100 uL TE溶液溶解,用TE(pH8.0)作空白对照,于紫外分光光度计上测定260nm、280nm和230nm吸收值,计算A260/A230和A260/A280的比值,并换算出核酸的含量。 (6)琼脂糖凝胶板的制备 (7)加样:将样品与溴酚蓝按4:1的比例混合,用移液器缓慢加入凝胶样品孔中,点样量为每孔5 μgDNA。 (8)电泳:点样端接负极,电泳开始时,可用较高的电压,如100伏特,这样可使样品很快进入胶内,而减少样品扩散,待样品进入胶内即可保持每厘米5伏特左右的电压,DNA 在电泳中向正极移动。 当溴酚蓝的区带移至距凝胶底部1-2cm,停止电泳,当胶板为10-15cm的长度时,电泳时间一般为2小时左右。 (9)观察与鉴定

遗传学实验

第六章真核生物的染色体作图 (试题及答案) 09生物02班杨亚琼20091052220 一.名词解释(每题2分,共10分) 1.染色体作图:确定相互连锁的基因在染色体上的位置及它们之间的遗传距离的过程即染色体作图。 2.MI模式和MII模式:MI 模式即第一次减数分裂模式。指基因与着丝粒之间没有发生交换时,一对等位基因在第一次减数分裂时分开,这种分离称MI 分离,而把子囊孢子中等位基因的分离形式称为MI模式。MII模式即第二次减数分裂模式。指基因与着丝粒之间发生了交换,交换后的等位基因要到第二次减数分裂时才分开,这种类型的分离称为第二次分离,子囊孢子中等位基因的分离形式称为MII模式。 3.SSR:即简单重复序列。指一类由1~6个碱基组成的基序串联重复而成的DNA序列。如(GA)n,(GGC)n,(GATA)n等,代表重复次数,序列长度一般在100bp以下,其最大特点是在不同个体间长度的高度变异性。 4.原位杂交(in situ hybridization):是指DNA探针直接与染色体或染色体片段上对应的同源区段杂交结合,杂交结果直接显示出与探针序列同源的区域在染色体或染色体片段上所处的位置。 5.单交换(single crossover)和双交换(double crossover):在一段染色体区域同时发生两次交换的现象称为双交换。由双交换形成的重组型配子称为双交换型配子。如果只发生一次交换,则称为单交换。 二:填空题(每空1分,共20分)

1.从遗传规律考虑,基因重组途径可有( )和( )。 自由组合连锁交换 2.在同一个连锁群内任意两个基因之间交换值与这两个基因之间的距离有关,两个基因间距离越大,其交换值也就愈();反之,距离越小,则其交换值也就愈(),但最大不会超过(),最小不会小于()。 大小 50﹪ 0﹪ 3.番茄中,圆形果对长形果为显性,光皮果对桃皮果为显性。用双隐性个体与双杂合个体测交得到下列结果,光皮圆果24、光皮长果246、桃皮圆果266、桃皮长果24。a、杂合体亲本的基因连锁是相引还是相斥?()。 b、这两个基因的交换率为()。 相斥8.57 4.在链孢霉中,若某一基因与着丝粒相距10个图距单位,那么杂合体所产生的交换型子囊应为()。 20 5.染色体连锁遗传图的图距单位是(),物理遗传图的图距单位是() cM bp 6.真核生物的染色体四级结构,是指(),(),(),() 核小体螺旋体超螺旋体染色体 7.常用的遗传标记主要可分为四类,分别是(),(),(),() 形态学标记细胞学标记生化标记分子标记 8.用真菌进行遗传学分析的最主要优点是() 真菌是单倍体,经减数分裂产生的四个子囊孢子呈线性排列,其排列顺序直接反映了四条染色单体的排列顺序 三:选择题(每题2分,共20分) 1.某一植物中,以AABBDD×aabbdd杂交,F1再与三隐性亲本测交,获得的Ft数据为:ABD20;abd20;abD20;ABd20;Abd5;aBD5;aBd5;AbD5;从这些数据看出ABD是(A)。

林木遗传学实验指导

林木遗传学实验指导 实验一植物细胞的有丝分裂 实验二植物细胞的减数分裂 实验三染色体组型分析 实验四基因分离

实验一植物细胞的有丝分裂 一、实验目的 观察树木、花卉细胞有丝分裂各时期染色体的变化和特征,掌握根尖压片技术。 二、实验原理 有丝分裂是植物细胞数目增加的主要方式,常见于根尖、茎尖分生区的细胞,细胞经有丝分裂正确地把染色体分配给子细胞,形成两个染色体数目、内容一致的子细胞。有丝分裂是一个连续过程,根据染色体的形态特征可人为地将分裂期分为前期、中期、后期、末期等四个时期。 三、实验材料 发芽的杉木种子根尖;洋葱的幼根。 四、实验用具及药品 显微镜、载玻片、盖玻片、解剖针、刀片、镊子、吸水纸、小烧杯、大培养皿、冰箱、恒温水浴锅、量筒、天平。 醋酸、铁矾、苏木精、8-羟基喹啉、秋水仙素、二甲苯、盐酸、叔丁醇、无水乙醇、95%乙醇。 五、实验步骤 1.取材 ⑴杉木种子根尖将杉木种子在自来水中浸泡24h,然后置培养皿中,在25℃下发芽,5~7天后胚根长达10~15㎜时将发芽种子取出。 ⑵洋葱根尖培养将洋葱的鳞茎放在盛清水的培养皿内,在室温(20~25℃)下培养使其发根,待根长约10~15㎜时将根取出备用。 2.预处理为了阻止纺缍体的活动,获得更多的中期分裂相,同时使染色体相对缩短,便于染色体分散和计数,可对根尖进行预处理。 可用于预处理的化学药物有生物碱、苷类、酚类及其他物质,常用药物的浓度及处理时间如下:

(1)秋水仙碱:浓度为0. 04%~0.2%,处理2~5 h; (2)a-溴代萘:饱和水溶液处理0.5~4 h; (3)对二氯苯:饱和水溶液处理2~4 h; (4)8-羟基喹啉:浓度为0. 002M,处理2~4 h; 上述各处理在室温下进行,若低温处理则用蒸馏水在1~4℃下处理24 h。 3.固定经过预处理的材料冲洗干净后,用卡诺氏固定液固定12~24 h,目的是将细胞迅速杀死,使染色体保持固定的形态。经固定的材料若不立即使用,可换到70%酒精中置于4℃下保存。 卡诺氏固定液的配制:冰醋酸:纯酒精=1:3(体积比)。 4.水解固定好的材料换入蒸馏水中洗净,然后放入1N盐酸溶液中,在60℃下解离5~20min,以便胞间层的果胶类物质解体,使细胞易于分散,便于压片,同时还可使染色体获得一个较为透明的背景。材料经解离后用蒸馏水洗涤数次,将材料中的酸洗净,以便染色。 1N盐酸溶液的配制:取8.25ml浓盐酸(比重1:19),加蒸馏水至1000ml摇匀即可。 5.染色(铁矾—苏木精法) 苏木精是从墨西哥的一种木本豆科植物洋苏木的心材中提取的一种天然染料,是一种核染色剂,其本身对组织和细胞的亲和力不强,不能直接染色,而必须依靠硫酸铁铵和硫酸铝铵等盐类作媒染剂才能对细胞染色。由于苏木精适用范围广,染色效果好,且颜色的保存性也较好,故在植物制片技术中被广泛采用。 媒染剂的配制:将铁矾(硫酸铁铵)配成2~4%的水溶液,该溶液较易氧化变质,最好是现配现用;置冰箱中可延缓其氧化,能保存2个月。 染色剂的配制:一般用0.5%的苏木精水溶液,配制时先将苏木精结晶体溶于少量的95%酒精中,完全溶解后再加入蒸馏水,不加瓶塞,而用纱布包扎瓶口,使瓶内外空气能流通。将其静置一处使其缓慢氧化,室温下半个月至一个月可“成熟”,过滤后使用。采用下列方法之一可加速染色剂的“成熟”:(1)在100ml新配制的苏木精溶液中加入3~5ml过氧化氢;(2)用煮沸的蒸馏水配制;(3)将新配好的苏木精溶液倾入一个较大

生物技术遗传学实验指导

目录 验一人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备 实验二小鼠骨髓细胞染色体标本的制备 实验三人类染色体G显带技术 实验四人类染色体C显带技术 实验五核仁形成区银染技术 实验六人类染色体G显带核型分析 实验七X染色质标本的制备 实验八姐妹染色单体交换 实验九微核检测技术 实验十ABO血型的测定及其基因频率的计算 实验十一苯硫脲尝味试验及其基因频率的计算 实验十二人类皮纹分析 实验十三遗传咨询 实验十四人类基因组DNA的提取 实验十五聚合酶链式反应(PCR) 实验十六DNA的琼脂糖凝胶电泳 实验十七PCR-RFLP技术 《遗传学》实验须知 一、医学遗传学实验目的和要求 医学遗传学实验课是医学遗传学课程的重要内容。实验课有助于加深和巩固基础理论知识,并进一步了解和掌握本学科的基本实验内容和操作技能。在培养学生分析问题、综合问题和解决问题能力方面具有重要作用。为此,要求学生做到以下几点: 1、实验课前做好预习,明确实验目的、实验原理。

2、复习有关理论内容。 3、熟悉实验的主要步骤。 4、初步估计和判定实验的可能结果。 二、实验操作过程中的注意事项 1、认真操作,仔细观察和综合分析实验所出现的现象与结果并及时记录。 2、如果实验结果与理论结果不一致,须及时进行科学分析,判断结果的可靠性,寻找出现误差的原因。 3、各种实验试剂用后放回原处,瓶盖封严,轻拿轻放。 4、使用微量加样器时,一定调整好取用量,按使用要求操作。 5、实验室应保持肃静,注意清洁卫生,实验中用过的废弃物品要及时清理,避免堵塞下水管道。 三、实验后的注意事项 1、实验后,整理清洁所用仪器、设备,注意放回原位,以备下次使用。 2、如有仪器损坏,要及时填写破损报告,并报告老师。 3、离开实验室前,检查并关闭门、窗、水、电。 四、实验室的意外处理 实验室如遇着火、烫伤等意外事件发生,必须镇静做紧急处理,并立即报告老师。 1、着火:如遇酒精灯推倒或其它原因着火,首先将一切易燃品移至远处,然后用水扑灭或者切断电源。 2、火伤:皮肤被火灼伤,用烫伤软膏涂抹,如伤势较重,立即送医院治疗。 3、如有毒药品泼溅到皮肤上,如EB,同位素等,应用大量清水进行清洗,必要时,去医院处理。. 4、割伤出血:遇玻璃割伤出血,可用碘酒或红药水消毒后,用纱布包扎。如有玻璃留在伤口,处理前应先取出。 实验一人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备 【目的要求】 1、初步掌握人体外周血淋巴细胞短期培养的基本方法。 2、初步掌握人体外周血淋巴细胞染色体标本制备的技术方法 【实验原理】 人体外周血淋巴细胞培养(人体末梢血、微量全血短期培养)及其染色体标本制备是国内外研究显示染色体最常用和效果最好的方法。此方法取材方便,用血量少,操作简便,现已广泛应用于基础医学、临床医学的研究和染色体病的诊断等。 人体外周血中的小淋巴细胞,是已分化、处于G期的细胞,几乎不具有分裂增殖能力。0在离体血培养细胞中很难找到正在分裂的淋巴细胞,因此,需采用刺激细胞增殖的措施。人们发现从云豆(菜豆)中提取的植物血球凝集素(植物血凝素,PHA)可以刺激小淋巴细胞进行有丝分裂,即在PHA作用下,处在G期的小淋巴细胞可转化为淋巴母细胞。淋巴母细胞具0有分裂能力,重新进入增殖周期进行有丝分裂。在PHA作用下体外培养72小时左右,多数淋巴细胞已处于细胞周期的第二周期。此时,细胞分裂相较多,但都处于分裂的不同时期。一般来说,制作染色体标本主要是显示细胞分裂中期染色体,因中期染色体形态最为典型、最为清晰,最易辨认,是研究染色体的最好阶段。为了获得大量可供分析的中期染色体,需在终止细胞培养前数小时加入适当浓度

普通遗传学实验试题

一、名词解释(每小题1分,共10分)。 1、联会复合体( ): 2、同源染色体(): 3、性连锁( ): 4、染色体畸变: 5、结构杂合体: 6、结构纯合体: 7、平衡易位:

8、常染色质: 9、异染色质: 10、孟德尔群体: 二、选择题(每小题1分,共10分)。 1、减数分裂是一种特殊方式的细胞分裂,仅在配子形成过程中发生。与这一过程有关的是() A、同源染色体在第二次分裂中分开 B、分裂后拥有亲本整套的遗传物质 C、分裂的结果是形成四个具有独立发育能力细胞 D、遗传物质减少一半 2、在果蝇的系列实验中,处女蝇的收集尤为重要,由蛹羽化为果蝇后,哪个时间段收集处女蝇为宜。() A、6~15小时 B、12~13小时 C、8~12小时 D、13~16小时 3、某一种植物210,在中期I,每个细胞含有多少条染色单体( )。 A、10 B、5 C、20 D、40

4、杂合体所产生的同一花粉中的两个精核,其基因型有一种可能是( )。 A、和; B、和; C、和; D、和。 5、玉米体细胞220条染色体,经过第一次减数分裂后形成的两个子细胞中的染色单体数为()。 A、20条 B、10条 C、5条 D、40条 6、一个大孢子母细胞减数分裂后形成四个大孢子,最后形成()。 A、四个雌配子 B、两个雌配子 C、一个雌配子 D、三个雌配子 7、在一条染色体上存在两对完全连锁的基因(A B)/(a b),而C基因是在另一染色体上,相互独立,杂种与三隐性个体杂交,后代可能出现() A、8种表现型比例相等 B、8种表现型中每四种比例相等 C、4种表现型每两种比例相等 D、4种表现型比例相等 8、在果蝇中,红眼(W)对白眼(w)是显性,这基因在X染色体上。果蝇的性决定是型。纯合的红眼雌蝇与白眼雄蝇交配,在它们的子代中可期望出现这样的后代() A、♀红,♂红 B、♀红,♂白 C、♀白,♂红 D、♀白,♂白 9、一色盲女人与一正常男人结婚, 其子女表现为()。

遗传学实验题(自制)

遗传学实验题 常见题型:①验证突变类型(显性突变、隐性突变)或基因型(DD、Dd) ②验证性状的遗传是否符合孟德尔遗传定律 ③判断基因所在位置(细胞质遗传;细胞核遗传中的常染色体遗传、伴性遗传、XY同源区遗传) ④设计育种方案 典例1:体色是划分鲤鱼品种和检验其纯度的一个重要指标。不同鲤鱼品种的体色不同,是由于鱼体鳞片和皮肤含有不同的色素细胞及其数量分布差异所致。科研人员用黑色鲤鱼(简称黑鲤)和红色鲤鱼(简称红鲤)进行杂交实验。 a:黑鲤和红鲤杂交,无论正交、反交,F1皆表现为黑鲤 b:F1雌雄个体间相互交配,F2既有黑鲤也有红鲤,且黑鲤:红鲤约为15:1。 (1)鲤鱼体色中的_________是显性性状。 (2)分析实验结果推测:鲤鱼的体色是由________对基因控制的,该性状的遗传遵循 _________定律。 (3)为验证上述推测是否正确,科研人员又做了如下实验: ①选择纯合黑鲤和纯合红鲤做亲本杂交获得F1; ② ③ 预期结果 _。 (4)一条雌性鲤鱼的眼型表现为异型眼,该异型个体与双亲及其他个体的眼型均不同,假如已知该眼型由核内显性基因E控制,则该变异来源最可能是。 典例2:请根据下列不同遗传问题情形,回答有关问题。 (1)若果蝇的一对等位基因A-a控制体色,B-b控制翅的刚毛,两对基因位于不同的同源染色体上。将纯合的两种果蝇先后进行如图杂交:

根据以上实验结果,分析回答: (1)控制灰身和黑身的基因位于染色体上。控制正常刚毛和截刚毛的基 因位于染色体上。 (2)写出F1的基因型♀_______________、♂_______________。 (3)若刚毛基因(B)和截毛基因(b)这对等位基因存在于X、Y染色体的同源区段,则刚毛雄果蝇表示为X B Y B、X B Y b、X b Y B,若仅位于X染色体上,则只表示为X B Y。现有各种纯种果蝇若干只,请利用一次杂交实验来推断这对等位基因是位于X、Y染色体上的同源区段还是仅位于X染色体上,请写出遗传图解,并用文字简要说明你的实验方案。 遗传图解: 说明你的实验方案:_____________________________________________ 预期:若______________________________,则______________________________。 若______________________________,则______________________________。 变式1:某种鸟类体色(基因用A、a表示)、条纹的有无(基因用B、b表示)是两对独立 (1)根据组杂交试验的结果,可判定这两对性状中的显性性状分别是。(2)第2组亲本中黄色无纹个体的一个卵原细胞能够产生的卵细胞基因型是。在配子形成过程中,减数第二次分裂后期细胞中含个染色体组。 (3)第3组杂交试验后代比例为2:l,请推测其原因最可能是。根据这种判断,若第二组后代中绿色无纹个体自由交配,F2的表现型及比例应为. (4)请用遗传图解表示第2组杂交试验:

遗传学实验指导

《遗传学》实验学习指导 《遗传学》是生命科学中的中心学科。同时也是一门实践性很强的学科。它是指导育种工作的理论基础,在传统育种、转基因育种、人体基因产物的产业化生产、各种传染性疾病病原菌的遗传分析研究及疫苗的生产、人类遗传病的基因治疗等人类面临的难题中发挥着巨大作用。对于现代从事生命科学的人,学习和掌握遗传学基本实验方法是十分必要和有益的。 一实验要求: (一)实验前:预习实验内容,了解实验原理、实验目的,逐点分析实验操作过程,对每一个细节进行深刻的理解,不仅要知道实验该如何操作,而且要知道实验为什么要这样做,弄清实验操作过程中需要注意的细节,做到心中有数,以提高实验成功的可能性。 (二)实验操作过程中:一丝不苟,认真操作每一个环节,对实验现象和实验数据进行认真的观察记录。 (三)实验后:对实验结果和数据进行及时总结整理。结合所学的理论对实验结果进行分析,写出实验报告。对成功的实验可以提出改进的方法或建议。对于不成功的实验要分析失败的原因。 (四)强调动手能力的培养:在实验分组上,多数实验是以1人为组,单独操作。对学生实验成绩的评定上,包括实验操作。 二实验教材及学时 (一)实验教材:以《遗传学实验》刘祖洞江绍慧编为主,根据理论课所学内容,也采用了其它教材的个别实验。如:《遗传学手册》第三章“遗传学教学实验”的内容。(二)实验总学时:30 三实验内容及注意事项: (一)实验内容:见下表:

(二)实验目的意义及注意事项 1 植物有丝分裂的观察 目的:观察染色体在有丝分裂中的动态变化过程,识别有丝分裂各个时期特点,加深对有丝分裂遗传学意义的理解。 掌握观察植物根尖有丝分裂的压片方法。 注意事项: (1)根尖解离时间适合; (2)取材部位一定要准确,只有分生区的细胞才有分裂相(部位准); (3)取材料要少,有利于着色和细胞分散。 2 染色体的核型分析 目的:学习植物染色体核型分析的过程,掌握植物染色体组型分析的方法。 注意事项: (1)核型分析的关键需要较多的染色体分散好、形态好的细胞,因此,要求根尖的预处理要好,保证有较多的中期分裂相; (2)根尖的预处理应根据不同的药物,注意预处理药物的浓度、温度和时间; (3)制片时,细胞尽可能分散,压片时用力均匀,勿搓动; (4)测量数据尽可能接近染色体的实际长度; 3 减数分裂装片的制片与观察 目的: (1)观察染色体在减数分裂中的行为和变化过程,识别减数分裂各个时期特点,

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